Revista Brasileira de Farmacognosia
Estudo fitoqumico de Erythraea centaurium,
Jacaranda caroba, Remijia ferruginea e
Solanum paniculatum visando identificar
marcadores qumicos para o fitoterpico
Ierobina
Braga, F.C.1, *, Valadares, Y.M.1, Costa, M.A.1, Lombardi, J.A.2,
Oliveira, A.B. de1
1
Laboratrio de Fitoqumica e Biologia Farmacutica,
Faculdade de Farmcia, UFMG
2
Departamento de Botnica, Instituto de Cincias Biolgicas,
UFMG
Resumo
O fitoterpico Ierobina, comercializado no
mercado nacional h 67 anos, tem uso indicado para o
tratamento de dispepsias. O fitoterpico constitudo
pelos extratos fluidos de trs espcies nativas (Solanum
paniculatum, Remijia ferruginea e Jacaranda caroba)
e uma extica (Erythraea centaurium). O presente
estudo descreve a identificao de marcadores qumicos
para os extratos das espcies constituintes da Ierobina
e a obteno de perfis cromatogrficos de referncia
para os mesmos, os quais contribuiro para o
estabelecimento de protocolos para o controle de
qualidade do fitoterpico.
O mercado brasileiro de fitoterpicos encontra-
se em franca expanso, de maneira semelhante
tendncia mundial, tendo movimentando cerca de US$
355 milhes em 19941. Apesar da proliferao no uso
de fitoterpicos e de sua publicidade cada vez maior, o
controle destes produtos, na maioria dos casos, ainda
inadequado. Assim, segundo Alonso " necessrio legislar
a respeito, no somente para acabar com a indstria de
especulao e fraude, mas tambm para promover e
incentivar os estudos de fitoterpicos, garantindo a
qualidade destes produtos e protegendo a sade da
populao"2. A atual legislao brasileira sobre
fitoterpicos visa atender a esta demanda, atravs das
28 Rev. Bras. Farmacogn., v. 13 supl 2, p. 28-31, 2003.
ISSN: 0102-695X
2003
Portarias 6/95, 16/95 e, mais recentemente, pela
resoluo RDC 17/00 da ANVISA. Esta legislao
evidencia a necessidade de melhoria da qualidade tcnica
dos fitoterpicos, os quais passam a ser objeto de testes
de farmacologia pr-clnica, toxicologia pr-clnica e
ensaios clnicos, alm de rigoroso controle de qualidade.
Neste contexto, insere-se o presente estudo, que
visou identificar marcadores qumicos para o fitoterpico
Ierobina, comercializado no mercado nacional h 67
anos (Laboratrio Belfar, Belo Horizonte), indicado para
o tratamento de dispepsias. A administrao de
Ierobina para ratos, anteriormente ingesto de dieta
contendo alto teor de lipdios, indicou um aumento de
40% na atividade da lipase lipoprotica do tecido
adiposo epididimal, enzima responsvel pela captao
de triacilgliceris, em relao ao grupo controle,
atestando a eficcia do fitoterpico na dispepsia3.
O fitoterpico Ierobina constitudo pelos
extratos fluidos das espcies nativas Solanum
paniculatum L. (Solananceae), denominada vulgarmente
de jurubeba, Remijia ferruginea D.C. (Rubiaceae),
popularmente conhecida como quina da serra ou quina
mineira, e Jacaranda caroba D.C. (Bignoniaceae), de
nome vulgar caroba ou carobinha, alm da espcie
extica Erythraea centaurium (L.) Borkh.
(Gentianaceae), denominada vulgarmente de centurea.
Todas essas espcies so empregadas popularmente
como amargos, dentre outros usos4,5.
Os estudos fitoqumicos necessrios validao
de fitoterpicos compreendem as etapas de isolamento
e elucidao estrutural de metablitos secundrios, os
quais so utilizados como marcadores qumicos na
identificao da espcie vegetal, no planejamento e
monitoramento das aes de transformao tecnolgica
e em estudos de estabilidade4. Alm disso, a composio
qualitativa de materiais vegetais de referncia tambm
deve ser avaliada, a partir dos perfis cromatogrficos
obtidos por HPLC e CCD ("impresso digital"), sendo
auxiliares teis na autenticao da matria prima vegetal.
Assim, realizaram-se inicialmente ensaios de
prospeco fitoqumica para os extratos de referncia e
os extratos fluidos fornecidos pela empresa, utilizados
na manufatura do fitoterpico. De maneira geral
observou-se uma correspondncia entre os resultados
dos extratos de referncia e os da empresa, sugerindo a
autenticidade do material vegetal utilizado para produo
do fitoterpico. Iridides, triterpenos e esterides foram
detectados em todas as espcies, bem como cumarinas
e alcalides, ausentes em J. caroba. Flavonides foram
detectados em todos os extratos de referncia, mas no
nos extratos de J. caroba e S. paniculatum fornecidos
pela empresa.
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Tambm se observaram semelhanas entre os
perfis cromatogrficos obtidos por HPLC para os
extratos de referncia e da empresa, como pode ser
visualizado para a espcie R. ferruginea (Fig. 1). As
variaes observadas foram atribudas s diferenas na
polaridade dos extratos, j que todos os de referncia
foram obtidos por percolao com EtOH 96% e aqueles
da empresa com concentraes variadas de EtOH, de
10% a 50%. Tambm no podem ser descartadas
variaes sazonais dos materiais vegetais utilizados na
produo dos extratos, que poderiam influenciar na
impresso digital dos mesmos.
Tendo em vista a ausncia de estudos
fitoqumicos para as espcies nativas e/ou de
constituintes micromoleculares comercialmente
disponveis, procedeu-se ao isolamento de marcadores
qumicos dos extratos de referncia das espcies vegetais
constituintes do fitoterpico. Foram isolados cido
urslico, a-amirina e uma mistura dos cidos urslico e
oleanlico de J. caroba; cido oleanlico, cido maslnico
e lcool aliftico de E. centaurim; cido urslico de
Remijia ferruginea e paniculonina B de S. paniculatum
(Fig. 2). Alguns dos marcadores qumicos isolados foram
detectados nos extratos fluidos empregados para
fabricao do fitoterpico, em anlises por CCD.
O estabelecimento dos perfis cromatogrficos
de referncia para os extratos e o isolamento e
identificao de marcadores qumicos das espcies,
realizados no presente trabalho, contribuiro para o
estabelecimento de protocolos para o controle de
qualidade do fitoterpico. Os marcadores qumicos so
especialmente vlidos para autenticar o material vegetal
utilizado na produo dos extratos, ponto crucial para
garantir a qualidade do produto, j que, exceo de
E. centaurium, todas as espcies constituintes so
nativas e coletadas da flora espontnea.

