INOVAES TECNOLGICAS

ESTUDO DE BIOFILMES E O POTENCIAL DE

CORROSO EM AO INOXIDVEL EM GUAS
MARINHAS

Brunela dos Santos Neves brunelasn@gmail.com

Instituto Federal de Educao, Cincia e Tecnologia do Esprito Santo Campus
Vitria

Adriana Marcia Nicolau Korres adrianak@ifes.edu.br

Instituto Federal de Educao, Cincia e Tecnologia do Esprito Santo Campus
Vitria

Viviane Azambuja Favre-Nicolin viviane@ifes.edu.br

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Vitria

IX Simpsio Brasileiro de Engenharia Ambiental, XV Encontro Nacional de Estudantes de

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Engenharia Ambiental e III Frum Latino Americano de Engenharia e Sustentabilidade
 1. RESUMO
Os biofilmes so pequenos ecossistemas complexos e dinmicos, formados por
microrganismos envolvidos em uma matriz de polmeros orgnicos aderidos a uma
superfcie. Microrganismos estruturados em biofilmes demonstram uma preferncia
pelo processo de adeso em diversas superfcies, incluindo ao inoxidvel. O ambiente
marinho um ambiente propcio para associao de microrganismos devido
velocidade das ondas, temperatura do ambiente, potencial eletroqumico de substratos
metlicos imersos na gua do mar e diversos outros fatores que propiciam essa
interao. O presente trabalho tem como objetivo estudar o biofilme e o potencial de
corroso em aos inoxidveis AISI 316 imersos por 40 dias em guas das praias da Ilha
do Boi em Vitoria, ES e Manguinhos na Serra, ES. O estudo incluiu a avaliao do
nmero de unidades formadoras de colnias por cm (UFC/cm) na superfcie dos
cupons de ao, a caracterizao morfolgica, determinao de coliformes totais e
Escherichia coli e pela perda de massa do material em estudo. Os resultados mostraram
um maior nmero de UFC/cm na contagem global de microrganismos aerbios
mesfilos heterotrficos em aos imersos na gua de Manguinhos, observando a
presena de cianobactrias somente nesse ambiente. Estas foram ausentes na superfcie
dos aos imersos na gua da Ilha do Boi, possivelmente pela predominncia de fungos.
O estudo de biofilme no ao inoxidvel em ambientes marinhos se torna importante
devido dinmica de formao e interao dos mesmos com o meio de estudo, podendo
comprometer a balneabilidade da gua do mar como tambm o descarte indevido do
material danificado pela corroso, gerando um grande acmulo de sucata.
Palavras-chave: Biofilmes, Corroso, Ao Inoxidvel, gua Marinha.

2. INTRODUO/OBJETIVO
O ambiente marinho o mais corrosivo de todos os meios naturais e
compreende desde a atmosfera envolvida com sal do mar at regies mais profundas do
oceano com o lodo no fundo do mar. Os componentes e estruturas que esto
normalmente expostos aos meios marinhos so, por exemplo, as bombas e tubulaes
de gua do mar, navios, submarinos, cais, estacas e plataformas de petrleo (PONTE,
2003).

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 Os biofilmes so pequenos ecossistemas complexos e dinmicos, formados por
microrganismos envolvidos em uma matriz de polmeros orgnicos aderidos a uma
superfcie, configurando um modo protegido de desenvolvimento microbiano mediante
as situaes hostis. Microrganismos estruturados em biofilme demonstram uma
preferncia pelo processo de adeso em diversas superfcies inanimadas, incluindo ao
inoxidvel (RECH et al., 2013).
Frequentemente, tem sido observado danos causados em estruturas que esto
expostas a ambientes marinhos devido corroso e a bioincrustao, alm do impacto
ambiental causado e prejuzos s espcies marinhas (MENEZES, 2012). Dependendo
do ponto de vista, os biofilmes podem ser benficos ou nocivos, da a necessidade de
estudar sua formao nesse ambiente como um meio de determinao da resistncia do
mesmo, com o intuito de prevenir danos e proteger o material constituinte de estruturas
instaladas em ambientes marinhos.
Estima-se que o Brasil direciona cerca de 3,5% de seu Produto Interno Bruto
(PIB) na busca de alternativas para conteno e reposio de materiais deteriorados.
Dados tambm apontam que 25% da produo anual de ao do pas so destinados
somente substituio das estruturas danificadas pela corroso. Outro problema que o
descarte indevido do material danificado gera um grande acmulo de sucata (MELLO;
VILA; SILVA, 2015).
vista disso, justifica-se o estudo da comunidade microbiana em superfcie de
ao por nmeros e a perda de massa do material exposto corroso, o que pode
esclarecer sobre a formao de biofilmes e possveis danos associados corroso da
superfcie do ao imersos em guas marinhas.

