1 Vibrio cholerae Universidade Federal do Par Universidade Federal do Par Centro de Cincias Biol Centro de Cincias Biol gicas

s gicas Prof Profa a . Dr . Dra a . . Karla Karla T. S. Ribeiro T. S. Ribeiro DEPAT/CCB/UFPA DEPAT/CCB/UFPA TAXONOMIA Bacteria; Proteobacteria; Gammaproteobacteria; Vibrionales; Vibrionaceae Famlia: Vibrionaceae Gnero: Vibrio Espcies: V. cholerae V. parahaemolyticus V. alginolyticus V. Vulnificus e outros Existe cerca de 48 espcies ambientais e patognicas. Vibrio Vibrio cholerae cholerae23 VIBRIO CHOLERAE Agente etiolgico: Vibrio cholerae descoberto por Robert Koch em 1884 na ndia. Doena clera Bitipos: Clssico (at a 6 pandemia) El Tor (a partir da 7 pandemia) Sorogrupo: O1 (clera at a 7 pandemia) O139 ou Bengal (1992/1993): possvel 8 pandemia da clera Sorotipos: 3 fraes antignicas A, B e C Inaba (fraes A e C) Ogawa (fraes A e B) Hikojima (fraes A, B e C) Estrutura Antignica Estrutura Antignica maior menor Sobrevida no meio ambiente Varivel - Atividade Hemoltica - + Lise pelo Bacterifago tipo IV + - Aglutinao de hemcias de aves Resistente Sensvel Sensibilidade Polimixina B + - Teste de Voges-Proskauer (VP) El Tor Clssico Bitipos Caractersticas Diferenas entre Vibrio cholerae Bitipos Clssico e El Tor Os sorogrupos O1 e O139 so idnticos quanto aos fatores de virulncia; Estudos moleculares genes do antgeno 01 foi substitudo pelos genes do O139 transferncia horizontal; V. cholerae os que no pertencem aos sorogrupos O1 e O139 so denominados vibrios NAG (nonagglutinable) ou NVC (non-cholerae vibrio). Antgeno Somtico O 1, 2, 3, 4, ............139........155 CLERA Ogawa Inaba Hikojima LPS CARACTER CARACTER STICAS BACTERIOL STICAS BACTERIOL GICAS GICAS Meio de cultura de isolamento TCBS (Agar Tiossulfato-Citrato-Bile-Sacarose);

pH alcalino (8,4 - 9,6); fermentam a sacarose e a manose, mas no a arabinose; um germe frgil no suporta certas condies desfavorveis do ambiente; sobrevivncia na gua depende de diversos fatores: temperatura, pH, outras bactrias, presena de sais e matria orgnica; 4 FATORES DE VIRULNCIA DO FATORES DE VIRULNCIA DO V. V. cholerae cholerae Toxina col Toxina col rica CT rica CT (termolbil) semelhante a toxina LT de Escherichia coli (ETEC); Outras toxinas Zonulla occludens (ZOT) e a toxina colrica acessria (Ace) diarria; Fator de colonizao pilus TCP Fatores acessrios de colonizao Pilus Tipo IV Protenas (AcfA; B, C e D) Os genes que controlam os fatores de virulncia dos vibrios so regulados pela protena ToxR. Degrada vrias protenas, como fibronectina, mucina e lactoferrina Protease (mucinase) Protena citoltica. formadora de poros. Provoca acmulo de fludos em alas ligadas do intestino do coelho. Hly (hemolisina) Provoca hemlise. Citotxica para leuccitos e clulas Hela. Relacionado diarria de voluntrios vacinados com amostras de V. cholerae CT negativas Rtx (repeat in toxin) Forma poros na membrana das clulas eucariticas Ace (acessory cholera toxin) Altera a permeabilidade das zonasoclusivas Zot (zona occludens toxin) Toxinas Toxinas produzidas pelo Vibrio cholerae com exceo de CT PATOGENICIDADE PATOGENICIDADE Transmisso via fecal-oral dose infectante de 1011 UFC; Perodo de incubao algumas poucas horas at vrios dias (mdia / 2-3dias); Clera intestino delgado; Sintomas nuseas, vmitos, diarria profusa e clicas abdominais, cimbras, desidratao e choque; As fezes tm o aspecto de gua de arroz; contm muco; grande quantidade de vibries e forte odor de peixe . Patognese: ao da toxina CT sobre a enzima adenilciclase desencadeia uma srie de reaes metablicas na clula desidratao rpida perda de eletrlitos e gua DIARR DIARR IA IA; A taxa de mortalidade de 25 a 50%;

