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Extrao com Fluido Supercrtico

Glaucia M. F. Pinto
Pontifcia Universidade Catlica de Campinas, Faculdade de Qumica

Jefferson F. Pinto
Protimu Ltda

Isabel C. S. F. Jardim *
icsfj@iqm.unicamp.br
Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Qumica

Informaes do Artigo Resumo

Histrico do Artigo Neste trabalho apresentou-se uma discusso das caractersticas da extrao
Criado em Abril de 2006 com fluido supercrtico, suas condies de operao, uma comparao com
outras tcnicas de extrao e aplicaes analticas da tcnica.

O trabalho mostra que um fluido supercrtico pode ser obtido com

diferentes substncias se as mesmas se encontrarem acima do ponto
crtico, da temperatura crtica e presso crtica, o que pode ser visualizado
Palavras-Chaves em um diagrama de fases. Dentre os fluidos supercrticos mais utilizados
destaca-se o dixido de carbono devido a seus baixos parmetros crticos,
Extrao
Fluido supercrtico
no toxicidade, no inflamabilidade, no reatividade, possibilidade de
Qumica Analtica obteno com alto grau de pureza, grande acessibilidade, baixo custo
Fluido extrator e ser gasoso em temperatura ambiente, sendo que este ainda pode ser
Cromatografia modificado pela adio de solventes orgnicos. A operao da extrao
com fluido supercrtico permite o acoplamento on-line e a recuperao do
solvente utilizado. Os parmetros que governam a SFE so discutidos,
principalmente presso, temperatura, natureza da matriz e polaridade do
fluido extrator. Alguns aspectos de comparao mostram que a extrao
com fluido supercrtico uma tcnica atrativa para ser aplicada no preparo
de amostras slidas, pois apresenta vantagens em relao s outras
alternativas de tcnicas de preparo de amostra (soxhlet, ultra-som, extrao
por solvente acelerado, entre outras), devido as caractersticas de rapidez;
baixo custo por extrao; reduzido consumo de solventes orgnicos; baixa
manipulao; boa preciso e exatido; versatilidade; boa recuperao e
facilidade de automao.

O trabalho ainda apresenta algumas aplicaes da SFE, que hoje so

muito numerosas e variadas, incluindo amostras ambientais (solo, gua,
ar, sedimentos, suspenses e tecidos animais), alimentos (frutas, vegetais,
cereais, tecidos animais...), produtos naturais (leos essncias, aromas...),
frmacos (drogas de abuso, hormnios...) e polmeros.
Chemkeys. Licenciado sob Creative Commons (BY-NC-SA)

* Autor para contato

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Objetivo
Descrever a tcnica de preparo de amostra de extrao
com fluido supercrtico, seus parmetros e esquema de
operao bsico, correlacionando com outras tcnicas de
preparo de amostras e apresentando alguns exemplos de
aplicaes tpicas em qumica analtica.
Introduo
A extrao com fluido supercrtico (SFE - Supercritical
Fluid Extraction) uma tcnica de extrao utilizada
principalmente quando se deseja retirar substncias de
interesse (analitos) de matrizes slidas. Ela emprega
um fluido em condies supercrticas, que apresenta
propriedades intermedirias entre um gs e um lquido.
O crescimento desta tcnica est relacionado com a
preocupao da comunidade cientfica com a sade e
o bem estar do ser humano, gerando a necessidade de
analisar matrizes cada vez mais complexas (como guas
naturais, solos, sedimentos e ar, alm de amostras de
alimentos, plantas, frutas, plsticos, etc.), com baixos
nveis de concentrao (traos e sub-traos).
O fluido supercrtico
O primeiro relato da observao de uma fase supercrtica
ocorreu em 1822, feito pelo Baro Cagniard de la Tour.
Ele notou, visualmente, que a separao de fases entre um
gs e um lquido desaparecia quando certas substncias
eram aquecidas em recipientes fechados [1].
Um fluido supercrtico (SF-Supercritical Fluid)
definido como sendo formado acima do ponto crtico, da
temperatura crtica (Tc) e presso crtica (Pc), o que pode
ser visualizado em um diagrama de fases, apresentado na
Figura 1.
Quando somente um valor crtico atingido (temperatura
ou presso) o fluido considerado em estado subcrtico
[5].
Acima do ponto crtico, algumas propriedades da substncia,
como densidade e viscosidade, so intermedirias entre um
gs e um lquido. O fluido adquire uma densidade similar
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Figura 1. Diagrama de fases mostrando a regio do fluido supercrtico
para o dixido de carbono [1,2-4].
de um lquido (e portanto um poder de solvatao) e
simultaneamente uma compressibilidade parecida com a
de um gs. O grande poder de solvatao ocasiona uma
alta permeao do fluido na amostra, aumentando a
probabilidade de uma extrao completa [2,6].
Na Tabela 1 apresentam-se as propriedades fsicas do
SF e observa-se, comparando com as propriedades de
lquidos e gases, que o SF apresenta alta densidade, baixa
viscosidade e difusibilidade superior da fase lquida (o
que explica a grande e atrativa taxa de transferncia de
massas do SF) [1,2,4].
Tabela 1. Ordens de magnitude de parmetros fsicos para gases,
fluidos supercrticos e lquidos (adaptada da Ref. 1).
Objeto Densidade / Viscosidade Coeficiente
g mL-1 dinmica/ de difuso /
g cm-1 s-1 cm 2/s-1
Gs 0,0006 - 0,002 0,0001 - 0,003 0,1 - 0,4
(ambiente)
Fluido 0,2 - 0,5 0,0001 - 0,0003 0,0007
supercrtico
(Tc, Pc)
Lquido 0,6 - 1,6 0,002 - 0,03 0,000002
(ambiente) - 0,00002
Uma das propriedades mais importantes de um fluido
supercrtico, que est relacionada sua alta densidade (0,2
a 0,5 g mL-1), a sua capacidade de dissolver molculas
no-volteis de alta massa molar. Por exemplo, o dixido
de carbono supercrtico dissolve n-alcanos com 5 a 30
tomos de carbono [2]. Alm disso, a alta difusibilidade
do fluido supercrtico garante extraes rpidas.
Outra importante caracterstica do SF que sua densidade
pode ser precisamente ajustada, variando os valores
de temperatura e presso (situao compreendida pela
observao do grfico da Figura 2), enquanto a densidade
de um lquido s alterada pela adio de outros
solventes ou com uma grande elevao da temperatura.
Esta caracterstica de densidade varivel responsvel
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pela grande seletividade dos SF, o que representa uma
vantagem, principalmente para matrizes complexas de
origem ambiental [1,3,4].
Existem SF que podem ser considerados opes em
substituio ao dixido de carbono, mas todos apresentam
desvantagens que inibem o seu uso: os clorofluorcarbonos
so inimigos ambientais, pois destroem a camada de
oznio e causam o efeito estufa, o xido nitroso pode ser
explosivo na presena de matria orgnica e tende a se
decompor espontaneamente, o xennio apresenta custo
muito elevado, a amnia tem alta reatividade, entre outros
[1,5].

