Escolar Documentos
Profissional Documentos
Cultura Documentos
Clulas-tronco em Odontologia
Ana Prates Soares*, Lugya Amorim Henriques Knop*, Alan Araujo de Jesus **, Telma Martins de Arajo***
Resumo
R Dental Press Ortodon Ortop Facial 33 Maring, v. 12, n. 1, p. 33-40, jan./fev. 2007
Clulas-tronco em Odontologia
matriz
R Dental Press Ortodon Ortop Facial 34 Maring, v. 12, n. 1, p. 33-40, jan./fev. 2007
SOARES, A. P.; KNOP, L. A. H.; JESUS, A. A.; ARAJO, T. M.
cultura com alto potencial indutivo adipognico. formao de tecido sseo fibroso autlogo a partir
Ademais, as clulas-tronco da polpa dentria ex- de clulas-tronco provenientes de polpas de indi-
pressaram nestina e protena glial fibrilar cida vduos com idades acima de 30 anos, assim como a
(GFAP, sigla do ingls glial fibrilar acid protein), diferenciao dessas clulas em odontoblastos11.
que so marcadores de precursores neurais e c- Os marcadores para as clulas-tronco so de ex-
lulas gliais, respectivamente7. trema importncia, pois estas clulas residem em
Existem evidncias de que clulas-tronco de diferentes locais dentro do tecido26. So necess-
dentes decduos so similares quelas encontradas rios mais estudos sobre marcadores especficos que
no cordo umbilical. Quando comparadas s clu- possam identificar nichos de clulas-tronco presen-
las-tronco provenientes da medula ssea e da pol- tes na polpa dentria in situ e sobre como se d
pa de dentes permanentes, notou-se que as SHED o desenvolvimento desses nichos9. possvel que
(stem cells from human exfoliated deciduous te- as clulas-tronco da polpa humana e do ligamento
eth) apresentam uma maior taxa de proliferao. periodontal estejam associadas com a microvascu-
Alm disso, os dados desse estudo indicam que as latura8,25. Atualmente so utilizados os seguintes
SHED possuem habilidade de se diferenciarem marcadores microvasculares, para localizao de
em clulas odontoblsticas funcionais, adipcitos tais clulas: STRO-1 (marcador de clulas do estro-
e clulas neurais, alm de estimularem a osteog- ma), Fator Von Willebrand e CD146 (molcula da
nese aps transplantao in vivo (Fig. 2)16. superfcie de clulas endoteliais)18,25,26. A expresso
Pesquisas demonstraram que clulas-tronco da da telomerase celular em tecidos normais pare-
polpa requerem um meio indutor apropriado e um ce estar associada presena de clulas-tronco.
arcabouo composto por hidroxiapatita/triclcio- Tcnicas de deteco in situ dessa ribonucleo-
fosfato para induzir a formao de osso, cemento e protena tm a possibilidade de atuarem como
dentina in vivo3,8. Alguns autores demonstraram a marcadores celulares9.
clulas-tronco
isoladas
adipcitos
odontoblastos
clulas neurais
FIGURA 2 - Clulas-tronco isoladas do tecido pulpar de dentes decduos tm alta capacidade proliferativa e so capazes de se diferenciarem em odontoblastos
maduros, adipcitos ou clulas neurais.
R Dental Press Ortodon Ortop Facial 35 Maring, v. 12, n. 1, p. 33-40, jan./fev. 2007
Clulas-tronco em Odontologia
R Dental Press Ortodon Ortop Facial 36 Maring, v. 12, n. 1, p. 33-40, jan./fev. 2007
SOARES, A. P.; KNOP, L. A. H.; JESUS, A. A.; ARAJO, T. M.
