- -Sessão

SessãoCientífica
Científica- -
Hotel Imperial Aveiro
12Hotel Imperial
de Abril Aveiro
de 2016
12 de Abril de 2016
19h30
19h30
Infogene: Quem Somos, Onde Estamos, O que Fazemos?

Laboratório I

Lab. de
Biologia
Molecular
(Prestação de Serviços)

infogene Laboratório II

I&D e Inovação
(Investigação e
desenvolvimento de
novos produtos)

Partners
O que Fazemos?

Diagnóstico
Farmacogenética
molecular
Analise genética de
previsão a tratamento
ALTO-RISCO farmacológico
ALTO-RISCO PLUS
COMPLETE Lab de Biologia
infoDSTs /infoPathogen Molecular

Detecção precoce e (Prestação de

não-invasiva Serviços)
InfoSolutions
Consultoria, Formação
e Execução de trabalho
científico
 3 razões para escolher os nossos Serviços

1. COMPETÊNCIA
A Infogene tem um quadro de pessoal técnico altamente qualificado em Genética, Virologia molecular e
Oncologia (1 PhD em virologia molecular, 1 PhD em genética molecular, 2 mestres em bioquímica e 1 mestre
em genética e biotecnologia para as ciências da saúde), com cerca de 15 anos de experiência na área de
investigação molecular do cancro. A Infogene é atualmente um dos mais laboratórios mais competentes, a
nível nacional e internacional, para executar ensaios moleculares.

2. TECNOLOGIA
No nosso laboratório são aplicadas as tecnologias mais avançadas para o diagnóstico molecular, tais como a
reação em cadeia da polimerase (PCR), PCR Quantitativo em tempo real (qPCR), DNA arrays e sequenciação
de ADN.

3. QUALIDADE
A Infogene participa periodicamente em programas de controlo de qualidade externa (EHEQAS, UKNEQAS).
No que se refere aos serviços de deteção/genotipagem do HPV, os resultados obtidos foram sempre de
excelência. Recentemente a Infogene foi auditada pela SGS (Junho 2015) e cumpre os requisitos da norma
ISO 9001:2008 para as atividades de: i) Investigação e desenvolvimento na deteção precoce do Cancro, ii)
Distribuição de DMs e iii) Prestação de serviços de deteção precoce do cancro através de biologia molecular.
O que Fazemos de Inovador?
Pipeline I&DT – Infogene -

Identificação Validação Homologação Lançamento

Biomarcador Clínica Infarmed (CE) Oficial

2012

KIT de COLHEITA/AUTO-COLHEITA + Teste HPV

Detecção precoce do cancro 2015 RUO

do pulmão (ar exalado) 2016 CE/MD-IVD

Cancro
Cancro da
da 2016
‘Uromonitor’ bexiga
bexiga
I INFORMAÇÃO PARA PROFISSIONAIS DE SAÚDE
I PARTE: O PROBLEMA

II PARTE: A PREVENÇÃO

III PARTE: “o teste da mulher”

e outros serviços de detecção HPV
 I PARTE:
O Problema
 1. O Problema: o cancro do colo do útero (CCU)

• A nível mundial:
4º cancro mais prevalente nas mulheres;

• Em Portugal:
- 2º cancro mais frequente em mulheres em idade fértil;
- são diagnosticados, por ano, cerca de 720 novos casos;
- morrem, por ano, 390 mulheres portuguesas.
(Ferlay et al. 2013; Bray et al. 2013; Bruni et al. 2015). Fonte: GLOBOCAN 2012 (IARC)

É um dos cancros com maior taxa de incidência e mortalidade,

mas também um dos cancros humanos mais preveníveis!
 2. Qual é a principal causa do cancro do colo uterino?

