Ncleo Interfsico

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 clula Procarionte e Eucarionte. o DNA possui grande parte da informao gentica; mitocndria e cloroplasto. Ncleo como controlador do metabolismo celular. DNA RNA protena o ciclo de vida das clulas divido em duas fases: - Interfase - Mitose DNA DNA (replicao) DNA RNA (Transcrio) PROTENA (Traduo)
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Forma
clulas prismticas alongadas

clulas poligonais esfricas

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Moncito Linfcito

Neutrfilo
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Tamanho
varia com o metabolismo e contedo de DNA.

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Envoltrio Nuclear (EN)

separa ncleo do citoplasma.

ME

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Composio qumica
constitudo por duas membranas 5-6 nm de espessura. membrana lipoprotica

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Estrutura
2 unidades de membrana membrana interna lmina nuclear membrana externa com ribossomos, continuidade com o REG. cisterna perinuclear contm as mesmas protenas presentes nas cisternas do RE. EN uma poro especializada do RE.
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Envoltrio Nuclear MET

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Poros
as membranas do EN so interrompidas por poros que se formam com a fuso da membrana interna e com a membrana externa. quantidade de poros varia com o tipo de clula e com o seu estgio funcional, ex: - clulas embrionrias alta atividade de sntese protica maior quantidade de poros. - espermatozide maduro clula com baixa atividade metablica menor quantidade de poros.

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Complexo de poro

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Face citoplasmtica

Face nuclear

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Complexos de poro Ncleo citoplasma

Funo molculas pequena transporte passivo molculas grandes transporte ativo atravs de receptores presentes nas membranas do EN ocorre o reconhecimento dos RNAs e protenas.
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Lmina Nuclear
10-20 nm de espessura. Protenas laminas A, B e C filamentos intermedirios do citoesqueleto. Lamina B possui uma poro lipdica que se insere na bicamada, a essa protena se associam as laminas A e C.

Funo manter a forma e dar suporte estrutural ao EN ligao da fibras cromatnicas ao EN. Mitose fosforilao e desfosforilao.
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 Nucleoplasma poro aquosa constituda por protenas, RNAs, nucleosdeos e ons, onde esto mergulhados nuclolo e cromatina.

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CROMATINA
poro do ncleo, com exceo do nuclolo, se cora e visvel ao MO. cromatina e cromossomos representam dois aspectos morfolgicos da mesma estrutura.

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Testculo de rato espermatcito I e II - HE

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Composio qumica
DNA, RNA, protenas histnicas e no histnicas. DNA 2 cadeias de polinucleotdeos complementares e antiparalelas. quantidade de DNA por ncleo varia de espcie para espcie. RNA - cerca de 3%.
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Histonas
protenas bsicas devido a grande presena de aminocidos ARGININA e LISINA. protenas de baixo peso molecular. no so renovadas constantemente como a maioria das outras protenas. H2A, H2B, H3 e H4 so menores com 102-135 aminocidos altamente conservados. H1 possui cerca de 220 aminocidos menor grau de conservao durante a evoluo. H5 eritrcitos nucleados de aves.
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 Protenas no histnicas cidas, podem ser encontradas ligadas ao DNA ou dispersas no nucleoplasma:

a) 30 protenas participam da estrutura dos cromossomos; b) protenas relacionadas com os processos de replicao e reparo do DNA; c) protenas que participam do processo de ativao e represso gnica.
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Estrutura
1974 Olins e Olins ncleos em diferentes choque osmtico ME colar em contas. Kornberg ao mesmo tempo comprovou que a fibra cromatnica era constituda por unidades repetitivas compostas de H2A, H2B, H3 e H4, duas molculas cada e cerca de 200 pb de DNA.

1975 Oudet nucleossomo nucleode (core nucleossmico).

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Colar de contas

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 Nucleosomo unidade repetitiva da cromatina forma cilndrica achatada com 10 nm de dimetro e 6 nm de altura.

Centro do nucleossomo - Fibra de 10nm de dimetro ou nucleofilamento. - Fibra de 30 nm ou solenide.