Aps trmino dos sintomas, o perodo de excreo da bactria pode se manter por uma a duas semanas. DIAGNSTICO LABORATORIAL Isolamento do V. cholerae das fezes atravs e cultivos em meios de isolamento: APA e TCBS; Seguindo de identificao bioqumica e sorolgica (para determinar o sorogrupo); Pesquisa de toxina colrica atravs de ELISA, sondas moleculares PCR (Polimerase Chain Reaction.)5 ISOLAMENTO E IDENTIFICAO DE Vibrio cholerae 1. Cultura bacteriana 2. Meio de Triagem Kligler: Al/Ac TSI: Ac/Ac Prova da Oxidase String Test Sorologia Caracterizao Fenotpica Caracteriza Caracteriza o o Genot Genot pica pica O homem o nico reservatrio comprovado; A doena mantm-se atravs do ciclo: homem meio ambiente homem; Alguns animais podem albergar a bactria; assim como certas plantas aquticas e frutos do mar. RESERVAT RESERVAT RIO E FONTES DE RIO E FONTES DE INFEC INFEC O O6 TRANSMISSO TRANSMISSO Primariamente atravs da ingesto de gua contaminada com as fezes ou vmitos de indivduos doentes; Menor extenso fezes de portadores; Secundariamente pela ingesto de alimentos poludos por gua contaminada; por mos sujas de doentes, portadores e manipuladores dos produtos; alm de vetores. TRATAMENTO E PREVEN TRATAMENTO E PREVEN O O Terapia de Reposio Oral (TRO) ou endovenosa; Antibiticos: tetraciclina eritromicina cloranfenicol urazolidona entre outros Preven Preven o o consumo de gua tratada e o preparo adequado dos alimentos so medidas altamente eficazes HISTRICO E EPIDEMIOLOGIA Endmica no Continente Indiano Pandemias 1 1817-24 2 1829-52 3 1852-59 V. cholerae O1, Clssico 4 1863-75 5 1881-96 6 1899-1923 7 1961 IndonsiaV. cholerae 01, Bitipo El Tor***

***Amrica do Sul/Brasil 1991 8 1993 Bangladesh V. cholerae 0139, Bitipo Bengal OUTROS VIBRIOS VIBRIO PARAHAEMOLYTICUS Encontrado na gua do mar e animais marinhos; Importante causa de infeco intestinal; A infeco veiculada atravs da ingesto de peixes; no Japo 70% dos casos de intoxicao alimentar; Diagnstico: isolamento da bactria das fezes est relacionada com a produo de toxina e a invaso da mucosa intestinal ; Consumo de ostras cruas so fontes de infeco sistmica 7 Vibrio Vibrio vulnificus vulnificus um patgeno oportunista, gram-negativo, haloflico, fermentador de lactose; Encontrado em ambientes marinhos associado a vrias espcies marinhas como plnctons, frutos do mar (ostras, mexilhes, caranguejos) e peixes com barbatanas; Sua sobrevivncia est ligada a fatores como temperatura, pH, salinidade, e aumento de resduos orgnicos neste meio; Este organismo causa infeces em feridas, gastrenterites ou a sndrome conhecida como "septicemia primria". Infeces mais graves geralmente ocorrem em pessoas com comprometimento heptico, alcoolismo crnico ou hemocromatose e em imunodeprimidos - KONEMAN, E. W. et al. Diagnstico Microbiolgico, Texto e Atlas Colorido. Rio de Janeiro: Medsi, 2001. 1465p. - MAZA, Luis M. de la.; PEZZLO, Marie T.; BARON, Ellen Jo. Atlas de Diagnstico em Microbiologia. Porto Alegre: ARTMED, 1999, 216p. MURRAY, P. R.; CURY, A. E. Microbiologia Clnica. 2.ed. Rio e Janeiro:MEDSI, 2002, 392p. - OPLUSTIL, Carmem Paz; ZOCCOLI, Cssia Maria; TOBOUTI, Nina Reiko;SINTO, Sumiko Ikura. Procedimentos Bsicos em Microbiologia Clnica. 2.ed. So Paulo:SARVIER, 2004, 340p. - PELCZAR, M. J. et al. Microbiologia: Conceitos e Aplicaes. Vol. 1 e 2. So Paulo: Makron Books, 1996. - TORTORA, Gerald J. et al. Microbiologia. Porto Alegre: Artmed, 2000. 860p. - TRABULSI, L.R. et al. Microbiologia. 4.ed. So Paulo: Atheneu, 2004. 718p. Sites: http://www.columbia.edu/cu/biology/courses/g4158/presentations/2004/Vibrio_ Cholerae.ppt#308,70,Pathogenesis: Mechanism of Action cont. http://www2.umdnj.edu/mimmweb/Instruction/week30/GNPDF%20PR.pdf Referncias Bibliogr Referncias Bibliogr ficas ficas