METABOLISMO DO GRUPO HEME*

Introduo
A formao da bilirrubina depende da biossntese e degradao dos grupos heme, presentes
principalmente nas hemcias. A durao mdia de vida de uma hemcia depende da espcie
animal: caninos e humanos 120 dias; felinos 70 dias; sunos 65 dias; equinos 150 dias; bovinos
160 dias; ovinos e caprinos 100 dias. Assim, as hemcias so fagocitadas pelo sistema retculo
endotelial (fgado, bao e medula ssea) para posterior degradao da hemoglobina, liberando
os grupos heme.
As porfirinas atuam como compostos intermedirios na biossntese do heme formadas pelo
encontro de uma molcula de succinil-CoA e uma molcula de glicina em organismos animais.
Nos vegetais, ao invs da glicina, ocorre a unio de uma molcula de succinil-CoA e uma
molcula de glutamato. A insero de um tomo de ferro no interior da porfirina gera um grupo
heme. Nas plantas, a insero de um tomo de magnsio no interior de uma porfirina forma a
clorofila, pigmento verde.
Alguns erros na biossntese do heme podem ocorrer, denominados porfirias, assim como, o
acmulo dos produtos de degradao desse composto (bilirrubina) provoca hiperbilirrubinemia
e ictercia. Nestes ltimos, a mensurao da bilirrubina total e suas fraes, direta e indireta so
essenciais para o diagnstico. Os valores de referncia variam amplamente conforme as
espcies.

Biossntese do grupo heme

As porfirinas so compostos tetrapirrlicos cclicos que atuam como intermedirios

na biossntese do grupo heme. As mais importantes na natureza so uroporfirina,
coproporfirina e protoporfirina, esta ltima forma o grupo heme. As porfirinas formam
compostos metablicos importantes para o organismo, sendo a maioria delas, associadas
a ons metlicos, chamadas metaloporfirinas. Esses compostos possuem quatro anis
heterocclicos (I, II, III, IV) que esto ligados entre si por grupos meteno (-CH=)
conforme ilustrado na Figura 1. As porfirinas encontradas na natureza so compostos
em que, nas vrias cadeias laterais so substitudas por oito tomos de hidrognio

_______________________________________________________________________________
*Seminrio apresentado pela aluna LUCIELE VARASCHINI TEIXEIRA na disciplina BIOQUIMICA DO
TECIDO ANIMAL, no Programa de Ps-Graduao em Cincias Veterinrias da Universidade Federal do Rio
Grande do Sul, no primeiro semestre de 2010. Professor responsvel pela disciplina: Flix H. D. Gonzlez.

numerados por ncleo de porfina. Nas plantas, ao invs do tomo de ferro, a clorofila
contm um tomo central de magnsio, mantendo a mesma estrutura porfirnica.

Figura 1. Molcula da porfirina formada

por quatro anis pirrlicos (I, II, III, IV)
intercalados por grupos meteno.
Fonte: Harpers Illustrated Biochemistry,
cap. 32, p. 271, 2003.

A primeira reao para a sntese do grupo heme ocorre na mitocndria pela unio de
uma molcula de succinil-CoA e uma molcula de glicina atravs da reao catalisada
pela

enzima

aminolevulinato

sintetase

(ALA

sintetase).

Esta

reao

gera

aminocetoadipato, que ento descarboxilado a aminolevulinato (nas plantas, algas e na

maior parte das bactrias, o aminolevulinato formado a partir do glutamato e no da
glicina). Assim, esta etapa constitui o passo limitante para a biossntese do heme.
Logo, o aminolevulinato transportado para o citosol havendo dimerizao
catalisada pela enzima ALA desidratase (tambm chamada porfibilinognio sintetase)
para produzir porfobilinognio. Aps, ocorre a condensao de quatro molculas de
porfobilinognio para produzir o intermedirio preuroporfirinognio. A enzima que
catalisa esta condensao a porfobilinognio desaminase (PBG desaminase), tambm
chamada uroporfirinognio I sintetase. O preuroporfirinognio ter dois destinos:
ismeros I e III do uroporfirinognio. O ismero I uma molcula no metabolizvel e
o ismero III se forma pela ao conjunta da uroporfirinognio sintetase e da
2

uroporfirinognio III cosintase. O uroporfirinognio descarboxilado pela enzima

uroporfirinognio descarboxilase e no produto resultante h substituio de grupos
acetil por grupos metil, passando a ser chamado de coproporfirinognio. O
coproporfirinognio III o intermedirio mais comum na sntese do heme.
O coproporfirinognio III transportado novamente para o interior da mitocndria,
onde dois grupos propinicos so descarboxilados passando a grupos vinil por ao da
coproporfirinognio oxidase. O produto desta reao o protoporfirinognio IX, um
composto

incolor.

