Difuso, Osmose e Tnus

Universidade Federal do Cear Centro de Cincias Departamento de Bioqumica e Biologia Molecular Disciplina de Biofsica

Difuso, Osmose e Tnus

1. Difuso 1.1. 1.2. Definio Fatores que afetam o coeficiente de difuso Leis de Fick Relao entre Distncia e o Tempo de Difuso Implicaes Biolgicas das Leis de Fick

1.2.1. 1.2.2. 1.2.3. 1.3. 1.4. 1.5. 2.1. 2.2. 2.3. 2.4. 3. Tnus 3.1. 3.2.

Potencial Qumico Potencial de Difuso Equao de Nernst Introduo Osmolaridade Osmose atravs de membranas Medida da Presso osmtica Tonicidade de Solues Plasmlise

2. Osmose

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Difuso
1.1. Definio o movimento de componentes de uma mistura qualquer, seguindo a 2 Lei da Termodinmica. A tendncia de movimentao de um componente dos lugares onde ele se encontra em maior quantidade para lugares onde ele se encontra em menores quantidades. Esses movimentos ocorrem em meios gasosos, lquidos e at slidos. Tudo tendendo a uma maior desordem do sistema, ou seja, um aumento da Entropia. Importncia Biolgica do Processo de Difuso.

1.2. Fatores que Influenciam o processo de difuso 1.2.1. Leis de Fick 1 Lei de Fick:

A velocidade de difuso diretamente proporcional ao gradiente de concentrao

Diferena na concentrao de uma substncia S (CS) entre dois pontos, separados pela distncia x.; Matematicamente:

J S = DS

C S x

Onde:

Js Velocidade de transporte ou densidade de fluxo. a

quantidade de uma substncia S que atravessa uma unidade de rea, por uma unidade de tempo. Geralmente expressa em unidades de moles por m2 por segundo (mol . m-2. s-1);

DS Coeficiente de Difuso. uma constante de proporcionalidade

que mede o quo facilmente uma substncia S se move atravs de um determinado meio.

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O Coeficiente de Difuso uma caracterstica da substncia: Molculas Maiores tm menores coeficientes de difuso Por exemplo, a difuso no ar muito mais rpida do que a difuso em um lquido. O Coeficiente de Difuso de uma substncia depende do meio:

O DS proporcional velocidade na qual a molcula se difunde pelo meio e inversamente proporcional ao tamanho da molcula e a viscosidade do meio circulante:

DS =

kT 6 .r

O sinal negativo na frmula da densidade de fluxo, JS, indica que o fluxo se move de acordo com o gradiente de concentrao; Resumindo:

A 1 Lei de Fick afirma que uma substncia ir se difundir mais rpido quando o gradiente de concentrao for mais abrupto (ou seja, quando CS grande) ou quando o coeficiente de difuso aumentado. Aplica-se a difuso estacionria (steady-state), ou seja, quando a concentrao dentro do volume de difuso no muda com o tempo. 2 Lei de Fick Aplica-se na difuso no-estacionria, ou seja, quando a concentrao dentro do volume de difuso muda com o tempo. Matematicamente:

CS 2C S =D t x 2
1.2.2. Relao entre Distncia e o Tempo de Difuso A partir da Primeira Lei de Fick, pode-se derivar uma expresso para o tempo que uma substncia leva para se difundir em uma distncia particular.

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Considerando as molculas de uma substncia em um ponto inicial, a medida que tal substncia se difunde do ponto inicial, o gradiente de concentrao se torna menos abrupto (CS diminui) e portanto, o movimento se torna menor.

O tempo mdio necessrio para uma partcula difundir uma distncia L igual a:

L2 t= DS
Portanto, a partir da expresso acima, temos que o tempo mdio para uma substncia se difundir uma dada distncia aumenta proporcionalmente ao quadrado daquela distncia. Da mesma forma, a distncia atingida pelas molculas difundidas aproximadamente proporcional ao inverso do quadrado do tempo. Ex.1: Se uma molcula para se difundir por 2 m leva 4 ms, levar 9 ms para se difundir por 3 m e 16 ms para atingir 4 m. Ex.2: Considerando o DS em gua da molcula de glicose 10-9 m2. s-1, temos que o tempo necessrio para esta molcula se difundir atravs de uma clula de 50m de dimetro de 2.5 s. No entanto, o tempo mdio para esta mesma molcula de glicose difundir em 1 m de gua de aproximadamente 32 anos. Esses exemplos demonstram que a difuso em solues pode ser efetiva dentro das dimenses celulares, mas muito, mas muito lenta para o transporte de massas em longas distncias. 1 Lei de Fick em relao a uma rea de troca (Quando h uma interface de troca, como por exemplo uma superfcie de absoro):

