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Manual Veterinrio de Colheita e Envio de Amostras
2010
Sade Pblica Veterinria
Centro Pan-Americano de Febre Aftosa
Manual Veterinrio de Colheita e Envio de Amostras
2010
permitida a reproduo parcial ou total desta obra, desde que citada a fonte. A responsabilidade pelos direitos autorais de textos e imagens do autor. Tiragem: 5.000 exemplares 1a edio. Ano 2010 Impresso no Brasil / Printed in Brazil Distribuio e informaes MINISTRIO DA AGRICULTURA, PECURIA E ABASTECIMENTO Departamento de Sade Animal Coordenao Geral de Combate a Doenas Esplanada dos Ministrios, Bloco D, Anexo A, 3 andar, Sala 301 CEP 70043-900 Braslia, DF www.agricultura.gov.br 0800 - 7041995 Este Manual foi realizado no mbito do Termo de Cooperao Tcnica (TCT) com o Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento (MAPA) e o Centro Pan-Americano de Febre Aftosa (PANAFTOSA) da Organizao Pan-Americana da Sade (OPAS)/ Organizao Mundial da Sade (OMS).
Crditos
Coordenao Guilherme Henrique Figueiredo Marques - DSA/SDA/MAPA Jlio Csar Augusto Pompei OPAS/PANAFTOSA Mnica Martini - OPAS/PANAFTOSA Reviso Tcnica Jlio Csar Augusto Pompei OPAS/PANAFTOSA Mnica Martini - OPAS/PANAFTOSA Gilfredo Darsie - OPAS/PANAFTOSA Guilherme Henrique Figueiredo Marques DSA/SDA/MAPA Ana Cristina Gonalves Pinto da Rocha CGAL/SDA/MAPA Elaborao: Grupo Tcnico Edviges Maristela Pituco IB/SP Josete Garcia Bersano IB/SP Claudia Del Fava IB/SP Claudia Pestana Ribeiro IB/SP Simone Miyashiro IB/SP Ricardo Spacagna Jordo IB/SP Adriana Hellmeister de Campos Nogueira IB/SP Antonio Guilherme Machado de Castro CAPTAA/SP Renato Lus Luciano CAPTAA/SP Ana Maria Iba Kanashiro CAPTAA/SP Ana Lcia S. P. Cardoso CAPTAA/SP Eliana Neire Castiglioni Tessari CAPTAA/SP rica Weinstein Teixeira APTA/SP Dejair Message UFV/MG Reviso Bibliogrfica Astrid Rocha Pimentel Colaborao IB/SP: Alessandra Figueiredo de Castro Nassar, Elenice Sequetin Cunha, Eliana De Stefano, Eliana Roxo, Eliana Scarcelli Pinheiro, Liria Hiromi Okuda, Margareth lide Genovez e Wilter Ricardo Russiano Vicente. MAPA: Jos Carlos de Souza CDA/SP: Armando Salvador da Silva (In memoriam) Departamentos de Clnica Veterinria e de Reproduo Animal da FMVZ/ USP
Manual veterinrio de colheita e envio de amostras: manual tcnico. Cooperao Tcnica MAPA/OPASPANAFTOSA para o Fortalecimento dos Programas de Sade Animal do Brasil. Rio de Janeiro: PANAFTOSA OPAS/OMS, 2010. 218p.: il. Color.; 15 cm. (Srie de Manuais Tcnicos, 13) ISSN 0101-6970 1. Colheita de amostras - manuais. 2. Doenas dos animais - diagnstico. I. Centro Pan-Americano de Febre Aftosa - OPAS/OMS. II. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. III. Ttulo. IV. Sries.
Apresentao
A Cooperao Tcnica entre o Centro Pan-Americano de Febre Aftosa e o Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento tem possibilitado aes efetivas para o fortalecimento dos Programas de Sade Animal do Brasil, investindo principalmente no aprimoramento das aes tcnicas e na valorizao dos prossionais envolvidos na manuteno do patrimnio representado pela Sanidade Animal. Este Manual Veterinrio de Colheita e Envio de Amostras foi elaborado para preencher uma lacuna na bibliograa especializada e sua proposta servir de guia para consulta rpida e objetiva por veterinrios de campo do servio ocial ou autnomos. Visa assim, aprimorar a qualidade da amostra colhida e assegurar sua correta conservao e envio, facilitando rede laboratorial a realizao de diagnsticos rpidos e conclusivos, no mbito dos Programas Nacionais de Sanidade Animal. nosso desejo que este Manual, alm de ser utilizado no campo por prossionais da medicina veterinria, seja tambm um valioso instrumento de capacitao, uso e referncia para os Servios de Sanidade Animal.
Jamil Gomes de Souza Departamento de Sade Animal - Diretor
Ottorino Cosivi Centro Pan-Americano de Febre Aftosa Diretor
Prefcio
O Manual Veterinrio de Colheita e Envio de Amostras foi elaborado de forma simples, prtica e com uma viso atualizada dos aspectos mais importantes da colheita de amostra para o diagnstico das principais doenas dos animais. Os autores deram especial nfase queles pontos que, com base em sua experincia, consideram de maior interesse, particularmente para os Programas de Sade Animal do Brasil. Em seus captulos, divididos de acordo com os aspectos de biossegurana e com a colheita de amostras para o diagnstico de doenas de ruminantes, equdeos, sudeos, aves e abelhas Apis mellifera, o manual pretende fornecer um apoio ao mdico veterinrio de campo quanto correta colheita de material da espcie afetada e ao sistema comprometido, para que as amostras colhidas de eleio no levem em considerao apenas a doena suspeita quando da realizao do exame clnico, o que impossibilitaria os diagnsticos diferenciais.
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O Manual no pretende esgotar todos os assuntos nele abordados, mas abre a possibilidade de uma discusso focada e atualizada e dar ensejo a futuras contribuies, revises e complementaes. Espera-se que os usurios deste Manual o apliquem em suas atividades no dia-a-dia, esclarecendo dvidas e promovendo mudanas que resultem em melhorias na ateno veterinria.
Agradecimentos
Expressamos nossos sinceros agradecimentos ao Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento (MAPA) pelo apoio na elaborao deste Manual e equipe de autores pelo excelente trabalho realizado.
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Sumrio
Captulo 1 Tabela de medidas de agulhas 46 47 48 50 52 52 54 56 58 60 62 64 66 68 68 70 72
Biossegurana
1. Equipamentos de proteo individual (EPI) 2. Equipamentos para conteno dos animais 3. Identicao do animal e da amostra 4. Descarte de material 5. Acondicionamento para remessa de amostras para diagnstico 6. Requisio de exames
15 16 18 20 22 24 28
Tubos para colheita de sangue Pele e mucosas Material para colheita de amostras para diagnstico de doenas de pele e mucosas Amostras para diagnstico de doenas de pele e mucosas Lquido e tecido epitelial vesicular Lquido esofgico-farngeo (LEF) Exsudato (secrees) Bipsia de pele e mucosa Raspado de pele Sangue
Captulo 2
Ruminantes, Equdeos e Sudeos

Sangue Sangue Colheita de sangue com sistema a vcuo Colheita de sangue com seringa e agulha Boas prticas de colheita para preveno da hemlise Boas prticas ps-colheita para preveno da hemlise
35 36 38 40 42 44 45 Sistema respiratrio Material para colheita de amostras para diagnstico de doenas do sistema respiratrio Amostras para diagnstico de doenas do sistema respiratrio Pulmo e linfonodos Secrees Sangue
Sistema gastrintestinal Material para colheita de amostras para diagnstico de doenas do sistema gastrintestinal Amostras para diagnstico de doenas do sistema gastrintestinal Contedo ruminal Fezes Alimentos para nutrio animal Sangue
74 76 78 78 80 82 84
Sistema circulatrio e linftico Material para colheita de amostras para diagnstico de doenas do sistema circulatrio e linftico Amostras para diagnstico de doenas do sistema circulatrio e linftico rgos - sistema nervoso central, fgado, bao, pulmo, rim, corao, linfonodos e intestino delgado e grosso Sangue capilar e venoso Sangue Sistema osteoarticular
108 110 112 112 116 118 120 122 124 124 126 128 130 132 132 134 138 142
Sistema reprodutor e urinrio Material para colheita de amostras para diagnstico de doenas do sistema reprodutor e urinrio Amostras para diagnstico de doenas do sistema reprodutor e urinrio Feto de at 2 Kg Feto e natimorto com mais de 2 Kg Placenta Smen Muco prepucial tcnica do suabe Muco prepucial tcnica do lavado prepucial Muco cervicovaginal Urina Sangue
86 88 90 90 92 94 96 98 100 102 104 106
Material para colheita de amostras para diagnstico de doenas do sistema osteoarticular Amostras para diagnstico de doenas do sistema osteoarticular Lquido sinovial Sangue Sistema nervoso central (SNC) Material para colheita de amostras para diagnstico de doenas do sistema nervoso central (SNC) Amostras para diagnstico de doenas do sistema nervoso central (SNC) SNC inteiro Pores do sistema nervoso central (SNC) Outros rgos - fgado, bao, pulmo, rim, corao, linfonodos, intestino delgado e grosso Sangue
Captulo 3
Captulo 4 145 146 148 150 150 154 158 160 162 164 166 168 170 172
Aves
Principais doenas que acometem as aves Material para colheita de amostras para diagnstico de doenas das aves Amostras para diagnstico de doenas das Aves Sangue (para obteno do soro) rgos Suabe de traquia Suabe de cloaca Suabe de arrasto - a) gaze ou esponja e b) prop Fundo de caixa Papel ou cepilho que forra a caixa de transportes de aves de 1 dia Fezes frescas Mecnio Ovos bicados
Abelhas Apis mellifera

Material para colheita de amostras para diagnstico de doenas de abelhas Apis mellifera Garantindo a segurana Reconhecendo as partes de uma colmeia Identicando os indivduos da colnia, clulas de operrias, clulas de zango e realeira Abrindo e inspecionando uma colmeia Fases do desenvolvimento das abelhas Diferentes anomalias na fase de cria Principais doenas, intoxicaes e parasitoses que afetam Crias de Abelhas Apis mellifera Amostras para diagnstico das principais doenas que afetam Crias de Abelhas Apis mellifera Amostra 1 Amostra 2 Amostra 3 Amostra 4 Principais doenas, intoxicaes e parasitoses que afetam Abelhas Adultas Apis mellifera Amostras para diagnstico das principais doenas que afetam Abelhas Adultas Apis mellifera Amostra 1 Amostra 2 Amostra 3 Amostra 4 Amostra 5
175
176 178 179 180 182 186 188 190 194 194 196 198 200 202 204 204 206 208 210 212 214
Bibliografia
Captulo 1
BIOSSEGURANA
Autores Edviges Maristela Pituco Ricardo Spacagna Jordo Adriana Hellmeister de Campos Nogueira Centro de P & D de Sanidade Animal Instituto Biolgico (APTA/SAA-SP) 14 15
Biossegurana um conjunto de procedimentos destinados a prevenir, controlar, reduzir ou eliminar riscos inerentes s atividades suscetveis de comprometer a sade humana, animal e o ambiente
Touca
culos
Luvas com o de ao
Mscara
1 - Equipamentos de proteo individual (EPI)

Utilizar vestimentas de proteo apropriadas de acordo com o risco, tais como macaco, avental ou cala e jaqueta impermeveis.
Luvas nitrilica - neoprex Luvas de ltex
Luvas tricotadas pigmentadas
Botas
Avental impermevel
Avental
Macaco
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2 - Equipamentos para conteno dos animais

Verifique com antecedncia se as instalaes e equipamentos esto disponveis, limpos e em boas condies de uso. Utilize equipamentos e materiais de boa qualidade.
Abre boca Imobilizador nasal tipo formiga Uma boa conteno pode ser obtida pelo uso de argola nasal
Cachimbo
Para prevenir acidentes e fazer uma boa colheita de amostras para diagnstico, muito importante que o animal esteja bem imobilizado. Isto deve ser feito preferencialmente no tronco de conteno. Muitas vezes necessrio o uso de peias, principalmente quando h risco de acidentes (com coices) ou quando os animais ficam inquietos.
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3 - Identicao do animal e da amostra

Os mtodos de identificao animal mais comuns so: tatuagem, brinco (visual ou eletrnico) e marcao a fogo.
Brincos
Brincos: aplique o brinco na parte central da orelha e entre as duas nervuras principais. O alicate aplicador deve ficar na posio vertical (em p), evite a posio horizontal (deitado).
A identificao da amostra comea com a identificao do animal. Essa etapa crucial para que no final do processo, seja garantida a rastreabilidade. No momento da colheita da amostra de cada animal, o nmero do animal dever ser conferido e anotado no rtulo do frasco e no formulrio de colheita. Na impossibilidade de se obter a identificao do animal, identificar o lote ou ncleo, a colmeia, entre outros.
Registrar a id enticao do animal no recipiente de colheita, prefer encialmente em rtulo de esparadrapo com caneta es ferogrca. Para substitui r essa forma de iden ticao, necessrio que a alternativa a ser empregada se ja previamente testada.
NOTA
Aplicador de brincos
Animal com brinco bem posicionado 20 21
4 - Descarte de material
Material perfuro-cortante Agulhas, lminas de bisturi, tubos quebrados, tubos de vidro contendo uido devem ser descartados em caixas coletoras prprias para material perfurocortante. Na falta dessas, utilizar recipientes de paredes rgidas com tampa (latas de leite em p ou similares).
Outros materiais Seringas, luvas, gorro, mscara, avental ou macaco descartvel, gaze, algodo e outros materiais potencialmente infectantes devem ser descartados em saco branco de lixo, devidamente identificado para substncia infectante.
NOTA
ndo os Os recipientes conte lmente infectantes resduos potencia s como devem ser sinalizado ados para Infectante e destin lar ou algo coleta de lixo hospita ndo-se as equivalente, respeita internacionais normas nacionais e e minimizar que tm por nalidad ntais, sanitrios riscos ambie e ocupacionais.
priedade, todos os Antes de sair da pro : na colheita, tais como materiais utilizados s), agulhas s (formiga sondas, imobilizadore ser desinfetados, icas e botas, devero metl micos ou fsicos, com desinfetantes qu po de contato e as observando-se o tem mais cada situao. Os de indicaes para ces, devero maca materiais, como os cos plsticos para ser colocados em sa o e lavagem. posterior desinfec
NOTA
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5 - Acondicionamento para remessa de amostras para diagnstico

O sistema de embalagem, inclusive para transporte terrestre, deve ser envasamento triplo: um recipiente primrio, uma embalagem secundria e uma embalagem externa obrigatoriamente rgida (embalagem terciria). 1 Passo Acondicionar o recipiente que contm a amostra (recipiente primrio), identificado de forma clara e legvel, em saco plstico vedado hermeticamente.
3 Passo Acondicionar dentro de outro recipiente resistente (embalagem secundria). Como alternativa de embalagem secundria, pode ser utilizada lata de leite em p ou de achocolatado, por exemplo.
2 Passo Envolver este conjunto em manta absorvente, prevenindo possveis vazamentos.
Importante: Deve-se realizar a desinfeco externa em todas as etapas do processo de acondicionamento da amostra, desde o recipiente primrio com a amostra, o saco plstico e a embalagem secundria at a caixa isotrmica
Se forem colo cados vrios recipientes pr imrios frge is em uma mes ma embalage m secundria, el es devem ser envolvidos in dividualmente ou separados de forma que se evite o contat o entre eles
NOTA
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4 Passo Acomodar o recipiente na caixa isotrmica (embalagem intermediria), que dever, por sua vez, ser colocada na embalagem terciria (externa). Utilizar gelo reciclvel em quantidade compatvel com o tamanho da amostra e o tempo para chegada ao laboratrio (como alternativa, garrafa pet bem fechada, com gua congelada). Preencher o espao vazio com enchimentos macios (ocos de isopor, jornal, papel toalha). Use caixas isotrmicas resistentes e em boas condies
NOTA
5 Passo Na parte externa da tampa da caixa isotrmica, afixar a requisio de exame, devidamente preenchida e colocada num saco plstico transparente. Fechar bem a caixa isotrmica e colocla dentro da embalagem terciria, que dever ser rotulada de acordo com as normas nacionais e internacionais. Em lados opostos, colocar a orientao de embalagem: Este lado para cima.
O transporte de amostras que tenham probabilidade insignicante de conter substncias infecciosas, como soro e sangue para inquritos soroepidemiolgicos ou que os agentes patognicos tenham sido neutralizados ou inativados de forma a no mais representar qualquer risco sade, no est sujeito a esta regulamentao, devendo apenas garantir que a embalagem primria seja estanque e a prova dgua. A embalagem secundria pode ser um saco plstico hermtico e a marca externa deve apenas conter a expresso Amostra Animal Isenta de Agente Infeccioso.
Para o transporte, as embala gens de material biolgico referente a espcime diagnstico devem ser iden ticadas com: Nome, endereo e telefone do remetente e do destinatrio Telefone para emergncias A marca UN 3373 colocad a na superfcie externa da embala gem terciria, de modo que seja fcil de ver e ler. A designao ocial de transporte Substncia Biolgica, categor ia B dever gurar ao lado da ma rca
NOTA
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6 - Requisio de exames Pontos importantes no preenchimento da Requisio de Exames

