Guia Tecnico - Unificado.bioquimica.04022011

GUIA TCNICO - BIOQUMICA
A Labtest, sempre pensando em educao continuada e em melhor atender s demandas dos

clientes, idealizou o Guia Tcnico para suas linhas de produto.
A maioria das informaes nele contidas advinda de dvidas frequentes e tambm de aspectos
importantes a serem observados para garantir o bom desempenho do produto e para facilitar a
realizao dos testes.
Sugerimos que o Guia Tcnico seja sempre utilizado como um apoio s Instrues de Uso dos
produtos.
Dando continuidade ao processo de contato com nossos clientes, que de fundamental importncia
para melhoria de nossos produtos e servios, mantemos ativo o SAC (Servio de Apoio ao Cliente)
atravs do DDG 0800 0313411 ou no e-mail: sac@labtest.com.br.
Esperamos que esta ferramenta seja til e aplicvel no dia a dia do laboratrio.
Sua opinio e sugestes de melhoria sero sempre bem vindas.
Atenciosamente,
Frida Wilke Alves Basques

Consultora Cientfica
Lagoa Santa, 15 de Janeiro de 2009
Todos os direitos esto reservados Labtest Diagnstica SA.
A distribuio, representao, publicao, uso comercial e/ou utilizao de tais materiais, no todo ou em parte, sem a
prvia e expressa autorizao da Labtest Diagnstica SA, representa violao de tais direitos, sujeitando o infrator s
penalidades legais previstas nas Leis 9.610/98 e 9.279/96 e no art. 184 do Cdigo Penal Brasileiro, bem como ao
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GUIA TCNICO BIOQUMICA
INFORMAES GERAIS
AMOSTRAS
Soros turvos podem ser clarificados por centrifugao a 19000g durante 30 minutos. Descartar a camada
superior de lpides. Este procedimento possibilita a utilizao da amostra lipmica para o teste de outros
analitos onde a lipemia tem interferncia significativa.
Para uma reviso das fontes fisiopatolgicas e medicamentosas de interferncia nos resultados e na
metodologia sugere-se consultar: http:/www.fxol.org.
CLCULO DA FORA CENTRFUGA RELATIVA (g)
g = 1,118 x 10-5 x r x n2
r = raio da centrfuga
n = rpm (rotaes por minuto)
ANALISADORES
Para a limpeza do sistema de fluxo de equipamentos semi-automticos, usar quinzenalmente uma
soluo de hipoclorito de sdio a 2,5%, deixando agir por 15 minutos, enxaguando bem em seguida.
Sempre aps a manuteno de analisadores deve ser realizada nova calibrao de todos os analitos.
uma prtica habitual calcular os resultados de atividade enzimtica utilizando um fator obtido em
condies timas de reao que incluem:
cubeta termostatizada a 37 0,2 C com 1,0 cm de espessura de soluo.
banda de passagem 2 nm.
luz espria 0,1%.
Como na maioria das vezes no possvel trabalhar sob essas condies, as boas prticas de laboratrio
recomendam realizar a calibrao do ensaio utilizando calibrador de enzimas indicado pelo fabricante do
reagente. A Labtest indica a linha Calibra para calibrao.
15/01/2009
GUIA TCNICO BIOQUMICA
INFORMAES GERAIS
REAGENTES
Para preservar o desempenho, os reagentes devem permanecer fora da temperatura de armazenamento
somente o tempo necessrio para se obter o volume a ser utilizado. Evitar exposio luz solar direta.
Nos analisadores automticos, os reagentes esto sujeitos a contaminaes com outros reagentes ou
com o ar ambiente, que dependem da caracterstica do equipamento e das condies de trabalho. Essas
contaminaes podem resultar em reduo da estabilidade dos reagentes ou modificaes no seu
desempenho, requerendo nova calibrao do sistema.
REAES
Como ocorre em toda medio da atividade enzimtica, a rigorosa observao do tempo e da
temperatura de incubao de grande importncia para a qualidade dos resultados.
LIMPEZA DE MATERIAIS
A gua utilizada no laboratrio deve ter a qualidade adequada a cada aplicao. Assim, para preparar
reagentes e usar nas medies, deve ter resistividade 1 megaohm ou condutividade 1 microsiemens e
concentrao de silicatos <0,1 mg/L (gua tipo II). Para o enxge da vidraria a gua pode ser do tipo III,
com resistividade 0,1 megaohms ou condutividade 10 microsiemens. No enxge final utilizar gua tipo II.
Quando a coluna deionizadora est com sua capacidade saturada ocorre a produo de gua alcalina com
liberao de vrios ons, silicatos e substncias com grande poder de oxidao ou reduo que deterioram
os reagentes em poucos dias ou mesmo horas, alterando os resultados de modo imprevisvel. Assim,
fundamental estabelecer um programa de controle da qualidade da gua.
A limpeza e secagem adequadas do material utilizado so fatores fundamentais para a estabilidade dos
reagentes e obteno de resultados corretos.
15/01/2009
A GUA COMO REAGENTE

A gua o suprimento do Laboratrio Clnico de menor custo. Talvez, por este motivo, sua qualidade
seja to negligenciada, apesar de ser um reagente importante e o mais utilizado.
A classificao da gua PURA pode ter diferentes significados, dependendo da situao.
gua PURA para uso domstico significa que ela livre de microrganismos patognicos e agentes
txicos, sendo prpria para o consumo humano.
gua PURA para uso farmacutico significa principalmente que ela livre de pirognios e
microrganismos.
No Laboratrio Clnico, a gua utilizada como reagente qumico e por isto a denominao gua
PURA significa que ela deve conter uma quantidade mnima de contaminantes (ons, matria
orgnica e microrganismos), capaz de atender a diferentes aplicaes.
Traos de ons ou metais aceleram ou inibem vrias reaes, principalmente as mediadas por
enzimas e prejudicam o desempenho de vrios reagentes, controles e calibradores.
O efeito das impurezas da gua nos diversos testes de laboratrio tem sido estudado
sistematicamente e existem evidncias de numerosas causas de erro. O cloro utilizado na gua
servida populao, na concentrao em torno de 1,0 mg/L, pode introduzir erros de at 25% na
determinao de cloretos e interfere com vrios procedimentos em bacteriologia e enzimologia.
Traos de metais aceleram ou inibem vrias reaes e podem introduzir erros significativos nas
medies de atividades enzimticas ou em procedimentos que utilizam enzimas como reagentes. A
dimenso do erro gerado pela impureza da gua depende em muito da concentrao do analito. Um
miligrama de sdio por litro de gua pode introduzir um aumento de 4,3 mEq/L na determinao de
sdio se a diluio utilizada for de 1:100, representando um erro de 3,1%, em uma concentrao de
sdio de 140 mEq/L. Por outro lado, 1,0 mg de potssio por litro de gua introduz um aumento de 2,5
mEq/L. Em uma amostra com potssio de 4,0 mEq/L, o erro de 62%.
Assim, a gua a ser utilizada no laboratrio deve ser purificada para que no produza interferncias
nos testes ou ensaios. Vrios so os processos de purificao que esto disponveis para utilizao
no laboratrio. Esta purificao consiste na eliminao de todas as substncias dissolvidas e
suspensas na gua.
Destilao - Processo de vaporizao e condensao de um lquido para purificar ou concentrar uma
substncia ou para separar uma substncia voltil de outras substncias menos volteis. o mtodo
mais antigo de purificao da gua.
Deionizao Neste processo a gua passa por um sistema contendo resinas insolveis, aninicas
e catinicas, onde os ons presentes na gua so trocados pelos ons presentes nessas resinas.
No caso das resinas de troca catinica, esta trocar seus ons hidrognio (H+) por contaminantes
catinicos, como clcio, magnsio, ferro, alumnio, mangans, cobre, zinco, cromo, nquel e outros
ctions metlicos e ctions diversos.
As resinas aninicas por sua vez trocam seus ons hidroxila (OH-) pelos contaminantes aninicos,
como clorato, clorito, cloreto, sulfato, sulfito, sulfeto, nitrato, nitrito, fosfato, fluoreto e outros nions,
alm da slica.
Osmose Reversa - Processo pelo qual a gua forada a passar por uma membrana
semipermevel que age como um filtro molecular. A membrana remove de 90 a 99% das impurezas
da gua.
Devido a sua capacidade de remoo de bactrias e pirognios, a osmose reversa frequentemente
combinada com a deionizao de modo a reduzir a frequencia de regenerao das resinas de troca
inica.
Filtrao atravs de Carvo Ativado Este processo remove o cloro por quimioabsoro e as
substncias orgnicas dissolvidas por adsoro. Geralmente o filtro de carvo ativado colocado nos
sistemas de purificao da gua antes da osmose reversa e antes da deionizao.
Ultrafiltrao - Utiliza uma membrana com poros ligeiramente maiores que os da membrana de
osmose reversa. utilizado para remover pirognios da gua purificada.
Principais contaminantes e eficincia da purificao

A tabela a seguir relaciona os vrios procedimentos de purificao da gua e sua eficincia na
remoo dos principais interferentes.
Destilao
Deionizao
Osmose Reversa
Carvo Ativado
Ultra filtrao
Slidos
Ionizados
E/B
E
B
P
P
Gases
Ionizados
P
E
P
P
P
Matria
Orgnica
B
P
B
E/B
B
Partculas
Bactrias
E
P
E
P
E
E
P
E
P
E
Tabela 1: E = excelente; B = boa; P = pobre (remoo pequena ou nula)

Uma combinao dos processos de purificao da gua para uso no Laboratrio Clnico consiste de:
Filtro inicial para reter partculas e bactrias; Filtro de carvo ativado para eliminar matrias orgnicas
e Sistema deionizador de leito misto ou separado para reter ons, acoplado ou no a um sistema de
osmose reversa.
O processo de deionizao e de osmose reversa, tem aplicao muito comum nos Laboratrios
Clnicos, mas o sistema deve ser monitorado para que possveis problemas sejam sanados. A
pequena sensibilidade no sistema de informao da qualidade da gua processada acarreta na
utilizao de gua imprpria. Contaminao com bactrias podendo deteriorar o sistema (resinas e
membranas). Liberao de silicatos, substncias alcalinas e potentes oxidantes, que interferem nas
reaes, principalmente as enzimticas.
A gua purificada para uso no Laboratrio Clnico, deve ser submetida ao controle da qualidade
devendo ser testada todas as vezes em que se obtiver um novo lote.
A gua de uso no laboratrio pode ser classificada em funo da concentrao de contaminantes
mais importantes.
Especificaes estabelecidas no momento da produo da gua:
Bactrias Heterotrficas (ufc/mL)

Resistividade (M/cm a 25 C)
Condutividade (mS/cm a 25 C)
Silicatos (mg/L)
Carbono orgnico total (TOC) ng/g (ppb)
Partculas (micra)
Tipo I
< 10
> 10
< 0,1
< 0,05
< 0,22
NCCLS
Tipo II
< 1000
>1
<1
< 0,1
-
Tipo III
> 0,1
< 10
<1
-
CLSI
ARLC
< 10
10
0,1
< 500
< 0,22
Tabela 2: ufc - unidade formadora de colnias; m - megaohms; S - microsiemens; NI No

Indicado; ARLC = gua Reagente para Laboratrio Clnico
Existe ainda uma especificao para a gua que usada em HPLC, cultura de clulas e tecidos,
anlise de cromossomas e testes de HLA, que denominada gua tipo Especial.
Cuidados devem ser tomados aps obteno de gua destilada ou deionizada, pois no tem sentido
obter uma gua de boa qualidade e contamin-la durante o processo armazenamento.
A gua de tipo I s existe nesta forma no momento de sua produo. Portanto, quando um reagente
requerer este tipo de gua, ele deve ser preparado imediatamente aps a produo da gua
purificada.
De modo geral, a gua deionizada se encontra em um estado antinatural e tem a tendncia a adquirir
um estado intermedirio entre o estado inicial e a purificao.
Os sistemas de armazenamento da gua de tipos II e III devem ser construdos com materiais que
no facilitem a contaminao qumica ou bacteriana.
O laboratrio deve seguir a RDC 302/2005 da ANVISA, que no item 6.2.7 descreve: O laboratrio
clnico e o posto de coleta laboratorial devem definir o grau de pureza da gua reagente utilizada nas
suas anlises, a forma de obteno, o controle da qualidade.
Controle da qualidade da gua

A slica (contaminante fracamente ionizado) uma das primeiras substncias que podem eluir dos
leitos de resina de troca inica quando se aproximam da saturao. A liberao de substncias
fortemente ionizadas ocorre em seguida, aumentando a condutividade.
Para realizar o controle da qualidade da gua para uso no laboratrio, so indicados alguns testes:
1. Determinar a quantidade de silicato presente na gua. O silicato o primeiro elemento a
aparecer na gua quando a coluna est atingindo seu ponto de saturao e comea a se tornar
imprpria para utilizao. Para determinao qualitativa de silicatos na gua, a Labtest
disponibiliza o produto Silicato MA Ref. 603.
2. Medir a condutividade da gua. Condutividade a capacidade que a gua possui em conduzir
corrente eltrica, quanto maior a condutividade, maior a quantidade de ons presentes na gua. A
medida da condutividade deve ser realizada com um condutivmetro. Unidade: S= microsiemens.
3. Realizar o controle microbiolgico da gua. Dever ser feito mensalmente e sempre aps
manuteno do equipamento. O controle microbiolgico da gua definido como Unidades
Formadoras de Colnia por mL de gua (UFC/mL). Cada laboratrio dever ter seu procedimento
de coleta e medida
Para obter uma gua que contenha somente partculas menores que 0,22 , utilizar um filtro com
poro de dimetro nominal igual a 0,22 .
Criar um sistema de registro da condutividade, da absorbncia encontrada no teste do Silicato Ma e
do controle microbiolgico com as datas de realizao. Repetir este teste de controle da qualidade da
gua, no mnimo semanalmente. Registrar todas as aes tomadas quando um dos parmetros se
mostrar fora da especificao desejada.
Data
Condutividade
Absorbncia
Silicato MA
(< 0,010)
Controle
Microbiolgico
Ao aplicada
Armazenamento
De modo geral, como a gua deionizada se encontra em um estado antinatural e tem tendncia a
retornar ao estado anterior purificao, devem-se tomar cuidados no armazenamento.
recomendvel obter a gua purificada na quantidade suficiente para um dia de trabalho.
MATERIAL CALIBRADOR E CONTROLES

