FOTOBIOLOGIA

É o ramo da biologia que estuda a interação entre sistemas biológicos e a

radiação eletromagnética.
 LUZ

É uma forma de energia radiante. Caracterizada fisicamente como LUZ VISÍVEL,

porque é o agente físico que, atuando nos órgãos visuais, produz a sensação da
visão.
 ENERGIA RADIANTE

É aquela que se propaga na forma de ondas eletromagnéticas, dentre as quais se pode destacar
as ondas de rádio, TV, microondas, raios X, raios gama, radar, raios infravermelho, radiação
ultravioleta e luz visível.
✓ 15% de raios ultravioleta (A, B e C)
✓ 60% de luz visível
✓ 25% de raios infravermelho
 ONDAS ELETROMAGNÉTICAS

Formada pela combinação de campos elétricos com campos magnéticos

✓ A velocidade de propagação dessas ondas no vácuo é 3 . 108 m/s

A figura mostra uma onda eletromagnética, sendo o campo elétrico (E), o campo magnético
(B) e a velocidade (V) perpendiculares entre si
O comprimento de uma onda eletromagnética é que determina seu comportamento

COMPRIMENTO DE ONDA (λ)

É a distância entre valores repetidos sucessivos num padrão de onda, ou seja, distância
entre picos (máximos), vales (mínimos). Inversamente proporcional a frequência.
✓ Ondas de alta frequência são curtas, tem λ menor
✓ Ondas baixa frequência são longas, tem λ maior
Radiações com comprimentos de onda emitem mais ondas por segundo (maior frequência)
Por esse motivo, são capazes de depositar maior quantidade de energia e,
consequentemente, interagem mais facilmente com ligações químicas de moléculas e
podem causar graves lesões a sistemas biológicos, podendo levar, inclusive à morte.

frequência

energia

poder de penetração
Césio - Seu núcleo não é estável e, para atingir esta estabilidade, emite radiação
Os raios gama, devido à alta energia que possuem, são capazes de penetrar profundamente
na matéria.

- Esterilização de equipamentos médicos

- Descontaminação de produtos alimentícios
Radioterapia - radiação gama, raios X ou feixes de eléctrons para o tratamento de
tumores, eliminando células cancerígenas e impedindo o seu crescimento.
a) Monocromacidade – A luz laser é composta por fótons ou partículas de energia com o
mesmo comprimento de onda e mesma cor, sendo uma luz pura. Já a luz branca é formada
por fótons de vários comprimentos de onda e, consequentemente, de várias cores.
b) Coerência – O feixe se propaga na mesma direção no tempo e no espaço com a mesma
frequência. As ondas dos fótons emitidos são sincronizadas, sendo que os picos e vales
coincidem em termos de direção, amplitude, comprimento e fase.
c) Colimação ou direcionalidade – A luz laser é unidirecional, possuindo divergência angular
muito pequena. O feixe de fótons é paralelo. Isso permite concentrar toda a energia do feixe
em um ponto com precisão.
A interação do laser com os tecidos biológicos é dependente de vários fatores;

LASER TECIDO

▪ Comprimento de onda ▪ Coeficiente de absorção

▪ Densidade de potência ▪ Coeficiente de espalhamento
▪
▪
▪
▪
Forma de emissão da luz
Taxa e duração dos pulsos
Utilização de fibras de contato
Raio focado ou desfocado
X ▪
▪
▪
▪
Índice de refração
Tipos de célula
Perfusão sanguínea
Condução térmica
▪ Tempo de exposição ▪ Oxigenação
▪ Inflamação
▪ Infecção
▪ Necrose
Ao incidir sobre um tecido, podem ocorrer quatro tipos de interação:

a) Absorção – A luz é absorvida por componentes dos tecidos como a água, hemoglobina
ou melanina. Essa energia é transformada em outras formas de energia (calórica,
química, etc.), atuando no interior dos tecidos onde foi absorvida e também propagando
seus efeitos para os tecidos vizinhos.

b) Reflexão – Parte da luz incidente é refletida e perdida.

c) Difusão ou espalhamento – Parte da luz se espalha pelos tecidos, perdendo sua potência.

d) Transmissão – A luz atravessa toda a espessura do tecido.