1 - Localizao da propriedade 1.1 Nome completo (sem abreviaes) e endereo do proprietrio do animal suspeito. 1.2 Nome completo da propriedade ou estabelecimento onde foi colhida a amostra. 1.3 Localizao que facilite o acesso propriedade citada. 2 - Identicao do remetente da amostra 2.1 Nome completo (sem abreviaes) e endereo do responsvel pelo encaminhamento da amostra. Dever constar um nmero de telefone para casos de emergncia. 2.2 O responsvel pelo preenchimento do formulrio e envio da amostra dever ser um prossional devidamente habilitado para trabalhar com materiais de risco biolgico. 3 - Descrio do animal suspeito, rebanho e da amostra 3.1 Informar a data da colheita, nome ou nmero do animal suspeito, idade, sexo, raa e espcie. 3.2 Preencher a nalidade do exame (ex. conrmao de diagnstico, movimentao, monitoramento). Em caso de conrmao de diagnstico, descrever quais os sinais clnicos apresentados pelo animal, e a data provvel de incio da doena e em caso de necropsia, descrever os achados mais signicativos. Para conrmao de diagnstico deve-se preencher uma requisio de exames para cada animal 3.3 Informar o nmero de animais existentes na propriedade, quantos animais apresentaram sinais clnicos semelhantes e quantos vieram a bito (informar vacinao, vermifugao). 3.4 Informar quais amostras foram remetidas e conservante utilizado. 4 - Informaes complementares Esse espao reservado para qualquer outra informao que o tcnico considere pertinente (suspeita de zoonoses informar se h pessoas envolvidas, etc.) 29
INFORMAES MNI
S PARA REMESSA MAS NECESSRIA
DE
DIAGNSTICO AMOSTRAS PAR A
Nome da Propriedade: Nome do Proprietrio: Endereo: CEP: Caixa Postal: Fone:
Cidade/Estado: e-mail: Celular: rinrio Dados do Mdico Vete E-mail:
Nome: Celular: Fone: do resultado: Endereo para envio Cidade/Estado: s CEP: Dados das Amostra [ ] central [ ] Sistema nervoso [ ] e pele osa [ ] Infeces de muc [ ] Sistemas stinais [ ] Infeces gastrinte afetados: [ ] diagnstico e [ ] Confirmao de [ ] vigilncia do Finalidade [ ] Movimentao exame: o/revalidao [ ] Requisito certifica
Infeces vasculares ares Infeces steo-articul Infeces do aparelho rio respirat Monitoramento _____ Outra:______________ ___
Tipo de Amostras: __________ [ ] Soro A [ ] Outro: ________ ____________ coagulante: [ ] EDT ____________ [ ] Sangue Total - Anti _________ leso/tecido_________ Especificar: sitio da [ ] Secreo: ________ [ ] Bipsia [ ] Smen [ ] Fezes _________ [ ] Contedo gstrico ________________ ne ________________ [ ] Placenta/cotildo [ ] rgos:_________ [ ] Fludo cavitrio [ ] Feto [ ] Embrio ________________ as ________________ [ ] Outr ________ ________________ Especificar:_________ entares: Informaes Complem : ) Informaes Clnicas cos mais significativos ente os achados clni (descrever objetivam s etc) os relevantes: Dados epidemiolgic ma doena infecciosa, pessoas envolvida (rea endmica de algu Diagnstico presuntiv o: o de colheita Formulrio detalhad Sexo Idade Espcie Tipo de amostra
Principal sistema afetado
Identificao da amostra
Identificao do animal
Data da colheita: eita: Responsvel pela colh
Data do envio:
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FORMULRIO NIC
ROLGICA A SNDROME NEU DE EXAMES PAR O DE REQUISIO - dezembro/2009) (UF) (verso atualizada N ________/____
2Registro
Profissional
1Responsvel
pela colheita da
amostra: envio: 3Responsvel pelo Endereo: Municpio/UF: E-mail:

1Proprietrio:
n nal Registro Profissio n Telefone: Fax:
Alguns pontos importantes no preenchimento da Requisio de Exames Para Sndrome Neurolgica

( ( ) )
2Propriedade:
3Coordenadas: 4Localizao:
Municpio/UF: ( Telefone: ( Fax:
) )
A - Identicao do remetente da amostra: Nome completo do responsvel pela colheita e/ou pelo envio da amostra com o n do registro prossional, caso seja veterinrio ocial, o n da matrcula e nome da instituio. B - Localizao da propriedade onde foi colhida a amostra: Nome completo do proprietrio do animal e da propriedade ou estabelecimento onde foi colhida a amostra. Se possvel, registrar as coordenadas da propriedade e localizao que facilite o acesso. C - Descrio do animal suspeito e do rebanho em que se encontrava: Marcar a espcie animal e no caso de animal silvestre especicar o nome vulgar. Marcar MH (morcego hematfago) e MNH (morcego no hematfago). Ruminante: colocar o local de origem da amostra no item 2 e preencher o item 5, referente a ingesto de protenas, concentrados, rao e suprimento mineral protico. Informar o rebanho existente, n de animais com sintomas clnicos e mortos, para animais de companhia ou silvestre desconsiderar essa informao. D - Aes na propriedade suspeita e os sinais clnicos apresentados. Colocar a origem da noticao, data da 1 visita e a data provvel do inicio da doena. E - Informaes sobre a colheita, acondicionamento e conservao da amostra Pode ser marcado mais de um quadrculo, desde que as amostras pertenam ao mesmo animal. Especicar as amostras encaminhadas, sempre quando vsceras/outros for marcado. F Observaes. Colocar outras informaes pertinentes, inclusive informando agresses a pessoas, caso tenham ocorrido. 31
E-mail:
1Espcie:
Ovina _______) Eqdea ra de origem: ____ Silvestres (cita do citar o pas MNH Animais bovino importa Bovdea (para Felina MH Suna Canina Caprina Hospital criao ___) de espcie: ________ Estabelecimento ________) icar: ____________ ruminante): F Outro (especif M amostra (para 2Local de origem da ______ Sexo: o de animais es Raa:______ Feiras/aglomera Idade:______mes veterinrio al: 3Identificao do anim fazenda gico ou na _____ Registro geneal ________________ a tria ular idade (par Cronologia den ____) 4Mtodo para estip icar: ____________ _________ Outro (especif Quando:_______ ruminante): Sim No ________________ da vida? Quais?__________ o em alguma fase Sim mortos (____) 5O animal ingeriu ra No doentes (_____) cies afetadas? Leptospirose _____) Havia outras esp Cinomose __ no rebanho (___ Clostridiose ________________ 6Nmero de animais: Raiva ____ Quando? foi vacinado Outras ________ 7O animal morto j lismo Botu __ para: o:____/____/__ Data da Notifica Vigilncia D Terceiro __ 1Origem da Proprietrio na: ____/____/__ l do incio da doe notificao: Data provve ____/____/____ 2Data da 1 visita: eriores dos membros post s (assinalar): Paralisia flcida cos apresentado riores 3Tipos de sinais clni alagem ped dos membros ante Movimento de Paralisia flcida Morte sbita portamental Convulses Alterao com Sialorria Depresso etria a/aerofobia Dism Fotofobi Agressividade Ataxia Tremores Midriase ta Tetania Paralisia, mas aler Nistagmo Opisttono Priapismo smos musculares Tenesmo Espa No Cegueira malo Apetite an Sacrificado: Sim te/sacrifcio): Incoordenao o incio at a mor is clnicos (desde __ __ % Durao dos sina Que percentual? No ______ horas Sim dos sinais se recuperaram Havia animais que No Sim clnicos? com animais direto de pessoas Houve contato suspeitos? Vsceras/Outras Medula falo E stra(s) : aminhada: Enc _______________ eita da(s) amo 1Tipo de amostra enc Quais?__________ Dia e hora da colh s __:___ ____/____/____ _____________ vel da morte: iado em: ________ Dia e hora prov Material env _ ________ ___/___/___ s __:_ o do material: colheita e a fixa Tempo entre a hora(s)
Observaes
____ Local/Data:______
/____/____ ____________,____ __________ ________________ ________________ mbo Assinatura e cari
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DE AMOSTRAS S PARA REMESSA MAS NECESSRIA INFORMAES MNI LHAS Apis mellifera DOENAS DE ABE DE PAR A DIAGNSTICO
Nome da Propriedade: de: Endereo da Proprieda (apicultor): Nome do Proprietrio Endereo: Cidade/Estado: CEP: e-mail: Caixa Postal: Celular: rinrio Fone: Dados do Mdico Vete Nome: Celular: Fone: do resultado: Endereo para envio Cidade/Estado: s CEP: Dados das Amostra colheita: cto no momento da colhidas e seu aspe Amostras Aspecto: [ ] Abelhas do alvado. de cria. Aspecto: [ ] Abelhas da rea . Aspecto: [ ] Abelhas do cho [ ] Crias. Aspecto: lizao na colmeia. [ ] Favo de mel. Loca ecificar: [ ] Outros dados. Esp eia Informaes da colm E-mail:
Pontos importantes no preenchimento da Requisio de Exames

1 - Localizao da propriedade 1.1 Nome da propriedade ou estabelecimento onde foi colhida a amostra. 1.2 Endereo da propriedade ou estabelecimento onde foi colhida a amostra (incluir localizao que facilite o acesso propriedade citada). 1.3 Nome completo (sem abreviaes) e endereo e telefone do proprietrio do apirio. 2 - Identicao do remetente da amostra 2.1 Nome completo (sem abreviaes), endereo e telefone do responsvel pelo encaminhamento da amostra. 3 - Dados das Amostras 3.1 Preencher um formulrio por colmeia. 3.2 Informar todos os tipos de amostras colhidas em cada colmeia, com as observaes pertinentes. No esquecer de indicar o local no interior da colmeia onde o pedao de favo de mel foi colhido. 4 - Informaes da colmeia 4.1 Caso o apicultor no adote marcao permanente nas colmeias, fazer marcao em cada uma das colmeias de onde foram colhidas as amostras. 5 - Informaes complementares 5.1 Detalhar o manejo de alimentao suplementar adotado pelo apicultor (incluindo poca de fornecimento s abelhas). 5.2 Caso o apicultor pratique apicultura migratria, indicar os locais para os quais as colmeias so deslocadas em cada poca do ano. 5.3 Informar se outros apicultores tm colmeias na mesma propriedade. 5.4 Utilizar o verso do formulrio para outras observaes que considerar importantes e no contempladas pelos itens mencionados (ex.: histrico do problema etc.) 33
eia: identificao aqui) Identificao da colm de forma permanente e escreva essa (identifique a colmeia Condio da colmeia: [ ] Forte. Obs: [ ] Mdia. Obs: [ ] Fraca. Obs: es. [ ] Outras condi
ementar Adota alimentao supl
atr Pratica apicultura migr visitada. eias na propriedade Nmero total de colm das, etc.): es Clnicas: ero de colmeias afeta Informa comportamento, nm (sintomas observados, o de colheita Formulrio detalhad
Identificao da colm eia
entares Informaes complem arar a origem. )? Especificar e decl (energtica ou protica a do ano? Em que poc ia? Para que local?
Identificao da amo
stra
Tipo de amostra
Data da colheita: eita: Responsvel pela colh
Data do envio:
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Captulo 2
RUMINANTES, EQUDEOS E SUDEOS
Autores Edviges Maristela Pituco Claudia Del Fava Claudia Pestana Ribeiro Josete Garcia Bersano Simone Miyashiro Centro de P & D de Sanidade Animal Instituto Biolgico (APTA/SAA-SP) 34 35
Sangue
O sangue representa cerca de 8% do peso corporal de um animal. As anlises do sangue so importante apoio ao diagnstico clnico. Pode ser colhido com seringa e agulha e transferido para recipientes de diferentes capacidades, com ou sem anticoagulante, ou colhido em tubos a vcuo que, por serem hermticos, garantem a esterilidade da amostra, o que desejvel em toda puno venosa. Para serem representativas, as amostras de sangue devem ter sua composio e integridade mantidas durante as fases pr-analticas de colheita, manuseio, transporte e eventual armazenagem. Antes da colheita de sangue para a realizao de exames laboratoriais, importante conhecer, controlar e, se possvel, evitar algumas variveis que podem interferir na exatido dos resultados. Classicamente, so referidas como condies pr-analticas variao na dieta e uso de medicamentos. Outros aspectos, como o uso de gel separador, anticoagulantes e conservantes e a hemlise podem tambm ser causa de variao dos resultados.
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1. Material
Sangue
a) Obteno de soro
Colher o sangue em tubo sem anticoagulante; manter o tubo inclinado em temperatura ambiente at o sangue coagular e retrair o cogulo, exsudando o soro (30 a 60 min). Transferir o soro para outro tubo (tampa com rosca ou tipo Eppendorf). Se for utilizado tubo com gel separador, ser necessrio centrifugar o sangue no mnimo 30 minutos aps a colheita e no mximo 2 horas e enviar o soro no prprio tubo.
b) Sangue total
O sangue dever ser colhido e enviado em tubo com anticoagulante (EDTA k2). Homogeneizar suavemente, invertendo o tubo (cerca de 6 vezes)
2. Onde colher
a) Veia jugular; b) Veia coccgea; c) Veia mamria; e d) em sunos, veia
cava cranial
3. Como colher
Utilizar sistema a vcuo ou seringa e agulha
a) Pesquisa de anticorpos
5. Exames b) Pesquisa direta
do agente
4. Recipiente e quantidade
sem anticoagulante: capacidade 10 mL.
a) Tubo de ensaio
b) Tubo de ensaio
com EDTA K2: capacidade 5 mL
6. Temperatura da amostra para transporte

a e b) Refrigerada (+2C a +8C)
7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio

At 48 horas
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38
Colheita de sangue com Sistema a Vcuo

PASSO A PASSO
1. Rosquear a agulha no adaptador. Retirar a capa protetora da agulha somente no momento da puno; (guras a e b) 2. Realizar antissepsia do local escolhido para puno; passar algodo embebido em lcool a 70%, na direo do pelo; 3. Retirar a capa da agulha e fazer o garrote; 4. Puncionar a veia; (gura c) 5. Introduzir o tubo no adaptador, pressionando-o at o limite; (guras d e e) 6. Esperar o sangue parar de uir para dentro do tubo, s ento retirar o tubo, assegurando a devida proporo sangue/anticoagulante; (gura f) 7. Soltar o garrote e s depois retirar o tubo e em seguida a agulha; 8. Separar a agulha do adaptador e descart-la em recipiente para perfuro-cortantes.
c d
e f
40
41
Colheita de sangue com Seringa e Agulha

PASSO A PASSO
1. Encaixar a agulha na seringa, sem retirar a capa protetora. Certicar-se de que a agulha esteja bem encaixada; (gura a) 2. Movimentar o mbolo da seringa (para frente e para trs) para retirar o ar; (gura b) 3. Fazer a antissepsia do local escolhido para puno; passar algodo embebido em lcool a 70%, na direo do pelo; 4. Retirar a capa da agulha e fazer o garrote; 5. Introduzir a agulha na veia e puxar o mbolo da seringa lentamente, para que o sangue possa uir; (gura c) 6. Colher aproximadamente 10 mL de sangue; 7. Soltar o garrote aps a venopuno; 8. Separar a agulha da seringa. Descartar a agulha em recipiente para perfuro-cortantes (gura d). Lembre-se: Nunca reencapar as agulhas. 9. Transferir o sangue da seringa para um tubo de ensaio com ou sem anticoagulante. Para evitar hemlise, o sangue deve uir lentamente pela parede do tubo; (gura e) 10. Descartar a seringa em saco plstico apropriado ou no mesmo recipiente em que foi descartada a agulha.
42
d e
43
BOAS PRTICAS DE COLHEITA PARA PREVENO DA HEMLISE