Logo,

este

convertido

em

protoporfirina

IX

pela

protoporfirinognio IX oxidase. A etapa final da sntese do heme envolve a insero de

um tomo de ferro no anel tetrapirrlico catalisada pela enzima ferroquelatase. A figura
2 ilustra a biossntese do grupo heme.

Figura 2. Biossntese do heme apresentando as reaes e respectivas enzimas. 1 Porfobilinognio

sintetase; 2 Uroporfirinognio sintetase; 3 Uroporfirinognio III cosintase; 4 Uroporfirinognio
descarboxilase; 5 Coproporfirinognio oxidase; 6 Protoporfirinognio oxidase; 7 Ferroquelatase.
Fonte: Lehninger Principles of Biochemistry, cap. 22, p. 855, 2004.

O grupo heme produzido em todos os tecidos animais, principalmente na medula

ssea e fgado. A existncia deste composto importante para o transporte de oxignio,
pois est presente principalmente na hemoglobina (80%), mioglobina e enzimas
(catalase, citocromo P450 e peroxidases). A citocromo P450 participa no metabolismo
heptico de diversas substncias, tornando-as de mais fcil eliminao. Existem
alteraes genticas na biossntese do heme que podem levar ao acmulo de
intermedirios da via, causando uma srie de doenas conhecidas como porfirias. Esses
3

defeitos genticos causam, por exemplo, aumento na atividade da ALA sintetase ou uma
diminuio na atividade da uroporfirinognio I sintetase, originando a porfiria aguda
intermitente (mais comum), que diagnosticada pelo aumento da excreo do
porfobilinognio na urina. Nesta condio no h mudana de colorao na urina, pois
esse composto incolor. Outro exemplo a protoporfiria eritropoitica, em que a
uroporfirinognio III sintetase est em dficit na medula ssea. Como resultado h
elevao de uroporfirinognio I e de seus produtos de oxidao (colorao
avermelhada), que so encontrados na urina e depositados em uma grande variedade de
tecidos, incluindo dentes e ossos.

Catabolismo do grupo heme

A maior parte dos grupos heme provm das hemcias senescentes, que so
capturadas pelo sistema retculo endotelial e sofrem degradao enzimtica. No
organismo humano cerca de 1 a 2 milhes de hemcias so destrudas por hora, gerando
6 gramas de hemoglobina para degradao e posterior formao de 300 miligramas de
bilirrubina por dia.
A hemoglobina degradada em globina e grupos heme, onde a primeira quebrada e
transformada em aminocidos para reutilizao no organismo e, o segundo fagocitado
principalmente no fgado, bao e medula ssea, at a formao de bilirrubina. O tomo
de ferro carreado pela ferritina na circulao sangunea e reutilizado para formao de
outros grupos heme.
A degradao do heme ocorre com a abertura do anel de tetrapirrol da porfirina pela
ao da enzima heme oxigenase, onde h quebra da ponte metenil entre os pirris I e II.
Nesta reao ocorrem duas oxigenaes e o NADPH, com seu poder redutor, libera
Fe2+, CO e biliverdina, um pigmento verde. Tem sido estimado que mais de 86% do
monxido de carbono endgeno derivado da quebra enzimtica do heme, e a
quantidade de monxido de carbono respiratrio tem sido usada como um mensurador
indireto da produo de bilirrubina.
Logo, atravs da enzima biliverdina redutase ocorre a formao de bilirrubina. Essa
enzima adiciona um hidrognio fornecido pelo NADPH reduzindo a dupla ligao entre
os pirris III e IV. O pigmento amarelo formado ser carreado at o fgado pela
albumina, onde ser posteriormente conjugado e excretado. Em muitos mamferos a
4

atividade da biliverdina redutase heptica suficiente para esta converso e

normalmente no h limite para a formao da bilirrubina. No entanto, a quantidade
desta enzima muito baixa em aves, consequentemente, a biliverdina encontrada em
maior quantidade na bile. A biliverdina tambm se encontra elevada na bile de coelhos
(70%). A figura 3 ilustra a degradao do heme e formao da bilirrubina.

Figura 3. Reaes de catabolismo do grupo heme

e

formao

da

bilirrubina.

