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INTRODUO Em um laboratrio de microbiologia o objetivo identificar quem o responsvel por um determinado estado infeccioso e indicar o perfil dos microrganismos

os que o homem est em contato atravs do monitoramento de populaes microbianas. A partir disso, o profissional da rea de sa de descobre quais microrganismos est!o desencadeando o quadro cl"nico do paciente. #ara que esses resultados sejam satisfatrios os laboratrios de microbiologia devem possuir estrutura capa$ de estabelecer informaes sobre a melhor amostra biolgica, reconhecer a flora normal, reconhecer os contaminantes, identificar microrganismos cujo tratamento beneficia o paciente, identificar microrganismos com propsitos epidemiolgicos, obter resultados rpidos em casos de emerg%ncia, racionali$ar no uso de antimicrobianos, reali$ar o transporte rpido das amostras e o relato dos resultados e manter uma educa!o mdica cont"nua em rela!o aos aspectos da infec!o hospitalar. #ara cultivar microrganismos artificialmente necessrio conhecer suas e&ig%ncias nutricionais e suas condies f"sicas de crescimento, trabalhar com material esterili$ado e obedecer 's normas de prtica assptica( )!o trabalhar em corrente de ar, nem ambiente agitado pelo ac mulo de pessoas* )!o falar nem respirar em frente ao recipiente aberto contendo material de estudo* Abrir o recipiente inclinado junto ' chama, onde o ar est rarefeito de formas vivas* +etirar o tamp!o de algod!o com o dedo m"nimo e a palma da m!o sem tocar na boca do recipiente e sem encostar o tamp!o em lugar algum* ,lambar a boca do recipiente sempre que for iniciar uma inocula!o, para que uma corrente de ar quente seja formada de dentro para fora* -ntrodu$ir o mais rpido poss"vel a ala ou pipeta sem tocar nas paredes do recipiente* Ao terminar a inocula!o, flambar a boca do recipiente e ajustar o tamp!o, conservando o material ao abrigo da poeira e umidade.

#ara que se tomem as provid%ncias adequadas, num caso de emerg%ncia, necessrio que se tenha conhecimento do grau do perigo apresentado pelo microorganismo em quest!o. E&istem vrias classificaes de micro.organismos, mas nenhuma delas d %nfase suficiente

na transmiss!o dos agentes microbianos* assim, para direcionar as emerg%ncias foi elaborada uma classifica!o dos micro.organismos infectantes, de acordo com o grupo de risco( /rupo de +isco - . #ouco risco individual e comunitrio( )este grupo est!o inclu"dos os micro.organismos que t%m bai&as probabilidades de provocar molstias humanas e s!o de pouca import0ncia veterinria* /rupo de +isco -- . +isco individual moderado, risco comunitrio limitado( Est!o aqui agrupados os agentes patog%nicos que podem provocar molstias humanas e os animais, mas que t%m bai&as probabilidades de causar perigo grave para o pessoal do laboratrio e a comunidade, animais de cria!o ou para o meio ambiente. A e&posi!o no laboratrio pode provocar infec!o grave, mas, s!o dispon"veis medidas efica$es de tratamento e preven!o, limitando assim, o risco de propaga!o* /rupo --- 1 +isco individual elevado e pequeno risco comunitrio( 2s agentes patog%nicos deste grupo provocam molstias humanas graves, mas que n!o se propagam de uma pessoa infectada para outra* /rupo -3 1 Elevado risco individual e comunitrio( 2s agentes patog%nicos deste grupo provocam graves molstias humanas e n!o animais, podendo propagar.se facilmente de um indiv"duo para outro direta ou indiretamente. 2s acidentes em laboratrios de 4icrobiologia, normalmente ocorrem pela forma!o de aerossis, por respingos, pipetagens incorretas, injees, trabalhos com grandes quantidades e5ou concentraes elevadas de micro.organismos, laboratrios superlotados de pessoal e material, infesta!o por roedores, por insetos e entrada de pessoas n!o autori$adas. #ara evitar a maior parte destes riscos, devem ser tomados cuidados especiais, desde a concep!o geral e instala!o do laboratrio. As infeces por micro.organismos em laboratrios de 4icrobiologia podem ocorrer atravs da pele, das vias digestivas e mucosa bucal, das vias respiratrias e mucosa nasal e dos olhos e ouvidos.

CONCLUSO #ode.se concluir atravs dessa prtica que os riscos inerentes 's pesquisas com micro. organismos patog%nicos e vrios acidentes trgicos ocorridos em laboratrios suscitam atualmente muita preocupa!o, levando assim, ao fortalecimento de medidas de segurana nos laboratrios e durante o transporte de amostras entre laboratrios. 4ateriais que podem causar infeces ou que s!o t&icos s!o sempre potencialmente perigosos. 6ais materiais devem ser tratados com o devido respeito e com muito cuidado. 7uando empregados de maneira incorreta no laboratrio podem ser muito perigosos, n!o somente para o indiv"duo que est trabalhando, mas para os outros que est!o pr&imos ou mesmo para a comunidade, pois muitas ve$es mecanismos de dissemina!o, como correntes de ar, podem espalhar e distribuir os agentes patog%nicos ou to&inas a grandes dist0ncias. 8esde que, para evitar contamina!o, e&iste a necessidade de aplica!o das boas prticas de laboratrio, o microbiologista deve estar seguro de que seus tcnicos cultivam e empregam estas prticas.

