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Aumento da inflamação e redução da sensibilidade à

insulina como indicadores de distúrbios metabólicos em


rinocerontes negros (Diceros bicornis) mantidos em
zoológico comparado aos selvagens
Increased inflammation and decreased insulin sensitivity indicate
metabolic disturbances in zoo-managed compared to free-ranging
black rhinoceros (Diceros bicornis)

Aumento da inflamação e redução da sensibilidade à insulina


como indicadores de distúrbios metabólicos em rinocerontes
negros (Diceros bicornis) mantidos em zoológico comparado aos
selvagens
Introdução

 Rinoceronte negro Africano (Diceros bicornis) está


criticamente em perigo;

 A população ex situ mundial de ~ 250 rinocerontes


negros está sob ameaça devido a uma
vulnerabilidade a síndromes de doenças incomuns;
EMSLIE, 2012

 A sobrecarga de ferro, ou hemocromatose, é uma


das condições mais comumente.
KOCK et al., 1992
Introdução

Figura 1. Esquema hipotético da cascata metabólica que ocasiona doenças em rinocerontes


negros mantidos em cativeiro.

GAASBEEK; MEINDERS, 2005; HAAP et al., 2006; NANJI; ANDERSON, 1985


Introdução
 Objetivou-se estabelecer e comparar os valores do
status inflamatório e da sensibilidade à insulina
relacionadas a reserva de fosfato e ferro em
rinocerontes negros selvagens em comparação aos
mantidos em cativeiro.

 Teve-se como hipótese que rinocerontes negros


mantidos em condições de zoológico exibem
concentrações aumentadas de marcadores
inflamatórios e diminuição da sensibilidade à
insulina em comparação com homólogos vivem
livremente.

SCHOOK et al (2015)
Material e Métodos
 Foram utilizados rinocerontes negros: zoológico (n =86)
e livres (n = 120);

 As amostras foram coletadas de rinocerontes


classificados como adultos (>7 anos), subadulto (3-7
anos) ou juvenis (<3 anos);

 Amostras de soro foram coletadas dos rinocerontes após


centrifugação e coagulação do sangue, as quais foram
armazenadas à 20°C para as análises de
biomarcadores.
Material e Métodos
 Biomarcadores analisados:
 Fator de necrose tumoral α (TNFα);
 Amilóide sérico A (SAA)
 Insulina;
 Glicose;
 Insulina/Glicose;
 Glicose/Insulina;
 RISQI;
 QUICKI;
 Fostato;
 Ferritina.
Material e Métodos
 Os ensaios para o fator de necrose tumoral α (TNFα),
amilóide sérico A (SAA) e insulina utilizando
equivalentes padrão do equino foram validados para o
soro de rinoceronte negro;

 O soro foi diluído numa gama de: 1:3-1:4 para TNFα;


1:10-1:400 para SAA; e 1:30 para insulina.

 As concentrações de glicose e fosfato foram


determinadas a partir de alíquotas de soro através de
um analisador de química.
Material e Métodos
 Imunoensaio enzimático de ferritina foi desenvolvido
usando métodos gerais para o cavalo (Smith et al.,
1984);

 Foram estimadas as relações Insulina/Glicose,


Glicose/Insulina, RISQI e QUICKI;
Material e Métodos
 Análise estatística:
 As concentrações e índices séricos de biomarcadores
foram transformados em box-plot para aproximar uma
distribuição normal.

 Para gerar estatísticas descritivas para a população


mantida em cativeiro foram utilizados como um único
conjunto de dados. Os valores médio, médio, mínimo
(min) e máximo (máximo) são apresentados para
refletir toda a variabilidade do conjunto de dados.