R Dental Press Ortodon Ortop Facial 37 Maring, v. 12, n. 1, p. 33-40, jan./fev. 2007
Clulas-tronco em Odontologia
duas camadas de matriz composta por hidrogel de implicam em uma possvel funo das clulas-tron-
polietilenoglicol, moldadas em forma de cndilo de co na regenerao tecidual periodontal, sendo ne-
humanos. Esses moldes de acrlico foram implantados cessrios estudos mais aprofundados.
em dorsos de ratos imunodeficientes. Foi observada a O objetivo da Odontologia conservadora restau-
formao de uma estrutura condilar aps 8 semanas rar ou regenerar os tecidos dentrios para manter a
da implantao. Tal achado representa uma ferramen- vitalidade, a funo e a esttica do dente. Gronthos
ta til para um futuro desenvolvimento de cndilos et al.8 iniciaram estudos para isolar clulas-tronco da
mandibulares atravs da engenharia tecidual2. polpa dentria a partir de terceiros molares humanos
Em outra pesquisa, clulas-tronco mesenqui- impactados. Em meio de cultura composto por L-as-
mais provenientes de porcos foram isoladas, culti- corbato-2-fosfato, glicorticide e fosfato inorgnico,
vadas em matriz de cido poli-dl-lctico-coglic- foi observada a capacidade de tais clulas formar em
lico e incubadas por 10 dias em meio de cultura depsitos clcicos in vitro. Aps transplantao em
com suplemento osteognico. Posteriormente a ratos imunocomprometidos, as clulas-tronco pul-
este perodo, as amostras foram transplantadas para pares exibiram habilidade de formar uma estrutura
defeitos sseos mandibulares induzidos cirurgica- semelhante ao complexo dentina-polpa, composto
mente e aps 6 semanas realizou-se a anlise his- de uma matriz de colgeno tipo I altamente organi-
tolgica, clnica e radiogrfica. Observou-se que os zada, perpendicular camada tipo odontoblstica, e
defeitos foram preenchidos com um tecido denso, tecido fibroso contendo vasos sanguneos, anlogo
semelhante ao osso, apresentando osteoblastos, os- polpa encontrada em dentes humanos normais. Ou-
tecitos, vasos sanguneos e osso trabeculado1. tros pesquisadores14 cultivaram o mesmo tipo celular
Inmeros esforos tm sido direcionados para a em meio indutor de mineralizao semelhante e ob-
regenerao periodontal. Laino et al.11 demonstra- servaram a formao de hidroxiapatita com pequenas
ram a presena de clulas tronco-adultas no liga- quantidades de carbonatos, caractersticos de apatitas
mento periodontal, com propriedade clonognica e biolgicas.
alta taxa proliferativa. Essas clulas foram estimu- A matriz extracelular fosfoglicoprotica no-co-
ladas in vitro a diferenciarem-se em clulas tipo ce- lagnica (MEPE, sigla do ingls matrix extracellular
mentoblastos, atravs de um meio rico em L-ascor- phosphoglycoprotein) foi identificada recentemente
bato-2 fosfato, dexametasona e fosfato inorgnico; no tecido dentrio, tendo o peptdeo Dentonina de-
aps 4 semanas observou-se acumulao clcica, rivado de sua seqncia gnica. A ao da Dentonina
embora em menor proporo quando compara- sobre as clulas-tronco da polpa foi avaliada13. Obser-
da com as clulas-tronco provenientes da medula vou-se um aumento na taxa de proliferao dessas
ssea e da polpa dentria. A anlise imunohisto- clulas, sendo possvel o uso deste peptdeo na rege-
qumica e Western blotting demonstraram que as nerao da polpa em resposta a injrias como traumas
clulas-tronco do ligamento periodontal expressa- e cries. So necessrios mais estudos para aplicao
ram uma variedade de marcadores cementobls- in vivo desta terapia.
ticos/osteoblsticos. Ao serem transplantadas para Em um estudo23, foi testada a capacidade do epi-
ratos imunocomprometidos as clulas formaram tlio odontognico de estimular clulas-tronco em-
uma estrutura semelhante ao cemento/ligamento briognicas e mesenquimais, provenientes dos tecidos
periodontal. Em defeitos criados cirurgicamente na neural e medula ssea, a expressarem genes do desen-
rea periodontal dos molares inferiores dos ratos, as volvimento dentrio e, assim, substiturem o mesn-
clulas se integraram ao ligamento periodontal em quima dentrio na bioengenharia. Em amostras com
duas das seis amostras e, ocasionalmente, uniram a clulas embriognicas e neurais, observou-se a ex-
superfcie do osso alveolar ao dente. Esses achados presso de Dspp, gene expresso por odontoblastos,
R Dental Press Ortodon Ortop Facial 38 Maring, v. 12, n. 1, p. 33-40, jan./fev. 2007
SOARES, A. P.; KNOP, L. A. H.; JESUS, A. A.; ARAJO, T. M.