O dixido de carbono s no pode ser considerado um

Figura 2. Grfico mostrando a correlao entre densidade, presso
e temperatura, SCF = regio do fluido supercrtico, NCF = regio
prxima ao lquido crtico = regio subcrtica, CP = ponto crtico
(adaptada da Ref. 1).
SF perfeito porque, devido a sua alta densidade, apresenta
uma capacidade limitada de dissolver molculas polares.
Esta desvantagem geralmente contornada pela adio
de modificadores, tambm chamados de co-solventes
ou entrainers. Os modificadores podem ser solventes
orgnicos, reagentes derivatizantes ou reagentes de par-
inico. Eles so adicionados continuamente no fluxo de
SF (acarretando na necessidade do uso de uma segunda
bomba) ou diretamente na amostra. Neste caso, as
vantagens so o favorecimento da dessoro do analito e a
diminuio do volume de solvente, mas a desvantagem a
necessidade de um perodo esttico adicional [1,5,8].

A funo dos modificadores facilitar a solubilidade e

a dessoro do analito do stio ativo da matriz. Porm,
Os fluidos supercrticos mais utili- os co-solventes devem ser adicionados em baixa
zados concentrao (a concentrao mais usada de no mximo
10% v/v), pois uma adio excessiva pode ocasionar efeitos
Sem dvida, o fluido supercrtico mais utilizado o indesejveis, uma vez que os parmetros crticos do SF
dixido de carbono devido a seus baixos parmetros so alterados para condies mais drsticas, podendo
crticos (Tabela 2), no toxicidade, no inflamabilidade, levar a condies subcrticas, na qual a seletividade
no reatividade, possibilidade de obteno com alto grau reduzida, pode-se necessitar de uma etapa de clean-up
de pureza, grande acessibilidade, baixo custo e ser gasoso prvia anlise e a eficincia da coleta do soluto extrado
em temperatura ambiente (o que facilita a separao do corre o risco de ser prejudicada [1]. A incorporao do
analito extrado) [1,3,4,7]. modificador altera muito o poder de solvatao do SF e
o efeito na transferncia de massa tambm modificado,
Tabela 2. Temperatura, presso e densidade (dc) crticas para alguns especialmente se o modificador interagir com o soluto
solventes [1]. [1]. Os modificadores mais utilizados so os solventes
Solvente Tcrtica /C Pcrtica /MPa dcrtica / g mL-1 orgnicos e dentre eles o mais empregado o metanol, mas
Xennio 16,6 5,76 1,10 a acetona, o clorofrmio, o diclorometano e a acetonitrila
Trifluorometano 25,9 4,69 0,52
tambm tm sido bastante usados [8].
Clorotrifluorometano 29,0 3,87 0,58
A gua, apesar de muitas vezes ser considerada prejudicial
Dixido de Carbono 31,0 7,29 0,47 no mecanismo de extrao, tm sido utilizada em alguns
xido Nitroso 36,5 7,17 0,45 trabalhos como modificadora [9,10], pois verificou-se
Hexafluoreto de 45,5 3,71 0,74 que ela ocasiona um inchao da matriz, o que favorece
Enxofre a extrao em certos casos. O uso de gua supercrtica
Clorodifluorometano 96,4 4,85 ---- apresenta desvantagens, pois as condies de temperatura
Propano 96,8 4,24 0,22 e presso necessrias so elevadas e nestas condies, se
uma desgaseificao muito eficiente no for realizada,
Amnia 132,4 11,13 0,24
a gua torna-se muito corrosiva para o sistema de ao
Triclorofluorometano 198,0 4,35 ----
inoxidvel.
gua 374,0 21,77 0,30