3. METODOLOGIA
3.1 AMOSTRAGEM DE GUA MARINHA
As amostras de gua foram coletadas semanalmente (sempre nas mesmas praias)
durante 40 dias com o uso de bombonas de 10L cada. As praias de coleta foram Praia
Grande, localizada na Ilha do Boi, Vitria, ES (figura 1) e a Praia da Enseada,
localizada em Manguinhos, Serra, ES (figura 2).

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 A Ilha do Boi est localizada entre os portos de Vitria e Tubaro, importantes
locais de passagem de navios e embarcaes. Manguinhos est localizada no municpio
da Serra, que se situa fora da rea porturia.

Figura 1 - Mapa da localizao da Ilha do Boi (Vitria - ES)

Fonte: GOOGLE MAPS (2016).

Figura 2 - Mapa da localizao de Manguinhos (Serra-ES)

Fonte: GOOGLE MAPS (2016).

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 3.2 MONTAGEM DO REATOR
Cupons de ao inoxidvel AISI 316 j polidos com dimenses de 20x50x1,8
mm, foram limpos individualmente e secos com secador.
Os experimentos foram conduzidos no Laboratrio de Biotecnologia e
Sustentabilidade (LABIOTECS) do Ifes - Campus Vitria, por 40 dias, em dois
sistemas estticos abertos (biorreatores) com capacidade de 15L cada com 10 cupons
cada. Foi feita a renovao semanal da gua do mar para simular o ambiente natural. Os
cupons de ao foram suspensos no estilo varal de modo a ficarem imersos na gua
contida no biorreator. A gua do biorreator foi circulada com bombinhas de aqurio
para uma melhor oxigenao (figura 3).

Figura 3 - Cupons de ao imersos em biorreatores contendo gua do mar

Fonte: AUTORIA PRPRIA (2016).

3.3 ANLISES MICROBIOLGICAS

As anlises microbiolgicas consistiram em enumerao de Unidades
Formadoras de Colnias/cm (UFC/cm), caracterizao morfolgica dos
microrganismos e determinao de coliformes totais e Escherichia coli.

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 Aps o perodo de imerso de 40 dias nos reatores contendo gua do mar, os
corpos de prova foram retirados com pina esterilizada, lavados delicadamente em gua
esterilizada para a retirada de clulas no aderidas. A coleta do material aderido nos
cupons foi realizada em triplicata e com o uso de trs swabs esterilizados. Ento foi feita
e enumerao de UFC/cm. Culturas isoladas foram obtidas a partir das placas de
UFC/cm e as lminas preparadas pela tcnica da colorao diferencial de Gram com
objetivo de caracterizar morfologicamente os isolados.
Tambm avaliou-se a qualidade microbiolgica da gua do reator aps os 40
dias de estudo utilizando-se o mtodo de presena ou ausncia de coliformes totais e
Escherichia coli atravs do uso de substrato cromognico, preconizado pelo Standard
Methods of the Examination of Water and Wastewater (APHA/AWWA/WEF, 2005).

