Contadores

Hematológicos

Ing. M. C. Molinari
 Conceptos básicos de hematología

- Elementos formes en suspensión - glóbulos rojos o eritrocitos

Sangre - glóbulos blancos o leucocitos
- plaquetas o trombocitos
- Plasma - suero
(líq. amarillento) - fibrinógeno (proteínas)

Hematocrito : Hto [%] = 100 (Volum. de eritroc./ Volum. de la sangre total)

Métodos de medición:
a) Directo: centrifugado de tubos capilares con microcentrífuga
b) Indirecto: en Cont. Hematológicos ( Hto = RBC * MCV)
 Distintas nomenclaturas y unidades

Nomenclat. A Unidades A Nomenclat. B (Coulter) Unidades B

Parámetro
Hemoglobina Hb g/l Hgb g / dL
Hematocrito Hct 0,## Hto %
Volumen Corp. Medio VCM l MCV fL
Hemoglob. Corp. Media HCM g MCH pg / cell
Conc. Hem. Corp. Media CHCM g/l MCHC g / dL
Concentr. de glób. rojos RBC count 106 / mm3
Concen. de glób. blancos WBC count 106 / mm3

1 mm3 = 1 uL = 1/6 de una gota ; 1 pg = 1g .10-12 ; 1 fL = 1 um3 = 1L . 10-15

 Glób. rojos Glób. blancos o leucocitos Plaquetas o
o Granulocitos trombocitos
eritrocitos Linfocitos Monocitos Neutrófilos Eosinófilos Basófilos

Defensa del organismo contra las infecciones Participa en los

Función Transporte de mecanismos de
Se tiñen con una Sus gran. se tiñen Se tiñen con
O2 y CO2 combin. de ambos con coloran. ácid. colorant. básicos la coagulación

Forma

8 um 4 um
Disco aplana- do en el Núcleo Núcleo 12 um Con gránulos
cen- tro. Sin núcleo redondo arriñonado Núcleo lobulado y gránulos en el citoplasma en su interior

Linfocitos
Cantidad
por unidad de Granulocitos
volumen Monocitos
Volumen Volumen
[fl]
60 120 35 90 160 450 2 20

H: 4,7 - 6,1 de 4,8 a 10,8 [103 /mm3]

Concen- 130 - 400
tración M: 4,2 - 5,4 20,5 - 51,1 2-8 50 - 70 1-4 0-4
[103/mm3]
[106 /mm3] [%] [%] [%] [%] [%]
 Hemoglobina (Hb)

Es vehículo para el transporte del oxígeno y del dióxido de carbono. Esta

proteína puede unirse hasta con 4 moléculas de O2 o de CO2, pero también
posee afinidad por otras moléculas, dando distintos derivados.
En los Contadores Hematológicos se le agrega a una parte de la muestra de
sangre un líquido llamado “lisante”. Esto produce la perforación y
contracción de la membrana de los glóbulos rojos (hemólisis). La
hemoglobina del interior del glóbulo queda liberada y se combina dando un
derivado llamado “cianometahemoglobina” (HiCN) cuya absorbancia
depende de la concentración de Hb en todos sus derivados. Por lo tanto se
puede determinar por colorimetría la concentración de Hb total de la
muestra.
 Indices Eritrocitarios

Son de utilidad para clasificar distintos tipos de anemias.

a) Volumen Corpuscular Medio (VCM): Es el volumen medio de los gl. rojos

VCM [fL] = 10 . Hto [%] / Concentración de rojos [106/mm3]

b) Hemoglobina Corpuscular Media: Representa la cantidad media de Hb en cada gl. rojo

HCM [pg] = 10 . Hb [g/dL] / Concentración de rojos [10 6 /mm3]

c) Concentración de Hemoglobina Corpuscular Media: Da la concentración media de Hb

en cada gl. Rojo
CHCM [g/dL] = 100 . Hb [g/dL] / Hto [%] (= 1000. Hb / VCM . RBC)
(= 100 . HCM / VCM )
Rango de valores para personas sanas

Hgb Hct MCV MCH MCHC

[g / dL] [%] [fL] [pg / cell] [g/ dL]

Hombres 14 -18 42 - 52 80 - 94
27 -31 * 33 -37 *
Mujeres 12 -16 37 - 47 81 - 99

*Nota: Hay un margen estrecho de variación de estos parámetros en personas sanas.

Estos parámetros son muy útiles para determinar si hay un problema en el funcionamiento
del equipo. La prueba consiste en medir una sangre control (control de calidad) o una sangre
sana, y verificar que el resultado esté dentro del rango. Si la muestra fuera de una sangre
desconocida, un alejamiento de este valor podría estar indicando una patología.
En otros equipos de laboratorio, como por ejemplo equipos de gases en sangre se utiliza esta
relación para inferir el valor del hematocrito a partir de una medición de hemoglobina por
colorimetría: Hct = 100 . Hgb / 35
 Conteo Hematológico
Automatizado

• Método de la impedancia eléctrica en corr.

contínua (impedancia volumétrica).
• Método de la impedancia a radio
frecuencia.
• Método óptico por dispersión (scattering).
 Impedancia - Volumen
F
 Método de impedancia eléctr. (corr. cont.)

Ref. a
35 fL
Lisante R+B+P >35 R+B ~ R
Z Ref.
b 20 fL <20 P
Z
B+P Ref.
35 fL
525 nm B
>35

Cantidad
R B Hb R/B ~ 600
P Hb P/B ~ 25
B/B = 1

b Integrador
Hto

V Volum.
a [fl]
t 2 20 35 60 90 120 160 450
 R
P

B
 Método de radiofrecuencia

El núcleo de la célula posee alta Z a la RF, pero el citoplasma no.

LA IMPEDANCIA ES PROPORCIONAL A LA DENSIDAD DE LA ESTRUCTURA CELULAR.
Ahora la amplitud de los pulsos dará información sobre la densidad del núcleo y granulosidad del
citoplasma.

Método óptico

En soluciones homogéneas: la absorción de luz es proporcional a la concentración.

Cuando en la solución hay partículas grandes la proporcionalidad se da entre :
Area total de la partícula ---- Cantidad de luz dispersada (midiendo la componente sobre
el eje)
 90
Láser

180 Componente a 0 grado

-90
La componente a 90 grados da información sobre granulosidad del citoplasma y
densidad del núcleo.
La componente de 90 grados será despolarizada por la granulosidad de los
leucocitos:
Los eosinófilos despolarizan ; los neutrófilos no.