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Uma alternativa recente e interessante ao uso de dixido
de carbono modificado, empregada na extrao de
compostos polares, o uso de gua subcrtica, isto , gua
aquecida sob condies moderadas e constantes de presso.
Nestas condies, a presso apresenta menor efeito, pois
as mudanas de densidade so menores. temperatura
elevada (~200 C) e presso de aproximadamente 5 MPa,
a polaridade da gua torna-se similar do metanol ou da
acetonitrila e a tenso superficial e a viscosidade tambm
so reduzidas para valores prximos as do metanol e da
acetonitrila [11,12].
Field et al. [13] utilizaram a SFE com dixido de carbono
e extrao com gua subcrtica, seqencialmente, para
determinar Dacthal e seus metablitos cidos (mono e
dicarboxlicos) em solo. A recuperao dos metablitos
cidos utilizando SFE com dixido de carbono com
metanol e acetonitrila foi menor que 50%, mas com gua
subcrtica foi maior que 90%.
Crescenzi et al. [14] analisaram multirresduos de
herbicidas em solo utilizando gua subcrtica, obtendo
resultados superiores aos obtidos com extrao Soxhlet e a
extrao por ultrassonificao (USE - Ultra Soniffication
Extraction).
Operao da SFE
O processo de SFE pode ser dividido em quatro estgios
principais: dessoro do analito da matriz, solubilizao
do analito pelo fluido supercrtico, arraste do analito para
fora da clula de extrao e coleta do analito extrado
[7,15]. A Figura 3 mostra um esquema de um sistema
bsico de SFE.
Figura 3. Esquema de operao de uma extrao com fluido
supercrtico, incluindo a etapa de concentrao (opcional) e a etapa de
anlise qumica [16].
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A operao de extrao inicia-se com o bombeamento
do solvente para a clula extratora que contem a amostra.
O gs ento pressurizado e aquecido at chegar s
condies desejadas. Na clula extratora, ocorre o contato
entre a amostra e o fluido supercrtico, que pode ser de
maneira dinmica, na qual o SF continuamente passado
atravs da matriz ou esttica, na qual se emprega uma
quantidade fixa de SF que permanece um perodo de
tempo em contato com a matriz, acontecendo a extrao.
Aps esta etapa, o extrato obtido levado at um restritor
(fixo ou varivel), no qual h um controle de temperatura
e presso. O extrato separado do fluido, que retorna ao
seu estado fsico original (devido despressurizao),
recolhido em um sistema de coleta utilizando geralmente
um solvente, um sistema criognico, uma reteno em
fase slida adequada ou ainda acoplamento on-line com
um sistema de anlise ou deteco. O solvente extrator
normalmente recolhido e reciclado.
Parmetros da SFE
Os parmetros que governam a SFE so principalmente:
presso, temperatura, natureza da matriz e polaridade do
fluido extrator [5,7].
Presso
Existe uma presso, conhecida como threshold
pressure, na qual o soluto comea a se solubilizar no
fluido supercrtico. Esta zona de solubilidade aumenta
muito rapidamente com a presso, que corresponde ao
aumento rpido na densidade do fluido, at atingir um
valor mximo. Aps o valor mximo ocorre ligeira queda
de solubilidade com o aumento da presso, o que pode ser
explicado pelas foras de repulso entre as molculas do
soluto dissolvidas no fluido supercrtico.
O controle da presso permite realizar uma extrao
seletiva. A ttulo de exemplo, pode-se realizar a extrao
seletiva de alcanos a uma temperatura de 45 C e uma
presso de 7,5 MPa, em relao aos hidrocarbonetos
poliaromticos (PAH), extrados a uma temperatura de
45 C e uma presso de 30 MPa [5,7,17].
Temperatura
Um aumento da temperatura, presso constante, ocasiona
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uma diminuio na densidade do fluido supercrtico e
portanto no seu poder de solvatao. Logo, os compostos
no volteis tero sua solubilidade diminuda nestas
condies e em conseqncia, o rendimento da extrao
ser diminudo. O comportamento dos compostos volteis
mais complexo, pois a solubilidade deles no fluido
supercrtico depende do poder de solvatao do fluido e
das tenses do vapor [7].
Nas matrizes naturais, nas quais a grande maioria dos
solutos encontra-se fixo nos stios ativos da matriz, uma
elevao da temperatura resulta em um aumento do
rendimento de extrao, independente da volatilidade do
soluto. Isto ocorre pois h um aumento na energia trmica,
que facilita a dessoro dos solutos fixos nos stios ativos
da matriz [7,17].
O ponto de fuso dos solutos de interesse tambm um
fator importante, uma vez que muitos solutos dissolvem-
se mais facilmente no fluido supercrtico se estiverem no
estado lquido [17].
Deve-se lembrar que a elevao da temperatura
prejudicial no caso de molculas orgnicas termolbeis.
Natureza da matriz
O rendimento da extrao depende fortemente das
caractersticas da matriz, principalmente natureza dos
stios ativos, superfcie especfica, porosidade, polaridade
e umidade [7].
Em anlises ambientais utilizando SFE, a matriz mais
comum estudada o solo, o qual por si j constitui
uma cincia especfica [17]. Para aumentar a superfcie
de contato entre a matriz e o SF, intensificando a
transferncia de soluto para o SF, as partculas do solo
devem ser as menores possveis. Amostras de solo com
alto teor de enxofre elementar devem sofrer a adio de
cobre particulado, pois a formao de sulfeto de cobre
inibe possveis interferncias, uma vez que o enxofre
pode ser extrado durante a SFE e causar obstrues no
restritor [9].
A presena de gua na amostra um assunto delicado.
Como regra geral, quantidades ao redor de 5% podem
favorecer o rendimento da extrao devido ao efeito
de inchao da amostra, facilitando a difuso do fluido
supercrtico e aumentando a polaridade do fluido,
funcionando como um modificador. Um excesso de
gua, por outro lado, vai ocasionar uma diminuio
no rendimento da extrao, principalmente devido
formao de plugging no restritor, ocasionado pela
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baixa solubilidade da gua no fluido supercrtico. Devido
