Organelas I Sistema de endomembranas

Profa. Marta G. Amaral, Dra. Biologia Celular

O que so organelas com endomembranas?

So compartimentos celulares organizados, limitados por membrana, no citoplasma das clulas com funes especficas.

Ncleo

Mitocndria

Complexo de Golgi

Retculo endoplasmtico liso

Retculo endoplasmtico rugoso

Lisossomo

Peroxissomos

Vacolos

Evoluo das organelas

1. Invaginaes da membrana plasmtica: formam o sistema de endomembranas
oMembrana nuclear oMembrana RE oMembrana Golgi oEndossomos oLisossomos

2. Fagocitose de bactrias: tem seus prprios genomas e sintetizam parte das suas protenas.
o Mitocndrias o Cloroplastos

Distribuio das protenas nas organelas

o Antes da diviso celular, h duplicao das organelas. o As organelas crescem por incorporao de novas molculas (lipdeos e protenas) o O RE secreta e entrega os lipdeos e protenas indiretamente para o Golgi, lisossomos, endossomos e membrana nuclear o Nas mitocndrias, cloroplastos e interior do ncleo as protenas so entregues diretamente a partir dos ribossomos do citosol

Mecanismos de distribuio de protenas

As protenas apresentam uma sequencia de aa denominada sinal de distribuio (15-60 aa), que indica o seu destino.
1. Transporte pelos poros nucleares: vo do citosol para o ncleo atravessando os poros. 2. Transporte pelas membranas: vo do citosol para o RE, mitocndrias e cloroplastos. Usam translocadores protecos. 3. Transporte por vesculas: saem do RE ou Golgi, dentro de vesculas de transporte envoltas por membrana, na entrega ocorre fuso de membranas

Tcnicas de DNA recombinante so Protenas destinadas ao RE possuem utilizadas para trocar a localizao uma sequncia-sinal N-terminal que de duas protenas: a sequncia-sinal as direciona para o RE, as que devem removida da protena do RE e permanecer no citosol no possuem anexada protena citoslica, as a sequncia. protenas acabam se localizando em um local anormal da clula

Transporte pelos poros nucleares

o O envelope nuclear formado por 2 membranas concntricas. o A membrana interna tem protenas que atuam como stios de ligao para os cromossomos e do sustentao para a lmina nuclear, dando suporte para estrutural para o envelope nuclear o A membrana nuclear externa semelhante a membrana do RE

Pequenas molculas solveis em gua podem passar livremente pelos poros

Molculas maiores e tem que ter um sinal de localizao nuclear para passar pelo poro

complexos de poros nucleares

Com gasto de energia: hidrlise de GTP (trifosfato de guanina)

Transporte pelas membranas

As protenas devem ser desenoveladas quando so importadas para dentro da mitocndria e cloroplasto

Importao de protenas pela mitocndria

o As protenas so carregadas de uma organela para outra, de uma organela para o citosol ou para o exterior celular, por vesculas de transporte o 2 tipos de protenas so transferidos do citosol para o RE: 1. Protenas hidrossolveis: passam pela membrana do RE e so liberadas no lmen. So as protenas que iro formar as secrees (para fora da clula) ou que iro para o lmen de outra organela. 2. Protenas transmembrana: so parcialmente translocadas pela membrana do RE, se tronam embebidas na membrana. Iro formar a membrana do RE ou de outra organela

Viso dinmica das protenas hidrossolveis no RE

1. Conjunto comum de ribossomos sintetizam protenas para o citosol ou protenas que sero transportadas para organelas envoltas por membrana
2. Ribossomos que esto traduzindo protenas citoslicas que permanecem livres no citosol 3. Protenas que so destinadas ao RE tem uma sequncia-sinal na cadeia polipeptdica crescente e direciona o ribossomo para a membrana do RE. Muitos ribossomos se ligam a cada molcula de mRNA , formando um polirribossomo. Ao final de cada ciclo de sntese da protena, as subunidades ribossomais so liberadas e se renem ao grupo comum do citosol.

Protenas solveis so liberadas no lmen do RE

1. SRP- Partcula de reconhecimento sinal: est presente no citosol e se liga a sequncia-sinal do RE quando exposta pelo ribossomo. 2. Receptor de SRP: est inserido na membrana do RE e reconhece a SRP. Depois de ligar-se ao receptor, a SRP liberada e recomea a sntese proteica. A cadeia polipeptdica dirigida para o lmen do RE por um canal de translocao da membrana do RE

1. A sequncia-sinal abre o canal de translocao e fica presa a ele 2. A cadeia proteica entra no lmen do RE 3. Uma peptidase-sinal cliva a sequncia-sinal da protena 4. O peptdeo-sinal clivado volta para o citosol e a protena fica no lmen do RE

Sinais que determinam o arranjo da protena transmembrana

1. Protena transmembrana de passagem nica

Cliva o peptdeo-sinal da protena

2. Protena transmembrana de passagem dupla

No h clivagem da sequncia de parada nem da sequncia de incio

Protena transmembrana

Transporte por vesculas

H 2 vias: secretria e endoctica

MET demonstrando a sequncia de eventos na formao de uma vescula revestida de clatrina a partir de uma fossa revestida

Vesculas revestidas: so as que brotam das membranas e tem uma capa proteica distinta no citosol

MEV demonstrando inmeras fossas e vesculas revestidas de clatrina brotando da superfcie interna da membrana plasmtica de clulas cultivadas

Vesculas revestidas por clatrina

Via secretria: brotam do Golgi Via endoctica: brotam da membrana plasmtica
Adaptinas se ligam as clatrinas na superfcie citoslica da vescula em brotamento Hidrolisam o GPT e destacam a vescula Remoo das protenas de revestimento

Adaptinas capturam os receptores de carga

Vescula se fusiona a membrana alvo

Dinamina se acopla ao pescoo da vescula em formao

Vesculas de clatrina

Como as vesculas de membrana encontram o caminho correto para o seu destino?

