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Eppendorf Reference® 2

Ajuste
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P-TR-0000469-00/092015
 Índice
Eppendorf Reference® 2 3
Português (PT)

Índice
1 Requisitos para um ajuste . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5
1.1 Ajuste de fábrica . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 6
1.2 Ajuste do usuário . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 7
1.2.1 Exemplo de ajuste . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 8
1.3 Alteração do volume em caso de ajuste de usuário alterado . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9
1.3.1 Alteração do volume em pipetas monocanal . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9
1.3.2 Alteração do volume em pipetas multicanal . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9
1.4 Ajuste para epT.I.P.S. Long . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 10

2 Líquidos com densidade elevada ou reduzida . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11

2.1 Cloreto de césio CsCl . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11
2.1.1 Valores de configuração para pipeta monocanal . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11
2.1.2 Valores de configuração para pipeta multicanal. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11
2.2 Glicerina C3H8O3. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12
2.2.1 Valores de configuração para pipeta monocanal . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12
2.2.2 Valores de configuração para pipeta multicanal. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 12
2.3 Soda cáustica líquida NaOH . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13
2.3.1 Valores de configuração para pipeta monocanal . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 13
2.4 Ácido fosfórico H3PO4. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14
2.4.1 Valores de configuração para pipeta monocanal . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 14

3 Ação capilar na imersão da ponteira de pipeta . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15

3.1 Dimetilsulfóxido DMSO. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15
3.1.1 Valores de configuração para pipeta monocanal . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 15

4 Erros . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16
4.1 Erros de medição de acordo com a Eppendorf AG . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16
4.1.1 Pipetas monocanal com volume variável . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16
4.1.2 Pipetas multicanal com volume variável . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 17
4.2 Limites de erro de acordo com ISO 8655-2002 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18
 Índice
4 Eppendorf Reference® 2
Português (PT)
 Requisitos para um ajuste
Eppendorf Reference® 2 5
Português (PT)

1 Requisitos para um ajuste

Através do ajuste o volume de dispensação é ajustado de forma que os erros de medição sistemáticos para
a aplicação prevista sejam reduzidos. Através de um ajuste o volume de dispensação é alterado ao longo de
toda a faixe de volume aproximadamente pelo mesmo volume.

O desvio do volume real do valor configurado pode ter diversas causas. Antes de realizar um ajuste
verifique que é possível excluir outras causas para desvios na dispensação.
• Cone de pico está OK
• Ponteira de pipeta é compatível com a pipeta
• Pipeta está estanque
• Foi realizada uma pré-molhagem suficiente
• Líquido, instrumento e ar ambiente têm a mesma temperatura
• Modo de trabalho e velocidade de pipetagem corretos
• Resolução suficiente da balança
• Local de pesagem sem correntes de ar
• Cálculo correto do volume

É necessário ajustar a pipeta, se em uma verificação gravimétrica for detectada a existência de um erro a
corrigir.

A alteração do ajuste é útil quando:

• Soluções que se diferenciam grandemente da água em suas propriedades físicas (densidade,
viscosidade, tensão superficial, pressão de vapor)
• Ação capilar na imersão da ponteira da pipeta (por ex. no caso de DMSO)
• Pressão atmosférica alterada devido a altura geográfica do local de utilização
• Ponteiras de pipeta cuja geometria se diferencia claramente de ponteiras padrão (por ex. ep T.I.P.S.
long)

A alteração do ajuste não influencia o erro de medição aleatório da dispensação. O erro de

medição aleatório pode ser melhorado através da substituição de peças desgastadas. O erro
de medição aleatório é ainda influenciado fortemente através do manuseio.
 Requisitos para um ajuste
6 Eppendorf Reference® 2
Português (PT)

1.1 Ajuste de fábrica

Requisito
• Pino
• Tampão de segurança vermelho de plástico
• Indicação do ajuste na posição "0"

1. Verificar o instrumento gravimetricamente e

registrar os resultados.

2. Perfurar o tampão de segurança no centro com o

pino.
3. Remover o tampão de segurança.

