Análise Estrutural

José Carlos Marques

Departamento de Química
Universidade da Madeira
 Programa

? Espectroscopia
? interacção luz /átomos-moléculas
? Espectroscopia UV-vis
? transições electrónicas
? determinação estrutural
? Espectroscopia IV
? transições entre níveis de energia vibracional
? interpretação de espectros
? Espectroscopia NMR
? transições energéticas
? interpretação de espectros
? Espectrometria de massa
? revisão de conceitos e interpretação de espectros
? Aplicações
 Interpretação de espectros MS

? Os espectros MS reflectem a fragmentação do ião molecular e é

característica da sua estrutura (cadeia carbonada) ao mesmo
tempo que põem em evidência certos grupos funcionais

? A intensidade do ião molecular é maior para as substâncias não

ramificadas e diminui com o grau de ramificação
? Numa série homóloga, a intensidade do ião molecular diminui com
o peso molecular
? excepção para os esteres de ácidos gordos
? Os pontos de ramificação favorecem a fragmentação.
? Regra geral a cadeia mais longa é eliminada na forma de radical
? Estruturas cíclicas (sobretudo as aromáticas) e as ligações duplas
estabilizam o ião molecular
? As ligações duplas favorecem a ruptura alílica
? CH2 - C*H - CH2 - R
 Interpretação de espectros MS

? As moléculas cíclicas saturadas tendem para perder os grupos de

substituição por ruptura da ligação ? e guardam a carga
? Nas moléculas cíclicas aromáticas substituídas por uma cadeira
alquílica a ruptura em ? é favorecida
? As ligações C-C adjacentes a um hetero-átomo quebram-se com
facilidade ficando a carga sobre o fragmento que contem o
hetero-átomo
? As rupturas de ligações (com ou sem rearranjo estrutural)
implicam com frequência a perda de pequenas moléculas neutras
? H2O, CO2, C2H4, NH3, H2S …
? Arranjo de McLafferty
? ON-Line
? http://www.scimedia.com/chem-ed/ms

? http://ul.chemistry.uakron.edu/gcms/index.html
 Introdução à espectrometria de massa

? Análise de estruturas moleculares por espectrometria de massa

? MS como método espectroscópico / comparação com UV, IV, RMN
? MS é uma técnica destrutiva - ao retirar um e- não podemos recuperar a
molécula
? A ionização da moléculas pode ser obtida por impacto electrónico (EI)
com electrões de elevada energia (20 a 70 eV)
? a energia da primeira ionização da maioria das moléculas é de 8 a 15 eV
? 1 eV = 9,649 x 104 J mol-1
M M + + e-

M + é conhecido como sendo o ião molecular

? Todos os iões moleculares têm um número impar de electrões
? O excesso de energia cedida ao ião molecular pode levar à sua
dissociação
? se a energia vibracional é suficientemente elevada a amplitude das vibrações é
superior ao seu limite elástico
? A fragmentação duma molécula dá origem ao seu espectro de massa
.
M .+ A+ +N

M .+ B. + + N
 O espectro do metanol

120
100
100
80
80 70

60 Série1
35
40
15 15
20 8 10 10 10

0
10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 31 32 33

? m/z 32 - pico molecular : CH3OH +

? M/z 31 - perda de H : CH2OH + (Pico base por ser o mais intenso)
? m/z 29 - perda de 3H : CHO +
? m/z 15 CH3 +
? m/z 33 corresponde à abundância natural do 13C (1,1%)
? a abundância natural de 2 H é de apenas 0,02%
? Os iões de dupla carga aparecem a metade da escala de m/z
? CH2OH2+ aparece a m/z de 15,5
 Regras para a fragmentação

