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SYNERMED

GLICOSE
Mtodo IR enzimtico (N-Sulfopropil) oxidase para determinao de Glicose.

SIGNIFICADO CLNICO
A maioria da energia adquirida pelo organismo proveniente do metabolismo oxidativo da glicose. A glicose entra na dieta como parte dos acares sacarose, lactose e em forma de amido. As enzimas liberam glicose a partir dessas combinaes e a glicose metabolizada diretamente ou convertida em forma armazenadora pelo fgado. O fgado fundamental na distribuio de glicose conforme necessidade imediata de liberao ou para armazenamento ou para propsitos estruturais. Muitos hormnios participam da manuteno adequada dos nveis sangneos em condies de equilbrio ou em resposta ao estresse. A medida da glicose sangnea indica se a regulao bem sucedida.
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PREPARAO DOS REAGENTES:


Cdigo: IR070-X Reagente de Trabalho: Para cada 2,5 ml de R1 acrescentar 1 ml de R2 e homogeneizar. Aps a reconstituio, os reagentes so estveis por um ms, se armazenados sob refrigerao entre 0 a 8C.

COLETA E PRESERVAO DA AMOSTRA


Utilizar amostra recente livre de hemlise coletado sob jejum. O soro ou plasma deve ser imediatamente separado das clulas. Relata-se que em temperatura ambiente a gliclise diminui os nveis sricos glicose em aproximadamente 7 % em uma hora.4 A glicose considerada estvel no soro ou plasma por at 4 dias em temperatura ambiente (20-25 C).5 Utilizar amostras recentes de urina, lquido asctico, lquido pleural, lquido sinovial e LCR. .

O uso clnico primrio da determinao da glicose est na deteco e controle do diabetes mellitus, o distrbio mais comum do metabolismo de carboidratos. Quase todas as doenas definidas como associadas a nveis anormais de glicose plasmtica e o resultado do mau funcionamento da regulao dos hormnios. A causa mais importante da hipoglicemina espontnea a secreo excessiva e inapropriada da insulina por tumores beta pancreticos. 2 A metodologia de determinao de glicose pode ser dividida em dois grupos, qumica e enzimtica. A maioria das medidas qumicas da glicose depende de suas propriedades redutoras e, portanto, esto sujeitas interferncia de substncias redutoras endgenas. Os mtodos enzimticos apresentam especificidade mxima para estimar a glicose e so considerados mtodos de escolha. 3 Reagente SynermedTM Glicose emprega a enzima glicose oxidase que altamente especfico para beta-D-glicose. A reao atinge uma cor azul que medida espectrofotometricamente a 670 nm eliminando virtualmente interferncias cromticas da hemoglobina, bilirrubina e turbidez.

APRESENTAO:
Cdigo :IR070-X R1 Cromgeno glicose R2 Enzima glicose Cd. N. IR071-X Cd. N. IR072-X 1 X 250 ml 1 X 100 ml

MATERIAIS NESCESSRIOS NO FORNECIDOS


Espectrofotmetro com capacidade de comprimento de onda de 670 nm (600-700nm), cubetas, pipetas calibradas, relgio, temperatura controlada, calibrador IR CAL II Synermed.

PRINCPIOS DA REAO:
A glicose oxidase catalisa a converso da glicose em gliconolactona que forma cido glicurnico e perxido de hidrognio.
glicose H2O -D-glicose gliconolactona oxidase cido glicurnico + H2O2 O2

CALIBRAO
Para calibrar esse mtodo deve-se usar material de referncia com base protica para glicose (no usar padro aquoso). Para melhor performance da calibrao, sugere-se uso do calibrador IR Cal II Synermed pela compatibilidade de metodologia .

CONTROLE DE QUALIDADE
O perxido de hidrognio reage com a N-sulfopropil-N-etil-3,5-dimetilanilina e ampirona na presena de peroxidase (POD) para formar um corante azo azul, o qual quantificado a 670 nm. uma boa prtica de laboratrio incluir soros controles na rotina. A Synermed recomenda que um controle normal e um patolgico sejam testados com cada grupo de soros desconhecidos para garantir bom desempenho com limites aceitveis. Material de controle, comercialmente disponvel, adequado e os resultados devem estar dentro de 2 desvios padro da mdia, sendo estabelecido por cada laboratrio.

