Universidade Federal do Maranho UFMA

Centro de Cincias Exatas e Tecnologia CCET

Coordenao de Engenharia Qumica COEQ

Projeto, Processos Qumicos e Monografia

Prof Romildo Sampaio

Ana Beatriz da Paixo Ribeiro

BIOENGENHARIA

Catlise Enzimtica

So Lus MA
Abril, 2017
SUMRIO
1. OBJETIVO........................................................................................................ 4
2. INTRODUO................................................................................................... 4
3. CATLISE ENZIMTICA................................................................................... 5
3.1 Atividade Enzimtica................................................................................6
3.2 Especificidade............................................................................................ 6
3.3 Fatores que Influenciam a Ao Enzimtica.........................................7
3.3.1 pH.......................................................................................................... 7
3.3.2 Temperatura........................................................................................ 7
3.3.3 Cofatores............................................................................................. 8
3.3.4 Inibidores............................................................................................. 8
3.3.5 Concentrao da Enzima...................................................................8
3.3.6 Concentrao do Substrato..............................................................8
4. EXERCCIO.................................................................................................... 10
5. CONCLUSO................................................................................................. 11
6. REFERNCIAS.............................................................................................. 12

1. OBJETIVO

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Apresentar introduo sobre bioengenharia e aprofundar a sobre a importncia das reaes
qumicas catalisadas por enzimas e quais so suas caractersticas fundamentais.

2. INTRODUO

Basicamente se tenta atravs da bioengenharia assentar enzimas, clulas ou

organismos em aplicaes tcnicas. A microbiologia, a bioqumica, a biologia molecular, a
bioinformtica, a engenharia de processos e a engenharia gentica se fundem com a
bioengenharia, convertendo-se numa especialidade muito ampla. A base da bioengenharia so
as reaes qumicas catalisadas por enzimas. Sobre esta base surgiram h muitos sculos atrs
os primeiros processos bioqumicos. Por exemplo, os vinhos e as cervejas produziam-se
juntando levedura, ou juntando enzimas ao leite se processavam diversos produtos lcteos
como o caso do queijo ou do kefir.

Uma importante ramificao da pesquisa nutricional do sculo vinte, conduzida em

paralelo e em igual significncia a do descobrimento de vitaminas e minerais, foi a descoberta
das enzimas e sua funo. Enzimas so protenas complexas que agem como catalisadoras em
quase todo processo bioqumico que ocorre no corpo. Sua atividade depende da presena de
vitaminas e minerais adequados, particularmente magnsio.

As enzimas so protenas especializadas na catlise de reaes biolgicas sob

condies favorveis de pH, temperatura, concentrao do substrato, etc. Elas esto entre as
biomolculas mais notveis devido a sua extraordinria especificidade e poder cataltico, que
so muito superiores aos dos catalisadores produzidos pelo homem. Praticamente todas as
reaes que caracterizam o metabolismo celular so catalisadas por enzimas.

Como catalisadores celulares extremamente poderosos, as enzimas aceleram a

velocidade de uma reao, sem, no entanto participar dela como reagente ou produto. A
Cintica Enzimtica a parte da enzimologia que estuda a velocidade das reaes
enzimticas, e os atores que influenciam nesta velocidade. A cintica de uma enzima
estudada avaliando-se a quantidade de produto formado ou a quantidade de substrato
consumido por unidade de tempo de reao.

Determinaes da cintica de reaes catalisadas por enzimas encontram-se entre as

tcnicas mais poderosas para elucidar o mecanismo cataltico das mesmas. Uma das maneiras
de se determinar dados de uma cintica enzimtica atravs da resoluo da equao de
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Michaelis-Menten, a partir da concentrao de substrato. O pH e a temperatura tem
influncias significativas na atividade da enzima, tendo cada reao enzimtica um valor de
pH e temperatura timos para a sua ao. Geralmente so condies brandas que favorecem a
utilizao das reaes enzimticas na indstria alimentcia. Essas condies costumam
favorecer o valor nutricional dos alimentos.

Alguns microrganismos so capazes de produzir diversas enzimas de interesse

industrial. Dentre esses microrganismos a levedura Saccharomyces cerevisiae, popularmente
conhecida como fermento de panificao, produz a enzima invertase que capaz de hidrolisar
a sacarose para produzir o acar invertido (mistura equimolar de glicose e frutose) que
muito utilizado pela indstria de alimentos, pois a frutose mais doce que a sacarose (cerca
de 40%) e no cristaliza to facilmente melhorando a textura de doces e sorvetes. Sacarose +
H2O Glucose + Frutose.

3. CATLISE ENZIMTICA

As enzimas so catalisadores muito potentes e eficazes, quimicamente so definidas

como protenas.