? Requisitos para um ião molecular

? deve ser o ião de massa mais elevada
? deve ter um número impar de electrões
? deve dar origem a iões de elevada massa molecular (perda de fragmentos
neutros)
? o ião molecular é uma espécie radicalar
? A Regra do Azoto
? Se um composto contem um número par de átomos de azoto, o seu ião
molecular tem uma massa par
? H20 - 18 CH4 - 16 CH3OH - 32 C27H46O - 386
? H2NNH2 - 32 NH3 - 17 C2H5NH2 - 45

? um composto contendo apenas C,H,O ou X deve ter uma massa molecular par
? um composto com número impar de átomos de azoto terá massa molecular impar
? um composto com um número par de átomos de azoto terá uma massa par

A regra pode ser aplicada aos fragmentos: um ião com um número impar de electrões terá uma
massa par se contiver um número par de átomos de azoto
 Fragmentação

? A fragmentação de um ião molecular é uma reacção unimolecular

? a pressão na fonte de iões é mantida suficientemente baixa para que as
reacções (colisões) envolvendo o ião molecular sejam mínimas
? Factores que influenciam a abundância de iões
? a estabilidade do ião depende nomeadamente da partilha dos electrões
ou da possibilidade de ressonância
? Regra de Stevenson: o ião fragmento com menor energia de ionização
tem maior probabilidade de se formar (também apresenta, em geral,
maior estabilidade)
? preferência para a perda do maior radical alquilo
? C2H5CH3CHC4H9+. dá origem preferencialmente a

? C2H5CH3CH+ > + CHCH3C4H9 > C2H5C+HC4H9 > C2H5C+CH3C4H9

Fragmentação
 Anéis e duplas ligações

? A soma dos anéis e duplas ligações pode ser calculada:

X - 1/2 Y + 1/2 Z + 1 em que: X = # C, Si

Y = # H, F, Cl, Br, I
Z = # N, P
? Se o número for um inteiro, só pode vir de um ião com número impar de
electrões
? Todos os iões moleculares têm um número impar de electrões, mas nem
todos os iões com número impar de electrões são iões moleculares
? Exemplos
? C3H9NO 3 - 9/2 + 1/2 +1 = 0 pode ser ião molecular
? C5H5N 5 - 5/2 + 1/2 + 1 = 4 pode ser ião molecular
? C7H5N2 7- 5/2 + 2/2 + 1 = 6,5 não pode ser ião molecular
? C8H16Cl 8 - 17/2 + 1 = 0 não pode ser ião molecular
 Massas e abundâncias isotópicas

2
H 1.00782506 H 2.0140 (0.015%)
13
C 12.0000000 C 13.0034 (1.1%)
15
N 14.00307407 N 15.00001 (0.37%)
17
O 15.994914075 O (0.04%) 18O 17.9992 (0,20%)
F 18.9984046
Na 22.9897703
37
Cl 34.9688530 Cl 36.9659 (32.5%)
81
Br 78.9183320 Br 80.9163 (98.0%)
? Cálculo da contribuições isotópicas
? para a formula geral : C w H x O z N y

PM ? 1
100 ? 0,015x ? 111
, w ? 0,37y ? 0,037z
PM

PM ? 2
100 ? 0,20z ? 0,006w(w ? 1) ? 0,004wy ? 0,0002wx
PM

? Caso de Br2, Br3 e Cl2

150
100 100 98 100
100
65
51 49
50 34 32
10,6
0
Abundâncias isotópicas
 O Espectrómetro de Massa

Os iões são desviados pelo campo magnético H. Apenas os iões cuja força centrífuga
iguala a força centrípeta atravessam o campo.

mv2/r = Hzv ou: m/z = H2r2/2V em que: H - intensidade do campo magnético

V - tensão aplicada
v - velocidade dos iões
z - carga do ião
m - massa do ião
 O GC/MS

GC - responsável pela separação (e quantificação) dos componentes da mistura

MS - responsável pela identificação (informação qualitativa) de cada componente (puro)

