Apostila Curso de Inverno

1 curso de i nverno
tpicos em
fisiologia
comparada
12 a 30 jul 2004
departamento de fisiologia
instituto de biocincias - usp
http://www.ib.usp.br/cursodeinverno
1 curso de inverno tpicos em fisiologia comparada i
idealizao
alunos de ps-graduao do
departamento de fisiologia ib/usp
elaborao
adriano alonso pereira da cunha
andr frazo helene
james fernando malta da silva
jessica ruivo maximino
jos eduardo de carvalho
marcelo alves da silva
merari de ftima ramires ferrari
rodrigo pavo
apoio
pr-reitoria de cultura e extenso
comisso de ps-graduao
instituto de biocincias
agradecimentos
gustavo eiji kaneto
gisele ortoli
1 curso de inverno tpicos em fisiologia comparada ii
ndice
NEUROTRANSMISSORES...................................................................................................1
RECEPTORES E SINALIZAO CELULAR........................................................................3
ROTEIRO DE AULA PRTICA..........................................................................................5
EVOLUO DO SISTEMA NERVOSO.................................................................................6
MECANISMOS CENTRAIS DO CONTROLE CARDIOVASCULAR....................................12
ROTEIRO DE AULA PRTICA........................................................................................15
HIPERTENSO E EXERCCIO FSICO: UMA BREVE INTRODUO...............................19
CONSIDERAES SOBRE A NEUROFISIOLOGIA DA MEMRIA..................................22
ASPECTOS FISIOLGICOS DAS TOXINAS DE ANIMAIS AQUTICOS E TERRESTRES
.............................................................................................................................................29
AS TOXINAS DE ANMONAS DO MAR COMO FERRAMENTAS PARA ENTENDER A
FISIOLOGIA DE RGOS, TECIDOS E SISTEMAS..........................................................32
ROTEIRO DE AULA PRTICA........................................................................................35
A DEPRESSO METABLICA NOS ANIMAIS..................................................................37
TERMORREGULAO EM INSETOS................................................................................40
A RANA E O RATO: UM ESTUDO COMPARATIVO DAS CAPACIDADES METABLICAS
EM TECIDOS MUSCULARES DE DUAS ESPCIES DE VERTEBRADOS .......................43
ECOFISIOLOGIA DE LAGARTOS......................................................................................49
COMPORTAMENTO E FISIOLOGIA DE FORMIGAS ATTA ..............................................51
RELGIO BIOLGICO DE MAMFEROS: MECANISMOS MOLECULARES E CONTROLE
DA RITMICIDADE INTERNA DO ORGANISMO. ................................................................54
SISTEMA DIGESTRIO......................................................................................................56
MECANISMOS DE OSMORREGULAO EM ANIMAIS. ..................................................59
EXERCCIO TERICO-PRTICO....................................................................................63
1 curso de inverno tpicos em fisiologia comparada 1
NEUROTRANSMISSORES
Lotte Marianne Pires Renault
Laboratrio de Neurocincias e Comportamento
Neurotransmissores (NTs) so mensageiros qumicos utilizados na comunicao entre clulas
do sistema nervoso. Podem ser categorizados por sua origem / estrutura qumica (ex: monoaminas,
peptdeos).
Neurotransmissores podem ser excitatrios ou inibitrios, no que concerne s suas aes
imediatas sobre a clula-alvo. Entre os mais comuns NTs excitatrios, esto glutamato e acetilcolina.
Aes inibitrias so mediadas por GABA e peptdeos (como opiides). No entanto, o resultado final
destas aes no necessariamente a ativao ou inibio da projeo.
Como exemplo, podemos considerar que a ao de uma projeo liberando NTs excitatrios,
como glutamato, sobre interneurnios inibitrios, resultar na ativao destes e em ao inibitria
sobre as reas-alvo destes interneurnios. Por outro lado, a ao de uma projeo liberando opiides
(portanto, inibitria) sobre interneurnios inibitrios GABArgicos resulta na inibio destes e
conseqente liberao das reas-alvo dos interneurnios.
O resultado final destas aes um mosaico de ativaes / inibies. Isto ocorre em diversos
nveis. Deve-se considerar que uma clula recebe uma enorme quantidade de sinapses, e que o
resultado final sobre sua atividade uma somatria determinada pelo balano de efeitos
intracelulares e pela posio das projees recebidas (sabe-se, por exemplo, que sinapses mais
distantes do corpo celular tm efeito mais pronunciado sobre o disparo final, o que denominado
cable effect). Alm disso, ao nvel de um ncleo, a atividade final pode resultar em modulao do
disparo basal (em reas que exibem disparo rtmico espontneo, os chamados marcapassos), ativao
/ inibio generalizada, ou inibio parcial paralelamente ativao seletiva de algumas reas dentro
do ncleo. Ou seja, ativao e inibio convivem lado a lado no SNC. Porque a inibio de uma rea
dentro de um ncleo, ou mesmo de regies como um todo, seria interessante?
A comunicao neuronal resulta na percepo sensorial, codificao de informaes e
planejamento de aes. Estes processos so maciamente dependentes da ativao e inibio de
clulas ao longo de diferentes vias por diversos NTs. Sabe-se que informaes so mantidas no SNC
pelo reforo das sinapses em projees neuronais, e que sua codificao dependente de como estes
neurnios disparam ao longo do tempo. Estas projees formam uma gigantesca rede, o que permite
a ocorrncia de associaes.
Se necessrio ao indivduo, no entanto, comparar a situao em que se encontra
presentemente com outras vivenciadas no passado que contenham elementos semelhantes,
necessrio que apenas uma parcela desta rede seja ativada, enquanto que muitas outras seriam
mantidas silentes pela ao de interneurnios inibitrios. De fato, estudos de neuroimagem em tempo
real em fatias cerebrais demonstraram que o hipocampo, uma rea do SNC que pea crucial no
processamento de memria, permanece sob inibio a maior parte do tempo, e apenas sinais
excitatrios recorrentes atravs de uma das suas maiores aferncias levam sua subseqente
ativao. Porm, esta ativao no generalizada: algumas reas so mantidas sob inibio,
enquanto outras encontram-se ativas. Ou seja, ocorre uma ativao seletiva. Ativaes seletivas em
regies do cerebelo, gnglios da base e medula tambm esto relacionadas preciso de
movimentos. Na percepo visual, o processo de inibio lateral permite a definio das bordas de
uma imagem. Assim, a presena de atividade inibitria est na base da coordenao refinada da
atividade nervosa. Por outro lado, a liberao de interneurnios inibitrios previne ativaes
patolgicas, como atividade epilptica. Alm disso, devemos recordar que o custo energtico da
atividade neuronal representa uma porcentagem alta do metabolismo basal de um indivduo, o que
torna interessante queda neste gasto, mantendo uma parte deste sistema silente.
A coordenao refinada definida por este mosaico de ativao / inibio foi definida ao longo
de um lento processo de evoluo do sistema nervoso. Sabe-se que alguns NTs, como acetilcolina,
GABA, serotonina e peptdeos (como substncia P) j se encontravam presentes em estgios iniciais
da escala evolutiva. Alguns receptores, como o colinrgico do tipo nicotnico, com seus caractersticos
sete domnios transmembrnicos, so altamente conservados ao longo da escala evolutiva. Em
aneldeos e artrpodes, cujo sistema nervoso ganglionar, possvel observar neurnios ativados e
inibidos por diferentes NTs. Em um estudo clssico, Kandel e col. mapearam um circuito neural em
neurnios gigantes de lula, demonstrando a modulao sobre clulas marcapasso e controle inibitrio.
Sabe-se que a modulao de gnglios marcapasso pela rede de interneurnios j ocorre em cnidrios.
A necessidade por esta modulao refinada tornou-se ainda maior, conforme aumentou o
tamanho do sistema nervoso, ao longo da escala evolutiva, com o processo de encefalizao, o
agrupamento de clulas em ncleos, at o surgimento dos sistemas nervosos de vertebrados. Neste
grupo, o agrupamento de gigantescas populaes de neurnios em ncleos, respondendo a mltiplos
sistemas de neurotransmissores, aumentou consideravelmente a flexibilidade de aes, percepo
sensorial e capacidade de arquivamento de informaes. Em uma comparao algo grosseira, poder-
se-ia dizer que, em sistemas mais complexos, a ativao macia sinalizaria um estado de alerta,
enquanto ativaes mais seletivas e precisas levariam seleo dos sinais sensoriais.
RECEPTORES E SINALIZAO CELULAR
Merari de Ftima Ramires Ferrari
Laboratrio de Neurotransmisso
Este tpico abordar algumas das possveis vias de transmisso da informao de uma clula
para a subseqente, assim como a sinalizao celular com nfase no sistema nervoso central. Sem
pretenso de esgotar o assunto, trataremos tambm das vias de sinalizao intracelular at a
regulao da transcrio gnica, assim como interaes entre receptores e alguns sistemas de
neurotransmisso. Alm de discutirmos alguns fatores que modulam a resposta final, particularmente
no que diz respeito regulao neural da presso arterial.
Para que o transmissor obtenha sucesso em transmitir a informao para as clulas
subseqentes, necessria a interao deste com seu receptor especfico.
Existem basicamente 4 tipos de receptores: os ionotrpicos, os metabotrpicos, os acoplados
a enzimas (como a tirosina-quinase) e os intracelulares
A forma de ao destes receptores varia enormemente:
1- Os ionotrpicos so mais rpidos e geralmente atuam na despolarizao celular embora
tambm possam agir modulando a transcrio gnica.
2- Os receptores acoplados protena G (metabotrpicos) desencadeiam cascatas
intracelulares envolvendo a adenilil ciclase ou a fosfolipase C.
3- Os receptores associados a enzimas, seja com atividade enzimtica intrnseca ou
acoplados tirosina quinase, tambm desencadeiam cascatas intracelulares podendo
fosforilar as MAP quinases e agir sobre fatores de transcrio.
4- Os receptores intracelulares so ativados por substncias capazes de atravessar a
membrana citoplasmtica como os estrgenos e o xido ntrico.
Todos os receptores mencionados podem atuar tanto na resposta rpida, que a
despolarizao celular, e/ou agir nas respostas a longo prazo, atravs de regulao da transcrio
gnica, por meio dos fatores de transcrio.
A localizao dos receptores muito importante para a eficincia da transmisso do estmulo.
Existem os receptores na membrana ps e pr-sinptica, alm dos j mencionados intracelulares.
Os receptores na membrana ps-sinptica podem transmitir a resposta ao ncleo das clulas,
regular a atividade de receptores vizinhos e/ou regular a despolarizao neuronal. Na membrana pr-
sinptica, os receptores podem controlar a liberao de neurotransmissores, e os receptores
intracelulares medeiam a resposta a longo prazo.
A presena de receptores muito importante para a interao da clula com o meio em que
se encontra. Desta forma, todos os grupos celulares conhecidos possuem molculas receptoras de
alguma natureza. Existem muito poucos estudos filogenticos com nfase nos diversos tipos de
receptores. Sabe-se que receptores ionotrpicos esto presentes em clulas pertencentes aos trs
grupos filogenticos (eucariontes, bactrias e arqueobactrias). Os estudos da evoluo de receptores
metabotrpicos restringem-se a poucos trabalhos que demonstraram protenas com 7 domnios
transmembrnicos e que se utilizam de fosforilao para transmitir o sinal, anlogas aos receptores
acoplados protena G, identificadas em protozorios e em metazorios ancestrais.
Bibliografia:
Receptores Acoplados Protena G:
Bennett, M.R. (2000) The concept of transmitter receptors:100 years on. (2000) Neuropharmacology
39:523-540.
Milligan, G. & White, J .H. (2001) Protein-protein interations at G-protein-coupled receptors. Trends in
pharmacological sciences 22(10): 513-518.
Clapham, D. E. & Neer, E.J . (1997) G protein subunits. Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol. 37:167-203.
Receptores I onotrpicos:
Engelman H.S. & MacDermott, A.B. (2004) Presynaptic ionotropic receptors and control of transmitter
release. Nat. Rev. Neurosci. 5(2):135-45.
Evoluo de Receptores:
Martinac,B. & Kloda, A. (2003) Evolutionary origins of mechanosensitive ion channels. Prog. Biophys.
Mol. Biol. 82(1-3):11-24.
Parmentier, M.L.; Galvez T.; Acher F.; Peyre B.; Pellicciari R.; Grau Y.; Bockaert J . & Pin, J .P. (2000).
Conservation of the ligand recognition site of metabotropic glutamate receptors during
evolution. Neuropharmacology 39(7):1119-31.
New, D.C. & Wong, J .T. (1998) The evidence for G-protein-coupled receptors and heterotrimeric G
proteins in protozoa and ancestral metazoa. Biol. Signals Recept. 7(2):98-108.
Fatores de Transcrio:
Papavassilov, A.G. (1995) Transcription factors. N. Engl. J . Med. 332(1):45-47.
Wang, L.L.; Chan, S.H.H. & Chan, J .Y.H. (2001) Fos protein is required for the re-expression of
angiotensin II type 1 receptor in the nucleus tractus solitraiui after baroreceptor activation in
the rat. Neuroscience 103(1): 143-151.
Revises sobre o controle cardiovascular pelo SNC:
Lawrence, A.J . & J arrott,B. (1996) Neurochemical modulation of cardiovascular control in the nucleus
tractus solitarius. Progress in Neurobiology 48:21-53
van Giesbergen, P.L.M.; Palkovits, M. & de J ong, W. (1992) Involvement of neurotransmitters in the
nucleus tractus solitarii in cardiovascular regulation. Physiological Reviews 72(3):791-824.
Sites relacionados:
http://www.cis.upenn.edu/~krice/receptor.html
http://www.gene-regulation.com
http://www.cerebronosso.bio.br
ROTEIRO DE AULA PRTICA
AVALIAO DE NEUROTRANSMISSORES E SEUS
RECEPTORES
Merari de Ftima Ramires Ferrari
1. Analisar o padro de marcao dos seguintes neurotransmissores em tecido nervoso:
- Tirosina hidroxilase (enzima da cadeia de sntese das catecolaminas
dopamina, noradrenalina e adrenalina).
- Neuropeptdeo Y
- Oxido Ntrico Sintase (enzima que converte l-arginina em citrulina e xido
ntrico, um neurotransmissor no convencional).
- Glutamato
- GABA
- Colina acetil transferase (enzima de sntese da acetilcolina)
- Vasopressina
- Protena Fos (produto do gene de expresso primria c-fos)
2. Observar filmes radioautogrficos com a marcao de receptores no sistema nervoso
central:
- Receptor alfa-2 adrenrgico
- Receptores Y
- Receptores nicotnicos
3. Observar a marcao do RNAm em filme radioautogrfico:
- Tirosina hidroxilase
- Neuropeptdeo Y e seus receptores
- Oxido ntrico sintase
- Colina acetil transferase
- Receptores nicotnicos
- Protena Fos
Questes para reflexo:
1. Quais as vantagens de estudar o RNA, o neurotransmissor e o receptor?
2. Havendo alteraes em um dos componentes do sistema, haver necessariamente
alterao na resposta final?
EVOLUO DO SISTEMA NERVOSO
Adriano Alonso Pereira da Cunha
Rodrigo Pavo
I NTRODUO
Neste mdulo discutiremos a evoluo do sistema nervoso atravs de uma abordagem
comportamental e neuroanatmica. Sero apresentados experimentos que avaliam as capacidades
sensoriais, motoras e cognitivas de animais de diferentes nveis da escala filogentica. Ao mesmo
tempo em que apresentaremos as estruturas neuroanatmicas que estariam diretamente relacionadas
com essas funes. Uma vez descritos e comparados os sistemas nervosos desses diferentes grupos,
sero apresentadas as teorias mais consistentes sobre seus padres evolutivos.
Antes de iniciarmos a discusso relacionada ao sistema nervoso, faamos uma breve reviso
dos conceitos evolutivos. A evoluo estaria ocorrendo de uma forma natural e no determinada, pois
no sabemos qual ser a caracterstica que ir acrescentar valor adaptativo aos indivduos, ou seja,
quais caractersticas sero filogeneticamente conservadas. Podemos comparar a evoluo a gotas
sucessivas de gua que percorrem caminhos diferentes ao serem jogadas em uma rocha, no se pode
prever qual caminho elas iro percorrer e nem onde iro cair devido a mudanas na umidade, vento,
etc. Cada caminho diferente, nessa analogia, seria uma linhagem que pode ter originado os animais
atuais, mostrando toda a diversidade de seres que existem hoje.
Cada organismo tem feies neuroanatmicas distintas que, em ltima instncia, refletem sua
relao com o meio. O estudo evolutivo do sistema nervoso feito essencialmente atravs de
evidncias indiretas. Isso porque esse sistema no fossilizvel e o comportamento de seres extintos
pode apenas ser inferido. As caractersticas do sistema nervoso desses seres, como complexidade dos
circuitos, conexes sinpticas, organizao cortical e subcortical so inacessveis; o que observvel
o volume da caixa craniana e as impresses nela gravadas. Assim, o estudo do sistema nervoso e do
comportamento baseiam-se na premissa de que capacidades funcionais de sistemas filogeticamente
mais antigos so refletidas em animais originrios dessas linhagens primitivas.
Imagem de crnio fossilizado de Captorhinus aguti: informaes sobre o
sistema nervoso so restritas em registros dessa natureza.
Vale a pena lembrar que essa concepo sobre animais primitivos e derivados, que parece
estar intimamente relacionada com a capacidade de processar informao e de agir favoravelmente
para beneficio individual, no pode ser diretamente interpretada como superioridade. Uma pequena
massa cerebral pode ser mais vantajosa do que uma grande, dependendo das circunstncias
envolvidas. Um crebro grande e capaz de lidar com muita informao tem gasto energtico maior,
ampla necessidade de O
2
. Limitaes a esses fatores podem beneficiar animais com crebros
pequenos e mais econmicos.
Dois princpios nortearam a configurao dos sistemas nervosos dos grandes grupos de
animais: (1) a capacidade de integrar mais informao sensorial e motora e (2) o sistema ter
dimenses reduzidas, com menor nmero de neurnios envolvidos. O resultado da atuao conjunta
desses padres resultou em sistemas eficientes, capazes de processar informaes diversas e de gerar
comportamentos complexos.
Definidos os elementos bsicos da evoluo do sistema nervoso, apresentaremos agora uma
discusso filogentica do tema, apresentando alguns grupos, suas estruturas enceflicas e
comportamentos.
Um ser vivo que capaz de coletar as informaes do meio em que vive, e, em seguida,
demonstrar uma resposta interna ou externa. Esse ser vivo apresentaria portanto ao menos um
sistema sensorial e um sistema efetor. Esse ser vivo poderia ser um homem, que ao sair de casa,
entra em contato com vento, e ao sentir essas condies do meio, efetua respostas, sejam estas
internas (apresenta um temor involuntrio e piloereo) ou externas (decide voltar para o interior de
sua casa para buscar um agasalho). Mas no, quem descreveu esse ser vivo no estava se referindo a
um ser humano, mas sim a um organismo unicelular, uma ameba. O estmulo era substncia p que
est usualmente associada a bactrias, das quais as amebas se alimentam. A resposta foi citocinese,
os pseudpodos da ameba direcionavam-se no sentido do gradiente de concentrao da substncia p,
ou seja, em direo a bactria. Integrao funcional entre estmulo e resposta, funo exercida pelo
sistema nervoso. Porm, o termo sistema nervoso no pode ser adotado para esse organismo. Esse
termo s ser aplicvel em nveis superiores da escala filogentica.
O primeiro organismo a apresentar um sistema nervoso verdadeiro pertenceu ao grupo dos
cnidrios. considerado um sistema nervoso verdadeiro porque apresenta clulas especializadas para
a conexo entre reas diferentes, os neurnios. O sistema desses animais permitiu uma comunicao
efetiva entre as diferentes partes do animal. Apresenta alta densidade de clulas sensoriais,
principalmente nos tentculos, e integra estmulos apresentados aos quimiorreceptores com respostas
musculares, proporcionando a esse animal uma movimentao adequada no sentido de alcanar
sucesso em suas atividades.
Dentro dos invertebrados, um grupo bastante interessante o dos insetos himenpteros.
Peguemos por exemplo, a formiga. So animais que apresentam alto grau de cefalizao, com
conexes razoavelmente densas para receptores sensoriais (existem receptores complexos acoplados
a olhos compostos altamente eficientes pelo menos nas castas aladas, rainha e macho). Alm disso,
estes animais apresentam organizao social complexa, com a existncia de diversas castas com
tarefas especficas. Toda essa complexidade foi possibilitada pelo desenvolvimento de uma estrutura
nervosa ampla e eficiente.