a isso, se o fluido supercrtico utilizado na extrao for o
dixido de carbono provavelmente ocorrer a formao de
pequenas partculas de gelo [5,8].
Para evitar a presena indesejvel da gua, um
procedimento comumente adotado a adio de agentes
secantes, como o Hydromatrix (uma terra de diatomcea
peletizada), o sulfato de magnsio, o sulfato de sdio, o
celite ou a celulose CF-1. As desvantagens dos sulfatos
de sdio e magnsio so as baixas capacidades relativas
de reteno de gua e, alm disso, o sulfato de magnsio
aquece quando hidrata. Os sulfatos podem ainda obstruir
o restritor devido a suas partculas pequenas e formar
aglomerados quando misturados com a gua. De fato, o
Hydromatrix parece ser o agente secante mais eficiente,
apresentando, como principal vantagem, o fato de reter
at duas vezes sua massa em gua. Um ponto a ser
considerado, que os agentes secantes Hydromatrix,
celite e celulose CF-1 mostraram reteno parcial de
alguns pesticidas [5].
Polaridade do fluido extrator
Como previamente mencionado, a presena de um
modificador altera a polaridade do SF. Os mecanismos
de interao do modificador no so bem explicados, mas
existem quatro modos de ao propostos [5]:
ocorre um aumento da solubilidade dos solutos devido
mistura do SF com o solvente polar;
ocorre uma troca dos solutos fixos nos stios ativos da
superfcie da matriz pelo solvente modificador;
h uma fixao do solvente modificador na superfcie
da matriz evitando que ocorra uma readsoro dos
solutos;
ocorre uma solvatao adicional da matriz (inchao)
facilitando a penetrao do SF.
Provavelmente, em amostras de solo contaminadas
naturalmente, matrizes vegetais e biolgicas, os trs
primeiros modos de ao ocorram simultaneamente [7].
SFE e Outras Tcnicas de Extrao
Nas ltimas dcadas, a preocupao com o desenvolvimento
de tcnicas analticas mais modernas foi bastante intensa,
fazendo com que hoje a etapa de anlise apresente alto
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grau de tecnologia, rapidez, preciso e exatido.
O mesmo no ocorreu com a etapa de preparo da amostra.
Assim, mais recentemente, percebeu-se que esta etapa
representa uma parcela excessiva do tempo (61%) [1] e do
custo total da anlise, e tambm a maior responsvel
pelo erro associado ao resultado final.
Esta realidade ocasionou uma grande preocupao com
o desenvolvimento das tcnicas de extrao de analitos
de matrizes complexas, pois sem elas a determinao
no possvel. Buscando principalmente, as seguintes
caractersticas:
Rapidez;
Baixo custo por extrao;
Reduzido consumo de solventes orgnicos;
Baixa manipulao;
Boa preciso e exatido;
Versatilidade;
Boa recuperao;
Facilidade de automao.
Tm-se desenvolvido tcnicas de extrao alternativas
para as tradicionalmente utilizadas (que no possuem tais
caractersticas): extrao lquido-lquido (LLE - Liquid-
Liquid Extraction), utilizada para amostras lquidas e
extrao por solvente (Soxhlet), utilizada para amostras
slidas.
A extrao em fase slida (SPE - Solid Phase Extraction)
e a microextrao em fase slida (SPME - Micro Solid
Phase Extraction), tm substitudo, com sucesso, a
maioria das aplicaes da LLE. Como alternativa
extrao Soxhlet surgiram a extrao assistida por
microondas (MAE - Microwave Assisted Extraction),
a extrao com fluido supercrtico (SFE), a extrao por
ultrassonificao (USE - Ultra Soniffication Extraction)
e a extrao por solvente acelerado (ASE - Accelerate
Solvent Extraction), sendo que a SFE e a ASE so as que
tm se mostrado mais atrativas para substituir a extrao
Soxhlet.
MAE e USE so tcnicas baseadas na utilizao de uma
quantidade reduzida de solvente, escolhido de acordo
com a natureza do analito de interesse, no qual o processo
de extrao acelerado pelo uso de um tipo de energia,
microondas e ultra-som, respectivamente. Os resultados
de extrao obtidos so geralmente equivalentes aos da
extrao Soxhlet, mas o tempo gasto no ultrapassa 30
min, na maioria dos casos [18].
A ASE a tcnica mais recente e utiliza temperatura
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elevada (50-200 C) e, conseqentemente, presso alta
(3,5-21 MPa), para manter o solvente no estado lquido.
Esta tcnica permite obter extraes quantitativas em
aproximadamente 15 min. [18].
O inconveniente principal da USE, MAE e ASE que
estas tcnicas, inevitavelmente, co-extraem compostos
indesejveis da matriz, resultando na necessidade de
incluir uma etapa de clean-up [18].
Assim, a SFE apresenta uma vantagem importante sobre
as demais tcnicas citadas, pois alm de ser rpida e utilizar
baixo volume de solventes, possui uma alta seletividade,
excluindo a necessidade de eliminao de interferentes,
previamente anlise [18].
O tempo de preparo de uma amostra utilizando SFE
pode variar entre 15 min a 2 h, enquanto que utilizando
extrao Soxhlet este tempo oscila entre 16 e 30 h. O
volume de solvente orgnico gasto em uma SFE , em
mdia, de 15 mL (se o trapeamento for realizado com
solvente), j utilizando a extrao Soxhlet o volume mdio
de solvente gasto de 150 mL. Calcula-se que o custo
de extrao por amostra, utilizando SFE seja ao redor de
US$ 5.50 versus US$ 22.00 para o mtodo convencional
[16].
Estes e outros fatores tm despertado a ateno dos
pesquisadores para a SFE e muito se tem investido no
desenvolvimento e investigao de novas e variadas
aplicaes para esta tcnica de extrao, principalmente
na rea ambiental, devido complexidade das matrizes
envolvidas (que requerem um mtodo eficiente de
extrao) e pelo fato de que, nos dias atuais, o interesse
global nesta rea supera qualquer outra.
Outros fatores que impulsionaram o desenvolvimento e o
aumento da utilizao da SFE em escala analtica foram:
a) o investimento e a disponibilizao de equipamentos
comerciais, sendo atualmente sete os fabricantes de
equipamentos, com a ISCO liderando o mercado [11,12]
e b) o surgimento de um mtodo oficial da Agncia
de Proteo Ambiental Norte-Americana (EPA -
Environmental Protection Agency), em 1992 (Mtodo