MATERIAL CALIBRADOR
Padro (Material Calibrador no protico): denominao dada a preparaes do material calibrador em
matriz no protica (geralmente so calibradores para um nico analito, ex.: Padro de Glicose).
Material com propriedades fsico-qumicas (viscosidade e densidade) diferentes da amostra humana e
pode gerar calibrao com desvio quando utilizado em analisadores automticos.
Calibrador (Material Calibrador protico): denominao dada a preparaes de material calibrador em
matriz protica (geralmente so multi-calibradores, ex.: Calibra).
Material com caractersticas fsico-qumicas mais prximas da amostra humana, sendo, portanto
apropriado para utilizao em analisadores automticos.
Padres e Calibradores so utilizados para transferir exatido para o mtodo analtico.
Em equipamentos manuais ou semi automticos A calibrao pode ser realizada com Padro ou
Calibrador
Em equipamentos automticos A calibrao deve ser realizada com Calibrador.
Calibradores e reagentes devem ser fornecidos pelo mesmo fabricante.
CONTROLES
Os controles so utilizados para monitorar a impreciso do ensaio.
Os controles so disponibilizados com a mdia e intervalo proposto pelo fabricante. Estes devem ser
considerados apenas como orientao at o momento em que o laboratrio tenha suficiente nmero de
dados (20 corridas consecutivas) para calcular estatisticamente seus prprios valores mdios e o intervalo
de variao ou o desvio padro analtico.
Para substratos podem ser utilizados controles e reagentes de fabricantes diferentes. O valor obtido
deve estar prximo ao valor alvo informado pelo fabricante para a metodologia usada. Cada laboratrio
deve estabelecer a mdia segundo seu sistema de medio.
Para atividades enzimticas o uso de controles e reagentes de fabricantes diferentes podem ser
utilizados, desde que o laboratrio estabelea a mdia segundo seu sistema de medio.
RECONSTITUIO E ARMAZENAMENTO
Seguir as orientaes constantes nas Instrues de Uso do fabricante.
Utilizar a gua especificada para a reconstituio do Calibrador ou Controle.
Utilizar pipeta volumtrica calibrada para a reconstituio.
Para aliquotar e armazenar amostras de controles e calibradores, utilizar tubos prprios para
congelamento, com tampa de rosca e anel de vedao (criotubos).
Anotar lote e data de reconstituio nas alquotas.
Congelar e descongelar cada alquota uma nica vez.
- Geladeira comum congelador com temperatura em torno de 4 C negativos.
- Geladeira duplex freezer com temperatura em torno de 10 C negativos
- Freezer comum- temperatura em torno de 20 C negativos.
Aps descongelamento, homogeneizar suavemente antes do uso, sem agitar.
15/01/2009
CALIBRAO
Entende-se calibrao como a transferncia de exatido de um material calibrador para um mtodo ou
sistema analtico.
CURVA DE CALIBRAO
a representao grfica da relao entre as medidas obtidas em um processo analtico (absorbncia) e
a quantidade da substancia contida no material calibrador
FATOR DE CALIBRAO
Quando uma reao segue a lei de Beer, podemos determinar o Fator de Calibrao usando a equao:
Concentrao do Calibrador
Fator Calibrao =
Absorbncia do Calibrador
O Fator de Calibrao pode variar em funo das caractersticas e condies do analisador, diferenas
no material volumtrico utilizado, temperatura do banho-maria, entre outros.
Sendo assim, o Fator de Calibrao deve ser determinado para cada sistema analtico.
INTERVALO DE CALIBRAO
o intervalo de tempo ou sries de medidas durante o qual a calibrao pode ser considerada estvel
dentro de limites especificados e documentados.
VERIFICAO DA CALIBRAO
Quando se tem uma calibrao estvel, com Fator de Calibrao j bem definido, podemos fazer a
Verificao da Calibrao, utilizando o material calibrador.
QUANDO REALIZAR A CALIBRAO
Por recomendao do fabricante do reagente ou analisador.
Na mudana de lote de reagente.
Quando se utiliza um novo frasco de reagente em substituio a outro que foi recalibrado durante seu
uso.
Nas indicaes do Controle da Qualidade.
Sempre aps manutenes realizadas no analisador.
CONDUTA APS CALIBRAO
Verificar se o resultado da calibrao diferente da calibrao anterior (absorbncia ou Fator de
Calibrao).
- SIM Indicador de que a calibrao era realmente necessria.
- NO Se a calibrao foi realizada para atender a uma indicao do controle da qualidade,
ocorreu uma falsa indicao, o sistema est instvel.
15/01/2009
CALIBRAO
CAUSAS DA PERDA DE CALIBRAO
Modificao no desempenho do reagente:
- Adio de novo reagente em frascos com sobras de reagentes usados;
- Preparao inadequada do reagente de trabalho;
- Utilizao de reagentes armazenados de maneira inadequada;
- Contaminao do reagente (por arraste do analisador ou por exposio ao ambiente;
- Instabilidade inerente do reagente.
Modificao na resposta do analisador.
Modificao no desempenho do material volumtrico utilizado.
FALSA INDICAO DE PERDA DA CALIBRAO
Controle Qualidade inadequado.
Armazenamento incorreto das amostras do Controle Qualidade.
Reconstituio incorreta das amostras do Controle Qualidade.
Contaminao das amostras do Controle Qualidade.
Troca da amostra do Controle Qualidade.
CAUSAS DE DESVIO NA CALIBRAO
Reconstituio do material calibrador
- Volume de reconstituio diferente do especificado;
- gua ou outro solvente com caracterstica inadequada;
- Uso de material volumtrico no calibrado.
Diluir de forma inadequada o material calibrador.
Valor do calibrador informado no analisador difere do valor do calibrador em uso.
- Em geral a concentrao do analito no material calibrador difere lote a lote.
Realizar a calibrao utilizando material volumtrico com desempenho diferente do material volumtrico
utilizado durante a realizao dos ensaios (ocorre principalmente em ensaios manuais).
Utilizar valor do calibrador obtido por metodologia diferente da metodologia em uso:
- Valor do calibrador designado com metodologia que utiliza branco de amostra e aplicado em
metodologia que no utiliza branco de amostra.
- Valor do calibrador designado em metodologia bicromtica e aplicado em metodologia
monocromtica.
Utilizar material calibrador armazenado de maneira inadequada.
- Material calibrador armazenado em recipiente com vedao insuficiente.
- Material calibrador armazenado fora da temperatura especificada.
Utilizar fator de calibrao terico.
- O fator de calibrao terico obtido em condies timas e por isso deve ser aplicado com
restries.
- sugerido realizar calibrao com material calibrador apropriado.
Uso de calibrador com concentrao muito baixa
- Ex.: Bilirrubina, Creatinina, testes de atividades enzimticas
CALIBRAO DE ATIVIDADE ENZIMTICA
uma prtica habitual calcular os resultados de atividade enzimtica utilizando um fator obtido em
condies timas de reao que incluem:
comprimento de onda: 340 nm
cubeta termostatizada a 37 0,2 C com 1,0 cm de espessura de soluo.
banda de passagem 2 nm.
luz espria 0,1%.
Como na maioria das vezes no possvel trabalhar sob essas condies, as boas prticas de
laboratrio recomendam realizar a calibrao do ensaio utilizando calibrador de enzimas indicado pelo
fabricante do reagente. A Labtest indica a linha Calibra para calibrao.
15/01/2009
TIPOS DE REAO
PRINCIPAIS TIPOS DE REAO
Colorimtrica - O produto da reao corado e medido na faixa visvel do espectro.
Ultravioleta - O produto da reao absorve energia radiante (Luz) na regio do ultravioleta prximo (medida
geralmente efetuada em 340 nm).
Turbidimtrica - Reao de aglutinao que medida fotometricamente. A turbidez formada na reao
pode ser medida em diferentes regies do espectro, dependendo da sensibilidade do sistema.
Aglutinao - Reaes que utilizam partculas ligadas a antgenos ou anticorpos que reagem com um
analito produzindo uma reao visvel a olho nu ou ao microscpio.
ELISA - Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay (Ensaio de imunoabsoro ligado a enzima)
Coagulao
AS REAES PODEM SER:
Absorbncia
Reao de Ponto Final

A quantidade do produto formado reflete a reao de todo analito presente na amostra.
0,4
T1
0,2
T2
T3
T0
0
0
10
15
20
Tempo de Reao (min)
T0 - T1 - Tempo em que est ocorrendo a reao.

T1 - T2 - Tempo em que a reao se completou e est estvel. Neste intervalo ser realizada a leitura da
reao.
T2 - T3 - Perda da estabilidade da reao.
Absorbncia
Absorbncia
Reao Cintica Contnua

Esta reao pode ser Crescente ou Decrescente. uma reao que aps um perodo inicial de estabilizao,
adquire velocidade constante que se mantm enquanto existir quantidade suficiente de substrato. As medies
devem ser realizadas no intervalo onde a velocidade constante. A diferena de absorbncia entre dois
intervalos o chamado (delta) da reao. Utiliza-se para clculo a diferena de absorbncia obtida por
minuto (A/min).
2 2
1,5 1,5
1 1
0,50,5
0 0
0 0
15/01/2009
2 2
4 4
6 6
8 8
Tempo
Reao
(min)
Tempo
dede
Reao
(min)
10 10
TIPOS DE REAO
Absorbncia
Reao Cintica de 2 Pontos

Realiza-se a primeira medio aps um curto perodo de estabilizao e uma segunda medio aps o
intervalo cintico apropriado. A diferena de absorbncia entre os dois intervalos, (delta) da reao,
utilizada para clculo.
1
0,8
0,6
0,4
0,2
0
0
Tempo de Reao (min)
Absorbncia
Reao Cintica de Tempo Fixo com leitura em Ponto Final

Aps completar o intervalo cintico estabelecido, a reao interrompida e o produto formado medido.
0,4
T1
0,2
T2
T3
T0
0
0
10
15
20
Tempo de Reao (min)
T0 - T1 - Intervalo de tempo onde ocorre a reao

T1 - Interrupo da reao enzimtica
T1 - T2 - Intervalo de estabilidade do produto da reao
T2 - T3 - Perda da estabilidade do produto da reao
OBSERVAES
Na reao Cintica Contnua e Cintica de 2 Pontos, importante que o equipamento tenha cubeta
termostatizada.
Na reao Cintica de Tempo Fixo imprescindvel um rigoroso controle da temperatura e do tempo de
incubao.
REAO CRESCENTE E REAO DECRESCENTE
Reao Crescente So caracterizadas pelo aumento da concentrao do produto formado ou de um dos
reagentes.
Reao Decrescente So caracterizadas pela diminuio da concentrao do produto ou de um dos
reagentes.
15/01/2009
TIPOS DE REAO
MODO DE LEITURA:
Monocromtica - A absorbncia utilizada para clculo o resultado da leitura realizada em um nico
comprimento de onda.
Bicromtica A absorbncia utilizada para clculo o resultado da diferena entre as leituras realizadas no
comprimento de onda primrio e no comprimento de onda secundrio. As leituras bicromticas so utilizadas
para minimizar a ao de interferentes, principalmente a lipemia.
UTILIZAO DO BRANCO
Absorbncia
Branco de Reagentes necessrio utilizar o Branco de reagentes como referncia sempre que a
absorbncia da mistura de reagentes no comprimento de onda utilizado, for diferente da absorbncia da gua.
No teste de Protenas Totais, vemos que em 545 nm o reagente tem uma absorbncia. Ao utilizarmos o
reagente como Branco, para zerar o equipamento, estamos eliminando a contribuio desta absorbncia nos
resultados.
0,5
A2
Padro
0,4
Branco
0,3
A1
0,2
0,1
0
400
450
500
550
600
Comprimento de Onda
A1 - Absorbncia do Reagente (Branco da Reao)

A2 - Absorbncia do Padro (Amostra)
A2 A1 = Absorbncia da Reao
Absorbncia
Branco de Amostra indicado quando a contribuio fotomtrica da amostra utilizada na reao altera
significativamente o resultado final.
0,5
A2
0,4
0,3
0,2
0,1
0
400
A1
450
500
550
600
Comprimento de Onda
A1 Absorbncia do branco da amostra (mistura do 1 reagente com a amostra)