TEXTO COM TODOS OS EQUIPAMENTOS PRESENTES NO LABORATRIO PARA FACILITAR O DESENVOLVIMENTO MENINAS! 1. Funes e/ u !"#$%!es & '!(e)$!# & #!* )!(+)$ &e '$%) *$ # ,$! 1.1. Material Permanente a. Autoclave . c0mara de vapor com parede dupla, equipada com dispositivos que permitem o enchimento da c0mara com vapor saturado e sua manuten!o em determinadas temperatura e press!o por quaisquer per"odos de tempo. 2 autoclave um equipamento indispensvel ao laboratrio de microbiologia na esterili$a!o de meios de cultura, gua, suspenses etc.9ver modo de opera!o: b. !tu"a! #e !terili$a%&o '(orno! #e Pa!teur) . esterili$a a seco toda vidraria convenientemente acondicionada, a temperatura de ;<= a >==o ? por ;.> horas. c. Re"ri*era#or . utili$ado na conserva!o de culturas de microrganimos sob bai&a temperatura, diminuindo o tempo de gera!o #. !tu"a bacteriol+*ica . favorece o crescimento de microrganismos pela incuba!o na temperatura adequada. Incuba%&o @ manuten!o do meio semeado em determinadas condies para promover o desenvolvimento dos microrganismos. e. Me!a a*ita#ora 'rumbeira) . favorece o crescimento de microrganismos aerbios, pela dissolu!o do o&ig%nio no meio, atravs da agita!o da mesa, em movimentos rotatrios. ". Cabine #e "lu,o laminar . c0mara assptica, dotada de e&austor e l0mpada fluorescente, sendo utili$ada em repiques de microrganismos *. (ermenta#or . equipamento onde ocorrem as fermentaes, podendo ser dotado de sistemas de agita!o, aera!o, refrigera!o. 1.-. .i#raria a. Tubo #e en!aio 'tubo #e cultura) . utili$ado no cultivo de microrganismos em pequeno volume de meio e na conserva!o de culturas puras de microrganismos. b. Placa #e Petri . facilita o isolamento de microrganismos devido ' grande superf"cie de crescimento que apresenta, possibilitando o aparecimento de colAnias separadas. Col/nia 0 aglomerado de clulas em meio slido, geralmente originadas de uma nica clula progenitora.

c. Pi1eta . para diluir preparaes diversas e inocular culturas l"quidas Inocular 0 in!erir2 intro#u$ir In+culo 'ou !emente) 0 concentra!o de clulas suficientes para cultivar uma de meio com bom rendimento #. Pi1eta Pa!teur . um tubo de vidro espichado em capilar, utili$ada para transportar pequenos volumes de l"quido e. Al%a #e Dri*al!34 . obtida a partir de uma pipeta #asteur longa, dobrada em 0ngulo reto e depois em BC? na chama. D utili$ada para espalhar microrganismos em meio de cultura slido. ". 5al&o #e "un#o c6ato. utili$ado geralmente para guardar meios de cultura. *. rlenme4er . utili$ado para propaga!o celular de microrganismos em meio l"quido sob agita!o em mesa agitadora. 6. (ernbac6 7 idem i. L8mina . para e&aminar microrganismos ao microscpios L8mina !cava#a . possui uma ou duas depresses possibilitando observar a mobilidade de microrganismos suspensos numa gota de l"quido 9Ensaio em gota pendente: 9. Lam:nula . utili$ada para recobrir preparaes microscpicas Ein vivo 1.;.Materiai! utili$a#o! em titul!es- &es($#!es- ")e"!)!es &e s #u. e &e 'e$ s &e %u#(u)!.Fequer, bast!o de vidro, bureta, funil, proveta, bal!o volumtrico, condensador dentre outros. 1.<. Diver!o! a.L=1i! #ermato*r="ico . utili$ado para escrever em superf"cie de vidro b.Al*o#&o bruto 'ou car#a#o). serve para proteger o material esterili$ado, do contato com o ar ambiente. c.Cabo #e >olle . feito com material isolante, adaptado em tr%s formas 9c"rculo, ele, agulha:. Gerve de suporte para um fio de platina ou uma liga n"quel.cromo, sendo utili$ado em inocula!o de microrganismos. /. Des$n0e%. a. De!in"ec%&o #o ar? . atravs da vapori$a!o de uma solu!o de hipoclorito de sdio a ;H* . pelo uso de l0mpadas de lu$ ultravioleta. . pode ser feita periodicamente com a vapori$a!o de uma solu!o de formalina 9formol a B=H:, no entanto, esta solu!o n!o se pode usar para a desinfec!o de ambientes ocupados*

