AULA 1

Plano de ensino + conteúdo

QUÍMICA ANALÍTICA
A química analítica se envolve com as determinações aonde você pode
expressá-las através da quantidade ou através do tipo de substância que está
analisando, por isso é a química das medições. Está relacionada com os
métodos e técnicas que podem ser utilizados na obtenção de medidas mais
precisas possíveis, esses métodos serão muito importantes para conseguir
distinguir qual é o melhor método, qual a sensibilidade, qual a especificidade e
definir as técnicas que são fundamentais nesse tipo de análise, estás te darão
as medidas mais precisas que conseguirem.

Pode ser definido como um:

 Conjunto de procedimentos analíticos.
 Permite conhecer quais as substâncias e sua quantidade em uma
determinada amostra.

Definição
 Técnicas de identificação e/ou quantificação de espécies químicas

Classificação/divisão
 Análise qualitativa: quem? (Qual substância esta sendo analisada)
 Análise quantitativa: quanto? (Descreve a quantidade dessa substância
que está sobre analise)

ANÁLISE QUALITATIVA
 Quer saber apenas se certas substâncias estão presentes ou assentes,
não se está interessado na quantidade de cada substancia na amostra.
 Seus resultados são expressos em palavras e símbolos. Exemplo: cobre
(Cu).

Neste caso, na análise qualitativa eu não vou estabelecer um número, nem

uma unidade de medida, vou estabelecer apenas o nome do analito que estou
determinando.
ANÁLISE QUANTITATIVA
 Determina a quantidade de uma ou mais espécies químicas
 Seus resultados são expressos em valores numéricos com indicação do
que estes números representam.
Ex: 5% Fe significa - 5g Fe/100 g da amostra.

Na análise quantitativa é preciso estabelecer um método de análise adequado

para que se consiga determinar a quantidade em que aquela substância
analisada se encontra. Para determinar a quantidade da substância em uma
amostra, antes de mais nada é preciso determinar se aquela substância de fato
se encontra naquela amostra, então primeiro ocorre a análise qualitativa para
determinar se aquele analito de fato encontre–se presente naquela amostra
para posteriormente determinar a quantidade desse analito na amostra.
TODA ANÁLISE QUANTITATIVA É PRECEDIDA DE UMA ANÁLISE
QUALITATIVA.

A unidade de medida padrão

Massa - gramas (g)
Líquido - ml

É importante que tanto o analito quanto a amostra estejam dentro da mesma

unidade de medida, por exemplo, se o analito estiver em kg a amostra também
deve estar em kg, se o analito estiver em grama, a amostra também deve estar
em gramas e assim sucessivamente.

Exemplificando:

Unidade de medida da massa: g de analito ___ para 100 gramas de

amostra
Unidade de medida volume: ml de analito ________ para 100 ml de
amostra

Disciplina interdisciplinar, envolve:

 Física
 Informativa
 Biologia
 Fisiologia
 Toxicologia
 Química dos matérias
  Estatística

Cobre a maior parte de todas as áreas da atividade humana

 Controle ambiental (água, ar, solo..)
 Análises clínicas (sangue, urina..)
 Qualidade dos alimentos
 Farmacologia
 Controle de qualidade industrial
 Área legal (limites, normatização)
 Desenvolvimento dos matérias

CLASSIFICAÇÃO DOS MÉTODOS ANALÍTICOS

Essa classificação dos métodos é muito importante, visto que essa metodologia
vai determinar como estas análises acontecerão.

QUÍMICOS:
(envolve uma reação química, para identificar a presença - uso o método
químico do reagente específico para dá um complexo colorido).

