TCNICA PARA A UTILIZAO DE PIPETAS

1. Objetivos:

Ensinar as tcnicas corretas para a utilizao de pipetas graduadas de vidro e

pipetas automticas, visando facilitar a execuo dos protocolos experimentais que sero
realizados durante a disciplina.
Pipetar volumes determinados repetidas vezes para observar o coeficiente de
variao.

2. Material por bancada:

2 pipetas graduadas de 1,0 mL

2 pipetas graduadas de 2,0 mL
4 pipetas de 5,0 mL
2 pipetas de 10,0 mL
1 pipeta automtica de 10 L
1 pipeta automtica de 1000 L
Ponteiras
2 Estantes para tubos de ensaio
10 Tubos de ensaio
Placa para leitora
Soluo de CuSO4 a 10% (p/v)
Frasco com gua destilada

3. Aprendendo a utilizar as pipetas

Graduadas:
Fazer vcuo na pr-pipeta, pressionando a marca superior.
Fixar a pipeta na parte inferior da pr-pipeta.
Introduzir a ponta da pipeta na soluo.
Apertar a marca inferior para que a soluo seja aspirada, vagarosamente, at
um pouco acima da marca zero. No se esquecer de observar o menisco.
Retirar a ponta da pipeta da soluo, se necessrio enxugar com papel
absorvente.
Liberar o excesso de soluo, pressionando a marca lateral da pr-pipeta,
para acertar o menisco na marca zero da pipeta.
Liberar o volume a ser pipetado, no local desejado.
Desconectar a pr-pipeta da pipeta.
 Automticas

Todo o procedimento deve ser realizado com a pipeta na vertical.

Acoplar a ponteira extremidade inferior da pipeta.
Pressionar com o polegar a ponta da pipeta at o primeiro estgio, para promover
a aspirao.
Mantendo-a pressionada, introduzir a ponta da ponteira na soluo a ser pipetada.
Soltar delicadamente, para que a soluo seja aspirada. Para aclimatao da
ponteira, liberar a soluo ainda no frasco.
Pressionar novamente com o polegar a ponta da pipeta at o primeiro estgio,
para promover a aspirao.
Retirar a ponteira da soluo e se necessrio enxugar a ponteira com papel
absorvente.
Liberar a soluo pipetada no local desejado, pressionando at o segundo estgio.

4. Procedimentos experimental (individual)

a) Pipetar em um tubo de ensaio 4,5 mL de gua + 0,2 mL de CuSO4.

Identificar o tubo e aguardar leitura da absorbncia
Comparar o valor obtido com os dos colegas de grupo e com valores fornecidos
pelos professores.
Calcular a concentrao de CuSO4 aps a diluio.

b) Pipetar em 12 pocinhos da uma placa 250 L de gua destilada + 10 L de CuSO4

Aguardar a leitura da placa
Calcular a mdia dos valores e coeficiente de variao (%).
Calcular a concentrao de CuSO4 aps a diluio.