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Nucleossomo

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Fibra de 10nm

Fibra de 30nm

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Estados conformacionais da cromatina

ao MO o ncleo interfsico apresenta dois padres distintos de colorao da cromatina. poro de colorao intensa heterocromatina poro menos corada e mais homognea eucromatina
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Heterocromatina

Eucromatina

Nuclolo

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- Heterocromatina facultativa

- Heterocromatina constitutiva centrmeros, telmeros e ao redor das constries secundrias.

Cromossomos - cromtide cada uma das metades cromossmicas observadas durante a diviso celular e que iro constituir um novo cromossomo.

- cromtide irm e homloga.

- Centrmero ou constrio primria a regio onde se situa o cinetcoro estrutura organizadora da polimerizao das fibras cromossmicas do fuso mittico.
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- metacntrico, submetacntrico, acrocntrico ou telocntrico. - Constries secundrias outras constries presentes nos cromossomos onde podero conter a Regio Organizadora do Nuclolo. - Telmeros so as extremidades cromossmicas.

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 - caritipo conjunto de caractersticas morfolgicas que permite a caracterizao dos lotes cromossmicos de um indivduo.

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- Cromossomos plumosos cromossomos grandes

podendo atingir 800 m de comprimento ocito e espermatcitos peixes, rpteis e aves meiose - (diplteno) nas ala h uma intensa sntese de RNA.

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Cromossomos Plumosos

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 Cromossomos politnicos 150 a 250 m de comprimento clulas somticas vrios tecidos de dpteros, em insetos colemboldeos e em protozorios ciliados pareamento ponto a ponto de cromossomos homlogos sntese de RNA.

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Nuclolo
estruturas esfricas e no envolvidas por membrana. MO

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Esmagamento de raiz de cebola

MET

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Tamanho
Est relacionado com a intensidade de sntese protica da clula. Ex: clulas indiferenciadas de embries; certos tumores malignos.

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Ovcito de Lagosta - HE

Ncleo Citoplasma

Nuclolo
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 Nmero geralmente nico Composio qumica protenas RNAr DNAr (DNA ribossmico)
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Biognese dos ribossomos

Os genes que codificam o RNAr esto localizados em pores de fibras cromatnicas que aps sua compactao iro constituir as constries secundrias de cromossomos especficos regies organizadoras do nuclolo NOR. Humanos 5 pares de cromossomos Feijo 1 par de cromossomo.
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NOR

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 Em clulas eucariontes os genes que codificam os RNAr esto presentes em mltiplas cpias por genoma.
Humano contm cerca de 400 cpias, dispersos em 5 cromossomos. Xenopus contm cerca de 600 cpias em um nico cromossomo. As vrias cpias do gene esto arranjadas in tandem, ou seja, repetidos seqencialmente estando cada gene separado do prximo por um segmento de DNA no transcrito.
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rvore de Natal

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rvore de Natal
Fibrilas de RNAr

DNA espaador

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Sntese e processamento do RNAr

RNA polimerase I RNAr 45S transcrito primrio (pr-RNAr), essa molcula clivada dando origem as molculas finais de RNAr: RNAr 28S (5.000 nucleotdeos) RNAr 18S (2.000 nucleotdeos) RNAr 5,8 S (160 nucleotdeos)

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ETS sequncia externa trasncrita ITS segmentos intercalares transcritos

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 medida que a RNA polimerase I transcreve o DNAr, protenas so adicionadas s molculas dos pr-RNAr nascentes. Os genes que codificam o RNAR 5S (120 nucleotdeos) no esto presentes nos DNAr, ou seja, esses genes esto localizados em outra regio do DNA que no a NOR RNA polimerase III depois de transcrito migra para o nuclolo onde complexado os RNAr 28S e 5,8S para formar a subunidade maior do ribossomo. 49 tipos diferentes de protenas sero adicionadas aos RNAR 28S, 5,8S e 5S. 33 tipos se associaro ao RNAr 18S.
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Estrutura

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RNA ribossmico
Procarionte
70S Subunidade menor 30S RNAr 16S 21 protenas Subunidade maior 50S RNAr 23s RNAr 5S Subunidade menor 40S RNAr 18S 33 protenas

Eucarionte
80S Subunidade maior 60S RNAr 28S RNAr 5,8S

34 protenas

RNAr 5S
49 protenas

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Ciclo Celular
Para que ocorra a diviso celular, quatro eventos so necessrios:
Deve haver um sinal reprodutivo esse sinal pode vir tanto de dentro como de fora da clula, e inicia os eventos de reproduo celular.

