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Toxicologia Forense
Fabrcio S. Pelio
Perito Bioqumico Toxicologista
Histrico
Renascena (sc. XIV ao XVII) era de
ouro dos envenenadores;
Grande popularidade dos venenos
facilidade e poucas perguntas;
Revoluo cientfica (sc. XVIII) criao
da cincia dos venenos, ou toxicologia;
Em 1823, a primeira condenao com
base em anlise toxicolgica.
Histrico
Paracelsus (1493 1541) contribuio para
toxicologia moderna. Relao dose-resposta;
Orfila classificou a toxicologia como uma
cincia separada (1815). Material de
autpsia e testes qumicos como prova legal;
Dcadas de 60 e 70 grande avano da
toxicologia analtica.
Todas as substncias so
venenos, no h uma que no o
seja. Somente a dose determina
que uma dada substncia no
seja um veneno (PARACELSUS-
1493-1541).
A dose faz o veneno !
Toxicologia
Veneno um conceito QUANTITATIVO
Princpios de ORFILA Princpios de ORFILA
1. Conhecimento de Toxicologia;
2. Histrico do caso;
3. Materiais adequadamente identificados
e acondicionados;
4. Uso de reagentes puros, brancos de
amostra e amostras controle
(adicionados).
Toxicologia - Definio
Ramo da cincia que lida com venenos.
a cincia que estuda o efeito adverso de
substncias qumicas (ou agentes fsicos) sobre os
organismos vivos, com a finalidade principal de
estabelecer o uso seguro dessas substncias.
a cincia que estuda as substncias nocivas
sade, suas aes, seus sintomas, seus efeitos e
seus contravenenos.
a cincia que estuda a
deteco, ocorrncia, propriedades, efeitos e a
regulao das substncia txicas.
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Toxicologia
Na prtica no to simples...
O que veneno?
Como medir ou classificar os efeitos
txicos?
A toxicidade no um evento molecular
isolado (absoro, distribuio,
metabolismo, interaes celulares, efeito
txico. Excreo e reparo).
Toxicologia
O que, enfim, veneno? H quem tenha
definies prontas, mas embora as pessoas
mais capacitadas tenham tentado definir
veneno, at aqui ningum obteve sucesso. (Sir
Robert Christison).
Morfina
Cobre
Flor
Doces
Definio de veneno perante a lei?
TOXICOLOGIA
URGNCIA
CLNICA
ANALTICA
EXPERIMENTAL
FORENSE
EXPERIMENTAL CLNICA
URGNCIA
Toxicologia Analtica
Detectar o agente qumico ou algum parmetro
relacionado exposio ao AT, em substratos
tais como fluidos
orgnicos, alimentos, gua, ar, solo, etc, com o
objetivo principal de prevenir ou diagnosticar as
intoxicaes.
Busca mtodos exatos, precisos, de
sensibilidade adequada para a identificao
inequvoca do AT.
Toxicologia Analtica
Fotos Laboratrio PF
Toxicologia Forense
Atravs da clnica e principalmente da
anlise qumica, identifica os
envenenamentos de quaisquer
causas, visando esclarecer justia.
Aprecia todos os envenenamentos
voluntrios (suicidas) e involuntrios
(homicidas ou acidentais) com
implicaes jurdicas.
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Toxicologia Forense
Investigao mdico-legal
- anlises post mortem
- investigao criminal
Controle antidopagem
(human performance forensic toxicology)
Testagem de drogas na urina
- drogas de abuso no ambiente de trabalho
- transportes, etc
Diagnstico
Histrico completo: sintomas, local do
evento, roupas, copos com resduos, etc.
Exame fsico completo: cor da pele, sinais, odor
desprendido, etc.
O fornecimento de quaisquer informaes
relacionadas ao histrico do caso de suma
importncia para o perito e reduzem de forma
substancial o tempo demandado para execuo
da anlise laboratorial.
Anlises Toxicolgicas
Para qu? Finalidade
O qu? Agente Txico
Onde? Amostra
Como? Mtodo
H uma provvel substncia implicada em caso de intoxicao?
SIM NO Porque se pede a anlise
????
conhecido, de forma verossmil, o agente txico?
SIM
Investigar com mtodo especfico
para a substncia
NO
Existe alguma informao credvel
e orientadora?
Pesquisar os txicos que
melhor se enquadram na
informao disponvel
Proceder a exames
de rotina
SIM NO
Anlises Toxicolgicas
Com histrico escolha da melhor matriz,
e do melhor mtodo (cocana, inalantes,
metais);
Sem histrico proceder todas as
marchas analticas disponveis no
laboratrio.
Anlise Toxicolgica
Sistemtica
Objetivo:
Identificar a(s) substncia(s) relacionada(s)
ao evento ou excluir o maior nmero de
substncias no menor intervalo de tempo
possvel.
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Anlises Toxicolgicas
CAS (Chemical Abstract Service):
21.046.764 substncias qumicas
registradas / 599 599..931 931 -- comercialmente comercialmente
disponveis disponveis..
NIOSH (National Institute for Occupational
Safety and Health) RTECS RTECS ((Registry of
Toxic Effects of Chemical Substances):
130.000 substncias.