Uma análise bem conhecida que envolva processo químico pode ser a análise
do leite, por exemplo. Outro exemplo seria uma análise clínica da urina, na
qual há uma procura das alterações do padrão normal. O método estabelecido
para a análise da urina é um método semi – quantitativo, que busca
substâncias que devem estar ausentes na urina, tais como a glicose, por
exemplo. Dessa forma é necessário uma substância química específica para
reagir com a glicose, então quando mergulhar a fita reagente dentro da urina
que irá conter várias outras substâncias químicas, apenas a glicose vai reagir
naquela região. Ou seja, a análise da urina ocorre através dessa reação
química, entretanto, na verdade ocorre uma mistura do processo químico, com
o processo de análise físico – químico. Estes são métodos analíticos, são
maneiras que se padronizam para determinar certas substâncias, de modo
qualitativo e quantitativo. Por exemplo, se é uma reação química obviamente
terá um reagente naquela região impregnado e que se tiver aquele analito vai
reagir naquele lugar e apresentar uma cor específica dependendo da
quantidade em que esse analito estiver, sendo essa uma análise química.
Entretanto, também envolve um método físico que é a corrida pelo papel, a
“corrida pelo papel” nada mais é do que a migração de uma substância por
uma superfície adsorvente que é baseada em uma propriedade física que é a
polaridade da substância, o tamanho da molécula, o tipo de interação
entre as moléculas. Dessa forma esse é um método físico visto que é
baseado em uma propriedade física, por conta disso é possível concluir que a
uroanálise é um método físico – químico.

 FÍSICOS: Ex: (Mas para dosar (espectrofotômetro) a quantidade)

 FÍSICO-QUÍMICA: Ex: (exame de urina, método baseado na identidade
na mudança da cor da fita).

MÉTODO QUÍMICO: REAÇÃO QUÍMICA

Termos importantes em uma análise química
 Analíto - É o elemento ou íon estudado. O Analito é um elemento
químico, podendo ser um íon, esse íon pode ser um cátion ou um ânion
e por aí vai.
� Reagente - É a substância que reage com o analíto através da reação
analítica. Um exemplo clássico de reagente é o teste de identificação de
glicose através da reação de Benedict (reagente azul). Para identificar a
presença de glicose é realizada uma reação com esse reagente de
Benedict, esse reagente de Benedict é o CuSO4(Sulfato de Cobre). O
sulfato de cobre reage especificamente com a glicose que nada mais é
do que um açúcar, a glicose pode ser um polihidroxialdeído
(C6H12O6) ou um polihidroxicetona (C6H12O6). O que acontece é
que o cobre do Sulfato de Cobre vai formar um complexo específico
com a carbonila da molécula de glicose e ao formar esse complexo ao
invés de permanecer na cor azul o reagente vai ficar na cor vermelho
tijolo ao formar esse complexo. Entretanto, esse reagente de Benedict
não é tão específico assim, visto que não é só a glicose que apresenta
essa carbonila livre, outros açúcares como a frutose, galactose pode
reagir com o sulfato de cobre. Dessa forma, a dosagem de glicose no
sangue pelo reagente tinha uma especificidade menor. Atualmente não
se utiliza mais o reagente de Benedict para fazer dosagem de glicose,
atualmente utiliza – se a Hexoquinase. Essa Hexoquinase é uma
enzima específica de transformação da glicose em glicose – 6 –
fosfato de maneira irreversível, ou seja, uma vez que ocorre a
conversão da glicose em glicose - 6 – fosfato a glicose – 6 – fosfato não
volta a se formar novamente em glicose , ou seja, com essa enzima é
utilizada em uma via específica da glicose e a eficácia da reação é
maior, visto que essa via identifica especificamente a presença de
glicose (C6H12O6). Atualmente esse teste de glicemia é muito
específico.