PAPILOMAVÍRUS
HUMANO (HPV)
100% 100% 100% 100%

90% 83% 90%

83%
80% 80%

70% 70%

60% 56% 60% 56%

50% 50%

40% 40%

30% 25% 30% 25%

20% 20%
11% 11%
10% 10%
* Photograph from University of Nebraska-Lincoln 0% 0%
Angie Fox, illustrator/ 2009. N o rm al A t i p i a s de Le s õ es d e Les õ es de A l t o C arci n o m as do N o rm a l A t ip ia s d e Lesões de L e s õ e s d e A lt o C a rc in o m a s d o
S i g n i f i c ad o B ai x o G ra u G rau C o l o d o Ú t e ro S ig n if ic a d o B a ix o G r a u G ra u C o lo d o Ú te r o
I n de t e rm i n ad o In d e t e rm in a d o

Dados extraídos de: Rui Nobre – Journal of Medical Virology 2010

O cancro do colo do útero é causado pelo Papilomavírus Humano (ou HPV).

O HPV está virtualmente presente em 100% dos casos de cancro do colo do útero.
 3. Quais os tipos de HPV associados com o CCU?

PAPILOMAVÍRUS
HUMANO (HPV)
Existem 50 tipos distintos de HPVs anogenitais, que são
divididos consoante o risco oncogénico em dois grupos:

HPVs de BAIXO-RISCO HPVs de ALTO-RISCO

6, 11, 13, 40, 42, 43, 44, (14 TIPOS)
54, 61, 70, 72, 81, 89, 16, 18, 31, 33, 35, 39,
.... 45, 51, 52, 56, 58, 59, 66 e 68
* Photograph from University of Nebraska-Lincoln
Angie Fox, illustrator/ 2009.

i) O cancro do colo do útero é causado pela infecção persistente de tipos de

Papilomavírus Humano de alto-risco (HPVs de alto-risco).
ii) O HPV instala-se e replica-se na zona de transformação do colo do útero,
estando simultaneamente presente no fluido cervicovaginal.
 4. Qual a taxa de prevalência do HPV?

Adaptado de Schiffman and Castle, 2005.

1) A infecção por HPV é altamente prevalente em jovens sexualmente activos (<30 anos);
2) MAS, em condições normais: estas infecções são transitórias e facilmente
eliminadas pelo sistema imunitário, pelo que acima dos 30 anos de idade
esta infecção é rara!
 5. Quem está em maior risco de desenvolver CCU?

Adaptado de Schiffman and Castle, 2005.

• Em condições ANORMAIS, a infecção por HPV torna-se persistente podendo

levar à origem de uma lesão e, em último caso, ao desenvolvimento de cancro.
Logo em MAIOR RISCO estão Mulheres ( > 30 anos de idade)
infectadas com HPV de alto-risco.
 PARTE II
A prevenção
 6. Prevenção primária: vacinação profilática

VACINAÇÃO PROFILÁTICA

“O momento ideal para a administração das vacinas profiláticas é antes do

início da actividade sexual, isto é antes da exposição ao HPV, altura do benefício
máximo”.

2 tipos de vacinas PROFILÁTICAS:

* MERCK (Gardasil): HPVs 6, 11, 16* e 18*
* GLAXO (Cervarix): HPVs 16* e 18*

A vacinação proporciona uma protecção muito eficaz contra os HPVs 16 e 18

NOTA: mas NÃO protege contra os outros 10 tipos de HPV alto-risco
(i.e. HPVs 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52, 56, 58 e 59)
 7. Prevenção secundária: rastreio convencional

Teste de Papanicolau (Exame citológico)

1) 2) 3)
h

Normal Lesão
4)

http://www.plannedparenthood.org Joste n, Obstetrics and Gynecology Clinics of NA 2008

Teste de Papanicolau baseia-se na análise morfológica de células do colo

do útero para detectar a presença de cancro e lesões pré-cancerígenas.
Idade: 25-65 anos; Periodicidade: Anualmente/Trianual ; Sensibilidade: 68% (Clavel, 2001)
8. Quais as desvantagens do teste de Papanicolau?
Apesar dos avanços alcançados pelo teste de Papanicolau (ou citologia)
no decréscimo da mortalidade, algumas desvantagens têm sido reconhecidas:

1. Apresenta baixa sensibilidade

i) mesmo quando realizada em meio liquido a taxa média de sensibilidade da citologia ronda apenas
os 68% (Clavel et al., 2001). Por exemplo, a sensibilidade do teste de HPV por PCR ronda os 99%
(Ronco et al., 2010).
ii) Hoje é reconhecido que 25% dos casos de cancro do colo do útero são detectados em mulheres
que participam regularmente em programas de rastreio e têm repetidamente citologias negativas
(Andrae et al., J Natl Cancer Inst 2008).

