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Revista Eletrnica de Biologia

REB Volume 6 (1): 82-93, 2013

ISSN 1983-7682
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Fungos Anemfilos Isolados Na Cidade De Belm, Estado Do Par - Brazil

Anemophilus fungi Isolated In The City Of Belm, State of Par - Brazil

Bruna Fernanda Pacheco Pereira
1
; Layla Evangelista de Melo
1
; Patrcia Fagundes
da Costa
1
.
1
Centro Universitrio do Estado do Par, Secretaria Municipal de Educao
Email contato: brunafernandapp@gmail.com

Resumo
Os fungos anemfilos so aqueles cuja disperso ocorre por meio das correntes areas,
sendo considerados oportunistas. O estudo buscou caracterizar a micobiota de acordo com
a sazonalidade, a frequncia e os gneros dominantes na regio. A coleta foi realizada
semanalmente no perodo de maro a setembro de 2010 pela tcnica Settle Plate, obtendo-
se o total de 504 de placas de petri contendo o meio Agar Sabouraund e total de 232
colnias de fungos filamentosos. Os dados meteorolgicos foram obtidos do site do
CPTEC/INPE (2010). Foram identificados sete gneros, dentre eles: Aspergillus (77,59%),
Penicillium (18,97%), Cladosporium (0,86%), Curvullaria (0,43%), Trichoderma (0,43%),
Paecilomyces (0,43%), Monilia (0,43%) e fungos com miclio estril (0,86%). Os dados
demonstraram que fatores abiticos possuem ao diferencial na manifestao de
determinados gneros de fungos anemfilos, bem como se observou variao fngica
qualitativa nos meses que apresentam maior e menor incidncia de chuvas e nos bairros
correspondentes aos locais de coletas.

Palavras-Chave: Fungos; Micobiota anemfila; Alrgenos oportunistas.

Abstract
The anemophilus fungi are those whose dispersion occurs through air currents, and are
considered as opportunistic fungi. The study aimed at characterizing the microbiota
according to seasonality, frequency and dominant genera in the region. The collection was
carried out weekly from March to September 2010 by using the Settle Plate technique, thus
obtaining a total of 504 petri containing a medium of contention Sabouraunds dextrose agar,
and total of 232 colonies of filamentous fungi. The meteorological data were provided by
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CPTEC/INPE (2010). During the seven months of collection, seven genera were identified,
including: Aspergillus (77.59%), Penicillium (18.97%), Cladosporium (0.86%), Curvullaria
(0.43%), Trichoderma (0.43%), Paecilomyces (0.43%), Monilia (0.43%), and fungi with sterile
mycelium (0.86%). The data demonstrated that abiotic factors have differential action in the
manifestation of certain anemophilous fungi genera, as well as we observed qualitative
fungal variation during the most and least rainy months in the neighborhoods where the
collections were performed.

Keywords: Fungi; Anemophious micobiota; Opportunistic allergen.