O anfioxo pertence ao grupo do protocordados, grupo que considerado originrio dos
cordados. O sistema nervoso desse animal bastante reduzido: o encfalo minsculo e est ligado
rgos sensoriais rudimentares ou ausentes. Os estmulos processados por esse sistema so
essencialmente tteis; no consegue reconhecer comida ou perigo distncia.
Os cordados (grupo que inclui todos os vertebrados e grupos mais primitivos como
urocordados e cfalocordados) apresentam a maior riqueza de estruturas neuroanatmicas e de
comportamentos. Grupo originrio de ancestral invertebrado (no se sabe de qual grupo, diversas
teorias consistentes afirmam a origem em diferentes grupos), teve obviamente alterao do seu
sistema nervoso. Organizaes neuronais do grupo filogeneticamente mais antigo (invertebrado)
foram reorganizadas e possivelmente suplementadas por estruturas adicionais. Os vertebrados
apresentam um plano nervoso comum, com concentrao de reas sensoriais na cabea
(=cefalizao, j presente no ancestral invertebrado) e organizao de tecido nervoso juntamente ao
eixo cordal (estrutura que mais adiante na escala filogentica ser denominada medula espinhal).
Os sistemas nervosos dos vertebrados foram alterados progressivamente na escala
filogentica. Apesar de contarmos com um registro fssil incompleto para propor estudos evolutivos
mais consistentes, provvel que tenham existido ancestrais em que os sentidos de olfato e viso
surgiram consecutivamente, permitindo que o sistema percebesse estmulos distantes. So
desconhecidos tambm os ancestrais em que apareceram os sentidos de gustao, equilbrio, dor e
temperatura. Sabe-se que a audio apareceu mais recentemente.
Os peixes atuais mais primitivos, os ciclostomados, tem um sistema nervoso com o padro
bsico de componentes motores e sensoriais, tronco cerebral, corpo estriado e telencfalo. Conforme
os organismos se tornaram mais complexos (complexidade aqui pode ser entendida como um maior
nmero de palavras para se descrever o animal), cada nova capacidade sensorial teve que ser
integrada centralmente com as outras sensaes. E o encfalo teve seu tamanho aumentado. Os
peixes primitivos tornaram-se predadores mveis. Essa maior mobilidade deve ter exercido presso
evolutiva para o aumento de algumas regies do encfalo. O sistema nervoso e o comportamento dos
peixes eram simples, mas superior ao dos grupos primitivos devido a maior quantidade de informao
e de movimento que estava sendo integrada. Acredita-se que as alteraes observveis no sistema
nervoso de peixes caverncolas (que tiveram reduo das reas relacionadas com o processamento
visual, como o tecto ptico, e aumento de reas relacionadas com o olfato, como o trato olfativo e as
reas telenceflicas associadas) sejam semelhantes s alteraes que teriam ocorrido nesses peixes
primitivos que se tornaram mveis: a alterao do padro de estmulos e respostas que tem que ser
processado diferenciada, e o sistema acaba sendo moldado pelo processo evolutivo para atender
esse processamento e aumentar a eficincia. como se houvesse uma conversa entre o processo
evolutivo e os sistemas sensoriais e sistema nervoso.
Representao de encfalos de vertebrados: peixe (bacalhau), anuro (sapo), rptil (crocodilo), ave
(ganso) e mamferos (gato e homem)
Os anfbios foram o grupo vertebrado que conquistou ambientes terrestres. As barbatanas
transformaram-se em membros. O encfalo ainda era pequeno, simples e cilndrico. Olfato continuou
sendo importante e a viso era til para reconhecimento de padres. Tato, equilbrio e audio foram
retidas.
Os rpteis apareceram posteriormente e desenvolveram ampla gama de estruturas. Alguns
desenvolveram uma armadura para proteo, como nas tartarugas; outros atingiram tamanhos
enormes, como os dinossauros. Suas respostas comportamentais eram estereotipadas e limitadas,
mas seus encfalos tubulares eram capazes de processar maior integrao sensrio-motora do que o
de anfbios. Uma pequena quantidade de neocrtex foi adicionada ao paleocrtex. Alguns rpteis
podiam agarrar objetos, usar os membros como armas e ficar de p e correr sobre as pernas
traseiras. O julgamento dos rpteis em resposta s necessidades de comida e de defesa contra
inimigos era superior a dos anfbios. Os arcossauros, dinossauros e seus descendentes, os crocodilos e
aves, em muitos aspectos eram superiores aos rpteis modernos como lagartos e cobras, em
relao ao tamanho do crebro e comportamento.
Os rpteis dependem principalmente da viso e do olfato, pouco da audio, para informao
distante. Muito dos dados da viso so processados na retina e no tronco cerebral, e relativamente
menos no prosencfalo, dessa forma o crebro propriamente dito ainda pequeno em relao aos
mamferos.
Rpteis da linhagem que deu origem aos mamferos, os sinpsidas, de tamanho prximo ao
de um camundongo, foi um dos primeiros grupos rpteis a aparecer. Eles esto extintos agora, e j
tinham passado sua densidade e diversidade mxima antes de aparecerem os primeiros dinossauros.
Mais tarde, os terpsidas surgiram. Eles existiram durante o tempo desde os primeiros rpteis at os
mamferos, e tinham caractersticas anatmicas desses dois grupos. Em um mundo ocupado pelos
rpteis andando durante o dia e descansando durante a noite, sinpsidas e terpsidas tornaram-se
noturnos. Eles expandiram seus sentidos de olfato e audio distncia, pois eles andavam
geralmente noite. Viso por cones provavelmente regrediu parcialmente, mas os bastonetes foram
preservados, assumindo o mesmo padro de viso observado em mamferos modernos. A melhora da
audio necessria para a sobrevivncia resultou em aumento da rea responsvel pelo
processamento desse tipo de informao, e por uma encfalo maior com sinapses no tronco cerebral,
tlamo e crebro propriamente dito. O olfato, porm, diferenciado em relao aos demais sentidos,
pois no tem retransmisso com o tronco cerebral e tlamo. Os animais fazendo a transio entre
rpteis e mamferos tiveram que integrar os sentidos de olfato, viso e audio, e mais uma vez
houve presso para aumentos relativos e absolutos do crebro.
As aves originaram-se de grupos reptilianos, podem ser considerados rpteis com penas ao
invs de escamas crneas. Seus encfalos so relativamente maiores aos de rpteis do mesmo
tamanho, mas esse aumento no de neocrtex (relativo aos mamferos). O neocrtex primordial das
aves pode ser incorporado a ncleos telenceflicos subcorticais. A estratgia evolutiva observada nas
aves diverge da estratgia dos mamferos.
A maior parte das aves tem boa viso, mas olfato menos importante para criaturas
voadoras do que para criaturas terrestres. Os centros visuais apresentam-se aumentados, assim como
reas relacionadas coordenao do vo. Tecido neural adicional foi necessrio para o
desenvolvimento de comportamentos definidos geneticamente de naturezas complexas. A habilidade
dos pssaros para voar milhares de quilmetros para refgios de inverno e para voltar toda primavera
um exemplo desse comportamento inato, assim como a construo de ninhos, comportamentos de
corte e hbitos alimentares.
Com o declnio do nmero de rpteis, mamferos placentrios de hbito insetvoro ganharam
espao. Esses animais e os que deles derivaram tornaram-se diurnos. A necessidade de reintegrar o
sistema visual de alto desempenho e o novo desenvolvimento dos cones resultaram em aumento de
entrada de informaes, e um encfalo maior. Mamferos mantiveram o tamanho do crebro estvel
durante longo perodo.
Essas informaes geram uma impresso de evoluo progressiva, de que animais cada vez
mais desenvolvidos foram originados conforme o passar do tempo. A evoluo, porm, seguiu
caminhos diferenciados, no s progressivamente (pelo aumento da capacidade integrativa sensrio-
motora), mas tambm regressivamente (reduo dessa capacidade) e estavelmente, de acordo com
as presses seletivas exercidas pelo meio. Existem animais que mantiveram sua estrutura bsica por
longos perodos de tempo, mesmo que algumas delas tivessem encfalos pouco desenvolvidos, mas
que eram capazes de manter-se em ambientes diferentes, resistentes e flexveis a alteraes efetivas
do meio.
Os mamferos possuem hoje grande diversidade e habitam os mais variados ambientes com
uma ampla gama de comportamentos. O encfalo de mamferos aumentou enormemente, permitindo
que o homem tenha se tornado o vertebrado dominante no planeta, mas o aumento do tamanho total
no significa o mesmo tenha ocorrido com cada parte. A maioria dos mamferos no-humanos tem um
sistema olfatrio aumentado medido pelo tamanho do bulbo olfatrio, cheirar relativamente mais
importante para esses animais do que para os primatas mais prximos ao homem, nos quais essa
rea regrediu. Em seres humanos temos uma regio neocortical muito desenvolvida, acompanhada
por uma expanso do cerebelo e tronco.
Bibliografia:
Sarnat, B H & Netsky M G (1981). Evolution of Neurvous System. Oxford University
Press.
Maturana H R & Varela F J (1988). The Tree of Knowledge: The biological roots of
Human Understanding. New Science Library Shambhala.
Bullock T H (1977). Introduction to Nervous Systems. W.H. Freeman and Company
Anderson P A V (1989). Evolution of the First Nervous Systems. Plenum Press.
Sites
http://www.ib.usp.br/~gfxavier/geoclima.html (texto sobre evoluo utilizado no curso
Fisiologia I do curso de Biologia)
http://www.fortunecity.com/campus/biology/752/snc.htm (Anatomia Comparada do Sistema
Nervoso Central Humano e de Ratus norvegicus)
MECANISMOS CENTRAIS DO CONTROLE
CARDIOVASCULAR
Jessica Ruivo Maximino
1. INTRODUO
A perfuso tecidual garantida pela manuteno da fora motriz da circulao em nveis
adequados e razoavelmente constantes ao longo de toda a vida dos indivduos, estejam eles em
repouso ou desenvolvendo diferentes atividades comportamentais. Os nveis de presso arterial (PA),
gerados pela atividade cardaca e vascular so controlados por diversos sistemas inter-relacionados
que realizam funes especficas.
Assim, conhece-se alguns mecanismos de ajuste da PA:
- Mecanismo de controle a curto-prazo da PA (Mecanismos neuro-humorais)
- Mecanismos de controle a longo-prazo da PA (Mecanismos de fluidos corporais)
2. CONTROLE DA PRESSO ARTERI AL PELO SI STEMA NERVOSO CENTRAL
O Sistema Nervoso Central (SNC) tem um papel importante na regulao do sistema
cardiovascular, por controlar tanto a atividade do sistema nervoso autonmico quanto a liberao de
fatores hormonais circulantes. O SNC modifica agudamente a PA e os batimentos cardacos,
facilitando a homeostase e as respostas apropriadas ao meio ambiente (WYSS et al
tem um papel fundamental na regulao a curto-prazo da PA.
iniciado em terminaes nervosas localizadas no seio carotdeo e no arco artico, as quais captam
K ., 1990).
W et al
1990) e algumas reas enceflicas parecem ter uma grande importncia na regulao cardiovascular.
envolvido na recepo e integrao de mltiplos processos viscerosensoriais, incluindo o controle
L & J , 1996). Ele o principal
no arco artico, dos quimiorreceptores dos corpos carotdeos e das aferncias provenientes do
(M & R , 1971; IPSKI ., 1975 ; IRIELLO ALARESU
1981).
O NTS influencia o controle cardiovascular atravs de suas projees para ncleos medulares
(OTAKE, 1993), rea postrema (SAPER et al.,1983), locus coeruleus (LC) e ncleos hipotalmicos, como
o ncleo paraventricular do hipotlamo (PVN) (SAWCHENKO & SWANSON, 1982).
Assim, alm do NTS outros centros bulbares esto envolvidos no controle cardiovascular,
como neurnios da poro caudal (CVL) e da poro rostral (RVL) da medula ventrolateral (VLM),
reas da formao reticular nesta regio do SNC. A CVL recebe projees diretas do NTS que, por sua
vez, envia projees inibitrias RVL. A RVL envia projees para os neurnios pr-ganglionares
simpticos na coluna intermdio lateral da medula espinhal exercendo dessa forma, efeito modulatrio
sobre o tono do sistema nervoso simptico (revisado por DAMPNEY, 1994). Essas projees constituem
o barorreflexo, assim, a circuitaria do barorreflexo ativada em decorrncia da variao da PA.
O NTS rico em variedade e quantidade de neurotransmissores, sendo que a participao
destes no controle neural da PA vem sendo muito discutida (VAN GIERSBERGEN et al., 1992; LAWRENCE &
J ARROT, 1996). Mais de trinta neurotransmissores bem como seus respectivos receptores so descritos
no NTS, sendo que o papel funcional de cada um deles ainda no foi adequadamente demonstrado.
Alm disso, possvel que interaes entre sistemas de neurotransmisso neste ncleo ampliem a
capacidade de modulao das respostas que acontecem aps determinado estmulo pressrico.
O LC, localizado na ponte tambm tem participao relevante nas respostas reflexas
autonmicas e neuroendcrinas em decorrncia de alteraes da PA. O LC envia projees para
diversas reas do encfalo e medula espinhal (FOOTE et al., 1983), recebendo aferncias
principalmente da medula oblonga (ASTON-J ONES et al., 1986).
Outro ncleo importante no controle da PA o PVN, localizado bilateralmente ao terceiro
ventrculo, o PVN recebe e envia projees diretas para o NTS podendo modular o processamento
bulbar do controle cardiovascular (SAWCHENKO & SWANSON, 1982). A estimulao deste ncleo pode
causar tanto efeito pressor quanto depressor. O efeito difere para cada rgo alvo. O fato de existir
projees diretas do PVN para a coluna intermdio lateral e do NTS para o PVN, pode-se relacionar
esse circuito com o barorreflexo (SAWCHENKO & SWANSON, 1982).
No SNC diversos mediadores qumicos participam do controle/modulao da PA, tais como as
catecolaminas, o neuropeptdeo Y (NPY), a angiotensina II (Ang II), o gaba, o glutamato, a
vasopressina entre outros.
Referncias Bibliogrficas:
ASTON-J ONES, G., ENNIS, M., PIERIBONE, V.A., NICKELL, W.T., SHIPLEY, M.T. The brain nucleus
locus coeruleus: restricted afferent control of a broad efferent network. Science , 7;234
(4777):734-737, 1986.
CIRIELLO, J . & CALARESU, F.R. Projections from buffer nerves to the nucleus of the solitary tract: an
anatomical and electrophysiological study in the cat. J . Auton. Nerv. Syst., 3(2-4): 299-310,
1981.
DAMPNEY, R.A.L. Functional organization of central pathways regulating the cardiovascular system.
Physiol. Rev., 74(2): 323-364, 1994.
FOOTE, S.L., BLOOM, F.E. & ASTON-J ONES,G. Nucleus locus coeruleus: new evidence of anatomical
and physiological specificity. Physiol. Rev.,63(3): 844-914, 1983.
KUMADA, M., TERUI, N. & KUWAKI, T. Arterial baroreceptor reflex: its central and peripheral neural
mechanisms. Prog. Neurobiol., 35(5):331-61, 1990.
LAWRENCE, A.J . & J ARROTT, B. Neurochemical modulation of cardiovascular control in the nucleus
tractus solitarius. Prog. Neurobiol., 48(1): 21-53, 1996.
LIPSKI, J ., MCALLEN, R.M. & SPYER, K.M. The sinus nerve and baroreceptor input to the medulla of
the cat. J . Physiol., 251(1): 61-78, 1975.
MIURA, M. & REIS, D.J . The paramedian reticular nucleus: a site of inhibitory interaction between
projections from fastigial nucleus and carotid sinus nerve acting on blood pressure. J .
Physiol., 216(2): 441-460, 1971.
OTAKE, K., NAKAMURA, Y. & EZURE, K. Projections from the commissural subnucleus of the solitary
tract onto catecholamine cell groups of the ventrolateral medulla. Neurosci. Lett.,
12;149(2):213-216, 1993.
SAPER, C.B., REIS, D.J . & J OH, T. Medullary catecholamine inputs to the anteroventral third
ventricular cardiovascular regulatory region in the rat. Neurosci. Lett.,11;42(3):285-291,
1983.
SAWCHENKO, P.E. & SWANSON, L.W. Immunohistochemical identification of neurons in the
paraventricular nucleus of the hypothalamus that project to the medulla or to the spinal cord in
the rat. J . Comp. Neurol., 1;205(3):260-272, 1982.
VAN GIERSBERGEN, P.L., PALKOVITS, M. & DE J ONG, W. Involvement of neurotransmitters in the
nucleus tractus solitarii in cardiovascular regulation. Physiol. Rev., 72(3):789-824, 1992.
WYSS, J .M., OPARIL, S. & CHEN, YUI-CHEN The role of the central nervous system in hypertension.
In: Hypertension: Pathophysiology, Diagnosis and Management, edited by J . H. Laragh
and B.M. Brenner. New York: Raven, p.679-701, 1990.
Site interessante:
www.pubmed.com
NEUROANATOMIA
Jessica Ruivo Maximino
OBJ ETI VO: Apresentar o Sistema Nervoso (SN) e suas possveis divises didticas.
O SN um todo. Sua diviso em partes tem um significado exclusivamente didtico, pois vrias delas
esto intimamente relacionadas do ponto de vista morfolgico e funcional. O SN pode ser divido
levando-se em conta critrios anatmicos, funcionais e embriolgicos.
DI VI SO DO SI STEMA NERVOSO COM BASE EM CRI TRI OS ANATMI COS
DI VI SO DO SI STEMA NERVOSO COM BASE EM CRI TRI OS EMBRI OLGI COS
1) Crnio: sustentao e proteo para o Sistema Nervoso Central.
Sistema Nervoso
C
Cerebelo
Tronco Encef lico
Mesenc falo
Ponte
Nervos
Gnglios
Terminaes Nervosas
Espinhais
Cranianos
Sistema Nervoso
Sistema Nervoso
Sistema Nervoso
Perif rico
Enc falo
Medula espinhal
C rebro
Cerebelo
lico
falo
Bulbo
Nervos
nglios
es Nervosas
Espinhais
Sistema Nervoso
Somtico
Sistema Nervoso
Visceral
Aferente
Eferente
Aferente
Eferente
Simptico
Parassimptico
Sistema Nervoso
Somtico
Sistema Nervoso
Visceral
Aferente
Eferente
Aferente
Eferente
Simptico
Parassimptico
Prosencfalo
Mesencfalo
Rombencfalo
Telencfalo
Diencfalo
Metencfalo
Mielencfalo
Crebro
Mesencfalo
Rombencfalo
Prosencfalo
Mesencfalo
Rombencfalo
Telencfalo
Diencfalo
Metencfalo
Mielencfalo
Crebro
Mesencfalo
Rombencfalo
2) Encfalo (crebro, cerebelo e tronco enceflico).
a) Para o tecido sseo no entrar em contato com o tecido
nervoso existem membranas fibrosas chamadas
meninges, que so: dura-mter, pia-mter e aracnide.
b) Crebro (Telencfalo + Diencfalo): giros e sulcos
(as artrias e veias ficam localizadas
preferencialmente nos sulcos).
Lobos (frontal, parietal, temporal e occipital)
c) Cerebelo
d) Tronco Enceflico: mesencfalo, ponte e bulbo
e) Tlamos: Comunicao
3) Pares de Nervos Cranianos
I - bulbo olfatrio / trato olfatrio
II - nervo ptico / trato ptico
III - nervo culomotor
IV - nervo troclear
V - nervo trigmeo
VI - nervo abducente
VII - nervo facial
VIII - nervo vestbulo coclear
IX - nervo glossofarngeo
X - nervo vago
XI - nervo acessrio
XII - nervo hipoglosso
4) Cauda eqina
5) Vrtebra: Msculo e medula
6) Observar a reconstituio do encfalo
Referncias:
Machado, A.B.M. Neuroanatomia Funcional. 2
a
edio. So Paulo. Ed. Atheneu, 2000.

HIPERTENSO E EXERCCIO FSICO: UMA BREVE
INTRODUO
Regiane Xavier de Moraes
Neste tpico ser sucintamente abordado a interao do exerccio fsico com a hipertenso,
alm de atualidades e tendncias em pesquisa na rea da fisiologia do exerccio e doenas
cardiovasculares.