Antes de iniciar a puno, deixar que o lcool utilizado na antissepsia seque. Evitar usar agulhas de menor calibre. No colher sangue de rea com hematoma ou equimose. Em colheitas de sangue a vcuo, puncionar a veia do animal com o bisel voltado para cima. Perfurar a veia com a agulha em um ngulo oblquo de insero, de 30 graus ou menos. Esse procedimento visa a prevenir o choque direto do sangue na parede do tubo, o que pode hemolisar a amostra, e tambm a evitar o reuxo do sangue do tubo para a veia do animal. Esperar o sangue parar de uir para dentro do tubo, antes de trocar o tubo por outro, assegurando a devida proporo sangue/ anticoagulante. Tubos com anticoagulante com volume insuciente ou com excesso de sangue alteram a proporo correta de sangue/aditivo, podendo levar a hemlise e a resultados incorretos. Em colheitas com seringa, vericar se a agulha est bem adaptada, a m de evitar a formao de espuma; no puxar o mbolo da seringa com muita fora. Descartar a agulha, passar o sangue, fazendo-o deslizar cuidadosamente pela parede do tubo e cuidando para que no haja contaminao do bico da seringa com o anticoagulante ou ativador de cogulo contido no tubo. No espetar a agulha na tampa do tubo, para transferncia do sangue da seringa para o tubo, porque pode ocorrer uma presso positiva, o que provoca, alm da hemlise, o deslocamento da rolha do tubo.
44
BOAS PRTICAS PS-COLHEITA PARA PREVENO DA HEMLISE

O sangue colhido no deve car exposto a temperaturas muito elevadas ou mesmo exposio direta luz, para evitar hemlise e/ou degradao. Homogeneizar a amostra de sangue com anticoagulante suavemente por inverso de 5 a 10 vezes, no agitar o tubo. O sangue total nunca deve ser congelado, se necessrio estocar, manter refrigerado, lembrando que dever chegar no laboratrio dentro de 48 horas. O soro poder ser congelado a - 20C, por at um ms. Nunca congelar soro com cogulo em tubo sem gel separador. No deixar o sangue em contato direto com gelo. No centrifugar a amostra de sangue em tubo para obteno de soro antes do trmino da retrao do cogulo, pois a formao do cogulo ainda no est completa, podendo levar ruptura celular. Quando utilizar um tubo primrio com gel separador, a separao (centrifugao) do soro deve ser efetuada dentro de no mnimo 30 minutos e no mximo 2 horas aps a colheita. Tubos com gel separador no podem ser centrifugados em baixas temperaturas, uma vez que as propriedades de uxo do gel relacionam-se com a temperatura. A formao da barreira de gel pode ser comprometida caso o tubo seja resfriado antes ou durante a centrifugao. Para otimizar o uxo e evitar aquecimento, ajustar as centrfugas refrigeradas a 25 C. No usar o freio da centrfuga com o intuito de interromper subitamente a centrifugao dos tubos, pois esta brusca interrupo pode provocar hemlise.
45
TABELA DE MEDIDAS DE AGULHAS

Mtrico (mm) Gauge/ Polegadas Cor do Canho
A cor do canho dene o dimetro da agulha
TUBOS COM ANTICOAGULANTE

EDTA K2 DIPOTSSICO EDTA K2 DIPOTSSICO COM GEL SEPARADOR HEPARINA
TUBOS SEM ANTICOAGULANTE

TUBO TUBO SILICONIZADO SILICONIZADO COM GEL SEPARADOR
1,60 X 40
16G 1 1/2
BRANCO
Tampa verde
Tampa vermelha
Tampa branca
1,00 X 25 1,00 X 30
19G 1 19G 1 1/4
TUBOS PARA COLHEITA DE SANGUE
CREME
TUBOS
1,20 X 25 1,20 X 40
18G 1 18G 1 1/2
0,70 X 25 0,70 X 30
22G 1 22G 1 1/4
PRETO
Centrifugao
Centrifugao
PREPARO
0,80 X 25 0,80 X 30 0,80 X 40
21G 1 21G 1 1/4 21G 1 1/2
0,45 X 13
26G 1/2
CASTANHO
Pesquisas de anticorpos
Cogulo Soro
0,55 X 20
24G 3/4
0,38 X 13
27 5G 1/2
Indicaes de uso Puno venosa: Branca bovinos e bubalinos; Rosa bovinos, equdeos, sudeos e pequenos ruminantes; Creme pequenos ruminantes; Verde pequenos ruminantes Puno articular: verde, violeta, castanho e cinza; Aves preto e verde
46
Pesquisas de anticorpos
Exames Bioqumicos e toxicolgicos
Isolamento Biologia Molecular
Isolamento Biologia Molecular
CINZA
EXAMES
Cogulo Soro separado por Gel
Sangue total Plasma Anel de Leuccitos
Sangue total Plasma Anel de Leuccitos
PRODUTO FINAL
VIOLETA
Sangue total Plasma
Centrifugao (1500-2000g/10min), no mnimo 30 minutos e no mximo 2 horas aps a colheita
Repouso 30 a 60 min.
Centrifugao No mximo em at 2 horas aps a colheita
VERDE
Tampa amarela
Tampa lils
ROSA
47
Pele e mucosas
A etiologia das enfermidades que afetam a pele muito variada, incluindo, entre outras, causas parasitrias, bacterianas, fngicas, virais, neoplsicas, nutricionais, txicas, fsicas, congnitas e genticas. O diagnstico no to fcil, pois a pele est exposta a fatores externos (contaminao e efeito do sol) que modicam substancialmente o aspecto e a evoluo das leses. Das doenas que acometem as mucosas, a principal a estomatite, que abrange o complexo de enfermidades vesiculares, tais como a febre aftosa, a estomatite vesicular e a varola bovina, que tm em comum a propriedade de provocar nas espcies afetadas a formao de vesculas contendo lquido incolor ou ligeiramente sanguinolento, tpico dessas doenas. O diagnstico se baseia em informaes clnicas, epidemiolgicas e laboratoriais. O diagnstico deve ter sempre um carter diferencial. Os materiais de eleio para diagnstico so fragmentos de epitlio e de mucosas e exsudato (lquido vesicular) provenientes de leses linguais, bucais, podais ou de bere. Alm disso, para pesquisa direta de agente em possveis portadores do vrus de febre aftosa, utiliza-se material esofgico-farngeo. A pesquisa de anticorpos em
soro tem sido utilizada para demonstrar ausncia de infeco, determinar a prevalncia em estudos soroepidemiolgicos, avaliar a resposta humoral aps vacinao e desao para os programas de erradicao e vigilncia. Em raras situaes, a sorologia pode ser utilizada como ferramenta de diagnstico denitivo.
Principais doenas de pele e mucosas e espcies acometidas

ESPCIES ACOMETIDAS DOENAS Febre aftosa Estomatite vesicular Lngua azul Varola/vaccnia (orthopoxvirus) Pseudovarola Ectima contagioso Rinotraqueite infecciosa bovina/ vulvo vaginite postular infecciosa Diarria viral bovina Doena Vesicular do suno Exantema Vesicular do suno X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X -
48
49
Material para colheita de amostras para diagnstico de doenas de pele e mucosas

Tubos (Tipo Falcon) com meio conservante Coletor universal com meio conservante
Porta-lminas Punch para bipsia Luvas Tubo tipo KMA (tampa com rosca) Microtubos tipo Eppendorf Tubos com tampa com rosca Lmina de bisturi Papel-toalha Pina Cabo de bisturi Tesoura cirrgica
Suabes e meios conservantes para transporte
Lmina de bisturi
Coletor universal
Agulha para colheita de sangue a vcuo
Lmina para microscopia
Tubos a vcuo para colheita de sangue, com gel separador, sem e com anticoagulante 50
Coletor de raspado esofgico-farngeo (copo de Probang)
Sistema para colheita de sangue a vcuo
Seringa e agulhas 51
Amostras para diagnstico de doenas de Pele e Mucosas

1. Material
Lquido e tecido epitelial vesicular
a) Todo o contedo
da vescula
3. Quantidade
b) Cerca de 2 g de
epitlio (1 a 2 cm2)
a) Nenhum
b) Lquido de Valle com pH 7,4 a 7,8; ou
4. Meio
2. Como colher
Meio Eagle 2 vezes concentrado, com antibitico e pH 7,2-7,6
a) Lquido Vesicular.
Caso as vesculas estejam ntegras (no rompidas), colher o lquido vesicular, com o auxlio de seringa e agulha estril
Colhendo lquido ves icular de um bovino afetado po r febre aftosa
a) Tubo de ensaio
estril com tampa com rosca (5 mL)
b) Tecido Epitelial Vesicular.
b) Tubo de ensaio estril contendo meio apropriado em quantidade suciente para que as amostras quem submersas
5. Recipiente
Colher, com tesoura ou bisturi e pina estril, fragmentos de epitlio vesicular, incluindo as bordas das leses das regies oral, nasal, podal e de glndula mamria
NOTA

Refrigerada (+2C a +8C)
Extensa leso de boca em um bovino afetado por febre aftosa

No caso de suspeita de doe na vesicular, o servio ocial dev er ser imediatamente informa do. As amostras s devem ser colh idas por prossionais do servio ocial e enviadas sob condies de segurana para laboratrios autorizados, para prevenir a disseminao da doena.
IMPORTANTE
As patas e beres, antes da colheita, devem ser lavados com gua limpa para remoo de sujeiras (no utilizar nenhum tipo de sabo ou antissptico)
At 48 horas
8. Exames
Pesquisa direta do agente
52
pao Leses no es o de um bovin interdigital
Leses no te to de vaca, pr ovocadas pelo vrus da varola bovin a
53
1. Material
Lquido esofgico farngeo (LEF)
Mucosa da regio farngea e anterior do esfago
2. Onde colher
Introduo do coletor na boca do
animal
trizes as dire NOTA o com e sade ord ial De ac gramas d mater os pro colheita de er d v a l, de anima o-farngeo te pelo sofgic ada somen ial. e z Oc ali ser re Veterinrio o Servi
4. Quantidade
Volume de muco (ideal: 15 mL, mnimo: 5 mL) diludo em igual volume de meio
3. Como colher
5. Meio
Earle 2 vezes concentrado, com antibitico e pH 7,4-7,6
Antes da colheita, os animais devero permanecer em jejum, se possvel, por um perodo de 12 horas; Uma hora antes da colheita, Realizao dos movimentos administrar gua para eliminar para a colheita do LEF eventuais restos alimentares; Colher as amostras de LEF por meio de coletores (copo Probang) previamente esterilizados, utilizando um para cada animal. Se no houver um nmero suciente de coletores, realizar a lavagem em gua limpa e desinfetar em gua fervente antes de colher amostra em outro animal e assim sucessivamente. Transferi Introduzir o coletor por sobre a lngua do animal conte r o do do pressionando-o levemente na glote at o copo ser copo coletor engolido pelo animal (certicar que o coletor no para frasco de esteja na traquia, situao em que o animal ir boca larga tossir, tentando expelir o objeto); Realizar o raspado da mucosa esofgica-farngea, fazendo movimentos suaves com o coletor (at 5 vezes) e retir-lo com cuidado para no derramar o contedo; Transferir o material LEF para frasco de boca larga e adicionar uma quantidade igual de Meio Earle 2X; Fechar o frasco, agitar e realizar a desinfecao externa.
54
6. Recipiente
Frasco de boca larga, com tampa de rosca, esterilizado

FOTO: LUS DAS
Refrigerada (+2C a +8C); ou Congelada (-20C)

Amostras para ensaios com ns legais devem ser lacradas ou seladas de modo que o acesso a elas seja possvel somente pelo rompimento do lacre ou selo .
NOTA
At 48 horas
9. Exames
Pesquisa direta do agente (Febre Aftosa)
55
1. Material
Exsudato (secrees)
rio Solicitar ao laborat io apropriado. o me
NOTA
4. Exames
a) Pesquisa de vrus b) Pesquisa de bactrias
2. Onde colher
Mucosas oral, nasal ou outro tecido afetado por um processo inamatrio
Meios conservantes para transporte da amostra (Tioglicolato de sdio, BHI e Eagle)
5. Meio
a) Eagle 2 vezes concentrado, com antibitico e 10% Soro Fetal Bovino (pH 7,4-7,6) b) Tioglicolato
de sdio
3. Como colher
6. Recipiente
Tubo de ensaio esterilizado
Colher com suabe estril, friccionando energicamente o local
Acondicionando suabe em meio Tioglicolato de sdio
7. Temperatura da amostra
para transporte

NOTA
Utilizar um suabe para cada amostra.

56

At 48 horas
57
1. Material
Bipsia de pele e mucosa
a e b) Fragmentos com, no mnimo, 0,5 cm de dimetro por 0,3 cm de espessura
5. Quantidade
2. Onde colher
De preferncia na rea de transio com e sem leso b
a) 3 mL de Eagle
6. Meio
b) Formol tamponado 10% (Volume de formol, pelo menos, 10 vezes maior que o volume de tecido a ser xado)
3. Como colher
Com punch, tesoura, pina e bisturi c
ou soluo salina siolgica - (NaCl 0,9%) estril
a) Tubo de ensaio esterilizado,

capacidade de acordo com o tamanho do fragmento
de acordo com o tamanho do fragmento
b) Frasco, capacidade
7. Recipiente
Realizar tricotomia e antissepsia; a. Inserir o punch, gir-lo e retirar fragmento; b. Com auxlio de pina e tesoura, cortar o fragmento para a bipsia; c. Fragmento extrado; d. Submergir um fragmento em meio Eagle (ou em soluo salina); e e. outro fragmento em formol 10%.

a) Refrigerada (+2C a +8C)
d e
b) Ambiente ou Refrigerada (+2C a +8C). Nunca congelar

a) At 48 horas b) Remeter no mesmo tempo que as amostras refrigeradas. Os fragmentos em soluo de formol 10%, mesmo no completamente xados, podem ser enviados ao laboratrio.
59
a) Pesquisa direta do agente

58
4. Exames
b) Histopatolgico
1. Material
Raspado de pele
5. Meio
Nenhum
6. Recipiente
Coletor universal
2. Onde colher
Na periferia das reas lesionadas
Nonononon nonon non
3. Como colher
Fazer o raspado profundo com lmina de bisturi

8. Tempo crtico 4. Quantidade

Cerca de 1 g
para chegada ao laboratrio

At 48 horas
9. Exames
60 61
1. Material
Sangue
a) Obteno de soro
b) Sangue total
2. Onde colher
cava cranial
3. Como colher
b) Pesquisa direta
5. Exames
do agente
a) Tubo de ensaio
b) Tubo de ensaio


At 48 horas
63
62
Sistema respiratrio
As doenas respiratrias so multifatoriais e provocam mortalidade, especialmente em animais jovens. Alteraes climticas, manejo zootcnico e instalaes inadequadas estressam e debilitam o animal, predispondo-o a infeces. O diagnstico deve basear-se no conjunto de informaes, tanto clnicas quanto epidemiolgicas e na conrmao laboratorial. O material clnico de eleio para o diagnstico diferencial deve incluir tecido pulmonar e linfonodos regionais e secrees respiratrias e oculares. O soro sanguneo pode auxiliar no diagnstico.
Principais doenas do sistema respiratrio e espcies acometidas

ESPCIES ACOMETIDAS DOENAS Tuberculose (Mycobacterium bovis) e outras micobacterioses Linfadenite caseosa Pleuropneumonia contagiosa (Micoplasmose, Actinobacilose) Pneumonia causada por agentes piognicos Doena de Aujeszky Rinite atrca (Bordetella bronchiseptica e Pasteurella multocida) Inuenza Vrus Sincicial Respiratrio Mormo Rinopneumonite equina Arterite viral equina Maedi-Visna
X X
X X
X X X
X X X
X X
X X X -
X X X X -
X X X
X X -
X X X X X 65
64
Material para colheita de amostras para diagnstico de doenas do sistema respiratrio
Tbua para corte de rgos
Coletor universal estril
Pedra para aar facas Meios para transporte de amostras (BHI, A3XB, Eagle) Tubos a vcuo para colheita de sangue, com gel separador, sem e com anticoagulante Facas
Tesoura para destrinchar ossos
Tesouras cirrgicas
Microtubos tipo Eppendorf
Tubos com tampa com rosca
Suabe estril (Comercial) Tubo tipo KMA (tampa com rosca)
Pina dente de rato Cabo de bisturi Lmina de bisturi Cary Blair 67
Sistema para colheita de sangue a vcuo 66
Amostras para diagnstico de doenas do sistema respiratrio

