TUBOS MLTIPLOS-C.

perfringens

!quecimento do ()C* em .gua fer/ente e e"friamento em .gua fria !mo"tra (aquecida a #$%C &or '0 minuto")

!dio de 0,4m, da "oluo de citrato f0rrico amoniacal #1 com "ulfito de "2dio 41

+nocular '0m, em cada tu-o

()C*
+ncu-ar a 5$35#%C &or 46 7 58

)e"ultado (9)4 meio enegrecido: )e"ultado du/ido"o4 meio tur/o

+nocular 0,'m, em cada tu-o em &rofundidade

)e"ultado (3)4 de"cartar tu-o"

,eite torna""olado (,itmu" *il;)

+ncu-ar a 5$35#%C &or 46 7 58

)e"ultado (9)4 formao de co.gulo, acidificao (cor ro"a) e g." (rom&imento do co.gulo)

Fluxograma de identificao e quantificao de Clostridium perfringens (CETESB, 2004)

MEMBRANA FILTRANTE

!mo"tra

<re&aro de dilui?e" decimai"4 3' ('0 : '032: outra")

Filtrao de 'm, de cada tu-o de cada diluio

Filtrao de 'm, ou mai"

m3FC

+ncu-ao &or 24 7 28 a 44,$ 7 0,2%C

)e"ultado (9)4 Col@nia" aAui" (Coliforme" termotolerante") Selecionar trB" col@nia" &ara re&icagem em tu-o" e"&ecCfico"

EC3*DE

+ncu-ao &or 24 7 28 a 44,$ 7 0,2%C

Fluore"cBncia3DF (5G$nm)4 <re"ena de E. coli

Fluxograma de identificao e quantificao de coliforme" termotolerante" e Escherichia coli &ela t0cnica da mem-rana filtrante (!<=!, '>>6: CETESB, 2004)

COLILERT

!mo"tra

<re&aro de dilui?e" decimai"4 ('03': '032: outra")

!dicionar '00m, de cada reci&iente de cada diluio

!dicionar '00m, de cada reci&iente de cada diluio

*i"tura do "u-"trato Colilert com a amo"tra e dilui?e" em reci&iente e"t0ril

!dicionar na" cartela" e "elar ra&idamente

+ncu-ao &or 248 a 5$35#%C

Colorao amarela inten"a4 Coliformes totais Calcular o H*<I'00m, na ta-ela Fluore"cBncia3DF (5G$nm)4 Escherichia coli. Calcular o H*<I'00m, na ta-ela

Fluxograma de identificao e quantificao de coliforme" totai" e Escherichia coli &ela t0cnica do "u-"trato cromogBnico (!<=!, '>>6: CETESB, 2004)

CONTAGEM PADR O DE BACT!RIAS "ETER#TROFAS T!CNICA DE $ERTIDO EM PLACA %POUR PLATE&

!mo"tra

<re&aro de dilui?e" decimai"4 ('03': '032: outra")

Fundir e manter a 4$%C em -an8o3 maria o" tu-o" com !gar &ara contagem &adro
(e"&eJar o conteKdo de um tu-o em uma &laca

+nocular 'm, de cada diluio

+nocular 'm, da amo"tra

<laca" de <etri com !gar &ara contagem &adro (du&licata da amo"tra e de cada diluio)

=omogeneiAar faAendo mo/imento" circulare" em forma de 6 E"&erar "olidificar

+n/erter a" &laca" e incu-ar &or 46 7 58 a 5$35#%C

Contagem da" col@nia" (eterminao da *0dia e C.lculo do" re"ultado" (DFCIm,)

Fluxograma de identificao e quantificao de -act0ria" 8eterotr2fica" &ela t0cnica de <our <late (CETESB, 2004)

MEMBRANA FILTRANTE-Salmonella s'

!mo"tra ($,)

Filtrao em mem-rana de 0,4$Lm e '42mm de diMmetro

!<T (200m,) 248I5$35#%C

+nocular 'm,

Caldo )a&&a&ort3Fa""iliadi" ('00m,)

+ncu-ar &or 243468 5$35#%C Em cada &erCodo de tem&o de""e realiAar a" eta&a" "eguinte"

!gar Ferde Bril8ante (col@nia" ro"a" e /ermel8a") +ncu-ar 248I5#%C

!gar N,( (col@nia" /ermel8a" com ou "em =2S) +ncu-ar 248I5#%C

!gar nutriente (248I5#%C)

<ro/a" -ioquCmica" (!gar TS+ e caldo li"ina) +ncu-ar &or 248 a 5#%C Fluxograma de i"olamento e identificao de Salmonella "& em amo"tra" de .gua &ela t0cnica da mem-rana filtrante (CETESB, '>>5)

CONTAGEM PADR O DE BACT!RIAS "ETER#TROFAS T!CNICA DE ESPAL"AMENTO EM PLACA %SPREAD PLATE&

!mo"tra

<re&aro de dilui?e" decimai"4 ('03': '032: outra")

+nocular 0,$m, de cada diluio em &laca" di"tinta"

+nocular 0,$m, da amo"tra

<laca" de <etri com !gar &ara contagem &adro (du&licata da amo"tra e de cada diluio)

=omogeneiAar com a ala de (rigal";i faAendo mo/imento" circulare" E"&erar "ecar

+n/erter a" &laca" e incu-ar &or 46 7 58 a 5$35#%C

Contagem da" col@nia" (eterminao da *0dia e C.lculo do" re"ultado" (DFCIm,)

Fluxograma de identificao e quantificao de -act0ria" 8eterotr2fica" &ela t0cnica de S&read <late (!<=!, '>>6)

TUBOS MLTIPLO- COLIFORMES TOTAIS ( TERMOTOLERANTES E E.COLI

!mo"tra <re&aro de dilui?e" decimai"4 ('03': '032: outra")
+noculao de 'm, de cada tu-o de cada diluio

+noculao de '0m, e 'm,

Caldo lacto"ado (com &Kr&ura de -romocre"ol ou tu-o" de (ur8am)4 cinco tu-o" de cada /olume e diluio adotado"

+ncu-ao &or 24 7 28 a 5$ 7 0,$%C

)e"ultado (9)4 Tur/ao com acidificao do meio (mudana de roxo &ara amarelo4 &Kr&ura de -romocre"ol) e &roduo ou no de g." (no" tu-o" de (ur8am)
+nocular dua" alada" de cada tu-o em um tu-o e"&ecifico

)e"ultado (3)4 )eincu-ar &or mai" 24 7 28 a 5$ 7 0,$%C

)e"ultado (9)
+nocular dua" alada" de cada tu-o em um tu-o e"&ecifico

)e"ultado (3)4 de"cartar tu-o"

Caldo lacto"ado /erde -ril8ante -Cli" a 21 46 7 58 a 5$ 7 0,$%C

+nocular dua" alada" de cada tu-o em um tu-o e"&ecifico

)e"ultado (3)4 de"cartar tu-o"

)e"ultado (9)4 Tur/ao e &roduo ou no de g." (no" tu-o" de (ur8am) <re"ena de Coliforme" Totai"
+nocular dua" alada" de cada tu-o em um tu-o e"&ecifico

EC3*DE &or 24 7 28I44,$ 7 0,2%C

Tur/ao4 <re"ena de Coliforme" Termotolerante" Fluore"cBncia "o- 5G$nm4 <re"ena de E. coli

Fluxograma de identificao e quantificao de coliforme" totai", coliforme" termotolerante" e Escherichia coli &ela t0cnica do" tu-o" mKlti&lo" (!<=!, '>>6: CETESB, 2004)