 “A luz precisa ser
absorvida para produzir
efeitos”
(1ª Lei da Fotobiologia de Grotthus-Draper)
 TRANSMISSÃO

Quando a luz atravessa uma superfície/tecido

Transmissão direta ocorre quando a luz atravessa um objeto e não há mudança na direção ou
qualidade dessa luz. Este fenômeno ocorre quando a luz atravessa um vidro ou o ar, por
exemplo.
Transmissão difusa ocorre quando a luz passa através de um objeto transparente ou
semitransparente e este objeto apresenta algum tipo de textura. A luz ao invés de se projetar
em uma única direção, é desviada em muitas direções.
Transmissão seletiva se dá quando a luz atravessa um objeto colorido. Parte da luz vai ser
absorvida e parte vai ser transmitida por tal objeto. Se projetarmos luz branca sobre uma
superfície vermelha (um filtro vermelho, por exemplo) a luz resultante será vermelha.
 REFLEXÃO

Quando a luz projetada sobre um objeto é refletida, em parte ou totalmente, de

maneira especular (direta) ou difusa, por este objeto.
✓ Devido à rugosidade da pele, a luz incidente reflete em vários ângulos
diferentes dos de entrada, esse fenômeno é responsável pelo brilho observado
na pele humana
Limpeza do local a ser tratado com Laser para remover suor, pomadas e secreção
sebácea minimizando a reflexão.
Ponta do aparelho Laser deve estar em contato leve com a pele e
direcionada perpendicularmente ao tecido alvo para minimizar a reflexão
✓ Conforme a luz atinge a superfície da pele, ocorre uma reflexão de 4-7% devido a
diferença no índice refratário entre o ar (n=0) e a camada córnea(n=1.45)

✓ O restante 93-96% da incidência da luz entra na pele, onde é espalhada e absorvida.

✓ A luz, ao penetrar nos tecidos sofre um processo chamado scattering ou

espalhamento, sendo então, absorvida pelas células e convertida em efeitos biológicos.
 ESPALHAMENTO/SCATTERING

Quando a luz penetra o tecido e encontra um meio que muda o seu caminho
óptico

✓ A mudança de caminho sempre ocorre quando a radiação encontra uma

matéria com índice de refração diferente do inicial

✓ Índice de refração é uma relação entre a velocidade da luz no vácuo e a

velocidade da luz em um determinado meio.

✓ O tecido tem maior índice de refração do que o ar (aproximadamente igual a

1) e dessa forma quando a luz incide no tecido a velocidade diminui.

c é a velocidade da luz no vácuo (c = 3 x m/s); v é a velocidade da luz no meio;

✓ Quanto mais próximo da superfície o espalhamento é mais estreito, e quanto
mais interno, mais espalhado

✓ Um único raio de luz pode entrar em um ponto e sair por vários.

✓ Para cada comprimento de onda o espalhamento acontece de forma diferenciada

Limite de Rayleigh

Regime de Mie
 LIMITE DE RAYLEIGH

O tamanho dos dispersores é pequeno quando comparado com o comprimento de onda

da radiação incidente

✓ Nos meios biológicos, os componentes celulares e alguns agentes extra-celulares,

como colágeno, são exemplos de estruturas que induzem o espalhamento Rayleight da
luz visível e infravermelha

✓ Espalhamento elástico ou linear: o fóton praticamente não perde energia, e a onda

dispersa mudando simplesmente sua direção. Ocorre em meios com presença de
partículas.
 REGIME DE MIE

O tamanho dos dispersores é comparável ao do comprimento de onda da radiação

incidente

✓ Fibras, mitocôndrias, núcleos, entre outras organelas espalham luz sob este regime

✓ Espalhamento não-linear: onde a frequência da radiação propagante é

(eventualmente) menor que a da radiação incidente
 ABSORÇÃO

Quando a luz é absorvida por componentes dos tecidos.

✓ A energia absorvida é medida em Joules/cm2 e é conhecida como densidade

de energia ou fluência.

✓ A absorção ocorre em nível atômico ou molecular e as moléculas capazes de

absorver um comprimento de onda específico são chamadas CROMÓFOROS

✓ Os principais cromóforos da pele são a oxihemoglobina, hemoglobina,

melanina e a água
Uma vez absorvida, a luz pode resultar em 4 efeitos:

Fotoablação
Fototérmica Fotopirólise

Bioestimulação
Fotoquímica Fluorescência tecidual
Interações Terapia fotodinâmica
Teciduais
Fotodissociação
Fotomecânica Fotoacústico

Fotoelétrica Fotoplasmólise
 FOTOTÉRMICO

A energia absorvida se converte em calor e destrói o alvo atingido

✓ São característicos dos lasers cirúrgicos

Fotoablação
Fotopirólise
 FOTOABLAÇÃO

A energia absorvida se converte em calor e destrói o alvo atingido por

vaporização e superaquecimento de fluídos teciduais, coagulação e hemostasia.

