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Aula06BioqII Qui ContExpressaoGenica
Aula06BioqII Qui ContExpressaoGenica
Tema:
Em procariotos
A identidade da sequência consenso do
promotor dita a “força” da transcrição pela
frequência do recrutamento da RNApol
Existe modulação adicional por proteínas
Regulação negativa
Dependente de Repressores
- Dependem da presença do
Efetor (sinal molecular)
Tipo característico em
procariotos
Regulação positiva
Dependente de Ativadores
- Dependem da presença do
Efetor (sinal molecular)
Tipo característico em
eucariotos
A Expressão Gênica é regulada por proteínas
Proteínas específicas reconhecem sequências específicas de DNA
Possuem domínios de interação com DNA e de interação com outras proteínas
- Normalmente dímeros reconhecer sequências palindrômicas simétricas
o papel dos Sulcos maior (mais específico) e menor (menos específico) no DNA
Alta especificidade
KA das proteínas
regulatórias pelas
sequências-alvo é 4-6
ordens de grandeza
maior do que para
outras sequências
Resíduos básicos
Interação com o Pi
Zinc Fingers
Homeodomínios
Controle da expressão em Procariotos
Procariotos produzem proteínas relacionadas a processos interdependentes de forma
agrupada
- Mecanismo geral simples para coordenar a regulação de genes inter-relacionados
P: sequência promotor
lacI: gene proteína repressora
O: operadores: sítio de ligação da proteína repressora
lacZ: gene da β-galactosidade
lacY: gene da permease
lacA: gene da tio-transacetilase
Estrutura tetramérica
α-D-galactopiranosil-(1 4)-D-glicopiranose
Indutores
α-D-galactopiranosil-(1 6)-D-glicopiranose
Óperon Lac
1) Na ausência de Lactose, não existe 1,6-alolactose e portanto a Proteína repressora Lac
permanece ligada à sequência operadora impedindo a transcrição do DNA
Permease
β-galactosidase
Transacetilase
Controle da Expressão Gênica em procariotos
Comutação de reguladores
Ativação da expressão gênica por AMPc
AMPc (coativador) indução conjunta de enzimas catabólicas
Repressão
Mecanismo de
splicing em
eucariotos
Controle da Expressão Gênica em procariotos
Controle por recombinação
Recombinação regula a expressão de diferentes proteínas do flagelo (FljB e FliC) a cada
1000 gerações
Mecanismo de escape do sistema imune
Sistema óperon
- Recombinase Hin inverte posição do promotor (e gene para a hin) para a FljB
- Sem expressão da proteína repressora FljA expressão da FliC
Controle da Expressão Gênica em Eucariotos
O tamanho do genoma
Diversidade Celular
- Impõem mais complexidade para atingir especificidade.
Transcrição e tradução NÃO são processos acoplados.
Os genes de uma mesma via não estão organizados em óperons.
- Existem somente algumas exceções
Transcrição basal não observada transcrição está inativa para a maioria dos genes
- Regulação positiva requer Ativadores sempre
- Regulação negativa necessitaria de grande número de repressores presentes na célula
em quantidade há poucos exemplos em eucariotos
Reversão executada
por
Histonas
desacetilases
repressão da
transcrição por
compactação da
cromatina
Remodelamento da Cromatina
Em levedura, os genes necessários para o metabolismo de galactose são ativados pela
proteína GAL4.
- Reconhece a sequência: 5’-CGG(N)11CCG-3’ 4.000 pontos no DNA de levedura
- Somente 10 deles são identificados pela GAL4 99,75% estão bloqueados
Requerimento de:
- elementos potenciadores (enhancers) a longa
distância do promotor
Controle combinatório
- Depende do subconjunto de proteínas produzidas
naquele tipo celular
- Heteroligômeros e heterocomplexos
Controle da Expressão Gênica em Eucariotos
Controle combinatório
Dependendo do conjunto de proteínas diferentes efeitos
Número reduzido de proteínas reguladoras maior especificidade
reconhecem sequências assimétricas
Ex: 2 famílias de reguladores com 3 membros cada
Formam Homodímeros e heterodímeros 36 possíveis combinações
Acentuadores ou potenciadores
- sequências específicas “acima” do promotor que funcionam como pontos de ligação
específicos para proteínas ativadoras ou repressoras.
- Podem estar a milhares de pares de base à 5’ do promotor
- Dependem da presença das proteínas ligadoras específicas
- Podem ajudar a expor o DNA para RNApol II
- Podem ajudar a montagem do complexo basal de
transcrição
Acentuador da creatina
quinase regulando a expressão
da β-galactosidade
Regulação gênica em eucariotos
Requer ação combinada de diversos agentes
UAS: upstream activator sequences: Sequências ativadoras a montante
Pode ser a jusante também
Reguladores da arquitetura: proteínas HMG
Remodelamento da cromatina
Coativadores: Ativadores ou repressores interação com o Mediador
Fatores basais de transcrição
Regulação gênica positiva em eucariotos
Coreografia da ativação da transcrição
Eventos em cascata variável para diferentes genes
Processo dependente de moléculas efetoras e reversível
Expressão gênica regulada por hormônios
Receptores Nucleares
Os receptores para hormônios estereoidais atuam induzindo a transcrição
- Proteínas modulares domínio de ligação ao DNA e domínio de ligação ao hormônio
Ex: Estrogênio e testosterona
Agonistas
Antagonistas
Expressão gênica regulada por hormônios
Receptores Nucleares
Os Receptores de hormônios nucleares regulam a transcrição por recrutar Co-ativatores ou
mediadores para o complexo de transcrição
Expressão gênica regulada por hormônios
Ação hormônios esteroides, tireoidianos e retinoide
- Livre transito pela membrana plasmática
Presença de sequências HRE: elementos de resposta hormonal específicos
Regulação por repressão da Tradução
Transcrição e tradução são processos desacoplados edição do mRNA e transporte para o
citoplasma
Envolve o armazenamento de mRNAs inativos no citoplasma
1) Fatores de iniciação da tradução são sujeitos a fosforilação inibe
2) Proteínas repressoras ligam-se à região 3’ não traduzida (3’UTR - untranslated region)
- Bloqueia a iniciação da tradução
3) Sítio de ação da regulação gênica regulada por RNA
Silenciamento gênico
O papel do microRNA – miRNA 60% dos genes humanos
Produção transitória chamados como pequenos RNAs temporais (stRNA)
Eucariotos superiores (nematódeos, mosca, plantas e mamíferos)
Fazem parte de noncoding RNA (ncRNA) incluem snRNA, tRNA, rRNA, snoRNA
- Mamíferos codificam mais ncRNA do que mRNA