Replicao do DNA o material gentico, e outros componentes vitais para a clula precisam estar presentes para que cada uma das duas novas clulas tenham suas funes celulares completas.
A clula precisa distribuir segregar o DNA replicado para cada uma das duas novas clulas. Membrana celular (e a parede celular, em organismos que a possuem) precisa crescer para separar as duas novas clulas em um processo chamado fisso.
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 Procariotos diviso celular freqentemente significa reproduo de todo o organismo unicelular.

A clula cresce em tamanho. Replica o seu DNA.

Divide-se em duas novas clulas fisso a privao de alimento pode ser um dos fatores que interrompe a diviso celular ex: bactria Bacillus subtillus.

o aumento na quantidade de alimento pode levar a um aumento na velocidade de diviso celular Escherichia coli quando colocada em um meio com abundncia de carboidrato.
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Ciclo celular em Eucariotos

No indivduo adulto as divises celulares continuam frequentemente, seja para a reposio de clulas mortas como para a regenerao de partes danificadas de tecidos e orgos. Clulas embrionrias, clulas do epitlio que reveste o intestino (a cada 3 dias), as do folculos capilares, as do sistema linftico e as da medula ssea so clulas que se dividem rapidamente so alvos nos tratamentos pela quimioterapia. Hepatcito, fibroblasto da pele, clulas renais, clulas do msculo liso, de pncreas, do ovrio, de pulmo clulas que podem permanecer sadias por longos perodos em um estado no-proliferativo.
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Substncias utilizadas na quimioterapia

6-mercaptopurina (uma anloga das purinas) Inibe a sntese dos compostos que iro fomar o DNA. Mitomicina Inibe a sntese de DNA, ligase fortemente a dupla hlice do DNA. Actinomicina D Impede a sntese de RNA, se combina com a guanina do DNA.
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 Interfase trs subclasses identificadas como S, G1 e G2. Fase S significa sntese, perodo onde ocorre a duplicao do DNA. Fase G1 perodo entre o fim da mitose e o comeo da fase S intervalo 1 nesta fase a clula se prepara para entrar na fase S. Fase G2 separa o fim a fase S e o incio da Mitose intervalo 2 nesta fase a clula se prepara para entrar em Mitose.
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 Apoptose processo fisiolgico normal de morte celular caspases cascatas de eventos levando a uma desorganizao da clula. - mudanas que ocorrem na clula durante a APOPTOSE. - fragmentao do DNA, resultante de clivagens entre os nucleossomos; - condensao da cromatina; - fragmentao nuclear em pequenos ncleos, o que d clula um aspecto granulado; - a prpria clula se contrai e se fragmenta em vesculas revestidas por membrana denominadas corpos apoptticos.
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Clula morta em um tecido em desenvolvimento foi fagocitada por uma clula vizinha

Necrose
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Clula em cultura apoptose grandes vacolos caracterstico

 Perodo G0 em estado de dormncia ou queiscncia com relao ao crescimento. podem sair desta fase mediante um estmulo apropriado: - nutrientes; - hormnios de crescimento; - estmulo mecnico, leso provocada por uma interveno cirrgica.

- neurnios, clulas da musculatura esqueltica e cardaca permanecem indefinidamente em G0, so consideradas como sendo terminalmente diferenciadas. Ex: ataque cardaco
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 Ponto de RESTRIO momento pouco anterior ao de transio da fase G1/S seria um ponto crtico a ser vencido pela clula para que a fase S possa ser iniciada.

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 Calonas so substncias presentes em alguns tecidos que inibe a atividade mittica impedindo a proliferao excessiva das clulas regulando o ritmo de crescimento dentro dos limites normais. Ex: FGADO diminuio das calonas especficas aumento das mitoses nas clulas medida que a regenerao se processa aumenta a produo de calonas reduz a proliferao celular.
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Check point

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Sistema de controle do ciclo celular

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Pontos de verificao asseguram que o genoma completo seja transmitido para as clulas filhas.

