Controle de crescimento microbiano

Hemilly Silva
Programa de Pós-Graduação em Genética
Aggeu Magalhães/ FioCruz
Introdução

• O controle científico do crescimento microbiano começou somente há

cerca de 100 anos;
• Pasteur levou os cientistas a acreditarem que microrganismos eram a
causa possível de doenças.

Na metade do século XIX

iniciaram as primeiras
práticas de controle
microbiano em procedimentos
médicos – lavagem das mãos e
técnicas cirúrgicas
assépticas.
Por que fazer controle microbiano?

• Prevenção e transmissão doenças;

•Inibição ou destruição total;

• Métodos físicos de controle do crescimento microbiano são

frequentemente utilizados na indústria, medicina e em domicilio para
promover a descontaminação microbiana, desinfecção e esterilização;

• O calor, a radiação e a filtração são capazes de destruir ou remover

os micro-organismos.
Controle de crescimento microbiano
Conceitos
 Controle de crescimento microbiano
Conceitos

• Os nomes dos tratamentos que causam a morte direta dos microrganismos

possuem o sufixo -cida, significando morte;

• Um biocida ou germicida mata os microrganismos (geralmente com algumas

exceções, como os endosporos); um fungicida mata os fungos; um viricida
inativa os vírus; e assim por diante.;

• Outros tratamentos somente inibem o crescimento e a multiplicação de

bactérias; seus nomes têm o sufixo -stático ou -stase, significando parar ou
diminuir, como na bacteriostase;
 Controle de crescimento microbiano
Conceitos

✔ Uma vez que um agente bacteriostático é removido, o crescimento é

retomado;

✔ Sepse, do termo grego para estragado ou podre, indica contaminação

bacteriana, como nas fossas sépticas para tratamento de esgoto;

✔ Assepsia é a ausência de contaminação significativa. Técnicas assépticas são

importantes em cirurgia para minimizar a contaminação dos instrumentos, da equipe
cirúrgica e do paciente.
Agentes químicos antimicrobianos
Fatores que influenciam a efetividade de tratamentos antimicrobianos

1 ) O número de microrganismos

• Quanto mais microrganismos existem no início, mais tempo é necessário para eliminar
a população inteira;

• Além disso, as bactérias frequentemente formam biofilmes, revestindo as superfícies

de tecidos ou os dispositivos médicos com camadas de células microbianas embebidas
em polissacarídeos;

• Os biofilmes podem retardar ou mesmo impedir totalmente a penetração dos agentes

antimicrobianos, reduzindo ou anulando sua eficiência
2) Influências ambientais

• A presença de matéria orgânica frequentemente inibe a ação dos

antimicrobianos
• químicos;

•Em hospitais, a presença de matéria orgânica como sangue, vômito ou fezes

influencia a seleção de desinfetantes;

•Microrganismos em biofilmes sobre superfícies são mais difíceis de serem

atingidos com eficiência pelos biocidas;
3) Tempo de exposição

• Os antimicrobianos químicos frequentemente requerem exposição

prolongada para que os microrganismos ou endósporos mais resistentes
sejam afetados.
Métodos físicos de controle microbiano

1 ) Calor

•O calor aparentemente mata os microrganismos pela desnaturação de suas

enzimas, que resulta em mudanças na forma tridimensional dessas proteínas,
inativando-as;
1.1 Esterilização por calor úmido

•O calor úmido mata os microrganismos principalmente pela coagulação proteica

(desnaturação), que é causada pela ruptura de ligações de hidrogênio que mantêm as
proteínas em sua estrutura tridimensional.

•Esse processo de coagulação é familiar a qualquer pessoa que já observou uma clara
de ovo fritando;

Figura 5.33 A autoclave e a esterilização pelo calor úmido. (a) O fluxo do vapor através de uma autoclave.
Calor úmido:

• Autoclave (121 ºC, pressão 1,1kg/cm2)

• Fervura (100 ºC)- mata os patógenos bacterianos vegetativos, os fungos
e seus esporos e quase todos os virus em torno de 10 minutoos;
Endosporos e alguns virus tem resistência;

• (coagulação proteina - desnaturação por ruptura das interações de

hidrogênio)
Ciclo da autoclave

• Pré-vácuo condição negativa. Essa pressão negativa é importante pra que o vapor entre
em contato com os materiais;
• Após a pressão negativa o vapor consegui entrar e juntamente com a agua aquecida.
1.2 Pasteurização

• O objetivo ao pasteurização é eliminar micro-organismos patogênicos;

• O processo também reduz o número de microrganismos, prolongando a qualidade do

leite quando mantido sob refrigeração;

• Além disso, pela redução da carga microbiana geral, a pasteurização retarda o

crescimento de organismos deteriorantes, aumentando consideravelmente o prazo
• de validade de líquidos perecíveis
1.3 Tratamentos de temperatura ultraelevada (UHT)

• Após atingir uma temperatura de 140ºC por 4 segundos. Mata todos os

microrganismos.
1.4 Esterilização por calor seco

Os itens esterilizados por esse procedimento são colocados em um forno.