A2 Absorbncia da Reao mais absorbncia do branco da amostra.
A2 A1 = Absorbncia final da Reao
15/01/2009
CONTROLE DA QUALIDADE
Tcnicas e atividades operacionais que se destinam a monitorar um processo e eliminar as causas de
desempenho insatisfatrio em todas as etapas do ciclo da qualidade.
Compreende o estudo de todos os erros e procedimentos utilizados para reconhec-los e minimiz-los.
No laboratrio clnico o controle (soro controle) desempenha o papel de aferidor da qualidade e
confiabilidade dos resultados obtidos.
Como em todo processo analtico existe uma variao esperada que no pode ser eliminada totalmente,
devemos procurar manter esta variao dentro de valores pr-estabelecidos por critrios baseados nos
diversos sistemas analticos, em dados clnicos e estudos estatsticos.
O Controle da Qualidade compreende tambm o registro de todas as aes realizadas.
Um sistema de Controle da Qualidade quando corretamente aplicado, proporciona:
1- Meios de medir e comparar a impreciso de mtodos, material de medio e instrumentos de trabalho.
2- Indicao de inexatido por introduo de erros sistemticos.
3- Deteco de erros aleatrios.
4- Registro contnuo, visvel e permanente dos resultados e aes.
5- Indicao das medidas corretivas e preventivas a serem tomadas, quando um resultado aparece fora de
controle.
A finalidade do Controle da Qualidade implementar a preciso metodolgica e mant-la continuamente,
visando com isto aprimorar a exatido dos mtodos.
A figura abaixo mostra as diversas situaes encontradas ao avaliar uma metodologia em um laboratrio
clnico:
Disperso de valores
Preciso sem Exatido
Preciso + Exatido
O grfico A descreve um mtodo com preciso inaceitvel, onde os resultados obtidos esto totalmente
dispersos ao redor da mdia.
No grfico B nota-se que existe uma pequena disperso de valores, demonstrando boa preciso, mas
devido a um ou mais erros sistemticos, no se consegue obter EXATIDO, estando a mdia bastante
diferente do seu valor verdadeiro.
O exemplo C mostra claramente um mtodo que rene as propriedades de PRECISO e EXATIDO,
estando perfeitamente dentro de controle.
21/07/05
PASSOS PARA IMPLANTAO DO CONTROLE INTERNO DA QUALIDADE (CIQ)
1) Escolher o controle a ser utilizado (de acordo com orientao do fabricante do reagente).
2) Utilizar o intervalo proposto pelo fabricante do controle, exceto em casos justificados.
3) Utilizar os dados obtidos em no mnimo 20 dosagens do controle interno para o analito em estudo
(ex: glicose, colesterol) para calcular a mdia de acordo com seu sistema analtico.
4) Na literatura Especificaes da Qualidade Analtica, buscar o Erro Total para o analito em estudo.
O Erro Total o erro mximo que um resultado pode conter.
5) Somar mdia obtida o percentual do Erro Total (de acordo com o analito em estudo).
Exemplo (Glicose): Erro Total: 6,9% (Especificao Desejvel)
Mdia calculada pelo laboratrio: 105 mg/dL
Clculo:
105 mg/dL
Mdia
6,9%
Erro total
7,2 mg/dL
3 DP
O valor de 7,2 mg/dL (referente a 3 DP), o mximo que os resultados podem variar em torno da
mdia, ou seja, podem variar de 98 a 112 mg/dL.
O valor de 1 DP, igual a 7,2 mg/dL dividido por 3 (1 DP = 2,4 mg/dL).
A corrida analtica deve ser rejeitada sempre que os resultados de controle excederem o intervalo
calculado.
6) Registrar os resultados do controle (os registros podem ser feitos em: tabela (manual ou Excel),
mapa Levey-Jennings, software especfico de CIQ...)
7) Registrar todas as ocorrncias, como:
- Mudana de lote de reagente, calibrador ou controle
- Nova calibrao (registrar o Fator de Calibrao)
- Preparo de novo frasco de reagentes e reconstituio de materiais
- Manuteno realizada no equipamento
8) Analisar os resultados do CIQ logo aps a obteno dos dados, para verificar a condio de
continuidade da corrida analtica.
9) Registrar as Aes Preventivas e Corretivas.
21/07/05
TERMINOLOGIA
Bias o mesmo que inexatido quando se compara a mdia dos resultados de um material de referncia
com o valor real. No controle estatstico da qualidade o bias usado como a dimenso do erro sistemtico.
Coeficiente de Variao (CV) Desvio padro relativo, isto , desvio padro expresso como percentagem
da mdia.
Desvio Padro (DP) Dado estatstico que descreve a disperso do conjunto de dados ao redor da mdia.
expresso nas mesmas unidades de medio (mg/dL, mmol/L, UI/L...)
Erro aleatrio Erro analtico positivo ou negativo cuja direo ou magnitude no pode ser prevista com
segurana. medido pelo desvio padro de um conjunto de medies.
Erro Sistemtico Erro que tem sempre uma direo. Sua grandeza verificada atravs do bias que
representa a diferena entre o valor verdadeiro e o valor mdio encontrado.
Erro Sistemtico Constante Erro que ocorre sempre em uma direo e cuja grandeza independe da
concentrao do analito.
Erro Sistemtico Proporcional Erro que ocorre sempre na mesma direo e cuja magnitude sempre
uma percentagem da concentrao do analito.
Erro Total o efeito combinado do erro aleatrio (impreciso) e do erro sistemtico (bias). Representa o
limite de erro analtico mximo aceitvel, inserido em um resultado de exame laboratorial.
Impreciso Desvio padro ou coeficiente de variao dos resultados de um conjunto de medies.
Inexatido Diferena numrica entre a mdia de um conjunto de medies e o valor verdadeiro, incluindo
os erros aleatrios e sistemticos.
Mdia a melhor avaliao do verdadeiro valor de um analito. a soma dos valores divididos pelo
nmero total de valores.
Repetitividade Grau de concordncia entre os resultados de medies sucessivas de um mesmo
mensurando efetuadas sob as mesmas condies. Significa a avaliao da impreciso (desvio padro) de
um sistema de medio realizada sob as mesmas condies (observador, padro de referncia, local,
condies de utilizao, tempo).
Reprodutibilidade Grau de concordncia entre os resultados das medies de um mesmo mensurando
efetuadas em condies variadas de medio. Significa a avaliao da impreciso (desvio padro) de um
sistema de medio realizada sob condies variadas (observador, padro de referncia, local, condies
de utilizao, tempo).
Variao Biolgica a variao de um analito no organismo do indivduo. A concentrao dos analitos
pode variar devido a fatores biolgicos envolvidos em seu ciclo de vida, tais como faixa etria, idade, etnia,
entre outros.
21/07/05
CIDO RICO LIQUIFORM Ref. 73

O cido rico o maior produto do catabolismo das purinas. oriundo do catabolismo das protenas da
dieta e de fontes endgenas, concentrando-se principalmente no fgado. excretado principalmente por via
renal. Os nveis sricos do cido rico so determinados pela relao entre a dieta, a produo endgena e
os mecanismos de reabsoro e de excreo.
PRINCPIO DA REAO
O cido rico oxidado pela uricase alantona e perxido de hidrognio. O perxido de hidrognio na
presena da peroxidase reage com o DHBS (cido 3,5-dicloro-2-hidroxibenzeno sulfonato) e a 4
aminoantipirina, formando o cromognio antipirilquinonimina. A intensidade da cor vermelha formada
diretamente proporcional concentrao do cido rico na amostra.
Uricase
cido rico + O2 + H2O
Alantona + CO2 + H2O2

Peroxidase
2H2O2 + DHBS + 4-aminoantipirina
Antipirilquinonimina + 4 H2O
APRESENTAO
Ref.
73.1 - Reagente 1
73.2 - Reagente 2
73.3 - Padro - 6,0 mg/dL
73-4/30
24 mL
6 mL
5 mL
73-2/100
80 mL
20 mL
5 mL
Temperatura Armazenamento: 2 - 8 C
ESPECIFICAES
Metodologia:
Enzimtico Trinder (Uricase Colorimtrico)
Reao:
Enzimtica com leitura em Ponto Final
Sistema:
Mono ou Birreagente
Aplicao:
Manual, semi-automtico e automtico
Comprimento Onda: 520 nm (490 a 540)
Amostra:
Soro, urina, liquido amnitico e sinovial
Linearidade:
20 mg/dL
Relao Amostra/Reagente: 1:51
ESPECIFICAES QUALIDADE ANALTICA
EQA Especificao: Desejvel
Erro Total: 11,9%
Bias: 4,8%
CVa: 4,3%
Bibliografia:
1- Fraser CG.Biological Variation: from principles to practise. Washington DC:AACC Press, 2001.141p.
2- Especificaes da Qualidade Analtica, Labtest Diagnstica SA.
CALIBRAO
Realizar a calibrao utilizando o Padro - Ref. 73.3 ou calibrador da srie Calibra da Labtest.
Os dados abaixo foram obtidos em espectrofotometro com banda de passagem de 2 nm, comprimento de
onda de 520 nm e cubeta de 1 cm de espessura, servindo somente como orientao e podem variar em
funo das caractersticas e condies do analisador, diferenas no material volumtrico utilizado,
temperatura do banho-maria, entre outros.
Absorbncia do Reagente: < 0,300
Fator de Calibrao mdio: 45
REAGENTE DE TRABALHO
Transferir o contedo de um frasco do Reagente 2 para um frasco do Reagente 1, ou misturar 4 volumes
do Reagente 1 com 1 volume do Reagente 2. Estvel 90 dias entre 2 - 8 C.
Em analisadores automticos, pode-se usar o Reagente de Trabalho ou sistema birreagente O uso do
sistema birreagente possibilita a minimizao da ao da interferncia fotomtrica provocada pela amostra.
LQUIDOS CORPORAIS (Carl Kjeldsberg, Joseph Knight. Body Fluids 1993)
Lquido Sinovial: o valor do cido rico presente no lquido sinovial prximo ao valor do soro coletado no
mesmo momento.
Lquido Amnitico: Feto imaturo < 7,6 mg/dL
20/09/2010
Feto maduro 7,6 mg/dL

1
CIDO RICO LIQUIFORM Ref. 73

ORIENTAES
Para o acerto do pH da urina pode ser utilizado KOH (hidrxido de potssio) ao invs de NaOH.
O NaOH tambm pode ser substitudo por Bicarbonato de Sdio na concentrao de 5,0 g/dL. Utilizar
Bicarbonato de Sdio puro.
O acerto do pH da urina preserva o cido rico, urobilinognio e porfirinas.
Estabilidade da urina de 24 horas: Estvel 4 dias entre 20 - 25 C (alcalinizada). Estvel menos de 1 ms
congelada a 20 C negativos.
IMPORTANTE: O Reagente 1 do produto HDL LE Labtest catlogo 98, contm em sua formulao a
enzima colesterol oxidase. Resduos deste reagente podem persistir no sistema de analisadores
automticos contaminando com a enzima colesterol oxidase o reagente da prxima pipetagem. Esta enzima
ir reagir com o colesterol livre contido na amostra levando a obteno de resultados falsamente elevados
se o teste subseqente utilizar a reao de Trinder.
INTERFERENTES
Aspirina (e outros salicilatos) tem efeitos diversos nos nveis de cido rico. Em nveis baixos (pessoas
que fazem uso ocasionalmente) a aspirina pode elevar o cido rico. Por outro lado em doses altas a
aspirina leva a valores diminudos de cido rico no sangue
Presena de cido ascrbico mesmo em baixas concentraes produz resultados falsamente
diminudos. sugerida a suspenso da ingesto de vitamina C nas 48 horas que antecedem a coleta.
CLEARANCE DO CIDO RICO (Tietz 2 Edio pgina 1523)
Determinar a concentrao do cido rico em amostra de soro e amostra de urina e efetuar o

clculo:
Clearance cido rico (mL plasma/min ) =
AU urina (mg/dL) x VU mL/min

AU soro (mg/dL)
VU mL/min = Volume Urina em mL / Tempo coleta em minutos

Intervalo de Referncia: 2,4 a 53,4 mL plasma/min
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL COM BRANCO DE AMOSTRA
Leitura A1
Adio R1
e Amostra
20/09/2010
Adio R2
Leitura A2
Tempo (min)
ALBUMINA Ref. 19
A albumina a protena que est presente em maior concentrao, respondendo por cerca de 60% do total
de protenas. sintetizada pelo fgado, aparecendo primeiro no citoplasma dos hepatcitos como um
precursor chamado pr-albumina. Tem meia-vida biolgica de cerca de 3 semanas. Tm um papel muito
importante na manuteno da presso osmtica do plasma e transporte de substncias.
PRINCPIO DA REAO
A albumina tem a propriedade de se ligar a uma grande variedade de nions orgnicos e molculas
complexas de corantes. O sistema de medio se baseia no desvio do pico de absortividade mxima de um
corante complexo (verde de bromocresol) quando este se liga albumina.
APRESENTAO
Ref.
19.1 - Reagente de Cor
19.2 - Padro - 3,8 g/dL
19- 250
1 x 250 mL
1 x 1 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Verde de Bromocresol (VBC) com tampo citrato
Reao:
Ponto Final
Sistema:
Monorreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
630 nm (600 a 640)
Amostra:
Soro, lquido asctico
Linearidade:
6,0 g/dL
Erro Total: 3,9%
Bias: 1,3%
CV: 1,6%

Erro Total: 3,90%
Bias: 1,30%
CVa: 1,60%
Bibliografia:
CALIBRAO
Realizar a calibrao utilizando o Padro Ref. 19.2 ou calibrador da srie Calibra da Labtest.
Lquido Asctico - diferenciao entre Transudato e Exudato:
Transudato: 1,6 0,5 g/dL
Exsudato: 0,6 0,4 g/dL
ORIENTAES
Heparina, EDTA, citrato e oxalato K combinado com fluoreto de sdio levam a resultados falsamente
diminudos.
A aplicao de torniquete por tempo maior que 3 minutos aumenta os valores de albumina.
20/09/2010
ALBUMINA Ref. 19
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
ALT/GPT Liquiform - Ref. 108