Um catalisador uma substncia que acelera uma reao qumica, at torn-la

instantnea ou quase instantnea, ao diminuir a energia de ativao. Como catalisadores, as
enzimas atuam em pequena quantidade e se recuperam indefinidamente. No levam a cabo
reaes que sejam energeticamente desfavorveis, no modificam o sentido dos equilbrios
qumicos, mas aceleram sua realizao.

Algumas enzimas so capazes de aumentar a taxa de certas reaes cerca de 1014

vezes, sem requerer condies extremas de temperatura, presso e pH. O contraste entre
reaes catalisadas por enzimas e utilizando catalisadores qumicos bem ilustrado pelo
processo de fixao do nitrognio (reduo do N2 a amnia). A nitrogenase catalisa a reao a
temperaturas em torno de 300K e pH prximo da neutralidade. Por outro lado, na sntese
industrial da amnia a partir de nitrognio e hidrognio as condies usadas so: temperaturas
entre 700 e 900K, presso entre 100 e 900atm, na presena de ferro e outros xidos metlicos
como catalisadores.

3.1 Atividade Enzimtica

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 As enzimas apresentam a capacidade de reagir com determinados constituintes das
clulas, denominados substratos, formando complexos, ou mesmo compostos com ligaes
covalentes e esse fato denominado atividade biolgica. Esta atividade vai depender da
estrutura da protena, isto , do nmero de cadeias peptdicas e arranjo dessas cadeias na
molcula, da natureza do substrato e ainda, se existir, da natureza do grupo prosttico.

3.2 Especificidade

Existe uma correlao entre a estrutura das protenas ou peptdeos que fazem parte da
molcula enzimtica e suas propriedades biolgicas, e esta propriedade leva a uma
especificidade extraordinariamente alta e reproduzvel. Provavelmente apenas uma frao da
molcula, denominada stio ativo, a responsvel pela ligao da enzima ao substrato ou
substratos, e essa frao determinaria a especificidade enzimtica.

O composto sobre o qual a enzima atua chama-se substrato. O substrato se une a uma
regio concreta da enzima, chamada stio ativo. Uma vez formados os produtos, a enzima
pode iniciar um novo ciclo de reao.

Alguns modelos foram propostos para explicar o tipo de ligao estabelecida entre
enzima e substrato.

Emil Fischer desenvolveu no sculo passado o conceito de especificidade enzimtica,

estabelecendo que existe uma relao estrica entre enzima e substrato. Em 1894 enunciou a
sua teoria na qual a especificidade enzimtica comparada a um conjunto de chave e
fechadura onde a chave, neste caso o substrato, deve se ajustar fechadura, neste caso a
enzima .Assim, cada enzima agiria sobre um nmero muito limitado de compostos.

Entre 1950 e 1960 um nmero de observaes feitas sugeriu que enzimas apresentam
considervel flexibilidade. Em 1958 Koshland props o modelo do ajuste induzido para
explicar o poder cataltico e especificidade apresentada por enzimas. Segundo esta teoria, em
alguns casos, o stio ativo adota a conformao idnea s em presena do substrato e a unio
do substrato ao stio ativo da enzima, desencadeia uma troca conformacional (arranjo espacial
dos grupamentos R dos aminocidos) que d lugar a formao de produto.

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 A especificidade das enzimas varia muito de uma enzima para outra, sendo muito
baixa para algumas enzimas e muito alta para outras. A especificidade baixa mais
comumente encontrada em enzimas degradativas, mas raramente encontrada em enzimas
biosintticas.

3.3 Fatores que Influenciam a Ao Enzimtica

3.3.1 pH

Ao comprovar experimentalmente a influncia do pH na velocidade das reaes

enzimticas se obtm curvas que indicam que as enzimas apresentam um pH timo de
atividade. O pH pode afetar de vrias maneiras:

- O stio ativo pode conter aminocidos com grupos ionizados que podem variar com o pH.

- A ionizao de aminocidos que no esto no stio ativo pode provocar modificaes na

conformao da enzima.

3.3.2 Temperatura

A temperatura influi na atividade e o ponto timo representa o mximo de atividade. A

temperaturas baixas, as enzimas encontram-se muito rgidas e quando se supera um valor
considervel (maior que 50C) a atividade cai bruscamente porque, como protena, a enzima
se desnatura. Em geral, os aumentos de temperatura aceleram as reaes qumicas: a cada
10C de aumento, a velocidade de reao se duplica. As reaes catalisadas por enzimas
seguem esta lei geral. Entretanto, sendo protenas, a partir de certa temperatura, comeam a
desnaturar-se pelo calor. A temperatura na qual a atividade cataltica mxima chama-se
temperatura tima. Acima desta temperatura, o aumento de velocidade da reao devido a
temperatura compensado pela perda de atividade cataltica devido a desnaturao trmica, e
a atividade enzimtica decresce rapidamente at anular-se.

