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MELHORAMENTO GENTICO (HTTP://WWW.BEEFPOINT.COM.BR/RADARES-TECNICOS/MELHORAMENTO-GENETICO/)

29/10/03 - por Equipe BeefPoint

As biotecnologias aplicadas
Reproduo e Melhoramento Animal:
Inseminao Articial, Transferncia
de embries, Fertilizao in vitro e
Clonagem Parte 2
Por Erica Perez Marson, Thiago Previero e Jos Bento Sterman Ferraz1

Consideraes sobre algumas biotecnologias reprodutivas: suas vantagens,


desvantagens e contribuies ao sistema produtivo

Primeiramente interessante destacar o porque da introduo de uma biotecnologia


num sistema produtivo. O que se tem notado, ao longo dos anos, que as
peculiaridades da agricultura e da pecuria nos pases de terceiro mundo ou em
desenvolvimento, induziram necessidade de se desenvolver, introduzir e de se
adaptar a novas tecnologias para que estes pases venham a alcanar aumentos da
produo e da produtividade, obviamente sempre a custos minimizados. O cenrio
mundial evoluiu para um patamar em que apenas os criadores com alta produtividade
permanecero de forma competitiva no mercado, pois os que no atingirem nveis
adequados de qualidade e produtividade sero automaticamente marginalizados do
processo produtivo. Entretanto importante destacar que a utilizao de novas
biotecnologias faz-se na medida em que o homem que as emprega tambm evolui
culturalmente.

Inseminao Articial (IA)

Na IA, diferentemente do servio natural, poucos pais sero requeridos para produzir o
mesmo nmero total de produtos. Portanto, a IA pode ser usada para aumentar a
intensidade de seleo dos machos e, conseqentemente, aumentar o mrito gentico

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mdio dos seus produtos. Em outras palavras, pode-se armar que a IA quando
utilizada para massicar a utilizao de reprodutores geneticamente superiores ,
certamente, a biotecnologia de maior impacto para os programas de melhoramento
animal. Vale ressaltar que o incremento gentico que esta biotecnologia pode gerar
nestes programas est sustentado pela utilizao de reprodutores de gentica superior.

Com a IA aliada aos avanos no melhoramento gentico para a seleo de touros de


acordo com o seu mrito gentico (DEP ou diferena esperada na prognie), os
produtores tem livre acesso aquisio de smen de touros de excelente qualidade
dentro de uma escala bem abrangente de valores, ou seja, que atende
democraticamente a todos os sistemas de produo. Obviamente que a desinformao
a respeito de caractersticas importantes de um touro como as produtivas (pesos
ajustados e medidas corporais) ou as genticas (DEPs) podem conduzir os produtores
a escolherem um animal de acordo com o seu parentesco com outros touros famosos
ou se o mesmo foi premiado em exposies. Muitas vezes, estas informaes
irrelevantes geram impacto porque correspondem aos touros com smen de preo
mais elevado no mercado, o que confunde os consumidores desavisados, cenrio que
vem sendo progressivamente mudado, felizmente.

Ao contrrio dos rebanhos de corte, bovinos de leite j usufruem a IA h dcadas. A


situao aqui um pouco diferente visto que as caractersticas economicamente
importantes so expressas somente nas fmeas. Alm disso, nos EUA, o rebanho total
de bovinos de leite submetido a uma nica avaliao gentica gerando um guia de
referncia de machos nacional, como se fosse um sumrio nico, o que permite aos
produtores comparar o mrito gentico de todas as vacas e touros em seu pas. Mais
recentemente tem-se proposto no Brasil, a adoo de um sumrio nico para animais
da raa Nelore.

Em pases como o Canad, Estados Unidos, Austrlia e Brasil, os rebanhos de gado de


corte so constitudos por um nmero muito maior de animais, o que ocorre ao
contrrio em pases europeus. Isso diculta a identicao de estros e pode tornar o
uso da IA menos indicado pela ecincia e, portanto, maior custo. Alm disso, como as
caractersticas relacionadas com a produo de carne podem ser medidas em ambos os
sexos, o teste de prognie oferece menos vantagem que no caso de gado de leite. A
combinao destes fatores faz com que o uso da IA em gado de corte, na maioria dos
pases desenvolvidos, seja menor do que 10%.

A maior limitao da aplicao da IA continua sendo, sem dvida, a baixa ecincia na


identicao de estros.

Transferncia de embries (TE)

O principal benefcio da TE produzir mais bezerros de uma mesma vaca, o que no


seria possvel por meio da reproduo normal. Uma fmea chega a ter, muito
precocemente, de 50 a 75 mil ocitos em seus ovrios, chegando a produzir, em mdia,

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de quatro a cinco bezerros em toda a sua vida, reproduzindo-se naturalmente. Com a


TE ela pode ter de 25 a 30 bezerros e com as novas tecnologias como a FIV, pode chegar
a 100 ou mais bezerros. Aqui que est o impacto desta biotecnologia.

