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Eletroforese em gel
Southern blot
Northern blot
Western blot
Ver também
Referências
Bibliografia
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Biologia molecular
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A biologia molecular é a área da biologia que explica os fenômenos e eventos biológicos sob o ponto de
vista molecular, com especial interesse no dogma central, ou seja, as interações entre DNA, RNA e
proteínas bem como a regulação dessas interações. Ou seja, trata-se do estudo dos processos de
replicação, transcrição,tradução e biossíntese, destas moléculas e suas implicações e significados
aplicados em outros ramos da biologia tais como biologia celular, histologia,patologia, fisiologia,
genética, ecologia, evolução.[1] Trata-se de um campo de estudos amplo, que além de manter relações
com as ciências biológicas anteriormente descritas também mantém relações com as áreas da química,
da física e da informática, em especial a bioquímica e a biofísica e bioinformática.[2]
Genética é o estudo de como características biológicas são transmitidas de geração para geração
(hereditariedade) através dos genes e suas modificações (mutações, recombinações entre outros), suas
interações e expressões. Como um fenômeno biológico, pode ser explicada como uma cadeia de eventos
celulares (biologia celular) e/ou moleculares (biologia molecular) e/ou químicos (bioquímica), sendo
possível também ser explicada como uma cadeia de eventos probabilísticos (estatística).
Muito do trabalho feito no âmbito da biologia molecular relaciona-se com a obtenção, identificação e
caracterização de genes. Assim sendo, diversas técnicas têm sido desenvolvidas no meio da biologia aqui
vão sendo citadas algumas.[3]
A reação em cadeia de polimerase, ou PCR, é uma técnica de grande versatilidade que permite obter
múltiplas cópias de um segmento de DNA. O PCR também é usado para introduzir locais de restrição e
mutações pontuais ou para identificar um fragmento particular de DNA numa biblioteca de cDNA.[4]v
Eletroforese em gel
A eletroforese em gel é uma das principais ferramentas de trabalho em biologia molecular. Em geral,
DNA, RNA e proteínas podem ser separados segundo o seu tamanho numa matriz usando um campo
elétrico aplicado. Na eletroforese em gel de agarose, o DNA ou o RNA é separado fazendo a amostra
migrar através de um gel de agarose. As proteínas são normalmente separadas segundo o seu tamanho
usando eletroforese em gel de acrilamida; também podem ser separadas segundo a sua carga elétrica
usando focagem isoelétrica.
Southern blot
O Southern blot é uma técnica que permite obter informação sobre a massa molecular e a quantidade
relativa de uma determinada sequência de DNA. A técnica, desenvolvida por Edwin Southern, é uma
combinação de eletroforese em gel do DNA (este é frequentemente fragmentado por enzimas de
restrição antes de fazer o Southern), transferência deste para uma membrana e hibridização com uma
sonda marcada (radioativa ou fluorescente). Após a hibridização, a membrana é lavada para remover
sonda não ligada a DNA e obtém-se uma imagem através de autorradiografia ou autofluorescência. A
imagem obtida dá a(s) localização(ões) do DNA que liga a sonda, com a intensidade do sinal, dando uma
medida relativa da quantidade de DNA que hibridiza.
Northern blot
O Northern blot estuda o perfil de expressão de RNA mensageiro: onde, quando e quanto de
determinado RNA mensageiro (correspondente à expressão de um determinado gene) está presente
numa dada amostra. É uma das formas mais simples de determinar em que momento certos genes estão
a ser expressos em sistemas vivos. Neste processo, o RNA é separado numa eletroforese em gel,
transferido para uma membrana e detectado de forma similar ao DNA no Southern blot.[5]
Western blot
Ousa o mesmo princípio do Southern blot e do Northern blot mas é aplicado a proteínas. Estas são
separadas usando eletroforese em gel de poliacrilamida, na presença do detergente dodecilo sulfato de
sódio (SDS).
Ver também
Microarranjo
Modelagem molecular
Proteoma
Referências
(em inglês) Alberts, Bruce; Johnson, Alexander; Lewis, Julian; Morgan, David; Raff, Martin; Roberts,
Keith; Walter, Peter. Molecular Biology of the Cell, Sixth Edition. [S.l.]: Garland Science. pp. 1–10. ISBN
9781317563754
(em inglês) Astbury, W. T.. Molecular Biology or Ultrastructural Biology ?. Nature 190, 1124 (1961)
doi:10.1038/1901124a0
Cox, Michael M.;Doudna, Jennifer A.;O’Donnell, Michael. Biologia Molecular: Princípios e Técnicas.
Artmed, 2012 ISBN 8-536-32741-3
Vanzela, André Luis Laforga; Souza, Rogério Fernandes de. Avanços da biologia celular e da genética
molecular. UNESP, 2009. ISBN 8-571-39941-7
James D. Watson, Tania A Baker, Stephen P. Bell, Alexander Gann, Michael Levine, Richard Losick,
Biologia Molecular do Gene; Artmed, ISBN 8-536-31228-9
Bibliografia
Matioli, Sergio Russo. Biologia molecular e evolução; Holos, 2001, ISBN 8-586-69927-6
Zaha, Arnaldo; Ferreira, Henrique Bunselmeyer; Passaglia, Luciane M. P.. Biologia Molecular Básica, 5ª
ed.; Artmed, 2014 ISBN 8-582-71058-5
Ligações externas
«Alcor em Portugal»
[Esconder]vde
Biologia
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Esta página foi editada pela última vez às 09h46min de 28 de maio de 2021.
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