AD
J
Re

4. Inserir a ferramenta de ajuste.

AD
J
Re

5. Fixar o botão de comando.

6. Rodar a ferramenta de ajuste para alterar a
indicação do volume.

AD
J
Re

7. Ajustar o volume determinado através da análise

gravimétrica.
8. Analisar gravimetricamente a configuração nos
volumes de teste.
 Requisitos para um ajuste
Eppendorf Reference® 2 7
Português (PT)

9. Inserir o tampão de segurança vermelho.

A pipeta é identificada com o tampão de
segurança vermelho como uma pipeta ajustada e
calibrada pelo usuário.

AD
J
Re

1.2 Ajuste do usuário

A alteração do ajuste do usuário é representada claramente na janela. Na entrega o indicador de ajuste está
ajustado para "0". Repondo para "0" é possível restaurar o ajuste de fábrica.

Requisito
• Pino
• Vedação de ajuste vermelha de plástico

1. Determinar gravimetricamente o desvio do

volume dispensado em relação ao volume
ajustado.
2. Com base no desvio calculado (aqui na
pág. 9)determinar o valor para o ajuste do
usuário.

3. Perfurar a vedação de ajuste no centro com o

pino.
Reference 2

4. Retirar a vedação de ajuste.

J
AD

5. Inserir a ferramenta de ajuste.

Reference 2

6. Rodar a ferramenta de ajuste até o indicador de

ajuste indicar o valor pretendido.
 Requisitos para um ajuste
8 Eppendorf Reference® 2
Português (PT)

7. Analisar gravimetricamente o ajuste do volume

de teste.

Reference 2 8. Inserir a vedação de ajuste vermelha.

9. Identificar o tempo de validade da pipeta.

A pipeta é identificada com a vedação de ajuste
vermelha como uma pipeta ajustada e calibrada
pelo usuário.

1.2.1 Exemplo de ajuste

Problema
• Ajuste do volume 300 μL
• Líquido dimetilsulfóxido (DMSO)
• Devido a ação capilar aspiração de volume de 303 μL
Solução

 Ajustar a escala do ajuste do usuário para -4.

O volume de dispensação efetivo é reduzido em aprox. 3 μL para 300 μL.
 Requisitos para um ajuste
Eppendorf Reference® 2 9
Português (PT)

1.3 Alteração do volume em caso de ajuste de usuário alterado

Os valores de volume (Δ V) são valores teóricos e se destinam apenas a orientação. Eles se aplicam a
pipetas com ajuste de volume variável para cada volume ajustado. Em função do modo de trabalho e outras
condições (temperatura, densidade, etc.) podem ocorrer desvios em relação aos valores.

1.3.1 Alteração do volume em pipetas monocanal

Volume nominal Código de cor Ajuste do usuário Δ V [μL]

+8 +6 +4 +2 -2 -4 -6 -8
1 μL cinza escuro 0,05 0,0375 0,025 0,0125 -0,012 -0,025 -0,037 -0,05
2 μL 5 5

2,5 μL
5 μL cinza médio 0,2 0,15 0,1 0,05 -0,05 -0,1 -0,15 -0,2
10 μL
20 μL cinza claro 0,4 0,3 0,2 0,1 -0,1 -0,2 -0,3 -0,4
10 μL amarelo 0,4 0,3 0,2 0,1 -0,1 -0,2 -0,3 -0,4
20 μL
25 μL amarelo 2 1,5 1 0,5 -0,5 -1 -1,5 -2
50 μL
100 μL
200 μL amarelo 4 3 2 1 -1 -2 -3 -4
300 μL laranja 6 4,5 3 1,5 -1,5 -3 -4,5 -6
200 μL azul 20 15 10 5 -5 -10 -15 -20
250 μL
500 μL
1000 μL
2 mL vermelho 50 37,5 25 12,5 -12,5 -25 -37,5 -50
2,5 mL
5 mL violeta 100 75 50 25 -25 -50 -75 -100
10 mL azul turquesa 200 150 100 50 -50 -100 -150 -200

1.3.2 Alteração do volume em pipetas multicanal

Volume nominal Código de cor Ajuste do usuário Δ V [μL]

+8 +6 +4 +2 -2 -4 -6 -8
10 μL cinza médio 0,2 0,15 0,1 0,05 -0,05 -0,1 -0,15 -0,2
100 μL amarelo 2 1,5 1 0,5 -0,5 -1 -1,5 -2
300 μL laranja 6 4,5 3 1,5 -1,5 -3 -4,5 -6
 Requisitos para um ajuste
10 Eppendorf Reference® 2
Português (PT)

1.4 Ajuste para epT.I.P.S. Long

A geometria das ponteiras de pipeta diferencia-se claramente da de ponteiras padrão. Na utilização de

epT.I.P.S. Long é aspirado um volume menor. É recomendável uma alteração da configuração do usuário
para a redução de erros de medição sistemáticos.