3.4 TAXA DE CORROSO

A determinao da taxa de corroso dos cupons de ao foi feita pelo mtodo da
massa de referncia onde os cupons de ao AISI 316 foram pesados em balana de
preciso (modelo AL 500 Marte) antes do incio do experimento e aps os 40 dias de
imerso em gua do mar, com a retirada do biofilme e com o tratamento apropriado
(DECAPAGEM). A determinao foi feita em triplicata das amostras e posteriormente
foi calculada a mdia.
Como a perda de massa influenciada pela rea exposta e tempo de exposio,
essas variveis foram combinadas e expressas em taxa de corroso (FERREIRA et al.,
2002). De acordo com Associao Brasileira de Corroso (2013) os valores das taxas de
corroso podem ser expressos pela reduo de espessura do material por unidades de
tempo (em mm/ano) e/ou pela perda de massa por unidade de rea, por unidade de
tempo em mg/dm2/dia (mdd).

4. RESULTADOS E DISCUSSO

4.1 ANLISES MICROBIOLGICAS

4.1.1 Unidades Formadoras de Colnias/cm (UFC/cm)

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 A tabela 1 mostra o nmero de UFC/cm obtida a partir dos cupons de ao
imersos por 40 dias em gua das praias de Manguinhos e Ilha do Boi. Foram feitas
contagem global de microrganismos aerbios mesfilos heterotrficos e a contagem de
bolores e leveduras.

Tabela 1 - Nmero de Unidades Formadoras de Colnias por cm nos cupons de ao

316 imersos

Fonte de Contagem Global de Microrganismos Contagem de Bolores e

gua Aerbios Mesfilos Heterotrficos (em Leveduras (em UFC/cm)*
UFC/cm)*

Ilha do Boi 2,5.10 4,0.10

Manguinhos 3,5.10 2,0.10

*A contagem foi feita com menos de 30 colnias

Fonte: AUTORIA PRPRIA (2016).

De acordo com nmero de UFC/cm constatou-se um nmero maior na

contagem global de microrganismos aerbios mesfilos heterotrficos em Manguinhos
comparado com a Ilha do Boi. Este resultado pode estar relacionado ao fato de que em
Manguinhos a diversidade de microrganismos ter sido maior no que refere
classificao morfolgica. Como por exemplo as Cianobactrias que foram isoladas na
gua de Manguinhos e ausentes na Ilha do Boi.
Quanto contagem de bolores e leveduras, observou-se um nmero maior na
Ilha do Boi quando comparado com Manguinhos, possivelmente pela gua da Ilha do
Boi ser um ambiente mais antropizado, com maior circulao de embarcaes, e
possivelmente por apresentar maior quantidade de matria orgnica. Os bolores so
fungos filamentosos que obtm sua nutrio a partir de matria orgnica disponvel no
ambiente e as leveduras so fungos no filamentosos que esto bem difundidos na
natureza sendo disseminados principalmente pelo vento e pelas correntes areas
(TORTORA; FUNKE; CASE, 2010).

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 4.1.2 Caracterizao Morfolgica
A caracterizao morfolgica dos isolados microbianos permitiu avaliar a forma,
o arranjo e a reao tcnica de colorao diferencial de Gram. Foi possvel observar
estreptobacilos Gram positivos, estafilococos Gram positivos e bacilos Gram negativos
como morfotipos microbianos da Ilha do Boi. Como morfotipos microbianos isolados
da superfcie do ao imerso em gua da praia de Manguinhos, estafilococos Gram
positivos, bacilos e diplobacilos Gram positivos, bacilos finos Gram negativos e dois
tipos de cianobactrias.
Pedrs-Ali e Brock (1983) afirmaram que a disponibilidade de substrato, a
fora de corrente ou fluxo da gua do sistema e a alimentao pelo zooplncton so
variveis que podem influenciar na disponibilidade das bactrias na gua em ambientes
naturais.
No presente trabalho, a troca semanal da gua e a circulao da gua simulando
o ambiente natural, influenciaram na diversidade de microrganismos. Essa diversidade
foi encontrada principalmente nos cupons imersos na gua de Manguinhos.
A caracterizao morfolgica mostrou a presena de cianobactrias somente nos
aos imersos na gua de Manguinhos. Estas estiveram ausentes na Ilha do Boi
possivelmente pelo predomnio de fungos na superfcie do ao imerso em gua desse
ambiente.