1. Material
Pulmo e linfonodos
a) Fragmentos de 20 g e, pelo b) Fragmentos de 3x1x1 cm menos, um linfonodo regional de cada rgo
5. Quantidade
a) Nenhum
2. Onde colher
rgo acometido e linfonodos regionais
b) Formol tamponado 10% (volume de formol, pelo menos 10 vezes maior que o volume de tecido a ser xado)
6. Meio
3. Como colher
Com tesoura e pina estril, colher fragmentos das reas com leses (caseosa, purulenta, marmorizada, outras)
NOTA
Leses caseosas em pulmo de animal acometido por tuberculose
a) Coletor
universal estril
b) Frasco, capacidade de acordo

com o tamanho do fragmento
7. Recipiente

a) Refrigerada
(+2C a +8C)
b) Ambiente ou Refrigerada (+2C a +8C)
Fragmento de leso o material de eleio para diagnstico de tuberculose.

a) At b) Histopatolgico
48 horas refrigerada. Os fragmentos em soluo de formol 10%, mesmo no completamente xados, podem ser enviados ao laboratrio
4. Exames
68
b) Remeter no mesmo tempo que a amostra
a) Pesquisa direta do agente
69
1. Material
Secrees
5. Meio
a) Submergir o suabe
em 2 mL de Eagle 2 vezes concentrado, com antibitico a
Meio Eagle
2. Onde colher
Narinas
b) Submergir o suabe em 2 mL de: A3XB para Mycoplasma spp; e Tioglicolato de sdio, BHI ou Cary Blair para outras bactrias
3. Como colher
Limpar o local com gaze estril umedecida em soluo siolgica, retirando crosta, se houver. Colher com suabe estril, friccionando energicamente o local, utilizando um suabe para cada narina. Submergir o suabe no meio para transporte indicado.
b Meio BHI
6. Recipiente
Tubo de ensaio estril com meio apropriado
para transporte
4. Exames
a) Pesquisa de vrus
70
b) Pesquisa de bactrias
Soro sanguneo pode auxiliar no diagnstico de algumas doe nas respiratrias; por esse motivo, enviar o soro junto com o material par a pesquisa direta do agente.
NOTA
8. Tempo crtico
At 48 horas
71
1. Material
Sangue
a) Obteno de soro
b) Sangue total
2. Onde colher
cava cranial
3. Como colher
do agente
a) Tubo de ensaio
b) Tubo de ensaio


At 48 horas
73
72
Sistema gastrintestinal
Dada a importncia da alimentao nos animais de produo e a alta incidncia de problemas com ela relacionados, faz-se necessria uma avaliao do manejo e das instalaes, assim como uma inspeo dos alimentos, armazns e reas de pastoreio. As caractersticas da alimentao e seu manejo podem ser a origem de muitos problemas, principalmente digestivos e metablicos. Para pesquisar a causa do distrbio, alm do exame clnico geral, testes complementares de amostras de alimento, do suco ruminal, do sangue e/ou das fezes so de grande valor no reconhecimento e na diferenciao de doenas dos rgos digestivos.
Principais doenas do sistema gastrintestinal e espcies acometidas

ESPCIES ACOMETIDAS
DOENAS TGE Gastrenterite Transmissvel Enterites bacterianas (Colibacilose, salmonelose, campilobacteriose) Disenteria suna (Brachyspira hyodysenteriae) Enterotoxemia (Clostridium perfringens) Isosporose (Isospora suis) Verminoses ou Helmintoses Rotavirose em animais jovens Diarria Viral Bovina Febre Catarral Maligna Intoxicaes X X X X X X
X X X X X X
X X X X X X
X X X X
X X X X
X X X X
74
75
Material para colheita de amostras para diagnstico de doenas do sistema gastrintestinal
Saco plstico estril
Luvas de palpao
Tubos a vcuo para colheita de sangue, com gel separador, sem e com anticoagulante (EDTA e heparina) Adaptadores para colheita de sangue a vcuo
Tubo tipo KMA (tampa com rosca)
Tubo com tampa com rosca
Luvas de ltex
Sonda gstrica
Seringa e agulhas esterilizadas 76 77
Amostras para diagnstico de doenas do sistema gastrintestinal

1. Material
Contedo ruminal
3. Quantidade
Cerca de 10 mL
4. Meio
Nenhum
2. Como colher
Por sonda gstrica ou ruminocentese Introduzir a sonda gstrica via oral e retirar o lquido ruminal, criando vcuo por um sistema manual ou bomba eltrica. No caso de ruminocentese, a puno feita no abdmen esquerdo do animal, no ponto mdio entre a ltima costela e articulao femorotibiopatelar. Fazer tricotomia e antissepsia numa rea de 5cm x 5cm. Fazer aplicao subcutnea de 2 a 3 mL de lidocana 2%. Introduzir a cnula ventrocranial e aspirar o contedo com seringa de 20 mL. Se ocorrer obstruo da agulha, injetar ar com outra seringa. Obter de 3 a 10 mL de lquido ruminal. Antes de retirar a agulha, introduzir 5 mL de soluo siolgica estril, para evitar aderncia. Finalmente, retirar seringa e agulha, de forma suave e conjunta.
5. Recipiente
Frasco estril
6. Temperatura
da amostra para transporte
Refrigerada (+2C a +8C) ou Congelada (-20C)

NOTA
Resfriar ou congelar o mais rpido possvel aps a colheita fazendo chegar ao lab oratrio, nessas condies.
7. Tempo crtico

At 48 horas
8. Exames
Toxicolgicos
78 79
1. Material
Fezes
3. Quantidade
20 g de fezes por animal. No caso de rebanhos, colher 10 a 15 amostras de cada faixa etria. Utilizar um frasco por animal.
2. Como colher
Diretamente do reto (utilizando luva) ou da poro central do bolo fecal (utilizando esptula), imediatamente aps defecao
4. Meio
Nenhum
5. Recipiente
NOTA

Em caso de material de necrps ia, enviar um fragmento de ala intestinal com o contedo fecal, amarran do as extremidades com barbante. Alm disso, enviar fragmentos de fgado e rim, uma parte refrigera da para exames toxicolgicos e outra parte em formol a 10% para exa mes histopatolgicos. A identicao de substncia txica nestes rgos pode auxiliar no diagnstico da causa morte.
80

At 48 horas
8. Exames
81
1. Material
Alimentos para nutrio animal
4. Quantidade
a) 1 kg para b) 2 kg para alimentos volumosos, raes, gros e como silagem, feno e para alimentos concentrados, que tem tendncia separao como entre outros raes e concentrados contendo uria, alimentos. farelo de algodo, entre outros produtos.
2. O que colher
Rao comercial, gros, forragens frescas e conservadas (silagem e feno), restos de cultura, palhadas e suplementos
NOTA
3. Como colher
Retirar amostras parciais de cada alimento a ser analisado, colhidas em diferentes pontos do local de interesse: campo, armazm, sacarias, cocho, silos etc. Dessa amostra mdia, aps homogeneizao, retirar uma nica amostra, que deve ser representativa da mdia do material a ser analisado.
NOTA
Efetuar as colheitas em ente vrios pontos, principalm para produtos que no apresentam uma a ou que homogeneidade perfeit cia separao. tenham tendn
5. Recipiente
Sacos plsticos resistentes para produtos slidos Frascos de polietileno para produtos lquidos (melao, gordura)
um nico Nunca retirar a amostra de a pois no ser representativ ponto, cluses quanto e no permitir con qualidade do produto.

a) Ambiente (material seco) b) Refrigerada (+2C a +8C) para material verde ou mido

At 48 horas
8. Exames
Anlise qumica e pesquisa de agente (toxinas e bactrias, entre outros agentes)
82 83
1. Material
Sangue
a) Obteno de soro
b e c) Sangue total
O sangue dever ser colhido e enviado em tubo com anticoagulante (EDTA ou heparina). Homogeneizar suavemente, invertendo o tubo (cerca de 6 vezes)
2. Onde colher
cava cranial
3. Como colher
EDTA
Heparina
a) Tubo de ensaio sem anticoagulante: capacidade 10 mL b) Tubo de ensaio com EDTA K2: capacidade 5 mL c) Tubo de ensaio com heparina: capacidade de 5 a 10 mL
a) Pesquisa
de anticorpos
b) Pesquisa direta
do agente
5. Exames c) Toxicolgicos
e bioqumicos

a, b e c) Refrigerada (+2C a +8C)

At 48 horas
85
84
Sistema reprodutor e urinrio

Os problemas reprodutivos esto associados a repetio de cio, infertilidade, descarte prematuro de reprodutores, abortamento, mumicao fetal, nascimento de bezerros com malformao e fracos, entre outros fatores. A etiologia das doenas da reproduo multifatorial, podendo a causa ser infecciosa ou no infecciosa, e requer diagnstico diferencial para identicao do agente. Para tanto, devem ser examinadas prioritariamente amostras de tecidos fetais refrigerados e xadas em formol, secrees cervicovaginal e prepucial. A pesquisa de anticorpos no soro sanguneo pode auxiliar no diagnstico.
Principais doenas do sistema reprodutor e urinrio e espcies acometidas

ESPCIES ACOMETIDAS DOENAS Brucelose Leptospirose Campilobacteriose Genital Micoplasmose Neosporose Toxoplasmose Tricomonase Genital Bovina Rinotraquete infecciosa bovina/ Vulvo vaginite postular infecciosa Diarria viral bovina Parvovirose Doena de Aujeszky Peste suna clssica Sndrome Reprodutiva e Respiratria dos Sunos (SRRS) Circovirose Clamidiose Arterite viral equina Aborto equino por herpesvirus X X X X X
(raro)
X X X X X X X X X -
X X X X X X -
X X X X X -
X X X X X X X 87
X X X X -
86
Material para colheita de amostras para diagnstico de doenas do sistema reprodutor e urinrio
Coletor universal estril Saco plstico Tbua para corte de rgos
Suabe estril
Suabe estril Pipeta de inseminao articial Pedra para aar facas Facas Agulha para colheita de sangue a vcuo Tubo com tampa com rosca Tesoura para destrinchar ossos
Suabe acoplado em pipeta de inseminao articial
Papel toalha Meios para transporte de secrees (BHI, A3XB, Eagle e Lactopep) 88 Tubos a vcuo para colheita de sangue, com gel separador, sem e com anticoagulante
Tubo tipo KMA (tampa com rosca) Gaze
Palhetas de smen 89
Amostras para diagnstico de doenas do sistema reprodutor e urinrio

1. Material
Fetos de at 2Kg
3. Recipiente
Saco plstico (no mnimo, 3 sacos para cada feto)
2. O que colher
Feto inteiro
Feto bovino

Feto ovino Feto caprino
5. Tempo crtico
At 48 horas
NOTA
No congelar.
O laboratrio ir necropsiar e colher as amostras para os diversos exames. Colher soro sanguneo da fmea que abortou.
Fetos sunos
6. Exames
Pesquisa direta e indireta do agente e exame histopatolgico
91
90
1. Material
Feto e natimorto com mais de 2 Kg
a1) Fragmentos de cada rgo b) Fragmento de cada a2) 3 mL de cada uido

com cerca de 20 g
5. Quantidade
rgo com cerca de 3x3x1 cm
2. O que colher
Fgado, pulmo, bao, sistema nervoso central, corao, rim, timo e uidos corporais (lquido toracoabdominal ou pericrdico e contedo gstrico)
Colhendo contedo gstrico
6. Meio
a) Nenhum b) rgos xados com formol tamponado 10% (volume de formol, pelo menos 10 vezes maior que o volume de tecido a ser xado).
7. Recipiente
a1) rgos: saco plstico ou coletor universal. a2) Fluido: tubo de ensaio esterilizado ou coletor universal
de acordo com o tamanho do fragmento
b) Frasco; capacidade
3. Como colher
Necropsiar e colher os fragmentos de rgos com pina e tesoura esterilizadas. Escolher parte do rgo com leso, se no houver leso, colher aleatoriamente. Colher os uidos corporais com seringa e agulha esterilizadas
a) Refrigerada
(+2C a +8C)

4. Exames
a1) Pesquisa direta do agente a2) Anticorpos
Fluido tracoabdominal
b) Histopatolgico
a) At 48 horas
refrigerada. Os fragmentos em soluo de formol 10%, mesmo no completamente xados, podem ser enviados ao laboratrio
93
92
1. Material
Placenta a) 20 g
4. Quantidade
b) Fragmento de 3x3x1 cm
2. Como colher
Escolher sempre reas de transio do tecido com e sem leso. Nos ruminantes, colher algumas carnculas
5. Meio
a) Nenhum b) Formol tamponado 10% (Volume de formol, pelo menos 10 vezes maior que o volume de tecido a ser xado)
a) Saco plstico ou coletor universal
b) Frasco; capacidade
6. Recipiente
de acordo com o tamanho da pea
3. Exames
a) Pesquisa direta do agente b) Exame histopatolgico
a) Refrigerada
(+2C a +8C)
a) At 48 horas
95
94
1. Material
Smen
3. Quantidade
Smen in natura: 0,5 mL Smen industrializado: 10 palhetas de 0,5 mL
2. Como colher
Excitar o touro com fmea ou manequim, ou usar eletroejaculador. Colher o smen, utilizando vagina articial
FOTO: CRVLAGOA
4. Recipiente
Palheta ou tubo de ensaio esterilizado
OA FOTO: CRVLAG
para transporte
O volume de sm en a ser enviado ao labor atrio depende das anlises que sero realizadas; na dvida, consult ar o laboratrio. Identicar individu almente as amostras.
NOTA
6. Tempo crtico
At 48 horas
7. Exames
96 97
NOTA
1. Material
Muco prepucial
2. Onde colher
Cavidade prepucial
nter o touro Antes da colheita, ma l no mnimo 07 dias. em repouso sexua do muco com Evitar contaminao urina. her primeiro Quando for o caso, col pois proceder o suabe prepucial e de ao lavado. Solicitar ao laboratrio s. os meios apropriado
5. Meio
a) Submergir c) Submergir o b) Submergir o o suabe suabe em 2 mL suabe em 10 mL em 2 mL de de Lactopep de: Tioglicolato Eagle 2 vezes de sdio ou BHI (0,5 g de Lactopep concentrado, para 10 mL (Campylobacter spp), com antibitico A3xB Mycoplasma de soluo salina 0,85%) spp) e Cary Blair (outras bactrias)
a c
3. Como colher
Tcnica do suabe: Fazer a tricotomia do stio prepucial e lavar externamente o prepcio, utilizando apenas gua, e enxugar com papel toalha. Colher muco, introduzindo no fundo de saco da cavidade prepucial um suabe estril acoplado a uma pipeta de inseminao articial. Friccionar o suabe nas mucosas prepucial e peniana. Retirar o suabe e submergi-lo no meio para transporte apropriado. Utilizar um suabe para cada amostra.
6. Recipiente
Tubo de ensaio

a e b) Refrigerada (+2C a +8C) c) Ambiente
a) Pesquisa
de vrus
98
4. Exames
b) Pesquisa de
bactrias
c) Pesquisa de Tritrichomonas foetus

a e b) At 48 horas c) At 6 dias
99
1. Material
Muco prepucial
NOTA
2. Onde colher
Cavidade prepucial
touro anter o eita, m 7 a 10 dias. 0 da colh Antes o sexual de pous muco em re o do tamina on Evitar c o urina. eitas, n com s 3 colh s, essria alo de 7 dia c So ne m interv al. o sexu co nimo, -se o repous m ndo mante
4. Quantidade
40 mL de soluo salina 0,85%
5. Meio
Lactopep (proporo: 2 g/40 mL de soluo salina)
3. Como colher
Tcnica do lavado prepucial: Fazer a tricotomia do stio prepucial e lavar externamente o prepcio utilizando apenas gua. Enxugar com papel toalha. Proceder lavagem da cavidade prepucial, utilizando uma pipeta de inseminao articial acoplada a um tubo exvel ligado a uma seringa com 40 mL de soluo salina estril 0,85%. Introduzir a pipeta at o fundo de saco da cavidade prepucial e injetar o volume total da soluo salina. Retirar a pipeta e obliterar o stio prepucial com uma das mos e, com a outra, massagear vigorosamente o prepcio por um minuto. Liberar o stio prepucial e recolher o lquido no frasco contendo meio Lactopep (em p). Homogeneizar e completar o volume com soluo salina, at obter 40 mL.
100
6. Recipiente
Tubo cnico

