UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO SUL

FACULDADE DE FARMCIA
DEPARTAMENTO DE PRODUO DE MATRIA-PRIMA
DISCIPLINA DE FARMACOGNOSIA I

RELATRIO DE AULA PRTICA

EXTRAO E ANLISE DA CAFENA DE SEMENTES DE
GUARAN

Alunos: Jauri Francisco da Siqueira Junior

Pedro Magnum Mendes
Turma: B

Porto Alegre, abril de 2010

1. Introduo
O Guaran um arbusto nativo do Brasil (dos estados de Amazonas e Par) e da Venezuela ,
denominado cientificamente por Paullinia cupana Kunth, membro da famlia Sapindaceae. rica
em alcalides, como a cafena e a teobromina, reconhecidos por suas aes estimulante. O
farmacgeno caracterstico do guaran so suas sementes secas e levemente torradas, que possuem
concentrao elevada de seus princpios ativos, embora seus frutos possuam grandes quantidades
destes alcalides.
Das metil-xantinas existentes na natureza a que mais prevalece na dieta , sem dvida, a
cafena, existindo em mais de 60 espcies de plantas em todo o mundo. O caf , inevitavelmente, a
fonte primria de cafena no adulto mas, a cafena est tambm contida, naturalmente, em muitos
alimentos como o ch, o cacau e o guaran. A cafena adicionada, artificialmente, a muitos outros
produtos, incluindo alguns refrigerantes base de cafena, bebidas energticas e em algumas
formulaes farmacuticas, no tendo qualquer valor nutricional para o organismo humano,
restringindo-se apenas aos seus efeitos estimulantes.
A cafena um composto qumico classificado como alcalide - uma substncia de carter
bsico derivada de plantas, que contm em sua frmula nitrognio e oxignio, alm de carbono e
hidrognio (como por exemplo a nicotina e a teobromina) do grupo das metil-xantinas uma
substncia orgnica, azotada, existente no msculo, urina, em vrios rgos e em algumas plantas
(como a teofilina e a teobromina).
Atua sobre o Sistema Nervoso Central, rins, msculo e corao. Tem conhecida ao
estimulante, diurtica e cardiotnica. Produz um estado de leve excitao psquica, favorecendo o
trabalho intelectual, diminuindo a sensao de sono e de fadiga. Estudos confirmam que a cafena
reduz o tempo de reao, melhora a capacidade mental, tais como teste de associao, embora a
preciso no sofra grandes melhorias. Age tambm sobre o metabolismo basal, e aumenta a
produo de suco gstrico. Combate a depresso e cansao causado por antiestamnicos ou
analgsicos antirreutmticos.
Seus mecanismos de ao so diversos, e semelhantes aos das anfetaminas, como a cocana
e herona, no entanto tem efeitos bem mais leves. Relativamente aos seus principais metablitos,
farmacologicamente mais ativa que a teobromina e menos que a teofilina e paraxantina. Suas aes
sobre o sistema nervoso central envolvem: a competio por receptores de adenosina (A1 e A2),
exercendo um efeito antagnico sobre estes; tambm atua pelo bloqueio da enzima fosfodiesterase,
responsvel pelo metabolismo intracelular do AMPc, modificando uma cascata de sinalizao intracelular; provoca aumento da concentrao da dopamina no sangue, diminuindo a recaptao da
mesma no SNC.
A cafena uma droga psicotrpica, e como qualquer outro alcalide, ela cria aes
agradveis e estimulantes, podendo causar dependncia verificando-se aumento da dose por parte
do usurio. Tambm pode causar dependncia fsica, sendo que muitas pessoas podem sentir os
sintomas desagradveis devido falta do consumo da mesma, tais como dores de cabea, nuseas e
problemas estomacais.
Entretanto seu uso recomendado em pequenas doses dirias, sendo um dos estimulantes
mais utilizados corriqueiramente. componente de diversos medicamentos, amplamente utilizados
na terapia sintomtica da gripe e de resfriados, como demonstrado na tabela abaixo:

Tabela 1- Medicamentos contendo cafena existentes em Portugal

DCI / Nome Genrico

Nome do
Medicamento

Dosagem

Forma
Farmacutica

Genrico

cido acetilsaliclico +
Cafena + Paracetamol

A.G.Antigripe

200 mg + 150 mg + 30 mg

Comprimido
revestido

No

Cafena + Paracetamol

Algik

500 mg + 65 mg

Comprimido
efervescente

No

cido acetilsaliclico +
Cafena + Paracetamol

Anadin Extra

300 mg + 200 mg + 45 mg

Comprimido
revestido

No

cido acetilsaliclico +
Cafena + Codena

Cofena

500 mg + 10 mg + 30 mg

Comprimido

No

cido acetilsaliclico +
cido ascrbico +
Cafena

Cortigripe

250 mg + 100 mg + 20 mg

Comprimido
revestido

No

cido ascrbico +
Bromofeniramina +
Cafena + Paracetamol

Ilvico N

250 mg + 3 mg + 10 mg + 36
mg

Comprimido
revestido

No

Beladona (alcalides) +
Cafena + Ergotamina +
Paracetamol

Migretil

Beladona, alcalides 0,1 mg

+ Cafena 100 mg +
Ergotamina, tartarato 1 mg +
Paracetamol 400 mg

Comprimido
revestido por
pelcula

No

Cafena + Propifenazona

Optalidon

500 mg + 75 mg

Supositrio

No

Por ser uma metil-xantina, rapidamente absorvida aps a administrao oral, que por
estimular o SNC, aumenta o rendimento muscular. Tambm devido s suas caractersticas
estimulantes, e sua ao sobre o Sistema Nervoso Central e vascular, ela favorece a ao dos
analgsicos atenuando as dores de cabea (principalmente as de origem vascular, j que bloqueia a
ao dilatadora da adenosina, favorecendo a contrao dos vasos e diminuindo a dor). Diminui os
sintomas de desconforto, como a dor, a fadiga e o mal-estar.
Atua tambm relaxando a musculatura lisa dos bronquios e agindo como estimulante
respiratrio e potencializador de analgsico do cido acetil saliclico e do paracetamol. Normalmene
a cafena utilizada em associao com outros princpios ativos.
Possui utilizao e farmacologia reconhecida frente ao sistema cardiovascular, ao tratamento
do sono e da ansiedade, atuando tambm no sistema digestivo, endcrino e respiratrio. De forma
geral, reduzir a ingesto de cafena uma atitude benfica quando estamos passa-se por perodos de
estresse, pois esta atua como estimulante, e inevitavelmente, eleva o nvel do mesmo, que
desencadeador de diversas patologias.
Buscasmos em aula prtica extrair a cafena presente em sementes secas do guaran e
analisar a eficincia deste procedimento, como ser descrito no presente trabalho.