A B

Figura 1. Cromatogramas, obtidos por RP-HPLC, para o extrato de referncia (A) e extrato fluido (B) de Remijia
ferruginea. Condies cromatogrficas: vide Material e Mtodos

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CH3
CH3
H3C H3C CH3
H3C

CH3 CH3 COOH

CH3 CH3 CH3
CH3 CH3 COOH
CH3
CH3
CH3
HO
HO HO
H3C CH3
H3C CH3
H3C CH3
-amirina cido urslico cido oleanlico

O OH

HO
COOH
HO O O

HO
HO OH
HO
HO O
cido maslnico
O
HO

Paniculonina B

Figura 2 . Estruturas qumicas das substncias isoladas das espcies constituintes do fitoterpico Ierobina

Material e Mtodos
Material vegetal: Amostras de Jacaranda caroba
(partes areas) e Solanum paniculatum (folhas e caules)
foram coletados no campus da UFMG, e de Remijia
ferruginea (galhos) no Parque Estadual do Rio Preto,
Minas Gerais. Exsicatas das espcies coletadas esto
depositadas no herbrio BHCH, UFMG, sob nmeros
50394, 4751 e 51460, respectivamente. Amostras de
sumidades floridas da espcie extica Erythraea
centaurium foram enviadas pela empresa produtora.
Preparao dos extratos: Foram preparados extratos
por percolao com EtOH 96% dos materiais vegetais
30
secos, denominados "referncia". Os extratos fluidos
utilizados na fabricao do fitoterpico foram fornecidos
pela empresa produtora, denominados "empresa".
Prospeco fitoqumica: A prospeco fitoqumica dos
extratos (referncia e empresa) compreendeu a obteno
da "impresso digital" por RP-HPLC e anlises por
CCD, com reveladores especficos, para determinar as
classes de produtos naturais presentes7. Para as anlises
por HPLC empregou-se coluna de ODS (250 x 4,0 mm
d.i., 5 m, Merck, Alemanha) fluxo de 1,0 mL/min,
temperatura de 40 C, procedendo-se eluio com
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gradiente linear de H2O (A) e CH3CN (B): 0 min 90% Ripperger, H.; Schreiber, K. Structure of paniculonin A
A, 10% B; 60 min 10% A, 90% B, seguido de 10 min and B, two new spirostane glycosides from Solanum
de eluio isocrtica. A deteco foi realizada no UV210. paniculatum L. Chemische Berichte, v.101, p.2450-
Foram analisadas solues metanlicas dos extratos na 2458, 1968.
concentrao de 10 mg/mL
Isolamento e identificao de marcadores qumicos:
Os extratos de referncia das quatro espcies foram
fracionados empregando-se procedimentos *Autor para correspondncia
cromatogrficos variados e parties entre solventes
imiscveis. A purificao das substncias isoladas foi Prof. Ferno Castro Braga
realizada por sucessivas cromatografias, seguindo-se Laboratrio de Fitoqumica e Biologia Farmacutica
recristalizao final. A identificao das substncias Faculdade de Farmcia - UFMG
baseou-se na anlise dos espectros no IV e RMN de Av. Olegrio Maciel, 2360
1
H e 13C, com experimentos 1D e 2D (COSY, 30180-112 - Belo Horizonte - MG
HETCOR, HMQC). Os dados obtidos foram fernao@dedalus.lcc.ufmg.br
comparados com valores relatados na literatura8,9.

Agradecimentos
O presente trabalho foi financiado com recursos do
CNPq e do Laboratrio Belfar, no mbito do Edital
Fitoterpicos (processo 521199 / 01-8).

Referncias Biliogrficas
1
Ferreira, S.H. (Org.) Medicamentos a partir de
plantas medicinais no Brasil. Rio de Janeiro:
Academia Brasileira de Cincias,132p. 1998.
2
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3
Braga F.C. Contribuio para validao do
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- CNPq. Belo Horizonte,80p. 2003.
4
Corra, M.P. Dicionrio de Plantas teis do Brasil
e das Exticas Cultivadas. Rio de Janeiro: Di Giorgio,
1974.
5
Tyler, V.E. Herbs of choice. The therapeutic use of
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1994.
6
Sonaglio, D.; Ortega, G.G.; Petrovick, P.R.; Bassani,
V.L. Desenvolvimento tecnolgico e produo de
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Gosmann, G.; Mello, J.C.P.; Mentz, L.A., Petrovick,
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258, 1999.
7
Wagner, H.; Bladt, S.; Zgainsky, E.M. Plant drug
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Springer, 320 p. 1984.
8
Mahato, SB.; Kundun, AP. 13C NMR spectra of
pentacyclic triterpenoids - a compilation and some
salient features. Phytochemistry, v.37, p.1517-1575,
1994.
31