DETERMINAÇÃO DE

COLINESTERASE EM SORO
ou PLASMA
UC: ANÁLISES QUÍMICAS E TOXICOLÓGICAS

Prof. Dra. Cristina Massocatto

Diagnóstico da intoxicação por inibidores de AchE

• História clínica
• Clínico: Sintomatologia típica
• Laboratorial: Dosagem das enzimas colinesterase
plasmática ou acetilcolinesterase eritrocitária

• Plasmática: Pseudocolinesterase - suspeita de exposição aguda –

T ½ vida: 7 dias

• Eritrocitária: AchE verdadeira - suspeita de exposição crônica –

maior tempo para diminuir e também para normalizar – T ½ vida:
90 dias
 Sinapse de
neurotransmissão AChE permitem que o neurônio colinérgico
retorne ao seu estado de repouso após ser
colinérgica ativado.
Colinesterase (ChE) sérica

à Encontrada no fígado, substância branca do cérebro,

pâncreas, coração e soro.

à Valores diminuídos de ChE séricos podem ser

determinados como um indicador de envenenamento
hepático por inalação ou com contato com a pele por
alguns compostos organofosforados.
 Colinesterase (ChE) sérica
Classificação do Diminuição dos
envenenamento níveis de ChE
Leve 15-25%
Moderado 25-35%
Grave 30-50%

***Uma diminuição de 50 -
70% ocorre em pacientes com
cirrose avançada e carcinoma
de metástase no fígado.
DOSAGEM DE PSEUDOCOLINESTERASE
AMOSTRAS
• Pode ser utilizado o soro ou plasma heparinizado ou
no EDTA.

• Atividade enzimática permanece estável em

amostras armazenadas durante 15 dias entre 2-8oC
e 6 meses a -20oC.
 PRINCÍPIO DE AÇÃO
Metodologia: Cinética
Finalidade: determinar a atividade da pseudocolinesterase

Sobre a ação catalítica de Colinesterase, a Butiriltiocolina é hidrolisada

em Tiocolina e Butirato

R2
A Tiocolina reduz ferricianeto de potássio, de cor amarela, em
ferrocianeto de potássio, que é incolor.

R1
O decréscimo da absorbância é medido a 405 nm, sendo proporcional
a concentração de pseudocolinesterase na amostra
 TÉCNICA
PROCEDIMENTO
Amostra ou calibrador 8 µL
Reagente A 300 µL
Incubação durante 5 minutos a 37oC.
Reagente B 60 µL
Homogeneizar e transferir imediatamente para a cubeta.
Esperar 2 minutos.

ØFazer a leitura inicial (A1) em 405 nm disparando simultaneamente o

cronômetro.
ØRepetir a leitura após 3 minutos (A2).
ØPARA OBTER O RESULTADO DE COLINESTERASE U/L, MULTIPLICAR A
DIFERENÇA DE ABSORBÂNCIA (A2-A1) PELO FATOR.
 Calculando o fator de calibração:

CÁLCULOS

EXEMPLO:
VALORES DE REFERÊNCIA à SORO ou
PLASMA