sugerindo que apesar de no haver formao dentria, adultos, foi desenvolvido um experimento23. Verifi-
h o estmulo para a diferenciao celular. cou-se que aps 26 dias da transplantao houve for-
Um modelo de aplicao clnica da terapia endo- mao de um dente ectpico, histologicamente nor-
dntica foi proposto por Nakashima18, baseado no mal, com presena de dentina, esmalte e um tecido
cultivo, proliferao e diferenciao de clulas-tron- similar ao ligamento periodontal. Sendo identificada
co pulpares em odontoblastos, sua insero em uma pelos autores uma possibilidade de transplantao de
matriz moldada do preparo cavitrio que apresente primrdios dentrios e seu subseqente desenvolvi-
exposio pulpar e o posicionamento da matriz no mento em humanos. Tal possibilidade leva a discus-
dente. Assim haveria a proliferao dos odontoblastos ses sobre a tica na experimentao com embries
e formao de dentina tubular funcional. em desenvolvimento23.
Na busca pela formao de um rgo dentrio
completo, foram desenvolvidos experimentos em ra- CONSIDERAES FINAIS
tos, utilizando primrdios da lmina dentria ao in- Existe um grande avano nos experimentos com
vs de populaes de clulas-tronco isoladas6,23. Isto clulas-tronco adultas provenientes de tecidos bu-
evidencia uma dificuldade na manipulao de todos cais. O seu fcil acesso e o fato de no serem rgos
os fatores envolvidos no desenvolvimento de um r- vitais constituem um atrativo para testes de prati-
go dentrio. Alm desta problemtica evidente a cidade e viabilidade de tcnicas da bioengenharia.
necessidade da insero e funcionabilidade do rgo possvel que, num futuro prximo, se utilize da
formado, de maneira que possa se integrar ao sistema bioengenharia na terapia endodntica e periodon-
estomatogntico. tal, apesar de, atualmente, a cincia se encontrar
Pesquisadores observaram que clulas dentrias distante de desenvolver rgos dentrios completos
no estgio de boto, obtidas de ratos recm-nascidos, a partir de clulas-tronco, devido aos mecanismos
cultivadas in vitro durante 6 dias e transplantadas para complexos da formao dentria.
dorsos de ratos imunocomprometidos, apresentaram
resultados timos na formao de coroas dentrias AGRADECIMENTOS
maduras, com caractersticas muito semelhantes aos Os autores agradecem SempToshiba, pelo apoio
dentes formados naturalmente6. Para determinar se constante ao Centro de Ortodontia e Ortopedia
rudimentos dentrios em fase de campnula pode- Facial Prof. Jos dimo Soares Martins FOUFBA.
riam formar um rgo dentrio, quando transplanta-
Enviado em: abril de 2006
dos para uma regio desdentada da maxila em ratos Revisado e aceito: junho de 2006
Abstract
Introduction: there is great interest in developing techniques for manipulation of stem cells for the use in restor-
ing organs and tissues. The effectiveness of bioengineering is based on the existence of stem cells, an extra cellular
matrix and growth factors. Innumerous growth factors are involved in the development of dental organs, and this
complexity of factors makes it extremely difficult to grow a complete organ, even though there are multiple essays
reporting the formation of enamel and dentin from isolated stem cell, originating from dental pulp tissues. More
recently, deciduous teeth have been used to extract stem cells from their pulp tissues. We know that these cells are
highly proliferate. The recognition of the biological behavior of these cells and techniques used to isolate them is
of great interest to dentists. Aim: the aim of this study was to review the current trends of research with stem cells
in Dentistry and the factors implied for their practical and successful use.
R Dental Press Ortodon Ortop Facial 39 Maring, v. 12, n. 1, p. 33-40, jan./fev. 2007
Clulas-tronco em Odontologia
REFERNCIAS 14. LIU, H.; LI, W.; SHI, S.; HABELITZ, S.; GAO, C.; DENBESTEN, P.
MEPE is downregulated as dental pulp stem cells differentiate.
Arch Oral Biol, Oxford, v. 50, no. 11, p. 923-928, 2005.