✓ Devido ao superaquecimento das camadas internas próximas à superfície, o

tecido é convertido em vapor .
 FOTOPIRÓLISE

A energia absorvida se converte em calor e destrói o alvo atingido por

combustão do tecido à distância; queima do tecido

✓ Este efeito que possibilita a aplicação do laser em corte e coagulação de

tecidos
A maioria das células humanas podem facilmente resistir a temperaturas até 40º C

Efeitos nos tecidos Temperatura

Mudanças de conformação 43 oC
Retração
Hiperemia
Redução da atividade enzimática 50 oC
Desnaturação de proteínas 60 oC
Coagulação
Desnaturação de colágeno 80 oC
Carbonização
Vaporização e ablação 100 oC
 VAPORIZAÇÃO

Imediatamente após a cirurgia observam-se

evidências de dano térmico. Três zonas de
dano tecidual podem ser claramente vistas:
zonas de vaporização, carbonização e
vacuolização. Além desta última zona o
tecido está aparentemente normal.
Um Laser com grande poder de penetração (ex.: Nd:YAG) necessita dispor de uma maior
densidade de potência, em relação a outro de pouco poder de penetração (ex.: CO2), para
se obter o mesmo efeito térmico;
Vaporização de mucocele em lábio inferior com uso de Laser Nd:YAG
Vaporização de linfangioma em lábio superior com uso de Laser CO2
 FOTOQUÍMICO

A energia absorvida resulta numa reação química

✓ Produz a estimulação ou inibição de atividades enzimáticas e de reações fotoquímicas

✓ Mudanças em cadeias complexas e moléculas básicas

✓ Permitindo a instalação de processos fisiológicos de natureza terapêutica, como ações

analgésicas, antiinflamatórias e de reparação tecidual.

Biomodulação

Terapia fotodinâmica

Fluorescência tecidual
Biomodulação
Efeito normalizador de processos bioquímicos e moleculares nos tecidos

Terapia fotodinâmica
Reação fotoquímica citotóxica na qual, uma fonte de luz intensa, ativa um corante,
previamente absorvido pelas células, e esta ativação induz a uma série de reações
metabólicas que culminam com a destruição seletiva do tecido.

Fluorescência tecidual
Método de diagnóstico para detecção de substâncias fotoreativas nos tecidos.
 BIOMODULACÃO

Efeito normalizador de processos bioquímicos e moleculares nos tecidos

✓ Absorção de fótons por parte da célula seja diretamente por captação em

nível de cromóforos mitocondriais ou por ação em sua membrana celular,
produzindo estimulação ou inibição de atividades enzimáticas e de reações
fotoquímicas.

EX: aliviar a dor, mas também para fazer com que a sensibilidade volte a
instalar-se em áreas de parestesia ou paralisia
Comprimentos de onda no vermelho e infravermelho próximo atuam de formas
diferentes, sendo uma com ação intracelular (organelas) e outra extra celular
(membrana).
LASER VERMELHO LASER INFRAVERMELHO

▪ Visível
▪ Ação Mais Superficial ▪ Invisível
▪
▪
Inicio de ação mais rápido
Age diretamente na mitocôndria
(mudanças fotoquímicas nos
receptores)
X ▪ Ação Mais Profunda
▪ O Fóton age
membrana celular
primeiro na
(efeitos
sobre o potencial dos canais de
▪ Age em lisossomos Ca++) causando excitação de
▪ Há uma direta ativação da indução elétrons, vibração e rotação de
de síntese de enzimas e ATP partes da molécula ou a
molécula como um todo
▪ Incremento da síntese de ATP
Os efeitos biomodulatórios do Laser de baixa intensidade incluem:

Efeitos primários ou diretos – quando a energia absorvida nos tecidos transforma-se

imediatamente em outro tipo de energia ou efeito biológico. Classificados em: efeitos
bioquímicos, bioelétricos e bioenergéticos.

Efeitos secundários ou indiretos – resultando em aumento do fluxo sanguíneo e da drenagem

linfática, interferindo na resposta inflamatória do organismo.

Efeitos terapêuticos gerais - antiinflamatório, analgésico e reparador tecidual

Promovem ações de natureza analgésica, anti-

inflamatória e cicatrizante
Efeitos Primários ou Diretos

▪ Efeitos Bioquímicos – Liberação de substâncias pré-formadas, tais como: histamina,

serotonina e bradicinina.
Estimula a produção de ATP
Inibe a síntese de prostaglandinas (antiinflamatório)
Liberação de Beta endorfina e serotonina (analgésico)
Ação fibrinolítica (antiedematoso)

▪ Efeito Bioelétrico - Ajuda a normalizar o potencial da membrana agindo diretamente na

mobilidade iônica (através do fótons), e indiretamente, aumentando a quantidade de ATP
produzida pela célula, ocorrendo a potencialização da bomba de sódio e potássio.