Então nesse teste é colocada a amostra de soro, em seguida é

adicionado um anticoagulante específico para que não ocorra o
 consumo da glicose, uma vez que as hemácias estão presentes e
podem utilizar a glicose para realizar sua respiração celular. Dessa
forma é extremamente importante adicionar esse anticoagulante
específico que é o fluoreto para inibir a via glicolítica a fim de
conservar a taxa de glicose e não atrapalhar na análise da amostra. Em
seguida é adicionado o reagente Hexoquinase que reage com a glicose
a transformando em glicose – 6 – fosfato. Nesse contexto entra outra
reação química para medir a glicose – 6 – fosfato e ocorre a dosagem
dessa glicose no espectrofotômetro. Essa é uma reação muito mais
específica. Nesse contexto de análise do exemplo citado acima a
glicose seria o analito e o regente seria a Hexoquinase. E a reação
analítica é a reação que acontece até chegar na substância que eu vou
dosar, nessa reação do exemplo acima ela ocorre através de três etapas
e não através de uma etapa específica.

 Reação analítica - são reações seguidas de transformações facilmente

identificáveis que permitem confirmar que a reação entre o analito e o
reagente ocorreu.
A reação analítica é a reação que acontece até chegar na parte da
substância que iremos dosar posteriormente, essas reações são
seguidas de transformações facilmente identificáveis onde podemos
confirmar a reação entre o analito e o reagente. A reação entre a
Hexoquinase e a glicose não é uma reação colorida, fica tudo sem
mudar de cor. Entretanto, a presença desse produto nessa reação vai
ser capaz de ser medido pelo espectrofotômetro. O que acontece é isso,
ao final da reação esse produto pode ser medido por este método físico
que é o espectrofotômetro.

Normalmente a reação química deve ser facilmente identificada visto

que é muito utilizada na análise qualitativa, então quando adicionado
um reagente ele reage com o analito que estamos pesquisando e esse
analito pode precipitar, pode dar um aspecto colorido, pode soltar gás,
ou seja, é uma reação visível. Porém, nem sempre isso é possível, nem
sempre essa reação é visível, então é utilizado um método físico para
dosar.

Exemplificação
CuS04 - reagente de benedict (reage com a carbonila da cetona do aldeído,
invés de ficar azul, ele fica vermelho tijolo). Porém, não é só a glicose que tem
a carbonila livre, outros açúcares como frutose também tem, tornando o análise
menos específico. Hoje em dia é usado a hexoquinase (REAGENTE), que é
uma enzima específica da glicose (ANALITO) na glicose 6 fosfato, reação
irreversível, esta análise e específica para glicose.

REAÇÃO ANALÍTICA
São reações seguidas de transformações facilmente identificáveis que
permitem confirmar que a reação entre o analito e o reagente ocorreu.
Normalmente, estas transformações são:
 Mudança de cor da solução
 Formação de um precipitado (ou de sua dissolução
 Libertação de um gás

Método químico; reação quimica

Na reação química o analito é transformado num composto que possua
determinadas propriedades características que nós permitam a certeza de que
foi esse o composto obtido. Quando mais específico o reagente, melhor.

Como exemplo, temos:

Cl - (aq) + AgNO3 (aq) - AgCl(s) + NO3 - (aq)
O que acontece aqui é a utilização do Nitrato de Prata (AgNO3) como
reagente para pesquisar a presença de Cloro (Cl) como analito. Por que isso
ocorre? Isso é uma coisa bem interessante, cada analito que formos pesquisar
é necessário reagentes específicos, quanto mais específico for o reagente
maior será a probabilidade de encontrar aquele analito, caso o mesmo esteja
presente na amostra analisada. Nesse caso o Nitrato de Prata reage
especificamente com o Cloro e dá origem ao Cloreto de Prata que estará na
fase sólida, ocorrendo uma precipitação e indicando a presença do Cloro na
amostra. Anteriormente nessa amostra não havia precipitado, todas as
substâncias encontravam – se na fase aquosa. Foi adicionado o Nitrato de
Prata dentro da água (H2O) para verificar se nessa água havia a presença de
Cloro, a reação química comprovou positivo para a presença de cloro na água,
visto que na reação formou um precipitado sólido quando o Nitrato de Prata
reagiu com o Cloro, formando o Cloreto de Prata sólido.