1. Introduo

Os fungos so microrganismos encontrados em uma variedade de ambientes,
sendo o ar atmosfrico seu principal meio de disperso, o que garante o sucesso na
propagao destes microrganismos denominados fungos anemfilos (LOBATO,
2009). Gambale (2010) relata que os propgulos podem ser levados a grandes
distncias, pelos ventos, quando a via de disperso o ar atmosfrico. O processo
de disperso ocorre por meio da liberao de altas taxas de propgulos e pela
fragmentao de seus miclios (LOBATO, 2009). Esta facilidade em sua distribuio
ocasiona a irradiao desta aeromicobiota em uma variedade de substratos.
A diversidade fngica e sua ocorrncia se tornam variveis de acordo com a
localizao geogrfica, sazonalidade e velocidade dos ventos de cada regio, uma
vez que a liberao dos esporos dependente de condies favorveis
proporcionadas pelo ambiente. A maioria dos fungos comumente considerados
aeroalergenos tem um padro sazonal de liberao de esporos (MENEZES, 2004).
Mezzari (2002) relata que em condies ambientais favorveis, os fungos se
espalham amplamente na natureza, pois so grandes produtores de esporos, e seus
propgulos fngicos permanecem ativos no meio ambiente, expondo o ser humano
constantemente. Segundo Mezzari (2002) cada individuo pode ficar exposto em uma
regio com diferentes quantidades desse aeroalrgenos.
Dentre os poluentes biolgicos, os fungos destacam-se entre os demais por
crescerem e disseminarem-se pela poeira ambiental, alm de manterem-se viveis
por longos perodos e em materiais de uso comum e superfcies (LOBATO, 2009).
Souza et al. (2008) elucida que dentre as espcies de fungos anemfilos que
apresentam grande importncia em patologias mdicas os pertencentes aos gneros
Penicillium sp., Aspergillus sp., Mucor sp., Rhizopus sp., Cladosporium sp.,
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Alternaria sp., entre outros. Estes gneros so considerados os principais
responsveis por sintomatologias respiratrias como rinite e asma. Para Menezes et
al. (2004) a prevalncia de alergia respiratria causada por fungos estimada entre
20% a 30% para indivduos atpicos e 6% para toda a populao.
Estudos referentes aeroalrgenos no Brasil foram realizados nas regies Sul,
Sudeste e Nordeste do pas, o primeiro estudo completo a ser realizado na regio
norte, especificamente na cidade de Belm/PA foi por Amaral Costa no ano de 1960,
este apresentou sua tese de doutorado Faculdade de Medicina na Universidade do
Par, intitulada Contribuio ao Estudo da Flora Mictica do Ar da Cidade de
Belm. Amaral Costa teve sua pesquisa iniciada em 15 de janeiro de 1958 e
finalizada em 09 de janeiro de 1959; este realizou coletas dirias de esporos de
fungos atravs da tcnica de placas de petri expostas, identificando 36 gneros
fngicos.
Uma vez demonstrada carncia de estudos na regio Norte, esta pesquisa
buscou elucidar o conhecimento acerca da micobiota anemfila, qualitativamente,
ocorrente na cidade de Belm, Estado do Par, Servindo de base para o
conhecimento da micobiota anemfila neste municpio.


2. Materiais e Mtodos

A pesquisa foi desenvolvida na cidade de Belm (latitude: 01 23'.6 Sul e
longitude: 048 29'.5 Oeste) localizada estado do Par, sendo considerada a porta
de entrada da Amaznia, cuja estao climtica compreende um perodo com maior
percentual de chuvas (novembro a abril) e outro com baixo percentual de chuvas
(maio a outubro). Os bairros selecionados para coletar as amostras foram: Cidade
Velha (CV), Jurunas (J), Nazar (N), So Brs (SB) e Pedreira (P) (Figura 1).
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Figura 1. Mapa dos bairros da cidade de Belm.
Fonte: Prefeitura de Belm.

A coleta foi realizada semanalmente, exceto nos dias chuvosos, em dois
perodos diferentes do dia, no horrio da manh iniciado as 07h00min e no perodo
intermedirio iniciado as 12h00min, de maro a setembro de 2010, totalizando 504
placas, seguindo a seqncia dos bairros da zona Norte, Sul, Leste, Oeste e Centro.
Em cada bairro foram escolhidos trs diferentes pontos de coleta cuja distncia entre
estes era de 50m. Para coleta de fungos anemfilos utilizou-se a tcnica Settle
Plate (Mtodo de deposio gravitacional) que consiste em expor as placas Petri (10
cm de dimetro e 20 ml de gar-Sabouraud) a uma altura do solo de 1,5m, durante
10 minutos em uma rea ao ar livre. Aps a realizao das coletas, dados
referentes da umidade relativa do ar (UR), Velocidade do vento (Vv), temperaturas
mxima e mnima (TM, Tm) foram obtidos a partir do site do Centro de Previso de
Tempo e Estudos Climticos - CPTEC, do Instituto Nacional de Pesquisas Espaciais
INPE.
O material coletado foi encaminhado ao Laboratrio de Microbiologia do Centro
Universitrio do Par CESUPA, onde foram incubados em estufa bacteriolgica
durante trs (3) dias no Laboratrio de Microbiologia do Centro Universitrio do Par
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CESUPA. Aps o crescimento das diferentes colnias, foi realizado isolamento de
cada uma das colnias em tubo e ensaio contendo gar-Sabouraud (Figura 2), onde
permaneceram por mais trs (3) dias para seu desenvolvimento. Foram excludas as
placas que atravs da observao macroscpica apresentem caractersticas de
colnias leveduriformes ou bacterianas.