▪ Efeito Bioenergético- Ativação do sistema imunológico. Incremento da atividade

fagocitária dos linfócitos e macrófagos e melhora a quimiotaxia de leucócitos.
Efeitos Secundários ou Indiretos

▪ Estímulo à microcirculação – Liberação de Histamina leva ao aumento do fluxo sanguíneo

▪ Estímulo ao trofismo celular - Aumento da produção de ATP acarreta o aumento na

velocidade da taxa de mitose, e isso aumenta os processos de reparação tecidual, pelo
estímulo à capacidade de cicatrização do tecido conjuntivo e pela neoangiogênese e
melhora o trofismo celular.
Efeitos Terapêuticos

Antiinflamatório – Aumenta a degranulação dos mastócitos elevando a quantidade de

histamina, o que gera vasodilatação e aumento da permeabilidade vascular.

Inibindo a produção de prostaglandinas, por ação bloqueadora na ação da enzima

ciclooxigenase sobre o ácido araquidônico.
Objective: This article aimed to study the effect of LED Phototherapy (LED-PHT) (630nm or
850 nm) on mast cells on the dorsum of the tongue of rodents.
Methods: Sixty Wistar rats were divided into three groups: I, Control; II, IR-LED (850 nm,
21.9 J/cm2, 73 sec; and III, red-LED (630 nm, 21.9 J/cm2, 73 sec). The specimens were taken
after, 20, 45, and 60 min following irradiation. The specimens were routinely processed;
stained with toluidine blue; and then total, degranulated, and nondegranulated mast cells
were counted and statistical analysis performed.
Conclusions: Our results lead us to conclude that both red and IR-LED light caused
increased mast cell degranulation and that IR-LED light resulted in a greater number of
mast cells.
Efeitos Terapêuticos

Analgésico – Aumento da concentração de beta-endorfina no líquido cefalorraquidiano.

Manutenção do potencial de membrana, evitando a despolarização, por meio

do aumento da síntese de ATP. Essa energia é usada para expulsar os íons Na+ do interior da
célula, dificultando a transmissão do estímulo doloroso local.
Efeitos Terapêuticos

Antiedematoso – Estímulo a microcirculação, pois favorece melhores condições de drenagem

do plasma que forma o edema.

Ação fibrinolítica que proporciona a resolução efetiva do isolamento causado

pela coagulação do plasma, que determina o edema duro
Efeitos Terapêuticos

Reparador Tecidual – Incrementa a produção de ATP, proporcionando um aumento da

atividade mitótica e aumento da síntese de proteína por intermédio da mitocôndria tendo
como consequência, o aumento da regeneração tecidual em um processo de reparação.

✓ Estímulo à microcirculação
✓ Aumento do tecido de granulação
✓ Regeneração de fibras nervosas
✓ Neoformação de vasos sanguíneos e regeneração dos vasos linfáticos
✓ Aumento da quantidade de colágeno após irradiação, das ligações cruzadas do colágeno e
da tensão de ruptura da ferida
✓ Incremento da atividade fagocitária dos linfócitos e macrófagos.
Fotobiomodulação para tratamento de afta, herpes, mucosite
 TERAPIA FOTODINÂMICA

Reação fotoquímica citotóxica na qual, uma fonte de luz intensa, ativa um corante,
previamente absorvido pelas células, e esta ativação induz a uma série de reações
metabólicas que culminam com a destruição seletiva do tecido.

LUZ

TFD

FS O2
Absorção do FS

Irradiação com uma fonte de luz

FS ativado pela luz, transfere

energia ao oxigênio molecular

Formação de espécies reativas de

oxigênio

Morte celular
 FS remove átomos de H do
substrato biológico
Radicais livres ou O2
íons-radicais molecular

Estado Estado Estado

fundamental singleto tripleto
FS transfere elétrons ao
substrato biológico
Radical superóxido,
hidroxila e peróxido de
hidrogênio

MECANISMO TIPO I
O FS reage com o substrato biológico
(fosfolipídeos, colesterol e proteínas)
formando radicais capazes de oxidar
biomoléculas destruição celular.
 FS transfere energia
O2 O2 singleto
molecular

Estado Estado Estado

fundamental singleto tripleto

Altamente reativo

MECANISMO TIPO II
O FS reage com o oxigênio molecular
formando oxigênio singleto, altamente
reativo que causa destruição celular.
Terapia fotodinâmica antitumoral