Universidade Federal da Bahia

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Caique dos Santos Aguiar

Márcio Borba da Silva

Metodologia para coleta de organismos do filo Ciliophora, no ambiente da

Bacia hidrográfica do rio Verruga, Bahia

Introdução: O trabalho prévio do Biomonitoramento é investigar um indicador ideal que

informe sua ocorrência e abundância em determinado ambiente bem como o comportamento
de um fenômeno estressor para a biota. A tarefa do indicador será útil para monitorar os
diversos níveis de organização, inclusive nos níveis de ecossistema, comunidade, população
e organismo (NIEMI; MCDONALD, 2004)

As atividades humanas sempre ocorreram próximas a percursos de água, como rios e riachos,
e por este fato, as águas, e as comunidades biológicas que a habitam, em algum momento,
são influenciadas por atividades antrópicas (GARCIA, ANDRESSA, 2016). O presente estudo
visa ressaltar a importância da utilização do filo Ciliophora como bioindicadores, por serem um
grupo de bioindicadores em ascensão, por sua alta sensibilidade a pequenas variações do
ambiente. essa importante sensibilidade a fatores físicos e químicos pode ser justificada pelo
fato de muitas espécies de ciliados apresentarem demanda específica em relação às
características do meio, como quantidade de matéria orgânica, temperatura, pH e concentração
de oxigênio (MADONI; BRAGHIROLI, 2007; DIAS et al. 2008). Ademais, ciliados são
largamente distribuídos geograficamente, sendo componentes essenciais em quase todos os
ambientes aquáticos (BLATTERER, 2002; CLEVEN, 2004).

Área de Estudo: O Rio Verruga nasce na Serra do Periperi, área urbana de Vitória da
Conquista, em uma reserva ecológica que preserva sua nascente, também conhecida como
nascente do Poço Escuro. Os afluentes mais importantes, da margem direita, são: o Riacho
Santa Rita, Córrego Lagoa de Baixo e Rio Periquito, enquanto que, da margem esquerda, são os
Córregos Leão, Jeribá, Córrego do Moreira e rios D’Água Fria, dos Canudos, Santa Maria,
riacho José

Jacinto, córrego Riacho Seco e riacho da Areia (ROCHA) Rio Verruga é localizado na região
Sudoeste da Bahia entre os municípios de Vitória da Conquista e Itambé como mostrado na
figura 1.

A bacia do Rio Verruga É uma área intensamente afetada pela ação antrópica. A precipitação
média anual varia de 600 a1.100 mm e a temperatura média anual variando de 21,5°C a 24°C.
(FILHO et al 2015).
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Figura 1: Bacia hidrográfica do rio Verruga, Bahia.

Fonte: (ROCHA), (SILÉIA et al 2013).

Metodologia Espuma de Poliuretano

Conjuntos de unidades de forma hexaédrica de espuma de poliuretano (“x” por “x” por “x”
mm) suspensos na “água”. Todas as unidades serão presas por cabos de náilon. Os locais de
amostragem, serão dispostos a diferentes distâncias das fontes de água. Unidades de espuma
de poliuretano (PFUs), serão usadas como substratos artificiais para o estabelecimento de
comunidades de Ciliophora em cada uma das estações de amostragem ao longo do estudo.
PFUs com dimensões de “x” cm, serão ancoradas aproximadamente “x” cm abaixo da
superfície perto da água. As amostras de PFU serão colhidas em intervalos de tempo de “x
dias”, respectivamente, durante os períodos de exposição na água (PLAFKIN et al). Após o
intervalo de PFU serão coletados algumas como amostras paralelas para análise.

As espécies de protozoários de PFUs serão obtidas espremendo manualmente o máximo de

água possível do substrato em frascos de polietileno de 150 ml. A riqueza dos táxons foi
determinada a partir de material vivo, pipetando duas ou três gotas do material de depósito
bem misturado no fundo do copo e examinando-os com microscopia ampliação de 100-400x. A
identificação será feita usando chaves protozoológicas padrão. A colonização de substratos
artificiais de PFU introduzidos fornece um meio de avaliar a diversidade e a capacidade de
dispersão das espécies microbianas. Embora os substratos PFU usados neste estudo também
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coletem bactérias, fungos, algas e alguns micrometazoa, restringimos nossas análises

taxonômicas no filo Ciliophora.

A amostragem envolverá fazer “x” lâminas de montagem do material colhido de cada unidade
de PFU. Cada montagem consistia em 4 gotas de materiais compostos coletado do fundo do
frasco de coleta. As amostras foram fixadas com em álcool absoluto para estudo molecular,
solução de Bouin para realização da técnica de impregnação pela prata (WILBERT, 1975),
formaldeído 4% para realização da técnica do carbonato de prata (FOISSNER et al., 1991).