3560 para determinao de hidrocarbonetos de petrleo
em solos). Hoje existem mais dois mtodos oficiais da
EPA que utilizam SFE: Mtodo 3561, para anlise de
hidrocarbonetos aromticos polinucleares (PAH) e
mtodo 3562, para anlise de bifenis polinucleares (PCB)
e pesticidas organoclorados (OCP) em solos, sedimentos,
aerossis e outros materiais slidos.
Dentre as principais desvantagens da SFE devem-se citar:
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[12,19].
Alto custo instrumental (de US$ 10 a 80 mil);
Grande nmero de parmetros para otimizar e
controlar;
Laborioso desenvolvimento de mtodo;
Condies de extrao fortemente dependentes da
matriz.
Um dos fatores importantes para decidir se as vantagens
da SFE compensam as desvantagens o nmero de
anlises que o laboratrio interessado na tcnica realiza.
Aplicaes da SFE em Qumica
Analtica
Apesar das aplicaes da SFE na rea analtica serem
relativamente recentes, meados da dcada de 80, esta
tcnica de extrao tem sido utilizada h muito tempo
em aplicaes industriais. Os primeiros a utilizarem o
poder de solvatao do SF foram Hannay e Hogarth em
1879 [1], estudando a solubilidade do cloreto de cobalto
(II), cloreto de ferro (II), brometo de potssio e iodeto de
potssio em etanol supercrtico [1]. Aps isto, os estudos
com SF foram intensificados surgindo vrias patentes para
extrao de diversos produtos naturais, como extrao de
cafena do caf, extrao da nicotina do tabaco, obteno de
aromatizantes de diversas especiarias, alm de aplicaes
que incluem extrao de leos vegetais, preparao de
alimentos dietticos (eliminao de gorduras), purificao
de compostos e etc. Sem dvida, a aplicao industrial de
maior destaque a obteno do caf descafeinado, que
antes da utilizao da SFE era obtido por extrao com
solventes orgnicos txicos.
Hoje, as aplicaes da SFE so muito numerosas e
variadas, incluindo amostras ambientais (solo, gua, ar,
sedimentos, suspenses e tecidos animais), alimentos
(frutas, vegetais, cereais, tecidos animais...), produtos
naturais (leos essncias, aromas...), frmacos (drogas de
abuso, hormnios...) e polmeros.
Muitas pesquisas tentam mostrar as potencialidades do
uso de SFE. Tais pesquisas deixam claro que, apesar
da potencialidade, isto , da SFE poder ser aplicada
uma ampla variedade de matrizes, para determinao de
diversos analitos, muitas vezes as condies especficas
que devem ser usadas para tornar a extrao possvel ou
eficiente, no compensam as vantagens apresentadas, e
portanto, apesar de potencial, o uso da SFE deixa de ser
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vivel.
Algumas aplicaes mais recentes e relevantes foram
selecionadas, com grande destaque para as aplicaes na
rea ambiental:
Amostras ambientais
a) Matrizes slidas (solo e sedimentos)
Solo e sedimentos apresentam grande interesse
ambiental, pois sabe-se que eles esto interligados com
os demais compartimentos do ecossistema, existindo
processos de transporte de contaminantes dos solos
(ou sedimentos) para a gua e o ar, influenciando,
portanto, na contaminao do meio ambiente como
um todo.
Sem dvida, o solo a matriz ambiental na qual o uso
da SFE apresenta maior potencialidade e viabilidade.
Isto porque, fora alguns cuidados prvios com a
amostra (controle da umidade, tamanho de partculas
e adio de cobre para eliminao de enxofre)
nenhuma condio especial de anlise necessria.
A amostra slida adicionada diretamente na clula
extratora. Alm disso, os conceitos envolvidos so
relativamente simples e bem estabelecidos.
Na maioria dos casos, o dixido de carbono um
fluido supercrtico bastante adequado, sendo que a
necessidade de adio de um modificador depende do
analito.
Os analitos mais extrados em amostras deste tipo
so: PAH, PCB e pesticidas.
Morselli et al. [20] determinaram hidrocarbonetos de
petrleo em solos utilizando SFE. Foram utilizadas
amostras de solo fortificadas para as determinaes.
As extraes foram realizadas em um equipamento
Hewlett-Packard modelo 7650T, utilizando dixido
de carbono e extrao dinmica e esttica. Foram
adicionados 5 ou 10% (v/v) de acetona, como
modificador, diretamente na clula de extrao. As
extraes foram realizadas a uma temperatura de 80
C e uma presso de 22,7 MPa, sendo a coleta feita
em fase estacionria octadecilsiloxano (C18).
A soro dos hidrocarbonetos foi avaliada utilizando
a equao de Freundlich e verificou-se que ela
depende fortemente do contedo de matria orgnica
dos solos. Avaliou-se que as recuperaes do analito
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dependem da soma do equilbrio entre as extraes
dinmicas e estticas. Verificou-se que a presena de
5% (v/v) de acetona como modificador foi a condio
que forneceu os melhores resultados.
Berset e Holzer [10] desenvolveram um mtodo para
extrao, utilizando SFE, e quantificao, utilizando
cromatografia gasosa de alta resoluo acoplada
espectrometria de massas, de alguns dos principais
contaminantes ambientais: os PAH, os PCB e os
OCP.
A matriz analisada era constituda por uma suspenso
de esgoto domstico, industrial e esgoto obtido aps
o escoamento superficial de gua. Foi adicionado
cobre s amostras secas, para um tratamento
prvio, e as SFE foram realizadas utilizando um
equipamento Hewlett-Packard 7680T, sendo as
condies de extrao diferenciadas para cada tipo de
contaminante.
As extraes de PAH foram realizadas em trs etapas
com extraes dinmicas e estticas. A primeira
utilizou dixido de carbono, temperatura de 80 C,
presso de 12,1 MPa e coleta em fase slida (C18).
Na segunda o SF foi dixido de carbono com 1% (v/v)
de metanol e 4% (v/v) de diclorometano, temperatura
de 120 C, presso de 33,5 MPa. A terceira etapa
tambm foi realizada com dixido de carbono puro
como SF nas mesmas condies de temperatura e
presso da segunda etapa.
A primeira etapa de extrao dos PAH visou a
extrao dos PAH mais volteis, a segunda etapa
extraiu os PAH menos volteis e a terceira etapa
foi usada para purgar o sistema e prepar-lo para a
