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Boletim de Biotecnologia
Biotecnologia Microbiana
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Biotecnologia Microbiana
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(a) (b)
Figura 4 – Grânulos de PHAs observados por microscopia de epifluorescência após coloração com Azul de Nilo.(a) início da fase de “fartura” ; (b)
fim da fase de “fartura”
moléculas de acetil-CoA para formar parâmetros de operação do processo, o sequencial (SBR). O SBR é operado
acetoacetil-CoA, sendo esta reacção rendimento de produção de PHAs por em ciclos de cerca de 12 a 24 horas. A
catalisada pela enzima 3- Cetotiolase. culturas mistas possa atingir valores adição de substrato é feita por pulso,
A síntese de PHB prossegue pela acção superiores aos descritos na literatura. sendo consumido em cerca de 1 a 2
das enzimas NADPH redutase e PHB horas, seguindo-se um período de
A optimização da produção de PHAs
sintetase. Após a exaustão do substrato cerca de 10 a 22 horas de ausência
tem de passar necessariamente pela
externo, o PHB é degradado, produ- de carbono externo (Dircks et al.,
selecção da configuração de reactor e
zindo-se acetil-CoA que é usado para 2001, Serafim et al., 2002). Os SBRs
das condições de operação que con-
crescimento e manutenção celular são reactores ideais para seleccionar
duzam à obtenção de rendimentos e
(ciclo a tracejado na Figura 5). populações microbianas com elevada
produtividades elevadas. A configura-
capacidade de acumulação de PHAs,
ção de reactor mais usada para estudar
porque a biomassa cresce em condi-
4.3 – Optimização do processo a produção de PHAs por culturas
ções transientes. Este tipo de reactor
mistas, usando o processo de “Fome
Um dos factores que tem limitado a é fácil de controlar e é altamente
e Fartura”, é o reactor descontínuo
produção de PHAs por culturas mis-
tas tem sido o baixo rendimento de
produção quando comparado com o
obtido por culturas puras, nomeada-
mente por Ralstonia eutropha, usada
na produção Industrial de PHAs (Kim
et al., 1994). De facto, enquanto este
microrganismo é capaz de acumular
cerca de 80% (massa de PHA por
massa celular), o valor referido na
literatura para culturas mistas não
ultrapassa 60% (Reis et al., 2003).
Este valor máximo de acumulação
de PHAs foi obtido com culturas de
lamas activadas, sujeitas a condições
transientes de adição de substrato
(“Fome e Fartura”) descritas anterior-
mente. Deverá notar-se, contudo, que
o interesse pela produção de PHAs
por culturas mistas tem tido como
principal objectivo estudar os meca-
nismos de acumulação de reservas
intracelulares e não a sua optimização
com vista à produção industrial, pelo Figura 5 – Metabolismo de síntese e degradação de PHB por diversos microrganismos (modifica-
que é de esperar que, manipulando os do a partir de Sudesh et al., 2000).
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(a) (b)
Figura 7 – Produção de PHB para dois tipos de adição de substrato: (a)- alimentação em contínuo; (b) – alimentação por pulsos. (æ - velocidade
de adição de acetato (a) e concentração de acetato (b), à- % de PHB, ç- OUR (velocidade específica de consumo de oxigénio (oxygen uptake rate),
ó-concentração de amónia).
cos fermentáveis (ex. soro de leite, res- feeding. Water Research 32 (11): 3403-3413. Page, W.J., Sherburne, R., D’Elia, L., Graham,
caldo de melaço) ou fermentados (ex. Biby, G.D., 2002. Degradable plastics: http: L.L., 1995. Poly(β-hydroxybutyrate) extrusion
//www.icma.com/inf/polymers.htm. from pleomorphic cells of Azotobacter vinelan-
ácidos orgânicos). No primeiro caso dii UWD. Can. J. Microbiol. 41, 22-31.
o processo deve incluir uma etapa de Daigger G. T., Grady, C.P.L., 1982. The
Reis M.A.M., Serafim L.S., Lemos P. C., Ramos
fermentação a montante do processo dynamics of microbial growth on soluble
substrates. Water Res. 16, 365-382. A.M., Aguiar F.R., van Loosdrecht M.C.M..,
de produção de biopolímero. 2003. Production of Polyhydroxyalkanoates
Dircks, K., Henze, M., van Loosdrecht M.C.M., by Mixed Microbial Cultures. Bioprocess and
No caso de se desenvolverem condi- M., Mosbaek, H., Aspegren, H., 2001. Storage Biosystems Engineering, 25, 377-385.
ções que tornem o processo de pro- and degradation of poly-β-hydroxybutyrate
in activated sludge under aerobic conditions. Serafim L. S., Lemos, P. C., Reis, M. A.
dução de PHAs por culturas mistas e Water Res. 35(9), 2277-2285. M., 2002. Change in Metabolism of PHA
resíduos industriais economicamente Accumulation by Activated Sludge Modifying
Kim, B.S., Lee, S.C., Lee, S.Y., Chang, H.N., Operating Conditions. Water Science and
viável, num futuro próximo esta Chang, Y.K. and Woo, S.I., 1994. Production Technology, 46 (1-2), 353-356.
tecnologia permitiria reduzir de forma of poly(3-hydroxybutyric acid) by fed-batch
Sudesh, K., Abe, H., Doi, Y., 2000. Synthesis,
significativa a utilização de plásticos culture of Alcaligenes eutrophus with glucose
structure and properties of polyhydroxyalka-
não biodegradáveis e a necessidade de concentration control. Biotechnology and
Bioengineering, 43: 892-898 noates: biological polyesters. Prog. Polymer.
tratamento do tipo de resíduos indus- Sci. 25, 1503-1555.
Lee, S.Y., 1996. Plastic bacteria? Progress
triais referidos, resolvendo um duplo
and prospects for polyhydroxyalkanoate
problema ambiental. production in bacteria. Trends Biotechnol., 14,
431-438.~
Liu, W.-T., Mino, T., Nakamura, K., Matsuo, T.,
Agradecimentos 1996. Glycogen accumulating population and
its anaerobic substrate uptake in anaerobic-
Este projecto (POCTI/35675/BIO/2000) aerobic activated sludge without biological
phosphorus removal. Water Res. 30 (1), 75-82.
foi financiado pela Fundação para a Ciên-
cia e Tecnologia (FCT). Luísa S. Serafim e Madigan, M.T., Martinko, J.M., Parker, J., 2000.
Paulo C. Lemos agradecem à FCT pelas Brock Biology of Microorganisms, Prentice-
Hall International Editions, Upper Saddle
bolsas PRAXIS XXI BD/18287/98 e BPD/
River.
20197/99, respectivamente.
Majone, M., Dirks, K., Beun, J.J., 1999. Aerobic
storage under dynamic conditions in activated
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storage response selected under intermittent
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