A alanina aminotransferase - ALT, antigamente denominada transaminase pirvica, encontrada
abundantemente no fgado, em quantidades moderadas no rim e em pequenas quantidades no corao e
na musculatura esqueltica. Sua origem predominantemente citoplasmtica, fazendo com que se eleve
rapidamente aps a leso heptica, tornando-a um marcador sensvel da funo do fgado. Como marcador
hepatocelular, apresenta valores alterados em patologias que cursam com necrose do hepatcito, como
hepatites virais, mononucleose, citomegalovirose e hepatites medicamentosas. um marcador menos
sensvel que a AST para hepatopatias alcolicas, cirrose ativa, obstrues extra-hepticas e leses
metastticas no fgado.
PRINCPIO DA REAO
A ALT catalisa especificamente a transferncia do grupo amina da alanina para o cetoglutarato, com
formao de glutamato e piruvato. O piruvato reduzido lactato por ao da lactato desidrogenase (LDH)
enquanto que a coenzima NADH oxidada a NAD. A reduo da absorbncia em 340 nm, conseqente
oxidao da NADH, monitorada fotometricamente sendo diretamente proporcional atividade da ALT na
amostra.
ALT
L-Alanina + Cetoglutarato
Piruvato + L-Glutamato
LDH
Piruvato + NADH
NAD + L-Lactato
APRESENTAO
Ref.
108.1 - Reagente 1
108.2 - Reagente 2
108.3 - Reagente 3
108- 4/30
4 x 24 mL
4 x 6 mL
1 x 1,5 mL
108- 2/100
2 x 80 mL
2 x 20 mL
1 x 2,2 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Reao:
Sistema:
Cintica UV - IFCC
Cintica Contnua Decrescente
Monorreagente (sem o uso do Reagente 3)
Birreagente (com o uso do Reagente 3)
Aplicao:
Semi-automtico e automtico
Comprimento Onda:
340 nm
Amostra:
Soro ou plasma (EDTA, heparina)
Linearidade:
entre 3,5 e 400 U/L
EQA Especificao: tima
Erro Total: 16,0%
Bias: 6,0%
CVa: 6,1%
Bibliografia:
CALIBRAO
Os dados abaixo foram obtidos em espectrofotometro com banda de passagem de 2 nm e cubeta de 1 cm
de espessura servindo somente como orientao e podem variar em funo das caractersticas e condies
do analisador, diferenas no material volumtrico utilizado, temperatura do banho-maria, entre outros.
Absorbncia do Reagente: >1,000
Fator de Calibrao Terico: 1746
O uso de calibrao para a medida da atividade enzimtica importante para a correo da variabilidade ou
correo da resposta fotomtrica. Indicamos o uso de calibrador da srie Calibra.
No utilizar calibradores de outros fabricantes na calibrao de testes cinticos enzimticos.
20/09/2010
ALT/GPT Liquiform - Ref. 108

Em alguns equipamentos semi-automticos, a calibrao direta do teste no possvel quando se usa o
Modo Cintico. Neste caso, ensaiar o material calibrador em triplicata (as diferenas entre os calibradores
no devem ser maiores que 5%). Em seguida recalcular o fator para insero na programao em
substituio ao fator terico de acordo com a frmula abaixo:
Fator =
Atividade do Calibrador
x Fator utilizado
Atividade Encontrada
DETERMINAO DA ATIVIDADE ENZIMTICA SEM O USO DO PIRIDOXAL FOSFATO

Neste caso os resultados obtidos NO so rastreveis ao mtodo de referncia da IFCC
A medio ser realizada usando somente o Reagente 1 e Reagente 2. Transferir o contedo de um
frasco do Reagente 2 para um frasco do Reagente 1, ou misturar 4 volumes do Reagente 1 com 1 volume
do Reagente 2. Estvel 14 dias entre 2 a 8 C.
DETERMINAO DA ATIVIDADE ENZIMTICA UTILIZANDO O PIRIDOXAL FOSFATO
Para obteno de resultados rastreveis ao mtodo de referncia IFCC, necessrio utilizar o
procedimento bi-reagente, para que a enzima seja totalmente ativada pelo piridoxal fosfato.
Preparo do Reagemte de Trabalho
Transferir 0,300 mL do Reagente 3 para um frasco do Reagente 1 (24 mL) e homogeneizar suavemente.
Estvel 21 dias entre 2 - 8 C.
Opcionalmente pode-se preparar um volume menor misturando 1 volume do Reagente 3 com 80 volumes
do Reagente 1 (exemplo: adicionar 0,010 mL do Reagente 3 a 0,800 mL do Reagente 1)
Realizar o teste de acordo com os protocolos de cada analisador.
ORIENTAES
O mtodo de referncia proposto pela International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory
Medicine (IFCC) recomenda a utilizao do piridoxal fosfato para assegurar que toda transferase presente
na amostra esteja totalmente ativa, evitando valores falsamente diminudos em amostras com deficincia da
coenzima.
As diferenas entre medidas consecutivas (A) devem ser equivalentes, respeitadas as variaes
inerentes a cada metodologia.
Um teste realizado somente com o Reagente de Trabalho fornece a informao sobre suas condies. A
absorbncia inicial geralmente em torno de 1,800 para reagentes recm preparados. Absorbncias at
1,000 podem ser aceitas, mas devem ser acompanhadas. A atividade do reagente no deve ser maior que
10 UI/L, uma atividade maior pode indicar sujeira no sistema de fluxo e na cubeta.
Quando o resultado obtido no est de acordo com a clnica (resultado muito baixo ou mesmo negativo),
uma causa provvel pode ser uma elevada atividade enzimtica com consumo excessivo de substrato.
Nestes casos a absorbncia final da reao se encontra no limite da capacidade do teste (absorbncia <
0,400) e os deltas so decrescentes e at negativos.
- Diluir a amostra conforme orientao das Instrues de Uso e realizar o teste novamente.
Em amostras muito ictricas a absorbncia da amostra mascara uma reduo da absorbncia da reao,
com resultados baixos ou mesmo negativos.
Nos testes enzimticos, quando se trabalha com reagentes e controles de fabricantes diferentes, os
valores constantes nas instrues dos controles no servem como referncia. O controle pode ser utilizado
desde que o laboratrio determine sua prpria mdia.
Absorbncia
REAO CINTICA CONTNUA DECRESCENTE

1
2
Tempo (min)
20/09/2010
AMILASE CNPG - Ref. 25

As amilases so enzimas que catalisam a hidrlise da amilopectina, da amilose e do glicognio. A amilase
presente no sangue e na urina de indivduos normais de origem pancretica (predominantemente forma
P) e das glndulas salivares (forma S).
PRINCPIO DA REAO
A -Amilase hidrolisa o substrato -(2-cloro-4-nitrofenil)--1,4-galactopiranosilmaltoside (Gal-G2--CNP),
liberando 2-cloro-4-nitrofenol (CNP) e 1,4 galactopiranosilmaltoside (Gal-G2). A velocidade de formao de
2-cloro-4-nitrofenol pode ser medida fotometricamente e proporciona uma medida direta da atividade da Amilase na amostra.
-Amilase
Gal-G2--CNP + H2O
Gal-G2 + CNP
APRESENTAO
Ref.
25.1 - Substrato
25-2/30
2 x 30 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Substrato Gal-G2--CNP
Reao:
Cintica Contnua Crescente
Sistema:
Monorreagente
Aplicao:
Semi-automtico e Automtico
Comprimento Onda:
405 nm
Amostra:
Soro ou Plasma (heparina), lquidos asctico, duodenal, pleural
Linearidade:
2000 U/L
Erro Total: 15,7%
Bias: 7,8%
CVa: 4,8%
Bibliografia:
CALIBRAO
Absorbncia do Reagente: <0,300
modo Cintico. Neste caso, ensaiar o material calibrador em triplicata (as diferenas entre os calibradores
Fator =
20/09/2010
x Fator utilizado
AMILASE CNPG - Ref. 25

LQUIDOS CORPORAIS (Carl Kjeldsberg, Joseph Knight. Body Fluids 1993;184, 233)
Lquido Asctico e Pleural:
Intervalos de Referncia semelhante aos valores do soro. Para que tenha significado clnico o valor, nestes
lquidos, deve ser pelo menos 3 vezes maior.
ORIENTAES
Pipetar o substrato com a boca, soprar no substrato, usar material contaminado com saliva e conversar
junto ao frasco destampado, so aes que podem contaminar o reagente com quantidades microscpicas
de saliva, capazes de deteriorar irremediavelmente o substrato.
Amostras com Citrato, EDTA ou Oxalato no devem ser usadas porque fornecem resultados falsamente
diminudos.
Pode ser utilizada amostra nica de urina, desde que seja determinada a creatinina na mesma amostra,
sendo o resultado reportado como Relao Amilase / Creatinina (U/g). Ver clculos nas Instrues de Uso.
A metodologia da Amilase CNPG utilizando o substrato Gal-G2--CNP produz resultados falsamente
elevados em amostras de ces. No temos estudos em outras amostras veterinrias.
INTERFERNCIAS DE DROGAS
Aumento: Morfina, aspirina, codena, meperidina, prostigmine, metacolina, ureocolina, clorotiazida,
cortiscoterides
Diminuio: Glicose, frutose, glucagon, insulina, tolbutamida
Absorbncia
REAO CINTICA CONTNUA CRESCENTE
2
1
Tempo (min)
20/09/2010
AMILASE - Ref. 11
As amilases so enzimas que catalisam a hidrlise da amilopectina, da amilose e do glicognio.
A amilase presente no sangue e na urina de indivduos normais de origem pancretica
(predominantemente forma P) e das glndulas salivares (forma S).
PRINCPIO DA REAO
A amostra incubada com um substrato de amido e a diminuio da cor azul, aps a adio de iodo,
comparada com um controle, sendo proporcional atividade da amilase na amostra.
APRESENTAO
Ref.
11.1 - Substrato
11.2 - Reagente de Cor - Estoque
11-100
50 mL
5 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Caraway modificado.(amido-iodo)
Reao:
Cintica de Tempo Fixo com leitura em Ponto Final
Aplicao:
Manual e semi-automtico
Comprimento Onda:
660 nm (620 a 700)
Amostra:
Soro ou Plasma (heparina), lquidos asctico, duodenal, pleural
Linearidade:
400 Unidades/dL
Relao Amostra / Reagente: 1:501
Erro Total: 15,7%
Bias: 7,8%
CVa: 4,8%
Bibliografia:
TUBO CONTROLE
Absorbncia mdia do tubo Controle: 0,475
PREPARO DO REAGENTE DE COR DE USO
Transferir o contedo da ampola para o frasco vazio e rotulado fornecido no kit, adicionar 45 mL de gua
destilada ou deionizada e misturar. Estvel por 6 meses entre 2 - 8 C.
LQUIDOS CORPORAIS (Carl Kjeldsberg, Joseph Knight. Body Fluids 1993;184, 233)
Lquido Asctico e Pleural:
Intervalo de Referncia semelhante aos valores do soro. Para que tenha significado clnico o valor nestes
lquidos deve ser pelo menos 3 vezes maior.
ORIENTAES
Pipetar o substrato com a boca, soprar no substrato, usar material contaminado com saliva e conversar
junto ao frasco destampado, so aes que podem contaminar o reagente com quantidades microscpicas
de saliva, capazes de deteriorar irremediavelmente o substrato.
Uma diminuio maior que 10% na absorbncia do tubo controle, indica contaminao do substrato com
saliva.
aconselhvel fazer alquotas do Substrato, para em caso de contaminao, no haver perda de todo o
reagente.
Amostras com Citrato, EDTA ou Oxalato no devem ser usadas porque fornecem resultados falsamente
diminudos.
20/09/2010
AMILASE - Ref. 11
Pode ser utilizada amostra nica de urina, desde que seja determinada a creatinina na mesma amostra,
sendo o resultado reportado como Relao Amilase / Creatinina (U/g). Ver clculos nas Instrues de Uso.
Como ocorre com toda reao enzimtica a rigorosa observao do tempo e da temperatura de
incubao de grande importncia para a qualidade dos resultados obtidos. A diferena de 1 minuto no
tempo de incubao introduz um erro de 13,3% nos resultados.
Deve ser realizado um rigoroso controle do Tempo de Reao. Cronometrar cada tubo por
EXATAMENTE 7 minutos e 30 segundos no banho-maria 37 C antes de adicionar o Reagente de Cor.
A temperatura do banho-maria deve estar controlada (37 C).
O controle rigoroso do tempo de reao essencial para obteno de resultados asequados.
No protocolo de equipamentos semi-automticos como o Labquest o fator de calibrao est 1,000 para
ser liberada a absorbncia, que deve ser utilizada para os clculos. Estes equipamentos no tm memria
suficiente para realizar este clculo.
INTERFERNCIAS DE DROGAS
Aumento: Morfina, aspirina, codena, meperidina, prostigmine, metacolina, ureocolina, clorotiazida,
cortiscoterides
Diminuio: Glicose, frutose, glucagon, insulina, tolbutamida
CLCULO DE ATIVIDADE DA AMILASE
Definio de Unidade: Quantidade de Enzima contida em 100 mL de soro que hidroliza 10 mg de amido
em 30 minutos.
No teste, 1,0 mL de Substrato, que contm 0,4 mg de Amido incubado durante 7 minutos e 30 segundos
com 0,02 mL de soro.
Clculo do valor em unidade, supondo-se que todo amido hidrolizado:
30 x 100 x 0,4
FATOR = = 800
0,02 x 10 x 7,5
30 = 30 minutos
100 = 100 mL de soro
0,4 = mg de Amido no tubo
0,02 = volume de soro na reao
10 = 10 mg de Amido
7,5 = tempo de reao
Absorbncia
REAO CINTICA DE TEMPO FIXO COM LEITURA PONTO FINAL

Interrupo da Reao
enzimtica
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
AST/GOT Liquiform - Ref. 109