2. Baixa taxa de robustez

Uma vez que este teste se baseia na análise morfológica de células do colo uterino, o diagnóstico
poderá ser variável consoante o operador e protocolo usado (Stoler et al., JAMA 2001).

3. Dificuldade de implementação e logística associada

Para a realização de uma citologia adequada é imprescindível que o instrumento de
colheita, o frasco de conservação e transporte da amostra, assim como o protocolo de
citologia sejam compatíveis e estritamente cumpridos. É difícil cumprir este pressuposto,
porque vulgarmente são usados utensílios de marcas distintas e de compatibilidade não
avaliada (Gravitt et al., PLoS ONE 2010).
Existe algum teste alternativo ou complementar ao teste
de Papanicolau (citologia) que apresente maior
sensibilidade, maior taxa de reprodutibilidade e que seja
mais fácil de implementar?
A nossa solução:

Teste alerta para o cancro do colo do útero que compreende:

um estojo de colheita de fluido cervicovaginal e
um teste para a detecção e genotipagem dos HPVs de alto-risco
 1. Estojo para a colheita

Componentes do estojo:

1) Instruções de colheita;
2) Dispositivo validado para a colheita e/ou auto-colheita de
fluido cervicovaginal;
3) Tubo de armazenamento da amostra à temperatura
ambiente;
4) Envelope pré-pago para envio da amostra para o laboratório.

O estojo apresenta marcação CE (Conformité Européene) e a sua

comercialização está autorizada em Portugal pelo Infarmed

Fácil de implementar na sua clínica/lab. Logística simples!

O nosso estojo disponibiliza todos os componentes necessários,
e validados em simultâneo, para a colheita, envio da amostra e detecção do HPV.
 2. Instruções para a colheita

Simples, cómodo e rápido!

Basta introduzir a “varinha” na vagina até que ela pare, rodar uma vez, retirá-la e deixar
secar cerca de 1-3 minutos ao ar. Por fim, colocar a porção branca no tubo de transporte e
enviar à temperatura ambiente no respectivo envelope RSF.
 3. Características do teste de HPV

Teste de detecção HPVs de alto-risco

i) O teste de HPV associado ao teste da mulher, baseia-se na tecnologia de PCR (Reacção
em cadeia da polimerase). Estudos recentes indicam que esta tecnologia é duplamente mais
sensível que o teste de citologia identificando mais mulheres em risco de desenvolver CCU *.

ii) O nosso teste não só detecta, como genotipa individualmente todos os 14 tipos de HPV
de alto-risco (16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,66 e 68).
O nosso teste disponibiliza aos ginecologistas mais informação do que a grande maioria dos
testes existentes no mercado, permitindo, por isso, avaliar a persistência da infecção ao
longo do tempo.

iii) O teste de HPV apresenta marcação CE-IVD e o laboratório Infogene apresenta

certificação ISO 9001:2008, participando periodicamente em programas de controlo de
qualidade externa, sendo considerado laboratório de excelência para a detecção do HPV
pelo programa EHEQAS.

* Efficacy of human papillomavirus testing for the detection of invasive cervical cancers and cervical intraepithelial neoplasia: a
randomised controlled trial; Ronco et al The Lancet Oncology 2010;11:249-57
 3. Características do teste de HPV

Teste de detecção HPVs de alto-risco (PCR)

Estojo de colheita
ginecológica
O nosso estojo disponibiliza todos os
componentes necessários, e validados
em simultâneo, para a colheita, envio da
amostra e posterior detecção do HPV.
+
- Detecta todos os tipos de HPV de alto-risco;
- Maior robustez e sensibilidade que o Papanicolau
(estudos recentes indicam que o teste de HPV é duplamente
mais sensível que o papanicolau identificando mais mulheres
em risco de desenvolver CCU*).