1. ABUKAWA, H.; SHIN, M.; WILLIAMS, W. B.; VACANTI, J. P.; 15. LOVSCHALL, H.; TUMMERS, M.; THESLEFF, I.; FUCHTBAUER,
KABAN, L. B.; TROULIS, M. J. Reconstruction of mandibular E. M.; POULSEN, K. Activation of the Notch signaling pathway
defects with autologous tissue-engineered bone. J Oral Maxil- in response to pulp capping of rat molars. Eur J Oral Sci, Co-
lofac Surg, Philadelphia, v. 62, no. 5, p. 601-606, 2004. penhagen, v. 113, no. 4, p. 312-317, 2005.
2. ALHADLAQ, A.; MAO, J. J. Tissue-engineered neogenesis of 16. MIURA, M.; GRONTHOS, S.; ZHAO, M.; LU, B.; FISHER, L. W.;
human-shaped mandibular condyle from rat mesenchymal stem ROBEY, P. G.; SHI, S. SHED: stem cells from human exfoliated
cells. J Dent Res, Alexandria, v. 82, no. 12, p. 951-956, 2003. deciduous teeth. Proc Natl Acad Sci USA, Washington, D.C.,
3. BATOULI, S.; MIURA, M.; BRAHIM, J.; TSUTSUI, T. W.; FISHER, v. 100, no. 10, p. 5807-5812, 2003.
L. W.; GRONTHOS, S.; ROBEY, P. G.; SHI, S. Comparison of 17. MOONEY, D. J.; POWELL, C.; PIANA, J.; RUTHERFORD, B. En-
stem-cell-mediated osteogenesis and dentinogenesis. J Dent gineering dental pulp-like tissue in vitro. Biotechnol Prog, New
Res, Alexandria, v. 82, no. 12, p. 976-981, 2003. York, v. 12, no. 6, p. 865-868, 1996.
4. COBOURNE, M. T.; HARDCASTLE, Z.; SHARPE, P. T. Sonic 18. NAKASHIMA, M. Bone morphogenetic proteins in dentin re-
hedgehog regulates epithelial proliferation and cell survival in generation for potential use in endodontic therapy. Cytokine
the developing tooth germ. J Dent Res, Alexandria, v. 80, no. Growth Factor Rev, Oxford, v. 16, no. 3, p. 369376, 2005.
11, p. 1974-1979, 2001. 19. NAKASHIMA, M.; AKAMINE, A. The application of tissue engi-
5. DENG, M.; SHI, J.; SMITH, A. J.; JIN, Y. Effects of transforming neering to regeneration of pulp and dentin in Endodontics.
growth factor beta1 (TGFbeta-1) and dentin non-collagenous J Endod, Baltimore, v. 31, no. 10, p. 711-718, 2005.
proteins (DNCP) on human embryonic ectomesenchymal cells 20. NAKASHIMA, M.; REDDI, H. The application of bone morpho-
in a three-dimensional culture system. Arch Oral Biol, Oxford, genetic proteins to dental tissue engeneering. Nat Biotechnol,
v. 50, no. 11, p. 937-945, 2005. New York, v. 21, no. 9, p. 1025-1032, 2003.
6. DUAILIBI, M. T.; DUAILIBI, S. E.; YOUNG, C. S.; BARTLETT, J. D.; 21. NAKASHIMA, M.; TOYONO, T.; MURAKAMI, T.; AKAMINE,
VACANTI, J. P.; YELICK, P. C. Bioengineered teeth from cultured A. Transforming growth factor-beta superfamily members ex-
rat tooth bud cells. J Dent Res, Alexandria, v. 83, no. 7, p. 523- pressed in rat incisor pulp. Arch Oral Biol, Oxford, v. 43, no. 9,
528, 2004. p. 745-751, 1998.
7. GRONTHOS, S.; BRAHIM, J.; LI, W.; FISHER, L. W.; CHERMAN, 22. ODORICO, J. S.; KAUFMAN, D. S.; THOMSON, J. A. Multi-
N.; BOYDE, A.; DENBESTEN, P.; ROBEY, G. P.; SHI, S. Stem cell lineage differentiation from human embryonic stem cell lines.
properties of human dental pulp stem cells. J Dent Res, Alexan- Stem Cells, Basel, v. 19, no. 3, p. 193-204, 2001.
dria, v. 81, no. 8, p. 531-535, 2002. 23. OHAZAMA, A.; MODINO, S. A.; MILETICH, I.; SHARPE, P. T.