A aspartato aminotransferase - AST, antigamente denominada transaminase oxaloactica, encontrada em
diversos rgos e tecidos, incluindo corao, fgado, msculo esqueltico e eritrcitos. Est presente no
citoplasma e tambm nas mitocndrias, e portanto sua elevao indica um comprometimento celular mais
profundo. No caso do hepatcito, isso se revela por uma elevao por tempo mais prolongado no curso das
hepatites virais agudas e uma elevao seletiva nos casos de hepatites alcolicas, metstases hepticas e
necroses medicamentosas e isqumicas.
PRINCPIO DA REAO
A AST catalisa especificamente a transferncia do grupo amina do cido asprtico para o cetoglutarato com
formao de glutamato e oxalacetato. O oxalacetato reduzido malato por ao da malato desidrogenase
(MDH), enquanto que a coenzima NADH oxidada NAD.
A reduo da absorbncia em 340 ou 365 nm, conseqente oxidao da NADH, monitorada
fotometricamente, sendo diretamente proporcional atividade da AST na amostra.
AST
L-Aspartato + Cetoglutarato
Oxalacetato + L-Glutamato
MDH
Oxalacetato + NADH
Malato + NAD
APRESENTAO
Ref.
109.1 - Reagente 1
109.2 - Reagente 2
109.3 - Reagente 3
109-4/30
4 x 24 mL
4 x 6 mL
1 x 1,5 mL
109- 2/100
2 x 80 mL
2 x 20 mL
1 x 2,2 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Reao:
Sistema:
Cintica UV - IFCC
Cintica Contnua Decrescente
Monorreagente (sem o uso do Reagente 3)
Birreagente (com o uso do Reagente 3)
Aplicao:
Comprimento Onda:
340 nm
Amostra:
Soro ou plasma (EDTA)
Linearidade:
400 UI/L
Erro Total: 15,2%
Bias: 5,40%
CVa: 6,0%
Bibliografia:
CALIBRAO
20/09/2010
AST/GOT Liquiform - Ref. 109

Fator =
x Fator utilizado
DETERMINAO DA ATIVIDADE ENZIMTICA SEM O USO DO PIRIDOXAL FOSFATO

Neste caso os resultados obtidos no so rastreveis ao mtodo de referncia da IFCC
Preparo do Reagente de Trabalho
Transferir o contedo de um frasco do Reagente 2 para um frasco do Reagente 1 ou misturar quatro
volumes do Reagente 1 mais um volume do Reagente 2. Estvel 10 dias entre 2 - 8 C.
DETERMINAO DA ATIVIDADE ENZIMTICA UTILIZANDO O PIRIDOXAL FOSFATO
Para obteno de resultados rastreveis ao mtodo de referncia IFCC, necessrio utilizar o
procedimento bi-reagente, para que a enzima seja totalmente ativada pelo piridoxal fosfato.
Preparo do Reagente
Transferir 0,300 mL do Reagente 3 para um frasco do Reagente 1 (24 mL) e homogeneizar suavemente.
Estvel 21 dias entre 2 - 8 C.
Opcionalmente pode-se preparar um volume menor adicionando-se 1 parte do Reagente 3 a 80 partes do
Reagente 1 (exemplo: adicionar 0,010 mL do Reagente 3 a 0,800 mL do Reagente 1).
ORIENTAES
O mtodo de referncia proposto pela International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory
Medicine (IFCC) recomenda a utilizao do piridoxal fosfato para assegurar que toda transferase presente
na amostra esteja totalmente ativa, evitando valores falsamente diminudos em amostras com deficincia da
coenzima.
Absorbncia
REAO CINTICA CONTNUA DECRESCENTE

1
2
Tempo (min)
20/09/2010
BETATEST PLUS - Ref. 14K7

Gonadotrofina corinica humana (HCG) um hormnio glicoprotico produzido pelas clulas do
sinciciotrofoblasto da placenta. A molcula de HCG composta por duas subunidades: alfa e beta. A
subunidade beta a que confere a especificidade, uma vez que a subunidade alfa comum a outros
hormnios como o LH, o FSH e o TSH. Alm das subunidades livres, outras molculas HCG-relacionadas
podem estar presentes, tanto no soro como na urina de mulheres grvidas. Essas molculas podem
apresentar grandes variaes estruturais e so reconhecidas diferentemente por diversos imunoensaios
para HCG.
PRINCPIO DA REAO
AMOSTRA
Anti IgG de rato

Anti hCG
Anti hCG conjugado com ouro coloidal
A amostra reage com um conjugado de ouro coloidal-anticorpo monoclonal anti-hCG e a mistura se move
cromatograficamente na membrana por ao capilar. Na existncia de hCG na amostra, uma linha colorida
se forma na regio onde est imobilizado o anti-hCG (resultado Positivo). A mistura continua a migrar na
membrana e h a formao da linha Controle.
NEGATIVO
T
POSITIVO
INVLIDO
APRESENTAO
Betatest Ref. 14 K7
Conjunto para 25 testes
ESPECIFICAES
Metodologia: Imunoensaio cromatogrfico
Amostra:
Soro ou Urina.
Sensibilidade: 25 mUI/mL
ORIENTAES
A leitura deve ser realizada dentro de 5 minutos aps o incio do teste.
Leituras aps os 5 minutos no devem ser consideradas.
A linha Controle pode tornar-se visvel posteriormente, entre 5 e 10 minutos.
O Laboratrio deve guardar as amostras tanto de soro quanto de urina por pelo menos 3 meses para
que em caso de dvida do resultado possa repetir o exame.
O Laboratrio no deve liberar o resultado no laudo como positivo ou negativo para gravidez, mas
positivo ou negativo para presena de hCG.
Drogas Interferentes (resultado positivo na ausncia de gravidez): Pregnyl; Choragon; canabinides
A interpretao do teste requer cautela, pois a presena do hCG no sinnimo de gestao. Valores
elevados so encontrados em neoplasias de clulas germinativas e tumores trofoblsticos gestacionais
(mola hidatiforme, mola parcial e coriocarcinoma). Ilhotas celulares de outros tumores podem produzir
hCG, como alguns carcinomas do pulmo, estmago, pncreas, fgado e mama. O hCG no lquor pode ser
til no diagnstico de neoplasia germinativa intracraneana.
15/01/2009
BETATEST PLUS - Ref. 14K7

Resultados falsos positivos podem ser obtidos aps a transfuso de sangue oriundo de doador com altos
nveis do hCG, pela presena de anticorpos heterfilos, ou de materiais semelhantes ao hCG
eventualmente presentes em associao com cistos de ovrio ou doena inflamatria plvica.
SORO - RESULTADO FALSO POSITIVO
Cliente teve sangramento aps o exame?
- Provvel perda espontnea da gravidez.
Foi realizado o teste na urina?
- Resultado positivo - Provvel perda espontnea da gravidez.
- Resultado Negativo - Possvel presena de anticorpo heteroflico.
Verificar a possibilidade de troca de amostra.
SORO - RESULTADO FALSO NEGATIVO
Repetir o teste aps alguns dias.
Realizar o teste na 1a urina da manh.
Possibilidade de a paciente ter nvel baixo de hCG.
URINA - RESULTADO FALSO POSITIVO
- Provvel aborto espontneo.
Foi realizado o teste no soro?
- O resultado foi positivo? Provvel aborto espontneo.
URINA - RESULTADO FALSO NEGATIVO
Possibilidade de a paciente ter nvel baixo de hCG. . O teste pode ser realizado como auxiliar no
diagnstico da gravidez no dia provvel da menstruao. Entretanto, em alguns casos, a concentrao de
hCG to pequena que o teste ser negativo. Neste caso, realizar novo teste em amostra colhida aps 3 5 dias.
NVEIS DE HCG
Em princpio a presena de HCG pode ser determinada a partir da data provvel da menstruao.
Uma tentativa de balizar os valores mais significativos oferece os nmeros abaixo em mUI/ml:
4a semana 1.000
5a semana 3.000
6a semana 6.000
7a semana 20.000
Da 8a 10a semana transcorre o fenmeno apical de HCG, quando a taxa eleva-se a 50.000 ou mesmo
100.000 mUI/ml. Depois de 90 dias de amenorria estabelece-se uma amplitude entre 5.000 e 15.000
mUI/ml. Qualquer valor abaixo deste limite indicativo de anormalidade. Um segundo pico de HCG, menor,
descrito na 36a semana, de significado desconhecido.
15/01/2009
BETATEST PLUS TIRAS - Ref. 14T

Gonadotrofina corinica humana (HCG) um hormnio glicoprotico produzido pelas clulas do
sinciciotrofoblasto da placenta. A molcula de HCG composta por duas subunidades: alfa e beta. A
subunidade beta a que confere a especificidade, uma vez que a subunidade alfa comum a outros
hormnios como o LH, o FSH e o TSH. Alm das subunidades livres, outras molculas HCG-relacionadas
podem estar presentes, tanto no soro como na urina de mulheres grvidas. Essas molculas podem
apresentar grandes variaes estruturais e so reconhecidas diferentemente por diversos imunoensaios
para HCG.
PRINCPIO DA REAO
AMOSTRA
Anti IgG de rato

Anti hCG
Anti hCG conjugado com ouro coloidal
A amostra reage com um conjugado de ouro coloidal-anticorpo monoclonal anti-hCG e a mistura se move
cromatograficamente na membrana por ao capilar. Na existncia de hCG na amostra, uma linha colorida
se forma na regio onde est imobilizado o anti-hCG (resultado Positivo). A mistura continua a migrar na
membrana e h a formao da linha Controle.
APRESENTAO
Betatest Tiras Ref. 14 T
Conjunto para 25 testes
ESPECIFICAES
Metodologia: Imunoensaio cromatogrfico
Amostra:
Soro ou Urina.
Sensibilidade: 25 mUI/mL
ORIENTAES
A leitura deve ser realizada dentro de 5 minutos aps o incio do teste.
Leituras aps os 5 minutos no devem ser consideradas.
A linha Controle pode tornar-se visvel posteriormente, entre 5 e 10 minutos.
O Laboratrio deve guardar as amostras tanto de soro quanto de urina por pelo menos 3 meses para
que em caso de dvida do resultado possa repetir o exame.
O Laboratrio no deve liberar o resultado no laudo como positivo ou negativo para gravidez, mas
positivo ou negativo para presena de hCG.
Drogas Interferentes (resultado positivo na ausncia de gravidez): Pregnyl; Choragon; canabinides
A interpretao do teste requer cautela, pois a presena do hCG no sinnimo de gestao. Valores
elevados so encontrados em neoplasias de clulas germinativas e tumores trofoblsticos gestacionais
(mola hidatiforme, mola parcial e coriocarcinoma). Ilhotas celulares de outros tumores podem produzir
hCG, como alguns carcinomas do pulmo, estmago, pncreas, fgado e mama. O hCG no lquor pode ser
til no diagnstico de neoplasia germinativa intracraneana.
15/01/2009
BETATEST PLUS TIRAS - Ref. 14T

Resultados falsos positivos podem ser obtidos aps a transfuso de sangue oriundo de doador com altos
nveis do hCG, pela presena de anticorpos heterfilos, ou de materiais semelhantes ao hCG
eventualmente presentes em associao com cistos de ovrio ou doena inflamatria plvica.
SORO - RESULTADO FALSO POSITIVO
- Provvel perda espontnea da gravidez.
Foi realizado o teste na urina?
- Resultado positivo - Provvel perda espontnea da gravidez.
- Resultado Negativo - Possvel presena de anticorpo heteroflico.
Verificar a possibilidade de troca de amostra.
SORO - RESULTADO FALSO NEGATIVO
Possibilidade de a paciente ter nvel baixo de hCG.
URINA - RESULTADO FALSO POSITIVO
- Provvel aborto espontneo.
Foi realizado o teste no soro?
- O resultado foi positivo? Provvel aborto espontneo.
URINA - RESULTADO FALSO NEGATIVO
Possibilidade de a paciente ter nvel baixo de hCG. . O teste pode ser realizado como auxiliar no
diagnstico da gravidez no dia provvel da menstruao. Entretanto, em alguns casos, a concentrao de
hCG to pequena que o teste ser negativo. Neste caso, realizar novo teste em amostra colhida aps 3 5 dias.
NVEIS DE HCG
Em princpio a presena de HCG pode ser determinada a partir da data provvel da menstruao.
Uma tentativa de balizar os valores mais significativos oferece os nmeros abaixo em mUI/ml:
4a semana 1.000
5a semana 3.000
6a semana 6.000
7a semana 20.000
Da 8a 10a semana transcorre o fenmeno apical de HCG, quando a taxa eleva-se a 50.000 ou mesmo
100.000 mUI/ml. Depois de 90 dias de amenorria estabelece-se uma amplitude entre 5.000 e 15.000
mUI/ml. Qualquer valor abaixo deste limite indicativo de anormalidade. Um segundo pico de HCG, menor,
descrito na 36a semana, de significado desconhecido.
15/01/2009
BILI-D Liquiform - Ref. 93