J S = DS A

C S x

Isso significa que a velocidade de difuso diretamente proporcional rea da superfcie de absoro. Quanto maior for esta superfcie, maior a velocidade de difuso. 1.2.3. Implicaes Biolgicas das Leis de Fick Relao rea / Volume nos seres vivos Tamanho Celular

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1.3. Potencial Qumico Nos sistemas biolgicos, o transporte de substncias podem ser dirigidos por 4 foras principais: Concentrao, Presso hidrosttica, Gravidade e Campo Eltrico; Matematicamente, o potencial qumico pode ser definido como:

Potencial Qumico de j

j = * + RT ln C j + z j FE + v j P j
Potencial Qumico de j nas condies padro Componente de Concentrao Componente de Potencial Eltrico Componente de Presso Hidrosttica

Onde:

j Potencial Qumico de j em J.mol-1 j* Potencial Qumico de j nas condies padres

R Constante Universal dos Gases T Temperatura Absoluta Cj Concentrao de j A componente de Potencial Eltrico aplica-se apenas se a substncia j tiver uma carga, ou seja, se j for um on. Onde: z Carga Eletrosttica do on (Valncia) F Constante de Faraday E Potencial Eltrico Geral da Soluo O componente de presso hidrosttica expressa a contribuio do volume parcial molar de j (Vj) e da presso no potencial qumico de j. (O volume parcial Molar de j a mudana no volume por mole de substncia j adicionada no sistema, para uma adio infinitesimal). Normalmente desprezado. O Potencial Qumico , portanto a soma de todas as foras que podem agir em uma molcula para direcionar o transporte lquido. Movimento contra um gradiente de potencial qumico no-espontneo e, no caso biolgico, pode ser um indicativo de transporte com gasto de energia.

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Exemplo 1: Difuso da Glicose atravs de uma membrana permevel Se a [Glicose] no for muito grande, pode-se escrever seu potencial qumico apenas em termos de concentrao.
Interior Clula Exterior

Molculas de Glicose

O potencial qumico da Glicose no interior da clula ser: E no meio exterior, ser:

E * E G = G + RT ln CG (2)

I * I G = G + RT ln CG (1)

Da pode-se calcular a diferena de potencial qumico da Glicose entre as solues externas e internas, G, indiferentemente do mecanismo de transporte (Ativo ou Passivo). Considerando que a glicose est sendo removida do meio externo (-) e adicionada ao interior da clula, portanto a mudana na energia livre da glicose transportada, em Joules por mol, ser:

= I E
Substituindo as equaes (1) e (2) na equao (3), teremos:
* I * E G = ( G + RT ln CG ) ( G + RT ln CG )
I E G = RT (ln CG RT ln CG )

(3)

I CG G = RT ln E CG

Se esta diferena potencial qumico negativa, a glicose pode difundir para dentro da clula de forma espontnea; Se for positiva, ter de haver gasto de energia.

Em outras palavras, a fora motriz () para a difuso de um soluto s relacionada magnitude do gradiente de concentrao (CsI/CsE).

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Exemplo 2: O movimento de K+ para dentro de uma clula Se o soluto carrega uma carga eltrica, como um on, o componente eltrico do potencial qumico deve ser considerado. Suponha uma membrana permevel ao ction K+:
Interior Clula Exterior

Partculas de K+

O potencial qumico do K+ no interior da clula ser: E no exterior, ser:

E * E K = K + RT ln CK + zFE E
+ + +

I * I K = K + RT ln CK + zFE I
+ + +

A diferena de Potencial qumico do K+, ser:

I E K + = K + K +

Substituindo, teremos:
* * K + = ( K + + RT ln[K + ]I + zFE I ) ( K + + RT ln[K + ]E + zFE E )

Como a carga eletrosttica do K+ igual a +1, temos que:

K + = RT ln [ K + ]I + F (E I E E ) + E [K ]

A magnitude e o sinal desta expresso iro indicar a fora motriz e a direo para difuso de K+ atravs de uma membrana. Essa equao mostra que ons, como o K+ difundem em resposta tanto ao seu gradiente de concentrao, como a diferena de potencial eltrico entre os dois compartimentos.

Uma implicao importante desta equao que os ons podem se difundir passivamente contra o seu gradiente de concentrao se uma voltagem apropriada (campo eltrico) aplicada entre os 2 compartimentos.

Normalmente, conhecido como o potencial eletroqumico.