O GC/MS é um dos mais importantes equipamentos analíticos conhecidos, devido à sua capacidade de
separar a mistura,
de dar uma informação qualitativa e quantitativa e ainda devido à elevada sensibilidade alcançada. É ainda
possível, em
determinadas condições, programar reacções químicas (em fase gasosa) no seu interior.
MS - fonte de ionização / sector magnético
 O sistema de vácuo

? O funcionamento de um espectrómetro de massa exige condições

de vácuo elevada (10-5 a 10-7 torr)
? o trajecto livre médio dos iões deve ser superior à distância entre a
fonte ionização e o detector
? trajecto livre - distância percorrida pelos iões ou moléculas antes de colidir com
outro ião ou molécula.
? trajectos livres médios elevados asseguram uma maior
reproductibilidade da fragmentação e maior sensibilidade
? no espectrómetro de massa são usadas voltagens muito elevadas (8KV)
na aceleração dos iões
? um aumento da pressão leva ao aparecimento de inconvenientes descargas
eléctricas
? Bombas
? turbomoléculares
? difusão
 A interface GC/Ms

? O objectivo da interface é remover a maior quantidade possível

de gás de arrasto
? Idealmente deve:
? transferir quantitativamente todos os compostos para o MS
? evitando a descriminação
? reduzir o fluxo total à entrada do MS (vácuo necessário).
? Faz-se notar que a simples divisão (split) do fluxo não é adequada dado que leva a
uma perda significativa dos produtos em análise, sem eliminar o excesso de gás de
arrasto
? Tipos:
? Separador molécular
? vácuo entre a saída da coluna e entrada no MS
? Separador de membrana
? a selectividade dependente da polaridade e PM / baixa sensibilidade
? Open split
? excesso de fluxo (1ml/min) é eliminado / falta é compensado com He
? Entrada directa
? aplicável no caso de colunas capilares
GCMS - interface open split
LCMS - Interface electrospray
MS - fonte de ionisação
 Espectrometria de Massa - regras de fragmentação

? A intensidade de M+ é maior para substâncias não ramificadas e

diminui com o grau de ramificação
? Numa série homóloga, a intensidade de M+ diminui com o PM
(excepto para os ésteres de ácidos gordos)
? Os pontos de ramificação são pontos de rotura preferenciais
? Duplas ligações e estruturas cíclicas estabilizam o M+
? Ciclos saturados têm tendência a perder as cadeias de
substituição
? As ligações C--C adjacentes a um heteroátomo rompem-se com
facilidade, ficando a carga sobre o fragmento que contém o
heteroátomo
? As roturas de ligação dão frequentemente origem à eliminação de
pequenas moléculas neutras: H2O, CO2, C2H4, NH3, H2S
 Principais fragmentos neutros

14 CH2 35 Cl 53 C4H5 70 C5H10

15 CH3 36 HCl 54 CH2CH2CN 71 C5H11,
16 O 39 C3H3 55 C4H7 C3H7C=O
17 OH 41 C3H5 56 C4H8 76 C6H4
18 H2O, NH4 42 C3H6, C2H2O 57 C4H9, C2H5C=O 77 C6H5
19 F 78 C6H5 + H
43 C3H7, 58 CH3C(=O)CH2 +
26 CN, C2H2
CH3C=O H, C2H5CHNH2 79 C6H5 + 2H,
27 C2H3 Br
44 CH2CHO 59 C3H6OH,
28 C2H4, CO
45 CH3CHOH, CH2OC2H5
29 C2H5,
CHO CH2CH2OH, 60 CH2COOH
30 CH2NH2 CH2OCH2 61 CH3COO
31 CH2OH 46 NO2 65 C5H5
32 O2 47 CH2SH 66 C5H6
33 SH 48 CH3S + H 67 C5H7
34 H2S 49 CH2Cl 68 CH2CH2CH2CN
51 CHF2, C3H3 69 C5H9, CF3
 Lista de fragmentos mais comuns

