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Espectroscopia UV Visivel
Espectroscopia UV Visivel
Princpios bsicos
Desvios qumicos
Deslocamento do equilbrio: quando um analito dissocia, associa ou reage com um
solvente para formar um produto que tem um espectro de absoro diferente do analito. Ex:
indicador cido-base.
Desvios instrumentais
Em solues muito concentradas, as molculas de soluto influenciam umas s outras
devido a suas proximidades, pois quando ficam muito perto umas das outras, a absorvidade
pode mudar um pouco.
Espectrofotmetros
Fontes de radiao
Monocromadores
So dispositivos essenciais dos espectrofotmetros e tem como funo a seleo do
comprimento de onda e que se tem interesse para a anlise. constitudo de uma fenda de
entrada de um elemento de disperso de radiao e de uma fenda de sada. O elemento de
disperso pode ser um prisma ou uma rede de difrao.
1) Monocromador prismtico: a radiao policromtica procedente da fonte de
radiao passa pela fenda de entrada e incide sobre a face de um prisma, sofrendo desvio. Os
prismas de quartzo so indicados para trabalhar na regio ultravioleta, embora tenham mais
disperso que o vidro. Na regio do visvel so empregados primas de vidro. Os prismas de
quartzo apresentam desvantagem de serem altamente refringentes e oticamente ativos.
2) Monocromador reticular: o principal elemento de disperso dos monocromadores
reticulares a rede de difrao, que consiste em uma placa transparente com inmeras
ranhuras paralelas e de mesma distncia. As redes de difrao dispersam a radiao
policromtica baseadas no fenmeno da interferncia, e a disperso resultante desta rede
linear. As redes de difrao possuem resoluo melhor que os prismas e podem ser utilizadas
em todas as regies espectrais.
Recipientes
1 cm
Cubeta convencional
Espectro de protenas
- possuem espectro bem caracterstico;
-so influenciadas pelo meio local: dependem de fenmenos eltricos;
-mostra a quantidade de hlice e folha ;
-caso a protena seja desnaturada, a espectroscopia ser diferente.
Fluorescncia e fosforescncia
Fluorescncia a emisso de luz associada com eltrons que se movem de um
estado excitado para o estado fundamental.
Fosforescncia a capacidade que uma espcie qumica tem de emitir luz.
As duas so freqentemente usadas para se estudar processos biolgicos e so
muito mais teis que a absorbncia, por serem consideravelmente mais sensveis,
podendo, ento, detectar concentraes bastante baixas.