O sedentarismo pode contribuir para o aparecimento e/ou agravamento de doenas
cardiovasculares como a hipertenso. De acordo com 3 Consenso brasileiro de hipertenso (1998),
15 a 20% da populao brasileira est acometida. Atualmente 90 a 95% dos idosos so hipertensos.
Durante os ltimos tempos, o exerccio fsico, bem como as suas implicaes e conseqncias,
tem sido extensamente estudado por cientistas de todo o mundo. Usualmente, os exerccios,
aerbicos e/ou de resistncia, mais recomendados e utilizados so a caminhada e corrida em esteiras
rolantes, a natao em piscinas, a musculao com pesos e pedalar em bicicletas ergomtricas. Em
animais normalmente so utilizados a roda de corrida espontnea, a esteira para corrida induzida e a
natao. Estas pesquisas buscam compreender as aes do exerccio no organismo, quais os
mecanismos centrais e perifricos que as norteiam e, principalmente, quais os benefcios que poucas
horas de mudana na rotina diria podem causar tanto para uma pessoa ou animal saudvel como
para os acometidos por patologias.
A realizao do exerccio fsico provoca uma srie de respostas fisiolgicas nos diversos
sistemas corporais, em particular no cardiovascular e nervoso. Objetivando manter a homeostasia
celular, diante do aumento das necessidades metablicas, h incremento do dbito cardaco,
redistribuio do fluxo e aumento da perfuso sangunea para a musculatura em atividade.
Sabe-se que exerccios fsicos regulares, quando so adequadamente prescritos, e de baixa
intensidade podem provocar alteraes autonmicas importantes que influenciam o sistema
cardiovascular. Dentre estas, a atenuao da hipertenso arterial tanto em humanos quanto em ratos
espontaneamente hipertensos (SHR). A atividade fsica contribui para a melhora do controle
barorreflexo e reduo de 8 a 11 mmHg da presso arterial sistlica e diastlica, respectivamente, em
indivduos hipertensos (Hagberg, et al.,2000). Estudos mostram que a diminuio da presso arterial
deve-se diminuio do dbito cardaco que est associado diminuio da frequncia cardaca ps
exerccio (bradicardia de repouso) (Vras-Silva, et. al.,1997). Entretanto, alguns autores propem que
exerccios crnicos provocam queda na resistncia vascular sistmica e, consequentemente na
reduo da presso arterial (Nelson, et al.,1986). O treinamento fsico normaliza o tnus simptico,
que controla a frequncia cardaca em SHRs (Gava, et al.,1995) e diminui a atividade nervosa
simptica em humanos, ou seja, estes resultados sugerem que a atividade fsica pode modular a
atividade nervosa simptica para o corao e vasos perifricos, explicando, em partes, a queda
pressrica.
Modulaes especficas da frequncia cardaca durante o exerccio constituem um mecanismo
muito preciso de manuteno do suprimento do fluxo sanguneo para o crebro, corao, pele e
msculos em atividade.
Os neurotransmissores vasopressina (AVP) e ocitocina (OT) so produzidos em neurnios
magnocelulares do Ncleo Paraventricular do Hipotlamo (PVN) que envia e recebe projees do
Ncleo do Trato Solitrio (NTS). O PVN e o NTS so importantes centros de controle cardiovascular
(Michelini e Morris, 1999).
A AVP facilita a resposta taquicrdica durante a atividade fsica. Contraditoriamente, a OT
diminui a taquicardia e contribui para a bradicardia. Desta forma, estes neurotransmissores possuem
efeitos especficos e opostos no controle da frequncia cardaca. Este balano entre o estmulo
excitatrio (AVP) e inibitrio (OT) prov a eficincia do ajuste fisiolgico requerido
momentaneamente, j que a taquicardia necessria para suprir a maior demanda de fluxo
sanguneo e metablica da musculatura em atividade durante o exerccio. Assim, no NTS de indivduos
treinados, a AVP e OT atuam como moduladores da frequncia cardaca durante a atividade fsica por
potencializar ou moderar, respectivamente, a taquicardia (Michelini, 2001).
importante enfatizar que as vias vasopressinrgicas e ocitocinrgicas do tronco enceflico
no so os nicos mecanismos centrais envolvidos na gnese da taquicardia. Assim, projees
descendentes vasopressinrgicas e ocitocinrgicas do PVN para o NTS so parte do mecanismo
central de modulao do reflexo barorreceptor no controle da frequncia cardaca durante o exerccio
e outras condies ambientais (Michelini, 2001).
Podem ser observadas ainda outras alteraes cardiovasculares decorrentes do treinamento
fsico tais como a hipertrofia cardaca. Exerccios aerbicos, por meio do aumento de volume
sanguneo, podem estimular adaptaes na morfologia cardaca, metabolismo energtico e funes.
Estes podem produzir hipertrofia cardaca ecntrica, na qual o aumento da massa ventricular
proporcional ao aumento da cmara cardaca (Frohlic, et al.,1992). Trata-se de uma resposta
fisiolgica e compensatria fundamental para suportar o aumento da carga de trabalho. Para que tal
modificao acontea ocorre no msculo cardaco aumento da sntese proteica, aumento da espessura
das miofibrilas, aumento de filamentos contrteis dentro da fibra muscular, etc. Estas alteraes
estruturais, morfo-funcionais e metablicas do corao induzidas pelo exerccio resultam em maior
volume de ejeo sistlica, que torna-se mais vigorosa, e maior esvaziamento ventricular.
Entretanto, a hipertrofia cardaca pode se instalar em resposta a certos estados patolgicos
crnicos como e hipertenso arterial. Na hipertrofia concntrica o aumento da massa ventricular no
proporcional ao aumento da cmara cardaca. Desta forma o trabalho cardaco feito contra uma
excessiva resistncia ao fluxo sanguneo. O corao hipertrofiado pode falhar e tornar-se incapaz, em
casos mais graves, de prover o fluxo sanguneo normal para o indivduo hipertenso.
Em suma, o exerccio fsico crnico de intensidade baixa a moderada possui implicaes
clnicas importantes j que pode reduzir ou mesmo abolir a necessidade de uso de medicamentos
anti-hipertensivos, diminuindo, desta forma, o custo do tratamento, extinguindo efeitos colaterais e
principalmente promovendo melhora na qualidade de vida de indivduos hipertensos. Assim pode ser
tido como uma importante conduta no farmacolgica no tratamento da hipertenso arterial.
Referncias Bibliogrficas Citadas
FROHLIC, E.D., et al. The Heart in Hypertension. N. England. J . Med. v.327, p. 998-1008, 1992.
GAVA, N.S.; VRAS-SILVA, A.S.; NEGRO, C.E.;et al. Low-Intensit Exercise Training Attenuates
Cardiac -adrenergic Tone During Exercise in Spontaneously Hypertensive Rats.
Hypertension. v.26 (2), p.1129-1133, 1995.
HAGBERG, J .M.; PARK, J .J .; BROWN, M.D. The Role of Exercise Training in the Treatment of
Hypertension: an Update. Sports Med, v. 30, p. 193206,2000.
MICHELINI, L.C. Oxytocin in the NTS - a New Modulator of Cardiovascular Control During Exercise.
Annals New York Acad. Sci. v.940,p.206-220,2001.
MICHELINI, L.C.; MORRIS, M. Endogenous Vasopressin Modulates the Cardiovascular Responses to
Exercise. Annals New York Acad. Sci. v.897, p. 198-221,1999.
NELSON, L.; J ENNINGS, G.L.; ESLER, M.D.; et al. Effect of Changing Levels of Physical Activity on
Blood-pressure and Haemodynamics in Essential Hypertension. Lancet, v. 2, p. 473476, 1986.
VRAS-SILVA, A.S.; MATTOS, K.C.; GAVA, N.S.; et al. Low-intensity Exercise Training Decreases
Cardiac Output and Hypertension in Spontaneously Hypertensive Rats. Am J Physiol: Heart
Circ Physiol, v.273(6 Pt2), p. H2627-H2631, 1997.
Referncias Bibliogrficas Sugeridas
DUFLOTH, D.L.; MORRIS, M.; MICHELINI, L.C. Modulation of Exercise Tachycardia by Vasopressin in
the Nucleus Tractus Solitarii. Am.J .Physiol. v.273,p.R1271-R1282, 1997.
KRAMER, J .M.; BEATTY, J .A.; PLOWER,E.D.; WALDROP, T.G. Exercise and Hypertension: a model for
Central Neural Plasticity. Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. v.29(1-2), p.122-6, J an, 2002.
KRAMER, J .M.; PLOWEY,E.D.; BEATTY,J .A.; LITTLE,H.R.; WALDROP,T.G. Hypothalamus, Hypertension
and Exercise. Brain Res Bull. v.53(1), p.77-85,2000.
McARDLE, W.D.; KATCH,F.I.; KATCH, V.L. Fisiologia do Exerccio: Energia, Desempenho e Funo.
p190-225.Guanabara Koogan: RJ .
NEGRO, C.E.; RONDON,M.U.P.B. Exerccio Fsico, Hipertenso e Controle Barorreflexo da Presso
Arterial. Rev Bras Hipertens. v.8(1),p.89-95,jan-mar,2001.
NEGRO, C.E.; RONDON,M.U.P.B; KUNIYOSHI,F.H.S.; LIMA, E.G. Aspectos do Treinamento Fsico na
Preveno de Hipertenso Arterial. Rev Hipertenso. v.4 (3), 2001.
SILVA, G.J .J .; BRUM,P.C.; NEGRO,C.E.; KRIEGER,E.M. Acute and Chronic Effects of Exercise on
Baroreflexes in Spontaneously Hypertensive Rats. Hypertension. v.30(3),p. 1997.
TURNER, D.L. Cardiovascular and Respiratory Control Mechanisms During Exercise: an Integrated
View. J .Exp.Biol. v.160, p.309-340, 1991.
Sites Relacionados
www.cardiol.br
www.sbh.org.br
CONSIDERAES SOBRE A NEUROFISIOLOGIA DA
MEMRIA
Andr Frazo Helene
1. Proposta:
aula terica com durao de uma a duas horas
2. Objetivo:
tratar de forma sucinta da expresso da memria no SNC
3. Conceitos:
bases de neuroanatomia funcional
tcnicas de abordar experimentalmente o problema da relao crebro-funo
sistemas de memria
4. Material didtico:
apenas aula com utilizao de projetor digital
Texto de apoio
A atividade e o funcionamento do SNC esto diretamente ligados sua capacidade de gerar a
partir basicamente da ativao individual de clulas neuronais processos que em ltima instncia
permitem gerar atitudes to sofisticadas quanto dirigir um carro, lembrar o nome de uma cidade ou
tomar uma deciso, considerando diferentes informaes e expectativas simultaneamente.
A proposta presente aqui pretende abarcar estas questes, tentando aproximar propostas
experimentais e a vida cotidiana, sempre com um enfoque de anlise formal da natureza antomo-
funcional das funes expressadas pelo SNC.
Sistemas de memria
O uso de um termo nico pode sugerir que memria um sistema unitrio, uma entidade
independente qual um nico sistema responde. No entanto, quando falamos de memria temos de
nos referir a muito mais do que apenas um sistema simples e unitrio. Sob o termo "memria" esto
presentes todos os processos de reteno, gerenciamento e evocao de informaes, sejam estes
por perodos de tempo que podem ser to curtos quanto fraes de segundo at perodos to longos
como uma vida inteira. Informaes estas que abarcam a capacidade de arquivar informaes as mais
variadas: sobre ns mesmos e sobre nosso ambiente.
A noo de que memria pode ser dividida em diferentes componentes antiga e muito
baseada na observao de casos clnicos neurolgicos, que sempre tiveram papel vital ao longo da
histria dos estudos da memria. Um dos mais clssicos casos clnicos foi estudado e descrito por
Brenda Milner e William Scoville e publicadas em 1957, sobre o paciente H.M.. Aps passar por uma
cirurgia realizada por Scoville para extirpao de um foco epilptico grave, que envolveu a remoo
bilateral de parte considervel de seu crtex temporal medial e hipocampo (Figura 1), o paciente H.M.
apresentou um caso de perda de suas capacidades de formao de novas memrias (amnsia).
Apesar desta no ser a nica origem possvel de casos de amnsia (pacientes com a doena de
Korsakoff tambm apresentam um quadro de amnsia, apesar de terem leses em estruturas no
corticais), as sndromes amnsicas se mostram de natureza extremamente seletiva. Pacientes
amnsicos embora no consigam se lembrar da maioria dos eventos que experienciam tem muitas de
suas funes de memria preservadas. Por exemplo, a capacidade de aprendizagem de novas
habilidades, motoras ou perceptuo-cognitivas esto mantidas, mesmo que no acompanhadas da
capacidade de reconhecer isto por parte do paciente, exatamente pela seletividade apontada. Da
mesma forma, a capacidade de manter informaes por curtos perodos de tempo tambm est
mantida, favorecendo o conceito de modularidade de funes presente no sistema (Figura 2).
Quantos tipos de memria existem?
O estudo dos processos de memria vem se beneficiando do conceito de modularidade de
funes, isto , da noo de que memria compreende um conjunto de habilidades mediadas por
diferentes mdulos do sistema nervoso, que funcionam de forma independente, porm cooperativa. O
processamento de informaes nesses mdulos dar-se-ia de forma paralela e distribuda, permitindo
que um grande nmero de unidades de processamento influencie outras em qualquer momento no
tempo, e que grande quantidade de informaes seja processada concomitantemente.
Memria de longa durao
Memria de longa durao se refere a qualquer reteno de natureza perene e duradoura.
Esta pode ser dividida em duas diferentes modalidades, ou mdulos. A primeira, chamada de
declarativa, se refere habilidade de armazenar e recordar ou reconhecer de maneira consciente e
passvel de declarao fatos e eventos. Esta tipicamente descrita pela declarao verbal (de onde
advm o nome declarativa) mas tambm pode se dar atravs de reconhecimento ou de uma imagem.
No exemplo do caso H.M. exatamente esta modalidade de memria que foi perdida, fazendo com
que o paciente no se "lembre". Assim esta modalidade de memria poderia ser descrita como um
"saber que" (Figura 3).
Diferentemente, a memria implcita (ou procedimental), se refere capacidade de
aprender novas habilidades motoras ou perceptuo-cognitivas (Figura3). Estas, por seu carter no
consciente de execuo e aquisio, so tarefas que demandam treino longo e repetitivo e que muito
dificilmente podem ser adquiridas de outra forma que no pela execuo em si da tarefa em questo.
Sua evocao se d, necessariamente, pela execuo da habilidade e poderia ser descrita como
"saber como". exatamente esta habilidade que est preservada em pacientes amnsicos, tal como
o caso do paciente H.M..
Memria Operacional (inicialmente descrito como "de curta durao")
Memria operacional um conceito hipottico que refere-se ao arquivamento temporrio da
informao para o desempenho de uma diversidade de tarefas cognitivas. Embora ela seja
usualmente identificada com (e mesmo tratada como sinnimo de) memria de curta durao, esta
ltima mostrou-se por demais simples para lidar com os tipos de reteno de informao por curtos
perodos de tempo evidenciados experimentalmente. Assim, desenvolveu-se o conceito de memria
operacional como um sistema de capacidade limitada e com mltiplos componentes, responsveis no
s pela manuteno de informaes por curtos perodos mas tambm pela capacidade de selecionar
estmulos relevantes no ambiente e entre as informaes de longa durao (Figura 4).
A essncia da memria
Sabe-se hoje que a aquisio de memria basicamente se d pela modulao das sinapses,
nome dado ao processo pelo qual duas clulas nervosas se conectam (Figura 5). A partir da descrio
das sinapses, conceito primeiramente proposto por Wilhem Waldeyer e posteriormente demonstrado
por Ramn y Cajal, mudanas na organizao de conexes sinpticas tm sido exaustivamente
associadas aos processos de aprendizagem e memria em uma diversidade de espcies de
invertebrados e vertebrados, favorecendo a interpretao sobre a ubiqidade destes mecanismos nos
processos de arquivamento de informaes. Sendo assim, podemos descrever memria pela
facilitao - e pela eliminao seletiva - de ligaes entre clulas neuronais, que desta forma se
agrupam funcionalmente em agregados (ns) e propiciam a conexo posterior destes entre si,
tambm por modulao de conexes sinpticas, gerando a possibilidade destes ns representarem em
si o arquivamento de uma informao.
Para termos uma idia do que representa na prtica esta caracterstica associativa do
funcionamento do sistema nervoso na gerao de memrias, assim como para vislumbrarmos o poder
de arquivamento de informaes deste sistema, vale ressaltar que estima-se que tenhamos cerca de
cem bilhes de clulas neuronais (ou neurnios) no nosso sistema nervoso. Mais ainda, que cada uma
destas clulas tem em mdia vinte mil conexes (sinapses) com outras clulas. Ou seja, sendo o
sistema nervoso um sistema que traz em si a riqueza de poder arquivar informaes atravs de
conexes entre cada uma de suas clulas componentes, o sistema nervoso humano tem em si uma
ordem de grandeza inimaginvel resguardada em sua estrutura.
Levando adiante o fato de sabermos que memrias se estruturam em redes de conexes
sinpticas de neurnios podemos montar um mapa mais claro do que estamos falando. Haveria, no
sistema nervoso, uma grande quantidade de unidades dedicadas de processamento inerentemente
plstico, cada qual devotada a uma tarefa especfica mas simples. Quando ativadas, essas unidades
excitam e inibem outras ao longo de uma rica rede de conexes. Algumas acabam por gerar ligaes
associativas cuja fora pode ser alterada em funo de diferentes fatores. Seguindo o raciocnio,
novas informaes geram novas ativaes, gerando novas conexes que sero somadas quelas j
existentes, tornando-se assim um novo "ramo" de ativao a partir de um n anterior. Nessas redes,
conjuntos de ns podem representar informaes da memria compartilhadas entre diferentes
arquivamentos (Figura 6).
Topologia da Memria
Para entender melhor a formao e a topografia de memrias til pensar que o crtex
sensorial primrio e as reas motoras do crtex so repositrios de uma forma em muito inata de
memria, chamada de memria filtica, ou "memria das espcies". No nascimento estas reas j
contm em sua estrutura de conexes sinpticas as "experincias" essenciais selecionadas
evolutivamente ao longo do tempo, sendo basicamente informaes de natureza simples sobre
sensao e movimento. Sem dvida podemos chamar esta estrutura bsica de conexes sinpticas de
memria, uma vez que so informaes que adquiridas, esto armazenadas e podem facilmente ser
evocadas. Um bom exemplo disso pode ser visto no comportamento de mamar dos bebs, um
comportamento extremamente complexo, que envolve a utilizao de grande nmero de msculos
sincronizadamente e que certamente ser evocada pela estimulao correta.
Poder caracterizar memria frente observao da forma como esta se estrutura
topologicamente no sistema nervoso traz em si a possibilidade de ampliarmos a abrangncia do
debate sobre memria. O sistema nervoso, em seu processo histrico de interao com o ambiente,
reage no apenas a estmulos, mas tambm s contingncias espaciais e temporais entre os
estmulos, e tambm destes com suas respostas - inicialmente seguindo regras bsicas j
determinadas em suas estruturas sinpticas inatas e colhendo informaes de resposta de maneira
muito abrangente e inespecfica. Com o acmulos destes registros sobre ocorrncias anteriores o
sistema passa a ser treinado, identificando regularidades na ocorrncia desses eventos, formando
memrias e, conseqentemente, passando a poder gerar previses (probabilsticas) sobre o ambiente.
Desta forma, passa a agir antecipatoriamente frente ao ambiente. Uma das conseqncias deste
processo o desenvolvimento de intencionalidade; ou seja, como resultados almejados podem ser
previstos com base em registros sobre regularidades passadas, o sistema pode gerar aes que levem
a resultados desejados, ao invs de simplesmente esperar que eles ocorram desta forma quase que
aleatoriamente.
Consideraes possveis
A busca por regularidades no ambiente gera a possibilidade de previso que se identificadas
adequadamente agiro diretamente no sucesso das decises que sero tomadas. Por outro lado,
centrar esforos na busca de regularidades observando pistas no informativas no ambiente tero o
resultado oposto: tomadas de deciso equivocadas. No entanto muitas vezes a deteco de
regularidades se torna extremamente difcil, seja por uma inadequao do treino ao que fomos
expostos, seja pela prpria natureza do estmulo em questo. Por exemplo, um indivduo neurtico,
em ltima anlise no capaz de discriminar entre estmulos realmente perigosos e aqueles
inofensivos. Exatamente por isso tem medo de gatos, cachorros, elevador, de outras pessoas, ou as
mais variadas condies de estimulao incua. Da mesma forma, o neurtico pode se tornar incapaz
de escolher entre ocupaes realmente importantes e desnecessrias, dedicando um tempo enorme a
atividades como lavar as mos ou no pisar em faixas na rua.