Toda vez que as clulas vermelhas do sangue ficam velhas, nosso organismo trata de destru-las. O
produto final desta tarefa a bilirrubina indireta (no conjugada) a qual encaminhada ao fgado para que
este possa transform-la em bilirrubina direta (conjugada) para que possamos elimin-la. Em algumas
situaes, o fgado no consegue dar conta de metabolizar toda a bilirrubina e ento, esta se acumula no
nosso organismo produzindo a ictercia.
PRINCPIO DA REAO
A amostra solubilizada em meio cido e a bilirrubina direta medida por formao de azobilirrubina com
dicloroanilina diazotada. A cor formada proporcional concentrao de bilirrubina direta na amostra.
APRESENTAO
Ref.
93.1 - Reagente 1
93.2 - Reagente 2
93-1/104
1 x 80 mL
2 x 12 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Labtest DCA (DCA-dicloroanilina diazotada)
Reao:
Ponto Final
Sistema:
Birreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
546 nm (530 a 550)
Amostra:
Soro ou Plasma (heparina, EDTA)
Linearidade:
At 12,0 mg/dL
Relao Amostra / Reagente: Ver Instrues de Uso / Protocolo de Aplicao
Erro Total: 22,30%
Bias: 7,10%
CVa: 9,20%
Bibliografia:
CALIBRAO
Realizar a calibrao utilizando calibrador da srie Calibra da Labtest.
LQUIDOS CORPORAIS (Carl Kjeldsberg, Joseph Knight. Body Fluids 187;1993)
Lquido Pleural (relao lquido pleural / soro):
Transudato < 0,6
Exsudato > 0,6
ORIENTAES
Proteger amostras e controles da ao da luz.
A estabilidade da Bilirrubina em controles e calibradores reduzida. Verificar orientaes nas instrues
de uso dos produtos.
Amostras hemolisadas fornecem valores falsamente diminudos na determinao da Bilirrubina Direta.
Drogas que podem aumentar medies de bilirrubina incluem alopurinol, esterides anablicos, alguns
antibiticos, antimalariais, azatioprina, clorpropamida, colinrgicos, codena, diurticos, epinefrina,
meperidina, metotrexato, metildopa, inibidores da MAO, morfina, cido nicotnico, contraceptivos orais,
fenotiazinas, quinidina, rifampina, salicilatos, esterides, sulfonamidas e teofilina.
20/09/2010
BILI-D Liquiform - Ref. 93

As drogas que podem diminuir medies de bilirrubina incluem os barbitricos, cafena, penicilina e
doses altas de salicilatos.
Para uso em equipamentos semi-automticos e manual, utilizar o produto Bilirrubina Ref. 31 e

Padro Bilirrubina Ref. 32
Em equipamentos semi-automticos no tem como criar um protocolo pois o equipamento no tem
memria para os clculos necessrios (correo do volume entre a absorbncia A1 e A2).
No caso da reao ser realizada em equipamentos semi-automticos com cubeta de fluxo, pode ser
utilizado o procedimento a seguir:
Reagente 1
gua
Amostra
Calibrador
Branco a
1,0 mL
0,1 mL
-
Branco
1,0 mL
0,1 mL
-
Teste a
1,0 mL
0,1 mL
-
Teste
1,0 mL
0,1 mL
-
Calibrador a
1,0 mL
0,1 mL
Calibrador
1,0 mL
0,1 mL
Homogeneizar e incubar em banho-maria a 37C durante 5 minutos.

Determinar as absorbncias dos tubos Branco a, Teste a e Calibrador a em 546 nm (530 a 550), acertando
o zero com gua. Esta ser a absorbncia A1.
Reagente 2
Branco
0,25 mL
Teste
0,25 mL
Calibrador
0,25 mL
Homogeneizar e incubar em banho-maria a 37 C durante 5 minutos. Determinar as absorbncias do Teste

e Calibrador em 546 nm (530 a 550), acertando o zero com o Branco. Esta ser a absorbncia A2
Aplicar os clculos conforme orientaes das Instrues de Uso.

Neste procedimento, o nmero de determinaes ser reduzido para 40 testes e haver sobra do
Reagente 2.
Absorbncia
Leitura A1
Adio R1
e Amostra
20/09/2010
Adio R2
Leitura A2
Tempo (min)
BILIRRUBINA - Ref. 31
este possa transform-la em bilirrubina direta (conjugada 2 molculas de cido glicurnico) para que
possamos elimin-la. Em algumas situaes, o fgado no consegue dar conta de metabolizar toda a
bilirrubina e ento, esta se acumula no nosso organismo produzindo a ictercia.
PRINCPIO DA REAO
A Bilirrubina dosada por diazotizao e formao de azobilirrubina vermelha com absoro mxima em
525 nm. A Bilirrubina Direta (diglicurnide) dosada em meio aquoso, enquanto a Total (Direta e Indireta)
dosada por ao de potente solubilizador de ao catalisadora.
APRESENTAO
Ref.
31.1 - Acelerador
31.2 - cido Sulfanlico
31.3 - Nitrito de Sdio
31
1 x 250 mL
1 x 120 mL
1 x 5 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Sims Horn; (Malloy Evelyn)
Reao:
Ponto Final
Sistema:
Birreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
525 nm (500 a 540)
Amostra:
Linearidade:
25,0 mg/dL
Relao Amostra / Reagente: Ver Instrues de Uso
Erro Total:
BD: 15,5%
BT: 22,3%
Bias:
BD: 7,10% BT: 5,0%
CV:
BD: 9,2%
BT: 6,40%
Bibliografia:
CALIBRAO
Realizar a calibrao utilizando o Padro de Bilirrubina Ref. 32 ou calibrador da srie Calibra da Labtest.
Transudato < 0,6
Exsudato > 0,6
ORIENTAES
Metodologia para teste de proficincia da SBAC: Malloy Evelyn
Proteger as amostras e controles da ao da luz.
de uso dos produtos
20/09/2010
BILIRRUBINA - Ref. 31
O padro de Bilirrubina no acompanha o produto. Utilizar o Padro de Bilirrubina Labtest Ref. 32.
Drogas que podem aumentar medies de bilirrubina:alopurinol, esterides anablicos, alguns
Drogas que podem diminuir medies de bilirrubina: barbitricos, cafena, penicilina e doses altas de
salicilatos.
Absorbncia
Leitura A1
Adio R1
e Amostra
20/09/2010
Adio R2
Leitura A2
Tempo (min)
BILI-T Liquiform - Ref. 94

este possa transform-la em bilirrubina direta (conjugada) para que possamos elimin-la. Em algumas
situaes, o fgado no consegue dar conta de metabolizar toda a bilirrubina e ento, esta se acumula no
nosso organismo produzindo a ictercia.
PRINCPIO DA REAO
A bilirrubina indireta da amostra desligada da albumina e solubilizada por ao de um acelerador e as
bilirrubinas direta e indireta so medidas por formao de azobilirrubina com dicloroanilina diazotada. A cor
formada proporcional concentrao de bilirrubina total na amostra.
APRESENTAO
Ref.
94.1 - Reagente 1
94.2 - Reagente 2
94-1/104
1 x 80 mL
2 x 12 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Labtest DCA; (DCA-dicloroanilina diazotada)
Reao:
Ponto Final
Sistema:
Birreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
546 nm (530 a 550)
Amostra:
Linearidade:
At 30,0 mg/dL
Relao Amostra / Reagente: Ver Instrues de Uso e Protocolo de Aplicao
Erro Total: 15,5%
Bias: 5,0%
CVa: 6,4%
Bibliografia:
CALIBRAO
Transudato < 0,6
Exsudato > 0,6
ORIENTAES
Proteger amostras e controles da ao da luz.
de uso dos produtos.
Amostras hemolisadas fornecem valores falsamente diminudos na determinao da Bilirrubina Direta.
Drogas que podem aumentar medies de bilirrubina incluem alopurinol, esterides anablicos, alguns
20/09/2010
BILI-T Liquiform - Ref. 94

As drogas que podem diminuir medies de bilirrubina incluem os barbitricos, cafena, penicilina e
doses altas de salicilatos.
Para uso em equipamentos semi-automticos e manual, utilizar o produto Bilirrubina Ref. 31 e

Padro Bilirrubina Ref. 32
Em equipamentos semi-automticos no tem como criar um protocolo pois o equipamento no tem
memria para os clculos necessrios (correo do volume entre a absorbncia A1 e A2).
No caso da reao ser realizada em equipamentos semi-automticos com cubeta de fluxo, pode ser
utilizado o procedimento a seguir:
Reagente 1
gua
Amostra
Calibrador
Branco a
0,08 mL
0,05 mL
-
Branco
0,08 mL
0,05 mL
-
Teste a
0,08 mL
0,05 mL
-
Teste
0,08 mL
0,05 mL
-
Calibrador a
0,08 mL
0,05 mL
Calibrador
0,08 mL
0,05 mL
Homogeneizar e incubar em banho-maria a 37C durante 5 minutos. Determinar as absorbncias dos

tubos Branco a, Teste a e Calibrador a,em 546 nm (530 a 550) acertando o zero com gua. Esta ser a
absorbncia A1.
Reagente 2
Branco
0,2 mL
Teste
0,2 mL
Calibrador
0,2 mL
Homogeneizar e incubar em banho-maria a 37 C durante 5 minutos. Determinar as absorbncias do Teste

e Calibrador em 546 nm (530 a 550), acertando o zero com o branco. Esta ser a absorbncia A2
Aplicar os clculos da Instruo de Uso.
Aplicar os clculos conforme orientaes das Instrues de Uso.

Neste procedimento, o nmero de determinaes ser reduzido para 40 e haver sobra do Reagente 2.
Absorbncia
Leitura A1
Adio R1
e Amostra
20/09/2010
Adio R2
Leitura A2
Tempo (min)
Ca ARSENAZO Liquiform - Ref. 95

O clcio o mineral mais abundante do organismo: 1100 a 1200 g de clcio, dos quais 90% est no
esqueleto. O resto repartido entre os tecidos (msculos sobretudo) e o plasma sangneo. No plasma o
clcio se apresenta ligado s protenas, como tambm na forma ionizada indispensvel s numerosas
funes das clulas. um elemento primordial da membrana celular na medida em que ele controla sua
permeabilidade e suas propriedades eletrnicas. Est ligado s contraes das fibras musculares lisas,
transmisso do fluxo nervoso, liberao de numerosos hormnios e mediadores do sistema nervoso,
assim como atividade plaquetria (coagulao do sangue).
PRINCPIO DA REAO
O clcio reage com o arsenazo III em meio discretamente cido formando o complexo clcio-arsenazo III de
cor azul, cuja intensidade diretamente proporcional concentrao de clcio na amostra. A absorbncia
do produto da reao deve ser medida nos comprimentos de onda 600 ou 660 nm.
APRESENTAO
Ref.
95.1 - Reagente 1
95.2 - Padro - 10 mg/dL
95-2/50
2 x 50 mL
1 x 5 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Arsenazo III
Reao:
Ponto Final
Sistema:
Monorreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
600 nm (600 a 610) ou 660 nm (650 a 660)
Amostra:
Soro ou plasma (heparina e urina
Linearidade:
17 mg/dL
CLIA:
Erro Total: 10%
Bibliografia:
CALIBRAO
onda de 600 ou 660 nm e cubeta de 1 cm de espessura, servindo somente como orientao e podem
variar em funo das caractersticas e condies do analisador, diferenas no material volumtrico utilizado,
Absorbncia do Reagente:
600 nm: <2,500

660 nm: 0,420 a 0,520
Fator de Calibrao mdio:
600 nm: 21
660 nm: 20
ORIENTAES
Alimentos ricos em clcio (>100 mg/100g): Figo seco, brcolis, salsa, pimento verde, soja, amndoa,
avel, castanha do par, melado, gema de ovo, leite, queijos, caviar, cacau.
A relao entre o resultado de clcio inico em uma amostra, usando o clculo ou realizando a dosagem
por eletrodo on seletivo de aproximadamente 0,9 (Pottgen P, Davis ER. Clin Chem 1976;22:1752).
Plasmas coletados com citrato, oxalato, fluoreto ou EDTA fornecem resultados falsamente diminudos
por formarem complexos estveis com o Clcio.
20/09/2010
Ca ARSENAZO Liquiform - Ref. 95

Quando a absorbncia do produto da reao medida em 600 nm, valores de Hemoglobina maiores que
60 mg/dL produzem interferncias significativas.
Quando a absorbncia do produto da reao medido em 660 nm, valores de Hemoglobina at 180
mg/dL no produzem interferncias significativas.
CLCIO URINRIO
Para acidificar a urina, o uso de 20 mL de HCl determinado para um volume mdio de 1500 mL de
urina.
Opcionalmente o laboratrio pode acidificar a urina aps recebimento. Homogeneizar a urina, separar
uma alquota e acidificar respeitando a proporo acima. Exemplo: Para 15 mL de urina adicionar 0,2 mL de
HCl 6 mol/L.
Preparo do HCl 6 mol/L (50% v/v): Misturar 10 mL de cido Clordrico (PA) com 10 mL de gua destilada
ou deionizada.
A acidificao da urina minimiza a precipitao do clcio na amostra.
O clcio urinrio dosado em amostra de urina isolada pode ser relacionado ao volume do filtrado
glomerular (FG). Esta relao uma alternativa para obter valores de calciria quando a amostra de 24
horas no estiver disponvel.
Drogas que elevam o clcio urinrio: Colestiramina, mandrolona, paratohormnio injetvel, vitamina D.
Fatores que diminuem a calciria: Urina alcalina, ftalato de sdio, diurticos tiazdicos.
No h relao direta entre clcio urinrio e clcio srico, podendo-se encontrar hipercalciria sem
hipercalcemia.
TRANSFORMAO DE UNIDADES
mmol/L = mg/dL x 0,25
mmol/L x 2 = mEq/L
mEq/L = mg/dL x 0,499
mEq/L x 0,5 = mmol/L
FRMULA PARA CORREO DA HIPO OU HIPERALBUMINEMIA

Clcio corrigido ( mg / dL ) = {( 4 Albu min a ) x 0 ,8 } + Clcio
Clcio corrigido (mg / dL) =
ou
Clcio
{0,55 + (Protenas / 16)}
Albumina = Albumina srica g/dL

Protenas = Protena srica g/dL
Clcio = Clcio srico mg/dL
ESTABILIDADE DO REAGENTE
Cuidados com contaminao:
O material pode ser tratado com soluo aquosa de cido clordrico 50% (v/v) ou detergente no
inico, lavado com gua corrente e enxaguado com gua destilada ou deionizada.
A vidraria armazenada pode acumular resduos que levam obteno de resultados falsamente
elevados.
Em equipamentos automticos sugere-se fazer o clcio separado da rotina para evitar contaminao
cruzada. Sempre programar uma lavagem no sistema do equipamento antes de iniciar o teste.
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
CLCIO Liquiform - Ref. 90

