MICROBIOLOGIA E IMUNOLOGIA

Tpico GENTICA MICROBIANA

Marcelo Moreno [o material de uma bactria tpica consiste em uma nica molcula de DNA circular ]

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E. coli , molcula nica de DNAc de PM 2 x 109 dltons O DNA do menor organismo de vida livre, o Mycoplasma, bactria sem parede celular, apresenta PM de 5 x 108 dltons clula bacteriana tpica X clula humana (2 mil ptns : 100 mil ptns) bactrias (haplides, gene sofrendo mutao, no ser expresso, clula no apresentar esta caracters/); clulas humanas (diplides)

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Nucleide regio do citoplasma onde se localiza o DNA DNA procarioto uma molcula circular nica* O nucleide no apresenta membrana nuclear, tampouco aparelho mittico ou histonas DNA bacteriano no apresenta introns, enquanto o DNA eucarioto apresenta * Vibrio cholerae apresenta 2 cromossomos, e Borrelia burgdorferi apresenta 1 linear

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MUTAES alterao da base; aa diferente; fentipo alterado 1) Substituio de base(erros da DNApol; mutagnico) - Mutao missense (substitui base>cdon>aa diferente) - Mutao nonsense (cdon de terminao)

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2) Mutao de fase de leitura (frame shift) - pares de bases retirados ou adicionados(ptn inativa) 3) Transposons (profundas mudanas nos genes)

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Causas( substncias qumicas; radiaes ou vrus) Substncias qumicas: 1) HNO2, agentes alquilantes (alterao da base PH erradas, pareamentos errados) 2) Anlogos de base(5-bromouracil substitui a timina)(troca de AT para GC) 3) Benzopireno(mutao de fase de leitura)carcinognicos

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1) 2) 3) 4)

Radiografias e luz UV Quebrar ligaes covalentes Produo de radicais livres Alterao das bases UV ligao cruzada de bases pirimdicas (incapacidade de replicao)

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Mutaes condicionais letais Cepa do vrus da gripe Vrus no replicado a 37 oC, mas a 32 oC Vacina contra gripe

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TRANSFERNCIA DE DNA NO INTERIOR DE CLULAS BACTERIANAS Transposons - Transfere DNA de um stio no cromossomo bacteriano para outro stio ou p/ um plasmdeo. Sntese e transferncia de cpias Rearranjos programados (alteraes antignicas) ( Neisseria gonorrhoeae e Borrelia recurrentis ) - Movimento de gene(stio no expresso silencioso para um ativo) variantes de antgenos(no induzido pela RI)

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TRANSPOSONS genes saltadores, no auto-replicativos 1 plasmdeo pode conter vrios! enzimas (resistncia a drogas); toxinas mutao(alterao da expresso gnica) 4 domnios: 1 seqncia de insero nas extremidades (SIR) 2 transposase (exciso e integrao) 3 repressor( transposase) e regula o 4 - gene de resistncia a antibiticos

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TRANSPOSONS
Gene de resistncia a antibiticos Gene da Transposase

SIR Gene repressor

SIR

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PLASMDEOS DNAfd circular, auto-replicativos Plasmdeos transmissveis(conjugao) PM 40 a 100 milhes; pilus sexual; ptns necessrias; 1 a 3 cpias/clula Plasmdeos no-transmissveis PM 3 a 20 milhes; genes para transferncia ausentes; 10 a 60 cpias/clula Cura

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PLASMDEOS (importncia mdica)

Resistncia a antibiticos Resistncia a metais pesados(redutases) Resistncia a UV (enzimas de reparo) Pili ou fmbrias Exotoxina (enterotoxinas) Bacteriocinas Antibiticos Enzimas degradativas (Pseudomonas)

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TRANSFERNCIA DE DNA ENTRE CLULAS BACTERIANAS - Conjugao; transduo e a transformao 1) Conjugao: clula doadora e outra receptora; plasmdeo F controla; pilus sexual (tubo conjugativo); macho F+(fator F) liga a bactria fmea receptora F- ; clivagem do fator F; transferncia para a clula receptora; sntese de DNA para formar plasmdeo de dupla fita em ambas(apenas o fator F transmitido)

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Obs.: F+ com plasmdeo integrado ao cromossomo bacteriano; Clulas Hfr (alta freqncia de recombinao) 2) Transduo: vrus bacterianos (fago, bacterifago); replicao viral ; montagem; incorporao de genoma bacteriano; DNA na clula receptora pode se integrar (converso lisognica) ( toxina diftrica, botulnica, do clera, toxina eritrognica)

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Obs.: transduo generalizada(qq regio do cromossomo bacteriano, 1:1000); especializada(DNA do fago integrado ao cromossomo celular, stios especficos de ligao, genes vizinhos especficos) 3) Transformao: transferncia de DNA livre para uma clula; laboratrio; transfeco (DNA purificado injetado na clula eucaritica)

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Griffith, 1928 - Trabalho com cepas de

Streptococcus pneumoniae

Griffith, 1928

Griffith, 1928

Griffith, 1928

1944 - Avery, Colin & Maclyn. DNA TRANSPORTADOR DA INFORMAO GENTICA

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Obs.: F+ com plasmdeo integrado ao cromossomo bacteriano; Clulas Hfr (alta freqncia de recombinao) 2) Transduo: vrus bacterianos (fago, bacterifago); replicao viral incorporao de genoma bacteriano; DNA na clula receptora pode se integrar (converso lisognica) ( toxina diftrica, botulnica, do clera, toxina eritrognica)

 memria de Oswald T. Avery, cuja vida estudando uma nica bactria patognica culminou no descobrimento de que o DNA o portador da informao gentica.

Bibliografia recomendada:
Microbiologia . Gerard J. Tortora, Berdell R. Funke e Christine L. Case. 8 ed. Porto Alegre : Artmed, 2005. Microbiologia Mdica e Imunologia. Warren Levinson e Ernest Jawetz. 7 ed. Porto Alegre: Artmed, 2007. Microbiologia de Brock. Madigan, Michael E. 12 ed. Porto Alegre : Artmed, 2008.