1ª etapa: contagem da quantidade de acessos por espécie – primeiro da coleta, e depois do

que já tem;

OBS: plantas alogamas (meio irmãos): estudo da genética da média dos indivíduos existentes
no bag para aquele acesso; (ver trabalho 2015) – evita obter uma diversidade baixa dos
acessos (no caso de trabalhar no pool gênico) / existe cruzamento e existe até diversidade
entre a mesma família/acesso;

2ª etapa: ver tabela do artigo – marcar quais deles foram coletados;

3ª etapa: fazer uma separação da edulis e selvagem; separando quantas são de cruz e quantas
são de brasilia; verificar os cultivares, se esta faltando algum;

Planilha (quantidade): Espécie / acessos / plantas // separando de cada lugar (embrapa)

4ª etapa: classificar os géis de quantificação – por individuo

1 – banda forte / maior que o lambda / sem arraste ou pouco

2 – banda media / parecida com lambda / arraste

3 – banda fraca, não definida / menor que lambda / arraste

5ª etapa: verificar quantas e quais plantas esta indo pra germinar;

Reunião 08/02/18

- iniciar rodada pcr edulis: 161 plantas / 69 acessos

- iniciar RGA – ver os géis das meninas e selecionar os melhores/ideais e intermediário – ver
quantitativo; P/ edulis

Quantos estão entre ideal e regular; Qual o total de primers e o total de bandas
que estes geraram?
PCR: 2 placas de 96 = 192

Temos 196 plantas de edulis:

Pegar os 34 acessos da mandioca com 3 plantas de cada=102

Os 2 acessos menores=3
35 acessos de brasilia = 35
Total de 69 acessos, com total de 140 plantas

Uma placa fechada com edulis/ e a seguinte terá 44 edulis (restante), e depois 27
individuos de alata, e 12 individuos de setácea, e para fechar os 13 espaços, com as
espécies da colombia;
Outra placa com as 72 de cincinata;

Dos 18 RGA das meninas, selecionar os 10 melhores: começar os classificados como

ideal, se tiver 10 ok, se tiver menos ver os regular para fechar, se tiver mais verificar os
géis para ver quais amplificaram mais e mais nítidos;

Ver dos 10 melhores, ver os primers comuns para passar primeiro= resulta num mix
comum para todas as 2 primeiras placas

Sempre usar o mesmo termociclador para cada rodada de um primer;

Media de gasto: 2 tubos e meio de taq

Conferir no lab: quantos tubos tem fechado de Taq, se tem aberta / de DNTP / GelRed
/ placas de pcr – usaremos 50/ bluejuice / conferir a receita – ata de elisa – procurar
loading ou tampão stop / verificar ponteira p10 /

Identificar os tubos – marcar os tubos estoque e trabalho – preparar

Na caixa identificar mais detalhado; coleta tal, dna estoque ou trabalho;

A ideia é passar 2 pcr e correr o 2 gel / alternado;

Cotar GelRed – ver empresa