PRINCPIO DA REAO
O clcio reage com a prpura de ftalena em meio alcalino formando um complexo de cor violeta que
medido em 570 nm.
APRESENTAO
Ref.
90.1 - Reagente 1
90.2 - Reagente 2
90.3 - Padro - 10 mg/dL
95-2/50
2 x 45 mL
2 x 15 mL
1 x 3 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
CPC; (o-cresolftalena)
Reao:
Ponto Final
Sistema:
Mono ou Birreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
570 nm (550 a 590)
Amostra:
Soro ou plasma (heparina e urina)
Linearidade:
16 mg/dL
CLIA:
Erro Total: 10%
Bibliografia:
CALIBRAO
Fator de Calibrao mdio: 9,0
ORIENTAES
A relao entre o resultado de clcio inico em uma amostra, usando o clculo ou realizando a dosagem
por eletrodo on seletivo de aproximadamente 0,9 (Pottgen P, Davis ER. Clin Chem 1976;22:1752).
mmol/L x 2 = mEq/L
20/09/2010
CLCIO Liquiform - Ref. 90

CLCIO URINRIO
urina.
HCl 6 mol/L.
Preparo do HCl 6 mol/L (50% v/v): Misturar 10 mL de cido Clordrico (PA) mais 10 mL de gua
destilada ou deionizada.
hipercalcemia.
Clcio corrigido ( mg / dL ) =
ou
Clcio
{0 ,55 + (Pr otenas / 16 )}

O CO2 atmosfrico altera significativamente a estabilidade do Reagente 1. A utilizao do reagente
mantido em recipiente aberto por perodos superiores a oito horas obriga a realizao de nova calibrao. A
calibrao pode ser realizada com menor frequencia, semanalmente, quando se utiliza novo reagente a
cada oito horas sendo descartado o resduo anterior.
Manter na bandeja do analisador somente o volume suficiente para a realizao de uma corrida analtica.
elevados.
Em equipamentos automticos sugere-se fazer o clcio separado da rotina para evitar contaminao
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
CLCIO TITULOMTRICO - Ref. 33

PRINCPIO DA REAO
O clcio determinado por titulao com EDTA usando como indicador o cido calcon carboxilco.
APRESENTAO
Ref.
33.1 - Tampo
33.2 - Indicador
33.3 - EDTA
33.4 - Padro - 10 mg/dL
33
100 mL
7,5 mL
50 mL
1 x 4 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Reao:
Aplicao:
Amostra:
Volume de Reao:
Ferro e Ham modificado

Titulao
Manual
Soro ou plasma (heparina e urina)
Ver Instrues de Uso

CLIA:
Erro Total: 10%
Bibliografia:
DESEMPENHO DO SISTEMA
Para a familiarizao com o ponto de viragem, recomenda-se titular 0,5 mL do padro, utilizando o
procedimento proposto para o soro.
O ponto de viragem do padro alcanado com 1,0 mL de EDTA.
ORIENTAES PARA O TESTE
Clcio corrigido ( mg / dL ) =
ou
Clcio
{0 ,55 + (Pr otenas / 16 )}

20/09/2010
CLCIO TITULOMTRICO - Ref. 33

mmol/L x 2 = mEq/L
CLCIO URINRIO
urina.
HCl 6 mol/L.
Preparo do HCl 6 mol/L (50% v/v): Misturar 10 mL de cido Clordrico (PA) mais 10 mL de gua
destilada ou deionizada.
hipercalcemia.
elevados.
20/09/2010
CAPACIDADE LIGAO FERRO - Ref. 41

A transferrina ou siderofilina srica a protena transportadora do ferro no soro. O seu grau de saturao
marcial varia conforme a patologia envolvendo o metabolismo do ferro.
PRINCPIO DA REAO
Um padro de ferro com concentrao conhecida (500 g/dL) incubado com a amostra de soro em um
tampo de pH 8,3. Ocorre, ento, a saturao dos stios disponveis para ferro na protena transportadora
(transferrina).
O excesso de ferro no ligado ento medido atravs da formao de um complexo magenta brilhante
aps adio de Ferrozine , permitindo a determinao da capacidade de ligao de ferro.
APRESENTAO
Ref.
41.1 - Tampo
41.2 - Padro - 500 g/dL
41.3 - Ferrozine
41-40
1 x 60 mL
1 x 20 mL
1 x 2,5 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Goodwin modificado; (Ferrozine)
Reao:
Ponto Final com branco de amostra
Sistema:
Birreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
560 nm (540 a 580)
Amostra:
Soro (sem hemlise)
Linearidade:
450 g/dL
Erro Total: 15,3%
Bias: 4,40%
CVa: 6,60%
Bibliografia:
CALIBRAO
Realizar a calibrao utilizando o Padro - Ref. 41.2.
ORIENTAES
A amostra deve ser colhida pela manh visando evitar as variaes diurnas do ferro que podem produzir
redues de at 30% nos resultados.
Idade, sexo, perodo de gestao, uso de contraceptivos orais e estrognio alteram as concentraes do
ferro srico e podem modificar os valores da capacidade de ligao de ferro.
Cada 1,0 mg/dL de hemoglobina srica aumenta o Ferro srico em 3,4688 g/dL.
Valor aproximado da Transferrina:
Transferrina (mg/dL) = Capacidade Total Ligao Ferro x 0,70
Intervalo de Referncia: 200 a 360 mg/dL
Para equipamentos automticos sugerimos o uso do produto Transferrina Turbiquest Ref. 329.
A limpeza e secagem do material utilizado so fatores fundamentais para a estabilidade dos reagentes e
obteno de resultados corretos.
20/09/2010
CAPACIDADE LIGAO FERRO - Ref. 41

CUIDADOS COM CONTAMINAO
O material pode ser tratado com soluo aquosa de cido ntrico 10% durante uma noite ou detergente
no inico, lavado com gua corrente e enxaguado com gua destilada ou deionizada.
elevados. Sugerimos que todo o material para este uso seja guardado em sacos plsticos at o momento
do uso.
Absorbncia
Leitura A1
Adio R1
e Amostra
20/09/2010
Adio R2
Leitura A2
Tempo (min)
CKMB Liquiform Ref. 118

A creatina quinase formada por molculas dimricas compostas de subunidades M e B e existem na
forma de isoenzimas MM, MB e BB. As subunidades M e B so imunologicamente distintas, sendo a CKMM e CK-MB distribudas principalmente nos msculos esqueltico e cardaco, respectivamente, enquanto
que a CK-BB est presente principalmente no crebro e tecidos compostos de msculo liso.
PRINCPIO DA REAO
A amostra incubada com o Reagente de Trabalho da CK-MB que contm um anticorpo especfico para a
subunidade CK-M e que inibe completamente a atividade enzimtica do monmero CK-M. A atividade do
monmero CK-B, que no inibida pelo anticorpo, medida pela seguinte seqncia de reaes:
CK-B
Creatina Fosfato + ADP
Creatina + ATP
HK
ATP + Glicose
ADP + Glicose-6-Fosfato
G-6-PDH
Glicose-6-Fosfato + NAD
6-PG + NADH
A CK-B catalisa a desfosforilao da creatina fosfato para produzir adenosina trifosfato (ATP) que reage
com a glicose na presena da hexoquinase (HK) formando glicose-6-fosfato. A glicose-6-fosfato na
presena da glicose-6-fosfato desidrogenase (G-6-PDH) oxidada a 6-fosfogluconato (6-PG) e reduz o
NAD a NADH. A velocidade de incremento na absorbncia em 340 nm proporcional atividade da CK-B
na amostra.
APRESENTAO
Ref.
118.1 - Reagente 1
118.2 - Reagente 2
118.3 - Calibrador
118-2/30
2 x 24 mL
2 x 6 mL
1 x 1 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Imunoinibio - IFCC - UV
Reao:
Sistema:
Mono ou Birreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
340 nm
Amostra:
Soro ou Plasma (heparina ou EDTA)
Erro Total: 24,1%
Bias: 7,8%
CVa: 9,9%
Bibliografia:
CALIBRAO
Realizar a calibrao utilizando o Calibrador - Ref. 118.3 (ver concentrao no rtulo do frasco).
20/09/2010
CKMB Liquiform Ref. 118

Fator =
x Fator utilizado
Clculo do Fator de Calibrao considerando delta de reao de 1 minuto (Cintica Contnua) ou 5

minutos (Cintica Tempo Fixo ou Cintica de 2 pontos):
Fator Calibrao 1333 (delta de reao/5 min)
FC =
VT x 1000 x 2
x VA x d x 5
Fator Calibrao 6667 (delta de reao/min)
FC =
VT x 1000 x 2
x VA x d x 1
FC =
1,05 x 1000 x 2
= 6667
6,3 x 0,05 x 1 x 1
VT = Volume total do ensaio

1000 = converso de U/mL para U/L
2 = correo da atividade
= absortividade milimolar NADH (6,3)
VA = Volume da amostra
D = espessura da soluo (1 cm)
5 = correo do tempo
FC =
1,05 x 1000 x 2
= 1333
6,3 x 0,05 x 1 x 5
A molcula da CK-MB um dmero consistindo de uma subunidade B e uma subunidade M. Quando o

anticorpo reage com a subunidade M ocorre uma inibio da metade da atividade cataltica da molcula da
CK-MB. Por este motivo se deve multiplicar a atividade cataltica da CK-B por 2 para se obter a atividade
cataltica da CK-MB. Como foi utilizada a medio em 5 minutos, o fator deve ser dividido por 5 para se
obter a atividade por minuto.
PREPARO DO REAGENTE DE TRABALHO
do Reagente 1 com 1 volume do Reagente 2. Estvel 14 dias entre 2 a 8 C
ORIENTAES
Quando uma quantidade significativa da atividade da CK-BB estiver presente, ocorrer uma falsa
elevao da CK-MB.
O produto CK-MB Liquiform utiliza o princpio da imunoinibio da frao M por ao de anticorpo anti
CK-M especfico e deve ser aplicado exclusivamente para medir a atividade da CK-MB em amostras de
soro humano ou amostras controle contendo CK-MB e CK-MM humanas.
Quando se mede a CK-MB utilizando reagentes preparados com diferentes lotes de anti CK-M humana,
pode-se obter resultados significativamente diferentes para uma mesma amostra controle contendo CK-M
no humana.
Absorbncia
2
1
Tempo (min)
20/09/2010
CKNAC Liquiform Ref. 117

A creatina quinase formada por molculas dimricas compostas de subunidades M e B e existem na
forma de isoenzimas MM, MB e BB. As subunidades M e B so imunologicamente distintas, sendo a CKMM e CK-MB distribudas principalmente nos msculos esqueltico e cardaco, respectivamente, enquanto
que a CK-BB est presente principalmente no crebro e tecidos compostos de msculo liso.
PRINCPIO DA REAO
A atividade da creatina quinase total determinada de acordo com a seguinte seqncia de reaes:
CK
Creatina Fosfato + ADP Creatina + ATP
HK
ATP + Glicose ADP + Glicose-6-Fosfato
G-6-PDH
Glicose-6-Fosfato + NAD 6-PG + NADH
A CK catalisa a desfosforilao da creatina fosfato para produzir adenosina trifosfato (ATP), a qual reage
com a glicose na presena da hexoquinase (HK) formando glicose-6-fosfato. A glicose-6-fosfato, na
presena de glicose-6-fosfato desidrogenase (G-6-PDH), oxidada a 6-fosfogluconato (6-PG) e reduz o
NAD a NADH. A velocidade de incremento na absorbncia em 340 nm proporcional atividade da CK na
amostra.
APRESENTAO
Ref.
117.1 - Reagente 1
117.2 - Reagente 2
117.3 - Calibrador
117-2/30
2 x 24 mL
2 x 6 mL
1 x 1 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
IFCC - UV
Reao:
Sistema:
Mono ou Birreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
340 nm
Amostra:
Soro ou Plasma (heparina ou EDTA)
Linearidade:
2000 U/L
Erro Total: 15,2%
Bias: 5,8%
CVa: 5,7%
Bibliografia:
CALIBRAO
Realizar a calibrao utilizando o Calibrador - Ref. 117.3 (ver concentrao no rtulo do frasco).
20/09/2010
CKNAC Liquiform Ref. 117