b. De!in"ec%&o #a banca#a? Antes da reali$a!o de um determinado trabalho de microbiologia, a bancada deve ser limpa com uma solu!o detergente seguida de uma solu!o alcolica a <=H. c. De!in"ec%&o #a vi#raria? 1 2$&)!)$! % n(!'$n!&! . dever ser inicialmente esterili$ada em autoclave para que toda flora presente seja destru"da e, em seguida lavada com uma solu!o detergente ou sab!o neutro* 1 2$&)!)$! se' % n(!'$n!. autoclava!o. O*se)2!. 3 n!o costume se utili$ar solu!o sulfocrAmica na lavagem dos materiais do laboratrio de microbiologia, uma ve$ que esta solu!o contm cromo que um metal que pode into&icar as clulas vivas e tambm por ser de dif"cil remo!o no material 4. A% n&$%$ n!'en( a. Placa! #e Petri . embrulhadas com papel, geralmente formando conjunto de I unidades. A quantidade depende da necessidade do trabalho. b. Pi1eta! . obtura.se as boquilhas com mecha de algod!o 9;cm: para filtrar o ar soprado e para proteger o operador durante a manipula!o* em seguida s!o enroladas uma a uma com papel, anotando a capacidade de cada uma. c. Tubo! #e en!aio2 bal@e! #e "un#o c6ato2 rlenme4er!2 "ernbac6! . s!o preparados introdu$indo.se um tamp!o de algod!o cardado na boca do recipiente. Esse tamp!o deve ser feito, enrolando o algod!o no sentido da fibra em quantidade suficiente para facilitar o manuseio, isto , n!o deve ser nem muito apertado, nem muito frou&o. #. L8mina! . mergulhadas em solu!o alcolica, ficam aptas a serem utili$adas a qualquer momento, evitando paralelamente que sejam arranhadas. AT NO? 6oda vidraria utili$ada no laboratrio de microbiologia antes de ser preparada para esterili$a!o dever estar limpa e seca. !terili$a%&o em autoclave O1era%&o? ligar o aparelho ' rede eltrica. Aps a coloca!o do material dentro do autoclave, a tampa fechada e a torneira de remo!o de ar ou vapor dei&ada aberta para remover todo o ar. 7uando todo o ar for removido, dei&e que um flu&o de vapor fluente persista por cerca de C minutos, antes de fechar a torneira. A partir de ent!o a press!o internamente ir aumentar e chegar ' press!o de esterili$a!o usada, que de ;C lb5pol >, ou ;atm, ou ; Jgf5cm>, correspondendo a uma temperatura de ;>;=?. 2 tempo de e&posi!o do material no interior deste equipamento ir depender do volume de l"quido a ser esterili$ado. .idem ao anterior, porm sem necessidade de

#ara pequenos volumes, at I litros, podem ser esterili$ados durante >= a I= minutos a uma press!o de ;C lb5pol>. ?om rela!o a maiores volumes, ser necessrio, uma e&posi!o mais prolongada. 7uando a temperatura requerida para a esterili$a!o alcanada, deve.se comear a contar o tempo, usando um relgio de laboratrio 9com alarme:. 8ecorrido o tempo desliga.se o aparelho da corrente eltrica e mantm.se a autoclave e a torneira de ar e vapor fechados, at o manAmetro voltar ao ponto $ero, pois quando a press!o da autoclave aliviada rapidamente, os l"quidos dentro dos tubos e frascos fervem violentamente, fa$endo com que os tampes sejam arremessados para fora dos mesmos. ?onclu"da a esterili$a!o, abre.se a torneira de vapor* em seguida a tampa do autoclave levantada.

Kniversidade Estadual do Gudoeste da Fahia

?ampus Kniversitrio de Lequi 8epartamento de ?i%ncias Fiolgicas 1 8?F 8isciplina( 4icrobiologia ?urso de ,armcia --- Gemestre 8ocente( 8iscente( ?aroline +ocha da 4ata -ndhMana Nopes 2liveira +ebeca

R LATARIO D MICRO5IOLOBIA

LE7K-D 1 FA 4A-2 5 >=;>

Kniversidade Estadual do Gudoeste da Fahia

?aroline +ocha da 4ata -ndhMana Nopes 2liveira +ebeca

Relat+rio #e Microbiolo*ia? Ri!co! #e in"ec%&o no Laborat+rio

+elatrio

referente

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primeira aula prtica da disciplina 4icrobiologia, ministrada pela prof. #atricia para fins de avalia!o do IO semestre letivo de >=;>.

LE7K-D 1 FA )23E4F+25 >=;>

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