Ou ainda pode ocorrer do Nitrato de Prata precipitar outro grupo de ânions, a

prata é específica para ânions monovalentes, sendo estes o Nitrato, Cloro,
Flúor, Bromo, Iodo. Dessa forma se torna nítido que já temos reagentes
específicos para cada grupo de cátions e ânions.
MÉTODO FÍSICO
Envolve uma medição de um certo parâmetro do sistema que seja função da
composição, ou seja, é a relação entre composição química e as propriedades
físicas.

A) análise espectral - estuda os aspectos de emissão de luz que se obtém

quando se expõe uma substância a chama do bico de bunsen. (Qualitativa -
método físico)
”. Isso significa dizer que se eu pegar uma amostra e colocar ela no bico de
Bunsen vai ocorrer a mudança da chama, essa mudança da chama ocorre por
quê a substância que está presente (analito) vai emitir uma luz de coloração
específica, sendo essa uma Análise Qualitativa! Esse é um método físico por
quê trabalha com a emissão de luz, sendo essa uma propriedade física. Não
ocorreu uma reação química entre a amostra e o bico de Bunsen, não ocorreu
uma reação química entre um analito e um reagente.
O que acontece aqui é que determinadas substâncias químicas como alguns
íons, quando aquecidos, os seus elétrons mais externos saltam de um
subnível de energia para outro e quando eles perdem essa energia que
absorveram e voltam para o seu respectivo subnível, estes elétrons mais
externos emitem luz. Esse é o mesmo princípio dos fogos de artifício, certas
substâncias como as presentes nos fogos de artifício, quando é adicionado a
pólvora e a pólvora dá aquela emissão de calor, estes elétrons mais
externos dessas substâncias presentes nos focos de artifício absorvem esse
calor, saltando de um subnível energético para outro e quando voltam
novamente para o seu subnível eles emitem luz de uma cor específica.

O espectro de um dado elemento presente na amostra apresenta linhas

características:

Substância em estudo está no estado sólido e, é aquecida a alta temperatura.

 Sais de sódio - cor amarelo
 Sais de potássio - cor violeta
 Sais de estronico - cor vermelho carmim
 Sais de bário - cor verde
Este método apresenta alta sensibilidade (10-6 a 10-8g). É rápido e são usadas
pequenas quantidades da amostra.

QUANTO MENOR A QUANTIDADE DO ANALITO NA AMOSTRA, MAIOR A

SENSIBILIDADE DO MÉTODO QUE ESTÁ USANDO.

QUANTO MAIOR A QUANTIDADE DO ANALITO NA AMOSTRA, MENOS

SENSÍVEL ELE É.
 � Ou seja: Esse método físico de aquecimento é considerado altamente
sensível por quê a quantidade de analito analisada é muito pouca.
Dessa maneira, quanto menor a quantidade do analito na amostra
juntamente com a possibilidade de identificar essa substância, maior é a
sensibilidade do método de análise que está sendo utilizado.
Entretanto, quanto maior precisar ser a quantidade do analito na
amostra para conseguir identificar a substância por esse método,
menos sensível será o método utilizado.

B) análise luminescente (método fluorométrico)

 Observa-se a fluorescência da amostra obtida quando se ilumina o
objeto em estudo com radiação ultravioleta.
 Como fonte de radiação ultravioleta pôde-se utilizar uma lâmpada de
quartzo a vapor de mercúrio (luz de Wood)
 A análise por fluorescência é mais sensível que a análise espectral (<
10-8g de substâncias).
 ). Esse método é muito sensível, esse método é bastante utilizado na
detecção de reações antígeno – anticorpo, mais precisamente na
pesquisa de sífilis. Tem um exame que é realizado, primeiramente
ocorre a reação antígeno – anticorpo e ligado a esse anticorpo ou ligado
a esse antígeno encontra – se presente um complexo de fluorescência
que vai emitir fluorescência quando for iluminado.