Os benefcios para aumentar a ecincia reprodutiva de vacas selecionadas so:


a- Vacas geneticamente superiores podem contribuir mais para os programas de
melhoramento. Esta contribuio pode ser maximizada caso seus lhos sejam
selecionados para os programas de teste de touros e posterior uso na IA;
b- Aumento da taxa de seleo materna, que combinada com a rpida mudana
gentica, pode ser usada para estabelecer programas especiais de melhoramento
(MOET), que ser visto a seguir, podendo at dobrar o ganho gentico em relao aos
programas convencionais.

Considera-se ser um dos entraves na adoo de programas de TE a necessidade de as


vacas elites, utilizadas como doadoras, serem retiradas do sistema de produo. Outro
fator limitante na sua aplicao a grande variao no nmero de ovulaes e de
embries viveis obtidos em cada superovulao.

Enquanto a IA utilizada em quase que 70% das fmeas de gado de leite em muitos
pases desenvolvidos, a TE tem alcanado menos de 1% de utilizao. A razo bsica
que os custos so altos e os benefcios pequenos, dentre os quais os genticos so
provenientes da seleo de mes e isto sempre menos preciso do que a seleo dos
machos, visto que estes podem ter um grande nmero de prognies avaliadas. Assim, a
intensidade de seleo de fmeas acaba sendo menor do que a realizada nos machos.

Ovulao mltipla e transferncia de embries (MOET) como ferramenta para o


melhoramento

Fazendo uma comparao com a IA, pode-se considerar que a MOET est para fmeas
assim como a IA est para os machos, pois permite que menos fmeas (as de gentica
superior) sejam usadas para produzir a gerao seguinte. Assim a tcnica aumenta a
intensidade de seleo de fmeas e diminui o intervalo de geraes, pois permite que
uma fmea produza os lhos necessrios ainda jovens, conseqentemente,
aumentando o ganho gentico e melhorando a taxa de melhoramento gentico do
rebanho. A MOET representa, em outras palavras, o enfoque do impacto dado
transferncia de embries em programas de melhoramento animal direcionado para as
situaes comerciais atuais.

A estratgia envolve animais de gentica superior e a seleo em idade precoce, com


base nas informaes de famlia, onde so formadas amplas famlias de irmos
completos, podendo-se avaliar o mrito gentico dos tourinhos pela produo de suas
irms completas (alm das meio-irms maternas e paternas, me, tias, etc) em lugar
das lhas (teste de prognie convencional), sendo que os melhores machos sero
utilizados como pais da nova gerao. A substituio do teste de prognie pelo de irms
pode levar a considervel ganho de tempo, com seleo dos touros ainda jovens, com
reduo acentuada no intervalo de geraes e, portanto, maior progresso gentico.
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Porm isso no signica a erradicao do teste de prognie, pelo contrrio, um


rebanho MOET pode ser utilizado como fonte de tourinhos jovens para programas
convencionais de teste de prognie.

Estudos armam que a MOET pode produzir aumentos substanciais na taxa de


melhoramento gentico de qualquer espcie em que o ndice de reproduo natural
pequeno ou ainda em que a ocorrncia da transferncia de embries seja elevada,
podendo duplicar o melhoramento gentico observado. Em bovinos de corte o
aumento esperado nas taxas de melhoramento em ncleos MOET oscila entre 30 e
65%; em bovinos de leite, este aumento ocorre de 10 a 20% mais rpido do que o
proporcionado pelo teste de prognie. Entretanto, tambm foi registrado que a taxa de
endogamia pode tambm ser substancialmente aumentada, alm de que a tecnologia
requerida relativamente sosticada.

As limitaes encontradas nesta tcnica so a baixa produo mdia e alta variabilidade


do nmero de embries produzidos, o que diminui o ganho gentico esperado.

Produo embrionria in vitro

No sentido amplo, o termo fecundao in vitro (FIV) corresponde combinao dos


processos de coleta de ocitos, subseqente maturao in vitro, capacitao
espermtica e fertilizao in vitro e, nalmente, cultivo dos embries produzidos in vitro.

Em geral, menos de 20% dos ocitos fertilizados transformam-se em embries, viveis


para a transferncia, sendo tambm maior a perda durante a gestao. O resultado
nal que embries produzidos pela tecnologia da FIV ainda apresentam menor
fertilidade do que aqueles embries convencionais, em que se obtm, normalmente,
taxas de gestao de 60%. A viabilidade de embries provenientes de FIV, transferidos
no-cirurgicamente, tem gerado resultados animadores, como taxas de gestao entre
50 a 55%, apenas 10% menor do que com embries produzidos in vivo.

Entretanto, em gestaes com embries oriundos de FIV tm se observado aumento da


taxa de mortalidade fetal at um mximo de 20%. Bezerros fracos e grandes, com
aumento da incidncia de partos distcicos, tm sido descritos, mas necessrio um
nmero maior de dados e registros mais precisos sobre estes eventos.