4.1.3 Coliformes Totais e Escherichia coli

Os resultados no apresentaram fluorescncia azul sob luz ultravioleta para
ambos ambientes (Ilha do Boi e Manguinhos), o que indica ausncia de Escherichia coli
nas amostras. Escherichia coli o indicador da contaminao fecal de ambientes, o que
significa que, quando detectada, indica a presena de patgenos.
Mesmo a caracterizao morfolgica indicando bacilos Gram negativos nos aos
imersos na gua de Manguinhos e bacilos finos Gram negativos nos aos imersos na
gua da Ilha do Boi, os resultados indicaram ausncia de Escherichia coli, portanto
ausncia de patgenos nos dois ambientes.

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 4.2 TAXA DE CORROSAO
O clculo da taxa de corroso pela perda de massa dos cupons de ao indica que
a taxa de corroso foi cinco vezes maior nas amostras imersas nos reatores com a gua
de Manguinhos. A tabela 2 mostra as taxas de corroso dos cupons de ao,
considerando a reduo da espessura do material (mm/ano) e a perda de massa em
MDD (mg/dm/dia).

Tabela 2 - Clculo da taxa de corroso pela perda de massa dos cupons de aos AISI
316 imersos por 40 dias nas guas de Manguinhos e da Ilha do Boi

M1 (g) M2 (g) M3 (g) Mdia (g) Taxa de corroso Taxa de

(mm/ano) corroso
(mdd/dm2/dia)

Ilha i 11.957 11.891 12.248

Ilha f 11.943 11.887 12.234

m 14 4 14 10 0,01147 2,5

Manguinhos i 12.190 12.490 12.066

Manguinhos f 12.157 12.405 12.040

m 33 85 34 50 0,05738 12,5

Fonte: AUTORIA PRPRIA (2016).

Araujo (2011) constatou que a corroso pode ser atribuda especificamente

formao de biofilmes e atividade dos microrganismos neles presentes, por vrios
mecanismos como, por exemplo, pela gerao de agentes corrosivos, cidos orgnicos e
inorgnicos.

5. CONCLUSES/RECOMENDAES
O nmero de UFC/cm mostrou maior contagem global de microrganismos
aerbios mesfilos heterotrficos em Manguinhos (3,5x10) e uma maior contagem de
bolores e leveduras na Ilha do Boi (4,0x10).
Pela caracterizao morfolgica dos microrganismos presentes na superfcie dos
aos imersos na gua da praia de Manguinhos e da Ilha do Boi, observou-se que a troca

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semanal da gua e a circulao da mesma simulando o ambiente natural, influenciaram
na diversidade de microrganismos no encontrados em trabalhos desenvolvidos
anteriormente. E que foi possvel observar a presena de cianobactrias somente nos
aos imersos na gua de Manguinhos, possivelmente pelo predomnio de fungos na
superfcie dos aos imersos na gua de Ilha do Boi.
Mesmo a caracterizao morfolgica indicando bacilos Gram negativos nos aos
imersos na gua de Manguinhos e bacilos finos Gram negativos nos aos imersos na
gua da Ilha do Boi, os resultados indicaram ausncia de Escherichia coli, portanto
ausncia de patgenos nos dois ambientes, aps 40 dias de experimento.
Mostrou-se um processo corrosivo maior no ao com o biofilme de Manguinhos
quando comparado ao da Ilha do Boi, na qual a taxa de corroso por perda de massa foi
cinco vezes maior nas amostras imersas em gua de Manguinhos.
O estudo de biofilme no ao inoxidvel em ambientes marinhos se torna
importante principalmente na rea de Engenharia Sanitria e Ambiental devido a
dinmica de formao e interao dos mesmo com o meio de estudo, podendo
comprometer a balneabilidade da gua do mar como o descarte indevido do material
danificado pela corroso gerando um grande acmulo de sucata.

6. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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