 Muito usado para identificar a sífilis

MÉTODO FÍSICO-QUÍMICO
● Medidas de um parâmetro físico que está associado a composição
química através de uma reação analítica. . Esses métodos irão utilizar
tanto a reação química quanto o método físico para fazer medidas.

 Metodos colorimetricos: cromatografia em coluna

 Métodos espectroscópicos, eletroquímicos, condutividade elétrica,
absorção ou emissão de luz e etc.

As reações são melhores desenvolvidas em meio gasoso. No meio em

solução, as reações acontecem mais rápido, o meio ele é preferido, tanto é que
quando trabalhamos com uma amostra sólida primeira coisa que fazemos é
diluir aonde a substituição fique solúvel para que ocorra a maior probabilidade
de choque.

CLASSIFICAÇÃO DOS METODOS ANALITICOS quantitativos

� Segundo a quantidade de substâncias a ser analisada. : o método a ser
utilizado para analisar a amostra pode ser classificado de acordo com a
quantidade de amostra a ser analisada.
� Nesse sentido os métodos podem ser:

A) MACROANALISE
Quando vai ser analisada uma amostra maior.
São usadas massas de 0,5 – 1,0 ou 20 – 50 ml de solução
As reações se efetuam em tubos de ensaio (10-20 ml) ou bequer de 100 ml
Quando se faz alguma precipitação, o solido (precipitado) deve ser separado
por filtração com funil através de papel filtro.

B) SEMIMICROANALISE
São usadas quantidades 10 a 20 vezes menor do que a quantidade utilizada na
macroanalise, isto é, cerca de 0,05 g (50 mg) ou 1,0 ml de solução.
São usados tubos de ensaio de 5 a 10 ml.
As reações envolvendo precipitação, o solido é separado da fase aquosa
mediante centrifugação ou por microfiltração com pequenos funis.

C) MICROANÁLISE
A quantidade de substancias é aproximadamente 100 vezes menor que a
quantidade usada na macroanalise (0,005 g – 0,01 g).
Uso reagentes de grande sensibilidade para conseguir identificar a quantidade
menor do analito.
� As reações são realizadas pelo método microcristaloscópico ou pelo
método da gota. Esse método microcristaloscópico quer dizer que são
microcristais que serão observados em microscópios.

Existe dois métodos de MICROANALISE

1. Analise pelo método microcristaloscópico:

As reações são realizadas sobre uma lamina de vidro, identificando-se o íon ou
elemento a partir dos cristais formados através de um microscópio.
2. Analise pelo método da gota (reações gota a gota):
As reações são acompanhadas de uma viragem da coloração da solução ou
pela formação de precipitados corados. Estas reações podem ser realizadas
em uma placa de porcelana com cavidades onde depositam gota a gota a
solução em estudo e os reagentes.
Como resultados da reação aparece uma mancha corada cuja cor permite
comprovar a presença na solução do íon a identificar. Ao invés da placa de
porcelana com cavidades podem ser 234sutilizados vidro de relógio, capsula
de procela e etc.

D) ULTRAMICROANALISE
As quantidades usadas são substancias são inferiores a 1,0 mg, ou seja,
valores da amostra se encontram em microgramas ou nanogramas
Todas as operações analíticas são observadas por microscópio.

Amostra
 Porção de material coletado para analise
 Menor fração representativa para análise

Composição da amostra
 Variedade de substancias
 Substancia que será determinada é chamada de analito
 Os analitos constituintes podem estar presentes em quantidade:
 Maiores ou majoritários: < 1%
 Menores ou minoritários (> 0,01 – 1%)
 Traços (menor que 0,01% ou 100 ppm)
 Se o analito é majoritário, minoritário ou se está em traços, vai mudar a
dosagem que será utilizada para fazer a análise. Se o analito for
majoritário pode ser utilizada a miligrama, se o analito for minoritário
pode ser utilizado microgramas, se for em traços será utilizado ppm. É
importante saber trabalhar com essas unidades de medida nas análises
químicas e saber fazer estas transformações do analito para sua
respectiva unidade de medida após fazer a identificação do mesmo.