COMPOSIO DOS REAGENTES:


Cdigo: IR070-X R1 Cromgeno glicose Cd. N. IR071-X Contm 280 mol/l de N-sulfopropil-N-etil-3,5-dimetilanilina na mistura final da reao R2 Reagente glicose Cd. N. IR072-X Contm 280 mol/l de ampirona, 1400 U/l de peroxidase (rbano silvestre) e 18.000 U/l de glicose oxidase (microbiana) na mistura final da reao. Uma leve variao nas concentraes dos componentes pode ocorrer de um lote para outro, mas isso no ir alterar os resultados do ensaio.

PARAMETROS DA REAO:
Comprimento de onda Primrio.............670nm (600-700 nm) Comprimento de onda secundrio..........NA Tipo de reao........................................Ponto final Direo da reao...................................Crescente Temperatura de reao...........................37C Relao amostra/reagente.......................1:100 Linearidade.............................................900 mg/dl Tempo de incubao...............................10 minutos (600 seg) Para programao de analisadores consultar assessoria cientfica.

ADVERTNCIAS E PRECAUES:
1. 2.

Os reagentes SynermedTM so exclusivamente para uso diagnstico in vitro. Como precauo normal de laboratrio, no pipete os reagentes com a boca e evite contato com os olhos e pele.

PROCEDIMENTO MANUAL:
1. Pipetar Branco Calibrador Desconhecido Reativo de Trabalho 1000 l 1000 l 1000 l Calibrador 10 l Amostra 10 l 2. Incubar a 37C por 10 minutos. 3. Ler no espectrofotmetro a 670 nm contra o Branco de reagente. As leituras devem ser realizadas dentro de 10 minutos. Urina, Lquidos asctico, pleural ,sinovial e LCR: Tomar uma alquota e dosar utilizando o mesmo procedimento acima.

ARMAZENAGEM E ESTABILIDADE DOS REAGENTES:


R1-Cromgeno Glicose deve ser armazenado refrigerado, entre 0 e 8C, firmemente tampado e protegido da luz. R2-Reagente Glicose deve ser armazenado refrigerado, entre 0 a 8C. Nessas condies, e no frasco original, o reagente estvel at a data de validade indicada no rtulo do produto.

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________ Synermed International Inc. 17435 Tiller Court, Sute 100, Westfield, IN, USA, 46074, Telephone: 317-896-1565 Fax: 317-896-1566

RESULTADOS
A absorbncia lquida usada para calcular os valores de glicose utilizando a seguinte frmula: Clculos: Fator = Conc. do Calibrador (Valor na Bula) Absor. do Calibrador Conc. do Desconhecido = Fator x Absor. do desconhecido Exemplo: Absorbncia do desconhecido = 0,360A670nm Concentrao do calibrador = 300 mg/dl ou (16 mmol/l) Absorbncia do calibrador = 0, 600A670nm Ento: Fator= 300 mg/dl = 500 0,600 Conc. do desconhecido = 500 x 0,360 = 180 mg/dl ou 9,6 mmol/l

4.

A reprodutibilidade corrida a corrida do mtodo, similar do analisador Hitachi 705, foi determinada a partir de valores obtidos de 5 anlises similares de material de controle de qualidade ensaiado durante um perodo de 22 lotes. Os seguintes resultados foram obtidos: Mdia DP VC 74,2 mg/dl 0,9 1,3 % 287,8 mg/dl 4,3 1,5 %

INFORMAES ADICIONAIS BIBLIOGRAFIA:


1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. Widmann, Frances K, Clinical Interpretation of Laboratory Tests, F.A . Davis Company, Philadelphia, pp. 237-239. Howanitz, P.J. and Howanitz, J.H., Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods (Henry, J.B., ed.), W.B. Saunders Co., Philadelphia, p.173, 1979. Ibid., p.158 Ibid., p.158 Pileggi, V.and Szustkiewicz, Clinical Chemistry Principles and Thecnics (Henry, R.J. ed.), Harper & Row, Hagerstown MD, p.1288, 1974. Young, D.S., Pestaner, L.C. and Gibberman, V., Clin Chem. 21: 278D281D, 1975. Bekerman, S., A,B,Cs of Interpretive Laboratory Data, Greenville, NC, 1983, p.155. Jacobs, D.S et al ,Laboratory Test Handbook, Lexi-Cop Inc ,Cleveland,p.137,1996.