Geralmente, uma temperatura de cerca de 170°C mantida por
aproximadamente duas horas assegura a esterilização.
2 ) Baixas temperaturas

• O efeito das baixas temperaturas sobre os

micro-organismos depende do micróbio
específico e da intensidade da aplicação;

• Por exemplo, nas temperaturas dos

refrigeradores comuns (0 a 7°C), a taxa
metabólica da maioria dos microrganismos é tão
reduzi da que eles não podem se reproduzir ou
sintetizar toxinas;

• A refrigeração comum tem efeito

bacteriostático;
2 ) Baixas temperaturas

• Contudo, os psicotróficos ainda crescem

lentamente em temperaturas de refrigerador,
alterando o aspecto e o sabor dos alimentos
após algum tempo;

• O congelamento lento é mais nocivo às

bactérias; os cristais de gelo que se formam e
crescem rompem a estrutura celular e
molecular bacteriana.
3 ) Filtração

•A filtração é a passagem de um líquido ou gás por

meio de um material semelhante a uma tela, com
poros pequenos o suficiente para reter os
microrganismos;

•A filtração é usada para esterilizar os materiais

sensíveis ao calor, como alguns meios de cultura,
enzimas, vacinas e soluções antibióticas;

•Algumas salas de cirurgia e salas ocupadas por

pacientes queimados recebem ar filtrado para
reduzir o número de microrganismos transmitidos
pelo ar.
 FILTRAÇÃO

Materiais termolábeis

HEPA (High efficiency particulate air filters)- Filtro de ar particulado de alta

eficiência. Capazes de remover quase todos os micro-organismos maiores de
0,3 micrómetro de diâmentro;

Acetato de celulose dobrado ao redor de folhas de alumínio. Bastante usado

nos laboratórios de microbiologia.
 Filtração

TORTORA et al., 2012

Sistema de Filtração acoplado
4 ) Dessecação

•Na ausência de água, uma condição conhecida

como dessecação, os microrganismos não
podem crescer ou se reproduzir, mas podem
permanecer viáveis por anos;

•A resistência das células vegetativas ao

ressecamento varia com a espécie e o
ambiente do organismo.

•Por exemplo, a bactéria da gonorreia pode

suportar o ressecamento somente por cerca
de uma hora;
5 ) Radiação

•A radiação apresenta vários efeitos sobre as

células, dependendo de seu comprimento de onda,
intensidade e duração. Existem dois tipos de
radiação que matam micro-organismos (radiação
esterilizante): ionizante e não ionizante;

•O principal efeito da radiação ionizante (raios

gama, raios X ou feixes de elétrons de alta energia)
é a ionização da água, que forma radicais hidroxila
altamente reativos . Esses radicais reagem com os
componentes orgânicos celulares, especialmente o
DNA;
 Controle de crescimento microbiano
Métodos físicos de controle microbiano
 Controle de crescimento microbiano
Métodos físicos de controle microbiano
Pressão osmótica

É a pressão que se faz sobre a solução mais concentrada para impedir a passagem de
solvente (no caso, a água) pela membrana citoplasmática, de uma solução mais diluída
(interior da célula) para a mais concentrada;
Concentrações de sal
Concentrações de açúcar
(diminuição da atividade da água)
AGENTES QUÍMICOS
Grupos USO Modo de ação Concentração Tempo de exposição
Álcoois antisséptico desnaturação proteica 77% (v/v) 10 segundos
desinfetante solvente de lipídeos 70% em peso (3 aplicações)
Aldeídos
formaldeído desinfetante desnaturação proteica alcoólica 8% 30 minutos
esterilizante Aquosa 4-10% 18 horas
desinfetante desnaturação proteica 2% 30 minutos
glutaraldeído
esterilizante 12 horas

Halogênios
hipoclorito desinfetante desnaturação proteica 1% cloro ativo 10 minutos
sanitizante inativação de ac.
desinfetante nucleicos 1% iodo ativo imediata
iodóforos Oxidação de grupos SH (água, álcool ou
antisséptico
combinação com tirosina detergente)

Fenóis desinfetante precipitação de proteínas 3% 10-30 minutos

CQA desinfetante alteração da membrana 1:1000 10-30 minutos

sanitizante celular bacteriana
Metais pesados antisséptico coagulação de proteínas 0,1-2% enquanto em contato

Oxidantes antisséptico agente oxidante H2O2 - 3% enquanto em contato

KMnO4 – 1:10000
Corantes antisséptico ? 1-5% prolongada
ANTIBIÓTICOS
 AVALIAÇÃO EFICÁCIA DOS AGENTES QUÍMICOS E
FÍSICOS

• Teste disco (agentes químicos)

Vamos exercitar a aula de hoje !!!!!!

Por que o calor é um agente eficaz de esterilização?

Vamos exercitar a aula de hoje !!!!!!

Diferencie antibióticos bactericidas de bacteriostático.

Vamos exercitar a aula de hoje !!!!!!

Qual objetivo principal da pasteurização?