•15 •CH3 •36 HCl, 2 H2O •54 CH2=CH-CH-CH2

•16 O, •NH2 •37 H2Cl •55 CH2=CHCHCH3
•17 HO• •38 C3H2, C2N, F2 •56 CH2=CHCH2CH3
•18 H2O •39 C3H3, HC2N •57 C4H9•, C2H5CO
•40 CH3CCH •60 C3H7OH
•19 F•
•41 CH2=CHCH2• •63 •CH2CH2Cl
•20 HF •42 CH2=CHCH3, CH2=C=O •71 C5H11•
•26 CHCH, •CHN •43 C3H7, CH3C•=O •73 CH3CH2OC(=O)•
•27 CH2=CH•, HCN •44 CH2=CHOH, CO2, N2O, CONH2 •74 C4H9OH
•28 CH2=CH2, CO •45 CH3CHOH, CH3CH2O•, CO2H, CH3CH2NH2•75 C6H3
•29 CH3CH2•, •CHO •46 (H2O and CH2=CH2), CH3CH2OH •76 C6H4
•47 CH3S• •77 C6H5
•30 NH2CH2•, CH2O, NO, C2H6
•48 CH3SH •78 C6H6
•31 •OCH3, •CH2OH, CH2NH2
•49 •CH2Cl
•32 CH3OH, S •52 C4H4
•33 HS•, (•CH3 and H2O) •53 C4H5
•34 H2S
•35 Cl•
 Hidrocarbonetos saturados
Série CnH+2n+1: 15, 29, 43, 57, 71, 85
? M+ geralmente observável
? grupo de picos CnH2n+1 (+ intensos), CnH2n e CnH2n-1, separados por 14
uma
? os alcanos ramificados apresentam um M+ menos estável e uma
fragmentação preferencial junto à ramificação - CnH2n + intenso que
CnH2n+1
? alcanos alicíclicos: M+ muito estável e fragmentação junto ao ciclo (? )
 Alcenos
H+
Série Cn 2n: 28, 42, 56, 70, 84, 98 e
Série CnH+2n-1: 27, 41, 55, 69, 83, 97
? M+ observável, com fragmentação semelhante aos alcanos mas com
predominância dos iões CnH2n e CnH2n-1
? Nos alcenos aromáticos M+ é importante (normalmente é o pico base) e
apresentam um pico m/z 91 muito forte (ciclo substituído)
? os cicloalcanos apresentam uma fragmentação semelhante
 Á lcoois
Série CnH2n+1O+: 31, 45, 59, 73, 87

? M+ é fraco e praticamente inexistente para os alcoóis terciários

? fragmentação em C--C adjacente ao OH
? alcoóis 1ºs: R-CH2-O+H (31, 45, 59, 73, 87)
? se 31 é maior que 45, 59, … deve tratar-se de um álcool primário
? para C >6 o espectro é análogo ao alceno correspondente
? perda de água (M-18) - principalmente nos álcoois primários
? fenóis: M+ importante e eliminação de CO (28)
 Á cidos carboxílicos
Série CnH2n-1O+: 45, 59, 73, 87
? M+ fraco (nos alifáticos) mas visível. Intenso nos aromáticos
? Massa 60 é típica (rearranjo de McLafferty)
? M-18 (H2O) e M-45 (COOH). No caso de cadeias longas, apresenta a
fragmentação típica dos alcanos (separação de 14 uma)
? Aromáticos: M-17, M-18 e M-45
 Cetonas
Série CnH2n-1O+: 29, 43, 57, 71, 85

? M+ importante e fragmentação em C--C adjacente a C=O (com a carga

sobre o fragmento que contem o O)
? Pico base resultante da perda do R maior da cadeia
 Aminas
Série CnH2n+2N+: 3, 44, 58, 72, 86

? M+ fraco (salvo se existir um anel aromático), impar se N é impar e

praticamente inexistente se R for longo
? O pico base resulta da cisão de C--C adjacente a N (m/z=30 nas
aminas 1ªs)
? Se for ramificada em ? perde a cadeia (R) mais longa