Figura 2. Isolamento e incubao
Fonte: Laboratrio de Microbiologia do Centro Universitrio do Par 2010.

A identificao fngica foi realizada atravs de observao macro e
microscpica, onde a identificao macroscpica consistiu na descrio do aspecto
das colnias, atravs da observao do verso e anverso, cujas caractersticas
analisadas foram: pigmentao, textura e consistncia das colnias. Para
identificao microscpica as estruturas estudadas foram: hifas, estruturas de
reproduo (esporforos e esporos), para esta anlise seguiu-se a tcnica do
microcultivo em lmina Ridell (1950) (Figura 3). Para caracterizao genrica
utilizou-se como referncia De Hoog et al (2000) e Lacaz et al (1998).
Os dados foram tabulados no Microsoft Office Excel 2007

, gerando um banco
de dados, em seguida foram criados grficos numricos para que estes representem
os resultados encontrados na pesquisa.
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Figura 3. Tcnica de microcultivo Ridell (1960).
Fonte: Laboratrio de Dermato-imunologia


3. Resultados e Discusso

No total de 72 placas mensais expostas em cinco bairros em Belm,
excluindo dias chuvosos, obteve-se 504 placas. A partir destas formaram-se 232
colnias de fungos filamentosos. As figuras 4 e 5 exemplificam os resultados
macroscpicos referentes pesquisa.
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Figura 3. Placas com desenvolvimento fngicos
Fonte: Laboratrio de Microbiologia do Centro Universitrio do Par 2010.


Figura 4. Colnias de fungos filamentosos isoladas em meio de cultivo tubo de ensaio.
Fonte: Laboratrio de Microbiologia do Centro Universitrio do Par 2010.

Durante os sete meses de coleta, identificaram-se sete gneros, foram estes:
Aspergillus, Penicillium, Cladosporium, Curvularia, Trichoderma, Paecilomyces,
Monilia e fungos com miclio estril (Figura 6). A identificao dos fungos foi
realizada atravs da anlise microscpica da estrutura de reproduo, caracterstica
para cada gnero.
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Figura 6. Gneros fngicos encontrados: A)Gnero Aspergillus; B) Gnero Penicillium; C)
Gnero Curvularia; D) Gnero Monilia.
Fonte: Laboratrio de Microbiologia-CESUPA/2010.

Os gneros Aspergillus e Penicillium, foram isolados em todos os bairros
variando sua distribuio. O gnero Cladosporium foi encontrado nos bairros So
Brs e Cidade Velha, Trichoderma somente no bairro de Nazar, Paecilomyces no
bairro da Pedreira, Monilia no bairro do Jurunas, Curvularia em So Brs e fungos
de miclio estril na Cidade Velha (Grfico 1).

Grfico 1. Frequncia de gneros fngicos de acordo com os locais de coleta, Belm, 2010.