Fonte:

http://library.med.utah.edu/NetBiochem/images/
hemeorxn.gif

Conjugao da bilirrubina

A bilirrubina uma molcula apolar, lipoflica e insolvel no plasma sanguneo,

tambm chamada bilirrubina livre. Consiste em um tetrapirrol linear formado por dois
dipirrometenos assimtricos conectados por uma ponte de metileno (Figura 4). Cada
grupo dipirrlico possui uma cadeia lateral carboxietil, que atua na polaridade,
solubilidade e ionizao deste pigmento; no entanto, como possui uma forma totalmente
protonada, as ligaes de hidrognio estabilizam a molcula em uma conformao
rgida que se assemelha a um livro dobrado, onde cada dipirrometeno constitui uma
folha do livro. Logo aps sua formao se liga a albumina e carreada at o fgado,
onde ocorrer sua conjugao com o cido glicurnico. A bilirrubina conjugada uma
molcula polar, solvel nos lquidos corporais e hidroflica (Figura 5).

Figura 4. Frmula estrutural da bilirrubina livre.

Fonte: http://pt.wikipedia.org/wiki/Bilirrubina

Figura 5. Frmula estrutural da bilirrubina conjugada

ou diglicurondeo. Fonte:
http://www.mundodeodio.es/wpcontent/uploads/2010/04/bilirubindiglucuronide.jpg

A bilirrubina entra pela face sinusoidal dos hepatcitos por difuso facilitada,
ligando-se ligandina, uma grande protena citoslica que tem tanto funo de
6

transporte quanto de detoxificao, aumentando a sua solubilidade no citosol. Uma

molcula de uridina-difosfato-glicose (UDP-glicose) transformada em UDPglicuronato atravs da enzima UDP-glicose desidrogenase. O UDP-glicuronato se liga a
bilirrubina, formando o composto bilirrubina diglicurondeo, reao catalisada pela
bilirrubina-UDP-glicuroniltransferase. Por ltimo, a bilirrubina conjugada sai dos
hepatcitos para os canalculos biliares por transporte ativo primrio, entra no ducto
biliar e armazenada na vescula biliar (bile), para posterior excreo no duodeno. A
bilirrubina conjugada o principal componente da bile (Figura 6).
Embora o fgado seja o principal stio de conjugao e excreo da bilirrubina, vias
alternativas tm sido demonstradas. Nos animais normais estes mecanismos alternativos
so de menor importncia mas, em animais com doena heptica tornam-se importantes.
Os rins e o intestino so, experimentalmente, stios capazes de conjugar a bilirrubina.

Figura
6.
Mecanismo
de
conjugao
http://www.hepcentro.com.br/images/Bilirrubin.gif

da

bilirrubina.

Fonte:

Excreo da bilirrubina

Armazenada na vescula biliar, a bilirrubina conjugada ento excretada no duodeno

(bile), mas sua melhor absoro ocorre no intestino grosso, onde reduzida a uma srie
de derivados incolores, chamados estercobilinognios. A reao catalisada por
desidrogenases bacterianas anaerobicamente no clon. O cido glicurnico removido
7

por ao de enzimas bacterianas especficas (glicuronidases), enquanto o pigmento

reduzido a urobilinognio. Em animais que no possuem microrganismos intestinais
para esta etapa, a bilirrubina passa inalterada e excretada nas fezes, no ocorrendo a
formao de urobilinognio. A maioria do urobilinognio formada no intestino
excretada nas fezes (estercobilina). Uma pequena parte reabsorvida para a circulao
portal e reexcretada na bile. Uma pequena frao (1 a 5%) do urobilinognio volta para
a circulao geral (via ciclo entero-heptico) e excretado pelo rim (urobilina). No co
esta frao excretada pelo rim passa por filtrao e secreo tubular, contribuindo para a
acidez da urina (Figura 7).

Figura 7. Esquema ilustrando a excreo da bilirrubina e do urobilinognio.

Hiperbilirrubinemia

Sob condies normais a taxa de produo sistmica de bilirrubina equivalente a

taxa de

captao

heptica,

conjugao

e excreo biliar.

No

entanto,

hiperbilirrubinemia ocorre quando a taxa de produo maior do que a de excreo. A

ictercia o aparecimento do pigmento amarelo nos tecidos, resultante da
hiperbilirrubinemia. Esta anormalidade pode ter vrias causas, dividindo-se basicamente
em pr-heptica, heptica e ps-heptica (Tabela 1).