 Médias foram comparados utilizando um modelo geral


linear (PROC MIXED, SAS).
Resultados
Tabela 1. Concentrações médias e intervalo de referência de 95% para biomarcadores em rinocerontes negros
selvagens
N° total de
Biomarcador Referência Limite inferior Limite superior
animais
TNFα (pg/mL) 118 43.7 11.9 (9.9-15.2) 151.1 (111.4-183.5)
SAA (ng/mL) 120 5.6 0.8 (0.5-1.2) 82.7 (42.9-112.9)
Insulina (mU/L) 117 4.8 1.8 (1.6-2.1) 19.4 (15.6-22.7)
Glicose (mg/dL) 117 75.2 15.5 (11.4-20.6) 169.6 (161.1-190)
I/G (um/mmol) 117 1.3 0.3 (0.27-0.38) 10.1 (7.8-12.1)
G/I (mg/dL/mU/L) 117 14.4 1.7 (1.2-2.4) 44.2 (39.1-48.8)
RISQI (mU/L) 117 0.5 0.1 (0.12-0.18) 0.7 (0.7-0.8)
QUICKI 117 0.4 0.3 (0.28-0.30) 0.66 (0.5-0.6)
Fostato (mg/dL) 120 4.5 2.3 (2.1-2.5) 6.5 (6.2-6.9)
Ferritina (ng/mL) 120 293.8 53.9 (39.1-75.4) 893.1 (756.9-1007.1)
TNF α = factor de necrose tumoral alfa; SAA = amilóide sérico A; I / G = relação insulina-glicose; G / I = relação glucose:insulina;
RISQI = recíproco da raiz quadrada da insulina; QUICKI = índice quantitativo de verificação da sensibilidade à insulina.

SCHOOK et al (2015)
Resultados

Figura 1. Box plot das concentrações de: fator de necrose tumoral α do soro (TNFα) (A); amilóide sérico A
Amiloíde sérica a (SAA) tem sido associada à sobrecarga de ferro em outras espécies. Kirk et al.
(SAA) (B); insulina (C); glicose (D); insulina/glicose (E); glicose/insulina (F); recíproco da raiz quadrada da
(2001) (RISQI)
insulina relataram
(G);um aumento
índice na expressão
de sensibilidade de SAA
à insulina em camundongos
(QUICKI)(H); fosfato (I) e com sobrecarga
ferritina de ferro
(J) em rinocerontes
na dieta
negros em comparação
mantidos ao grupo
em cativeiro em controle.
comparação aos selvagens.
SCHOOK et al (2015)
Discussão

 TNFα

↓HEPCIDINA

SOBRECARGA DE FERRO
SPERETTA, et al (2014); SCHOOK et al (2015)
Resultados
Tabela 2. Valores descritivos para biomarcadores de soro em amostras de 86 rinocerontes negros mantidos em
zoológicos

Biomarcador Média Mediana Min Máx % rinocerontes

% acima do intervalo
TNFα (pg/mL) 282.0 51.5 0.1 6362.4 21% (18 de 86)
SAA (ng/mL) 192.2 12.4 0.1 10384.0 36% (31 de 86)
Insulina (mU/L) 55.2 39.3 0.8 506.1 39% (34 de 86)
Glicose (mg/dL) 70.32 65.5 6 575 1% (1 de 86)
I/G (um/mmol) 17.3 11.2 0.2 149.1 33% (28 de 86)
% abaixo do intervalo
G/I (mg/dL/mU/L) 4.5 1.6 0.1 77.3 32% (27 de 86)
RISQI (mU/L) 0.20 0.16 0.04 1.13 20% (20 de 86)
QUICKI 0.31 0.29 0.20 1.12 30% (26 de 86)
Fostato (mg/dL) 5.05 4.9 1.4 16.1 2% (2 de 86)
Ferritina (ng/mL) 3643.6 2669.7 101.3 28485.6 92% (79 de 86)
TNF α = factor de necrose tumoral alfa; SAA = amilóide sérico A; I / G = relação insulina-glicose; G / I = relação glucose:insulina;
As concentrações de ferritina sérica significativamente maiores em 92% dos rinocerontes negros
RISQI = recíproco da raiz quadrada da insulina; QUICKI = índice quantitativo de verificação da sensibilidade à insulina.
mantidos em zoológico corroboraram com estudos anteriores (Kock et al., 1992, Smith et al.,
1995).
Discussão
O estudo consistiu na primeira comparação de
marcadores inflamatórios e estado de insulina/glicose
em rinocerontes negros em cativeiro comparado aos
selvagens;

 Ilustrou o valor de uma análise comparativa para


identificar potenciais falhas de criação que impedem
que uma espécie em extinção prossiga sob cuidados
humanos. Havendo diferenças profundas em todos os
biomarcadores circulantes, inflamatórios e da relação
insulina/glicose apontando para perturbação
metabólica para animais mantidos em cativeiro.

SCHOOK et al (2015)
Discussão
 A condição corporal da espécie em cativeiro mostra
que o aumento da adiposidade dos rinocerontes pode
ser um dos principais contribuintes para as
perturbações metabólicas;

 Portanto, é fundamental avaliar o papel da dieta e/ou


de níveis de atividade de rinocerontes pretos que
vivem em jardins zoológicos.

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