Grfico 2. Gneros fngicos encontrados nos diferentes perodos do dia, Belm, 2010.
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No grfico 1 se observa que houve variao dos gneros fngicos nas coletas
realizadas nos diferentes perodos do dia, no horrio da manh iniciado as 07h00min
e no perodo intermedirio iniciado as 12h00min.
Os gneros Aspergillus e Penicillium, foram encontrados nos dois perodos do
dia, com baixa variao, no entanto, no perodo da manh verificou-se Paecilomyces
e Monilia, enquanto no perodo intermedirio, obteve-se a ocorrncia dos gneros
Cladosporium, Trichoderma, Curvularia e fungos com miclio estril.
Apesar da carncia de trabalhos que correlacionem fatores abiticos ao
crescimento fngico, Gambale (1983) ao estudar influencia dos mesmos na
disperso de fungos do ar na cidade de So Paulo, identificou que h diferena
entre os ndices obtidos em vrios horrios, e que no perodo da tarde se obtm um
maior nmero de fungos; enquanto que no perodo da manh e da noite observou-se
menor freqncia.
Gambale et al.(1983) tambm indica que a iluminao pode ser um fator
importante na variao de fungos do ar, pois em horrios com maior iluminao
maior ser a quantidade de esporos no solo ou em outros substratos, pela atuao
de outro fator abitico como vento, aumentando a concentrao de esporos no ar.
Tambm se observou variao fngica qualitativa nos meses com maior
incidncia de chuvas (maro e abril), com ocorrncia de cinco diferentes gneros e
fungos com miclio estril, enquanto nos meses com reduo do percentual de
chuvas (maio a setembro), obtiveram-se trs gneros (Grfico 2). Destaca-se que se
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tomou como base apenas o comportamento das chuvas no perodo de
desenvolvimento do experimento.
Bernardi (2006) relata em sua pesquisa, que com a diminuio da umidade
relativa ocorreu diminuio nas unidades formadoras de colnias (UFC), e o
aumento da temperatura mdia diminuiu as UFC, desta forma influenciando
negativamente no nmero de propgulos transportados.
Durante os sete meses de coleta foram identificados sete gneros, dentre eles
Aspergillus (77,59%), Penicillium (18,97%), Cladosporium (0,86%), Curvularia
(0,43%), Trichoderma (0,43%), Paecilomyces (0,43%), Monilia (0,43%) e fungos com
miclio estril (0,86%), comparando os resultados obtidos com outras pesquisas em
diferentes localidades observamos variaes qualitativas (Tabela 1).

Tabela 1. Anlise comparativa entre estudos realizados em ambiente externo
Gneros
Autor /Ano/Local (%)
Costa
(1960)
Belm
Faria
(1967)
Belo Horizonte
Gambale
(1977)
So
Paulo
Mezzari
(2002)
Porto Alegre
Menezes
(2004)
Fortaleza
Bernardi
(2005)
Pelotas
Penicillium 18,54 11,67 10,18 15,03 13,41 10,20
Aspergillus 10,64 10,51 5,69 15,03 44,83 3,82
Cladosporium 5,8 - 15,82 17,86 6,83 18,22
Curvularia 19,83 2,01 1,87 8,87 9,79 7,74
Trichoderma 4,53 0,57 2,73 - 0,13 -
Paecilomyces 2,90 0,72 0,79 - 0,26 2,19
Monilia 2,66 - - - - -
Miclio
Estril
3,95 - - 1,59 - -
Total (%) 67,95 25,48 37,8 50,38 81,29 41,9