Ambiente

At 06 dias
9. Exame
Pesquisa de Tritrichomonas foetus
101
1. Material
Muco cervicovaginal
O perodo ideal pa ra colheita de muco vaginal nos dias subsequentes ao estro (evitar colhe ita logo aps a cpu la). O uso de espcu lo fundamenta l para obteno de amostra de muc o cervicovaginal de boa qualidade.
NOTA
2. Onde colher
Cavidade vaginal
3. Como colher
Lavar a regio vulvar apenas com gua e secar com papel toalha. Adaptar o suabe a uma pipeta de inseminao articial e com auxlio de um espculo, introduzir o suabe na vulva at a crvix. Friccionar a mucosa, retirar o suabe e submergir em tubo de ensaio contendo meio de transporte. Utilizar um suabe para cada amostra.
a) Pesquisa
de vrus
4. Exames
6. Recipiente
Tubo de ensaio esterilizado contendo meio apropriado
b) Pesquisa de
bactrias
c) Pesquisa de Tritrichomonas foetus
5. Meio
a) Submergir b) Submergir o c) Submergir o o suabe suabe em 10 mL suabe em 2 mL de: de Lactopep Tioglicolato de em 2 mL de Eagle 2 vezes sdio ou BHI (0,5 g de Lactopep para 10 mL concentrado, (Campylobacter spp), com antibitico A3xB (Mycoplasma de soluo salina 0,85%) spp) e Cary Blair (outras bactrias)

a e b) Refrigerada
(+2C a +8C)
c) Ambiente

a e b) At 48 horas c) At 6 dias
103
102
1. Material
Urina
5. Meio e quantidade
a) Meio de Fletcher.
Colocar 1 mL de urina em 9 mL de soluo salina tamponada, pH 7,2 e inocular 2 mL dessa diluio em tubo contendo meio de Fletcher.
2. Onde colher
A amostra de urina pode ser obtida da mico espontnea, de mico induzida, por puno vesical ou mediante cateterismo uretral em fmeas.
b) BHI. Colocar 1 mL da urina em 3 mL em tubo contendo meio de transporte (BHI).
c) Nenhum.
Enviar o restante de urina, cerca de 20 mL.
3. Como colher
Antes da colheita, higienizar a regio da vulva ou prepcio com gua e sabo, enxaguar e secar com papel toalha. Colher o jato intermedirio da urina com coletor universal estril. H vrios procedimentos para induzir a mico: - A obstruo dos olhos e boca em pequenos ruminantes, durante uns segundos, tanto em fmeas como em machos, estimula a eliminao de urina. - Induo da mico em touros por massagem suave e rtmica no stio prepucial e, em vacas, massagem na vulva. Alertamos que esses mtodos s funcionam quando a bexiga est cheia. - Uso de furosemida (diurtico) por via intravenosa favorece a mico dentro de 10 a 15 minutos, porem no deve ser utilizado em animais suspeitos de urolitase
a e b) Tubo de ensaio
contendo meio apropriado
c) Coletor universal estril
6. Recipiente
Os meios especcos so fornecidos pelo laboratrio.
NOTA

a) Pesquisa para b) Pesquisa para c) Tcnicas de Leptospira spp. Brucella spp. biologia molecular
104
4. Exames

At 48 horas
105
1. Material
Sangue
a) Obteno de soro
b) Sangue total
2. Onde colher
cava cranial
3. Como colher
do agente
a) Tubo de ensaio
b) Tubo de ensaio


At 48 horas
107
106
Sistemas circulatrio e linftico

Doenas do sistema circulatrio e linftico produzem sinais clnicos diversos, tais como edema subcutneo, colorao anormal de mucosas (palidez, cianose, congesto e ictercia), hemorragias (petquias e sufuses) na pele e nos rgos internos, edema de rgos, principalmente do pulmo e do crebro. Esses sinais so decorrentes da ao de alguns patgenos que lesionam o endotlio e podem causar diculdade respiratria, cansao, anorexia, apatia e prostrao no animal. O diagnstico diferencial utiliza fragmentos de rgos refrigerados e xados em formol, sangue com anticoagulante e soro sanguneo.
Principais doenas dos sistemas circulatrio e linftico e espcies acometidas

ESPCIES ACOMETIDAS DOENAS Peste Suna Clssica Peste Suna Africana Circovirose Diarria viral bovina Carbnculo Hemtico (Antrax) Hemoglobinria bacilar Leptospirose Erisipela Doena do Edema Babesiose (protozorios sanguneos) Anaplasmose Prpura hemorrgica Anemia infecciosa equina X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X
108
109
Material para colheita de amostras para diagnstico de doenas dos sistemas circulatrio e linftico
Tubos a vcuo para colheita de sangue, com gel separador, sem e com anticoagulante Tubo com tampa com rosca
Potes de plstico, de boca larga e tampa de rosca, com capacidade para diferentes volumes
Agulhas para colheita de sangue a vcuo
Seringa e agulha estreis
Porta-lminas redondo
Saco plstico
Frasco de formol 35-40% (para utilizao, diluir uma parte de formol em 9 partes de gua)
Tubo tipo KMA (tampa com rosca) Tbua para corte de rgos Microtubos tipo Eppendorf
Serrote de arco
Cizalha Porta-lminas Tesoura para destrinchar ossos Facas Talhadeira
Gancho Marreta Faca Machado 111
Pedra para aar facas 110
Amostras para diagnstico de doenas dos sistemas circulatrio e linftico

Rim
3. Exames
a Pesquisa direta do agente
Pulmo Corao
1. Material
rgos - sistema nervoso central, fgado, bao, pulmo, rim, corao, linfonodos e intestino delgado e grosso
Fgado
Bao
2. Como colher
Necropsiar o animal e colher os fragmentos com tesoura ou bisturi e pina esterilizados, evitando danos ao tecido durante a retirada. Escolher parte do rgo com leso; se no houver leso, colher aleatoriamente. Selecionar a poro do intestino delgado com contedo, ligar e seccionar. Colher linfonodos regionais.
Linfonodo Fragmentos de rgos que sero remetidos ao laboratrio, sob refrigerao
Ala intestinal ligada
um dos hemisfrios cerebrais cerebelo Medula cervical Fatia do tlamo
112
113
b Exame histopatolgico
Bao Intestino delgado Fgado Rim Pulmo
a) Nenhum
b) Formol tamponado 10% (volume de formol, pelo menos 10 vezes maior que o volume de tecido a ser xado)
5. Meio
Corao leo terminal
Linfonodos
b) Frasco; capacidade de acordo

com o tamanho do fragmento
6. Recipiente
Fragmentos de rgos que sero remetidos ao laboratrio, xados em formol
ATENO
Outro hemisfrio cerebral
go Embalar cada r ente para individualm tes pesquisa de agen

a Fragmentos de SNC e b Tecidos
Tronco enceflico
outros rgos, embalados em sacos plsticos esterilizados (refrigerados) Metade do cerebelo
xados em formol
a) Refrigerada
(+2C a +8C)
b) Ambiente ou Refrigerada
(+2C a +8C)
de cada rgo a2) 10 a 30 cm de intestino delgado (ala ligada)

114
a1) Fragmentos de 20 g
4. Quantidade
b1) Fragmentos de 3x1x1cm b2) 10 cm de rgo tubular

de cada rgo (leo com placas de Peyer)

a) At 48 horas b) Remeter no mesmo tempo que a amostra
115
1. Material
Sangue capilar e venoso
Preparao de um esfregao de sangue a campo, imediatamente aps a colheita da amostra.
4. Quantidade
Trs lminas por animal
2. Onde colher
Preferencialmente sangue perifrico a partir da puno de capilares na ponta da orelha
5. Meio
Nenhum
3. Como fazer o esfregao de sangue

1. Manter a lmina horizontalmente entre o polegar e o indicador. 2. Colocar uma pequena gota de sangue sem anticoagulante na extremidade da lmina. (gura a) 3. Colocar uma segunda lmina (extensora) contra a superfcie da lmina, em frente gota de sangue, formando um ngulo de 45. 4. Movimentar a lmina para trs, de modo que entre em contato com a gota de sangue, pressionando-a at que a gota se espalhe por toda a borda da lmina. (gura b) 5. Impelir a lmina, mantendo sempre o mesmo ngulo, num s movimento rme e uniforme, sem separar uma lmina da outra. Forma-se ento uma delgada camada de sangue. (gura c) 6. Secar rapidamente ao ar e identicar com lpis. 7. Fixar por dois minutos em lcool metlico, retirar e secar. 8. Enviar ao laboratrio em porta-lminas.
NOTA
6. Recipiente
Transportar em caixas ou frascos com paredes rgidas e com ranhuras prprias para a xao das lminas

Ambiente

At 48 horas
A sensibilidade da tcnica pode ser aumentada com a confeco de esfregaos sanguneos a partir da puno de capilares na ponta da orelha.
9. Exames
Pesquisa de hemoparasitas
117
116
1. Material
Sangue
a) Obteno de soro
b) Sangue total
2. Onde colher
cava cranial
3. Como colher
do agente
a) Tubo de ensaio
b) Tubo de ensaio


At 48 horas
119
118
Sistema osteoarticular
A avaliao de problemas osteoarticulares deve considerar a possibilidade de alteraes do encfalo e do aparelho locomotor, tendo em vista que os sinais clnicos podem ter sua origem em anomalias de um ou de outro sistema. No diagnstico diferencial, deve-se considerar artrose e artrite sptica, malformaes das extremidades, traumatismos no parto ou causados por acidentes. O material clnico de eleio para pesquisa de agentes infecciosos o lquido sinovial. O soro sanguneo pode auxiliar no diagnstico.
Principais doenas do sistema osteoarticular e espcies acometidas

ESPCIES ACOMETIDAS DOENAS CAE (artriteencefalite caprina) Maedi-Visna Brucelose Chlamidolose (Chlamydophila psittaci e pecorum) Tuberculose Micoplasmose Erisipela suna Artrites causadas por bactrias piognicas e enterobactrias X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X
120
121
Material para colheita de amostras para diagnstico de doenas do sistema osteoarticular

Produto para antissepsia
Algodo
Seringa e agulhas
Material para tricotomia
Agulha para colheita de sangue a vcuo Tubos a vcuo para colheita de sangue, com gel separador, sem e com anticoagulante
Tubo tipo KMA (tampa com rosca)
Suabe estril
Suabe estril
122
123
Amostra para diagnstico de doenas do sistema osteoarticular

1. Material Lquido sinovial 2. Onde colher
Articulaes acometidas - escapulo-umeral, coxofemoral e articulaes do carpo e do tarso
NOTA
O soro sanguneo pode auxiliar no diagnstico de algumas doenas osteoarticulares.
4. Quantidade
Mnimo 1,5 mL
5. Recipiente
Tubo estril
3. Como colher
1 Sedar o animal; 2 Fazer a tricotomia e a desinfeco da regio da puno; 3 Conter o animal, a m de evitar Puno da articulao do carpo movimentos bruscos; em ovino acometido de artrite 4 Puncionar a articulao acometida, utilizando seringas com agulhas de 0,8 mm de dimetro e 40 mm de comprimento para articulaes escapulo-umeral e coxofemoral e com agulhas mais curtas para articulaes do carpo e do tarso; 5 Posteriormente, dividir a amostra entre um tubo com anticoagulante, para estudo citolgico e outro tubo sem anticoagulante, para pesquisa direta de agente; 6 Retirar a agulha e aplicar um curativo no local.
124
O lquido sinovial normal incolor e muito viscoso

Lquido sinovial de aspecto sanguinolento em um caso de artrite
7. Tempo crtico
Se a leso estiver supurada, colher o exsudato com suabe, utilizando meios especcos para cada situa o.
NOTA

At 48 horas
8. Exames
125
Pesquisa direta do agente e citolgico
1. Material
Sangue
a) Obteno de soro
b) Sangue total
2. Onde colher
cava cranial
3. Como colher
do agente
a) Tubo de ensaio
b) Tubo de ensaio


At 48 horas
127
126
Sistema nervoso central (SNC)

A importncia das doenas do sistema nervoso central (SNC) cresceu aps o aparecimento da encefalopatia espongiforme bovina (EEB), por se tratar de uma zoonose. Desde ento, o conhecimento sobre essas doenas aumentou exponencialmente. A patologia do sistema nervoso complexa, devido grande variabilidade anatmica de suas estruturas: encfalo (crebro, tronco enceflico e cerebelo) e medula espinhal, que atuam de forma integrada para controlar as funes do organismo. Agentes bacterianos, virais, parasitrios e prinicos, tumores, substncias txicas ou traumatismos podem afetar direta ou indiretamente o SNC e produzirem sinais clnicos que permitem identicar disfuno neurolgica e, em alguns casos, a localizao da leso. O envolvimento do SNC evidenciado por alteraes nas funes sensitivas, motoras, reexas, sensoriais e comportamentais. Para conrmar a causa de doena neurolgica necessria a realizao de diagnstico diferencial. As estruturas do encfalo e de outros rgos para pesquisa direta de agentes devem ser colhidas e mantidas sob refrigerao at sua chegada ao laboratrio; para exame histopatolgico, devem ser xadas em formol 10%. A pesquisa de anticorpos no soro sanguneo pode auxiliar no diagnstico.
Principais doenas do sistema nervoso central e espcies acometidas

ESPCIES ACOMETIDAS DOENAS Raiva Encefalopatia Espongiforme Bovina (EEB) Scrapie Encefalite Herptica Bovina Febre Catarral Maligna Doena de Aujeszky (Pseudoraiva) Listeriose Botulismo Intoxicaes (arsnico, chumbo, organofosforados, carbamatos e plantas txicas) Encefalite Herptica equina Encefalomielite equina do leste, oeste e venezuelana Polioencefalomalcia Leucoencefalomalcia equina X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X X
X -
X -
X -
X X X 129
128
Material para colheita de amostras para diagnstico de doenas do sistema nervoso central (SNC)
Tubos a vcuo para colheita de sangue, com gel separador, sem e com anticoagulante
Potes de plstico, de boca larga e tampa de rosca, com capacidade para diferentes volumes Frasco de formol 3540% (para utilizao, diluir uma parte de formol em 9 partes de gua) Saco plstico
Agulhas para colheita de sangue a vcuo Seringa e agulha estreis Sistema para colheita de sangue a vcuo Microtubos tipo Eppendorf Tbua para corte de rgos
Serrote de arco Coletor universal estril Tubo tipo KMA (tampa com rosca)
Cizalha
Talhadeira Gancho Pedra para aar facas Facas 130 Tesoura para destrinchar ossos Marreta Machado Faca 131
Amostras para diagnstico de doenas do sistema nervoso central (SNC)

1. Material
SNC inteiro
Nunca congelar, pois o laborat rio ir dividir as pores para os diferentes exames e, inclusive , xar uma parte em formol.
NOTA
3. Meio
Nenhum
4. Recipiente
Saco plstico ou frasco; capacidade de acordo com o tamanho do rgo
2. Como colher
1 passo: com faca e auxlio de um gancho, retirar a pele e msculos da calota craniana 2 passo: cortar o osso com machado, serra ou talhadeira e marreta 3 passo: seccionar com tesoura a duramater e retirar o encfalo cortando os nervos cranianos 4 passo: enviar o encfalo inteiro com a medula espinhal cervical e o conjunto hipse, trigmeos e rede admirvel carotdea (capilares ao redor da hipse)

6. Tempo crtico

At 48 horas
7. Exames
Pesquisa direta do agente e exame histopatolgico
132 133
1. Material
Pores do sistema nervoso central (SNC)
4. Passo a passo para separar o SNC

Separando o cerebelo Seccionar os pednculos cerebelares, um por vez, introduzindo uma lmina cortante, rostral e horizontalmente entre o tronco enceflico e o cerebelo
2. Como colher
Dissecar a pele e os msculos da cabea. Cortar a calota craniana, utilizando serrote, machado ou talhadeira e marreta. Com tesoura e pina, seccionar a duramater e os nervos cranianos. Retirar o encfalo e a medula espinhal cervical. Separar as pores para anlise laboratorial.
3. Pores anatmicas do SNC

Encfalo e medula espinhal cervical a - hemisfrios cerebrais; b - cerebelo; c - tronco enceflico; d - medula espinhal cervical
Encfalo
Separando o tronco enceflico Seccionar o tronco enceflico do resto do encfalo, na altura do tlamo, de ambos os lados
a b
c d
135
Medula espinhal cervical 134
5. Exames
a Pores do SNC para pesquisa direta do agente b Pores do SNC para exame histopatolgico 1 2 1 2 4 3 Separar em: 1 - hemisfrio cerebral; 2 - metade do cerebelo; 3 - medula espinhal cervical; 4 - tlamo 3 4 Separar em: 1 - hemisfrio cerebral; 2 - metade do cerebelo; 3 - conjunto de hipse, rede admirvel carotdea e gnglio do nervo trigmeo ; 4 - tronco enceflico; 5 - medula espinhal cervical 5
6. Meio

formol, pelo menos 10 vezes maior que o volume de tecido a ser xado).
a) Nenhum
b) Formol tamponado 10% (volume de
a) Refrigerada
(+2C a +8C)
b) Ambiente ou Refrigerada (+2C a +8C)
a) Saco plstico
7. Recipiente

tampa de rosca; capacidade de acordo com o tamanho da pea
ou coletor universal
b) Frasco de boca larga com
a) At 48 horas
136
137
1. Material
Outros rgos fgado, bao, pulmo, rim, corao, linfonodos, intestino delgado e grosso
NOTA
Pulmo
Em casos de morte sbita e crepitao muscular, colher tambm fragmentos de msculo alterado.
2. Como colher
Colher os fragmentos com tesoura ou bisturi e pina esterilizados, evitando danos ao tecido durante a retirada. Escolher parte do rgo com leso; se no houver leso, colher aleatoriamente. Para o intestino delgado, selecionar a poro com contedo, ligar e seccionar. Colher linfonodos regionais.
Rim
NOTA
Fgado Bao Corao
Enviar ao laboratrio pelo menos um fragmento de cada rgo refrigerado e um em formol.
138
139
Ala intestinal ligada
Poro do intestino delgado
a) Nenhum
b) Formol tamponado 10% (volume de formol, pelo menos 10 vezes maior que o volume de tecido a ser xado).
5. Meio

leo terminal (placas de Peyer) Linfonodos
NOTA
b) Frasco; capacidade de acordo

com o tamanho do fragmento.
6. Recipiente
Embalar cada rgo individualmente para pesquisa de agentes
a) Pesquisa direta do agente b) Exame histopatolgico
3. Exames
Fragmentos de SNC e outros rgos
Tecidos xados em formol
a1) Fragmentos de 20 g de cada rgo a2) 10 cm a 30 cm de intestino delgado (ala ligada).

