Universidade Federal do Rio Grande do Sul

Instituto de Ciências Básicas da Saúde

CBS06026 - Microbiologia Geral

Citologia bacteriana

Profª. Gertrudes Corção

FUNDAMENTAIS ACESSÓRIAS

─ Parede celular ─ Grânulos de inclusão

─ Membrana citoplasmática ─ Flagelo

─ Citoplasma ─ Glicocálice

─ Ribossomos ─ Pili

─ DNA cromossomal ─ Fímbrias

─ DNA plasmidial

─ Endósporo
 Membrana citoplasmática

─ Circunda o citoplasma  separação do meio externo

─ Presente em todos os organismos

─ 8 μm de espessura

─ Muito frágil

─ Integridade  sobrevivência da célula

─ Principal função: barreira seletiva

Membrana citoplasmática

Bicamada fosfolipídica

─ Hopanoides  rigidez

─ Mycoplasma  colesterol
 Membrana citoplasmática

Proteínas integrais  ancoradas à

membrana

Proteínas periféricas  associadas à

superfície

Glicoproteínas e glicolipídios  lubrificação e

interação
 Membrana citoplasmática

Fluidez  mobilidade das

proteínas
─ Auto-selamento

“Mosaico fluido”
 Membrana citoplasmática

Funções: Permeabilidade seletiva

Porção hidrofóbica  barreira à

difusão
─ Moléculas hidrofóbicas pequenas
se difundem
─ Moléculas hidrofílicas não
conseguem passar

Água  difusão, aquaporinas

 Membrana citoplasmática

Funções: Transporte

─ Importar nutrientes

─ Exportar metabólitos

─ Mudança conformacional do transportador

 Membrana citoplasmática

Funções: Transporte

Transporte simples

─ Meio menos concentrado → mais concentrado

─ Força próton-motriz
 Membrana citoplasmática

Funções: Transporte

Translocação de grupo

─ Meio menos concentrado → mais concentrado

─ Substância transportada é alterada

quimicamente

─ Energia de comporto orgânico

 Membrana citoplasmática

Funções: Transporte

Transportador ABC

─ ATP binding cassette

─ Proteína de ligação  elevada afinidade

─ Energia  hidrólise de ATP

─ Gram-negativas  periplasma

─ Gram-positivas  face externa

 Membrana citoplasmática

Funções: Transporte

Difusão facilitada

─ Proteínas transportadoras ─ Substâncias impermeáveis à membrana

─ A favor do gradiente  sem gasto ─ Transportadores inespecíficos ou

energético específicos
 Membrana citoplasmática

Funções: Nutrição e produção de energia

─ Enzimas  quebra de nutrientes

─ Geração de ATP e conservação de energia

FUNDAMENTAIS ACESSÓRIAS

─ Parede celular ─ Grânulos de inclusão

─ Membrana citoplasmática ─ Flagelo

─ Citoplasma ─ Glicocálice

─ Ribossomos ─ Pili

─ DNA cromossomal ─ Fímbrias

─ DNA plasmidial

─ Endósporo
 Citoplasma

─ Envolvido pela membrana citoplasmática

─ Reações químicas

─ Espesso, semitransparente, elástico

─ Composição  80% água 20% Lipídios

Proteínas
Polissacarídeos
Moléculas de ↓ PM
Nucleotídeos
Etc.

─ Sem organelas membranosas, fluxo citoplasmático e citoesqueleto

 Citoplasma

Principais estruturas citoplasmáticas

─ DNA cromossomal, RNA, DNA plasmidial

─ Ribossomos

─ Corpúsculos de inclusão (reserva energética)

─ Íons inorgânicos

─ Carboidratos, lipídios, proteínas

 Citoplasma

DNA cromossomal

─ Cromossomo bacteriano  único, fita dupla, circular

─ Funções essenciais  divisão, síntese de proteínas, etc.

─ Nucleoide

─ Fixado à membrana citoplasmática

─ Ocupa maior volume em células em crescimento ativo

 Citoplasma

DNA cromossomal

Sem nucleossomo

─ DNA não é enovelado!

E. coli lisada mostrando a

grande extensão do seu
cromossomo 1 mm = 4,7MB
 Citoplasma

Ribossomos

─ Locais de síntese proteica

─ Grande número na célula  aspecto granular

─ Proteínas (40%) + rRNA (60%)

 Citoplasma

Ribossomos

─ 2 subunidades  70S

rRNA 16S rRNA 23S e 5S

+ +
21 proteínas 31 proteínas
 Citoplasma

Ribossomos

Eritromicina, Cloranfenicol

Estreptomicina, Gentamicina
 Citoplasma

Ribossomos

─ Polissomo  tradução simultânea de um mesmo mRNA por

vários ribossomos
FUNDAMENTAIS ACESSÓRIAS

─ Parede celular ─ Grânulos de inclusão

─ Membrana citoplasmática ─ Flagelo

─ Citoplasma ─ Glicocálice

─ Ribossomos ─ Pili

─ DNA cromossomal ─ Fímbrias

─ DNA plasmidial

─ Endósporo
 Estruturas acessórias

Grânulos de inclusão

─ Reserva energética

─ Composição variada
• Metacromáticos  fosfato inorgânico; C. diphtheriae
• Polissacarídicos  amido/glicogênio
• Lipídicos  ácido poli-β-hidroxibutírico
• Enxofre  bactérias do enxofre; Thiobacillus sp.
• Carboxissomos  ribulose-1,5-difosfato-carboxilase
• Magnetossomos  Fe3O4; decomposição de H2O2?
 Estruturas acessórias