Condições de teste
• Utilização de água desmineralizada
• Pipetagem a temperatura ambiente
• Ponteira pré-molhada
• Profundidade de imersão da ponteira aprox. 5 mm
• Aspiração e dispensação lentas da água
• Blow-out é acionado com um retardo de aprox. 2 segundos
• Aspiração preferencialmente vertical e dispensação ligeiramente inclinada na parede

epT.I.P.S. Código de cor pipeta Ajuste do volume Ajuste recomendado para o

ajuste do usuário
1250 μL L azul 500 μL +4
1000 μL +4
5 mL L violeta 2,5 mL +1,5
5 mL +1,5
10 mL L azul turquesa 5 mL +2
10 mL +5

Os valores de medição dependem em grande medida do modo de trabalho individual. As

configurações recomendadas têm de ser verificadas através de uma medição gravimétrica.
 Líquidos com densidade elevada ou reduzida
Eppendorf Reference® 2 11
Português (PT)

2 Líquidos com densidade elevada ou reduzida

No caso de líquidos com densidade elevada ou reduzida é aconselhável ajustar a pipeta. Os valores para o
ajuste encontram-se nas tabelas.

Os valores de medição dependem em grande medida do modo de trabalho individual. As

configurações recomendadas têm de ser verificadas através de uma medição gravimétrica.

2.1 Cloreto de césio CsCl

Condições de teste
• Concentração 45 %
• Temperatura 22 °C
• Densidade 1,501 g/mL
• Dispensação de líquido na parede do tubo
• Blow-out 3 s após dispensação
• Ponteira de pipeta não está pré-molhada
• Ponteira de pipeta nova para cada dispensação de líquido

2.1.1 Valores de configuração para pipeta monocanal

Volume nominal Código de cor Valor de configuração Valor de configuração

100 % volume nominal 50 % volume nominal
2,5 μL cinza escuro – –
10 μL cinza médio +6,5 +3,5
20 μL cinza claro +6,5 +2,5
20 μL amarelo +6,5 +2,5
100 μL amarelo +3 +3
200 μL amarelo +2,5 +2
300 μL laranja +2,5 +2,5
1000 μL azul +2 +2
2,5 mL vermelho +1,5 +1,5
5 mL violeta +1,5 +1,5
10 mL azul turquesa +5 +4

2.1.2 Valores de configuração para pipeta multicanal

Volume nominal Código de cor Valor de configuração Valor de configuração

100 % volume nominal 50 % volume nominal
10 μL cinza médio +3 +3
100 μL amarelo +1 +1
300 μL laranja +1 +1
 Líquidos com densidade elevada ou reduzida
12 Eppendorf Reference® 2
Português (PT)

2.2 Glicerina C3H8O3

Condições de teste
• Concentração 50 %
• Temperatura 25 °C
• Densidade 1,124 g/mL
• Dispensação de líquido na parede do tubo
• Blow-out 3 s após dispensação
• Ponteira de pipeta não está pré-molhada
• Ponteira de pipeta nova para cada dispensação de líquido

2.2.1 Valores de configuração para pipeta monocanal

Volume nominal Código de cor Valor de configuração Valor de configuração

100 % volume nominal 50 % volume nominal
2,5 μL cinza escuro 0 0
10 μL cinza médio 0 0
20 μL cinza claro +1 0
20 μL amarelo +1 0
100 μL amarelo +1 +1
200 μL amarelo +1 +1
300 μL laranja +1 +1
1000 μL azul +1 +1
2,5 mL vermelho +1 +1
5 mL violeta +1 +0,5
10 mL azul turquesa +2 +0,5

2.2.2 Valores de configuração para pipeta multicanal

Volume nominal; código Código de cor Valor de configuração Valor de configuração

de cor 100 % volume nominal 50 % volume nominal
10 μL cinza médio 0 0
100 μL amarelo 0 0
300 μL laranja +0,5 +0,5
 Líquidos com densidade elevada ou reduzida
Eppendorf Reference® 2 13
Português (PT)