Este efeito, de produo de neuroses, possvel de ser replicado em animais de laboratrio.
Ivan Pavlov, cientista russo nascido em 1849 e que teve importncia decisiva nos estudos da
psicologia experimental, produziu animais neurticos. Aps condicionar cachorros a salivarem frente
apresentao de um crculo mas no de uma elipse (associando temporalmente estes estmulo
oferta e no oferta de alimento), Pavlov passou a aproximar a forma da elipse ao do crculo (Figura
7). O limite ao qual os animais conseguiam diferenciar adequadamente os dois estmulos era de
elipses quase circulares de proporo entre o tamanho dos eixos que a compunham de 7 para 8. A
partir deste ponto, elipses mais circulares (no caso com propores de 8 para 9, por exemplo) se
tornaram indissociveis dos crculos, para os animais. Esta exigncia era demasiada para a capacidade
de discriminao do animal. A saliva punha-se a correr inicialmente diante da elipse, depois diante do
crculo e, finalmente, diante de qualquer um deles ou mesmo de ambos, sem distino. O co punha-
se a ganir e latir ferozmente para a tela, tentava saltar da mesa e cortar as amarras com os dentes.
Da por diante o animal passou a ser intil para experimentao. Salivava ao ver a experimentadora, a
sala de experincias ou ainda qualquer outro estmulo. Aparentemente a capacidade de discriminao
do animal sofrera colapso quase completo, tornando-o, dessa forma, um animal neurtico.
No entanto este um exemplo simplista do que passamos no dia a dia ao longo de nossas
vidas. Apesar de ser importante identificarmos situaes simples e especficas possivelmente
perigosas, tais como mentir na frente de crianas apesar de repreend-las severamente quando
mentem (fazendo com que a criana no consiga detectar qual o estmulo importante na situao, j
que mentir no parecer ser), as preocupaes validas so em geral de natureza muito mais
abrangentes.
Diferente de outros animais, temos crebros extremamente generalistas. Ou seja, estamos
aptos a desenvolver diferentes habilidades frente s demandas de nosso ambiente. Na prtica talvez
jamais sejamos to bons para lembrar onde guardamos as coisas como os animais especialmente
adaptados a guardar alimento antes do inverno o so, de maneira a poder ach-los durante a poca
de frio. No entanto seremos muito melhores em tarefas variadas nas quais estes animais no teriam
sucesso algum, ao mesmo tempo em que teremos um desempenho satisfatrio em uma tarefa de
recordao. Isto depende somente do treino ao qual seremos expostos para tanto, e aqui temos de
entender treino como muito mais do que apenas uma vivncia curta para desempenho de uma tarefa,
temos de considerar todos os estmulos aos quais passamos ao longo de nossa vida.
ASPECTOS FISIOLGICOS DAS TOXINAS DE ANIMAIS
AQUTICOS E TERRESTRES
Dr. Joacir Stolarz de Oliveira
Laboratrio de Imunoqumica do Instituto Butant
O fascnio apresentado por animais aquticos e terrestres devido, em grande parte, pela
imensa variedade de formas anatmicas e matizes de cores apresentados por seus corpos e tambm
pela grande capacidade de adaptao aos diferentes ambientes em que vivem, seus diferentes
hbitos de vida e suas relaes com os outros seres. Outra caracterstica bastante marcante e que
aparece desde microorganismos at alguns vertebrados a capacidade de produzir e/ou acumular
substncias txicas, as toxinas
1
, que so empregadas em diversas estratgias envolvidas na defesa
contra predadores, no ataque a presas potenciais, alm da sua utilizao na comunicao qumica
intra e interespecfica.
Dentro deste contexto, atualmente conhecido uma enorme diversidade e complexidade de
toxinas que compem os venenos
2
e as peonhas
3
de organismos, tanto aquticos (marinhos e de
gua doce) como terrestres. Algumas peonhas foram desenvolvidas para a captura de presas como
ocorre, por exemplo, nas glndulas de serpentes, escorpies e aranhas, nos nematocistos de guas
vivas e anmonas do mar e nos arpes (ferres) de moluscos marinhos do gnero Conus. Outras,
esto voltadas quase que exclusivamente para a defesa em ambientes altamente competitivos, como
por exemplo quelas que so encontradas em peixes (peixe-pedra, peixe-escorpio, etc.) e em alguns
anfbios. J os venenos so encontrados desde organismos unicelulares, como algas e dinoflagelados,
e ao longo dos muitos filos que compreendem os metazorios como os chaetognatos, nemertneos,
esponjas, moluscos, muitos peixes (peixe-porco, balistes, baiacus, etc.) e mesmo em aves, como s
pertencentes ao gnero Pithoui (Pitus da Papua Nova Guin) e mamferos monotremados, o
ornitorrinco (Ornithorhynchus anatinus).
No que diz respeito natureza qumica das toxinas, tanto de peonhas quanto de venenos,
esta pode ser a mais diversa possvel, variando desde compostos de baixos a elevados pesos
moleculares, proticos ou no, polares ou apolares, termoestveis ou termolbeis, etc. Muitos
compostos no proticos podem ser encontrados, como por exemplo os politeres produzidos por
dinoflagelados marinhos e que acumulam-se em moluscos bivalves filtradores, e as molculas
heterocclicas como as toxinas guanidnicas (tetrodotoxina e saxitoxina) encontradas em moluscos,

1
Toxinas so substncias txicas com maiores ou menores aes especficas em sistemas
biolgicos e que ocorrem em peonhas e venenos (Meier & Stocker, 1989).
2
Venenos (do ingls, poison) so produtos metablicos produzidos ou armazenados em
rgos de um determinado organismo e que afetam a um outro quando estes so ingeridos, podendo
tambm atuar de modo artificial por via parenteral. (Freyvogel & Perret, 1973).
3
Peonhas (do ingls, venom) substncias originadas em glndulas especializadas e que
esto associadas a ductos excretores, possuindo ou no uma estrutura inoculadora (Freyvogel &
Perret, 1973).
crustceos, equinodermos e peixes. Estas substncias, algumas vezes podem chegar ao homem
atravs da cadeia alimentar, podendo provocar srios casos de envenenamentos alimentares.Tambm
so conhecidas aminas, presentes nas peonhas de aranhas, alcalides encontrados nas peles de
anfbios, etc. De uma maneira em geral, compostos proticos apresentam-se mais freqentemente e
em maior quantidade nas peonhas e venenos, e por sua vez, so as molculas mais investigadas do
ponto de vista farmacolgico. Muitos peptdeos e protenas so encontrados em escorpies, aranhas,
anmonas moluscos e anfbios.
Devido imensa diversidade qumica encontrada nas toxinas muitas estratgias e tecnologias
de purificao e elucidao estrutural tiveram que ser desenvolvidas, sendo que somente mais
recentemente com a popularizao e um maior acesso a equipamentos de elevado custo (como os
empregados em espectrometria de massas e na anlise protemica) e a busca por novas molculas
visando ao emprego na biotecnologia que muitas toxinas puderam ser caracterizadas. Alm disto,
no que diz respeito s toxinas proticas, o avano da biologia molecular veio possibilitar a clonagem,
expresso e a conseqente obteno de tais substncias em grandes quantidades, permitindo a
realizao de estudos estruturais e de estrutura-funo, empregando tcnicas de ressonncia nuclear
magntica e de cristalografia.
Do ponto de vista fisio-farmacolgico as aes das toxinas podem ser as mais variadas.
Dentre elas destacam-se as aes neurotxicas, hemolticas, cardiotnicas, necrticas,
antimicrobianas, enzimticas, etc.
A cincia que trata das substncias txicas produzidas ou acumuladas em organismos vivos,
suas propriedades e seu significado biolgico para o organismo envolvido a Toxinologia (Meier &
Stocker, 1989)
4
. A Toxinologia emprega muitos dos conhecimentos desenvolvidos em diferentes sub-
reas da Biologia como a Fisiologia, Farmacologia e a Ecologia para auxiliar na investigao das
toxinas, visando elucidao dos mecanismos de ao destas substncias, suas aplicabilidades tanto
na cincia como medicina ou na indstria e, em alguns casos, busca por terapias cada vez mais
eficazes a serem empregadas em casos de envenenamentos.
A presente aula tratar dos principais grupos de animais considerados venenosos e/ou
peonhentos, sejam eles terrestres ou aquticos, destacando suas principais toxinas produzidas e/ou
acumuladas, bem como alguns aspectos relativos aos mecanismos de ao e interaes fisio-
ecolgicas envolvidas.
Bibliografia:
Freitas, J . C. Nomenclatura em Toxinologia. Relaes com a comunicao qumica entre organismos e
propriedades biolgicas das toxinas. Mem. Inst. Butantan, 53(2): 191-195.
Freyvogel, T. A. & Perret, B. A., 1973. Notes on Toxinology. Experientia, 29 (11): 1317-1452.
Meier, J . & Stocker, K. 1989. Review article: On the significance of animal experiments in Toxinology.
Toxicon, 27(1): 91-104.
Sugestes de leitura:

4
Freitas (1991) simplifica: Toxinologia refere-se ao estudo das toxinas.
Freitas, J . C.; Rangel, M.; Oliveira, J . S.; Zaharenko, A. J . & Rozas, E., (2003) An outline on marine
toxinology studies in the Brazilian coast. Comments on Toxicology, 9: 1-22.
Halsted, B. (1967). Poisonous and venomous animals of the world, vol. 2. US Governmental Printing
Office, Washington. 844p.
Kaul, P. N. (1990). Drugs Molecules of Marine Origin. Progress in Drug Research, 35: 521-557.
Lozoya, A. V. (1994). Envenenamientos por animales - animales venenosos y urticantes del mundo.
Ediciones Diaz de Santos S.A., Madrid. 342p.
Oliveira, J . S. & Freitas, J . C. (2001). Produtos Naturais Marinhos: caractersticas dos envenenamentos
alimentares e substncias de interesse farmacolgico. Higiene Alimentar, 15 (80/ 81): 22-33.
Rash, L. D. & Hodgson, W. C. (2002). Pharmacology and biochemistry of spider venoms. Toxicon, 40:
225-254.
Rochat, H. & Martin-Euclaire, M. F. (2000). Animal Toxins Facts and Protocols. Birkhuser Verlag,
Berlin. 365p.
AS TOXINAS DE ANMONAS DO MAR COMO
FERRAMENTAS PARA ENTENDER A FISIOLOGIA DE
RGOS, TECIDOS E SISTEMAS.
Andr Junqueira Zaharenko
Laboratrio de Produtos Naturais Marinhos
As anmonas do mar so animais que pertencem ao filo Cnidaria e a classe Anthozoa. Todas
as anmonas, assim como os celenterados em geral, possuem estruturas celulares microscpicas,
similares a arpes, denominadas de nematocistos, responsveis pelo papel de paralisar presas e
tambm atuam na defesa dos animais. Estas estruturas contm potentes neurotoxinas paralisantes
que agem sobre crustceos e peixes pelo simples contato com esses animais. Essa estratgia de
vital importncia para os mais distintos animais, desde esses cnidrios, passando por moluscos
predadores, escorpies, aranhas e at serpentes.
Todos esses tipos de animais produzem toxinas proticas e peptdicas em glndulas
especializadas e as injetam, a partir de estruturas tambm especializadas na inoculao, como
ferres, presas e, no caso dos cnidrios, nematocistos. Durante muitos anos os cientistas em geral se
debruaram em tentativas de purificar e elucidar os mecanismos de ao das toxinas, ainda que por
dcadas as limitaes tecnolgicas e operacionais dificultassem essa tarefa.
Um dos aspectos mais importantes que devemos nos focar, quando vamos tentar investigar
quais so os possveis mecanismos de ao e alvos das toxinas, exatamente qual o tipo de animal
predado pelo nosso objeto de estudo. As anmonas, por exemplo, predam em geral peixes e
crustceos planctnicos. Essas presas, por sua vez, so de rpida locomoo e poderiam facilmente
escapar de um predador que tambm no fosse rpido na captura.
Quando pensamos nos ambientes ocupados pelas anmonas, logo devemos nos ater ao fato
de que esses animais so ssseis, ou seja, vivem fixos em um substrato rochoso e basicamente no
se movem. Se as presas das anmonas so animais de rpida locomoo, as toxinas direcionadas a
sua captura devem ter um efeito o mais efetivo e letal possvel. Seguindo nessa linha de raciocnio, os
alvos mais conhecidos onde as toxinas anmonas atuam so: na conduo nervosa e na contrao
muscular das presas. Toxinas que bloqueiam a neurotransmisso, levando a paralisia seguida de
morte, so as molculas mais investigadas nesse grupo de animais at hoje.
Remetendo aos conhecimentos bsicos de fisiologia e biologia celular, sabemos que um
potencial de ao (PA) evocado basicamente pela mudana de voltagem do interior de uma clula
nervosa atravs da entrada de ons sdio (despolarizao) e a sada de ons potssio na mesma. Este
ltimo processo um pouco mais tardio e permite o restabelecimento da voltagem inicial no interior
da clula (repolarizao), o chamado potencial de membrana. A seqncia desses eventos,
controlados refinadamente pelos canais para Na
+
e K
+
dependentes de voltagem, leva a transmisso
do impulso eltrico, com consequncias fisiolgicas importantes para a comunicao neuronal e a
contrao muscular. Para uma reviso completa, a leitura do captulo 11 (pginas 523-547) do livro
MOLECULAR BIOLOGY OF THE CELL (Alberts et al., 3
a
e 4
a
edies; 1994, 2002) bastante
recomendada.
Durante a passagem de um PA de um neurnio a outro, temos no neurnio pr-sinptico,
durante a despolarizao, a abertura de canais para Ca
2+
dependentes de voltagem prximos ao
boto sinptico. Quando se abrem, esses canais permitem o influxo de Ca
2+
que provoca,
subsequentemente, a alterao da concentrao intracelular desse on e a ativao de maquinarias
secretrias de neurotransmissores. Vesculas contendo neurotransmissores so liberadas na fenda
sinptica e estes ligam-se aos respectivos receptores ps-sinpticos, propagando o PA ou
desencadeando eventos secundrios importantes para a fisiologia celular. A contrao muscular
desencadeia-se da mesma maneira, apenas diferindo na sequncia de eventos ps-sinpticos
desencadeadas pela ligao da acetilcolina (no caso de mamferos, por exemplo) ou do glutamato (no
caso de crustceos e invertebrados) nos respectivos receptores das fendas sinpticas. importante
ressaltarmos que nesse caso no h um neurnio ps-sinptico e sim uma musculatura inervada por
um neurnio pr-sinptico.
Essa reviso de conceitos bsicos importante quando nos deparamos com os mecanismos
de ao de neurotoxinas de anmonas e de outros animais peonhentos. A maioria dos peptdeos de
anmonas descritos e estudados age em canais para Na
+
ou para K
+
dependentes de voltagem.
Retardam o processo de inativao dos canais de Na
+
e bloqueiam os canais de K
+
, produzindo um
influxo enorme de ons Na
+
e uma diminuio drstica da sada de ons K
+
nas clulas. Isso faz com
que o PA tenha sua amplitude e durao aumentadas dramaticamente.
Para a fisiologia celular, a liberao de neurotransmissores passa a ser tremenda, levando a
contraes musculares que no cessam, paralisando um animal que tenha sofrido injees diretas
dessas toxinas em seus tecidos.
Existem, atualmente, cerca de 10 subtipos de canais de Na
+
dependentes de voltagem (os
chamados, Nav) distribudos nos sistemas nervosos central e perifrico, tecido cardaco, medula
espinhal e msculo esqueltico. So protenas transmembranares que diferem levemente em termos
de seqncias primrias e parmetros cinticos.
Como nosso grupo de pesquisa vem trabalhando h longos anos com neurotoxinas de
anmonas do mar, recentemente publicamos um trabalho no qual a comparao dos efeitos de 3
toxinas praticamente idnticas difere pouco dependendo dos subtipos de Nav ensaiados (Oliveira et
al., 2004). Ou seja, isso mostra que a atuao das molculas em seus stios de ligao sutilmente
modulada por alguns aminocidos em suas estruturas. Dependendo do subtipo de Nav ensaiado,
havia efeitos preferenciais ou no de cada uma das toxinas. Durante a aula expositiva os resultados
sero apresentados e discutidos com os alunos. A leitura do trabalho de Oliveira et al., 2004- EM
PUBLICAO, tambm requerida.
Conforme os diferentes tipos de toxinas so purificados e caracterizados, cada vez mais essas
molculas so empregadas como ferramentas farmacolgicas, para em laboratrio induzirem seus
efeitos e ajudarem os cientistas a investigar diferentes aspectos da fisiologia.
Muitas companhias farmacuticas revendem toxinas com esse propsito, a preos
elevadssimos. Acessando o site www.alomone.com e clicando em Ion Channel Modulators e
Neurotoxins, podemos ver a lista de diferentes toxinas com seus respectivos preos.
Embora companhias farmacuticas forneam toxinas como substncias para pesquisa bsica,
muitas delas vm investindo milhes de dlares no desenvolvimento de frmacos a partir dessas
molculas. Como exemplo, existem peptdeos que bloqueiam especificamente canais de K
+
dependentes de voltagem expressos em linfcitos-T. Esse tipo de bloqueio leva a uma supresso do
sistema imune e, conseqentemente, esse tipo de toxina torna-se altamente atrativo como um
remdio para tratar artrite reumatide e rejeio a rgos transplantados. Na reviso apresentada por
Chandy et al., 2001, os alunos podem acompanhar os avanos recentes nesse sentido.
Finalizando, queremos mostrar que a partir de prottipos naturais pode-se obter substncias
altamente eficazes para o estudo da fisiologia e que sirvam tambm como modelos para o
desenvolvimento de medicamentos.
Bibliografia:
Alberts, B. et al. 1994. Molecular Biology of the Cell. Garland Publishing. New York. 3
rd
edition. 1294p.
Chandy, K.G.; Cahalan, M.; Pennington, M.; Norton, R.; Wulff, H. & GUTMAN, G.A. (2001). Potassium
channels in T lymphocytes: toxins to therapeutic immunosupressants. Toxicon. 39: 1269-1276.
Oliveira, J . S.; Redaelli, E.; Zaharenko, A. J .; Cassulini, R. R.; Konno, K.; Curia, G.; Pimenta, D.C.;
Freitas, J . C.; Clare, J . J . & Wanke, E. (2004). Binding of sea anemone toxins to Nav 1.1-1.6
Sodium Channels: Unexpected Contributions from Differences in the IV/ S3-S4 Outer Loop.
J ournal of Biological Chemistry. ARTIGO ACEITO, EM PUBLICAO.
Andr Junqueira Zaharenko
Laboratrio de Produtos Naturais Marinhos
Durante a aula prtica, os alunos acompanharo procedimentos de fracionamento de peonhas
totais pela tcnica cromatogrfica de gel-filtrao. Basicamente, a metodologia consistir conforme
descrito abaixo:
Purificao da peonha por gel-filtrao em gel de Sephadex G-50 e estimativa do
contedo protico:
O fracionamento da peonha liofilizada de anmona ser realizado atravs de uma coluna (1,9cm
X 131cm) empacotada com gel Sephadex G-50 (Pharmacia LKB- Biotechnology, Uppsala, Sweden),
para se obter as fraes neurotxicas e hemolticas j detectadas neste tipo de fracionamento. A
peonha previamente centrifugada e liofilizada (cerca de 1-2g de material seco; 200mg de protena)
ser dissolvida em 10-20mL de tampo acetato de amnio 0,1M, pH 7,0 e aplicada ao topo da coluna,
equilibrada e eluda por gravidade com o mesmo tampo. Cerca de 60 fraes de 10mL cada uma
foram coletadas, agrupadas e liofilizadas.
A absorbncia de cada frao, uma medida relativa da quantidade de protena contida em
cada uma, ser registrada diretamente na sada da coluna, atravs da passagem do efluente por um
detector de UV (Spectra/ Chrom
TM
Flow Thru UV Monitor com unidade ptica de 280nm e UV Monitor
Controller, Spectrum, Austria) antes de entrar no coletor de fraes. A informao, captada pelo
detector, integrada e registrada permanentemente em papel (Spectra/ Chrom TM 1 Channel
Recorder, Spectrum, ustria). O registro direto na sada da coluna permite o acompanhamento
constante do processo de filtrao em gel, desta maneira, otimizando o processo de coleta.