Tabela 1. Tipos de ictercias relacionadas a algumas enfermidades

Tipo de ictercia

Enfermidades associadas

Pr-heptica

Anemia hemoltica, hemlise intravascular, ictercia neonatal (humanos)

Heptica

Deficincia de glicuronil transferase, hepatite, tumores hepticos

Ps-heptica

Obstruo de ductos biliares, clculos biliares, tumores biliares

Na maioria das espcies domsticas a hiperbilirrubinemia ocorre quando o valor

plasmtico mximo ultrapassado, em mdia 2,0 mg/dL. Primeiramente, o pigmento
amarelo observado na urina para depois atingir o plasma. Em uma maior concentrao
atinge os tecidos, principalmente mucosas e escleras (Figura 8).
A bilirrubina encontrada na urina est essencialmente na forma conjugada por ser
hidroflica, entretanto, quando a bilirrubina livre (lipoflica) est elevada, provoca
toxicidade em vrios rgos, incluindo o sistema nervoso central, conhecido por
kernicterus. Esta enfermidade rara, com maior ocorrncia em neonatos humanos.
Contudo, a bilirrubina na sua concentrao ideal tida como um timo antioxidante nos
tecidos.

Figura 8. Ictercia em equino (esclera), felino e canino (mucosa oral).

Fontes:
http://cal.vet.upenn.edu/projects/poison/plants/slides/1077lg.jpg,
http://www.marvistavet.com/assets/images/icterus_cat.gif,
http://davidbessler.files.wordpress.com/2008/07/221338346.jpg

Mensurao da bilirrubina e valores de referncia para espcies

domsticas

A mensurao da bilirrubina plasmtica fornece um ndice quantitativo da severidade da

ictercia. Quando acompanhada de outros testes, pode ser definida a causa da ictercia. Para a
9

determinao da bilirrubina a amostra preferencial o soro isento de hemlise, lipemia e

protegido da luz; entretanto, pode-se tambm utilizar o plasma com heparina tomando-se os
mesmos cuidados citados anteriormente.
A bilirrubina foi detectada pela primeira vez em 1883 por Erlich, em reao com o cido
sulfanlico diazotado, em amostras de urina. Van den Bergh e Snapper demonstraram a presena
de bilirrubina no soro sangneo pelo emprego do diazo - reagente de Erlich e lcool como
aceleradores. Os mtodos existentes determinam a frao que produz cor com a reao de Van
den Bergh em soluo aquosa (bilirrubina direta), enquanto a frao que desenvolve cor com o
lcool chamada bilirrubina indireta. A reao direta ocorre com a bilirrubina conjugada
(diglicurondeo) solvel em gua. Por outro lado, a reao indireta se processa com a bilirrubina
no conjugada, insolvel em gua, mas que se dissolve em lcool para acoplar o reagente diazo.
A bilirrubina total compreende a soma das fraes conjugada e no-conjugada. Atualmente, nos
laboratrios clnicos ocorre uma srie de ajustes tcnicos para que os resultados sejam mais
precisos, diminuindo a ao de interferentes.
Nas espcies domsticas os valores de referncia so muito variados, dependentes da
anatomia e fisiologia corporal. A tabela 2 apresenta alguns valores de referncia das
bilirrubinas.

Tabela 2. Valores de referncia (mg/dL) das bilirrubinas total, indireta e direta nas diferentes
espcies domsticas (Fonte: Kaneko, 2008)
Tipo de

Canino

Felino

Bovino

Equino

Ovino

Caprino

Suno

Total

0,1 0,5

0,15 0,5

0,01 0,5

1,0 2,0

0,1 0,5

0 0,1

0 1,0

Indireta

0,01 0,49

0,03

0,2 2,0

0 0,12

0 0,1

0 0,3

Direta

0,06 0,12

0,04 0,44

0 0,4

0 0,27

bilirrubina

0 0,3

Concluso

O entendimento dos processos metablicos torna-se importante, principalmente na medicina

veterinria, devido s diferentes espcies animais. Embora o metabolismo da bilirrubina seja
semelhante nos mamferos, sempre h uma particularidade entre as espcies. Isto visto
comparando-se os valores de referncia citados neste trabalho.
A mensurao das bilirrubinas, principalmente indireta e direta direciona o clnico para o
provvel diagnstico, visto que o aumento da primeira ou da segunda, ou de ambas est presente
em diversas enfermidades.
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Referncias bibliogrficas
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