INTERAÇÃO DA ALBUMINA DE SORO BOVINO (ABS)

BIOMIMÉTICOS COM FOTOSSENSIBILIZADORES APLICADOS EM

FOTOQUÍMIOTERAPIA EM SISTEMAS BIOMIMÉTICOS.
Débora C.K Codognato1, Edmyr R. dos Reis2, Iouri Bosissevitch3,4, Ana Paula Ramos1
Departamento de Química e Departamento de Física, Faculdade de Filosofia, Ciências e Letras de Ribeirão Preto, FFCLRP/USP

A fotoquimioterapia (FQT) usa a luz para irradiar compostos

fotossensibilizadores (FS), que são aplicados em tecidos doentes, para
induzi-los a produzirem reações que matam as células em que estão ligados.
O uso de um carreador para levar os FSs até esses tecidos melhoraria sua
seletividade, para isso pensamos na albumina de soro por ser abundante no
organismo humano e possuir afinidade com esse tipo de tecido, usamos a
Albumina de Soro Bovino (ASB).
A princípio usamos como FS dois tipos de protoporfirina XI (PpIX): a sintética e a endógena
que é extraída de glândulas Harderianas de ratos e a ASB como carreador .
As amostras foram solubilizadas em dois tipos de solução tampão HAcNaAc com pH 4.5 e
PBS com pH 7.3.
Como métodos analíticos usamos Absorção Óptica, Emissão de fluorescência, DLS
(espalhamento dinâmico da luz), PZ (potencial zeta)

Parte1: Concentração de FS fixa variando a concentração de ASB

Espectros de Absorção: Espectros de emissão de fluorescência:
A adição de ASB induz mudanças nos espectros da PpIX sintética em pH 7,3 enquanto O mesmo ocorre com os espectros de emissão, apenas os da PpIX sintética
que em pH 4,5 eles oscilam em torno de um valor. A endógena não apresenta apresentam mudanças e a endógena continua sem alterações significativas para os
mudanças em nenhum dos pHs. dois tampões.

pH 4.5 pH 7.3 pH 4.5

pH 7.3

Fig. 1: espectros de absorção da PpIX sintética em pH 7.3 (a) e em pH 4.5 (b) para diferentes Fig. 2: espectros de fluorescência da PpIX sintética em pH 7.3 (a) e em pH 4.5 (b) para
concentrações de ASB. diferentes concentrações de ASB.
Potencial zeta e DLS:
O potencial Zeta varia mais em pH 7,3 que em pH 4,5, já o tamanho das partículas varia mais em pH 4,5, isso acontece por causa do ponto isoelétrico das amostras ser em
torno de 4,5 aumentando, assim, a interação eletrostática fazendo com que as porfirinas se agreguem.
PpIX-S PpIX-S PpIX-E PpIX-E

Fig. 3: potencial Zeta da PpIX sintética (a), endógena (c) e tamanho de partícula para PpIX sintética (b) endógena (d) para ambos pHs.

Parte 2: concentração de ASB fixa variando a concentração das porfirinas

Espectro de absorção:
Não apresentam variação.
Espectros de emissão de fluorescência:
A fluorescência da ASB diminuiu em todas as amostras.
pH 7.3 pH 4.5
pH 7.3 pH 4.5

Fig. 4: espectros de emissão da ASB com adição de PpIX sintética em pH 7.3(a), em pH 4.5(b) e adição da endógena em pH 7.3(c), em pH4.5
Tab 1: constantes de Stern Volmer da ABS com as porfirinas em ambos pHs.
Supressão da emissão de fluorescência:
Amostra KSV
Ambas porfirinas suprimiram a ASB, mas a endógena suprimiu com adição de
concentrações menores. PpIX-S em pH 7,3 2,84 ± 0,08 x 103
PpIX-S em pH 4,5 3,76 ± 0,18 x 104
Constante de supressão ou Stern Volmer:
PpIX-E em pH 7,3 8,14 ± 0,22 x 104
PpIX-E em pH 4,5 14,2 ± 0,40 x 105
𝐼0
= 1 + 𝑘𝑆𝑉 . [𝑄] Os valores de KSV relativos à PpIX endógena são maiores mostrando que ela se liga mais
𝐼 a ASB que a sintética.

1° 2° 3° 4° 5° 6° 7° 8°
Atividade
Sem Sem Sem Sem Sem Sem Sem Sem
Verificamos que a ASB se liga as duas PpIX mas a endógena possui maior Cumprir créditos de disciplina ok ok -- -- -- -- -- --
afinidade provavelmente devido a estar complexar com alguma estrutura anfifílica. Pesquisa e revisão bibliográfica ok ok X X X X
A próxima etapa é verificar as interações com sistemas biomiméticos usando a Realização de experimentos ok ok X X X X
cuba de Langmuir, e repetir para outros FSs. Análise dos resultados -- ok X X X X X
Elaborar e escrever a tese -- -- -- -- -- X X X
Apresentar os resultados em congressos e
-- ok X X X X X X
simpósios
Este estudo foi financiado pela Coordenação de Aperfeiçoamento de Preparação dos artigos -- ok X X X X X X
Pessoal de Nível Superior - Brasil (CAPES) - Finance Code 001 Apresentação da defesa da tese -- -- -- -- -- -- -- X

1Departamento de Física da Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, SP (email: decriskaco@gmail.com), 3Instituto
de Física da Universidade Federal de Goiânia, Goiânia, GO,
2Laser Laboratory, Center for Experimental Medicine e Universidade de Campinas, Campinas, SP, 4Departamento de Química da Universidade de São Paulo, Ribeirão Preto, SP