Respostas imunes especficas so requeridas

para cada tipo de patgeno

IMUNODIAGNSTICO:
Diagnstico laboratorial por meio de
tcnicas imunolgicas.

Quais as caractersticas de um bom teste

imunolgico?
Os testes imunolgicos desenvolvidos devem ter boa
sensibilidade e especificidade
Sensibilidade = capacidade de um teste ser positivo
(detectar os indivduos doentes) dentre aqueles efetivamente
doentes.
Especificidade = capacidade de um teste ser negativo
(detectar os indivduos sadios) dentre aqueles efetivamente
sadios.

Quais as caractersticas de um bom teste

imunolgico?
Os testes devem indicar com preciso e exatido, a
presena ou ausncia de fatores relacionados doena
investigada.
O teste deve ser rpido, conveniente e/ou com custo
no elevado.

Por que realizar um diagnstico imunolgico ?

O padro-ouro de diagnstico de doena infecciosa pode ser

demorado e apresentar baixa sensibilidade.

Cultura
microbiolgica:
dois meses para
obter o resultado

TUBERCULOSE

Baciloscopia: baixa
sensibilidade; no
especifico para M.
tuberculosis

Quais os fatores que interferem na

reao antgeno anticorpo ?

Metodologias que utilizam:

1) Reagentes no marcados ou conjugados
Testes de aglutinao
(qualitativa e quantitativa)
Testes de precipitao
2)

Reagentes marcados ou conjugados

ELISA
Imunofluorescncia direta e indireta
Western Blot

Reaes de Aglutinao
Anticorpo + Antgeno particulado
aglutininas
Agregao visvel de partculas

Eritrcitos
Bactrias
Fungos
ltex

Anticorpo
Efeito pr-zona

Antigeno

Fonte: Roit, Immunology , 6 edio

Como fazer o diagnstico da Sfilis ?

Agente etiolgico: Treponema palidum

Reao de Precipitao
Interao anticorpo e antgeno solvel forma uma rede que
pode desenvolver um precipitado visvel.

Anticorpos bivalentes
+
Antgenos multivalentes

PRECIPITADO

Antgeno

Reao de precipitao em solues

Reao quantitativa:
Quantidade cte Ac
Quantidade cresc. Ag
Qtidade precipitina

Imunoensaio Enzimtico
ELISA
(Enzyme Linked Immuno Sorbent Assay)

Preciso e
exatido

Permite
automao

Mtodo Analtico
(Antgeno/Anticorpo)

Elisa Direto
(Ag)
Ac

Soro
Ag

Enzima

Ac

Soro

Elisa Indireto
(Ac)
Ag

Ac

Enzima

Ac

O ensaio imunoenzimtico ELISA

Sensibilizao
Bloqueio
Soro (anticorpos primrios)
Steptavidina-peroxidase
Substrato + cromgeno
(ex.: H2O2 + ABTS)

Como feito o diagnstico

imunolgico da dengue ?

Resposta:
Pelo ensaio imunoenzimtico ELISA

Sensibilizao
Com anticorpos
Anti-IgM
humana

Leandro Hydec

Soro
diludo do
paciente

Antgenos
1,2,3

IgG de
camundongo
conjugado
peroxidase

Substrato (H2O2) e
Cromgeno

REAO DE IMUNOFLUORESCNCIA DIRETA

Anticorpo conjugado a FITC

Amostras de lavado nasal e aspirados, lavado ou swab de garganta,

swab ou aspirado nasofarngeo, congelados ou frescos.

Western Blotting
Immunoblotting

10 a 15 g/poo

As protenas migram de acordo com o tamanho e a

forma;

A protena desnaturada, as subunidades se

separam em um campo eltrico;
As molculas menores migram mais rapidamente
atravs da matriz porosa do gel, at atingirem seu
ponto isoeltrico (pI).

Utilizado para determinar a quantidade relativa e o peso

molecular de uma protena dentro de uma mistura de
protenas ou outras molculas;

Ocorre inicialmente
uma separao
analtica,geralmente
SDS-PAGE, de modo
que a posio final
das protenas no gel
sejam em funo do
tamanho molecular.

Papel de filtro

Gel de Poliacrilamida

Membrana

Papel de filtro