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1.4. Potencial de Difuso Quando sais difundem atravs de uma membrana pode haver a formao de um potencial de membrana eltrico (Voltagem); Por exemplo, considerando duas solues de KCl separadas por uma membrana: os dois ons, K+ e Cl- iro se difundir de acordo com suas respectivas diferenas de potencial eletroqumico; No entanto, a membrana apresenta diferentes permeabilidades para estes ons (geralmente mais permevel ao K+), fazendo com que estes tenham diferentes velocidades de difuso (o K+ ir se difundir mais rpido); Em um determinado momento, momentaneamente, haver uma pequena separao de cargas, criando instantaneamente, um potencial eltrico atravs da membrana; Um potencial que se desenvolve como resultado de uma difuso chamado de potencial de difuso. 1.5. Equao de Nernst Quando a membrana permevel a ambos os ons K+ e Cl-, o equilbrio no exemplo acima no ser atingido at que os gradientes de concentrao sejam iguais zero; No entanto, se a membrana for permevel a apenas o K+, a difuso deste on poderia carregar cargas atravs da membrana at que o potencial de membrana balanceasse o gradiente de concentrao. O transporte estaria em equilbrio, mesmo que o gradiente de concentrao no mudasse. Quando a distribuio de qualquer soluto atravs de uma membrana alcana o equilbrio o fluxo passivo (quantidade de soluto, atravessando uma unidade de rea de membrana por minuto) igual nas duas direes, de fora para dentro e de dentro para fora:

J I E = J EI
Fluxos esto relacionados ao , portanto:

jE = jI

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Ento para qualquer on, X, teremos:

E I ( * + RT ln C X + z X FE E ) = ( * + RT ln C X + z X FE I ) X X

Rearranjando a equao acima, obtemos a diferena de potencial eltrico entre os dois compartimentos:

EI EE =

E RT CX ln I z X F CX

Esta diferena de potencial eltrico conhecida como o Potencial de Nernst (EX) para aquele on:

E X = E I E E
E
E RT C ln I E = z F C

ou

CE 2,3RT log I E = z F C

Esta relao, conhecida como Equao de Nernst, afirma que, no equilbrio, a diferena na concentrao de um on entre dois compartimentos balanceada pela diferena de voltagem entre estes dois compartimentos.

A equao pode ainda ser simplificada para, um univalente ction, a 25 oC:

E C E = 59 log I C

Portanto, uma diferena de 10 vezes na concentrao corresponde a um potencial de Nernst de 59 mV (CE/CI = 10/1, log 10 = 1). Isto significa que um potencial de membrana de 59 mV manteria 10 vezes o gradiente de concentrao de um on que transportado por difuso passiva.

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2. Osmose 2.1. Introduo Caso particular de difuso; Apenas o nmero (concentrao) das partculas e a presso que estas exercem so considerados; Mecanismo: o As partculas de soluto e solvente esto em constante movimento, chocando-se com as paredes do recipiente. Esse choque Fora, exercida sobre rea, isto Presso. Os solventes puros possuem presso mxima, pois a nica partcula do sistema; Quando algum soluto acrescentado, a presso do solvente sempre diminui, porque parte do espao ocupado por molculas de soluto, e o nmero de partculas de solvente, que continua o mesmo, passa a exercer sua fora em rea maior; medida que a concentrao de soluto aumentada, a presso do solvente diminui e a presso do soluto aumenta. Se estas foras se exercem atravs de uma membrana permevel, haver movimentao de partculas de um para o outro compartimento. 2.2. Osmolaridade Muitas molculas ao se dissolverem, so separadas em suas partculas constituintes, pela ao do solvente:

NaCl
denominam eletrlitos;

H2O

Na+ + Cl-

Geralmente, as partculas separadas possuem carga eltrica, e por isso se Uma conseqncia direta da hidrlise que a concentrao de partculas maior do que a concentrao de molculas; A unidade de concentrao de partculas a osmolaridade (Osmol, osm), que comporta duas definies: o Conceito estrutural: 1 osmol corresponde a 6,02 x 1023 partculas por litro de soluo.