prxima extrao. Antes do experimento, houve a
adio de 20% (v/m) de gua para ocupar os stios
polares da matriz e facilitar a extrao.
As extraes de PCB foram realizadas empregando
extrao dinmica e esttica, com dixido de carbono
puro, temperatura de 80 C e presso de 30,5 MPa.
A coleta do extrato foi feita em Florisil.
Para os OCP, as extraes foram realizadas dinmica
e estaticamente, utilizando dixido de carbono puro
como SF, temperatura de 50 C, presso de 29,9 MPa
e coleta em C18.
Os extratos sofreram uma etapa de clean-up
utilizando colunas de slica gel (PAH e PCB) e coluna
de terra de diatomceas (OCP). As recuperaes
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obtidas foram boas, com valores muito prximos a
100% na grande maioria dos casos.
Os nveis de concentrao encontrados foram, em
mdia, de 6,9 mg/kg (massa seca) para a soma de 16
PAH constantes na lista da EPA; 0,1 mg/kg (massa
seca) para a soma de sete PCB estudados, e 0,002-
0,072 mg/kg (massa seca) para os OCP determinados
no esgoto. S foi encontrada correlao entre tipo de
esgoto e grau de contaminao para os PAH.
Rissato et al. [21] desenvolveram um mtodo
multiressduo para determinao de pesticidas
organoclorados, organonitrogenados,
organofosforados e pireterides em solo usando a
SFE e compararam o rendimento obtido com o de
extrao slido-lquido convencional. A determinao
dos pesticidas foi feita por cromatografia gasosa com
detector de captura de eltrons (GC-ECD) e por
cromatografia gasosa acoplada espectrometria de
massas (GC-MS), precedida de uma etapa de clean-
up utilizao cartuchos C18. Alguns parmetros
experimentais relevantes para a eficincia de extrao
foram estudados, presso de 40 MPa, temperatura
de extrao de 60 C e tempo de 20 min. Como a
soro de pesticidas pode ser afetada pelo tempo de
residncia no solo, amostras de solo fortificadas foram
extradas aps perodos diferentes de repouso (1, 20
e 40 dias). Uma amostra de solo real, coletada em
um campo agrcola em Bauru (SP-Brasil), tambm
foi analisada empregando as condies experimentais
j otimizadas para SFE e extrao slido-lquido.
Os resultados obtidos mostraram que a SFE pode
ser utilizada para extrair uma grande quantidade de
pesticidas de diferentes classes de amostras de solo
com menor tempo de extrao e uso reduzido de
solventes, obtendo-se valores de recuperao acima
de 80%.
b) Matrizes lquidas (gua)
A gua o recurso natural de maior importncia para
os seres vivos, uma vez que um homem (por exemplo)
pode passar vrios dias sem comer, mas no pode
passar 2 dias sem beber gua. Alm disso, o homem
tem cada vez mais conscincia de que a gua um
recurso finito e ento, vem crescendo a preocupao
com relao s contaminaes deste recurso.
Esta matriz talvez a que apresente maiores
dificuldades nas tentativas de utilizao da SFE.
O parmetro decisivo na extrao de amostras de
 Chemkeys - Liberdade para aprender
gua (ou lquidas genericamente) o coeficiente de
distribuio do analito entre o SF e a fase lquida. Do
ponto de vista do transporte do analito, a extrao
dinmica preferida em relao esttica devido
a problemas de possveis precipitaes do analito
durante o processo de decrscimo de presso.
Poucos trabalhos [22-25] tm sido realizados com
SFE diretamente em matrizes aquosas, apesar de
existirem clulas extratoras prprias para este uso
[7]. Este tipo de extrao tem maiores possibilidades
quando o analito apresenta solubilidade reduzida em
gua ou voltil [26].
A SFE pode ser aplicada diretamente s matrizes
aquosas de duas maneiras: a) colocando a amostra
diretamente na clula de extrao especial ou b)
adicionando a amostra a um suporte slido (o mais
usado Celite), que colocado na clula de extrao.
A segunda maneira apresenta a vantagem de se
utilizar o mesmo equipamento usado para amostras
slidas e a desvantagem de permitir a extrao de um
volume reduzido de amostra [26].
A alternativa freqentemente utilizada, em substituio
a SFE direta, para extrao de matrizes lquidas,
o uso da SPE previamente SFE. Primeiramente, a
amostra aquosa submetida SPE, utilizando como
sorvente disco de extrao com grupos octadecil (C18)
ou outro, e posteriormente a fase slida, contendo os
solutos de interesse, levada para a SFE [26]. Isto,
pode acarretar perdas de reprodutibilidade, aumento
do erro da anlise e diminuio da recuperao, pois
ocorre o acoplamento e a soma de duas tcnicas de
extrao, cada qual com suas desvantagens. Alm
disso, a extrao dos analitos retidos em fase slida
utilizando eluio com solvente mais simples e rpida
que a eluio usando SFE, o que envolveria, ainda, o
desenvolvimento de um novo mtodo. A vantagem
do uso do SF para extrair os analitos da fase slida,
estaria centralizada, principalmente, em aplicaes
envolvendo o uso on-line de cromatografia gasosa
(GC) pois, como a maioria dos SF um gs em
temperatura ambiente, isto facilitaria o acoplamento.
Porm, a SFE com matrizes aquosas direta apresenta
a desvantagem de necessitar de extraes contnuas
(em recirculao) para melhorar as recuperaes,
que mesmo assim so menores que as obtidas com
SPE/SFE. Desta forma, a SFE direta torna-se mais
demorada.
Os contaminantes mais estudados em gua so os
PAH, fenis e pesticidas.
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Messer e Taylor [27] estudaram a recuperao de
traos de 39 analitos semi-volteis de amostras de
gua fortificadas. Neste estudo foi utilizado 1 litro de
amostra, que primeiramente foi passado por um disco
de extrao, Empore C18, sendo posteriormente
extrado em sistema de SFE.
Foi realizada uma SFE com dixido de carbono puro
e outra com dixido de carbono modificado com
acetona (melhor condio para os compostos mais
polares). Em ambos os casos, a coleta do analito foi
feita em cartucho C18, sendo eludo posteriormente
com diclorometano. A anlise dos extratos foi feita
por cromatografia gasosa acoplada ao espectrmetro
de massas (GC/MS). As recuperaes obtidas
variaram entre 35-158%, com estimativa do desvio