2.3 Soda cáustica líquida NaOH

Condições de teste
• Concentração 40 %
• Temperatura 25 °C
• Densidade 1,437 g/mL
• Dispensação de líquido na parede do tubo
• Blow-out 3 s após dispensação
• Ponteira de pipeta não está pré-molhada
• Ponteira de pipeta nova para cada dispensação de líquido

2.3.1 Valores de configuração para pipeta monocanal

Volume nominal Código de cor Valor de configuração

100 % volume nominal
20 μL cinza claro +3
20 μL amarelo +5
100 μL amarelo 0
200 μL amarelo +2
300 μL laranja +3
1000 μL azul +0,5
2,5 mL vermelho +2
5 mL violeta +4
10 mL azul turquesa +6
 Líquidos com densidade elevada ou reduzida
14 Eppendorf Reference® 2
Português (PT)

2.4 Ácido fosfórico H3PO4

Condições de teste
• Concentração 85 %
• Temperatura 25 °C
• Densidade 1,689 g/mL
• Dispensação de líquido na parede do tubo
• Blow-out 3 s após dispensação
• Ponteira de pipeta não está pré-molhada
• Ponteira de pipeta nova para cada dispensação de líquido

2.4.1 Valores de configuração para pipeta monocanal

Volume nominal Código de cor Valor de configuração

100 % volume nominal
20 μL cinza claro 0
20 μL amarelo 0
100 μL amarelo +1
200 μL amarelo +2
300 μL laranja +2
1000 μL azul +2
2,5 mL vermelho +3
5 mL violeta +5
10 mL azul turquesa +8
 Ação capilar na imersão da ponteira de pipeta
Eppendorf Reference® 2 15
Português (PT)

3 Ação capilar na imersão da ponteira de pipeta

Devido a efeitos capilares é aspirada uma maior quantidade de líquido em caso de líquidos como, por
exemplo, dimetilsulfóxido. É recomendável uma alteração da configuração do usuário para a redução de
erros de medição sistemáticos.

Os valores de medição dependem em grande medida do modo de trabalho individual. As

configurações recomendadas têm de ser verificadas através de uma medição gravimétrica.

3.1 Dimetilsulfóxido DMSO

Condições de teste
• Concentração 99,8 %
• Temperatura 25 °C
• Densidade 1,097 g/mL
• Dispensação de líquido na parede do tubo
• Blow-out 3 s após dispensação
• Ponteira de pipeta não está pré-molhada
• Ponteira de pipeta nova para cada dispensação de líquido

3.1.1 Valores de configuração para pipeta monocanal

Volume nominal Código de cor Valor de configuração

100 % volume nominal
20 μL cinza claro -4
20 μL amarelo -4
100 μL amarelo -4
200 μL amarelo -4
300 μL laranja -4
1000 μL azul -2
2,5 mL vermelho -1
5 mL violeta -2
10 mL azul turquesa 0
 Erros
16 Eppendorf Reference® 2
Português (PT)