* Efficacy of human papillomavirus testing for the detection of invasive cervical cancers and cervical
intraepithelial neoplasia: a randomised controlled trial; Ronco et al The Lancet Onco-logy 2010;11:249-57

Disponibilização de um NOVO conceito para a detecção precoce do CCU,

mais sensível, mais robusto e mais cómodo.
 4. Fluxograma d’ “o teste da mulher”

Direccionado para as mulheres que desejem monitorizar

a sua saúde e assegurar que não se encontram em risco de desenvolver CCU.

3. Análise laboratorial 1 4. Análise laboratorial 2 5. Comunicação

1. Realização da 2. Envio da CONTROLO DNA celular Teste de HPV dos resultados
Colheita e/ou amostra para (verificação de que a (detecção de TODOS os HPVs por um professional
auto-colheita o laboratório amostra foi bem colhida) de alto-risco)
de saúde

Resultado NEGATIVO (-): Um teste negativo indica que o risco de desenvolver cancro do colo do
útero é mínimo.

Resultado POSITIVO (+): É importante clarificar que a infeção com HPVs de alto risco não indica
obrigatoriamente que a mulher seja portadora de lesões.
Um teste positivo indica que é portadora de uma infeção por HPV de alto risco e, por isso, tendo +30
anos, recomenda-se um acompanhamento ginecológico mais aprofundado.
 5. Estudos de validação d’ “o teste da mulher”

O “o teste da mulher” foi validado no Hospital Universitário de Uppsala (Suécia)

em 4 estudos independentes, envolvendo mais de 6 mil mulheres.

CONCLUSÃO:
A combinação “colheita/auto-colheita + teste de HPV” mostrou ser em mulheres com mais de
30 anos – não só ser mais sensível, mas também mais específico do que a citologia,
identificando, por isso, mais mulheres em risco de desenvolver cancro.
6. O “TESTE DA MULHER” complementa a citologia?
Sim! Estudos recentes comprovam que “se um teste de HPV e
citologia forem ambos negativos, o risco de desenvolver cancro é
nulo a 5 anos!” (*) Desta forma, paralelamente à realização de uma
citologia cervico-vaginal poderá ser realizado “o teste da mulher”!

(*) Sociedade Americana de Ginecologia e Soc. Americana do Cancro CA CANCER J CLIN 2012;62:147-172
 Mensagem final – Take-home message

1) O cancro do colo do útero é um dos cancros mais preveníveis,

uma vez que o seu agente etiológico é conhecido e pode ser detectado precocemente.

2) A vacinação contra o HPV16/18 reduz o risco de cancro,

mas não o elimina totalmente.

3) Mesmo que tenha sido vacinada é importante rastrear/realizar regularmente

métodos de detecção “precoce”,
uma vez que existem outros 12 tipos que podem originar cancro.

Informar, vacinar e fazer o rastreio!

 Mensagem final – Take-home message
4) O “teste da mulher” é um teste alternativo ou complementar à citologia
cervicovaginal e uma solução ideal para monitorizar a saúde das mulheres e
assegurar que não se encontram em risco de desenvolver CCU.

Este teste é constituído por:

i) um estojo de colheita de fluido cervicovaginal, que apresenta todos os

componentes necessários e validados, para a colheita, envio da amostra à
temperatura ambiente (via RSF) e posterior detecção dos HPVs de alto-risco;

ii) um protocolo simples, cómodo e rápido de colheita cervicovaginal;

iii) um teste de HPV, baseado na tecnologia PCR, que permite a detecção e

genotipagem individualizada de todos os 14 tipos de HPVs de alto-risco
(16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58,59,66 e 68).