Embora a produo de embries pela FIV deva contribuir decisivamente para uma
maior ecincia reprodutiva, como instrumento de multiplicao rpida do material
gentico melhorado existente, encurtando o intervalo de geraes e intensicando a
seleo, alm da maior ecincia no controle da taxa de endogamia, o que oferece
vantagens substanciais na taxa de melhoramento gentico, sua importncia vai alm do
interesse comercial, pois, ao permitir a produo em larga escala de ocitos maturados
e fecundados, servir de ferramenta indispensvel para o desenvolvimento de outras
biotecnologias reprodutivas relacionadas micro-manipulao embrionria e a
engenharia gentica, tais como a clonagem, produo de stem cells ou clulas
totipotentes, preservao de ocitos e embries, transgnese e marcadores genticos.
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Um bom ajustamento da tcnica de FIV poder melhorar a sua ecincia, porm ser
necessrio conhecer com maior profundidade os processos moleculares e
imunolgicos, envolvendo suas diversas etapas. Aumentar a intensidade de seleo de
fmeas atravs da FIV s ser vivel com a reduo do custo de produo de uma
gestao, proveniente de embries de vacas altamente selecionadas. Para isto, vrias
barreiras necessitam ainda que ser vencidas. A produo em massa de embries via
FIV, por exemplo, requer grande disponibilidade de ocitos, e isto, atualmente, s
possvel atravs de vacas provenientes de matadouro, que na maioria das vezes so de
baixo valor gentico.

Puno folicular in vivo (ovum pick-up)

Esta tcnica permite uma explorao eciente do pool de gametas de fmeas jovens,
aumentando a vida reprodutiva destes animais e diminuindo o intervalo de geraes.
Alm da utilizao de fmeas imaturas esta tcnica permite ainda explorao de fmeas
clinicamente infrteis, daquelas que no respondem aos tratamentos de
superovulao, fmeas idosas e ainda fmeas prenhes at o quinto ms de gestao.

Pr-seleo do sexo do produto: sexagem do smen

Os esforos mais recentes para sexagem dos espermatozides baseiam-se na


separao daqueles que tm o cromossomo X ou Y, pelo mtodo de citometria de uxo.
A diculdade deste est no fato de que o nmero de espermatozides a ser separado
relativamente baixo, alm disso, a separao apenas 90% correta e o espermatozide
danicado durante o processo, o que reduz a taxa mdia de fertilidade. A velocidade
do processo tambm um fator limitante, pois muito lenta inviabilizando seu uso na
pr-sexagem em massa do smen para uso normal na IA.

A sexagem do smen promove aumento da intensidade de seleo para um nico sexo,


conseqentemente, reduzindo este ndice no sexo oposto. Em situaes em que
machos e fmeas podem ser selecionados com base no teste de desempenho em
idades relativamente precoces, o efeito geral da sexagem de smen na taxa de
melhoramento gentico desprezvel. Entretanto em um esquema de teste de prognie
convencional feito em larga escala em rebanhos de leite, o uso do smen sexado pode
produzir um aumento de 25% na taxa de melhoramento gentico.

Um exemplo seria produzir um maior nmero de fmeas candidatas reposio por


vacas geneticamente superiores inseminadas com smen enriquecido com
espermatozides carreadores do cromossomo X, enquanto que as demais poderiam
ser destinadas produo de machos para o abate. Outra vantagem seria a reduo
dos custos e o possvel aumento da acurcia dos testes de prognie, pois tourinhos em
teste podero produzir maior nmero de lhas. Adicionalmente a sexagem de smen
pode exercer um importante papel na produo embrionria in vitro, pois permite a
produo de embries de sexo conhecido.

Sexagem de embries
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A identicao do sexo em embries nos estdios de pr-implantao quando em


programas de TE pode ser uma estratgia de eliminao de riscos de freemartinismo na
espcie bovina, pela transferncia de embries do mesmo sexo. Tem recebido pouca
ateno nos ltimos anos principalmente porque a princpio, no parece oferecer
vantagens substanciais em termos de taxa de melhoramento gentico.

Com relao tcnica em si, aliada s tecnologias atualmente disponveis, possvel


extrair uma clula de um embrio jovem e com o uso de sondas de DNA vericar se ele
do sexo masculino ou feminino. Todavia, esta metodologia no ainda amplamente
utilizada e por se relativamente cara, alm de se tratar de um mtodo invasivo, pois
promove rompimento da zona pelcida o que por precauo sanitria no pode ser
comercializada internacionalmente, aumenta o risco de reduo na taxa de fertilidade.

Tm sido pesquisados tambm alguns mtodos de ao no invasiva para a sexagem


de embries, evitando assim efeitos deletrios sobre os mesmos, e que permita
tambm sua criopreservao ou sucesso na transferncia, alm de boa conabilidade,
repetibilidade, simplicidade e rapidez. A pr-seleo in vitro de embries de bovinos, por
exemplo, tem sido bastante estudada em vrios laboratrios, pois aceito, em geral,
que embries machos desenvolvem-se mais rapidamente do que embries fmeas,
pelo menos em alguns sitemas de produo in vitro.
___________________________________________
1 Erica Perez Marson, Thiago Previero e Jos Bento Sterman Ferraz so da FZEA/USP

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