2. Materiais e Mtodos
2.1. Extrao
Pesou-se 1 grama de sementes secas do guaran para cada um dos trs diferentes mtodos de
macerao: macerao cintica diferencial, macerao cintica e macerao esttica. Adiciniou-se
40 ml de diclorometano para extrao das metilxantinas, acrescentando 2 ml de Nh4(OH) a amostra
direcionada a maceranao cintica diferencial.
A macerao das trs amostras foi realizada por 15 minutos. Filtraram-se as solues, e os
filtrados foram acondicionados em grais previamente pesados, e ento submetidos a aquecimento
em banho-maria, visando evaporaao do solvente utilizado.
2.2. Caracterizao da Cafena
A anlise do extrato seguiu o modelo presente na Farmacopia Brasileira, ressuspendendo-o
e realizando identificao por Cromatografia em Camada Delgada, como descrito seguir.
Ressupenderam-se os extrato j secos previamente, em 1ml de metanol, preparando o padro de 1
mg de cafena nas mesmas condies. Preparou-se o eluente para realizao da CCD, sendo este
constitudo nas propores de clorofrmio, etanol e cido frmico (90:8:2). A cromatografia
realizou-se sobre placas de slica de fase normal.
Aplicaram-se mesmas quantidades de cada um dos extratos obtidos pelos diferente mtodos
e do padro de cafena e teofilina (o marcador desta CCD), em quatro diferentes pontos, situados
lado lado, cerca de um centmetro da base da placa de slica. Removemos a placa e deixamos a
mesma secar ao ar durante alguns minutos. Procedeu-se a corrida da CCD em cuba com o eluente
descrito anteriormente, durante 20 minutos. Posteriormente, revelou-se a placa de slica com
radiao ultra-violeta =254 nm, analisando-se os Rf's frente ao marcador molecular (o padro de
cafena) e a anlise densitomtrica.
Tambm realizamos anlise da amostra de cafena por Cromatografia Lquida de Alta
Eficincia aclopado com detector UV (CLAE-UV), com software usado para registrar os
cromatogramas e medir as reas dos picos. Pesou-se 1g de amostra de cafena, adicinando-se 50 mL
de H2O, submetendo-se a soluo a aquecimento em banho-maria por 15 minutos. Dilui-se a
amostra balo volumtrico de 250 mL, completando-se o mesmo com H2O. Retirou-se 5 mL da
soluo resultante, que foi ento adicionada um novo balo volumtrico de 100 mL, completado
novamente com H2O.
A anlise da amostra foi realizada com 20 microlistos da soluo final diluda, realizando-se
prvia filtrao atravs de filtro de seringa. A amostra foi inserida em um frasco coletor inserido no
cromatgrafo. Utilizou-se coluna Merck C18 (dimenses 12,5 x 4 cm). Os solventes utilizados
foram metanol:gua (70:30 v/v) de pureza analtica, e foram injetados 20 microlitros de amostra e a
deteco de picos foi realizada a 272 nm. Os clculos de concentrao foram feitos partir da
equao de reta obtida, sendo esta: y= 96516x +3308. Os clculos de teor foram baseados nas reas
obtidas por um padro previamente estabelecido e por aquelas obtidas da anlise da amostra.
A preparao da curva-padro de anlise foi feita partir de soluo-me contendo 25 mg de
cafena, transferida para um balo volumtrico de 250 mL e diludo com gua, resultando em uma
soluo de concentrao terica de 100 microgramas/mL. Os pontos da curva padro foram feitos
com alquotas de 1, 2, 3, 4 e 5 mL retirados e transferidos para bales volumtricos de 100 mL,
diludos e completados com gua.

3. Resultados e Discusso
Aps realizados os diferentes mtodos de extrao realizados, os pesos dos extratos secos
foram determinados:
Tabela 2 Peso dos Extratos
Mtodos

Peso em gramas (g)

Macerao esttica

0,6 g

Macerao cintica

0,9 g

Macerao cintica diferencial

0,8 g

Nada se pode concluir atravs da simples anlise dos extratos secos, j que no se pode
afirmar que tratam-se de amostras puras de cafena. Os extratos foram reservados para posterior
anlise qualitativa de seus constituintes.
Nada se pode concluir atravs da simples anlise dos extratos secos, j que no se pode
afirmar que tratam-se de amostras puras de cafena, nem pode-se verificar quais so os
contaminantes das presentes amostras. Os extratos foram reservados para posterior anlise
qualitativa e quantitativa de seus constituintes.
Atravs da anlise densitomtrica da CCD das amostras, observamos que o cromatograma
obtido com a soluo 1, apresenta duas manchas principais de Rf's distintos: uma situada abaixo,
com rf de 0,5 aproximadamente, caracterizando a teofilina; outra situada acima, com rf de 0,70,
aproximadamente, denotando a presena da cafena. As amostras 2, 3 e 4 foram, consecutivamente,
as de extratos obtidos atravs de macerao cintica diferencial, macerao cintica e macerao
esttica. Atravs de anlise densitomtrica olho n, notamos que as manchas do extrato 2 so mais
concentradas que a do extrato 3, que por sua vez mais concentrada que as provenientes do extrato
4.
Podemos concluir que a macerao cintica diferencial apresentou uma efiicincia de
extrao aparentemente melhor que a dos demais mtodos. Poderia-se nebulizar a placa com
iodo/iodeto SR. A mancha correspondente a teofilina (rf 0,50 aproximadamente) apresenta
colorao violcea fugaz e a mancha correspondente a cafeina (rf 0,70 aproximadamente) apresenta
colorao castanho-avermelhada.
Atravs da anlise da amostra por CLAE-UV, podemos identificar a amostra como sendo
realmente de cafina, atravs da anlise do espectro obtibo por UV e comparao com o espectro
indicado na literatura. Com a anlise das reas dos picos apresentadas no cromatograma da amostra
padro (de concetrao conhecida) e das obtidas pela amostra (de concentrao desconhecida),
chegamos seguinte equao de reta: y= 96516x +3308. Sendo y=276122 (o valor de rea de pico
detectada pela tcnica de CLAE-UV), nosso x seria de 2,8266 microgramas (a concentrao da
amostra analisa, que foi de 20 microlitros da soluo final).
Portanto, a concentrao da soluo analisada seria de 141 microgramas/mL, determinando
assim uma concentrao amostral de 705 miligramas/grama de amostra (considerando-se a srie de
diluies feitas at a soluo me analisada neste roteiro).