A variao dos resultados nas diferentes pesquisas pode estar associada s
diferenas geogrficas e variaes climticas, onde segundo Galvagno &
Forchiassin (2010) possvel que a falta de crescimento se deva ausncia de
certos nutrientes necessrios. Essa variao tambm pode estar associada atravs
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da forma em que cada pesquisa foi realizada, ou devido as condies de anlise e
interpretao dos dados de cada local cuja pesquisa se desenvolveu.
Alm desses fatores, Costa (1960) destaca tambm os prs e os contras da
utilizao da tcnica Settle Plate (mtodo gravitacional). Os aspectos positivos so
principalmente: ser simples, de fcil manejo e ter base cientfica; permitir o estudo e
a identificao das colnias de maneira genrica; possibilitar o estudo da disperso
diria de fungos em determinada regio; permitir isolar fungos da atmosfera e
preparar antgenos para estudo da etiologia de processos alrgicos do sistema
respiratrio. Porm com aspectos negativos so ressaltados: no permitir obter a
variao quantitativa devido s dificuldades em saber o volume e a velocidade do
vento que passa sobre a placa em exposio e o crescimento rpido de certos
fungos prejudicando o de outros e consequentemente sua classificao.

4. Concluso

Os gneros identificados apresentaram ocorrncia em diferentes perodos do
dia e estaes, cujas variaes climticas podem exercer influencia na disperso e
desenvolvimento de fungos anemfilos. Dos sete gneros encontrados, os que
apresentaram maior ocorrncia foram o Aspergillus e Penicillium. Porm, cada
localidade apresentou diferentes variaes fngicas que podem estar associados a
diversos fatores que variam desde a localizao geogrfica at a forma de
desenvolvimento da coleta, anlise e interpretao dos dados.

REFERNCIA BIBLIOGRFICA

BERNARDI, E. ET AL. Fungos anemfilos e suas relaes com fatores abiticos, na praia
do Laranjal, Pelotas, RS. Revista de biologia e cincias da Terra, v. 6, n. 1, 2006.

COSTA, C. A. A. Contribuio ao Estudo Qualitativo da Flora Mictica do Ar da Cidade
de Belm e Sua Possvel Relao com Asma Brnquica e Rinite Alrgica. [s.l.]
Universidade Federal do Par, Faculdade de Medicina, 1960.

DE HOOG, G. S. ET AL. Atlas de fungos Clnicos. [s.l: s.n.].

GAMBALE, W. Fungos Contaminantes. In: Compndio de Micologia Mdica. Rio de
Janeiro: Guanabara Koogan, 2010. p. 99107.

93


GAMBALE, W. Influncia de Fatores Abiticos na Disperso Area de Fungos na Cidade de
So Paulo, Brasil. Revista de microbiologia, v. 14, n. 3, 1983.

GALVAGNO M. A; FORCHIASSIN, F. Fisiologia dos Fungos: crescimento, morfologia e
diferenciao. In: Fungos: uma introduo biologia bioqumica e biotecnologia.
2. ed. Caxias do Sul: EDUCS, 2010.

LACAZ, C. S. . ET AL. Micologia Mdica: fungos actinomicetos e algas de interesse
mdico. So Paulo: Servier, 1998.

LOBATO, R. C. ET AL. Sazonalidade e Prevalncia de Fungos Anemfilos em Ambiente
Hospitalar no Sul do Rio Grande do Sul, Brasil. Revista da Faculdade de Cincias
Mdicas de Sorocaba, v. 11, n. 2, p. 2128, 2009.

MENEZES, E. A. ET AL. Fungos Anemfilos causadores de alergia respiratria em
pacientes de Fortaleza, Cear, Brasil. Jornal Brasileiro de Patologia Mdica
Laboratorial, v. 40, n. 2, p. 7984, 2004.

MEZZARI, A. Fungos Anemfilos em Porto Alegre, RS. [s.l.] Universidade Federal do Rio
Grande do Sul, Faculdade de Veterinria, 2002.

RIDDELL, R. W. Permanent Stained Mycological Preparations Obtained by Slide Culture.
Mycologia, v. 42, p. 265270, 1950.

SOUZA, A. E. F. ET AL. Isolamento e Identificao da Microbiota Fngica Anemfila em
Diversos Setores do Centro de Cincias Biolgicas e da Sade da Universidade.
REvista de Biologia e Farmcia, v. 2, n. 2, p. 131148, 2008.