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UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO DE

JANEIRO
ESCOLA DE QUMICA

ANLISE ORGNICA INSTRUMENTAL

Espectrometria de
Massas
Prof Maria Letcia Murta Valle

uma tcnica analtica muito potente utilizada para


identificar compostos desconhecidos
quantificar compostos conhecidos
elucidar da estrutura qumica e as propriedades de
molculas.
Limites de deteco
10-12g, 10-15 moles para um composto de massa
1000 Daltons

A espectrometria de massas utilizada para


1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.

Detectar e identificar esteroides em atletas


Monitorar a respirao de pacientes durante uma
cirurgia
Determinar a composio de molculas encontradas
no espao
Determinar adulteraes em alimentos
Localizar depsitos de petrleo analisando rochas
precursoras
Monitorar processos de fermentao em indstrias
Detectar dioxinas em peixes contaminados
Determinar alterao em genes provenientes de
contaminao ambiental
Estabelecer a composio elementar em materiais
semicondutores

Espectrometria de Massas

O que um espectrmetro de massas?


1. O espectrmetro de massas um instrumento que mede as

massas de molculas individuais que foram convertidas em


ons, ie, molculas que foram eletricamente carregadas.

2. As massas so medidas em Daltron (Da) 1 Da = massa de 1

tomo do istopo de carbono 12 ( 12C) ou seja, o 12C tem 12


unidades de massa. Hoje existe uma sugesto de chamar esta
unidade de Thompson (Th).

3. No mede a massa molecular diretamente mas a relao


massa/carga dos ons formados pelas molculas .

4. A carga de um on um nmero inteiro z da unidade de carga

fundamental e a relao massa/carga = m/z representa Daltons


por unidade de carga. Em muitos casos z=1 e m/z
numericamente igual massa molecular do on em Da.

Componentes de um espectrmetro de
massas

Operao do equipamento
1.

ons sempre analisados em forma gasosa.

2.

A amostra pode ser slida, lquida ou gasosa. O


sistema de vcuo (10-7 a 10-6 torr) faz com que ela
permanea na fase gasosa

3.

Os ons so analisados no detector

4.

Os sinais eltricos em funo de m/z so


coletados e a informao convertida no
espectro de massas

Caractersticas de um espectro de
massas

Espectro de massas do dixido de carbono CO2.


A massa molecular do on vista em m/z 44.

Como a amostra introduzida no


equipamento?
Slidos
so introduzidos na regio de vcuo, vaporizados ou
sublimados geralmente por aquecimento
Gases e lquidos
so introduzidos por sistemas especiais usando
controladores de fluxo
A amostra volatilizada ionizada e analisada
Anlise de misturas
Acoplamento com cromatografia

Formao do on molecular e
Tcnica de impacto de eltrons

fragmentos inicos

Formao do on molecular e
fragmentos inicos
1.

Os ons so gerados pelo bombardeamento


das molculas gasosas com um feixe de
eltrons com alta energia.

2.

Os ons gerados podem ser positivos ou


negativos

3.

coletado um tipo de cada vez ou s os


positivos (mais comuns) ou s os negativos

4.

Molculas no ionizadas e fragmentos neutros


so descartados

Tipos de analisadores

Funcionamento do analisador

I - Detetor com duplo foco


II - Filtro de massa quadrupolo
III - Espectrmetro on trap
IV - Espectrmetro FT- ICR
(Fourier transform ion cyclotron resonance)

V - Espectrometro por Tempo de Vo (TOF-MS)


(time-of-flight)

I - Detetor com duplo foco


combinao de um sistema eltrico e um magntico

Alta resoluo:
separa ons de
mesma massa e
estrutura qumica
diferente
O campo
magntico altera
a trajetria dos
ons formados
O raio depende da
massa do ion.
Quanto maior o m/z
maior o raio

II - Filtro de massa quadrupolo


ons com uma m/z determinada so coletados no
detector e os outros escapam entre os rolos

Mais barato mais


fcil para ser
acoplado em
outros
instrumentos

III - Espectrmetro on trap


A ionizao e a sada da
massa ocorrem no
espao circundado pelo
anel e o cap de eletrodos.

Os ons podem ser


gerados fora e depois
introduzidos no
analisador

Ele armazena os ons e os


deixa passar de forma
seletiva, para o detector,
variando a carga eltrica

IV - Espectrmetro FT- ICR


Os ons so aprisionados dentro de uma clula cbica sob um
potencial fraco e um campo magntico constante.
O movimento de um orbital
covalente ("cyclotron")
induzido pela aplicao de
um pulso de rdio
freqncia entre os pratos
energizados. Os ons em
rbita geram um sinal fraco
nas placas de deteco.
A freqncia do sinal
inversamente relacionada ao
valor de m/z. A intensidade
proporcional ao nmero de
ons com massa m/z.
O sinal amplificado. Aparelho de alta preciso e gera
espectros de alta resoluo.

V - Espectrometro por Tempo de


Vo (TOF-MS) (time-of-flight)
Os ons so formados
de uma amostra por um
feixe pulsante
A ordem de chegada no
detector funo dos
valores de m/z
Os ons formados so
acelerados de forma
que ons com a mesma
carga tm igual energia
cintica. Menor massa,
menor velocidade
Alta sensibilidade

Funcionamento do detetor de ons

1.