Para estimar-se a quantidade de protena presente na peonha e nas fraes obtidas, durante
esta etapa e nas subseqentes, ser empregado um kit que se baseia no mtodo de dosagem do
cido bicinconnico (BCA) seguindo-se o protocolo do manual do fabricante (Pierce, Rockford, USA).
Utiliza-se albumina srica bovina como padro.
Purificao por cromatografia de fase reversa (RP-HPLC) da frao neurotxica
(FR I I I ):
Esta etapa ser realizada no Laboratrio Especial de Espectrometria de Massa (LEEM) do
Centro de Toxinologia Aplicada (CAT/CEPID- FAPESP) do Instituto Butantan.
O conjunto da frao neurotxica (FR III) obtida de cromatografias por filtrao em gel vai ser
ressuspendido em gua Milli-Q (Millipore Inc.) e injetado em um sistema de purificao Shimadzu de
HPLC constitudo por um detector UV-VIS SPD-10A VP, bombas LC-10AD VP e um sistema controlador
SCL-10A VP (Shimadzu Corp., J apan). As amostras so ento cromatografadas em uma coluna C-18
de fase reversa ODS (4.6 x 150 mm, 5m; Hi-Q) com um gradiente linear de 10 a 60% do solvente
B composto de acetonitrila + 0,1% de cido trifluoroactico (CH
3
CN / 0,1%TFA) com fluxo de 1,0
mL/min durante 40min, atravs de monitoramento em UV 214 nm. O solvente A composto de
0,1% de TFA em gua Milli-Q.
Todos os picos obtidos so coletados manualmente e individualmente ou agrupados em fraes
para serem posteriormente submetidos espectrometria de massa e ensaios biolgicos.
Monitoramento de atividade neurotxica das amostras em nervo sensorial de
crustceo. Tcnica de sucrose-gap:
A preparao ser realizada utilizando-se nervos sensoriais de crustceos decpodos braquiros
da espcie Callinectes danae (siri azul), coletados no canal de So Sebastio. Testaremos o efeito de
neurotoxinas isoladas de peonhas de anmonas sobre o potencial de ao axonal de nervo de siri.
O procedimento consiste na separao do 2
o
ou 3
o
par de patas provocando-se autotomia por
compresso do artculo proximal (base-squio). Como o nervo ocupa uma posio aproximadamente
central no pereipodo, o mesmo exposto at o dctilo, removendo-se um a um os artculos por
seco das membranas artrodiais, apdemas musculares e separao dos cndilos articulares.
Tcnica de sucrose-gap - Essa tcnica consiste no isolamento eltrico de uma rea
superficial do nervo, na regio entre os eletrodos de registro, atravs de lavagens sucessivas com
uma soluo de sacarose 1M. So feitas 10 lavagens com sacarose a fim de remover ons da
superfcie do nervo, deixando a rea eletricamente isolada, impedindo a passagem de corrente na
superfcie do nervo. O potencial de membrana pode ser medido de uma cmara contendo KCl para
outra com salina. Assim, eletrodos antes e aps a barreira de sacarose registram tanto a voltagem
produzida pela corrente inica que passa atravs da membrana e no interior das fibras nervosas
durante o potencial de ao, como o potencial de repouso. A cmara de acrlico que utilizada no
experimento para estimulao e registro dos potenciais de ao contm 8 sulcos escavados, unidos
centralmente por um sulco onde se encontra apoiado o nervo e, para isolar um sulco do outro
adiciona-se vaselina. Os eletrodos de estimulao se encontram nos sulcos 1 (positivo) e 2 (negativo),
enquanto que os de registro nos sulcos 5 e 8, separados por dois sulcos contendo sacarose 1M para
isolamento. Os cinco primeiros sulcos so preenchidos com soluo fisiolgica de C. danae e o ltimo
com soluo de KCl isosmtica (0,46M). Para amplificao dos sinais obtidos utilizamos um pr-
amplificador modelo CP511AC (Grass Instruments Co., Warwick, USA). Os dados sero adquiridos
atravs de um microcomputador tipo PC e processados atravs do programa WinWCP (Strathclyde
Electrophysiology Software, University of Strathclyde, Glasgow, UK
http://www.strath.ac.uk/Departments/PhysPharm/ses.htm).
A DEPRESSO METABLICA NOS ANIMAIS
Laura Saade Haddad
Laboratrio de Metabolismo Energtico e Adaptabilidade
Existem diversos fatores que limitam a existncia e sobrevivncia de um organismo na
natureza, podendo ser biticos, como a falta de recursos alimentares, relaes intra-especficas,
competio interespecficas, etc..., ou abiticos, os quais incluem fatores climticos como calor, luz,
umidade, interaes entre temperatura e umidade, oxignio, e outros. Frente a modificaes nestes
fatores, como quedas de temperatura, calor intenso, seca, escassez de oxignio e hipersalinidade, os
animais podem reagir de trs formas:
1- Migrar para um ambiente mais favorvel
2- Enfrentar estas condies ativamente
3- Evit-las mantendo-se inativos at o retorno a condies mais amenas.
Na maioria dos casos, estas mudanas nos fatores abiticos esto associadas escassez de
recursos alimentares, assim muitos animais adotaram a estratgia de evitar tais obstculos
sobrevivncia entrando em depresso metablica, na qual podem permanecer em jejum e inativos
por perodos prolongados e com uma drstica reduo no consumo de energia, ou seja, na taxa
metablica.
A depresso metablica uma reduo da taxa metablica padro ou de repouso para nveis
ainda inferiores podendo variar entre uma reduo de 60 a 99%, o que estende o tempo de
sobrevivncia de um indivduo quando as condies ambientais so desfavorveis, sendo a
sobrevivncia de um organismo diretamente relacionada com o grau de depresso metablica
alcanado. Este estado j foi relatado nos principais filos animais, de invertebrados a todas as
classes de vertebrados e caracterizado por uma reduo geral da atividade: os movimentos cessam,
a alimentao e digesto param, a freqncia cardaca e respiratria diminuem.
Existem diversos tipos de depresso metablica, como a estivao, que est associada ao
perodo de seca, a anaerobiose facultativa `a diminuio no teor de oxignio e a hibernao ao
frio invernal.
Na tabela 1 temos diversos exemplos de animais e alguns tipos de depresso metablica:
Fenmeno Animal % da taxa metablica
de repouso
Estivao
Lesma terrestre
Sapo/r do deserto
Peixe pulmonado
10-30
17-30
10-20
Anaerobiose facultativa Molusco marinho
Tartaruga de gua doce
5-10
5-20
Hibernao
Camundongo
Morcego
Esquilo terrcola
1.5-3
1-4
4-8
Existem tambm animais que realizam uma depresso metablica diria (torpor dirio), mas
este fenmeno est fortemente associado economia de energia durante o perodo de repouso,
tendo em vista que estes animais tem um consumo energtico bastante elevado durante o perodo de
atividade. o caso de algumas aves e mamferos pequenos, como beija-flores e morcegos,
respectivamente.
Dentre os animais capazes de reduzir to drasticamente seu metabolismo, alguns podem
faz-lo perante uma condio adversa repentina, inesperada, como a seca numa poca do ano em
que isto no freqente (encistamento em Artemia). Outros exibem uma dormncia sazonal, ou
seja, o fenmeno de depresso metablica se repete com periodicidade, ano aps ano, em
determinada estao. Nestes casos, a depresso metablica intrnseca, ou seja, o animal se
antecipa condio ambiental desfavorvel, ingere grandes quantidades de alimento, geralmente sob
a forma de lpides, e prepara todo o maquinrio enzimtico para a entrada em hipometabolismo.
Mesmo quando mantidos em laboratrio e com comida disponibilizada ad libitum estes indivduos
recusam o alimento durante a dormncia, denunciando o carter intrnseco do fenmeno.

Esquilo do rtico hibernando Lesmas Otala lactea estivando

O sapo Scaphiopus couchii saindo da estivao
Nesta aula sero abordados com maior profundidade os ajustes metablicos dos animais para
a entrada e sada da depresso metablica sazonal, bem como a regulao deste fenmeno.
Referncias bibliogrficas de apoio:
1-Para uma viso geral do fenmeno de depresso metablica:
Guppy, M., Fuery, C.J . and Flanigan, J .E. (1994). Biochemical Principles of metabolic
depression. Comp. Biochem. Physiol. 109B. 175-189.
Guppy, M. and Withers, P. 1990. Metabolic depression in animals: physiological perspectives
and biochemical generalizations. Biol. Rev. 74: 1-40.
Schimidt-Nielsen, K. (1996). Fisiologia Animal:Adaptao e meio Ambiente. 6ed. Editora e
Livraria Santos, So Paulo. P276-282.
2- A depresso metablica em diferentes animais:
Hailey, A. and Loveridge, J . P. (1996). Metabolic depression during dormancy in the African
tortoise Kinixys spekii. Can.J .Zool. 75:1328-1355.
Storey, K.B. (2002). Life in the slow lane: molecular mechanisms of estivation. Comp.
Biochem. Physiol. 133, 733-754.
Souza,S.C.R., Carvalho, J .E., Abe, A.S. Bicudo, J .E. P.W. and Bianconcini, M. S. C. (2004).
Seasonal metabolic depression, substrate utilization and changes in scaling patterns during the first
year cycle of tegu lizards (Tupinambis merianae). J . Exp. Biol. 2004 207: 307-318.
3-Para uma reviso sobre a regulao da depresso metablica:
Storey, K. B. and Storey, J .M. (2004). Metabolic rate depression in animals: transcriptional
and translational controls.
Boyer, B.B. and Barnes, B.M. Molecular aspects of mammalian hibernation. BioScience Vol.
49 No. 9 pp. 713-724
4-Para uma reviso geral sobre bioqumica:
Nelson, D.L., Cox, M. (2000). Lehninger Principles of Biochemistry. 3
rd
edition; Worth
Publishers: New York, N.Y.
TERMORREGULAO EM INSETOS
Denise Loli
Laboratrio de Metabolismo Energtico e Adaptabilidade
PARTE 1 I NTRODUO -TERMORREGULAO NOS I NSETOS EM GERAL
A maioria dos insetos torna-se progressivamente lenta e incapaz de voar a baixas
temperaturas. Porm, alguns insetos conseguem aquecer seus msculos de vo e ficar ativos mesmo
em ar muito frio (Schimdt-Nielsen, 2002). Tais insetos apresentam assim endotermia e so capazes
de realizar regulao da temperatura corprea em uma larga faixa de temperaturas ambiente. A
maioria desses animais regula a temperatura torxica mas no a temperatura abdominal (Withers,
1992). O aquecimento dos msculos do vo, no trax, antes da decolagem, ocorre, principalmente,
em grandes insetos, como gafanhotos, grandes mariposas, borboletas, mamangavas, vespas e
abelhas, que apresentam vo com alta potncia mecnica (Schmidt-Nielsen, 2002).
H muito tempo se conhece a endotermia em insetos. Em 1837, 6 anos aps o incio do uso
de termopares na medio da temperatura corprea em insetos por Nobili & Meloni (1831 apud
Heinrich, 1974), Newport (1837 apud Heinrich, 1974)) relatou que as mariposas e mamangavas
podem elevar a sua temperatura torxica acima da temperatura ambiente por meio de atividade
muscular. O aquecimento pr-vo foi descrito por Dotterweich (1928 apud Heinrich, 1974) e, em
1965, Heath & Adams (1965 apud Heinrich, 1974) mostraram que a mariposa Celerio lineata estabiliza
sua temperatura torxica durante o vo em uma larga faixa de temperaturas do ambiente. Desde
ento, vrios aspectos da termorregulao em insetos e outros animais foram estudados e revisados.
Para ilustrar as diferentes estratgias fisiolgicas, anatmicas e comportamentais de
termorregulao, usaremos como exemplo o caso das abelhas, que so insetos sociais que realizam
termorregulao individual e colonial.
PARTE 2 - CASO ESPEC FI CO: ABELHAS
Em abelhas em repouso, suas temperaturas corpreas so prximas s temperaturas
ambientais, porm, quando as abelhas saem para o forrageamento (vo para coleta de nctar, plen,
resina, barro etc) ou quando incubam sua cria, so capazes de regular as temperaturas corpreas por
meio de produo interna de calor. Dessa forma, a temperatura do corpo mantida constante e
independente da temperatura ambiente. Assim, as abelhas so denominadas insetos endotrmicos-
heterotrmicos ou endotrmicos facultativos (Heinrich & Esch, 1994)
A termorregulao possibilita:
- o vo em baixas temperaturas (as abelhas realizam aquecimento pr-vo)
- defesa contra predadores (h casos de abelhas que torram predadores capturados por
elas)
- incubar a cria (possibilitando condies adequadas para o desenvolvimento das larvas e
pupas e criando um microhbitat adequado para a colnia como um todo [termorregulao
colonial])
- vantagem competitiva (insetos que conseguem procurar recursos em horrios diferentes
de seus competidores)
Vantagens do comportamento de termorregulao em abelhas:
- propiciou o desenvolvimento de uma vida social
- propiciou a conquista de diferentes ambientes, como os desertos, as florestas tropicais,
o rtico etc (Michener, 1974; Heinrich & Esch, 1994)
PARTE 2.1. - TERMORREGULAO I NDI VI DUAL
Sero discutidos os mecanismos endgenos de produo de calor e os diversos fatores que
influenciam na termorregulao.
Mecanismos endgenos de produo de calor
A forma mais comum de gerao de calor no msculo o tremor muscular, que envolve o
funcionamento controlado de ATPases do sistema contrtil muscular (Hochachka & Somero, 1984). A
termognese por tremor muscular comum em mamferos, aves e em alguns insetos, sendo
aparentemente uma resposta generalizada dos endotermos ao frio.
Uma segunda maneira de aumentar a liberao metablica de calor envolve os processos que
resultam em termognese por no tremor. A termognese por no tremor relatada em mamferos
placentrios, alguns marsupiais e poucas aves (Withers, 1992). Os processos envolvidos englobam
aqueles de liberao de calor como aqueles gerados por ciclos fteis e aqueles originados do
metabolismo do tecido adiposo marrom (TAM) de mamferos. Heinrich (1993) apresenta ampla
reviso sobre as estratgias e mecanismos de termorregulao em insetos. Belzunces et al (1996)
investigaram os efeitos de compostos adrenrgicos na termorregulao de abelhas melferas mantidas
a 22C e com temperatura torxica monitorada por infravermelho. Segundo esses autores, um
mecanismo do tipo beta-adrenrgico parece estar envolvido na termorregulao de abelhas melferas
e particularmente na termognese.
O sistema circulatrio ineficiente para as trocas gasosas, entretanto auxilia na reteno de
calor no trax, por meio de mecanismo de contracorrente (Heinrich & Esch, 1994).
Outros fatores influenciando a termorregulao
Alm dos mecanismos endgenos, h tambm outros fatores que influenciam a
termorregulao das abelhas, como:
- pilosidade
- cor
- tamanho corpreo
- sexo
- hbito de vida
PARTE 2.2. - TERMORREGULAO COLONI AL EM I NSETOS SOCI AI S
O desenvolvimento das larvas e das pupas (a cria) favorecido se a temperatura do favo da
colnia for relativamente constante e independente da temperatura ambiente. Essas condies
favorveis dentro da colmia podem ser devido a estruturas internas e externas do ninho, do local
onde o ninho est alojado e da fisiologia das abelhas (termorregulao) (Michener, 1974; Engels et
al, 1995).
Considerando as abelhas, diversos grupos realizam termorregulao colonial, como as
abelhas melferas do gnero Apis, as mamangavas (Bombus) e as abelhas nativas sem ferro (por
exemplo os meliponneos). Este tpico ser discutido e apresentado na forma de diversos exemplos.
PARTE 3 - TPI CO DE DI SCUSSO
Evoluo da endotermia
Bibliografia:
Belzunces, L.P.; Vandame, R. & Gu, X. (1996) Modulation of honey bee thermoregulation by
adrenergic compounds. Neuroreport 7(10):1601-4.
Dotterweich, H. (1928) Zool Physiol Tiere 44: 399 apud Heinrich, B. (1974) Thermoregulation in
endothermic insects. Science 185: 747-56.
Engels, W.; Rosenkrakranz, P. & Engels, E. (1995) Thermoregulation in the nest of the neotropical
stingless bee Scaptotrigona postica and the hypothesis on the evolution of temperature
homeostasis in highly eosocial bees. Studies on Neotropical fauna and Environment 30(4):193-
204.
Heath, J .E. & Adams , P.A (1965) Nature 205: 309 apud Heinrich, B. (1974) Thermoregulation in
Heinrich, B. (1974) Thermoregulation in endothermic insects. Science 185: 747-56.
Heinrich, B. (1993) The Hot-Blooded Insects. Cambridge, MA. Harvard University Press.
Heinrich, B. & Esch, H. (1994) Thermoregulation in bees. American Scientist 82:164-170.
Hochachka, P.W. & Somero, G.N (1984) Biochemical Adaptation. Priceton University Press.
Michener, C.D. (1974) The social behavior of the bees. Cambridge. Belnap Press of Harvard University
Press, 404p.
Newport, G (1837) Philos Trans R Soc Lond 127(2): 259 apud Heinrich, B (1974) Thermoregulation in
Nobili & Meloni (1831) Ann Phys Chim 48: 198 apud Heinrich, B (1974) Thermoregulation in
Schmidt-Nielsen, K. (2002) Fisiologia animal: adaptao e meio ambiente. Santos Livraria Editora, So
Paulo.
Withers, P.C. (1977) Measurement of VO
2
, VCO
2
and evaporative water loss with a flow through mask.
J Appl Physiol 42(1): 120-3.
Withers, P.C. (1992) Comparative animal physiology. Saunders College Publishing, USA.
Sites interessantes:
http://zool33.uni-graz.at/schmickl/Self-
organization/Thermoregulation/Bee_thermoregulation/bee_thermoregulation.html
http://www.beekeeping.com/
http://www.hup.harvard.edu/reviews/HEITHE_R.html
http://www.webbee.org.br/
A Rana E O RATO: UM ESTUDO COMPARATIVO DAS
CAPACIDADES METABLICAS EM TECIDOS
MUSCULARES DE DUAS ESPCIES DE VERTEBRADOS
Jos Eduardo de Carvalho
Laboratrio de Ecofisiologia e Fisiologia Evolutiva
1 1. . I I N NT TR RO OD DU U O O
Os estudos comparativos nos oferecem uma valiosa ferramenta para se entender de forma
integrada como certas caractersticas fisiolgicas so modificadas em reposta s mudanas que
surgem ao longo da escala evolutiva. Eles nos permitem ainda compreender como, por exemplo, as
diferenas comportamentais esto correlacionadas com as caractersticas fisiolgicas que do suporte
aos padres tpicos de atividade em diversos organismos. Se focarmos as modificaes que ocorrem
em nvel celular podemos identificar diferentes alvos que esto sujeitos a modificaes na capacidade
de ciclagem de energia que, em ltima, estaro relacionadas com a capacidade para a atividade.
Dentre as principais alteraes podemos destacar os ajustes (1) na concentrao de estoques
energticos intracelulares, (2) na proporo e tamanho das fibras musculares, (3) na capacidade
tamponante dos msculos, (4) na quantidade de mitocndrias e (5) nos nveis e tipos de enzimas das
vias glicoltica e aerbia. Dessa forma, analisar de modo comparativo os processos metablicos
relacionados com a manuteno da homeostase energtica nos tecidos musculares contribui para o
entendimento das relaes entre a fisiologia e o desempenho. Nesta aula realizaremos um estudo
comparativo simples entre as atividades mximas das enzimas lactato desidrogenase (LDH) da via
glicoltica, e da citrato sintase (CS) do Ciclo de Krebs , em amostras em um tecido muscular do rato e
da r. Ao final, faremos uma discusso sobre os principais achados.
2 2. . A AB BO OR RD DA AG GE EM M E EX XP PE ER RI I M ME EN NT TA AL L
Material Biolgico
Utilizaremos a poro vermelha do msculo gastrocnemius do rato e da r. Todas as solues
sero fornecidas j preparadas; entretanto, suas composies so apresentadas no final do texto.