140
4. Quantidade
a) Refrigerada
(+2C a +8C)
b) Ambiente ou Refrigerada
(+2C a +8C)
b1) Fragmentos de 3x1x1cm de cada rgo b2) 10 cm de rgo tubular (duodeno, jejuno e poro terminal do leo)
a) At 48 horas
141
1. Material
Sangue
a) Obteno de soro
b) Sangue total
2. Onde colher
cava cranial
3. Como colher
do agente
a) Tubo de ensaio
b) Tubo de ensaio


At 48 horas
143
142
Captulo 3
AVES
Autores Antonio Guilherme Machado de Castro Renato Lus Luciano Ana Maria Iba Kanashiro Ana Lcia S. P. Cardoso Eliana Neire Castiglioni Tessari Centro Avanado de Pesquisa Tecnolgica do Agronegcio Avcola (CAPTAA) Instituto Biolgico, Descalvado, SP (APTA/SAA-SP) 144 145
Principais doenas que acometem as aves

A avicultura industrial caracteriza-se por possuir um sistema de criao intensivo, com as aves alojadas em galpes, para se obter o mximo de produtividade. Essa particularidade torna necessria a adoo de medidas de biosseguridade, visando a obter elevados ndices de produo, alm da preveno das doenas. Por essa razo imprescindvel o diagnstico e o monitoramento freqente do status sanitrio dos plantis avcolas.
As principais doenas que acometem as aves so: Salmonelose Micoplasmose Inuenza Aviria Doena de Newcastle Bronquite Infecciosa Laringotraquete Doena de Gumboro Anemia Infecciosa Colibacilose Coccidiose Clostridiose A maioria delas no ocorre isoladamente, havendo uma interao entre diversos patgenos, com a possibilidade de ocorrerem associaes simultneas entre vrias doenas, dentro de um mesmo lote, acarretando elevadas perdas econmicas.
IMPORTANTE
Em casos de suspeita de Doena de Newcastle e Inuenza Aviria de alta patogenicidade, o Servio Veterinrio Ocial no estado dever ser imediatamente noticado, sendo somente competncia do mesmo a colheita das amostras
146
147
Material para colheita de amostras para diagnstico de doenas das aves
Frasco para remessa histopatolgico Tesoura trinchante Tesoura
Frasco com gua peptonada
Pina
Plstico Bolsa de amostras com gua peptonada Frasco coletor
Luvas
Suabe Gaze Gaze para suabe de arrasto Palitos esterilizados
Caneta
Seringa e agulha Frascos para colheita de sangue Bolsa plstica para colheita Prop
148
Pipeta pasteur

149
Amostras para diagnstico de doenas das aves

1. Material
Sangue (para obteno de soro)
3. Como colher sangue para obteno do soro

AVES ADULTAS Veia ulnar (asa): Colocar a ave em decbito lateral, para que a colheita seja feita na veia ulnar (veia da asa). Colher o sangue usando seringa descartvel de 5 mL atravs da puno venosa; transferir para frascos de vidro ou tubo de ensaio de 10 mL, limpos e secos, sem anticoagulante. AVES DE 1 DIA Decapitao: Aps a insensibilizao do animal, com o auxlio de tesoura, proceder tcnica de seco da primeira vrtebra cervical (decapitao). Colher o sangue em frasco de vidro ou tubo de ensaio (10 mL), limpo e seco, sem anticoagulante. AVES ADULTAS E AVES DE 1 DIA Puno cardaca: Realizar a conteno da ave com a imobilizao das pernas e asas com uma das mos e puncionar no meio da regio da quilha (base do esterno), onde h um vazio, tendo o cuidado para no atingir o pulmo. Inserir a seringa com agulha no peito da ave de maneira perpendicular ao ponto de entrada e paralelo coluna vertebral, at atingir o corao. Puxar lentamente o mbolo at obter a quantidade desejada. Transferir para frascos de vidro ou tubo de ensaio de 10 mL, limpos e secos, sem anticoagulante. Aps colheita do sangue da ave atravs de puno cardaca, venosa ou outros mtodos de prtica; manter o frasco ou tubo inclinado a temperatura ambiente para que o sangue coagule e libere o soro; transferir a amostra de soro para microtubo tipo Eppendorf ou outro frasco de vidro.
2. Onde colher
Aves adultas: puno cardaca ou veia ulnar (asa) Aves de 1 dia: puno cardaca ou veia jugular (decapitao)
150
151
4. Quantidade
Sangue para obteno do soro: 4,0 mL por ave Soro: 1 mL por ave
NMERO DE AMOSTRAS
5. Recipiente
Tubo de ensaio ou frasco de vidro (para sangue); e microtubo tipo Eppendorf (para sangue ou soro)
ELISA: mdia 25 soros/lote Soroagltinao Rpida (SAR): sma 100 soros/lote para Mycopla synoviae (MS) e Salmonella s/ pullorum (SP) e 150 ou 300 soro m para Mycoplasma gallisepticu lote legislao vigente (MG). Consultar a em caso de monitoria ocial
NOTA
Para se obter um soro sem hemlise, ao transferir o sangue da seringa para o tubo, deve-se faz-lo cuidadosamente, deixando que o sangue escorra pela parede lateral do tubo . Nunca esgotar o san gue de forma brusca e nem no fund o do tubo. Evitar mexer os frascos ou tubos enquanto o sangue est em descanso para separar o soro .
6. Exames
Sorolgico para pesquisa de anticorpos
a) Soroaglutinao rpida (SAR)
hemaglutinao (HI), ELISA, Soroneutralizao, Soroaglutinao lenta e Imunodifuso em Gel de gar
b) Teste de inibio da
a) Refrigerada

b1) Refrigerada
(+ 2C a + 8C);
(+ 2C a + 8C). Nunca congelar
ou
b2) Congelada
(- 20C)
a) At 24 horas
152
b1) At 24 horas; ou b2) At 48 horas

153
1. Material
rgos
2. O que colher
Traquia, pulmo, orofaringe, corao, fgado, bao, rim, bursa, crebro, cerebelo, nervo citico, proventrculo, moela, pncreas, tonsilas cecais, duodeno e ceco.
fgado bao
3. Como colher
Utilizar luvas. Com o auxlio de uma tesoura de destrinchar aves, realizar a abertura da cavidade abdominal e torcica, em ave recm sacricada; Colher cuidadosamente rgos ou fragmentos de eleio, utilizando-se de tesouras e pinas esterilizadas; Cortar fragmentos com espessura mxima de 2,0 cm, dos tecidos com alteraes; Evitar encostar as mos nos rgos, mesmo com luvas, para evitar a contaminao. Agrupar os rgos em 4 conjuntos e coloc-los em recipientes separados, sendo: 1. Traquia, pulmo e orofaringe; 2. Corao, fgado, bao e rins; 3. Crebro, cerebelo e nervo citico; e 4. Proventrculo, moela, bursa, duodeno, pncreas, tonsilas NOTA ve ser cecais e ceco. 1. Traquia de a ntegra. mantid ultas Para o histopatolgico, colher 2. Em aves ad al), a fragmentos de todos os rgos ade sexu (maturid a atroa acima descritos em um nico bursa sofre um mais frasco com formol a 10%. a, sendo siolgic aves jovens. Incluir o nervo citico. evidente em
154
corao
moela proventrculo duodeno
pulmo testculo rim
ceco pncreas bursa
tonsilas cecais
nervo citico
155
4. Quantidade
rgos de no mnimo 5 aves/lote, sendo 3 aves com sintomas e 2 aves aparentemente sadias
a) Bacteriolgico b) Isolamento viral e biologia molecular c) Histopatolgico

O volume ideal de formol para cada recipiente cerca de 10 vezes o volume do material.
NOTA
5. Exames
Somente para mdicos veterinrios do Servio Ocial Para o diagnstico da doena de Newcastle e Inuenza Aviria, os rgos devem ser colhidos separadamente, sendo cada rgo de cada ave acondicionado em um nico recipiente.
6. Meio
a) Nenhum
a e b) Frasco coletor ou tubos tipo Falcon, agrupados

segundo descrito no item 3.
7. Recipiente
b) MEM (Meio Essencial Mnimo) com 10% de soro bovino (ou 10% de soro fetal bovino) com soluo de antibiticos (0,5X); BHI com soluo de antibiticos (0,5X); Caldo Triptose Fosfato Tamponado (TPB) com soluo de antibiticos (0,5X) c) Soluo de formol 10% (100 mL de formaldedo
a 37% e 900 mL de gua v/v)

a e b) Refrigerada (+ 2C a + 8C); c) Ambiente. Nunca congelar

a) At 24 horas; b) At 48 horas; c) Remeter no mesmo tempo que as demais
amostras. As amostras em soluo de formol 10%, mesmo no completamente xadas, podem ser enviadas ao laboratrio
157
156
1. Material
Suabe de traquia
2. Como colher
Abrir o bico da ave, abaixar a lngua, introduzir o suabe esterilizado na traquia e esfregar em toda a circunferncia, evitando tocar o suabe nas mucosas da boca, para evitar contaminao; Passar um suabe por ave e, em seguida, cortar a extremidade do suabe que estava em contato com a mo e mergulhar o restante no frasco que contm o meio de transporte. Ateno: no momento da colheita, sempre usar luvas descartveis e abrir a embalagem com o suabe pelo lado que est o cabo, evitando tocar no algodo.
Ao passar o suabe na traquia, devese tomar o cuidado de vericar se ele est sendo introduzido no local correto. Muitas vezes, pode-se confundir a traquia com o esfago. A traquia localiza-se na poro VENTRAL. Uma dica tracionar um pouco a lngua da ave, de modo que a traquia seja projetada em direo cavidade bucal, podendo ento ser visualizada.
NOTA
a) Isolamento viral
b) Isolamento bacteriolgico
ou tcnica de biologia molecular para Micoplasma
3. Exames
lote, agrupando 10 suabes em cada recipiente
a) Suabes de 30 aves/
b) Suabes de 20 aves/lote, agrupados em um recipiente
4. Quantidade
a) Soluo salina adicionada
de antimicrobianos especcos
b) Caldo Frey
5. Meio
esfago traquia
6. Recipiente
a e b) Bolsa de amostra ou frasco com tampa rosca

a) Refrigerada
(+ 2C a + 8C)
b1) Refrigerada (+ 2C a + 8C); ou b2) Congelada (- 20C)
a) At 24 horas

b1) At 24 horas; ou b2) se demorar mais de 24 horas
159
158
1. Material
Suabe de cloaca
a) Bacteriolgico
para salmonela
b) Isolamento viral, tcnica
3. Exames
de biologia molecular
2. Como colher
Colher amostra com suabe estril, realizando movimentos circulares no orifcio da cloaca. Passar o suabe na ave; em seguida, cortar a extremidade do suabe que estava em contato com a mo e mergulhar o restante no frasco que contm o meio para transporte. Ateno: no momento da colheita, sempre usar luvas descartveis e abrir a embalagem do suabe pelo lado onde ca o cabo, evitando tocar no algodo.
a) 50 suabes, sendo um suabe para cada 2 aves, total de 100 aves por ncleo. Todos os suabes agrupados em um mesmo recipiente
NOTA
b) 30 suabes, sendo um suabe por ave, total de 30 aves por ncleo. Agrupar cada 10 suabes em um mesmo recipiente (3 recipientes/ncleo)
4. Quantidade
vigente legislao Consultar a onitoria ocial em em caso d
5. Meio
a) gua peptonada
tamponada esterilizada
b) Soluo salina adicionada de antimicrobianos especcos
6. Recipiente
Bolsa de amostra ou frasco esterilizado

a) Refrigerada
(+ 2C a + 8C)
b1) Refrigerada (+ 2C a + 8C); ou b2) Congelada (- 20C)
a) At 24 horas

b1) At 24 horas; ou b2) se demorar mais de 24 horas
160
161
1. Material
Suabe de arrasto a) gaze ou esponja esterilizada b) prop esterilizado
NOTA
4. Quantidade
2 suabes por galpo do ncleo
2. Onde colher
Galpo
Gaze ou esponja esterelizada
Caso o laboratrio fornea um palito estril, utiliz-lo tro para colocar o suabe den do recipiente.
5. Meio
3. Como colher
a) Usando luvas
descartveis, abrir a embalagem do suabe de arrasto dentro do galpo a ser amostrado. Segurar o suabe pelo cordo e caminhar pelo galpo, arrastando-o sobre a cama, principalmente entre comedouros e bebedouros. Colocar o suabe dentro do recipiente com o meio para transporte, cortando fora o cordo.
Prop esterelizado
gua peptonada tamponada esterilizada
6. Recipiente

b) Calar o prop esterilizado
8. Tempo crtico
sobre a bota e caminhar pelo galpo, principalmente entre comedouros e bebedouros. Retirar o prop utlizando luvas descartveis e colocar dentro do recipiente com o meio para conservao.

