Eixo 05: Desenvolvimento Econmico e Sustentabilidade

ESTUDO DOS EFEITOS DO HORMNIO DO CRESCIMENTO SOBRE O

SISTEMA IMUNE: UMA ABORDAGEM NEUROIMUNOENDCRINA.
Avaliao do efeito combinado do hormnio do crescimento /fator-1 de
crescimento semelhante insulina na capacidade fagoctica de
macrfagos peritoneais de camundongos em substrato de fibronectina.
Clarice AGUDO MENEZES Jeniffer ESTEVO Salete SMANIOTTO.
Universidade Federal de Alagoas (UFAL)
Orientador (a): Salete Smaniotto
O objetivo do estudo foi avaliar o efeito combinado do hormnio do
crescimento/fator-1 de crescimento semelhante insulina na capacidade
fagoctica de macrfagos peritoneais de camundongo em substrato de
fibronectina. O estudo foi realizado in vitro com macrfagos peritoneais de
camundongos Swiss. Os macrfagos foram tratados com GH e/ou IGF-1 por
24h. Para a anlise morfolgica, os macrfagos foram examinados ao
microscpio de luz aps o tratamento por 24 horas. Foram observadas
alteraes morfolgicas nos macrfagos em todos os grupos de tratamento. O
resultado apresentado refora os dados j constantes na literatura de que o GH
e o IGF-1 podem agir na resposta imune atuando sobre os macrfagos.
Palavras-chave: Hormnio do crescimento Macrfagos - Fibronectina.
INTRODUO
O sistema imunolgico desempenha importante funo para o
organismo na defesa contra patgenos, combatendo a entrada de
microrganismos e erradicando as infeces. Para isso, o sistema imune conta
com rgos, clulas especializadas e molculas solveis que reconhecem os
elementos estranhos ao organismo, para combater as infeces (LIMA &
SAMPAIO, 2007).
Os macrfagos fazem parte destas clulas especializadas que compem
o sistema imunolgico. Na presena de antgenos eles so ativados podendo
assumir diferentes morfologias (Gordon, 2007). Alm disso, tambm produzem
e secretam molculas da matriz extracelular como fibronectina e laminina
(Johansson et al., 1979; Pedraza et al., 2000). Muitas substncias podem
interferir sobre as funes dos macrfagos, dentre elas fatores solveis como
citocinas e hormnios.
O hormnio do crescimento (GH) um polipeptdio constitudo de 191
aminocidos, o que lhe confere peso molecular de 22 kDa, sintetizado pelas
clulas somatotrpicas da adeno hipfise, exercendo suas funes atravs do
receptor especfico GHR. Alm de suas funes clssicas no metabolismo
celular e no crescimento do corpo, um potente imunomodulador que age em
rgos e clulas do sistema imunolgico (Savino & Dardenne, 1995). Ainda, o
GH responsvel pela promoo da sntese do fator-1 de crescimento
semelhante insulina (IGF-1), produzido principalmente pelo fgado, com
importante funo na proliferao, crescimento e diferenciao celular, tem a
maioria dos seus efeitos mediados atravs do receptor IGF-1R, presente em
uma grande variedade de tipos celulares (Denley et al., 2005).

Com base na importncia dos macrfagos para o sistema imunolgico e

no potencial imunomodulador dos hormnios, nosso estudo busca
compreender melhor o efeito do GH e/ou IGF-1 na biologia dos macrfagos
peritoneais.
MATERIAL E METODOLOGIA
Animais: Foram utilizados camundongos machos da linhagem Swiss de 6-8
semanas provenientes do Biotrio Central da Universidade Federal de Alagoas
para obteno dos linfcitos. Todos os procedimentos foram submetidos e
aprovados pelo Comit de tica da UFAL, sob o nmero de processo:
028370/2010-07.
Tratamento como GH/IGF-1: Os macrfagos foram tratados com GH e/ou
IGF-1 na concentrao de e 100 ng/mL, em meio RPMI contendo 2% de SBF e
mantidos em cultura por 24 horas. Ensaios na ausncia de GH e IGF-1 foram
utilizados como controles.
Ensaio de anlise morfolgica: Os macrfagos peritoneais foram cultivados
em lminas tipo labtek, revestidas com PBS/BSA 0,1 % ou com fibronectina (10
g/ml) num volume total de 1x10 5 clulas em 200 L de meio RPMI 1640 10%
SBF por poo. As culturas foram colocadas em estufa de CO 2 por 18 horas.
Aps este tempo, as clulas em cultivo foram tratadas com GH e/ou IGF-1,
conforme descrito anteriormente. Passadas 24 horas do tratamento, os poos
foram lavados, fixados com metanol por 10 minutos e corados com
hematoxilina-eosina. Posteriormente, as lminas foram montadas e
examinadas ao microscpio de luz acoplado a um sistema de aquisio de
imagens.
RESULTADOS E DISCUSSO
Efeitos do GH e/ou IGF-1 sobre a morfologia de macrfagos peritoneais
CTR

GH

Figura 3. Aspectos morfolgicos de macrfagos peritoneais. As fotomicrografias

representam a morfologia das clulas quando foram tratadas com GH e/ou IGF-1,
cultivadas em substrato de BSA 0,1% durante 24 horas. As clulas no tratadas foram
utilizadas como controle. Primeira linha: aumento de 400x, segunda linha: aumento de
1000x

IGF-1

CTR+FN

GH+FN

IGF-

Figura 4. Aspectos morfolgicos de macrfagos peritoneais. As fotomicrografias

representam a morfologia das clulas quando foram tratadas GH e/ou IGF-1, cultivadas em
substrato de fibronectina durante 24 horas. As clulas no tratadas foram utilizadas como
controle. Primeira linha: aumento de 400x, segunda linha: aumento de 1000x.

A partir da observao microscpica dos aspectos morfolgicos de macrfagos

foi possvel observar alteraes na morfologia das clulas quando tratadas com
GH e/ou IGF-1 na concentrao de 100 ng/mL, utilizando como substrato BSA
ou fibronectina, quando comparadas aos controles.
CONCLUSO
Os resultados apresentados neste estudo colaboram para o conhecimento
cientfico sobre os efeitos do hormnio do crescimento (GH) e do fator-1 de
crescimento semelhante a insula (IGF-1) em macrfagos peritoneais.
O tratamento in vitro alterou a morfologia de macrfagos em todos os grupos
de tratamentos testados;
REFERNCIAS
DENLEY A, COSGROVE LJ, BOOKER GW, WALLACE JC, FORBES BE.
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GORDON S: The macrophage: Past, present and future. Eur J Immunol
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JOHANSSON S, RUBIN K, HK M, AHLGREN T, SELJELID R: In vitro
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LIMA F A, SAMPAIO M C. O papel do timo no desenvolvimento do sistema
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SAVINO W, DARDENNE M: Immune-neuroendocrine interactions. Immunol
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