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o Conceito operacional: 1 osmol o nmero de partculas que exerce presso de 22,4 atmosferas em volume de 1 litro, ou presso de 1 atmosfera em volume de 22,4 litros. A concentrao osmolar igual concentrao Molar (Molaridade) multiplicada pelo nmero de partculas: Cosm = M x n. 2.3. Osmose atravs de membranas Quando todos os componentes so difusveis atravs da membrana: o H troca geral de todos os componentes Ex.: Um sistema com 2 compartimentos, A e B, separados por uma membrana permevel. Em (A) h uma soluo de glicose 2M e em (B) glicose 1M:
Glicose 2M Glicose 1M A B A B H 2O H 2O Glicose h Glicose

Incio

Durante

Equilbrio

o Componentes no difusveis (Membrana semi-permevel) Ex.: Soluo de uma macromolcula que no consegue atravessar pela membrana em (A) e gua em (B):
Macromolcula H 2O A B A B

h H 2O Phid Posm Incio Durante Equilbrio

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Ex.: Quando uma protena est em uma soluo de NaCl:

Macromolcula +NaCl 0,2M NaCl 0,2M A B A B

Incio

Durante

Equilbrio

A presso do solvente maior em B do que em A, e h passagem de solvente de A para B; Esta passagem resulta da diluio de NaCl em A e concentrao em B; Como conseqncia, presso de soluto em B fica maior do que em A, e passa soluto (NaCl) de B para A, at que haja equilbrio; Embora a concentrao de NaCl seja igual nos dois lados, a quantidade no lado A maior; A concentrao de gua em A menor do que em B, mas a quantidade maior;

A protena abaixa a presso do solvente do lado em que est. Concluso: Com macromolculas de um lado da membrana, passa solvente e soluto para este lado.

2.4. Medida da Presso osmtica As molculas de gua tendem a se mover das regies de alta concentrao de gua, para regies de baixa concentrao; Quando duas solues aquosas diferentes so separadas por uma membrana semi-permevel, as molculas de gua que esto se difundindo das regies de alta concentrao para as a de baixa, produzem presso osmtica; Esta presso, medida como a fora necessria para resistir o movimento da gua pode ser calculada pela Equao de vant Hoff:

POsm = ic.RT
Onde: ic osmolaridade R Constante dos Gases T Temperatura Absoluta

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Para solutos que no se dissociam em partculas, a equao de vant Hoff pode ser:

POsm =
Onde: n nmero de moles V Volume interno do recipiente

nRT V

A presso osmtica, especialmente a de macromolculas no difusveis determinada a partir do seu equilbrio com a presso hidrosttica;

Como no seguinte Exemplo:

Phid . = POsm
h Ento:

Phid . = dgh
POsm = nRT V

dgh =
Soluo contendo uma macromolcula

nRT V

3. Tnus Clulas biolgicas quando colocadas em diferentes solues, podem permanecer do mesmo tamanho, inchar at se romper (plasmlise) ou murcharem por compresso. Estas situaes esto relacionadas : o Concentrao de Soluto Externa; o Permeabilidade da Membrana Celular. Ex.: A hemcia humana tem uma concentrao interna equivalente a 0,3 osm (300 mosm) o Quando ela colocada em uma soluo de NaCl de 0,1 osm, a presso de solvente externa maior, portanto a gua penetrar na clula. Dizse que esta soluo Hipotnica;

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o Quando a hemcia colocada em uma soluo de NaCl de 0,3 osm, h equilbrio, no nem entrada nem sada de solvente. Esta soluo dita Isotnica; o Quando a hemcia colocada numa soluo de NaCl de 0,6 osm, a presso de solvente interna (dentro da clula) maior e a gua deixa a clula. Estas hemcias tm uma aparncia encolhida e murcha. Esta soluo chamada de soluo hipertnica. No exemplo acima, h coincidncia da Tonicidade com a Osmolaridade: A soluo hipotnica tambm hiposmolar (osmolaridade menor do que a hemcia), a isotnica isosmolar (mesma osmolaridade) e a soluo hipertnica hiperosmolar (osmolaridade maior que a hemcia). Ex. Hemcia em uma soluo de uria 0,3 osm: o Neste caso, as presses de gua, interna e externa, so iguais e se equilibram. No entanto, a membrana permevel a uria, fazendo com que esta entre na clula e desequilibre o sistema, diminuindo a presso interna de gua; o Com esta diferena de presso, a gua entra na clula, que sofre um inchao e se rompe; o Esta soluo hipotnica, embora tenha a mesma osmolaridade, ou seja, isosmolar; o Se a soluo externa 0,3 osm de NaCl + 0,3 osm de Uria, o sistema ficar em equilbrio. Esta uma soluo isotnica, embora seja tenha uma maior osmolaridade, ou seja, hiperosmolar; A entrada de uria na clula deixa as concentraes internas e externas iguais. Definio de Tonicidade de soluo:

Uma soluo isotnica quando a clula no varia o seu volume. Quando a clula est em uma soluo onde o seu volume aumenta, esta soluo hipotnica e quando o volume celular diminui a soluo hipertnica.

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