O “teste da mulher” é um NOVO conceito para a detecção precoce do CCU,

um estojomais mais sensível,
de colheita mais
de fluido robusto e mais
cervicovaginal e cómodo, e que disponibiliza aos
ginecologistas
HPVs de alto-risco mais informação do que a maioria dos testes existentes no mercado.
.
 ANEXO I _ Outros serviços de detecção do HPV (*)

2. Detecção 3. Genotipagem 4. Detecção e/ou

1. MÉTODO de TODOS INDIVIDUALIZADA Genotipagem
(Marca CE) INDIVIDUALIZADA
os HPVs-AR 1 dos HPVs de HPVs-AR 1 de TODOS os HPVs genitais

PCR SIM
Detecta e genotipa de forma NÃO
(CE-IVD) SIM individualizada TODOS os
ALTO-RISCO HPVs-AR

PCR SIM
(CE-IVD) Detecta e genotipa de forma DETECTA a presença de TODOS
SIM individualizada TODOS os os HPVs conhecidos (50 tipos)
ALTO-RISCO PLUS HPVs-AR

PCR SIM DETECTA e GENOTIPA TODOS

(CE-IVD) SIM Detecta e genotipa de forma
+ individualizada TODOS os os HPVs conhecidos (50 tipos)
COMPLETE
Sequenciação HPVs-AR

(*) Poderão ser realizados em amostras colhidas através do “teste da mulher”, amostras de citologia cervicovaginal
colhidas em meio líquido, amostras armazenadas em parafina, etc.
(1) Grupo de HPVs de ALTO-RISCO (HPVs-AR) definidos pela IARC (HPVS 16,18,31,33,35,39,45,51,52,56,58, 59, 66 e 68)
 ANEXO II _ Serviços de detecção de infeções do trato
urogenital (*)

Uma única amostra, até 10 agentes infeciosos:

. (HS) Herpes Simplex 1 . (MG) Mycoplasma

Herpes Simplex 2,
. (CT) Chlamydia trachomatis,
. (NG) Neisseria gonorrhoeae,
. (UU) Ureaplasma
urealyticum,
genitalium,
. (MH) Mycoplasma hominis,
. (GV) Gardnerella vaginalis,
. (TV) Trichomonas vaginalis ,
. (TP) Treponema pallidum.

Tecnologia de PCR em tempo real

(*) Poderão ser realizados em amostras de citologia cervicovaginal colhidas em meio líquido, amostras armazenadas em
parafina, etc.
 ANEXO III _ FOLLOW-UP DOS RESULTADOS * informação para clínicos

I. MULHERES COM IDADE COMPREENDIDA ENTRE 30 – 50 ANOS

“TESTE DA MULHER”
RISCO MINIMO de desenvolver CCU (repetição do teste a 3 ANOS)
NEGATIVO (-)

RESULTADO :
NEGATIVO (-) RISCO MINIMO (Repetir 3 ANOS)
“TESTE DA MULHER”
Repetição 6 meses*
POSITIVO (+) RESULTADO:
POSITIVO (+) COLPOSCOPIA

II. MULHERES COM IDADE SUPERIOR A 50 ANOS

“TESTE DA MULHER”
RISCO MINIMO de desenvolver CCU (repetição do teste a 3 ANOS)
NEGATIVO (-)

RESULTADO :
NEGATIVO (-) RISCO MINIMO (Repetir 3 ANOS)
“TESTE DA MULHER”
Repetição 3 meses*
POSITIVO (+) RESULTADO:
POSITIVO (+) COLPOSCOPIA

* Quando acompanhado com teste de Papanicolau -> seguir guidelines SPG

ANEXO IV _ Guidelines SPG (Teste HPV + / Citologia
negativa) * informação para clínicos

Extraído de Consenso Clínico SPG 2011

 www.otestedamulher.com

Contactos:
Infogene, lda
IPN - Rua Pedro Nunes, 3030-199 Coimbra
Tel. +351 239 700 327/Fax. +351 239 700 301
E-mail geral@infogene.pt/Web-page ww.infogene.pt