Patologia de Insetos

Daniel R. Sosa-Gómez
 Patógenos de insetos
 Bactérias  Nematóides
 Fungos  Insetos
 Vírus  Ácaros
 Protozoários  Prion?
 Rickéttsias

DRSG
 Bioensaio
Método para determinar a atividade
biológica de um material sintético ou
biológico, mediante a resposta de um
organismo ou células vivas.

DRSG
 Bioensaios
Aplicações em patologia de
Insetos
 Padronizar inseticidas microbianos
 Caracterização de raças
 Estudos de resistência
 Quantificar a atividade em amostras:
Estudos de persistência, efeito de fatores
ambientais (u.v., chuva, exudatos), controle
de qualidade
 Monitoramento da suscetibilidade natural
de populações de insetos
DRSG
 Bioensaios
Objetivos
 Determinar a virulência de um
patógeno
 Determinar a presença de um
patógeno (aspecto qualitativo) ou
atividade (quantitativo) através de sua
resposta
 Agentes microbianos
Sequência dos tópicos de pesquisa
para desenvolvimento

 Descoberta
 Potencial de controle (bioensaios)
 Especificidade, Biosegurança
 Autorização para uso experimental
 Formulação
 Ensaios em escala reduzida
 Patenteamento
 Colaboração Indústrias, Instituições
 Ensaios em grande escala (Rótulo)
 Dados para registro
 Registro DRSG
 Nomuraea rileyi
vs
Anticarsia gemmatalis (3rd instar)
Isolates TL50(1)
(days)

Nr32 6.7 a
Nr22 6.9 ab
Nr34 6.9 ab
Nr33 7.1 b
(1)
Concentration: 100 conidia/mm 2 DRSG
 Nomuraea rileyi
vs.
Anticarsia gemmatalis (3rd instar)

Isolates CL50
2 (1)
(conidia/mm )

Nr32 46 a
Nr22 52 a
Nr34 63 b

(1) 7 days after inoculation

DRSG
 Baculovirus
Bioensaios
 In vivo
Aplicado sobre a
superficie
Incorporado à dieta
(50oC)
Microgotas

 In vitro
Cultura de células

DRSG
 Bioensaios
Insetos
 Livre de doenças
 População homogênea
Aproximadamente mesmo estadio, peso e
tamanho
 Se possível proveniente de criação de
laboratório
 Evitar estresse dos insetos
 Estadio com mortalidade “natural” mínima

DRSG
 Dieta
Bioensaios
 Natural
Quando não se conhece dieta artificial
Dificuldades: contaminação, difícil
padronizar qualidade.
Exemplos: Scarabaeidae (Coleópteros),
Tentredinidae (Himenóptero)
 Artificial
Insetos adaptados após 3 a 6 gerações
Dificuldades: ressecamento, contaminação
Exemplos: Noctuidae (Lepidópteros)
DRSG
 Bioensaios
Métodos
 Número de insetos
 Repetições
 Número de doses ou concentrações
 Condições controladas de UR,
temperatura, fotoperíodo
 Testemunha
 Mortalidade diaria

DRSG
 Bioensaios
Análise
 Mortalidade >10% e <90%
 Valores corrigidos e acumulados
 Programas: SAS, POLO
 Interpretação
 Dificuldades: inversão da resposta,
mortalidade na testemunha,
contaminação, resposta heterogênea

DRSG
Concentração Letal média: concentração
necessária para matar 50% da população
em ensaio.

Dose Letal média: dose necessária para

matar 50% da população em ensaio.

DRSG
 Enhancement of AcMNPV Infections
with Enhancin from TnGV
Insect Mortality (%) Enhancement

Virus only Virus+Enhan (%)

Trichoplusia ni 34 80 135
48 98 104
Helicoverpa zea 22 90 309
67 96 43
Pseudaletia unipuncta 21 45 114
42 68 62
Spodoptera exigua 6 84 1300
12 60 400
DRSG
 The Single Particle Theory

 One single pathogen which

successfully overcomes the defense
mechanisms of the host and starts
reproducing is capable of killing its
host

Huber & Hughes (1984)

DRSG
 Lethal Time 50

Days after Insect Number Mortality

treatment
2 30 5
3 30 10
4 30 15
5 30 20
 Lethal Time 50

Insect Mortality
Number Days after treatment
1 2 3 4 5 6

30 2 5 10 18 20 25
30 5 8 12 19 23 28
 Volume Ingested by larvae of 3
Noctuids

Species First Third

(1)
A. gemmatalis 11 155

H. virescens 8 150

C. includens 9 309
(1)
Mean nanoliters

Kunimi & Fuxa (1996)

DRSG
Thank you!