Tipos de analito
 Um átomo; molécula; íon; polímero; proteína; célula e etc.
SOBRE O SANGUE
Se não colocar o anticoagulante na parte líquida é o soro.
Se eu colocar o anticoagulante na parte líquida é o plasma.

O que tem no plasma que não tem no soro?

Os elementos da cascata de coagulação!
Quando preciso ver os elementos dessa cascata, verificar se há alguma
alteração, é necessário trabalhar no plasma, não posso deixar a coagulação
acontecer se não todos esses elementos estarão presos no coagula, por isso
usamos o anticoagulante.

No soro há a coagulação, então não temos esses elementos.

No plasma coloquei o anticoagulante, não deixei a coagulação acontecer, eu
vou centrifugar separando as partes sólida que são as células sem a
coagulação separando da parte líquida (plasma, tem elemento da cascata).

AMOSTRA REPRESENTATIVA (QUALITATIVAMENTE E

QUANTITATIVAMENTE).

Composição da amostra
 Variedade de substâncias = quando você tem muitas substâncias pode
acontecer muitas interferências se o analito não for específico e
sensível.
 O analito pode ser majoritário, minoritário ou está só em traços.

Seleção e preparação da amostra

 Tipo de material determina o nível de dificuldade (trabalhar com gases é
difícil)
 Como por exemplo se o material a ser trabalhado estiver na forma
gasosa, isso implica uma certa dificuldade, visto que temos que saber
como esse gás está distribuído, se é homogêneo ou heterogêneo. Saber
se a presença do analito desejado está distribuído uniformemente. Tudo
isso é fundamental no momento de selecionar e escolher o modo de
preparo da amostra.

Considerar como o analito esta distribuído no material (é de forma

uniforme?)
Evitar erros de resultados
. O modo como essa amostra é preparada é fundamental para evitar os erros,
uma vez que, quanto mais manual for o preparo da amostra, mais passível de
erro vai ser, por outro lado, quanto mais automatizado for o preparo da
amostra, menor será a probabilidade de erros. Por conta disso, é de suma
importância que o aparelho esteja sob todo um acompanhamento de
padronização, calibração, visto que se esse aparelho não estiver passando por
essas regulações, vai ocorrer erro na amostra do mesmo jeito.

 Verificar se é homogêneo ou não

TERMOS GERAIS USADOS EM ANÁLISE QUÍMICA

Erros da amostragem
 Falha na obtenção de uma amostra verdadeiramente representativa.
 Ocorre quando se usa apenas uma parte de uma substancia não
uniforme.
 Tamanho do erro: depende do número de partículas da amostra
coletada e fração do material que é analisado.
 Quanto maior a amostra, menor a incidência de erro da amostragem.

PREPARO DA AMOSTRA
Depende do método de análise escolhido
 Todas as técnicas analíticas têm algumas exigências quanto ao tipo de
amostra que um método pode usar.
 Ex: cromatografia gasosa ou liquida

Depende da complexibilidade da amostra

 Podem estar presentes substancias que vão interferir na análise do
analito
  Solução possível é iniciar a analise com a separação dos componentes
da amostra

Depende da forma química do analito

 Muitos analitos podem estar em diferentes formas químicas em uma
mesma amostra, o que pode dificultar a análise. Ex: minério de ferro.

Depende da quantidade do analito

 Concentração mínima detectável
 Diluição limite

Concentração limite detectável - menor mínimo que consegue ser detectável.

A análise precisa acontecer em solução, então a diluição limite não pode ser
maior que a concentração mínima detectável.

Métodos de preparo da amostra

 Filtração
 Pesagem
 Diluição
 Ajuste do ph
 Concentração
 Extração liquido-liquido