Geralmente, a vescula transportada por protenas motoras que se movem ao longo das fibras do citoesqueleto. Quando a vescula chega ao seu alvo, ela tem que reconhece-lo, se ancorar na organela, se fundir e descarregar a sua carga.
2 famlias de protenas auxiliam no transporte de vesculas para suas membranas alvo. 1. Protenas Rab: so reconhecidas por receptores da membrana alvo 2. Protenas SNAREs: so protenas transmembranas da vescula (v-SNAREs)ou da membrana alvo (t-SNAREs)

reconhecidas por receptores da membrana alvo Reconhecimento da v-SNAREs pela t- SNAREs

Protenas SNAREs atuam na fuso de membranas

Vias secretoras
o A maioria das protenas quimicamente modificada no RE o No interior do RE ocorre a formao de pontes dissulfdicas, pela oxidao de pares de cadeias laterais de cistenas. o As pontes dissulfdicas do estabilidade para as protenas quando elas encontram mudanas de pH e enzimas no exterior da clula. o No RE ocorre a glicosilao, formando glicoprotenas o O citosol no tem enzimas de glicosilao

Funes dos oligossacardeos nas protenas:

Protegem a protena da degradao Retm a protena no RE at o seu enovelamento Orientam a protena para se dirigir organela correta Na superfcie celular formam o glicoclix

Glicosilao no RE
1. Adio de cadeias laterais de oligossacardeos e asparaginas especiais do polipeptdio 2. O oligossacardeo transferido como uma unidade intacta para a asparagina a partir de um lipdio, o DOLICOL

3. As asparaginas glicosiladas tem uma sequncia de 3 peptdeos: Asparagina-X-Serina Asparagina-X-Treonina X= qualquer aminocido

Controle de qualidade do RE
As protenas malformadas so transportadas para o citosol, onde sero degradadas

No interior do RE as chaperonas se unem s protenas malformadas impedindo a sua sada do RE

As protenas bem formadas so transportadas por vescula para o Golgi.

UPR (unfolded protein response)

O aumento da sntese proteica sobrecarrega o RE e as protenas mal enoveladas se acumulam no RE As protenas mal enoveladas se ligam a receptores que estimulam a produo de um regulador de transcrio O regulador de transcrio vai para o ncleo para ativar genes que codificam para a produo de chaperonas e outros componentes do RE

Modificao e distribuio das protenas no Golgi

O Golgi fica prximo ao ncleo e do centrossomo composto por uma coleo de sacos achatados e empilhados, denominados cisternas (cerca de 3-20 cisternas) Face de entrada: cis, adjacente ao RE

Face de sada: trans, em direo membrana plasmtica

Golgi de clula pancretica

Vias de exocitose via constitutiva X via regulada

Via constitutiva ou padro: *Crescimento da membrana antes da diviso celular. *Exocitose de protenas para o exterior (secreo) Protenas recm sintetizadas podem: -Aderir a superfcie celular -Ficar incorporadas na matriz extracelular -Difundir no lquido extracelular para nutrio ou sinalizao de outras clulas

Via constitutiva para suprir a membrana com protenas e lipdeos

Via constitutiva para protenas solveis

Via regulada: S existe em clulas secretoras onde o material estocado em vesculas de secreo. As vesculas brotam pela face trans, se acumulam prximo a membrana, para aguardar o sinal que estimular a liberao do seu contedo para o exterior

MET mostra a liberao de insulina para o espao extracelular a partir de uma vescula secretria de uma clula

Vias endocticas
o Fagocitose: partculas grandes (> 250 nm de dimetro), serve para a nutrio e para defesa o Pinocitose: lquido e molculas pequenas (< 150 nm de dimetro), serve para a nutrio

Fagocitose

MET, neutrfilo ingerindo uma bactria

MEV, macrfago fagocitando eritrcitos

Fagocitose

Pinocitose
Endocitose mediada por receptor
No sangue o colesterol transportado pela Lipoprotena de baixa Densidade (LDL)

Endocitose do colesterol

Endossomos iniciais e tardios

Destino das protenas receptoras

1. Reciclagem: a maioria devolvida ao mesmo domnio da membrana plasmtica de onde vieram 2. Degradao: se movem para os Lisossomos onde so degradados

3. Transcitose: alguns prosseguem para um domnio diferente da membrana plasmtica, transferindo suas molculas carga ligadas de um espao extracelular para outro.

Lisossomos
Sacos membranosos contendo enzimas hidrolticas que conduzem a digesto intracelular
Cerca de 40 tipos de enzimas esto presentes, as hidrolases cidas que agem em pH cido, dentro do lisossomo.

Sua membrana contm transportadores que permitem que os produtos finais da digesto de Macromolculas como aminocidos, aucares e nucleotdeos, sejam transportados para o citosol A membrana mantm uma bomba de H+ dirigida por ATP, que bombeia H+ para dentro do lisossomo mantendo o pH cido

Vias dos materiais degradados

Fagossomos: partculas fagocitadas fusionadas com lisossomos

Endossomos: macromolculas e lquidos fagocitados fusionados com os lisossomos

Autofagossomos: Organelas da prpria clula fagocitadas e fusionadas com lisossomos

Obrigada!