3.3.3 Cofatores

Enzimas tal como a quimotripsina (enzima que hidrolisa protena) ou triosefosfato

isomerase so ativas sem necessitar a presena de outro fator. No entanto, quase um tero das
enzimas conhecidas requer um componente no protico para sua atividade, denominado

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cofator. Os cofatores podem ser ons metlicos como o Fe++, Mg++, Mn++, Zn++, ou
molculas orgnicas, muitas delas derivadas de vitaminas do complexo B.

3.3.4 Inibidores

Certas molculas podem inibir a ao cataltica de uma enzima: so os inibidores.

Estes podem ocupar temporariamente o centro ativo por semelhana estrutural com o
substrato original (inibidor competitivo) ou alterar a conformao espacial da enzima,
impedindo sua unio ao substrato (inibidor no competitivo).

3.3.5 Concentrao da Enzima

A velocidade mxima da reao uma funo da quantidade de enzima disponvel.

Assim, a velocidade inicial da reao enzimtica diretamente proporcional concentrao
de enzima (existindo substrato em excesso)

3.3.6 Concentrao do Substrato

Para atender as necessidades do organismo, as reaes bioqumicas devem ocorrer em

velocidade compatvel. A velocidade de uma reao bioqumica expressa em termos de
formao de produto ou pelo consumo do reagente.

Inicialmente a velocidade da reao diretamente proporcional a concentrao do

reagente. O processo exibe cintica de primeira ordem. Quando a adio de mais reagente no
aumenta a velocidade, a reao exibe cintica de ordem zero. A velocidade passa a ser
constante porque no depende mais da concentrao dos reagentes, mas de outros fatores. A
quantidade de reagente o suficiente grande para saturar todos os stios catalticos das
molculas enzimticas. Assim, o reagente s existe na forma de complexos enzima-substrato
(ES). Como a curva velocidade-substrato hiperblica, a fase de ordem zero atinge uma
velocidade mxima.

A atividade enzimtica foi estudada por Leonor Michaelis e Maus Menten, em 1913,
dividindo o processo em duas etapas que podem ser descritas conforme a equao a seguir:

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 [...] inicialmente a enzima se combina reversivelmente com o substrato para formar o
complexo enzima-substrato, em um passo reversvel relativamente rpido. [...] Em uma
segunda etapa lenta, o complexo ES ento se quebra liberando a enzima livre, o produto da
reao, P. [...] (LEIHNINGER, 2002. p. 199)

Alm de estudar o processo envolvido durante a reao, Michaelis e Menten criaram

uma constante combinando: A velocidade inicial e mxima de converso do substrato em
produto; a concentrao de enzima; e a concentrao do substrato na soluo. Ou seja:
Quando a concentrao do substrato alcana a metade da velocidade mxima, encontramos a
constante.

4. EXERCCIO

(UFV) - O grfico abaixo representa a atividade enzimtica de uma determinada reao em

funo da temperatura.

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A seta indica o ponto:

a) Mnimo da temperatura para a reao enzimtica.

b) De desnaturao da enzima.

c) De desnaturao do produto.

d) timo de temperatura para a atividade enzimtica.

e) Mximo de substrato obtido.

O que acontece com a enzima aps esse ponto?

Resposta: letra d. Aps o ponto de temperatura tima para atividade enzimtica a enzima
comea a perder sua configurao tridimensional, ou seja, comea a desnaturar e
consequentemente perde a eficincia de catalisadora da reao.

5. CONCLUSO

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 A base da bioengenharia est na capacidade de controlar e disponibilizar de maneira
eficiente reaes qumicas catalisadas por agentes biolgicos/bioqumicos, para o
desenvolvimento de processos cada vez mais eficientes e envolvendo vrias especialidades
como biologia, qumica e engenharia aplicada.

A capacidade cataltica das enzimas as tornam adequadas para aplicaes industriais,

sendo uma delas na indstria alimentcia. As reaes enzimticas so muito importantes em
alimentos, pois dependendo delas no somente h formao de compostos altamente
desejveis, como tambm indesejveis. Porm em vrias industrias a enzima utilizada e de
essencial co

Portanto, a vasta aplicabilidade das enzimas as tornam fundamentais na indstria e o

conhecimento de suas principais caractersticas so essenciais para a aplicao da
bioengenharia.

6. REFERNCIAS

Cintica Enzimtica. Disponvel em: http://www.bioqmed.ufrj.br/enzimas/cinetica.pdf

11
Enzimas - Universidade Federal de So Carlos (2003) Disponvel em:
http://www.enq.ufsc.br/labs/probio/disc_eng_bioq/trabalhos_pos2003/const_microorg/e
nzimas.htm Acessado em 12-12-2013

Estgio de Docncia Cintica Enzimtica. Por Juliana Ribeiro Mariotto. Disponvel em:
http://www.enq.ufsc.br/labs/probio/disc_eng_bioq/apostilas/Apostila_cinetica_enzimatica_ju.
pdf

NELSON, D. L.; COX, M. Lehninger Princpios de Bioqumica. 3ed. So Paulo: Sarvier,

2002.

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