At 24 horas
9. Exame
Bacteriolgico para Salmonela
163
162
1. Material
Fundo de caixa
4. Quantidade
a) 1 suabe/2 caixas. Mnimo
de 4 caixas analisadas/lote, agrupando todos os suabes do lote num mesmo recipiente
NOTA
2. Onde colher
Caixa de transporte de aves de 1 dia
b) Fundos de no mnimo 4 caixas, agrupados por lote em um mesmo recipiente
3. Como colher
a) Suabe: usando luvas
descartveis, esfregar gaze esterilizada por toda a superfcie interna da caixa, preferencialmente sobre fezes, e coloc-la depois em recipiente adequado.
gente legislao vi Consultar a itoria ocial mon em caso de
b) Fundo da caixa: usando luvas descartveis, dobrar o fundo das caixas, de modo que o lado sujo com fezes que para dentro, e coloc-lo depois em recipiente adequado
a) gua peptonada
tamponada esterilizada
b) Nenhum
5. Meio
6. Recipiente
a) Bolsa de
amostra ou frasco esterilizado plsticos resistentes b
b) Sacos

a) Refrigerada
(+ 2C a + 8C)
b ) Ambiente

a e b) At 24 horas
Bacteriolgico e Micolgico
164 165
9. Exames
Papel ou cepilho que forra a caixa de transporte de aves de 1 dia
1. Material
5. Meio
Nenhum
2. Onde colher
Caixa de transporte de aves de 1 dia
6. Recipiente
Sacos plsticos resistentes
3. Como colher
Usando luvas descartveis, transferir o material que forra a caixa para sacos plsticos resistentes
4. Quantidade
Forro de caixa de transporte de no mnimo 4 caixas, agrupados por lote em um mesmo recipiente
Consultar a legislao vigente em caso de monitoria ocial
NOTA

Ambiente

At 24 horas
9. Exames
Bacteriolgico e Micolgico
166 167
1. Material
Fezes frescas
a) Bacteriolgico
b) Isolamento viral, tcnica
4. Exames
de biologia molecular
2. Onde colher
No Galpo
a) 1 pool de 100 amostras/ncleo, colocadas num mesmo recipiente

NOTA
5. Quantidade
b) 50 a 100g/lote
3. Como colher
Usando luvas descartveis e com auxlio de esptula esterilizada, recolher as amostras de fezes frescas de vrios pontos do galpo, coloc-las em uma mesma embalagem por lote
6. Meio
a) Nenhum
b) Soluo salina adicionada de

antimicrobianos especcos
7. Recipiente
a) Sacos plsticos
resistentes
b) Bolsa de amostra ou
frasco esterilizado


a e b) At 24 horas
168 169
1. Material
Mecnio
4. Quantidade
50 mL/ncleo de reprodutoras no vacinadas contra Salmonella enteritidis Mecnio de 200 pintos/ ncleo de reprodutoras vacinadas contra Salmonella enteritidis, apenas no primeiro nascimento
NOTA
2. Onde colher
No incubatrio
3. Como colher
Usando luvas descartveis, colher o mecnio diretamente em recipiente apropriado depois de a ave excret-lo sob leve presso
5. Meio
Nenhum
6. Recipiente

8. Tempo crtico

At 24 horas
9. Exame
Bacteriolgico para Salmonela
170 171
1. Material
Ovos bicados
4. Quantidade
20 ovos/ncleo de reprodutoras no vacinadas contra Salmonella enteritidis 150 ovos do primeiro nascimento/ncleo de reprodutoras vacinadas contra Salmonella enteritidis
2. Onde colher
No incubatrio
3. Como colher
Usando luvas descartveis, retirar do nascedouro ovos bicados no nascidos
5. Meio
Nenhum
6. Recipiente
Embalagens plsticas resistentes
a1) Refrigerada
(+2C a +8C);

ou
a2) Congelada (-20C)
a1) At 24 horas;

ou a2) Acima de 24 horas, at a
entrega no laboratrio
9. Exames
Bacteriolgico
172 173
Captulo 4
ABELHAS
Apis mellifera
Autores rica Weinstein Teixeira Agncia Paulista de Tecnologia dos Agronegcios (APTA, SAA-SP) Dejair Message Universidade Federal de Viosa (UFV) 174 175
Material para colheita de amostras para diagnstico de doenas que afetam
Abelhas Apis mellifera

IMPORTANTE
Saco plstico
Caixa isotrmica com gelo reciclvel Pina
Kit EPI Equipamento de proteo individual
cas e ar formo, fa dos, Sempre utiliz ente desinfeta am pinas devid tre apirios e en entre colmeias realizar ua e sabo, (lavar com g pois ecnica e de esfregao m cool 70%) l submergir em
Lpis e caneta esferogrca
Luvas de ltex Jornal Pincel/ trincha
Fumigador
Tubos tipo Eppendorf
Etiquetas
Envelope
Espuma Formo Papel
Faca Caneta do tipo marcador permanente 176
Pote plstico universal
Pote plstico universal perfurado
Pote plstico de 500 mL 177
Garantindo a segurana
Antes de dirigir-se ao apirio, o prossional dever vestir-se adequadamente com o equipamento de proteo individual (EPI), acender o fumigador e pegar o formo
TRABAL
Reconhecendo as partes de uma colmeia

Tampa
ever e colheita d O trabalho d sempre em do ser executa rolando divduo cont dupla, um in dor e com fumiga as abelhas mostras do as a outro colhen
DUPLA HAR EM
Chapu Mscara/Vu Macaco Tela excluidora Melgueira
Ninho Fundo
Alimentador
Luvas de borracha Formo Fumigador

O fumigador imprescindvel, pois a fumaa, na quantidade certa, permite controlar a defensividade das abelhas.
Protetor contra formiga Cavalete Alvado (entrada da colmeia) Luvas de algodo (usar Colmeia Langstroth ou padro, despovoada, em cavalete de madeira 179
Botas
opcionalmente, por baixo das luvas de borracha)
178
Identicando os indivduos da colnia, clulas de operrias, clulas de zango e realeira

Clula de operria operculada Operria
Clula de zango desoperculada
Clula de zango operculada
Realeira aberta Clula de operria desoperculada Rainha Zango
Operrias fazendo corte rainha Realeira fechada
180
181
Abrindo e inspecionando uma colmeia

1 Passo Abrindo a colmeia e controlando o comportamento defensivo das abelhas Fazer fumaa no alvado; Levantar a tampa; Fazer fumaa paralela superfcie dos quadros; Fechar a colmeia por 1 minuto; Manter o fumigador cerca de 15 cm da colmeia Certicar-se de que a rainha no est na tampa
Abrir a tampa novamente e fazer fumaa paralela superfcie dos quadros;
Apoiar a tampa no cho com a parte interna para cima, colocando sobre ela a(s) melgueira(s) ou qualquer outro aparato utilizado pelo apicultor (Ex.: Alimentador de topo, coletor de plen, coletor de prpolis, tela excluidora etc.).
183
182
2 Passo - Inspecionando a rea de cria;
NOTA
Localizao mais provvel ia. da rea de cr
Realizar a inspeo dos quadros da rea de cria. Certicar-se de que a rainha no est presente nesse quadro e, caso esteja, transferi-la cuidadosamente para outro quadro ou permitir que ela o faa espontaneamente.
Ninho
Com o auxilio do formo, descolar os quadros do ninho (devido propolizao); retirar um quadro da rea de cria.
Para facilitar a visualizao das crias, se necessrio, chacoalhar o quadro suavemente para dentro da colmeia ou utilizar um pequeno ramo de planta para afastar as abelhas adultas que esto cobrindo a rea de cria.
185
184
Durante seu ciclo de vida, as abelhas passam por quatro diferentes fases: ovo, larva, pupa e inseto adulto
DIFERENTES FASES DO DESENVOLVIMENTO DAS ABELHAS CRIAS NORMAIS
Diferentes estgios da fase de pupa (pupa de olho branco, pupa de olho rosa, pupa de olho rosa-escuro e pupa de olho marrom com pigmentao torcica de leve a forte).
Ovo
No primeiro dia, encontra-se na posio vertical, no segundo dia inclinada e, no terceiro dia, passa a car na posio horizontal
H.M.Takada, PRDTA-VP/APTA, SAA, SP
Larva
Fase larval Pr-pupa
Pr-pupa e pupa em diferentes estgios, desoperculadas, para permitir a visualizao.

M. Elias-Neto, FFCLRP/ USP
Diferentes sub-estgios do desenvolvimento larval, incluindo pr-pupa
Diferentes estgios da fase larval. Crias desoperculadas e operculadas 186
Crias sadias normalmente so vigorosas e apresentamse na fase larval no fundo dos alvolos, em forma de C (desoperculadas). Aps 5 a 6 dias, essas larvas so operculadas com cera, mudando constantemente a sua posio at carem retas nos alvolos, com o dorso do corpo na parede lateral do alvolo (pr-pupa). Nessa fase, ela cessa seus movimentos e passa por modicaes, transformando-se em pupa. Desde ovo, passando por todos os estgios de larva, at o estgio inicial de pupa, a cria apresenta-se com colorao branco-prola em todo o corpo. Ao longo da fase de pupa, ocorrem mudanas gradativas na pigmentao dos olhos e dos segmentos do corpo. 187
M. Elias-Neto, FFCLRP/ USP
Fases do desenvolvimento das abelhas
Pupa
Fase de pupa
Diferentes anomalias na fase de cria

Para reconhecer os sintomas das doenas importante estar familiarizado com as caractersticas das diferentes fases do desenvolvimento das crias e com a aparncia de um favo com crias saudveis.
Exemplos de possveis alteraes na aparncia das crias

Bart Smith, BRL/ARS/USDA
Cria mumicada
Quadro com rea de cria normal
Cria com alterao de cor e/ou ressecada
Cria contorcida na parede do alvolo com alterao de cor e murcha
Cria no fundo da clula com alterao de cor e murcha Quadro com rea de cria falhada
Cria com alteraes de consistncia (aquosa) 188 189
Principais doenas, intoxicaes e parasitoses que afetam CRIAS DE ABELHAS - Apis mellifera Cria Ptrida Americana ou Loque Americana
Agente causador Bactria Paenibacillus larvae
Cria Giz
Agente causador Fungo Ascosphaera apis Fase de desenvolvimento da cria afetada Crias j operculadas, pr-pupa e pupa (cam mumicadas)
BART SMITH, BRL/ARS/USDA
VIRGINIA WILLIAMS, BRL/ARS/USDA
Cria Ensacada
Agente causador Vrus SBV (Sac Brood Virus) Fase de desenvolvimento da cria afetada Pr-pupa (no consegue passar para pupa)
Cria Ptrida Europia ou Loque Europia

Agente causador Bactria Melissococcus plutonius Fase de desenvolvimento da cria afetada Geralmente larva desoperculada em fase de alimentao; algumas vezes cria operculada
190
Fase de desenvolvimento da cria afetada Pr-pupa e pupa
191
Cria Ensacada Brasileira

Agente causador Plen da planta barbatimo (Stryphnodendron spp) Fase de desenvolvimento da cria afetada Pr-pupa (no consegue passar para pupa)
Crias Anmalas
Agente causador Causa indeterminada Fase de desenvolvimento da cria afetada Pupa
Cria com asa deformada

Agente causador Vrus DWV (Deformed Wing Virus), ou, eventualmente, Varroa (por ao fsica) Fase de desenvolvimento da cria afetada Pupa, prximo emergncia ou nascimento (quando o sintoma evidente)
Varroatose
Agente causador caro ectoparasita Varroa destructor (na fase de reproduo) Fase de desenvolvimento da cria afetada Cria j operculada
192
193
Amostras para diagnstico das principais doenas que afetam CRIAS DE ABELHAS - Apis mellifera
Antes de iniciar a colheita de amostra, faa uma observao minuciosa dos favos na rea de cria. Nos quadros que apresentarem falhas (conforme apresentado na pgina 188), procure detectar a presena de crias com alteraes na cor (mudana de branco-prola para marrom claro a escuro); murchas; contorcidas nas paredes dos alvolos ou mumicadas.
4. Quantidade
Pedaos de favo contendo o mximo possvel de crias anormais 3 a 5 pedaos de favo de aproximadamente 3x3 cm a 3x10 cm, preferencialmente entre os arames do quadro. Pode tambm ser o favo inteiro
Colheita de crias para anlise

Para diagnstico da doena, colher 4 amostras diferentes
5. Recipiente
Envolver as amostras de favo em papel jornal ou outro tipo de papel no encerado. Ateno: Nunca envolver em plstico ou papel alumnio, nem colocar em frasco fechado
Amostra 1
1. Onde colher
No ninho
NOTA
2. O que colher 3. Como colher

Com a faca, entre os arames do quadro, cortar pedaos de favo em uma regio com crias suspeitas
194
de Realizar as colheitas utilizando luva amostras sobre as descartvel de ltex e descart-la, entre de borracha em saco uma e outra colmeia, ndo-o em seguida. de lixo, fecha

Ambiente

At 48 horas
Favos falhados e com crias anormais, sem mel
8. Exames
Isolamento/identicao Anlise microscpica e/ou molecular, se o material estiver preservado
195
Amostra 2
1. Onde colher
No ninho
5. Recipiente
Envolver os pedaos de favo em papel jornal ou outro tipo de papel no encerado. Ateno: nunca envolver em plstico ou papel alumnio, nem colocar em frasco fechado
2. O que colher
Favos contendo crias operculadas (preferencialmente, sem mel e com pupas mais velhas, de olho escuro)
3. Como colher
Com uma faca, cortar um pedao de favo com crias

Ambiente
4. Quantidade
Pedao de favo de aproximadamente 3x10 cm (contendo pelo menos 100 crias operculadas)

At 48 horas
8. Exames
Avaliao da taxa de infestao de crias por Varroa destructor (varroatose)
196
197
Amostra 3
1. Onde colher
No ninho
b) Papel ofcio comum
- esmagar a amostra ao dobrar o papel (colocar o papel dentro de um envelope)
2. O que colher
Crias anormais
3. Como colher
Com uma pina, colher, individualmente, crias anormais

a) Congelada (-20C). Congelar
imediatamente as amostras, mantendo o material em freezer at o envio para o laboratrio
4. Quantidade
Efetuar colheita individual de aproximadamente 20 crias ou todas, se forem menos de 20
b) Ambiente
5. Recipiente
Dividir as amostras em 2 partes iguais e colocar em:

At 48 horas
a) Tubos tipo Eppendorf
de 1,5 ou 2,0 mL - colocar uma cria suspeita por tubo
8. Exames
Anlise microscpica, microbiolgica e/ou molecular
199
198
Amostra 4
1. Onde colher
No ninho
Detalhe do favo contendo mel operculado e plen armazenado no alvolo (tambm chamado de po de abelha) Plen armazenado Mel operculado
2. O que colher
Pedao de favo contendo mel operculado (na parte superior de favos de cria - caso no encontre, colher mel desoperculado)
5. Recipiente
Colocar as amostras em frascos plsticos de 500 g a 1 kg. Fechar bem, colocando em seguida cada frasco em saco plstico
3. Como colher
Com uma faca, cortar a parte superior do favo contendo mel (entre o arame e a madeira do quadro)

Ambiente

At 48 horas
4. Quantidade
Quatro pedaos de aproximadamente 3X7 cm (a amostra pode conter plen)
200
8. Exames
Anlise para esporos de P. larvae e presena de plen de barbatimo
201
Principais doenas, intoxicaes e parasitoses que afetam ABELHAS ADULTAS - Apis mellifera Nosemose
Agente causador Microspordeos, Nosema apis e/ou Nosema ceranae Sintomas clnicos Diarria, quando causada por N. apis; Sintoma inespecco, quando causada por N. ceranae
Viroses
Agente causador Cerca de 18 diferentes vrus podem infectar abelhas, dentre os quais podem ser citados Black Queen Cell Virus (BQCV) - Filamentous Virus (FV) - Deformed Wing Virus (DWV) - Chronic Bee Paralysis Virus (CBPV) - Acute Bee Paralysis Virus (ABPV) - Israeli Acute Paralysis Virus (IAPV) e Cloud Wing Virus (CWV) Sintomas clnicos Inespeccos, muito embora, alguns sintomas tenham sido associados a viroses, tais como: abelhas com asas deformadas dentro e na frente da colmeia, abelhas sem pelos e com aspecto brilhoso, abelhas com asas opacas e abelhas com tremores
Yanping Chen, BRL/ARS/USDA
Acariose
Agente causador caros endoparasitas, Acarapis woodi, dentre outras espcies Sintomas clnicos Inespecco
Varroatose
Agente causador caro ectoparasita, Varroa destructor Constatao visual da presena do caro sobre as abelhas
Intoxicaes por agrotxicos

Agente causador Constituintes qumicos de inseticidas e de outros defensivos agrcolas Sintomas clnicos Grande quantidade de abelhas mortas fora e/ou dentro da colmeia
202
203
Osmar Malaspina, CEIS/UNESP
Amostras para diagnstico das principais doenas que afetam ABELHAS ADULTAS - Apis mellifera
Em abelhas adultas, geralmente, no ocorrem sintomas caractersticos de cada doena. O que se observa comumente a presena de algumas abelhas adultas moribundas na entrada da colmeia (alvado) ou no cho, rastejando at morrerem. Quando ocorre mortalidade por algum tipo de inseticida, observa-se maior quantidade de abelhas mortas no cho na frente da colmeia e, algumas vezes, no fundo da colmeia. Eventualmente, certas viroses e parasitas podem produzir sintomas especcos (asas deformadas, ausncia de pelos, entre outros)
2. O que colher
Abelhas adultas ainda vivas e moribundas (rastejando e sem conseguir voar)
3. Como colher
NOTA
tes Se possvel, um dia an r heita, capinar/limpa da col frente de 2 a 3 metros na ilitar a cada colmeia, para fac abelhas que visualizao das esto moribundas
Com o auxilio de uma pina, colher as abelhas moribundas
4. Quantidade
Cerca de 30 abelhas ou mais por colmeia
Colheita de abelhas adultas para anlise