padro relativo entre 3,3-15%.
Sandra et al. [28] analisaram amostras de suco de
fruta fortificadas com pesticidas, utilizando SFE
e GC/MS. Os autores verificaram que a adio de
uma fase slida na clula de extrao foi essencial,
e para este propsito foi usada a fase Chromsorb W,
formando um sandwich com a amostra lquida.
Aps as extraes a coleta foi feita em cartucho C18 e
as recuperaes obtidas ficaram entre 85-103%.
Kane et al. [29] compararam os resultados obtidos,
para extrao de surfactantes no-inicos utilizando
a SFE direta de amostras aquosas e o uso de SPE
previamente SFE. O mtodo de SFE direta utilizou
uma clula de extrao modificada para maximizar
a exposio do analito e a extrao foi realizada
continuamente at atingir 2 h. As recuperaes
obtidas com SFE direta no excederam 60%, com um
tempo de extrao de 2 h, enquanto que com o uso de
SPE/SFE as recuperaes foram de aproximadamente
90% e o tempo de extrao foi de 30 min.
c) Matrizes gasosas (ar)
Muitos compostos orgnicos volteis podem ser
encontrados no ar (atmosfrico, de ambiente fechado
ou aberto), principalmente sorvidos em material
particulado, poeira ou aerossis, apontando possveis
contaminaes ambientais. Como se trata de materiais
que estariam entrando diretamente em nossas vias
respiratrias, sua anlise de grande interesse.
Vrios processos antropognicos e biognicos
contribuem para a presena de compostos orgnicos
na fase particulada da troposfera, entre eles: a emisso
10 Chemkeys - Liberdade para aprender
de veculos movidos gasolina e diesel, a queima de
madeira, a abraso de superfcies de folhas de plantas,
o cozimento de alimentos, o uso de equipamentos
movidos a gs natural, a fumaa de cigarros, etc..
Cada uma destas fontes emite uma mistura complexa
de compostos orgnicos e como conseqncia, os
aerossis ambientais contm mais de cem compostos.
Algumas das classes de compostos geralmente
encontradas so: os alcanos, os cidos carboxlicos,
os PAH, os monoterpenes, os furanos, os fenis, os
benzenos alquilados e at os pesticidas [30].
Para anlise desta matriz, com interesse nos
contaminantes orgnicos volteis livres ou sorvidos
no material particulado, a primeira etapa a passagem
do ar por um filtro para reteno dos analitos e este
filtro submetido extrao ou o material slido
nele retido. Este procedimento inerente matriz e
portanto no constitui um fator complicante na SFE,
que ainda apresenta a vantagem de que, na maioria dos
casos, a mesma clula utilizada para coleta da amostra
tambm usada na extrao desta, diminuindo a
manipulao e portanto os erros.
Swami et al. [31] retiveram os termicidas, clordane e
clorpirifos, provenientes do ar ambiente, em Florisil e
os submeteram a SFE com dixido de carbono como
SF, em temperatura de 80 C e presso de 37,9 MPa.
O material extrado foi coletado em cartucho de fase
slida (Bondasil C18) e eludo com hexano (uma
poro de 1,3 mL e outra de 1 mL). A tcnica de
anlise utilizada foi GC com detector de captura de
eltrons. As eficincias de reteno dos analitos em
Florisil e as eficincias de extrao foram, em mdia,
de 85%. Utilizando 20 m3 de ar eles obtiveram limites
de deteco de 0,1 ng/m3 para clordane e 1 ng/m3
para clorpirifos.
Para avaliar a qualidade dos resultados obtidos com
a SFE muitos autores aconselham a comparao com
resultados obtidos com outras tcnicas empregadas
com a mesma finalidade. Liompart et al. [32]
apresentaram uma comparao entre as principais
tcnicas que vm substituindo a tradicional extrao
Soxhlet: a SFE, a USE e a MAE. As trs tcnicas
foram utilizadas para extrao de compostos fenlicos
(fenol, o-cresol, m-cresol e p-cresol) em solos, tendo
os resultados de recuperao e preciso comparados.
A Tabela 3 apresenta os principais parmetros de
extrao de cada tcnica.
A SFE foi realizada com dixido de carbono e o
modificador, metanol, foi adicionado diretamente na
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amostra. Para a coleta do extrato utilizou cartucho de
fase slida C18, com posterior eluio com hexano.
Foram testadas extraes com SF e microondas com
a amostra derivatizada com piridina.
Tabela 3. Parmetros utilizados na extrao de fenis em solo por
SFE, MAE e USE.
Parmetro SFE MAE USE
Temperatura de 45 130 Ambiente
extrao (C)
Volume de 0,1 (metanol) 2 (hexano)
solvente (mL) 30
2 (hexano, (diclorometano)
8 (acetona)
eluio)
Tempo total de 29,0 3,87 0,58
extrao (min)
A SFE foi realizada com dixido de carbono e o
modificador, metanol, foi adicionado diretamente na
amostra. Para a coleta do extrato utilizou cartucho de
fase slida C18, com posterior eluio com hexano.
Foram testadas extraes com SF e microondas com
a amostra derivatizada com piridina.
Para amostras com maior contedo de carbono
(maior reteno dos analitos), a SFE apresentou
resultados de recuperao menores que a MAE. Nos
demais casos, as recuperaes das duas tcnicas foram
boas (prximas a 100%) e quase 50% superiores aos
resultados obtidos com a USE.
Sabendo dos resultados (recuperaes com SFE
equivalentes as obtidas com MAE, sendo ambas
superiores as obtidas com USE), pode-se observar
novamente a Tabela 3 e verificar que a SFE apresentou
maior tempo de preparo da amostra (25 min), mas
menor consumo de solvente orgnico (0,1 mL de
metanol), alm de uma temperatura bem menor que
a utilizada na MAE. Porm, deve-se lembrar que
o custo de implementao da SFE maior que da
MAE e que os autores realizaram de 4-6 extraes
simultneas no sistema de MAE (o qual permite at
12 extraes simultneas), enquanto que a SFE no
permite extraes simultneas.
Heemken et al. [19] compararam o uso de SFE e ASE
com extrao Soxhlet, USE e saponificao metanlica
para determinao de microcontaminantes orgnicos
em material marinho particulado. Os analitos
estudados incluram PAH, hidrocarbonetos alifticos
e clorados e os sedimentos marinhos analisados foram
materiais certificados.
As recuperaes obtidas, para os PAH, com SFE
11 Chemkeys - Liberdade para aprender