Grânulos de inclusão
 Estruturas acessórias

Vacúolos de gás

─ Procariotos planctônicos  cianobactérias, bactérias fotossintéticas

anoxigênicas

─ Fileiras de vesículas de gás recobertas por proteínas

─ Manutenção da flutuabilidade
 Estruturas acessórias

Flagelos

─ Longos apêndices filamentosos e rígidos  propulsão da célula

─ Deslocamento  taxia

─ Flagelação
─ Polar  1 único flagelo (monotríquio) ou “tufos” (lofotríquio ou
anfitríquio)
─ Peritríquio  inserção em vários pontos da célula

─ Dependente de energia  força próton-motriz

 Estruturas acessórias

Flagelos – Importância clínica

─ Maior capacidade de colonização  ↑ patogenicidade

→ E. coli, P. mirabilis: infecções urinárias

─ Capacidade antigênica  antígeno H

─ O antígeno H também possui importância na identificação

sorológica de bactérias de importância clínica
→ Salmonella sp, E. coli O157:H7: infecções alimentares
 Estruturas acessórias

Flagelo axial / Endoflagelo

─ Exclusivos de espiroquetas

─ Feixes que se originam nas

extremidades e fazem uma espiral
em torno da bactéria

─ Rotação do flagelo  movimento

espiral

─ T. pallidum  movimento através de

fluidos corporais
 Estruturas acessórias

Visualização da motilidade

─ Proteus mirabilis  formação de véu

 Estruturas acessórias

Fímbrias

─ Apêndices celulares semelhantes a pelos, mais retos, curtos e finos

que flagelos  mais comuns em Gram-negativas

─ Pilina  arranjo helicoidal em torno de eixo central

─ Variam em número e distribuição

─ Adesão  a outras células ou a superfícies

 Estruturas acessórias

Pili (singular: pilus)

─ Mais longos que as fímbrias

─ Um ou dois por célula

─ Funções: motilidade pulsante, conjugação

 Estruturas acessórias

Pili

─ Conjugação
 Estruturas acessórias

DNA plasmidial

─ DNA fita dupla, circular (geralmente) e pequeno (5-100 genes)

─ Elemento extracromossomal

─ Autorreplicante, porém dependente da maquinaria celular

─ Podem ser adquiridos por conjugação, transformação ou

transdução
 Estruturas acessórias

DNA plasmidial

─ Genes não essenciais

─ Conferem vantagem adaptativa  fatores F, R, síntese de enzimas,

produção de toxinas

─ Fator R  uso disseminado de antibióticos levou à seleção de

bactérias resistentes
 Estruturas acessórias

Glicocálice

─ Matriz extracelular secretada pelas bactérias

─ Polímero viscoso e gelatinoso externo à membrana

─ Glicolipídios e glicoproteínas
 Estruturas acessórias

Glicocálice

─ Malha formando camada protetora

→ Camada rígida  cápsula
→ Camada frouxa  camada mucosa

─ A cápsula fornece maior proteção que a camada mucosa.

 Estruturas acessórias

Glicocálice – Funções

─ Aderência a superfícies  formação de biofilmes

─ Resistência à dessecação  ligação à água

─ Proteção  química e mecânica; evasão da fagocitose (fator de

virulência)
 Estruturas acessórias

Endósporos

─ Exclusivos de bactérias

─ Estruturas de resistência/repouso  metabolicamente inativo

─ Células altamente diferenciadas

─ Dispersão no ambiente  solo

 Estruturas acessórias

Endósporos

─ Gram-positivas

─ Coxiella burnetii  Gram-negativa;

estrutura semelhante a endósporo

Clostridium botulinum Bacillus cereus

 Estruturas acessórias

Endósporos

─ Resistência
 Estruturas acessórias

Endósporos

─ Resistência  contaminação!
 Estruturas acessórias

Endósporos

─ Esporulação/esporogênese

Mais de 200 genes envolvidos

Nutrientes
Síntese diferencial de proteínas
N2
─ Replicação do material
genético

─ Invaginação da membrana
plasmática ─ Septo se torna membrana
dupla circundando o
cromossomo e o citoplasma

─ Formação do pré-esporo

─ Acúmulo de peptideoglicano

─ Capa do esporo

─ Lise celular e liberação do

endósporo
 Estruturas acessórias

Endósporos

─ Esporulação/esporogênese
→ DNA, RNA, ribossomos
→ Cerne altamente desidratado  ácido dipicolínico + Ca2+
 Estruturas acessórias

Endósporos

─ Germinação
→ Lesão física ou química ao revestimento
→ Enzimas rompem camadas extras  entrada de água 
reinício do metabolismo

─ Não é mecanismo de reprodução!

→ Célula vegetativa  endósporo  célula vegetativa
 Estruturas acessórias

Endósporos - Coloração

─ Corantes de Gram não penetram parede do endósporo

─ Técnica de Schaeffer-Fulton
→ Verde malaquita  aquecido em vapor por 5 min
→ Lavagem com água
→ Safranina  corar células vegetativas

Coloração de endósporo Coloração de Gram