Anlises Toxicolgicas
O nico sinal seguro de intoxicao a
identificao da substncia no corpo
Plenck - Elementa Medicine et Chirurgiae, 1781
Anlise sistemtica - SLML
Caso - Amostras
Metais CarboxiHb Orgnicos fixos Volteis
Medicamentos
Agrotxicos
Drogas de abuso
Anlises Toxicolgicas
O que pesquisar?
Fenmenos toxicocinticos absoro,
distribuio e eliminao (biotransformao
e excreo);
Substncia: lipossolubilidade, grau de
ionizao, afinidade qumica;
Organismo: irrigao, contedo gua / leo
nos tecidos e rgos, biotransformao.
PAPEL DO PERITO TOXICOLOGISTA
Anlises Toxicolgicas
Onde pesquisar?
Amostras de vivos sangue, urina,
saliva, suor, plos, vmito.
Amostras de cadveres sangue, urina,
estmago com contedo, fgado, rim,
crebro, humor vtreo, bile.
PAPEL DO PERITO TOXICOLOGISTA
Anlises Toxicolgicas
Verificao de uso;
Eventos toxicocinticos;
Exemplos: tentativa de
suicdio, homicdio, abuso sexual, etc.
- Em vivos:
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Anlises Toxicolgicas
Qualidade dos resultados dependem quase que
exclusivamente dos fatores:
Escolha da amostra
Coleta (amostragem)
Conservao (armazenamento)
Integridade (segurana)
Amostras - principais evidncias para a
elucidao de um caso em toxicologia forense
Coleta de Sangue
O sangue deve ser sempre coletado por
pessoal qualificado;
Assepsia da pele - com produto que no
contenha lcool;
Anticoagulante;
Fluoreto de sdio anticoagulante e
conservante.
Sangue Sangue
Vantagens Vantagens
Reflete o que est circulando no corpo;
Permite interpretao
Correlao com efeitos
Desvantagem
Coleta invasiva
Necessidade de pessoal qualificado
Volume limitado
Anlises complexas e de alto custo
Urina
Vantagens
Fcil de coletar (no invasiva);
Custo baixo;
Quantidade relativamente grande;
Produtos de biotransformao em altas concentraes;
Fcil de analisar;
Janela de deteco alta.
Desvantagens
No est relacionada aos efeitos.
Cuidados na coleta de urina
Remover quaisquer ps, pastas, lquidos e
substncias que possam ser adicionadas
amostra;
Verificar pias e saboneteiras, esvaziar o
lixo e coloc-lo longe do local de coleta;
Jogar desinfetante azul na gua do vaso
sanitrio;
Fechar todas as fontes de gua.
Outras amostras
Suor;
Unhas;
Cabelos;
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Exames toxicolgicos post mortem
Encontro de cadver (morte suspeita);
Intoxicaes;
Trnsito (colises, atropelamentos);
Homicdios e suicdios;
Afogamentos;
Incndios;
Quedas;
Soterramento;
Outros.
Coleta da amostra
Coleta da amostra
Drummer e Gerostamoulos
Cuidados na coleta
A amostra deve ser acondicionada em um
recipiente apropriado e lacrado (para impedir
vazamentos e aberturas no-autorizadas);
A anlise deve ser iniciada imediatamente
depois da coleta. Quando impossvel, o frasco
deve ser conservado em refrigerador abaixo de
0 C.
Cada recipiente deve ser identificado de forma
clara, nica e permanente, e ficar sempre sob a
custdia do coletor, em local reservado e de
acesso restrito;
CADEIA DE CUSTDIA!
Anlises Toxicolgicas
Como pesquisar?
Mtodos de triagem;
Mtodos confirmatrios;
Objetivos
Produo de laudos inequvocos e irrefutveis;
Confirmao atravs de 2 tcnica de princpio
qumico diferente;
Deteco do analito em diferentes matrizes
biolgicas.
Anlises Toxicolgicas
Triagem
Positivo Negativo
Confirmao
Negativo Positivo
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Imunoensaio
Tcnica utilizada na triagem para identificao
de drogas ou de grupamento de drogas;
Princpio: competio entre uma droga (analito)
e um anticorpo especfico;
Baixa especificidade;
Os resultados positivos precisam ser
confirmados;
Vantagem: grande n de amostras analisadas
em curto intervalo de tempo e sensibilidade.
Imunoensaio
CROMATOGRAFIA EM CAMADA
DELGADA
CROMATOGRAFIA EM CAMADA
DELGADA
CROMATOGRAFIA EM CAMADA
DELGADA
Mtodos confirmatrios
CG-MS LC-MS
Permitem a identificao e a quantificao do
agente txico. Padro ouro de anlises.
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CG / MS Anlise de cocana
PI
Cocana
Leis de trnsito e drogas
ALTERAO NA LEI N 9.503, DE 23 DE SETEMBRO DE 1997,
QUE INSTITUI O CDIGO DE TRNSITO BRASILEIRO (CTB).