variaram entre 96 e 105% e com ASE entre 97 e

108%. Comparando com os valores certificados, as
recuperaes de SFE e ASE ficaram entre 86 e 88 %
destes valores.

Os resultados de recuperao obtidos para os alcanos,

utilizando SFE, de 93 115%, e ASE, de 94 107%,
foram iguais aos obtidos com Soxhlet, USE e MAE.
As estimativas de desvio padro relativos estavam na
faixa de 2,9 7,5 % para PAH e alcanos, usando SFE
e ASE.

A vantagem da extrao com saponificao metanlica
que a quantidade de gua da matriz no influencia
na extrao, porm o tempo de anlise de 2,5 h e o
volume de solvente orgnico, de 100 mL (hexano),
so grandes desvantagens.
A maior vantagem de ASE foi o tempo de extrao
(15 min), contra 90 min da SFE. A vantagem da SFE
foi o menor consumo de solvente (15 mL) contra 20
mL da ASE, porm a diferena pequena.
Bowyer e Pleil [33] utilizaram a extrao Soxhlet para
comparar os resultados obtidos com SFE na extrao
de compostos orgnicos de amostras de carpetes. Em
ambas as tcnicas de extrao, as amostras de carpete
foram extradas diretamente, sem tratamento prvio.
Na extrao Soxhlet foram utilizados 200 mL de
diclorometano e refluxo por 16 18 horas. Na SFE
foi utilizado dixido de carbono como SF e a coleta
foi realizada em 3 4 mL de diclorometano, com um
tempo total de extrao entre 70 e 80 minutos.
As extraes Soxhlet e SFE forneceram resultados
similares, em nmero e tipos de compostos extrados.
Isto pode ser visto na Figura 4, que mostra uma
comparao entre os cromatogramas obtidos por
GC/MS, para os extratos das duas tcnicas.
Figura 4b. Cromatograma de ons totais ilustrando os resultados
obtidos para a extrao SFE de uma amostra de carpete.
Devido s vantagens que a SFE apresenta em relao
extrao Soxhlet, principalmente em termos de
tempo de extrao e consumo de solventes, ela foi
considerada uma alternativa vivel e superior, no caso
apresentado.
Drogas de abuso
Uma das aplicaes neste campo refere-se anlise de
cabelo humano para verificao da presena de cocana e
benzolegonina [34].
Radcliffe et al. [35] apresentaram um breve relato das
atividades desenvolvidas com auxlio de fludo supercrtico
na determinao de drogas derivadas do pio, cocana,
cannabis e sedativos. As metodologias utilizadas podem
servir tanto para determinar a concentrao destas drogas
no momento da morte quanto para avaliar a dependncia
a longo prazo. Tambm foram apresentados resultados das
anlises de impresses digitais e resduos de explosivos.
Alimentos

Determinao de flavorizantes em framboezas [36] e

determinao de pesticidas em frutas e vegetais [37].

Boselli e Caboni [38] realizaram a extrao, em

microescala, de fosfolipdeos em amostras de ovo em
p, utilizando dixido de carbono supercrtico em
uma densidade de 1,06 g/mL (presso de 51,7 MPa e
temperatura de 40 C), em uma proporo de 67 g de
extrato por 100 g de amostra. Os resultados mostram que
a metodologia proposta uma boa alternativa para fins
analticos.

Figura 4a. Cromatograma de ons totais ilustrando os resultados Mohamed et al. [39] realizaram a extrao de colesterol
obtidos para a extrao Soxhlet de uma amostra de carpete.

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12 Chemkeys - Liberdade para aprender
em manteiga com metano supercrtico obtido em
temperaturas de 40, 55 e 70 C e presses na faixa de
8,5 a 24,1 MPa, em fluxo semi contnuo. Para determinar
a seletividade do processo, a operao de extrao foi
seguida de adsoro em alumina. Com a metodologia
proposta foi possvel reduzir o nvel de colesterol para 3%
do valor inicial.
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