8. GRONTHOS, S.; MANKANI, M.; BRAHIM, J.; GEHRON ROBEY, Stem-cell-based tissue engineering of murine teeth. J Dent
P.; SHI, S. Postnatal human dental pulp stem cells (DPSCs) in Res, Alexandria, v. 83, no. 7, p. 518-522, 2004.
vitro and in vivo. Proc Natl Acad Sci USA, Washington, D. C., 24. RISBUD, M. V.; SHAPIRO, I. M. Stem cells in craniofacial and
v. 97, no. 25, p. 13625-13630, 2000. dental tissue engineering. Orthod Craniofacial Res, Oxford,
9. HARADA, H.; MITSUYASU, T.; TOYONO T.; TOYOSHIMA, K. v. 8, no. 2, p. 5459, 2005.
Epithelial stem cells in teeth. Odontology, Tokyo, v. 90, no. 1, 25. SEO, B. M.; MIURA, M.; GRONTHOS, S.; BARTOLD, P. M.; BA-
p. 16, 2002. TOULI, S.; BRAHIM, J.; YOUNG, M.; ROBEY, P. G.; WANG, C.
10. IOHARA, K.; NAKASHIMA, M.; ITO, M.; ISHIKAWA, M.; NA- Y.; SHI, S. Investigation of multipotent postnatal stem cells from
KASIMA, A.; AKAMINE, A. Dentin regeneration by dental pulp human periodontal ligament. Lancet, London, v. 364, no. 9429,
stem cell therapy with recombinant human bone morphoge- p. 149-155, 2004.
netic protein 2. J Dent Res, Alexandria, v. 83, no. 8, p. 590- 26. SHI, S.; BARTOLD, P. M.; MIURA, M.; SEO, B. M.; ROBEY, P.
595,2004. G.; GRONTHOS, S. The efficacy of mesenchymal stem cells to
11. LAINO, G.; DAQUINO, R.; GRAZIANO, A.; LANZA, V.; CARIN- regenerate and repair dental structures. Orthod Craniofac Res,
CI, F.; NARO, F.; PIROZZI, G.; PAPACCIO, G. A new population Oxford, v. 8, no. 3, p. 191-199, 2005.
of human adult dental pulp stem cells: a useful source of living 27. SHI, S.; ROBEY, P. G.; GRONTHOS, S. Comparison of human
autologous fibrous bone tissue (LAB). J Bone Miner Res, Wash- dental pulp and bone marrow stromal stem cells by cDNA mi-
ington, D. C., v. 20, no. 8, p. 1394-402, 2005. croarray analysis. Bone, New York, 29, no. 6, p. 532-539, 2001.
12. LI, H.; BARTOLD, P. M.; ZHANG, C. Z.; CLARKSON, R. W.; 28. YAMASHIRO, T.; TUMMERS, M.; THESLEFF, I. Expression of
YOUNG, W. G.; WATERS, M. J. Growth hormone and insulin- bone morphogenetic proteins and Msx genes during root for-
like growth factor i induce bone morphogenetic proteins 2 and mation. J Dent Res, Alexandria, v. 82, no. 3, p. 172-176, 2003.
4: a mediator role in bone and tooth formation? Endocrinology, 29. ZHANG, Y. D.; CHEN, Z.; SONG, Q.; LIU, C.; CHEN,Y. P. Making
Chevy Chase, v. 139, no. 9, p. 3855-3862, 1998. a tooth: growth factors, transcription factors and stem cells. Cell
13. LIU, H.; LI, W.; GAO, C.; KUMAGAI, Y.; BLACHER, R. W.; DEN- Res, Beijing, v. 15, no. 5, p. 301-316, 2005.
BESTEN, P. K. Dentonin, a fragment of MEPE, enhanced dental
pulp stem cell proliferation. J Dent Res, Alexandria, v. 83, n. 6,
p. 496-499, 2004.
Endereo de correspondncia
Ana Prates Soares
Rua Arajo Pinho n. 62, 7 andar, Bairro Canela
CEP: 40.110-150 - Salvador/BA
E-mail: prates_ana@yahoo.com.br
R Dental Press Ortodon Ortop Facial 40 Maring, v. 12, n. 1, p. 33-40, jan./fev. 2007