Art. 165. Dirigir sob a influncia de lcool ou de
qualquer outra substncia psicoativa que determine
dependncia: (Redao dada pela Lei n 11.705, de
2008)
Infrao - gravssima; (Redao dada pela Lei n 11.705, de
2008)
Penalidade - multa (cinco vezes) e suspenso do direito de
dirigir por 12 (doze) meses; (Redao dada pela Lei n 11.705,
de 2008)
Medida Administrativa - reteno do veculo at a apresentao
de condutor habilitado e recolhimento do documento de
habilitao. (Redao dada pela Lei n 11.705, de 2008)
Leis de trnsito e drogas
Art. 277 - Todo condutor de veculo automotor, envolvido
em acidente de trnsito ou que for alvo de fiscalizao
de trnsito, sob suspeita de dirigir sob a influncia de
lcool ser submetido a testes de alcoolemia, exames
clnicos, percia ou outro exame que, por meios tcnicos
ou cientficos, em aparelhos homologados pelo
CONTRAN, permitam certificar seu estado. (Redao
dada pela Lei n 11.275, de 2006)
1 Medida correspondente aplica-se no caso de
suspeita de uso de substncia entorpecente, txica ou
de efeitos anlogos. (Renumerado do pargrafo nico
pela Lei n 11.275, de 2006)
Resoluo do CONTRAN n
206 de 20/10/2006
Art 3 - obrigatria a realizao do exame de
alcoolemia para as vtimas fatais de acidentes
de trnsito.
Direo sob a influncia de drogas
Efeitos desejados;
Efeitos colaterais
Sonolncia
Reflexo
Coordenao
Viso
Arriscar
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Direo sob a influncia de drogas
Aumento do tempo para tomar decises;
Dificuldade para longas distncias;
Quanto mais difcil a tarefa, maior a
probabilidade que o THC diminua o
desempenho;
O THC aumenta o desvio padro da posio
lateral e a variabilidade
do avano;
Servio de Laboratrio Mdico
Legal
1. Proceder anlises toxicolgicas para examinar:
lcool etlico e outros volteis;
Drogas de abuso (cocana, maconha, anfetaminas);
Medicamentos (benzodiazepnicos, barbitricos, morfina e derivados e
outros);
Praguicidas (aldicarb, fosforados, clorados, piretrides, etc.).
2. Realizar as seguintes anlises imunobiolgicas:
Gonadotrofina corinica (gravidez);
Sangue humano em anteparos;
Espermatozide e PSA em secrees e vestes.
3. Interpretao dos resultados analticos e consulta de casos;
4. Realizar pesquisas toxicolgicas;
5. Fornecer Polcia Civil do Esprito Santo suporte ao servio investigativo no
menor tempo possvel e com o mais alto padro de qualidade toxicolgico e
imunobioqumico.
Dosagem de etanol
Alcoolemia
Dosagem de etanol no sangue
Alcoolemia nos acidentes de
trnsito no Esprito Santo em 2008
Amostra estudada: Foram coletadas amostras de
sangue de vtimas fatais de acidentes de trnsito
(n=396), maiores de dezesseis anos e de ambos
os sexos, durante o perodo de 19 de maro de
2008 a 18 de dezembro de 2008.
Os casos estudados foram agrupados em trs
trimestres, sendo um trimestre anterior ao incio
da vigncia da lei (19/03/08 a 18/06/08) e dois
posteriores (19/06/08 a 18/09/08 e 19/09/08 a
18/12/08).
NEGATIVO
56%
POSITIVO
44%
0%
10%
20%
30%
40%
At 20
anos
21 - 30 31 - 40 41 - 50 51 - 60 > 60 anos
Grfico 1
Positividade (%)
Toxicologia Forense
Avaliao do desempenho psicomotor
Drogas facilitadoras de crimes
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Toxicologia Forense
Avaliao do uso de drogas de abuso
Perodo da pesquisa:
2006 2007
35% para lcool;
44% para cocana;
20% para maconha.
Amostra biolgica: urina Mortes violentas
BARRETO, J.M.; FARIA, M.G.C.; NAKAMURA-PALACIOS, 2007
Drogas de abuso e
medicamentos
Coleta da amostra;
Redistribuio
postmortem
Carboxihemoglobina
Monitoramento do monxido de carbono
CO: automveis, fogo, cigarro.
A Carboxi-Hb
B Hb reduzida
C - Paciente intoxicado
Anlises Toxicolgicas
Atualmente, se o toxicologista souber o
que procura ele o encontrar, desde
que exista;
Profissionais habilitados com formao ou
conhecimento em Toxicologia;
Trabalho em conjunto com os demais
profissionais;
Metodologias e Tcnicas padronizadas;
Equipamentos;
Histrico, conhecimento tcnico e intuio.
Dificuldades
Aplicao da toxicologia com a finalidade de
elucidar procedimentos clnicos, legais ou judiciais.
Matrizes complexas;
Pesquisa de metablitos;
Estabilidade de frmacos em amostras biolgicas;
Falta de informaes / informaes errneas.
Toxicologia
Voc tambm pode ser um toxicologista
em duas fceis lies, cada uma de dez
anos. (Arnold Lehman, 1955).