Em todos os espectrmetros, exceto no FT-ICR, os ons so


detectados e convertidos em anlise de massa pela energia de
coliso na superfcie do detecor das diferentes partculas, usando
sensores de luz e de carga.

2.

No FT-ICR a oscilao do sinal induzido pelo movimento dos ons


sentido nas placas de deteo.

O computador na espectrometria de massas


Os sistemas de base de dados do computador incluem:
software para quantificao, interpretao do espectro e
identificao dos compostos usando as bibliotecas de
espectros on line

Uso do EM na anlise de estruturas


Espectro de massa da acetona CH3COCH3

principais fragmentos
inicos
on molecular de m/z 58

Anlise do espectro
1. O espectro mostra os fragmento do on molecular (m/z 58) e os ons
mais intensos.
2. Os fragmentos so usados para deduzir as estruturas. Algumas
vezes os smbolos [ou +] e [ou -] so usados para indicar radicais
inicos
3. A perda 15 Da do on molecular da acetona d um on a m/z 43
presena de um grupo metila (CH3) na molcula original.
4. A perda de 28 Da para dar um on a m/z 15 presena de CO
5. Analisando estas perdas e prevendo estruturas para os possveis
ons, a molcula original do composto pode ser deduzida.
6. Algumas perdas comuns so 18 Da para a gua H2O; 17 Da para a
amnia NH3; e 77 Da para o grupo fenila C6H5.

Uso da EM na determinao das massas exatas

Exceto o carbono, cuja massa foi definida como sendo


exatamente 12,00000 Da, todos os elementos tm uma nica
massa, diferente do nmero inteiro

possvel determinar a massa de istopos e diferenciar


molculas com pesos moleculares muito prximos
C3H8O

60.05754

C2H8N2

60.06884

C2H4O2

60.02112

CH4N2O

60.03242

EXEMPLO

Distino entre o CO (m/z = 27,995) e N2 (m/z = 28,006 )

O espectro
obtido em um
instrumento de
FT-ICR de alta
resoluo

Outras tcnicas usadas para produzir ons

So tcnicas de ionizao usando baixa energia (soft) baseadas em


ionizao qumica (CI) e dessoro preservam o on molecular

Ionizao
eletrnica (EI)
da efedrina a 70
eV nenhum
on molecular
(m/z 165)

Ionizao Qumica de Efedrina


Ionizao qumica da
efedrina. A molcula
protonada tem m/z=166

Ionizao eletrnica

Ionizao Qumica x Ionizao Eletrnica

Na ionizao qumica (IQ) a amostra exposta a uma grande quantidade


de ons. Exemplo: metano ionizado (CH5+) em presena de uma
molcula M produz o on positivo [M+H]+.

No caso da ionizao eletrnica (IE) no aparece o on molecular m/z


165

Na IQ aparecem os fragmentos da molcula protonada m/z 166 e o


fragmento decorrente da perda de um mol de gua (18 Daltons) com
intensidades significativas

Em ambos os espectros pode ser visto o on a m/z 58

As etapas de fragmentao de molculas protonadas [M+H]+ no so,


necessariamente, as mesmas do on molecular M+

ons negativos e Ionizao por dessoro


ons negativos
So produzidos sob condies de ionizao qumica por
transferncia de um prton [M-H]- ou adio de um
eltron [M-]. Estes ons, em geral os nicos gerados,
podem ser usados para detectar espcies com grande
sensibilidade.
Ionizao por dessoro
Termo usado para descrever um processo no qual uma
molcula evaporada e ionizada simultneamente.

Acoplamento com tcnicas de separao


O espectrmetro de massas pode ser acoplado a

Cromatografia gasosa (CG)


Cromatografia lquida (CL)
Eletroforese capilar
Cromatografia com flido
supercrtico

Acoplamento e dois estgios de EM

No EM/EM o 1 analisador seleciona ons com um valor de fragmentao


m/z e o 2 produz um espectro dos fragmentos

Outras anlises

Relao entre istopos


so usados detetores mltiplos e cada detetor
focaliza especicamente um istopo. As
molculas orgnicas complexas so reduzidas
a CO2, H2O e N2

Espectrometria de massas elementar


usada mais para compostos inorgnicos

Espectro de massas por impacto de


eltrons da benzamida

O espectro de massas um grfico contendo as massas dos fragmentos carregados


positivamente, incluindo o on molecular, nas suas concentraes relativas
Pico base o pico mais abundante do espectro, tem arbitrariamente a intensidade de
100%.

Fragmentos inicos produzidos aps o impacto


de eltrons na benzamida

Cloro: peso atmico a partir do MS

Massa exata dos istopos

Intensidade dos picos de istopos


(% relativo ao on molecular) para
combinaes de bromo e cloro

Espectro do tetracloreto de carbono

Picos na regio do on molecular para compostos


contendo cloro e bromo

Rearranjo de McLafferty

A molcula deve possuir heterotomos


apropriadamente localizados (oxignio p.ex.)
Um sistema - usualmente uma ligao dupla
Um tomo de hidrognio em posio favorvel -
em relao ao sistema C=O

Resultam em picos de intensidade intensa, teis na


identificao da estruturas
So transies de baixa energia que aumentam a
estabilidade do produto

Rearranjo de McLafferty

A molcula deve possuir heterotomos


apropriadamente localizados (oxignio p.ex.)
Um sistema - usualmente uma ligao dupla
Um tomo de hidrognio em posio favorvel -
em relao ao sistema C=O