LINEARIDADE
A reao linear at 900 mg/dl para glicose. Para valores superiores repetir a determinao diluindo a amostra em gua deionizada. O valor obtido deve, ento, ser multiplicado pelo fator de diluio utilizado.

VALORES DE REFERNCIA
Os valores de referncia de glicose variam de acordo com a idade, sexo e dieta. Recomenda-se que cada laboratrio estabelea uma faixa esperada para a populao local. Soro/plasma RN 40 - 65 mg/dL adulto 65 - 120 mg/dL LCR: 47 - 72 mg/dL Urina: Negativo. Lquidos Asctico, Sinovial e Pleural: Acompanham os nveis plasmticos.

LIMITAES DO PROCEDIMENTO
1. A interferncia da hemoglobina, bilirrubina e lipemia dependem do tipo de instrumento, do comprimento de onda e da relao amostra/reagente usado. Para dados especficos de aplicaes individuais, veja as notas de aplicao do equipamento. Sabe-se que a bilirrubina interfere em reaes com peroxidase. 6 Essa interferncia minimizada pela leitura da absorbncia a 578nm. A interferncia da lipemia minimizada pela leitura bicromtica com um filtro secundrio de 650nm Para uma listagem completa das possveis fontes fisiolgicas e metodolgicas de interferncia, veja a publicao de Young, et

Esse produto garantido pela Synermed, Inc desde que usado como descrito nessa bula e na literatura da Synermed, Inc. SYNERMED, INC. NEGA QUALQUER GARANTIA DE COMERCIALIZAO OU PROPRIEDADE PARA QUALQUER OUTRO PROPSITO E, EM NENHUM CASO, A SYNERMED, INC. SER RESPONSABILIZADA POR QUALQUER DADO INCIDENTAL OU CONSEQENTE ADVINDO DE UMA TRANSGRESSO DA GARANTIA EXPRESSA ACIMA CITADA Synermed marca comercial da Synermed, Inc. 1992, Synermed, Inc. RRIR070-1 08/04/03

2.

1. A metodologia SynermedTM glicose foi correlacionada a um mtodo enzimtico de glicose amplamente aceito. A regresso linear calculada em 40 amostras, variando entre 36 a 435 mg/dl (2 a 24 mmol/l) com resultados Synermed no eixo Y foi: Y = 0,99X - 2,5 mg/dl (0,14 mmol/l) com um coeficiente de correlao de 0,9997. 2. A sensibilidade do mtodo tal que uma alterao na absorbncia de 0,001 detectar to pouco quanto 0,36 mg/dl (0,02 mmol/l) de glicose. 3. A preciso do mtodo foi determinada atravs do ensaio de 36 amostras de material de controle de qualidade a dois nveis de concentrao de glicose, onde se obteve os seguintes resultados: Mdia DP CV 65,3 mg/dl 0,54 0,93 % 252,1 mg/dl 1,81 0,72 % O coeficiente de variao obtido usando-se um pool de soro testado nas mesmas condies que o material controle usado para uma preciso de corrida foi de 0,72 % em um nvel de 116,6 mg/dl.

ESTUDO DO DESEMPENHO

PRODUZIDO POR: SYNERMED International Inc. USA KIT DISTRIBUIDO POR: SYNERMED DO BRASIL Rua Cincinato Braga, n 59-CJ A2- Trreo-Bela Vista 01333-011 - SO PAULO - SP Telefone (011)3266 3268 Fax (011)3141 9975 C.N.P.J 02.715.822/0001-84 INSC.EST.: 115.283.459.116 Responsvel Tcnico: Carolina Pasin Vicari CRF-SP n 29652-4 Nmero Registro ANVISA: 10438910019