Preparao das Amostras
Pese cerca de 100mg de cada msculo e retalhe o tecido com uma tesoura, tomando-se o
cuidado de mant-los sobre gelo. Adicione os fragmentos no tubo de homogeneizao e acrescente 9
volumes de tampo de homogeneizao gelado (multiplique a massa de tecido pesado em gramas
por 9 para ter o volume de tampo a ser pipetado em mL). Homogeneize a mistura no Ultra Turrax
(Ika Labortecnik) a 20.000 rpm, mantendo-se o tubo sob gelo. A seguir, introduza o sonotrodo do
sonicador U-200S control (Ika Labortecnik) na soluo homogeneizada e ligue o aparelho 3 vezes por
10 segundos, com intervalos de 10 segundos entre cada vez, na amplitude de 50% e ciclo de 0,5.
Este procedimento dever romper todas as membranas celulares e mitocndriais, liberando para a
soluo as enzimas compartimentalizadas. Prepare dois frascos para uma diluio adicional de cada
amostra de tecido. Dilua a amostra em 1:10 vezes (este extrato ser utilizado na medida da atividade
da LDH) e 1:5 vezes (este extrato ser utilizado na medida da atividade da CS) utilizando o tampo
de homogeneizao.
Medida da Atividade Mxima da LACTATO DESI DROGENASE ( LDH )
A enzima LDH a responsvel pela seguinte reao:
A atividade da LDH ser medida por espectrofotometria, a 25
o
C, atravs do monitoramento
contnuo das alteraes de absorbncia, a 340nm, dada pela oxidao do NADH quando o piruvato
consumido. Para isso, misture as solues identificadas no protocolo abaixo:
soluo
volume a pipetar na
cubeta ( L )
[ final no ensaio
]
( mM )
Imidazol HCl - 50mM (pH 7,0) 880 50
DTT 100mM 50 5
NADH 15mM 10 0,15
Amostra diluda 1:10 10
Misturar, esperar atingir 25
o
C e ler a absorbncia por 3 minutos a 340nm
CONTROLE
Piruvato 40mM 50 2
Misturar e ler a absorbncia por 3 minutos a 340nm EXPERI MENTAL
Anote os valores de variao de absorbncia por minuto da reao aps a adio de piruvato,
descontadas as variaes observadas na reao controle.
Medida da Atividade Mxima da CI TRATO SI NTASE (CS)
A enzima CS a responsvel pela seguinte reao:
+ NADH + H
+
LDH
+ NAD
+
CH3
C
O
C
O
O
PIRUVATO LACTATO
CH3
C
O
C
O
H OH
OXALACETATO
CH2
C
O
C
O
O
O
O C
+ ACETIL-CoA + H
2
O CS
O
O
O
CITRATO
CH2
C
O
C
O
C
CH2
OH
+ CoA-SH
A quantidade de oxalacetato usado por unidade de tempo uma medida da atividade
cataltica da CS. O uso de oxalacetato ser medido em espectrofotmetro, a 25
o
C, pelo aumento da
absorbncia a 412nm, devido produo de coenzima-A ligada ao DTNB. Para isso, misture as
solues identificadas no protocolo abaixo:
soluo
volume a pipetar na
cubeta ( L )
[ final no ensaio
]
( mM )
Tris HCl - 50mM (pH 8,0) 885 50
Acetil-CoA 3mM 100 0,3
DTNB 1mM 100 0,1
Amostra diluda 1:5 20
Misturar, esperar atingir 25
o
C e ler a absorbncia por 3 minutos a 412nm
CONTROLE
Oxalacetato 20mM 25 0,5
Misturar e ler a absorbncia por 3 minutos a 412nm EXPERI MENTAL
Anote os valores de variao de absorbncia por minuto da reao aps a adio de
oxalacetato, descontadas as variaes observadas na reao controle.
Clculos
A atividade enzimtica usualmente expressa em unidades de atividade enzimtica (U) por
grama de tecido fresco. A unidade U representa a quantidade, em micromoles, de substrato
convertido em produto por minuto na soluo (U = mol.min
-1
). Para o clculo da atividade
enzimtica nas condies do ensaio devemos utilizar a seguinte equao:
( Abs.min
-1
)
x
V
U . g
tecido fresco
-1
= ----------------------- = mol . min
-1
. g
tecido fresco
-1

x
d
x
v
x

amostra
onde:
Abs = alterao de absorbncia por minuto d = distncia percorrida pela luz na soluo ( mm )
V = volume do ensaio ( L ) v = volume da amostra no ensaio ( L )
= coeficiente de absoro molar ( L.mol
-1
.mm
-1
)
amostra
= concentrao de massa da amostra ( g.L
-1
)
As unidades so expressas no sistema SI (Sistema Internacional de Unidades).
O coeficiente para o NADH igual a 6,22.10
2
L.mol
-1
.mm
-1
e a distncia d = 10mm.
Para propsitos prticos, usamos a concentrao da substncia em mmol.L
-1
( = mol.mL
-1
).
Ento, para o NADH,
x
d = 6,22 L.mmol
-1
( = mol.mL
-1
). Para o DTNB, a 412nm, essa mesma
relao equivalente a 13,6. A razo V / v nos informa, em outras palavras, qual a diluio da
amostra no ensaio. J a concentrao de massa da amostra(
amostra
) representa a diluio feita na
homogeneizao. Como os tecidos de um modo geral apresentam cerca de 80% de gua,
normalmente aceito que 1g de tecido equivale a 1mL. Assim, podemos simplificar a equao acima
para facilitar o clculo de atividade enzimtica:
( Abs.min
-1
)
U . g
tecido fresco
-1
= ------------------
x
diluio no ensaio
x
diluio na homogeneizao
6,22
( se usado o NADH)
(ou 13,6
se usado o DTNB
)
...lembrando ainda que foi feita uma diluio extra da amostra (1:10 para a medida da atividade da
LDH e 1:5 para a medida da atividade da CS), e esta deve ser levada em conta neste momento
multiplicado-se o valor desta no resultado final.
Assim, utilize a equao acima para calcular a atividade das enzimas LDH e CS nos tecidos
musculares do rato e da r. Anote os resultados obtidos e guarde-os com carinho.
3 3. . A AG GO OR RA A P PE EN NS SE E N NI I S SS SO O. .. .. .
1. Que tipo de informao possvel obtermos com a anlise da atividade mxima das enzimas LDH e
CS e por que estas enzimas foram estrategicamente escolhidas para este estudo ?
2. Baseado neste estudo, quais seriam suas explicaes para as diferenas encontradas entre o rato e
r ?
3. O que devemos levar em considerao quando comparamos o rato e a r durante o desempenho
desses animais na atividade locomotora ?
4. Ao final dessa aula, quais as principais concluses que voc pode extrair desse tipo de estudo
comparativo ? possvel pensar em adaptao neste nvel de abordagem ?
4. I NFORMAES ADI CI ONAI S
Esquema das Principais Vias Metablicas Energticas no Msculo de Vertebrados
Composio do Tampo de Homogeneizao
Imidazol 20mM; PMSF 1mM; EDTA 2mM; NaF 20mM e Triton X-100 0,1% (pH 7.4)
Abreviaes da solues
DTT: Ditiotreito
DTNB: cido Dithionitrobenzico
NADH: Nicotinamida Adenina dinucleotdeo, forma reduzida
PMSF: Fenilmetilsulfonil fosfato
piruvato
desidroge
NAD
COENZIM
NADH+
CO
TRIACILGLICE
CIDO GLICE
ACIL-
5. SUGESTES DE LEI TURA
Metodologia
Bergmeyer, H.U. (1983) Methods of Enzymatic Analysis, vol 2. Enzymes. Verlag Chemic,
Wheinheim.
Passonneau, J .V and Lowry (1993). Enzymatic Analysis: a practical guide. Humana Press,
Totowa, N.J .
Teoria
Bevier, C.R. (1995) Biochemical correlates of calling activity in neotropical frogs. Physiol. Zool. 66:
1118-1142.
Gleeson, T.T. (1991) Patterns of metabolic recovery from exercise in amphibians and reptiles. J . Exp.
Biol. 160: 187-207.
Glesson, T.T. (1996) Post-exercise lactate metabolism: a comparative review of sites, pathways and
regulation. Annu. Rev. Physiol. 58: 565-581.
Hochachka, P.W. (1994) Muscles as Molecular and Metabolic Machines. CRC Press, Inc.
Hochachka, P.W. & Somero, G.N. (2002) Biochemical Adaptation. Mechanism and Process in
Physiological Evolution. Oxford Univ. Press, New York.
McNab, B.K. (2002) The Physiological Ecology of Vertebrates. A View from Energetics. Cornell
Univ. Press, New York.
Kemper, W.F.; Lindstedt, S.L.; Hartzler, L.K.; Hicks, J .W. & Conley, K.E. (2001) Shaking up glycolysis:
sustained, high lactate flux during aerobic rattling. Proc. Natl. Acad. Sci. 98: 723-728.
Pough, F.H.; Magnusson, W.E., Ryan, M.J . Wells, K.D. and Taigen, T.L. (1992) Behavioral
energetics. In: Ferder, M.E. and Burggren, W.M. (eds.) Enviromental Physiology of the
Amphibians. The Univ. Chicago Press. Chicago. pg: 395-436.
Suarez, R. K. (1996) Upper-limits to mass-specific metabolic rates. Annu. Rev. Physiol. 58: 583-605
Suarez, R.K. (1998) Oxygen and the upper limits to animal design and performance. J . Exp. Biol. 201:
1065-1072.
Wells, K.D. (2001) The Energetics of Calling in Frogs. In: Ryan, M.J . (ed.). Anuran
Communication. Smithsonian Inst. Press. Washington.
ECOFISIOLOGIA DE LAGARTOS
Renata Brandt Nunes
A ecofisiologia pode ser interpretada como o estudo de como os organismos funcionam e
respondem a mudanas em seus ambientes naturais. Neste contexto, a aula tratar principalmente
das implicaes fisiolgicas das mudanas de temperatura nos Squamata, com nfase nos lagartos,
pois bastante profunda a influncia deste fator na vida destes animais. Ser importante recordar a
terminologia relacionada regulao da temperatura, como os conceitos de endotermo e ectotermo
assim como pecilotermo e homeotermo; e ainda heliotermos, tigmotermos; a diferena entre ser
termorregulador e termoconformador; o que a temperatura preferencial e conceitos relacionados
aos limites de temperatura de atividade.
A aula em si ser baseada na discusso sobre os mecanismos morfolgicos e fisiolgicos
da termorregulao e a relao com aspectos da histria natural dos lagartos no contexto metablico
e dependente de temperatura, como distribuio e seleo de microhabitat; atividade diria e sazonal;
comportamento; alimentao, digesto e dieta; reproduo; infeco e balano hdrico.
Sugestes de Leitura
Bennet, A.F. (1980). The thermal dependence of lizard behaviour. Animal Behaviour, 28: 752-762.
Deeming, D.C. & Fergusson, M.W.J . (1991). Physiological effects of incubation temperature on
embryonic development in reptiles and birds. In Egg incubation: its effects on embryonic
development in birds and reptiles, eds D. C. Deeming & M. W. J . Fergusson, 147-171.
Cambridge: Cambridge University Press.
Espinoza, R.E. & Tracy, C.R. (1997). Thermal biology, metabolism and hibernation. In: The biology,
husbandry and health care of reptiles. Ackerman LJ ed. Volume 1, Biology of Reptiles.
T.F.H. Publication, Neptune City, NJ .
Huey, R.B. (1982). Temperature, Physiology, and the Ecology of Reptiles. In: Biology of the
Reptilia vol 12. Gans C. et al. eds, Academic Press.
McNab, B.K. (2002). The Physiological Ecology of Vertebrates: a view from energetics.
Cornell University Press.
Packard, G.C. (1991). The physiological and ecological importance of water to embryos of oviparous
reptiles. In Egg incubation: its effects on embryonic development in birds and
reptiles, eds D. C. Deeming & M. W. J . Fergusson, 213-228. Cambridge: Cambridge University
Press
Pough, F.H. (1980). The advantages of ectothermy for tetrapods. American Naturalist 115:92-
112.
Pough, F.H. & Gans, C. (1982). The vocabulary of reptilian termorregulation. In Biology of the
Reptilia vol 12. Gans C. et al. eds, Academic Press.
Pough, H.F.; Andrews, R.M.; Cadle, J .E.; Crump, M.L.; Savitzky, A.H. & Wells, K.D. (1998).
Herpetology. New J ersey: Prentice Hall, Inc.
Links I nteressantes
Pginas de pesquisadores, com informaes sobre as linhas de pesquisa e links para outras
pginas de herpetologia.
http://rydberg.biology.colostate.edu/faculty/profile.php?name=Packard
http://lamar.colostate.edu/~packard/ Gary Packard
http://faculty.washington.edu/hueyrb/index.html - Laboratory of Evolutionary Physiology, dirigido por
Raymond B. Huey. Dispe ainda de conselhos para estudantes de ps-graduao ou interessados
em fazer ps-graduao
http://uts.cc.utexas.edu/~varanus/ - Piankas Lab Page. Pgina do Laboratrio do Eric Pianka.
http://www.omnh.ou.edu/personnel/herpetology/vitt/ - Laurie J . Vitt
http://compphys.bio.uci.edu/bennett/bennett.htm Albert F. Bennet
http://oeb.indstate.edu/faculty/Angilletta.htm Michael J . Angilletta J r.
Cursos de Ecofisiologia na I nternet
http://wildlife.wisc.edu/courses/401/ - University of Wisconsin Madison
http://www.eeb.uconn.edu/courses/eeb296/ - University of Connecticut
http://bioweb.wku.edu/faculty/Crawford/526.html Western Kentucky University
I nformaes gerais sobre lagartos
http://tolweb.org/tree?group=Diapsida&contgroup=Amniota Tree of Life, com cladogramas e
discusses sobre filogenia de todos os grupos de seres vivos. Este link direciona para o grupo dos
diapsida.
http://www.ucmp.berkeley.edu/diapsids/diapsids.html UCPM Berkeley, cladogramas e todo tipo de
informao biolgica (incluindo fsseis) sobre a diversidade da vida, este link direciona para o grupo
dos diapsida
COMPORTAMENTO E FISIOLOGIA DE FORMIGAS Atta
Pedro Ribeiro
As sociedades dos insetos so conhecidas por se constiturem de indivduos especializados em
diferentes tarefas. Em certas espcies de formigas, esta especializao est relacionada com o
aparecimento de diferenas surpreendentes no tamanho entre indivduos de uma mesma colnia,
geralmente associadas a tarefas diferentes (Bonabeu, 1997). Temos, por exemplo, em colnias do
gnero Atta formigas cuja largura da cpsula ceflica pode variar de 0,8mm at 3,0mm.
Simplificando, podemos subdividir estes diferentes tamanhos em quatro grupos, de acordo com suas
funes. Assim, temos as jardineiras e babs que so as menores operrias da colnia e tm a
funo de cuidar das hifas e das formas imaturas. J as generalistas, de cpsula ceflica com
aproximadamente 1,4mm so responsveis por vrios tipos de atividades dentro do ninho, como a
preparao de vegetais, que deve ser feita antes da incorporao dos mesmos esponja, descarte de
lixo e reconstruo das esponjas de fungo. Temos ainda a no menos importante casta das
forrageadoras com 2,2mm de cpsula ceflica, essas formigas exploram o meio externo ao ninho e
so responsveis pela coleta de vegetao. Por ltimo, temos as defensoras ou soldados, com cpsula
ceflica de 3,0mm, como o prprio nome sugere so elas as responsveis pela defesa do ninho contra
invasores, principalmente de outras formigas. (Adam e Ratnieks, 2001; Roces e Holldobler, 1994;
Andrade et al., 2002; Carvalho, 1972; Wilson, 1980; Wilson, 1971). A diviso de tarefas no
completamente rgida, sendo que a colaborao entre os indivduos de diferentes castas propicia o
surgimento de padres de comportamentos caractersticos de um superorganismo, favorecendo a
colnia de uma forma global (Hlldobler e Wilson 1984). A manuteno do equilbrio homeosttico de
uma colnia requer uma rpida percepo de fatores desestabilizadores externos ou internos e uma
comunicao que possibilite a reorganizaao na direo do equilbrio.
Alm da flexibilidade na troca de tarefas entre as diferentes castas de formigas operrias
variaes do meio ambiente promovem comportamentos que conduzem ao reequilbrio do
microambiente da colnia. Kleineidam e Roces em 2000, observaram em ninhos de formigas
cortadeiras Atta vollenveideri diferentes comportamentos em funo da idade da colnia. Os ninhos
de colnias grandes, maduras, asseguram um bom micro-clima para o crescimento do fungo. Essas
colnias constroem montes de terra ao redor das entradas do ninho cuja arquitetura promove a
ventilao preservando a concentrao de CO2 em baixos nveis. Alm disso, esses montes de terra
impedem a entrada da enxurrada nos olheiros. As colnias jovens, pequenas e que ainda no
construram montculos protetores se vem obrigadas a fecharem todas as sadas do ninho para
proteg-lo do excesso de chuva. Quando fecham as entradas a concentrao de CO2 aumenta
rapidamente, a taxa de respirao da colnia reduz-se, a respirao do fungo simbitico tambm
reduzida e o crescimento da colnia fica comprometido. Contudo, atravs do fechamento, as operrias
impedem a inundao e garantem a continuidade da colnia.
Freqentemente a homeostase de uma colnia envolve processos complexos de
comportamentos onde aspectos individuais e sociais interagem para suprir, com maiores benefcios,
as necessidades energticas da colnia (Roces, 2002). Em colnias de Atta cephalotes, a primeira
formiga forrageadora que encontra uma nova fonte de alimento, corta um fragmento de folha bem
menor do que cortaria numa situao de forrageamento bem estabelecida. Dessa forma, essa
primeira formiga diminui o tempo de corte e chega mais rapidamente ao ninho onde passar as
informaes da fonte para suas irms. Assim, a coleta total para a colnia aumenta atravs do
recrutamento embora a primeira forrageadora tenha prejudicado sua performance. Num primeiro
momento, o recrutamento torna-se mais importante que a atividade individual de corte. Essa
capacidade individual de distinguir as diferentes situaes de forrageamento possibilita maior rapidez
no reequilbrio energtico da colnia (Roces, 1993). A velocidade com que as operrias modificam seu
comportamento em resposta aos estmulos externos varia de acordo com o tipo de comportamento e
o contexto. O grau de flexibilidade pode variar com o tamanho e a idade da colnia, as operrias de
colnias jovens parecem mais versteis, mais flexveis em suas tarefas, mas a colnia como um todo
menos homeosttica. Uma vez que a proporo entre as castas muito mais frgil em colnias
jovens, e os mecanismos de suporte, como a mudana de tarefas no 100% eficiente (Lenoir,
1979a; Gordon,1987).
Todo processo de homeostase de uma colnia que envolve novas organizaes e mudanas
de comportamentos, individuais ou sociais, depende de um sofisticado mecanismo de comunicao
qumica. As intercomunicaes ocorrem atravs de emanaes de substncias qumicas (feromnios)
exaladas de diferentes partes do corpo das formigas e percebveis por suas irms, atravs das
antenas que so rgos de percepo qumica. Esses avisos qumicos tm, de acordo com as
substncias desprendidas e circunstncias do momento, funes diferentes como: alarme de invaso,
chamados para os cuidados com a prole, recrutamento para a busca de alimentos e muitas outras
ainda no bem conhecidas (Hlldobler e Wilson, 1990). Alm de se comunicar atravs de feromnios
as formigas so capazes de perceber diversas variaes ambientais entre elas as de temperatura e
umidade. Uma vez identificadas essas variaes as operrias podem modificar o seu comportamento.
Desta maneira, a colnia, aparentemente, reconhece a existncia de um problema e passa a se
comportar de forma a tentar corrigi-lo. (Roces e Kleineidam, 2000).
Nesta aula nos basearemos na descrio e discusso de experimentos realizados em nosso
laboratrio. Estes experimentos mostram a plasticidade comportamental que formigas Atta sexdens
rubropilosa podem apresentar em diversas situaes.
Referncias
Adam, G.H. & Ratnieks, F.L.W. (2001). Task partitioning, division of labour and nest
compartmentalization collectively isolate hazardous waste in the leafcutting ant Atta cephalotes.
Behav. Ecol. Sociobiol. 49: 387-392.
Andrade, A.P.P.; Forti,L.C.; Moreira,A.A.; Boareto, M.A.C.; Ramos, V.M. & Matos, C.A.O.(2002).
Sociobiology vol. 40, n 2, 2002.
