Microbiologia Geral Aulas 3 e 4

1 de Maro de 2010

Microbiologia Principais tcnicas

Pesquisa bacteriolgica
Crescer o microrganismo a partir de uma amostra
(meios de cultura apropriados)

(meios selectivos, meios slidos)

Isolamento em cultura pura

(Meio lquido)

Expanso

(Coloraes, estudos bioqumicos, estudos genticos)

Caracterizao

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Tipos de microrganismos face s necessidades de nutrientes

Microrganismos prototrficos Microrganismos auxotrficos Microrganismos fastidiosos Microrganismos que so parasitas intracelulares obrigatrios (e.g. Mycobacterium leprae) (e g Outros microrganismos no cultivveis

Tipos de meios de cultura

Estado fsico Composio qumica Slido Lquido Definido Complexo Simples Selectivo Diferencial Enriquecido

Objectivo

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Meios de cultura definidos

Meio para E. coli
KH2PO4, K2HPO4, (NH4)SO4, MgSO4, CaCl2 Glucose Oligo-elementos (Fe, Co, Mn, Zn, Cu, Ni, Mo) (Fe Co Mn Zn Cu Ni H 2O

Meio para Leuconostoc mesenteroides

KH2PO4, K2HPO4, NH4Cl, MgSO4 Glucose, acetato de sdio Aminocidos (alanina, arginina, asparagina, aspartato, cistena, glutamato, glutamina,
glicina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, prolina, serina, treonina, triptofano, tirosina, valina)

Adenina, guanina, uracilo, xantina Vitaminas (biotina, folato, cido nicotnico, piridoxal, piridoxamina, piridoxina, riboflavina,
tiamina, pantotenato, cido p-amino benzico)

Oligo-elementos (Fe, Co, Mn, Zn, Cu, Ni, Mo) H 2O

Meios de cultura complexos

Meio de cultura igualmente bom para E. coli ou Leuconostoc mesenteroides
Glucose, Extracto de levedura Peptona KH2PO4 H 2O

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Meios selectivos e diferenciais

Manitol-Sal-Agar:
Manitol Extracto de carne Peptona NaCl (7,5%) (7 5%) Vermelho de fenol Agar

EMB (Eosin Methylene Blue) agar Meio selectivo e diferencial

Gelose sangue (Blood agar) Meio enriquecido e diferencial

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Pesquisa bacteriolgica
Crescer o microrganismo a partir de uma amostra
(meios de cultura apropriados)

(meios selectivos, meios slidos)

Isolamento em cultura pura

(Meio lquido)

Expanso

(Coloraes, estudos bioqumicos, estudos genticos)

Caracterizao

Preparaes coradas
A Aumentam a visibilidade d microrganismos t i ibilid d dos i i Acentuam as suas caractersticas morfolgicas Permitem a preservao das amostras

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Fixao
Processo pelo qual as estruturas internas e externas so preservadas e mantidas nas suas posies originais Processo pelo qual os organismos so mortos e firmemente ligados lmina de vidro
Fixao pelo calor: Preserva a morfologia g g geral, mas no as estruturas internas Fixao qumica: Protege as estruturas subcelulares e a morfologia em geral, em organismos mais delicados