Metodologia Armadilha de Acrílico

Os ciliados serão obtidos utilizando-se substratos artificiais constituídos por “x” lamínulas de
vidro (24 x 24 mm) dispostas em caixas acrílicas de formato retangular (“x” cm de comprimento
por “x” cm de largura) com aberturas nas laterais, de modo a permitir o livre fluxo da água pelas
lamínulas (UTZ, 2008). Em cada coleta, nas nove estações amostrais selecionadas, foram
inseridas “x” caixas de acrílico, sendo algumas destinadas à quantificação e realização de
técnicas de identificação dos ciliados e outras reservas para o caso de possíveis perdas e
danos aos substratos.

As caixas serão dispostas próximas às margens e suspensas na coluna d’água por uma bóia
localizada na superfície e por uma chumbada de pesca localizada a “x” cm do fundo, recolhidas
após um período de “x” dias de colonização (BEECH & LANDERS, 2002), acondicionadas em
caixas plásticas contendo água do local de coleta filtrada em papel filtro (poro 14μm) e,
armazenadas em caixa caixas térmicas durante o transporte ao laboratório.

Após a recuperação das armadilhas, estas serão levadas ao laboratório e analisadas e com a
alguma técnica de coloração. As amostras serão analisadas até 10h após a coleta, a fim de
minimizar possíveis alterações na estrutura das Ciliophora coletada, em consequência das
perturbações durante os procedimentos de coleta, transporte e análise das amostras.

Metodologia Rede de Plâncton

As amostras serão coletadas no período “x” em duas campanhas: (períodos de cheia e de
seca). Na campanha, as amostras serão coletadas no compartimento planctônico (“x” amostras
cada), totalizando “x” amostras durante todo o estudo. As amostras serão obtidas a partir da
filtração de um volume de “x” L de água por ponto, na subsuperfície, com auxílio de balde
graduado. A água foi filtrada em rede de plâncton de “x” μm de abertura de malha. Após a
filtração, o material retido na rede foi acondicionado em frascos de polietileno de 150 ml,
etiquetados e fixados em solução de formaldeído a 4% de concentração final, tamponada com
tetraborato de sódio. Parte dos outros protozoários serão obtidas por meio de integração da
superfície da coluna d´água e fundo, com auxílio de garrafa de van Dorn, para estimar a
densidade desses organismos nos ambientes, enfatizando as diferenças quantitativas da zona
fótica e afótica. Podem ser usados nessas amostras, cloreto de mercúrio (HgCl2) para fixar os
protozoários existentes e azul de bromofenol a 0,004% para corá-los (Pace & Orcutt, 1981).

Coletas de parâmetros físico-químicos

Fazer a leitura do disco de Secchi e registrar o valor na ficha de campo;
Calcular a zona fótica, multiplique o valor obtido na leitura do disco de Secchi por 3 e, em
seguida, dívida por 2, para obter o valor estimado correspondente à metade da zona fótica e
registrar na ficha de campo;
Realizar medições de vários parâmetros da água como pH, condutividade, salinidade, oxigênio
dissolvido e temperatura utilizando o Medidor Multiparâmetro e registrar na ficha de campo;
Realizar a leitura do potencial de hidrogênio (pH) e registrar na ficha de campo;
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Realizar medida da quantidade de corrente elétrica ou condutância no corpo d’agua.

Cronograma de coleta
Coleta no Rio Verruga: Para os períodos de cheia (quando há alta precipitação), durante os
meses de novembro e dezembro, são épocas com altas precipitações;
Para os períodos de seca (quando há baixa precipitação), durante os meses de agosto e
setembro, são épocas com baixa precipitação.

Fonte: https://www.climatempo.com.br/

Coleta em Boa nova: Para os períodos de cheia (quando há alta precipitação), durante os
meses de novembro e dezembro, são épocas com altas precipitações;
Para os períodos de seca (quando há baixa precipitação), durante os meses de agosto e
setembro, são épocas com baixa precipitação.

Fonte: https://www.climatempo.com.br
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Materiais:

- Espuma de poliuretano

- Cabos de náilon

- Frascos de polietileno de 150 ml

- Formaldeído 4%

- azul de bromofenol a 0,004%

- cloreto de mercúrio (HgCl2)

- Armadilhas de acrílico

- Papel filtro (poro14μm)

- Caixas térmicas

- Rede de plâncton de “x” μm

- Garrafa de van Dorn

- Tetraborato de sódio

- Medidor Multiparâmetro

- Condutivímetro Portátil

- PHmetro digital portátil

- Disco de Secchi

- bóia (armadilha de acrílico)

- Chumbada (peso para manter a armadilha de acrílico imóvel) de pesca

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Figura 2: Chumbada
Autor(a): Bianca Sartini do Espirito Santo