Autuori, M. (1941). Contribuio para o conhecimento da sava. (Atta ssp Hymenoptera
Formicidae) I- Evoluo do sauveiro Atta sexdens rubropilosa Forel, 1908.
Autuori, M. (1942). Contribuio para o conhecimento da sava (Atta ssp. Hymenoptera).
(Formicidae) III- Excavao de um sauveiro (Atta sexdens rubropilosa. Forel, 1908). Arq. Inst.
Biol. 13: 137-148.
Autuori, M. (1947). Contribuio para o conhecimento da sava (Atta ssp. Hymenoptera
Formicidae) IV- O sauveiro depois da 1 revoada (Atta sexdens rubropilosa,Forel.1988). Arq.
Inst. Biol. 18: 39-70.
Bergmeier, T. e al. 1948. Combate sava. Biologia- Formicidas- Extintores- Cuiabanas Ed.
Chac. e Quint. S. Paulo, n 42, 35.
Bonabeau, E.; Theraulaz, G.; Deneubourg, J .L.; Aron, S. & Camazine S., 1997. Self- organization in
social insects. Trends in Ecology and Evolution.12 (5): 188-193.
Carvalho, A.M.A. (1972). Alguns dados sobre a diviso do trabalho entre operrias de Atta sexdens
rubropilosa, Forel, 1908 em colnias iniciais mantidas em laboratrio. Tese de doutorado,
Instituto de Psicologia, Universidade de So Paulo, So Paulo
Carvalho, J . H. (1935). Ligeiras notas sobre o combate sava. Min. Agric., Dept. Nac. da Prod.
Vegetal Serv. Defesa Sanitria Vegetal. Publicao n 3 18 pp.
Cherret, J .M. (1968). The foraging behaviour of Atta Cephalotes ( l.). ( Hymenoptera: Formicidae). I.
Foraging pattern and plant species attacked in tropical rain forest. J ournal of Animal Ecology,
37: 387-402.
Detrain, C & Pasteels, J .M. (1992). Caste polyethism and collective defense in the ant, Pheidole
pallidula: the outcome of quantitative differences in recruitment. Behav. Ecol. Sociobiol.
29:405-412.
Gordon, D.M. (1999). Ants at work: How an Insect Society is Organized. The Free Press, Simon and
Schuster, de Nova York, USA.
Haines, B. L. (1978). Element and energy flows through colonies of the leaf-cutting ant, Atta
colombica in Panama. Biotropica, 10 (4): 270-277.
Hlldobler, B. & Wilson, E.O. (1990). The Ants. The Belknap Press of Harvard University Press,
Cambridge, Massachusetts 732 pp.
Hlldobler, B. and F.O. Wilson 1994. J ourney to the ants. Library of Congress Cataloging- in-
Publication data. USA. 228 pp.
Kerr, W. (1961). Acasalamento de rainhas com vrios machos em duas espcies da tribo Attini
(Hymenoptera, Formicoidea). Rev. Brasil. Biol. 21(1): 45-48
Mariconi, F.A.M. (1970). As savas. Editora Agronmica Ceres, So Paulo, Brasil. 167 pp.
Mariconi, F.A.M.; Berti Filho, E. & Fontes, L.R. (1996). Anais do Simpsio sobre Formigas
Cortadeiras dos Pases do Mercosul. Fundao de Estudos Agrrios Luis de Queiroz-
Piracicaba, So Paulo, Brasil. 139 pp.
Mueller, U.G. & Wcislo, W.T. (1998). Nesting biology of the fungus-growing ant Cyphomyrmex
longiscapus Weber (Attini, formicidae).
Oliveira Filho, M.L. (1934). Combate sava. Bol. Agric. 35: 541-610.
Ribeiro, P.L. & Navas, C.A. (2004). A study on the influence of relative humidity in the selection of a
garbage disposal location in Atta sexdens rubropilosa, Forel, 1908 (Hymenoptera- Formicidae)
(submetido).
Roces, F. & Nuez, J . (1995). Thermal Sensitivity During Brood Care in Workers of Two Camponotus
Ant Species: Circadian Variation and Its Ecological Correlates. J . Insect. Physiol. 41(8): 659-
669.
Roces, F. & Hlldobler, B. (1994). Leaf density and a trade-off between load-size selection and
recruitment behavior in the ant Atta cephalotes. Oecologia 97: 1-8.
Roces, F & Kleineidam, C. (2000). Humidity preference for fungus culturing by workers of the leaf-
cutting ant Atta sexdens rubropilosa . Insectes soc. 47: 348-350.
Stahel, G. & Geijskes, D.C. (1940). Observations about temperature moisture in Atta- nests. Rev.
Entomol. 11: 766-775.
Wilson, E.O.(1971). The I nsects Societies The Belknap of Harvard University Press.
Wilson, E.O. (1980a). Caste and Division of Labour in Leaf-cutter Ants (Hymenoptera: Formicidae:
Atta) Behavioural Ecology and Sociobiology. 7: 143-156.
RELGIO BIOLGICO DE MAMFEROS: MECANISMOS
MOLECULARES E CONTROLE DA RITMICIDADE INTERNA
DO ORGANISMO.
Pedro Augusto Carlos Magno Fernandes
Laboratrio de Cronofarmacologia
Aspectos Abordados:
O intuito desta aula ser passar um pouco da evoluo dos relgios biolgicos ao longo das
espcies at chegarmos aos mamferos onde o estudo ser aprofundado. Discutiremos os mecanismos
moleculares que controlam a ritmicidade interna do relgio central e como ele sincronizado por
fatores externos como, por exemplo, o ciclo claro/escuro ambiental.
O relgio biolgico central transmite as informaes rtmicas ambientais para diversos
osciladores internos que, por sua vez, promovem respostas fisiolgicas que se refletem em padres
comportamentais especficos. Para ilustrar este processo tomarei por base o controle do relgio sobre
a produo rtmica dos glicocorticides e da melatonina. Aproveitando para fazer um gancho com a
minha rea de pesquisa que consiste na investigao da inter-relao entre as glndulas pineal e
adrenal durante um processo inflamatrio crnico.
I ntroduo:
Os seres vivos, na sua forma mais simples, como os seres unicelulares, at sua forma mais
complexa, como os vertebrados, so estruturados no tempo e no espao. A maioria dos parmetros
bioqumicos, fisiolgicos e comportamentais dos organismos apresenta flutuaes dirias que
persistem sob condies constantes, indicando que osciladores endgenos foram incorporados aos
sistemas em resposta s variaes do ciclo claro-escuro ambiental (Menaker et al., 1997).
No centro dos sistemas que controlam e regulam os ritmos circadianos dos vertebrados esto
trs estruturas que se interconectam num eixo circadiano central, que so: os ncleos
supraquiasmticos (NSQ), a retina e as glndulas pineal e adrenal (Menaker et al., 1997). Estes
otimizam as atividades bsicas dirias, a vida reprodutiva e algumas respostas sazonais.
O sistema mnimo requerido para adaptao s variaes ambientais seria um relgio
endgeno, independente do meio ambiente, um sistema sensor que pudesse detectar as alteraes
rtmicas do meio ambiente e um ou mais elementos sincronizadores, que teriam como funo o ajuste
do meio interno e das funes vitais s variaes ambientais. Recentemente, foram descritos os
mecanismos moleculares do relgio central (NSQ) e de relgios biolgicos locais, chamados de servo
relgios (Reppert e Weaver, 2002). Tambm conhecida a forma como a retina capaz de detectar
luz e enviar a informao ftica para os NSQ (Provencio et al., 2000) e o papel de diversos
marcadores internos como, por exemplo, o da melatonina hormnio produzido e liberado pela
glndula pineal- como marcador do escuro e o dos glicocorticides -produzidos ritmicamente pela
glndula adrenal- como antecipadores do perodo de atividade, agindo portanto sobre o ciclo
viglia/sono dos indivduos.
Bibliografia:
Cronobiologia:Princpios e Aplicaes (2003) - Organizadores: Nelson Marques e Luiz Menna-
Barreto; editora Fiocruz.
Menaker, M.; Moreira, L.F. & Tosini, G. (1997). Evolution of circadian organization in vertebrates.
Braz. J . Med. Biol. Res., 30: 305-313, 1997.
Reppert, S.M. & Weaver, D.R. (2002). Coordination of circadian timing in mammals. Nature 418: 935-
941.
Provencio, I; Rodriguez, I.R.; J iang, G.; Hayes, W.P.; Moreira, E.F. & Rollag, M.D. (2000). A novel
human opsin in the inner retina. J . Neurosc. 20: 600-605.
Lang, V. & Sizonenko, PC. (1988) Melatonin and human adreno-cortical function. In: Miles, A.,
Philbrick, D.R.S. Thompson, C (eds) Melatonin, clinical perspectives. Oxford University
Press, pp 62-78.
Sites Recomendados:
www.nature.com
www.pubmed.com
SISTEMA DIGESTRIO
Carlos Eduardo Cruz
Laboratrio de Fisiologia Molecular do Trato Digestivo
ASPECTOS EVOLUTI VOS - CONSI DERACOES I NI CI AI S
Protozorios e e alguns organismos multicelulares (como esponjas) no apresentam um trato
digestivo, e a digesto ocorre intracelularmente. Embora isto possa parecer uma caracterstica
primitiva, j foi verificado em Paramecium que a digesto intravacuolar est associada uma
acidificacao e alcalinizacao sequencial, de uma maneira similar ao que ocorre no sistema digestivo de
vertebrados.
O movimento do alimento e fluidos ao longo do canal alimentar realizado por clulas ciliares
no sistema digestivo de muitos invertebrados. O transporte de secrees digestivas tambm pode ser
ajudado atravs do movimento ciliar nos cecos e dutos glandulares. medida que o tamanho das
partculas de alimento e o dimetro do trato digestivo aumentaram, os clios perderam a sua
eficincia, estando ausentes em alguns grupos como nematides e insetos, favorecendo a
participao de movimentos musculares no transporte do alimento.
Na maior parte dos invertebrados, h a formao de regies mais especializadas como cecos
e regies glandulares responsveis pela secreo, excreo e absoro de nutrientes. Moluscos e
artrpodos apresentam glndulas salivares altamente desenvolvidas. Em aneldeos o arranjo geral dos
rgos e tecidos similar ao observado em vertebrados. Em moluscos, j ocorre a formao de
estruturas hepticas apresentando diferentes tipos celulares, e que so responsveis pela absoro,
digesto intracelular, secreo, excreo e armazenamento, e produzem algumas enzimas digestivas
que so secretadas para a regio estomacal.
A digesto, fermentao microbiana e a sntese de nutrientes so complementadas pela
presena de endosimbiontes em muitas espcies de vertebrados, estando bem documentada em
aneldeos, moluscos, equinodermos e insetos. Buchner (1965) verificou que a presena de algas nas
clulas que revestem o trato digestivo de muitos invertebrados serve para garantir ao hospedeiro O
2
,
carboidratos, uma regio de armazenamento de alimento, alm servir de mecanismo de excreo de
CO
2
, PO
4
e compostos nitrogenados.
O SI STEMA DI GESTI VO SEGUE CI NTI CAS ENZI MTI CAS DE REATORES QU MI COS
De uma perspectiva fisiolgica, sistemas alimentares podem ser agrupados em trs categorias
com base em como eles processam o alimento em um reator qumico, ou local de digesto qumica. O
trato digestivo dos celenterados, por exemplo, funciona como um reator em batelada (tipo batch),
pois no recebe alimento continuamente, ou seja, necessrio que parte do alimento seja processado
e eliminado antes da entrada de mais alimento. No estmago de ruminantes, por outro lado, ocorre a
digesto autocataltica, atravs da presena de microorganismos simbiontes, e este funciona como um
reator contnuo de mistura em estado estacionrio (do tipo CFSTR), pois i. recebe entrada contnua de
substratos, ii. o seu contudo retirado continuamente e iii. a corrente de sada possui as mesmas
caractersticas do contedo do tanque do reator, sem variao ao longo do tempo. O intestino
delgado de mamferos funciona como um reator tubular em estado estacionrio (do tipo plug flow),
aonde a concentrao dos reagentes e a velocidade de consumo destes reagentes variam ao longo de
seu comprimento, considerando que nesta regio ocorre a absoro de nutrientes. Este tipo de reao
qumica ocorre durante a digesto cataltica, aonde enzimas digestivas endgenas atuam na hidrlise
do alimento.
CLASSI FI CAO DE ENZI MAS DI GESTI VAS
As enzimas digestivas foram amplamente conservadas ao longo da cadeia evolutiva.
Independentemente do organismo em questo, estas podem ser divididas, de uma maneira
simplificada, em proteases, carboidrases e lipases.
As proteases, que atuam sobre cadeias peptdicas de diferentes tamanhos, so divididas em
endopeptidases, quando hidrolisam os peptdeos internamente, ou exopeptidases, quando a hidrlise
feita pela cadeia amino- ou carboxi- terminal. Tais enzimas tambm so classificadas de acordo com
os aminocidos que participam do processo cataltico no stio ativo, podendo ser subdivididas em
cistena-, serina-, aspartato- e metaloproteinases.
Tripsinas, quimotripsinas, elastases, pepsinas, quimosinas e colagenases, por exemplo, so
endopeptidases que catalisam a hidrlise de diferentes aminocidos, que podem ser bsicos, como
arginina e lisina (no caso das tripsinas), ou catalisar a hidrlise do grupo carboxila de aminocidos
aromticos, como fenilalanina e triptofano (no caso das quimotripsinas). Dentre as exopeptidases,
podemos destacar as aminopeptidases, carboxipeptidases A e B e dipeptidases. As aminopeptidases
hidrolisam aminocidos a partir do grupo amina das cadeias peptdicas e so classificadas com base
na sua dependncia por ions metlicos (geralmente Zn
+2
ou Mn
+2
) e especificidade ao subtrato. As
carboxipeptidases hidrolisam aminocidos a partir do grupamento carboxila da cadeia peptdica, e
podem ser classificadas, de acordo com o seu mecanismo cataltico, em serina, metalo- e cistena
carboxipeptidases.
As protenas so sequencialmente hidrolisadas por endopeptidases extracelulares que atacam
ligaes peptdicas ao longo da cadeia protica, e exopeptidases, que hidrolisam aminocidos
terminais. Oligo- e dipeptdeos so posteriormente hidrolisados por enzimas presentes em
microvilosidades com borda em escova (ligadas diretamente membrana ou associadas ao glicoclix)
ou presentes no contedo das clulas intestinais absortivas.
A maioria das endopeptidases secretada como zimgenos inativos, e so ativadas no lmen
do trato digestivo, protegendo assim os tecidos do hospedeiro contra ataque proteoltico.

Os polissacardeos so inicialmente clivados por alfa-amilases na maioria dos organismos
estudados. Amilose, amilopectina e glicognio so hidrolisados por alfa-amilases para formar maltose,
isomaltose, maltotriose e outros oligossacardeos de ligao alfa-1,4. Maltase posteriormente atua nas
maltoses, mas incapaz de hidrolisar as ligaes alfa-1,6 de isomaltose, o que realizado pela
isomaltose ligada s clulas epiteliais intestinais. Alfa-amilase, maltase e sacarase so classificadas
como alfa-glicosidases, pois catalisam a hidrlise da ligao glicosdica alfa-1,4 de oligossacardeos e
di-holosdeos. As beta-glicosidases hidrolisam ligaes covalentes beta-1,4 entre holosdeos, como
celulose, hemicelulose e celobiose.
Embora enzimas endgenas de vertebrados consigam hidrolisar as ligaes alfa-1,4 e alfa-1,6
em amido e glicognio, elas no so capazes de hidrolisar as ligaes beta-1,4 encontradas em
celuloses e hemiceluloses, ou as ligaes alfa-1,4 de pectinas e galactanos, sendo esta digesto
realizada atravs da atividade microbiana. Quitina pode ser digerida por vrios grupos de vertebrados,
incluindo mamferos, aves e rpteis, alm de ser digerida por microorganismos.
Todos os dissacardeos, com exceo da quitobiose, so hidrolisados a monmeros por
dipeptidases presentes nas membranas das microvilosidades intestinais.

As esterases, diferentemente de lipases, geralmente hidrolisam lipdeos que esto em soluo.
As lipases descritas na maioria dos vertebrados hidrolisam triglicerdeos na ligao ster C-1 e C-3,
liberando dois cidos graxos e um beta-monoglicerdeo. Esterases hidrolisam monosteres tais como
lecitina e colesterol, liberando lisolecitina, colesterol e os seus respectivos cidos graxos.
Os lipdeos clivam cidos graxos de cadeia longa mais rapidamente do que esterases, cuja
especificidade parece ser mais dependente do tipo de lcool do que da estrutura do cido graxo. As
lipases j foram encontradas em secrees salivares, farngeas e gstricas em diversos grupos
animais, mas so secretadas principalmente pelo pncreas na maioria dos vertebrados e parecem ser
as enzimas mais importantes para a digesto lipdica. As esterases tambm so predominantemente
enzimas pancreticas em vertebrados.
Sais biliares e fosfolipdeos (principalmente lecitina) contribuem para a emulsificao e
absoro das gorduras da dieta, e tambm servem como via principal de excreo de colesterol e
produtos finais do catabolismo da hemoglobina. Todos os sais biliares parecem ser derivados de
colesterol. Em peixes e anfbios, eles consistem primariamente de lcoois sulfatados, e conjugados de
taurina e glicina em vertebrados acima destes grupos evolutivos. Uma vez iniciado o processo de
emulsificao, a lisolecitina, produto da hidrlise de lecitina, e os produtos finais da hidrlise de
triglicrides, tambm agem como detergentes fortes.
BI BLI OGRAFI A BSI CA
Withers, P.C. Comparative Animal Physiology, Saunders College Publishing, 1992
Randall, D.J . Animal Physiology Mechanisms and Adaptations, Freeman and Company, 1997
Schmidt-Nielsen, Fisiologia Animal Adaptao e Meio Ambiente, Editora Santos, 1996
MECANISMOS DE OSMORREGULAO EM ANIMAIS.
James Fernando Malta da Silva
Luis Alberto Valotta
Prof. Dr. Luiz C. Salomo
Laboratrio de Osmorregulao
COMENTRIOS GERAIS
adaptado de R. Gilles (1979) por
Luis Alberto Valotta
J ames Fernando Malta da Silva
A vida na Terra dependente de gua. Os seres vivos so sistemas bioqumicos altamente
sofisticados organizados em torno das propriedades desta molcula. A gua constitui-se no principal
meio onde as interaes moleculares indispensveis vida ocorrem. Tambm se constitui no veculo
que transporta as molculas para diferentes locais onde essas interaes podem ocorrer.
Alm dos muitos compostos orgnicos encontrados como solutos nos seres vivos, os ons
inorgnicos tambm so de fundamental importncia: participam como cofatores em muitas reaes
enzimticas; formam os gradientes qumicos os quais podem atuar como estoques de energia
potencial; e influenciam na permeabilidade das membranas biolgicas a outros solutos. Os diversos
solutos encontrados nas clulas vo, por outro lado, influenciar a mobilidade osmtica da gua e,
portanto, iro desempenhar um papel proeminente na manuteno da arquitetura celular. Alm disso,
muitos dos sistemas enzimticos que controlam as interaes qumicas caractersticas da vida esto
localizadas em estruturas altamente organizadas. Isto aponta a importncia da manuteno da
estrutura celular e volume nas reaes as quais envolvem estas enzimas como catalisadores.
Basicamente, as clulas podem ser vistas como mquinas qumicas extremamente complexas
nas quais a localizao e a concentrao de vrias espcies moleculares interatuantes devem ser
precisamente controladas no sentidos de manter atividade tima. Em tal contexto, o controle e a
manuteno do volume celular podem ser considerados requisitos essenciais a vida. Alm disso, o
problema da regulao de volume celular um dos elementos cruciais na conquista de diferentes
bitopos e no estabelecimento de organismos em ambientes aquticos com flutuaes de salinidade.