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 quinase enzima que catalisa a transferncia grupamentos fosfato do ATP para outra molcula fosforilao muda a estrutura tridimensional da protena-alvo, algumas vezes trocando simultaneamente a funo da protena. ciclinas seria uma protena regulatria que controla a capacidade das quinases para fosforilar protenas-alvo adequadas. CDK (cyclin-dependent kinases) uma quinase que pode catalisar a fosforilao de certos aminocidos em protenas quinase dependente de ciclina.
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 Existe uma ciclina para cada estgio do ciclo celular:

G1/S-ciclinas ativam Cdks no final de G1 e, com isso, ajudam a desencadear a progresso ao Incio, resultando no comprometimento entrada no ciclo celular. Seus nveis caem na fase S. S-ciclinas se ligam a Cdks logo aps a progresso ao Incio e ajudam a estimular a duplicao dos cromossomos. Os nveis das S-ciclinas permanecem elevados at a mitose, e essas ciclinas tambm contribuem ao controle de alguns eventos mitticos iniciais. M-ciclinas ativam Cdks que estimulam a entrada em mitose no ponto de verificao G2/M.

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MPF ativo induz a condensao cromossmica, o rompimento do envoltro nuclear e a reorganizao do citoesqueleto, para a montagem do fuso.

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 Todos esses eventos se realizam mediante a fosforilao de protenas essenciais nesses processos, como:
condensao cromossmica ocorre a fosforilao da H1 e de outras protenas nucleares.

a desorganizao do EN resulta principalmente da fosforilao de resduos especficos de serinas presentes nas laminas da lmina nuclear, o que provoca a separao dos filamentos de lamina em dmeros individuais.

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- O gene supressor de tumor p53 freqentemente alvo para mutaes recessivas em um grande nmero de patologias.

- A perda da expresso de p53 em clulas tumorais promove um super crescimento destas clulas in vivo.

- p53 participa na resposta intracelular ao dano no DNA atrasando a progresso do ciclo celular no checkpoint da fase G1.

- Este atraso pode prover tempo para o reparo no dano ao DNA, e para reparo de leses que seriam perpetuadas como mutaes em clulas entrando na fase S.

- A protena p53 parece iniciar o processo apopttico celular em resposta a agentes que danificam o DNA.
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Dano no DNA ambas as cpias do gene de p53 inativadas

Diviso celular normal

Dano no DNA nveis de p53 aumenta

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Proto-oncogenes so genes celulares reguladores importantes, em muitos casos codificando pts que funcionam nas vias de transduo de sinal que controlam a proliferao celular normal (ex: src, ras e raf).

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- Protena ras (rat sarcoma virus) identificado os genes primeira vez em ratos induz indiretamente a proliferao celular de clulas normais uma vez mutada esta protena permanece continuamente na forma ativa ligada GTP induz a proliferao desordenada das clulas cancerosas mesmo na ausncia de estimulao de fator de crescimento.

- A maioria das protenas oncogene funcionam como elementos da via de sinalizao que regulam a proliferao e a sobrevivncia celular em resposta estimulao de fator de crescimento.

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Essas protenas incluem fatores de crescimento polipetdeos, receptores de fator de crescimento, elementos das vias de sinalizao intracelular e fatores de transcrio.

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MITOSE
Prfase condensao da cromatina os cromossomos consistem de pares de cromtides idnticas.
Prometfase desorganizao do Envoltrio Nuclear, os microtbulos dos cinetcoros surgem e conectam os cinetcoros com o centrmero. Metfase cromtides pareadas comeam a se alinhar em um plano equatorial da clula. Anfase os centrmeros se separam, e os novos cromossomos comeam a se mover em direo aos plos. Telfase os cromossomos separados alcanam os plos opostos. - a telfase passa para a prxima interfase com os envelopes nucleares e os nuclolos se reestruturando e a cromatina tornandose difusa. Citocinese diviso do citoplasma.
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Esmagamento de raiz de cebola

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Mitose

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Meiose na gametognese humana.

a) Ovognese

b) Espermatognese

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Esquema detalhado das fases do ciclo celular.

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