4. Concluso
Comparando estes resultados, notamos que a macerao cintica apresentou contaminantes,
j que seu rendimento foi superior ao analisado por CLAE, e haviamos determinado por anlise
superficial (aparncia do extrato e colorao do mesmo) que o mesmo ainda apresentava ps da
matria-prima, no havendo filtrao eficiente prvia. O resultado foi coerente e prximo ao valor
obtido pela macerao cintica diferencial, confirmando a veracidade do mesmo.
Os mtodos de extrao por macerao so de baixo custo, e de fcil e efetiva realizao,
mas podem apresentar problemas e limitaes quando analisamos somente seu extrato sem maiores
anlises de identificao e quantificao efetiva, como demonstrado pelo trabalho; a presena de
outros componentes provindos do mtodo de extrao podem ser contabilizados erroneamente
como cafena.
O desenvolvimento dos mtodos cromatogrficos propiciaram um salto qualitativo na
anlise qualitativa, via CCD, e quantitativa, na CCD preparativa ou na CLAE. O acrscimo e
acoplamento de mtodos espectrofotomtrico de absoro no UV aumentou ainda mais a preciso
da anlise qualitativa na anlise de amostras de cafena, quando comparado com os dois outros
mtodos. Primeiro porque os extratos foram retratados, o que reduziu o nmero de contaminantes e
interferentes, e segundo porque a anlise da cafena no comprimento de onda especfico aumentou a
seletividade do mtodo. Entretanto, ainda h possibilidade de interferentes em menor escala, que
tambm absorvam nesse comprimento de onda.
A tcnica de cromatografia em camada delgada de alta eficincia para anlise de cafena
rpida e tem boa preciso. Tambm seria importate comparar seus resultados com aqueles de outros
mtodos usados para quantificao, bem como contra outros tipos de cromatografia para verificar a
repetibilidade e eficincia do mtodo.

5. Referncias Bibliogrficas
1. Rang H.P., Dale M.M., Ritter J.M.. Farmacologia; Guanabara Koogan; 4 Edio
1. Farmacopia Brasileira 4 edio
2. Smith, A.. Effects of caffeine on human behavior. In Food and Chemical Toxicology.
2002, 40, 1243-1255
3. The Merck Index; Thirteenh Edition; pag 275
4. Fisone G, Borgkvist A, Usiello A.. Caffeine as a psychomotor stimulant: mechanism of
action. In Cell Mol Life Sci. 61; 2004 Apr; 857-872
5. Martindale; The complete Drug Reference; Thirty-second Edition; Edited by Kathleen
Parfitt; 749-751
6. Maria, C.A.B.; Moreira, R.F.A. Cafena: Reviso sobre mtodos de anlise. Qumica
Nova, Vol. 30, pginas 99-105, 2007.
7. http://www.tuasaude.com/cafeina/, acessado no dia 01/04/10 s 16 horas e 30 minutos.