De acordo, a vida foi originada em algum tipo de oceano e a capacidade de controlar o volume celular
um dos principais pr-requisitos para a invaso de outros tipos de habitats como os ambientes de
gua doce e terrestre. Os organismos que habitam este meio desenvolveram adaptaes osmticas
especficas habilitando a sua manuteno em suas comunidades. H vrias maneiras atravs das
quais o problema da manuteno do volume celular pode ser resolvido. O organismo pode isolar-se
completamente do meio externo, evitando dessa forma o ganho ou a perda de gua. Esta soluo no
foi mantida por um grande nmero de espcies ao longo da evoluo. Trocas com o meio externo so
necessrias para satisfazer as necessidades celulares. Alguns esporos bacterianos podem sobreviver
por longos perodos com um contedo baixo de gua e sem trocas com o seu meio ambiente; nesta
situao, entretanto, seus processos vitais so essencialmente suspensos. Na maioria dos organismos,
a gua atravessa a membrana celular por difuso em resposta a gradientes osmticos. H duas
maneiras de evitar mudanas no volume celular enquanto mantm-se a possibilidade de trocas entre
o fludo intracelular e o meio ambiente. O primeiro mtodo consiste no controle da Concentrao
Osmtica (CO) do fludo intracelular em relao a eventuais modificaes do meio externo. O segundo
mtodo implica no controle da CO do fludo que circunda as clulas em quaisquer condies externas.
A ltima soluo foi adotada por diversos eucariotos e foi denominada por Florkin (1962), de a
regulao anisosmtica extracelular. Embora a existncia de um fludo extracelular diferente do
meio externo foi observada precocemente na evoluo, a efetiva regulao deste meio (os fludos
corpreos) um atributo de apenas alguns grupos zoolgicos altamente evoludos. Pode ser
encontrado em alguns vermes e moluscos, mas, essencialmente, ocorre em artrpodes e em
vertebrados. Alm disso, muitos dessas espcies so incapazes de manter o estado osmtico de seu
sangue quando a CO do ambiente varia.
Os mais eficientes reguladores anisosmticos formam a categoria denominada dos assim
chamados animais homeostticos; essas espcies podem manter a CO do seu sangue estacionria
independente das condies externas. Alm de alguns crustceos e peixes, representantes deste
grupo so encontrados entre rpteis, aves, e mamferos. Os ons inorgnicos Na
+
e Cl
-
so
predominantes como efetor osmtico sanguneo na maioria dos reguladores anisosmticos. Uria
usada por alguns vertebrados inferiores. Este composto orgnico encontrado essencialmente em
ciclostomados e em elasmobrnquios, mas tambm tem um papel em vrios anfbios e rpteis.
O controle da CO do meio interno em reguladores aniososmticos alcanada por
diferentes mecanismos, sempre envolvendo o transporte de sais, e localizada em vrios rgos. Os
rgos transportadores de sal podem ser morfologicamente muito diferentes variando, por exemplo,
de um rim de mamfero brnquia de um crustceo ou a papila anal de algumas larvas de inseto.
fundamental considerar que, com a exceo da glndula nasal de sal encontrada em aves e rpteis,
as quais parecem ser ligeiramente diferentes devido aos seus mtodos de controle, os rgos
transportadores de sal so construdos basicamente em modelos fisiolgicos muito similares: todos
realizam transporte ativo de sdio o qual uma das foras motrizes para o movimento de gua, o
contratransporte implicado no processo de sada de Na
+
sempre NH
4+
, H
+
ou K
+
e a ultraestrutura
desses rgos bem semelhante. Alm disso, apresentam importantes dobramentos das membranas
celulares, grandes espaos intercelulares e elevada densidade de mitocndrias essencialmente
localizadas prxima s membranas de trocas. possvel que esses mecanismos derivem a partir de
um mecanismo bsico de transporte de Na
+
o qual controla o outro e mais primitivo processo de
manuteno do volume celular; que , o controle da CO do fludo intracelular.
Como mencionado anteriormente, h apenas alguns animais homeostticos. Em todos as
outras espcies, as clulas tm que, algumas vezes, se defrontar com importantes mudanas na CO
de seu meio ambiente. Alm disso, os eficientes mecanismos de controle da CO sangnea que atuam
em espcies homeostticas podem estar encobertos sob certas condies ou podem apresentar uma
certa demora em responder a uma nova situao. Isto aponta para a importncia dos mecanismos de
controle osmtico do fludo intracelular na manuteno do volume celular.
O processo responsvel para o balano da CO pode manter o gradiente osmtico entre os
fludos intracelular e extracelular ou atuar no sentido de manter esses dois meios prximos a
condies isosmticas. A primeira soluo encontrada em clulas vegetais, em esponjas de gua
doce e em protozorios. Clulas vegetais so envolvidas por paredes celulares rgidas para evitar o
inchamento resultante do influxo osmtico de gua. O problema do influxo de gua em esponjas de
gua doce e em protozorios resolvido pela existncia de vacolos contrteis, cuja funo primria
remover qualquer excesso de gua. Na maioria das espcies de animais eucariticas, os fludos intra e
extracelulares so mantidos prximos da condio isosmticas. Os mecanismos implicados neste
processo foram denominados por Florkin (1962) como mecanismos de regulao isosmtica
intracelular. Trabalham para manter o equilbrio osmtico apesar da presena de solutos aninicos
no-difusveis no interior das clulas; estas partculas geram uma presso osmtica a qual, de outra
forma, iria induzir o inchamento e a lise das clulas de animais por possurem membranas facilmente
distensveis. Alm disso, estes mecanismos so de fundamental importncia na resposta regulatria
de volume que estas clulas so capazes de desenvolver aps mudanas na CO de seu meio
ambiente. Em todos os tecidos e clulas estudados at o momento, eles implicam no controle ativo do
montante de vrios efetores osmticos intracelulares entre os quais os ons inorgnicos Na
+
, K
+
e Cl
-
e
os aminocidos livres possuem um papel proeminente.
Os mecanismos de regulao isosmtica intracelular foram encontrados em tecidos e clulas
de muitas espcies de vrios grupos zoolgicos incluindo protozorios, invertebrados, e vertebrados.
importante notar que muitos desses organismos ou no possuem, ou possuem de forma muito frgil,
a capacidade de regulao anisosmtica extracelular. Pode-se, portanto, concluir que a regulao
isosmtica em nvel celular um processo mais primitivo o qual apareceu precocemente e persistiu ao
longo da evoluo. Processos de regulao anisosmticos devem ter sido adquiridos posteriormente,
adicionando s espcies que o possuam um novo leque de possibilidades.
Bibliografia Geral.
ALBERTS, B., BRAY, D., LEWIS, J ., RAFF, M., ROBERTS, K. & WATSON, J .D. Molecular Biology of The
Cell (3
rd
edition). Garland Publishing Inc. (1994).
BURGGREN, W. W., FRENCH, K., RANDALL, D. J . Eckert Physiology: Mechanisms and Adaptations (5
th
edition). W H Freeman & Co. 2002.
FLORKIN, M. La regulation isosmotique intracellulaire chez les inevertebrs marins euryhalins. Bull.
Acad. R. Belg. Cl. Sci., 48, 687-694, 1962.
GILLES, R. (Editor) Mechanisms of osmoregulation in animals: maintenance of cell volume (1
st
edition)
J ohn Wiley & Sons. 1979.
GUPTA, B. L., MORETON, R. B., OSCHMAN, J . L. & WALL, B. J . Transport of ions and water in animals
(1
st
edition). Academic Press. 1977.
HILL, R. & WYSE, G. Animal Physiology (2
nd
edition) Addison-Wesley Pub Co. 1989.
PROSSER, C. L. (Editor) Comparative Animal Physiology, Environmental and Metabolic Animal
Physiology (4
th
edition) J ohn Wiley & Sons. 1991.
SCHMIDT-NIELSEN, K. Animal Physiology : Adaptation and Environment (1
st
edition) Cambridge
University Press. 1997.
STONE, G., J OHNSTON, I. A.& WILLMER, P. J . Environmental Physiology of Animals (2
nd
edition).
Blackwell Science Inc. 2000
STRANGE, K. (Editor) Cellular and Molecular Physiology of Cell Volume Regulation (1
st
edition). CRC
Press. 1994.
WITHERS, P. C. Comparative Animal Physiology (1
st
edition). Harcourt Brace. 1992.
Peridicos I ndexados.
Advances in Comparative Physiology and Biochemistry.
American J ournal of Physiology.
Annual Review of Physiology.
Cellular Physiology and Biochemistry.
Comparative Biochemistry and Physiology.
Environmental Physiology and Biochemistry.
Experimental Physiology.
General Physiology and Biophysics.
International Review of Physiology.
J ournal of Cellular and Comparative Physiology.
J ournal of Cellular Physiology.
J ournal of Comparative Physiology.
J ournal of Experimental Biology.
J ournal of Experimental Zoology.
J ournal of General Physiology
EXERCCIO TERICO-PRTICO
Balano Osmtico em Ambientes Marinho, de gua Doce e Xrico.
elaborado por
Prof. Dr. Luiz Carlos Salomo
I ntroduo
Nos animais aquticos, especialmente nos animais marinhos e estuarinos, as variaes da
salinidade do meio podem resultar em variaes nas concentraes inica e osmtica do sangue e
fludos extracelulares. Animais marinos hiposmticos esto sujeitos ao efluxo de gua e influxo de
ons, contrariamente aos animais de gua doce, que por serem hiperosmticos, esto sujeitos ao
influxo de gua e efluxo de ons, alterando a Concentrao Osmtica (CO) do sangue e lquidos
tissulares.
H dois padres bsicos de resposta dos animais a tais variaes na salinidade, isto ,
osmoconformao e osmorregulao. No primeiro caso, a CO do sangue, hemolinfa ou lquidos
extracelulares varia linearmente com a variao da CO do meio. No segundo caso, a CO se mantm
constante apesar das variaes na salinidade do meio. Entre estes dois casos extremos,
osmorregulao e osmoconformao, ocorrem respostas intermedirias. Para se saber o padro de
resposta osmtica, em laboratrio, geralmente submetem-se os animais a meios de diferentes
salinidades, ou seja, de composies inicas diferentes e determinam-se as concentraes inicas e a
CO do sangue destes animais nestas diferentes condies experimentais.
J no ambiente terrestre, em que a grande vantagem a maior disponibilidade de oxignio, o
balano hdrico de outra natureza e, muitas vezes, obtido tanto por ajustes fisiolgicos como
comportamentais. Tal que se observa, por exemplo, no banco hidromineral do rato canguru
Dipodomys merriami. Entre os mamferos, 40% das espcies pertence a Ordem dos roedores, a mais
numerosa. Distribue-se por todo planeta, mas principalmente na Amrica do Sul. Adaptaram-se aos
diferentes ambientes, das regies polares ao equador, das montanhas as praias e do deserto aos
pntanos. A maioria dos roedores terrestre, mas alguns so arborcolas ou semi-aquticos. A maior
parte dos roedores de pequeno porte, isto , de 10 a 20 cm de comprimento e de 50 a 500 g de
massa corporal. Alguns, no entanto, como uma espcie de porco espinho (Hystrix cristata) do norte
da frica chega a atingir massas corpreas de 20-50 kg. A presena dos roedores tem relevante papel
ecolgico por serem a principal fonte de alimento para aves e mamferos carnvoros, havendo uma
relao bem estabelecida entre o tamanho da populao de roedores e suas presas. A relao com os
homens no se limita destruio da agricultura ou transmisso de doenas. So teis como
animais de laboratrio, por consumirem certos insetos e por propiciarem o arejamento do solo
cavando galerias subterrneas.
Entre os mamferos, so os roedores que ocuparam os mais diferentes ambientes com relao
disponibilidade gua. Esto presentes nos desertos mais ridos onde a gua no est disponvel,
mas que tambm se tornou dispensvel para eles. Nesse sentido, deve-se ressaltar as pesquisas de
Schmidt-Nielsen (1964) sobre os hbitos e a fisiologia renal do rato canguru que vive numa regio to
inspita, quanto disponibilidade de gua, que poucas outras espcies lhe fazem companhia.
Respostas osmticas em Perna perna
A Tab. 1 apresenta resultados em experimentos realizados com o molusco bivalve Perna
perna. Os mexilhes Perna perna foram coletados em costes nas proximidades de So Sebastio e
foram transferidos para tanques de cimento amianto e mantidos em gua de mesma salinidade do
local de coleta, isto , 1000 mOsm/kg H
2
O por cerca de 24 h. A seguir foram distribudos em tanques
de cimento amianto contendo gua do mar diluda com gua destilada, obtendo-se, assim, as
diferentes salinidades experimentais. Em cada salinidade experimental foram colocados mexilhes
com cunha entre as valvas e sem cunha. A hemolinfa dos animais com cunha foi coletada aps 6 h de
exposio aos diferentes meios, tempo previamente determinado considerando ser este perodo o
suficiente para as trocas osmo-inicas. Nos animais sem cunha, as amostras foram obtidas aps 24 h.
O objetivo das cunhas era o de manter a livre exposio das partes moles do animal aos meios
experimentais. Manteve-se arejamento contnuo durante todo o experimento.
Tabela 1. Concentrao osmtica da hemolinfa de Perna perna, com cunha e sem cunha
mantidos em diferentes salinidades. Valores em mOsm/kg H
2
O. As concentraes osmticas
foram determinadas pelo abaixamento do ponto de congelamento conforme descrito por
Salomo (Bolm Fisiol. Animal, Univ. S. Paulo, 4: 143-152, 1980).
Meio 250 410 560 700 850 1000 1150 1300
c/ cunha
V
417 598 685 864 1016 1150 1320
s/ cunha 910 650 620 730 860 1020 1160 1315
Estes resultados podem ser visualizados na figura abaixo:

Respostas osmticas em Macrobachium olfersii
Exemplares de Macrobrachium olfersii foram coletados no Rio Guaec, cuja salinidade
prxima de zero, transportados para o laboratrio em condies que garantiam a sua higidez, onde
foram mantidos em tanques de cimento amianto, com gua do mesmo local de coleta, continuamente
arejada. Aps um perodo de permanncia em meios iguais aos dos locais de coleta, os animais foram
transferidos para tanques com gua do mar diluda a fim de se obter as diferentes salinidades
desejadas (concentraes osmticas). A Tab. 2 indica os valores da concentrao osmtica dos oito
diferentes meios experimentais e da hemolinfa dos camares Macrobrachium sp. E a figura 2 mostra
estes dados plotados e ajustados por uma funo polinomial de 3 grau.
Tabela 2. Concentrao osmtica (mOsm/kg H
2
O) da hemolinfa de M. olfersii e dos
diferentes meios em que foram mantidos. As concentraes osmticas foram determinadas
pelo abaixamento do ponto de congelamento em um osmmetro Fiske.
Meio 0 150 300 450 600 750 900 1000
Hemolinfa 430 480 500 510 550 580 650 800
Discusso
1. Como voc definiria o comportamento osmtico de M. olfersii e de P. perna?
2. No caso de P. perna, em que sentido a introduo da cunha altera a resposta osmtica? Qual
o significado fisiolgico desta alterao?
3. Que tecidos ou rgos seriam mais sensveis ao estresse osmtico? Por que?
4. Em que nveis compartimentais estes fenmenos podem ser abordados?
5. O que se pode dizer acerca da eurialinidade destes dois animais, a partir dos resultados
obtidos?
6. A resposta osmtica de P. perna variao de salinidade pode ser expressa por uma funo
do tipo y = ax + b, enquanto que a do M. olfersii seria por uma funo do tipo y = ax
3
+ bx
2
+ cx + d. Qual o significado fisiolgico destas representaes?
7. No caso de P. perna com cunha e sem cunha, o que seria uma abordagem reducionista e uma
abordagem holstica, sistmica ou integrativa?
Osmorregulao no rato canguru
O balano hidromineral no rato canguru se torna crtico em razo do ambiente inspito em
que vive fazendo-o depender apenas da pouca gua contida nos alimentos e da gua metablica.
A Tab. 3 resume o balano hdrico do rato canguru.
Ganho Perdas
gua metablica 90% Evaporao 16%
gua livre nos alim. 10% Respirao 54%
Bebida 0% Urina 25%
fezes 5%
A perda de gua atravs da pele, por evaporao, reduzida mas chega a 16% enquanto que
mais da metade da perda total ocorre atravs do trato respiratrio. As glndulas sudorparas esto
ausentes da superfcie do corpo dos roedores, sendo encontradas apenas em determinadas reas,
como nas partes sem plo das patas. O estudo da perda de gua atravs da respirao levou
Schimidt-Nielsen a descrever um fenmeno interessante que ocorre em outros animais.
A Tab. 4 mostra as diferentes formas de indicar a quantidade de gua, na forma de vapor,
presente no ar em diferentes temperaturas.
Vapor de gua
Temperatura
(C) mmHg kPa % de 1 atm mg H2O/L ar
0 4,6 0,61 0,6 4,8
10 9,2 1,23 1,2 9,4
20 17,5 2,34 2,3 17,3
30 31,7 4,24 4,2 30,3
40 55,1 7,38 7,3 51,1
50 92,3 12,33 12,2 83,2
100 760 101,33 100 598
37 46,9 6,28 6,2 43,9
Como se v nesta Tabela o ar saturado na temperatura do corpo (37 C) contm cerca de 2,5
vezes mais gua na forma de vapor do que o ar saturado na temperatura ambiente (20 C), isto ,
43,9 e 17,3 mg/L, respectivamente. Assim, se o ar exalado for resfriado a perda de gua por esta via
seria menor. De fato a temperatura do epitlio nasal mais baixa do que de outras regies do corpo
e, portanto, h economia de gua. Este mecanismo, encontrado em outros mamferos e em aves,
denominado de mecanismo de contra-corrente nasal. No homem a temperatura do ar exalado est
prxima daquela do corpo. Logo, no h economia de gua.
A Fig. 3 mostra a quantidade de gua recuperada de gua em duas condies: a 15 C e 25
% de umidade relativa do ar (u.r.) e a 30 C e 25 %
A perda de gua pelas fezes minimizada graas reabsoro retal de gua e a eliminao
de fezes desidratadas.
Desde que a regulao de gua est intimamente associada temperatura, certos hbitos
encontrados em animais que vivem em regies desrticas, como o rato canguru, esto associados a
este fenmeno. Os seguintes hbitos so encontrados neste animal: hbitos noturnos durante o dia
permanecem em galerias onde a temperatura relativamente mais baixa; reduo das atividades
uma vez que a produo de calor inevitvel sempre que h contrao muscular, o animal mantm-
se em atividades reduzidas durante o dia.
A Fig. 4 resume as estratgias utilizadas pelo rato canguru para sobreviver num ambiente de
grande restrio hdrica.

Produo de urina concentrada
Esta talvez seja a mais importante adaptao fisiolgica do rato canguru. A concentrao
osmtica da urina deste animal superior a 6000 mOsm/kg H
2
O. um valor elevado, embora valores
superiores a 9000 mOsm/kg H
2
O possam ser considerados em outros roedores de regies desrticas.
(Lembre-se que a concentrao osmtica da urina humana varia de cerca de 60 a 1200 mOsm/kg
H
2
O) Rim capaz de produzir urina mais concentrada que o plasma s encontrada em mamferos e
aves.
O truque simples, como diz Schimidt-Nielsen, para a produo de urina concentrada reside
num fenmeno conhecido com efeito multiplicador de contra-corrente. Esquemas deste fenmeno
so encontrados em praticamente todos os livros de fisiologia. No entanto, valeria a pena ressaltar
que os elementos essenciais deste mecanismo so: (1) ala de Henle longa; (2) fluxo em sentido
contrrio nos dois ramos da ala; (3) transporte ativo; (4) um ramo que reabsorve ativamente soluto
deve ser impermevel gua.
Discusso
1. Que relao h entre umidade relativa do ar e o balano hdrico do rato canguru?
2. Que relao h entre a temperatura ambiente, balano hdrico e temperatura corporal?
3. Em que o mecanismo de contra-corrente nasal difere do mecanismo multiplicador de contra-
corrente encontrado no rim?
4. Em que se assemelha coriza observada no ser humano nos dias frios com aquele observado
nos animais com focinho frio?
5. Aves e mamferos so capazes de produzir urina concentrada. Por que?
Bibliografia
FYHN, H. J . Rodents. I n: Maloiy, G. M. O. (Editor). Comparative Physiology of Osmorregulation in
Animal. London, Academic Press, 1979, v. 2
SALOMO, L.C. & LUNETA, J .E. The effects of salinity changes on the osmotic and ionic
concentrations in the hemolymph of Perna perna (Mollusca: Bivalvia). Bol. Fisiol. Anim., 13: 29-
38, 1989
SCHMIDIT-NIELSEN, K. How animals work (1
st
edition). Cambridge University Press. 1988
STUCCHI-ZUCCHI, A. & SALOMO, L. C. Effect of osmo-ionic concentration on the compound action
potential of the cerebro-visceral connective of Perna perna (Mollusca: Bivalvia). Comp. Biochem.
Physiol., 101(A): 109-112.

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