4 Erros
4.1 Erros de medição de acordo com a Eppendorf AG
4.1.1 Pipetas monocanal com volume variável

Modelo Ponteira de teste Volume de Erro

epT.I.P.S. teste sistemático aleatório
±% ± μL ±% ± μL
0,1 μL – 2,5 μL 0,1 μL – 10 μL 0,1 μL 48,0 0,048 12,0 0,012
cinza escuro 0,25 μL 12,0 0,03 6,0 0,015
34 mm
1,25 μL 2,5 0,031 1,5 0,019
2,5 μL 1,4 0,035 0,7 0,018
0,5 μL – 10 μL 0,1 μL – 20 μL 0,5 μL 8,0 0,04 5,0 0,025
cinza médio 1 μL 2,5 0,025 1,8 0,018
40 mm
5 μL 1,5 0,075 0,8 0,04
10 μL 1,0 0,10 0,4 0,04
2 μL – 20 μL 0,5 μL – 20 μL L 2 μL 3,0 0,06 1,5 0,03
cinza claro 10 μL 1,0 0,10 0,6 0,06
46 mm
20 μL 0,8 0,16 0,3 0,06
2 μL – 20 μL 2 μL – 200 μL 2 μL 5,0 0,10 1,5 0,03
amarelo 10 μL 1,2 0,12 0,6 0,06
53 mm
20 μL 1,0 0,2 0,3 0,06
10 μL – 100 μL 2 μL – 200 μL 10 μL 3,0 0,3 0,7 0,07
amarelo 50 μL 1,0 0,5 0,3 0,15
53 mm
100 μL 0,8 0,8 0,2 0,2
20 μL – 200 μL 2 μL – 200 μL 20 μL 2,5 0,5 0,7 0,14
amarelo 100 μL 1,0 1,0 0,3 0,3
53 mm
200 μL 0,6 1,2 0,2 0,4
30 μL – 300 μL 20 μL – 300 μL 30 μL 2,5 0,75 0,7 0,21
laranja 150 μL 1,0 1,5 0,3 0,45
55 mm
300 μL 0,6 1,8 0,2 0,6
100 μL – 1000 μL 50 μL – 1000 μL 100 μL 3,0 3,0 0,6 0,6
azul 500 μL 1,0 5,0 0,2 1,0
71 mm
1000 μL 0,6 6,0 0,2 2,0
0,25 mL – 2,5 mL 0,25 mL – 2,5 mL 0,25 mL 4,8 12 1,2 3
vermelho 1,25 mL 0,8 10 0,2 2,5
115 mm
2,5 mL 0,6 15 0,2 5
 Erros
Eppendorf Reference® 2 17
Português (PT)

Modelo Ponteira de teste Volume de Erro

epT.I.P.S. teste sistemático aleatório
±% ± μL ±% ± μL
0,5 mL – 5 mL 0,1 mL – 5 mL 0,5 mL 2,4 12 0,6 3
violeta 2,5 mL 1,2 30 0,25 6
120 mm
5,0 mL 0,6 30 0,15 7,5
0,5 mL – 5 mL 0,1 mL – 5 mL L 0,5 mL 5,0 25 1,0 5,0
violeta 2,5 mL 3,0 75 0,9 22,5
175 mm
5,0 mL 2,0 100 0,8 40
1 mL – 10 mL 1 mL – 10 mL 1,0 mL 3,0 30 0,6 6
azul turquesa 5,0 mL 0,8 40 0,2 10
165 mm
10,0 mL 0,6 60 0,15 15
1 mL – 10 mL 1 mL – 10 mL L 1,0 mL 6,0 6 1,0 10
azul turquesa 5,0 mL 3,0 150 0,9 45
243 mm
10,0 mL 2,0 200 0,7 70

4.1.2 Pipetas multicanal com volume variável

Modelo Ponteira de teste Volume de Erro

epT.I.P.S. teste sistemático aleatório
±% ± μL ±% ± μL
0,5 μL – 10 μL 0,1 μL – 20 μL 0,5 μL 12,0 0,06 8,0 0,04
cinza médio 1 μL 8,0 0,08 5,0 0,05
40 mm
5 μL 4,0 0,2 2,0 0,1
10 μL 2,0 0,2 1,0 0,1
10 μL – 100 μL 2 μL – 200 μL 10 μL 3,0 0,3 2,0 0,2
amarelo 50 μL 1,0 0,5 0,8 0,4
53 mm
100 μL 0,8 0,8 0,3 0,3
30 μL – 300 μL 20 μL – 300 μL 30 μL 3,0 0,9 1,0 0,3
laranja 150 μL 1,0 1,5 0,5 0,75
55 mm
300 μL 0,6 1,8 0,3 0,9
 Erros
18 Eppendorf Reference® 2
Português (PT)

4.2 Limites de erro de acordo com ISO 8655-2002

Volume nominal Erros
sistemático aleatório
±% ± μL ±% ± μL
1 μL 5,0 0,05 5,0 0,05
2 μL 4,0 0,08 2,0 0,04
5 μL 2,5 0,125 1,5 0,075
10 μL 1,2 0,12 0,8 0,08
20 μL 1,0 0,2 0,5 0,1
50 μL 1,0 0,5 0,4 0,2
100 μL 0,8 0,8 0,3 0,3
200 μL 0,8 1,6 0,3 0,6
500 μL 0,8 4,0 0,3 1,5
1000 μL 0,8 8,0 0,3 3,0
2000 μL 0,8 16,0 0,3 6,0
5000 μL 0,8 40,0 0,3 15,0
10000 μL 0,6 60,0 0,3 30,0
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