Para diagnstico das doenas e intoxicaes de abelhas adultas, colher 5 amostras diferentes
5. Recipiente
Frascos de plstico tipo universal perfurado na tampa e nas laterais
6. Temperatura da amostra 7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio
para transporte
Ambiente
Amostra 1
1. Onde colher
Na frente da colmeia (no solo) e na entrada da colmeia (alvado)
204
At 48 horas
8. Exames
Deteco de esporos de Nosema spp., caros endoparasitas e protozorios
205
Amostra 2
1. Onde colher
Na entrada da colmeia (alvado)
4. Quantidade
Cerca de 30 abelhas ou mais, por colmeia
2. O que colher
Abelhas adultas campeiras que esto chegando
5. Meio
lcool 70%. No frasco, deixar 5mm de lcool acima das amostras de abelhas
3. Como colher
Fechar a entrada da colmeia (alvado) com uma tira de espuma comum e colher as abelhas que esto chegando dentro de um frasco plstico tipo universal, contendo lcool 70%
NOTA
6. Recipiente
Frasco plstico tipo universal (contendo lcool 70%) Ateno: fechar bem o frasco, colocando cada frasco em um saco plstico. Em seguida, colocar em caixa de papelo com divisrias entre os frascos

Ambiente
Para a colheita de abelhas no alvado, pode-se sug-las, utilizando-se um sugador de abelhas ou, alternativamente, varr-las com um pincel/ trincha comum (de pintura) de 4 a 5 cm de largura

At 72 horas
9. Exames
Deteco de esporos de Nosema spp., caros endoparasitas e protozorios
206
207
Amostra 3
1. Onde colher
Dentro da colmeia
4. Quantidade
Cerca de 10 abelhas por colmeia
5. Recipiente
Frascos plstico tipo universal
2. O que colher
Abelhas adultas que esto cobrindo a rea de cria
3. Como colher
Suspender um favo de cria. Com o auxlio de um frasco de plstico tipo universal, posicionado obliquamente e arrastado de baixo para cima, colher as abelhas dentro do frasco
6. Temperatura
da amostra para transporte
Congelada (-20C). Congelar imediatamente as amostras, mantendo o material em freezer at o envio para o laboratrio

At 24 horas
8. Exames
Anlise molecular
208 209
Amostra 4
1. Onde colher
Dentro da colmeia
4. Quantidade
Cerca de 200 a 300 abelhas por colmeia
5. Meio
lcool 70%. No frasco, deixar 5mm de lcool acima das amostras de abelhas.
2. O que colher
Abelhas adultas que esto cobrindo a rea de cria
6. Recipiente
Frasco plstico de 500 mL (contendo lcool 70%) Ateno: fechar bem o frasco, colocando cada frasco em um saco plstico. Em seguida, colocar em caixa de papelo com divisrias entre os frascos
3. Como colher
Suspender um favo de cria. Com o auxlio de um frasco de plstico de 500 mL contendo 250 mL de lcool 70%, posicionado obliquamente e arrastado de baixo para cima, colher as abelhas dentro do frasco
210

Ambiente

At 72 horas
9. Exames
Determinao da taxa de infestao de caros ectoparasitas
211
Amostra 5
1. Onde colher
NESP.
4. Quantidade
Cerca de 300 a 500 abelhas nas proximidades de cada colmeia
Na frente e/ou no fundo de cada colmeia
2. O que colher
Abelhas adultas moribundas e/ou mortas Importante: Colher abelhas mortas somente se a mortalidade tiver ocorrido um dia antes da colheita
OSMAR MALASPINA, CEIS/U
5. Recipiente
Frasco plstico com capacidade de 1 kg

OSMAR MALASPINA, CEIS/UNESP.
Congelada (-20C). Congelar imediatamente as amostras, mantendo o material em freezer at o envio para o laboratrio
3. Como colher
Com o auxlio de uma pina ou com a prpria mo utilizando luvas descartveis, colher as abelhas moribundas e/ou recentemente mortas
212

At 24 horas
8. Exames
Deteco de inseticida e outros defensivos agrcolas
213
Bibliografia
Antn, J. J. R.; MAyAyo, L. M. F. La exploracin clnica del ganado ovino y su entorno. Zaragoza: Servet, 2007. 422 p. ASSoCIAo BRASILEIRA DE noRMAS tCnICAS. NBR 7.500: smbolos de risco e manuseio para o transporte e armazenamento de material. Rio de Janeiro, maro de 2000. BERCHIERI JnIoR, A.; MACARI, M. Doenas das aves. Campinas: FACtA, 2000. 800 p. BRASIL. Conselho nacional do Meio Ambiente. Resoluo n 6, de 19 de setembro de 1991. Dispe sobre a incinerao de resduos slidos provenientes de estabelecimentos de sade, portos e aeroportos. Dirio Oficial Unio, Braslia, DF, 30 out. 1991. Disponvel em: <http://e-legis.anvisa. gov.br/leisref/public/showAct.php?id=1156> Acesso em: 14 dez. 2009. BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Controle da raiva dos herbvoros: manual tcnico. Braslia: MAPA/SDA/DSA, 2005. 104 p. BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Instruo normativa n 17 de 07 de abril de 2006. Aprovar, no mbito do Programa nacional de Sanidade Avcola, o Plano nacional de Preveno da Influenza Aviria e de Controle e Preveno da Doena de newcastle. Dirio Oficial da Unio, Braslia, DF, 10 abril 2006, Seo 1, p. 6. BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Instruo normativa n 32, de 14 de maio de 2002. Aprova as normas tcnicas de vigilncia para doena de newcastle e Influenza Aviria, e de controle e erradicao para a doena de newcastle. Dirio Oficial da Unio, Braslia, DF, 14 maio 2002. Seo 1, p. 28. BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Instruo normativa n 44 de 23 de agosto de 2001. Aprova as normas tcnicas para o controle e a certificao de ncleos e estabelecimentos avcolas para a Micoplasmose Aviria (Mycoplasma gallisepticum, synoviae e melleagridis). Dirio Oficial da Unio, Braslia, DF, 24 ago. 2001, Seo 1, p. 68. BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Instruo normativa n 78, de 03 de novembro de 2003. Aprova as normas tcnicas para controle e certificao de ncleos e estabelecimentos avcolas como livres de Salmonella gallinarum e de Salmonella pullorum e livres ou controlados para Salmonella enteritidis e para Salmonella typhimurium. Dirio Oficial da Unio, Braslia, DF, 05 nov. 2003, Seo 1, p. 3. Disponvel em: < http://extranet.agricultura.gov.br/ sislegis-consulta/servlet/VisualizarAnexo?id=11080>. Acesso em: 14 dez. 2009. BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Plano de ao para febre aftosa: volume I atendimento notificao de suspeita de doena vesicular. Braslia: MAPA/SDA/DSA, 2009. 96 p. BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Portaria n 48, de 17 de fevereiro de 2006. Submete consulta pblica, por um prazo de 30 (trinta) dias, a partir da data de publicao desta Portaria, o Projeto de Instruo normativa, que aprova o Plano nacional de Controle e Preveno da Doena de newcastle e de Preveno da Influenza Aviria. Dirio Oficial da Unio, Braslia, DF, 21 fev. 2006, Seo 1, p. 6. BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Portaria 108 de 04 de setembro de 1991. Aprova os mtodos analticos para controle de alimentos para uso animal. Dirio Oficial Unio, Braslia, DF, 17 set. 1991. Disponvel em: < http://extranet.agricultura.gov.br/sislegis-consulta/ servlet/VisualizarAnexo?id=12750>. Acesso em: 16 out. 2009. BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Portaria n 126, de 03 de novembro de 1995. normas de credenciamento e monitoramento de laboratrios de diagnstico das salmoneloses avirias (S. enteritidis, S. gallinarum, S. pullorum e S. typhimurium). Dirio Oficial da Unio, Braslia, DF, 06 nov. 1995, Seo 1, p. 17694. Disponvel em: < http://extranet.agricultura.gov.br/sislegis-consulta/ servlet/VisualizarAnexo?id=12698 >. Acesso em: 14 dez. 2009. BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Portaria n 182 de 08 de novembro de 1994. Aprova as normas de Credenciamento e Monitoramento de Laboratrios de Diagnstico da Doena de newcastle. Dirio Oficial da Unio, Braslia, DF, 11 nov. 1994, Seo 1, p. 17003. BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Procedimentos para colheita, transporte, recepo e conservao de amostras de soros para diagnstico sorolgico de febre aftosa. Braslia: MAPA/DSA/ DDA, 2004.13 p. BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Procedimentos para o diagnstico das doenas do sistema nervoso central de bovinos. Braslia: MAPA/DSA/DDA, 2003. 50 p. BRASIL. Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento. Secretaria de Defesa Agropecuria. Programa nacional de Sanidade Avcola. Procedimentos operacionais de atividades de campo: manual tcnico. Braslia, DF: MAPA, 2002. 85 p.
214
215
BRASIL. Ministrio da Sade. Secretaria de Cincia, tecnologia e Insumos Estratgicos. Diretrizes gerais para o trabalho em conteno com material biolgico. Braslia, DF: Ministrio da Sade, 2004. 60 p. (Srie A. normas e Manuais tcnicos). BRASIL. Ministrio dos transportes. Portaria n 204, de 20 de maio de 1997. Aprova as instrues complementares aos regulamentos dos transportes rodovirios e ferrovirios de produtos perigosos. Dirio Oficial Unio, Braslia, DF, 26 maio 1997. Suplemento n 98. CLInICAL AnD LABoRAtoRy StAnDARDS InStItUtE. Control of preanalytical variation in trace element determinations; approved guideline. Pennsylvania: nCCLS, 1997. (nCCLS document C38-A). CLInICAL AnD LABoRAtoRy StAnDARDS InStItUtE. Tubes and additives for venous blood specimen collection; approved standard. 5th ed. Pennsylvania: nCCLS, 2003. (nCCLS document H01-A5). KoERICH, P. K. V.; ZUFFo, J. P.; BACK, A.; PEREIRA, R. A. Guia de coleta e envio de materiais para diagnstico laboratorial. 2. ed. Xanxer, SC: news Print Grfica e Editora Ltda, 2007. 165p. MCGAVIn, M. D.; ZACHARy, J. F. Pathologic basis of veterinary disease. 4th ed. Maryland: Elsevier, 2007. 1488 p. SoCIEDADE BRASILEIRA DE PAtoLoGIA CLnICA/ MEDICInA LEGAL; BD DIAGnoStICS PREAnALytICAL SyStEMS. Recomendaes da Sociedade Brasileira de Patologia Clnica / ML para coleta de sangue venoso. So Paulo: SBPC/ML, 2005. 76 p. UnItED nAtIonS. UN recommendations on the transport of dangerous goods - model regulations. 13th ed. rev. Disponvel em: <http://www.unece.org/trans/ danger/publi/unrec/rev13/13files_e.html>. Acesso em: 30 out. 2009. WoRLD HEALtH oRGAnIZAtIon. Guidelines for the safe transport of infectious substances and diagnostic specimens. Genebra: WHo, 1997. (WHo/EMC/97.3). Disponvel em: <http://www.who.int/csr/emc97_3.pdf> Acesso em: 29 maio 2009. WoRLD HEALtH oRGAnIZAtIon. Laboratory biosafety manual. 2nd rev. Geneva: WHo, 2003. Disponvel em: <http://www.who.int/csr/resources/ publications/biosafety/Labbiosafety.pdf>. Acesso em: 29 maio 2009. WoRLD HEALtH oRGAnIZAtIon. Laboratory biosafety manual. 3nd ed. Geneva: WHO, 2004. Disponvel em: <www.who.int/csr/resources/ publications/biosafety/Biosafety7.pdf>. Acesso em: 29 maio 2009. WORLD ORGANIZATION FOR ANIMAL HEALTH. Manual of diagnostic tests and vaccines for terrestrial animals. 5th ed. Paris: oIE, 2004. Disponvel em: <http:// www.oie.int/eng/normes/mmanual/A_00055.htm> Acesso em: 30 out. 2009.
216
217
Ministrio da Agricultura, Pecuria e Abastecimento - MAPA Departamento de Sade Animal Esplanada dos Ministrios Bloco D, Anexo A, Sala 301 70043-900 - Braslia, DF - Brasil Tel.: 00 55 61 3218-2701 Fax: 00 55 61 3226-3446 http://www.agricultura.gov.br 0800 - 7041995 Organizao Pan-Americana da Sade OPAS/OMS Sade Pblica Veterinria Centro Pan-Americano de Febre Aftosa PANAFTOSA Av. Presidente Kennedy, 7778 CEP: 25040-004 Duque de Caxias, Rio de Janeiro Brasil Tel.: 00 55 21 3661-9003 Fax: 55 21 3661-9001 http://www.panaftosa.org.br

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Manual Veterinrio de Colheita e Envio de Amostras

Manual Veterinrio de Colheita e Envio de Amostras

Sade Pblica Veterinria

Centro Pan-Americano de Febre Aftosa

Jamil Gomes de Souza Departamento de Sade Animal - Diretor

Ottorino Cosivi Centro Pan-Americano de Febre Aftosa Diretor

Captulo 1 Tabela de medidas de agulhas 46 47 48 50 52 52 54 56 58 60 62 64 66 68 68 70 72

Ruminantes, Equdeos e Sudeos

86 88 90 90 92 94 96 98 100 102 104 106

Abelhas Apis mellifera

1 - Equipamentos de proteo individual (EPI)

Luvas tricotadas pigmentadas

2 - Equipamentos para conteno dos animais

3 - Identicao do animal e da amostra

Animal com brinco bem posicionado 20 21

5 - Acondicionamento para remessa de amostras para diagnstico

2 Passo Envolver este conjunto em manta absorvente, prevenindo possveis vazamentos.

6 - Requisio de exames Pontos importantes no preenchimento da Requisio de Exames

S PARA REMESSA MAS NECESSRIA

DIAGNSTICO AMOSTRAS PAR A

Nome da Propriedade: Nome do Proprietrio: Endereo: CEP: Caixa Postal: Fone:

Cidade/Estado: e-mail: Celular: rinrio Dados do Mdico Vete E-mail:

Data da colheita: eita: Responsvel pela colh

amostra: envio: 3Responsvel pelo Endereo: Municpio/UF: E-mail:

n nal Registro Profissio n Telefone: Fax:

Alguns pontos importantes no preenchimento da Requisio de Exames Para Sndrome Neurolgica

Municpio/UF: ( Telefone: ( Fax:

/____/____ ____________,____ __________ ________________ ________________ mbo Assinatura e cari

Pontos importantes no preenchimento da Requisio de Exames

ementar Adota alimentao supl

Data da colheita: eita: Responsvel pela colh

RUMINANTES, EQUDEOS E SUDEOS

5. Exames b) Pesquisa direta

6. Temperatura da amostra para transporte

7. Tempo crtico para chegada ao laboratrio

Colheita de sangue com Sistema a Vcuo

Colheita de sangue com Seringa e Agulha

BOAS PRTICAS DE COLHEITA PARA PREVENO DA HEMLISE

BOAS PRTICAS PS-COLHEITA PARA PREVENO DA HEMLISE

TABELA DE MEDIDAS DE AGULHAS

TUBOS COM ANTICOAGULANTE

TUBOS SEM ANTICOAGULANTE

19G 1 19G 1 1/4

TUBOS PARA COLHEITA DE SANGUE

18G 1 18G 1 1/2

22G 1 22G 1 1/4

0,80 X 25 0,80 X 30 0,80 X 40

21G 1 21G 1 1/4 21G 1 1/2

Exames Bioqumicos e toxicolgicos

Isolamento Biologia Molecular

Isolamento Biologia Molecular

Cogulo Soro separado por Gel

Sangue total Plasma Anel de Leuccitos

Sangue total Plasma Anel de Leuccitos

Sangue total Plasma

Centrifugao (1500-2000g/10min), no mnimo 30 minutos e no mximo 2 horas aps a colheita

Centrifugao No mximo em at 2 horas aps a colheita

Principais doenas de pele e mucosas e espcies acometidas

Material para colheita de amostras para diagnstico de doenas de pele e mucosas

Suabes e meios conservantes para transporte

Agulha para colheita de sangue a vcuo

Lmina para microscopia

Coletor de raspado esofgico-farngeo (copo de Probang)

// , ______ mbo Assinatura e cari