D.

ENZIMAS COMO ALVO TERAPUTICO

D.2.3. INIBIDORES DE ENZIMAS COM COFACTORES
D.2.3.1 NAD COMO CO-FACTOR:INIBIDORES DA 3HIDRXIMETILGLUTARILCoA REDUTASE

Ana Paula Francisco

QFI 2014-2015

Sumrio:
D.2.3. Inibidores de enzimas com cofatores
D.2.3.1. NAD como cofator: inibidores da 3-hidrxi-3-metilglutaril Coenzima A (HMG-CoA)
D.2.3.1.1. Aplicao teraputica
D.2.3.1.2. Caractersticas estruturais e funcionais da
HMG-CoA: sitio cataltico e catlise enzimtica
D.2.3.1.3. Inibidores reversveis: mevastatina e
lovastatina
D.2.3.1.4. Otimizao de prottipos

INIBIDORES REVERSVEIS COMO AGENTES

FARMACODINMICOS

D.2.3.1.1 Aplicao teraputica

As doenas coronrias so a principal causa de

morte nos pases industrializados
O colesterol o principal componente dos ateromas.
2/3 do colesterol circulante biossntetizado no
fgado

D.2.3.1.1 Aplicao teraputica

colesterol
O colesterol pode ser biossintetizado no fgado e
ingerido atravs da dieta. essencial para a estrutura e
funo das membranas celulares
e percursor dos
esterides.

D.2.3.1.1 A biossntese do colesterol

D.2.3.1.1 O NAD como co-factor

Dinucletido
Adenina

Fosfato
Nicotinamida
6

D.2.3.1.1 O NAD como co-factor

D.2.3.1.1 O NAD como co-factor

 D.2.3.1.2
Mecanismo
enzimtico
da
hidroximetilglutaril-CoA a cido mevalnico
Esquema
substrato

do

mecanismo

(HMGCoA),

molecular

mevaldedo

principais
do

cido

reduo

interaces
mevalnico

do

do
com

aminocidos do stio cataltico da enzima

Lys691

Asp767

Glu559

His866

K-Lys
S-Ser
L-Leu
D-Asp
E-Glu
N- Asx

Esquema do centro activo da HMGR humana com o substrato

Grupo
funcion
al

Resduo
que
realiza a
interac
o

Tipo de
interaco

aco

1-C=O

Glu559,
Lys691

Ligao de
H

Polarizao do
carbonilo

3-OH

Asp 690,
Arg 590

Ligao de
H

3-CH3

Leu

853

van der
Waals

5-C-OH

Lys

735

Ligao
inica

5-C=O

Ser684

Ligao de
H

-SH
(CoA)

His866

Ligao de
H

Regio terminal
COO- cuja carga
estabilizada por
ambos os resduos

Posio adequada
prxima do stio
para doar H ao
grupo tiol do CoA

Istvan E S et al. EMBO J. 2000;19:819-830

10

 D.2.3.1.2 Interaces do substrato com os resduos de

aminocido do stio cataltico da enzima

A interao do HMG com a enzima sobretudo polar e inica

11

 D.2.3.1.3. Inibidores reversveis: mevastatina e lovastatina

Mevastatina: metabolito isolado dos fungos Penicillium

citrinum e de P. brevicompactum (Compactina)

A Lovastatina foi isolada de Aspergillus terreus pela Merck

(Mevinolina)

Mevastatina e Mevinolina reduzem os nveis de colesterol

por inibio competitiva da HMG-CoA redutase.

O
O
Me

O
O

Me

Me
Me

Ki = 1.4 nM
Mevastatina

HO

HO

Me

Ki = 6.4 nM
Mevinolina
12

 D.2.3.1.3. Inibidores reversveis: mevastatina e lovastatina

Lovastatina complexada com HMG-CoA reductase: base

para a compreenso das relaes estrutura-actividade

Bolsa
lipoflica
Domnio
HMG

1T02
13

 D.2.3.1.3. Inibidores reversveis: mevastatina e lovastatina

A lovastatina inibe a HMG-CoA redutase com a lactona

hidrolisada: mimetiza o intermdio do substrato natural.
Domnio de ligao do HMG

HO
O

CO2H

CO2H

OH

OH

H
O

Me

HO

H
SCoA

Me

Bolsa lipoflica

14

 D.2.3.1.3. Inibidores reversveis: mevastatina e lovastatina

Mevastatina e lovastatina: A hidrlise destes pr-frmacos produz
um 3,5-hidrxi-cido que mimetiza o intermdio da sntese do
HMG-CoA.

15

 D.2.3.1.4 Optimizao dos prottipos

HO

O
Me

Me

HO

pravastatina

1 gerao
Hidrofilica
No pr-frmaco

Me

Me

R
O

HO

CO2Na
OH

HO

Me

O
Me

Me

Me

simvastatina

Di-hidromevastatina

2 gerao
Lipofilica
Pr-frmaco
Derivado semi sinttico

16

 D.2.3.1.4 Optimizao dos prottipos

Novas estatinas
A unidade de decalina pode ser substituda por
grupos bis-arilo, que podem incluir heterociclos.

Me

CO2Na

OH
F

HO

CO2Na

Me

HO

HO

Me

Me

Me
MeO

OH
Me
N

Me

N
Me

Me

Cerivastatina

N
H

Atorvastatina

17

 D.2.3.1.4 Optimizao dos prottipos

Novas estatinas

Rosuvastatina- 2004
1 derivado totalmente sinttico

reduz de forma rpida os

nveis de colesterol das LDL

1T02
18

 D.2.3.1.4 Optimizao dos prottipos

As estatinas exploram a flexibilidade da HMG-CoA redutase para
criar uma bolsa hidrofbica perto do centro activo e assim
aumentar a capacidade de interaco com a enzima

Interaces polares e
inicas com o centro activo
19

 D.2.3.1.4 Optimizao dos prottipos

Esquema das interaes da rosuvastatina com o centro activo
da enzima

Interaces polares entre o resduo HMG e os resduos localizados no loop cis,

Ser684, Asp690, Lys691 e lys692. O carboxilato forma uma ligao inica com Lys735. O
5-OH ligaes de H com Glu559 e Asp767. Parte lipofilica estabelece interaces
hidrofobicas com Leu562, Val683, Leu553, Ala856 e Leu857 . ligao adicional entre o F
e o grupo guanidina da Arg590. Para alm disso forma ainda ligaes de H extra
entre o grupo sulfona e a Ser563 e Arg568
20

 D.2.3.1.4 Optimizao dos prottipos

K-Lys
S-Ser
L-Leu
D-Asp
E-Glu
H-His
V-Val
R-Arg

21

 D.2.3.1.4 Optimizao dos prottipos

Valores de IC50 de algumas estatinas e Km do HMG CoA

22

 D.2.3.1.4 Relaes estrutura-actividade

A lactona ou o seu equivalente acclico so essenciais (cido 3,5-dihidroxivalrico ou b,d-di-hidrxi-heptanico, com substituintes na posio
7)

O grupo CO2H dever estar aninico

Os grupos OH devero estar no-substitudos
O ster butrico acomoda mais um grupo metilo
A decalina permite variaes estruturais simples e a sua substituio por

anis heterociclicos substitudos como indol (fluvastatina), piridina

(cerivastatina), pirrol (Atorvastatina) ou pirimidina (rosuvastatina),
conduz a derivados activos
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