Representaes grficas de dados de

cintica enzimtica
Representao directa dos
dados

Vmax [A]
v=
K m + [A]
 Grfico de Lineweaver-Burke
Vmax [A] 1 Km 1 1
v= = +
K m + [A] v Vmax [A] Vmax

Tomando o inverso de
ambos os membros
Y=m X +b

m = Km / Vmax
1/ v0
b = 1/Vmax

declive = K m / Vmax

[A] = 0.5K m
ordenada na origem = 1/Vmax

[A] = 5K m

1/[A]
 Grfico de Lineweaver-Burke

Vantagens:
Representao mais familiar
Observao fcil dos mecanismos de inibio
v e [A] separados

Desvantagens:
Distoro do erro inversamente proporcional a [A]
Mascara os desvios cintica Michaeliana
Sensvel a outliers
A regresso linear correcta tem que ser pesada
 Grfico de Hanes-Woolf

1 Km 1 1 [A] K m [A]
= + = +
v Vmax [A] Vmax v Vmax Vmax

Multiplicando ambos os Y=m X +b

membros por [A]

m = 1/Vmax
b = Km / Vmax
 Grfico de Hanes-Woolf

Vantagens:
O erro nas observaes quase no distorcido ao longo do eixo dos xx
Os valores de concentrao so representados directamente no grfico

Desvantagens:
[A] nos dois eixos provoca falsas correlaes
O erro dos pontos explode para valores prximos da origem
 Grfico de Eadie-Hofstee
1 Km 1 1 vK m v
= + Vmax = +v v = K m + Vmax
v Vmax [A] Vmax [A] [A]

Multiplicando ambos os
membros por vVmax
Y=m X +b

m = -Km
b = Vmax
 Grfico de Eadie-Hofstee

Vantagens:
Erro da velocidade presente em ambos os eixos torna este grfico
muito sensvel a desvios cintica Michaeliana
O intervalo [0,Vmax] directamente representvel no eixo dos yy

Desvantagens:
Distoro do erro, barras de erro no parelas aos eixos
Erro das observaes nos dois eixos torna impossvel de aplicar a
verso mais habitual do mtodo dos mnimos quadrados
Deteco de desvios sistemticos cintica Michaeliana
A deteco de desvios sistemticos cintica de Michaeliana
pode ser difcil, sobretudo se for usado um mtodo inaproriado.

Consideremos o seguinte conjunto de valores de v0 em funo

de [A]:

v0

[A]
Deteco de desvios sistemticos cintica Michaeliana
A simples inspeco visual do grfico no nos permite prever o
acentuado desvio cintica Michaeliana.

A linha verde corespondo ao verdadeiro comportamento

Michaeliano do enzima, na ausncia de perturbao:

v0

[A]
Deteco de desvios sistemticos cintica Michaeliana

A transformao de Lineweaver-Burke dificilmente permite suspeitar

da anomalia - o desvio da linearidade ocorre muito prximo da
origem e a compresso das varincias mascara o erro.

1/v0

1/[A]
 Deteco de desvios sistemticos cintica Michaeliana

A transformao de Hanes-Woolf tambm mascara o erro e o e o

desvio da linearidade bastante ligeiro:

[A]/v0

[A]
Deteco de desvios sistemticos cintica Michaeliana

A transformao de Eadie-Hofstee, graas presena dos valores de v0

nos dois eixos, revela um desvio da linearidade bastante maior:

v0

v0 / [A]
 Grfico de Eisenthal-Cornish-Bowden
(grfico linear directo)
Vmax [A] v
v= Vmax = v + Km
K m + [A] [A]
Inverso das variveis dependentes e independentes. A equao
v
Vmax = v + Km
[A]
Pode ser vista como uma recta de Vmax em funo de Km, com declive
v/[A], ordenada na origem v e abcissa na origem -[A] :

Vmax
A recta corresponde ao
conjunto de valores de
Km e Vmax que so
v compatveis com os
valores de v e [A]
observados
experimentalmente.

-[A] Km
 Grfico de Eisenthal-Cornish-Bowden
(grfico linear directo)
Existe um nico par de valores (Vmax, Km) compatvel com duas
observaes experimentais. Este par de valores corresponde ao ponto
de interseco das duas rectas no grfico linear directo:

Vmax

Vmax
v1

v2

-[A]1 -[A]2 Km
K m
 Grfico de Eisenthal-Cornish-Bowden
(grfico linear directo)
Para trs medies experimentais, e na ausncia de erro (situao
hipottica), as 3 rectas teriam como ponto de interseco o valor
verdadeiro de Vmax e Km.

Vmax

Vmax
v1

v2
v3

-[A]1 -[A]2 -[A]3 Km

K m
 Grfico de Eisenthal-Cornish-Bowden
(grfico linear directo)
Numa situao real, porm, os valores medidos so afectados de erro
experimental e as 3 rectas no iro ter um ponto de interseco comum,
mas trs pontos de interseco. Como estimar ento os melhores
valores de Km e Vmax a partir destes pontos ?

Vmax Vmax1 Vmax 2 Vmax 3

Vmax
v1

v2
K m1 K m 2 K m 3

-[A]1 -[A]2 Km
K m
Vmax = Mediana(Vmax1 , Vmax 2 , Vmax 3 )
K = Mediana(K 1 , K 2 , K 3 )
m m m m
 Grfico de Eisenthal-Cornish-Bowden
(grfico linear directo)
Para n medies experimentais, as n rectas tm n(n-1)/2 pontos de
interseco!

Vmax

Vmax 6*(6-1)/2=15
interseces

Km
K m