Fator =
x Fator utilizado

Transferir o contedo de um frasco do Reagente 2 para um frasco do Reagente 1, ou misturar 4 volumes do
Reagente 1 com 1 volume do Reagente 2. Estvel 14 dias entre 2 a 8 C.
ORIENTAES
Absorbncia
2
1
Tempo (min)
20/09/2010
CLORETOS Ref.115
O cloreto auxilia na manuteno da presso osmtica do sangue e, portanto, auxilia a regular a volemia e a
presso arterial. Ele absorvido dos intestinos e excretado primariamente pelos rins. Os nveis de cloreto
tambm afetam o equilbrio cido-bsico.
PRINCPIO DA REAO
Os ons cloreto presente na amostra reagem com tiocianato de mercrio formando cloreto mercrico e ons
tiocianato. Os ons tiocianato quando combinados com os ons frrico formam tiocianato frrico, de
colorao amarela com intensidade proporcional concentrao de cloretos.
Cl- + Hg(SCN)2
HgCl2 + 2 (SCN)-
(SCN)- + Fe3+
Fe (SCN)3
APRESENTAO
Ref.
115.2 - Padro - 100 mEq/L
115-1/50
1 x 50 mL
1 x 3 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Tiocianato de mercrio
Reao:
Ponto Final
Sistema:
Monorreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
450 nm (450 a 505)
Amostra:
Soro, plasma (heparina), urina e lquor
Linearidade:
At 130 mEq/L
EQA Especificao: Mnima
Erro Total3: 5,0%
Bias: 0,70%
CVa: 0,90%
Bibliografia:
2- CLIA
CALIBRAO
Realizar a calibrao utilizando o Padro - Ref.115.2 ou calibrador da srie Calibra da Labtest.
Absorbncia do Reagente: entre 0,050 e 0,070
ORIENTAES
Para realizar o teste em lquor e urina, utilizar amostras centrifugadas.
Em equipamentos automticos, devido contaminao cruzada, o reagente de Cloretos
potencialmente prejudicial para outros testes. Fazer o teste de Cloretos separado da rotina.
Plasma colhido em EDTA e citrato fornece resultados falsamente diminudos.
Para evitar a passagem do cloreto para as hemcias, o plasma ou soro devem ser separados at 1 hora
aps a colheita.
Para teste na urina, diluir a amostra 1:2 com gua deionizada. Multiplicar o resultado por 2.
20/09/2010
CLORETOS Ref.115
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
CLORETOS Ref. 49
O cloreto auxilia na manuteno da presso osmtica do sangue e, portanto, auxilia a regular a volemia e a
presso arterial. Ele absorvido dos intestinos e excretado primariamente pelos rins. Os nveis de cloreto
tambm afetam o equilbrio cido-bsico.
PRINCPIO DA REAO
Os ons cloreto presente na amostra reagem com tiocianato de mercrio formando cloreto mercrico e ons
tiocianato. Os ons tiocianato quando combinados com os ons frrico formam tiocianato frrico, de
colorao amarela com intensidade proporcional concentrao de cloretos.
APRESENTAO
Ref.
49.2 - Ativador
49.3 - Padro - 100 mEq/L
49
1 x 490 mL
1 x 14 mL
1 x 3 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Labtest (tiocianato de mercrio)
Reao:
Ponto Final
Sistema:
Monorreagente
Aplicao:
Manual, semi-automtico e automtico*
Comprimento Onda:
470 nm (450 a 500)
Amostra:
Soro, plasma (EDTA, oxalato, citrato, heparina), urina e lquor
Linearidade:
70 a 130 mEq/L
Erro Total: 5,0%
Bias: 0,70%
CVa: 0,90%
Bibliografia:
CALIBRAO
ORIENTAES
A aplicao do produto Cloretos em equipamentos automticos como Express, Selectra, Dimension...
fica dificultada devido relao de volume de amostra / volume de reagente (1:351).
Para realizar o teste em lquor e urina, utilizar amostras centrifugadas.
Opcionalmente pode-se preparar o reagente de trabalho na proporo de 7,0 mL do Reagente de Cor
(Ref. 49.1) mais 0,2 mL do Ativador (Ref. 49.2). Estvel 7 dias entre 10 e 30 C protegido da luz. Pipetar 3,5
mL em cada tubo e 10 L de amostra.
Em equipamentos automticos, devido contaminao cruzada, o reagente de Cloretos
potencialmente prejudicial para outros testes. Fazer o teste de Cloretos separado da rotina.
15/01/2009
CLORETOS Ref. 49
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
15/01/2009
Colesterol HDL Ref. 13

O colesterol uma substncia gordurosa que est presente em todas as clulas do nosso corpo. Ele trafega
em nosso sangue atravs de partculas chamadas de lipoprotenas: lipoprotenas de baixa densidade (LDL),
lipoprotenas de alta densidade (HDL), e lipoprotenas de muita baixa densidade (VLDL).
A frao do colesterol LDL transporta o colesterol para o organismo, depositando-o nas artrias. A poro
do colesterol HDL remove o colesterol da corrente sangnea, evitando o seu depsito nas artrias.
PRINCPIO DA REAO
As lipoprotenas de muita baixa densidade (VLDL) e as lipoprotenas de baixa densidade (LDL) so
quantitativamente precipitadas e, aps centrifugao, o colesterol ligado s lipoprotenas de alta densidade
(Colesterol HDL) determinado no sobrenadante.
APRESENTAO
Ref.
13.1 Precipitante
13.2 Padro 20 mg/dL
13-25
1 x 25 mL
1 x 5 mL
13-50
1 x 50 mL
1 x 5 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Precipitao com cido fosfotungstico e cloreto de magnsio
Reao:
Ponto Final
Sistema:
Monorreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
500 nm (490 a 540)
Amostra:
Soro
Linearidade:
200 mg/dL
Precipitao - Diluio da amostra: 1:2
Colorimetria Relao Amostra / Reagente: 1:11
NCEP (National Cholesterol Education Program):
Erro Total: 12,8%
Bias: 5,0%
CVa: 4,0%
CALIBRAO
Realizar a calibrao utilizando o Padro Ref. 13.2.
ORIENTAES
Para realizar a colorimetria necessrio o uso do produto Colesterol Liquiform Ref. 76.
A Labtest no realizou testes para poder indicar o uso de reagente de Colesterol de outro fabricante para
ser usado com o Colesterol HDL Ref. 13.
A concentrao do padro de Colesterol HDL de 20 mg/dL, mas para corrigir a diluio a que
submetida a amostra na precipitao, utilizada a concentrao de 40 mg/dL para clculo.
O padro no participa da etapa de precipitao.
Em equipamentos automticos, o sobrenadante colocado como amostra.
Todo material de controle deve ser tratado como uma amostra.
muito importante a agitao vigorosa por pelo menos 30 segundos para precipitar toda LDL e VLDL
presentes na amostra.
O sobrenadante deve estar lmpido.
O garroteamento por mais de 1 minuto produz hemoconcentrao, que pode aumentar os valores do
Colesterol em 5% aps 2 minutos e de 10 a 15% aps 5 minutos. Obter a amostra de sangue aps liberar o
torniquete.
20/09/2010
Colesterol HDL Ref. 13

Nveis elevados de ascorbato (vitamina C) produzem interferncias negativas por competio com o
cromognio na reao da peroxidase. Se houver suspeita da presena de cido ascrbico deixar o soro em
repouso durante 90 minutos antes de iniciar a dosagem para minimizar a ao do interferente.
Para clculo do Colesterol LDL e VLDL, pode ser utilizada a equao de Friedewald que exata para
amostras cujas concentraes de Triglicrides no ultrapassem 400 mg/dL e no pertenam a pacientes
portadores de lipoproteinemia do Tipo III.
Sugerimos o uso do produto LDL Liquiform Ref. 111.
EQUAO DE FRIEDEWALD
Colesterol VLDL =
Triglicrides ( mg / dL )
5
Colesterol LDL = Colesterol Total (Colesterol HDL + Colesterol VLDL)

CLCULO DO NDICE DE CASTELLI I (Risco Aterogncio)
Indice de Castelli I =
Desejvel:
Colesterol total ( mg / dL )
Colesterol HDL ( mg / dL )
Homens: at 4,9
Mulheres: at 4,3
CLCULO DO NDICE DE CASTELLI II (Risco Aterognico)

Indice de Castelli II =
Desejvel:
Colesterol LDL (mg/dL)

Colesterol HDL (mg/dL)
Homens: at 3,3
Mulheres: at 2,9
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
COLESTEROL Liquiform Ref. 76

Na sua forma pura, o colesterol um slido cristalino, branco, inspido e inodoro. um membro da famlia
dos esterides. Apesar da m fama, o colesterol um composto essencial para a vida: est presente nos
tecidos de todos os animais! Alm de fazer parte da estrutura das membranas celulares, tambm um
reagente de partida para a biossntese de vrios hormnios, do cido biliar (cidos colanicos) e da
vitamina D.
PRINCPIO DA REAO
Os steres de colesterol so hidrolisados pela colesterol esterase a colesterol livre e cidos graxos.
O colesterol livre oxidado pela colesterol oxidase a colest-4-en-ona e perxido de hidrognio. Na
presena de peroxidase e perxido de hidrognio, o fenol e a 4 aminoantipirina so oxidados formando a
antipirilquinonimina que tem absortividade mxima em 500 nm.
Colesterol Esterase
steres do colesterol
Colesterol + cidos graxos
Colesterol Oxidase
Colest-4-en-ona + H2O2
Colesterol + O2
Peroxidase
2 H2O2 + Fenol + 4-Aminoantipirina
APRESENTAO
Ref.
76.1 - Reagente 1
76.2 - Padro 200 mg/dL
76-2/100
2 x 100 mL
1 x 5 mL
76-2/250
2 x 250 mL
1 x 5 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Enzimtico - Trinder; Esterase-Oxidase
Reao:
Sistema:
Monorreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
500 nm (490 a 540)
Amostra:
Soro
Linearidade:
500 mg/dL
Erro Total: 9,0%
Bias: 3,0%
CVa: 3,0%
CALIBRAO
Colesterol no Lquido Pleural - utilizado para fazer a diferenciao entre transudato e exudato.
Valores acima 60 mg/dL - Exudatos
Valores abaixo 60 mg/dL - Transudatos
A concentrao do Colesterol no lquido pleural independente do valor no soro.
20/09/2010
COLESTEROL Liquiform Ref. 76

ORIENTAES
O garroteamento prolongado produz hemoconcentrao, que pode aumentar os valores do Colesterol
em 5% aps 2 minutos e de 10 a 15% aps 5 minutos. Obter a amostra de sangue aps liberar o
torniquete.
Durante a gravidez os nveis de colesterol esto aumentados. Aguardar seis semanas aps o parto para
realizar teste de colesterol.
Esterides anablicos, beta bloqueadores, epinefrina, contraceptivos orais e vitamina D aumentam os
nveis de colesterol.
Anticoagulantes como citrato, fluoreto, oxalato ou EDTA produzem resultados falsamente diminudos.
A variao biolgica do colesterol, decorrente da variao tambm biolgica das lipoprotenas
transportadoras do colesterol, observada quando a dosagem repetida em um mesmo laboratrio no
espao mnimo de 1 semana. Ela ocorre independentemente do erro analtico e pode variar entre 1,7 e
11,6% com uma mdia de 6,1% devido, principalmente, variao biolgica da LDL que a principal
lipoprotena transportadora de colesterol.
O uso de detergentes ou desencrostantes contendo perxido de hidrognio podem contaminar as
reaes de Trinder.
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
COLINESTERASE Liquiform Ref. 113

A enzima colinesterase tem papel fundamental na regulao dos impulsos nervosos atravs da degradao
da acetilcolina na juno neuromuscular e na sinapse nervosa. Existem dois tipos de colinesterases: a
acetilcolinesterase (colinesterase verdadeira ou colinesterase I), que encontrada nos eritrcitos, no
pulmo e no tecido nervoso; e a colinesterase srica, sintetizada no fgado, tambm chamada de
pseudocolinesterase ou colinesterase II.
Sua determinao til na avaliao e no acompanhamento de pacientes com intoxicao por
organofosforados (inseticidas) que inibem a acetilcolinesterase e diminuem os nveis da colinesterase II.
PRINCPIO DA REAO
A colinesterase (CHE) catalisa a hidrlise da butiriltiocolina, com formao de butirato e tiocolina. A tiocolina
reduz o ferricianeto de potssio, de cor amarela, a ferrocianeto de potssio, que incolor.
A reduo da absorbncia em 405 nm, conseqente reduo do ferricianeto de potssio, monitorada
fotometricamente, sendo diretamente proporcional atividade da colinesterase na amostra.
CHE
Butiriltiocolina + H2O Butirato + Tiocolina
2 Tiocolina + 2 [Fe(CN)6]3- + 2 OH- Colina + H2O + 2 [Fe(CN)6]4-APRESENTAO
Ref.
113.1 - Reagente 1
113.2 - Reagente 2
113-1/30
1 x 24 mL
1 x 6 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Cintica - DGKC
Reao:
Cintica
Sistema:
Mono ou Birreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
405 nm
Amostra:
Linearidade:
entre 70 e 20.000 U/L
Relao Amostra / Reagente: 1:63,5
Erro Total: 8,90%
Bias: 3,10%
CVa: 3,50%
Bibliografia:
CALIBRAO
de espessura e no comprimento de onda de 405 nm, servindo somente como orientao e podem variar em
ORIENTAES
O Labquest no armazena fatores de calibrao com mais de 4 dgitos. Como o fator de calibrao
obtido na Colinesterase apresenta 5 dgitos, necessrio ateno especial para a seguinte situao:
8 Quando realizada a calibrao e seqencialmente os testes de controle e amostra, o equipamento
utiliza os 5 dgitos do fator determinado.
8 Ao sair do teste e entrar novamente, o equipamento considera apenas os 4 primeiros dgitos do fator
memorizado anteriormente. Para correo, todos os resultados de controle e amostras devem ser
multiplicados por 10.
20/09/2010
COLINESTERASE Liquiform Ref. 113

No utilizar amostra coletada com fluoreto pois este inibe a atividade da colinesterase.
O Produto Colinesterase Labtest mede a atividade da pseudocolinesterase ou colinesteraase II.
Absorbncia
REAO CINTICA DECRESCENTE
Tempo (min)
20/09/2010
CREATININA K Ref. 96
A creatinina no formada pelo metabolismo corporal, sendo apenas um resultado do metabolismo da creatina
e, portanto, relacionada com a massa muscular. A converso da creatina em creatinina praticamente
constante, sendo que cerca de 2% da creatina total convertida em creatinina a cada 24 horas.
PRINCPIO DA REAO
A creatinina reage com o picrato alcalino formando um complexo de cor vermelha. A quantidade da cor
formada proporcional concentrao de creatinina na amostra.
Creatinina + Picrato alcalino Picrato de Creatinina
APRESENTAO
Ref.
96.1 - NaOH
96.2 - cido Pcrico
96.4 - Ferricianeto
96-300
1 x 240 mL
1 x 60 mL
1 x 5 mL
1 x 5 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Labtest - Reao de Jaff; Picrato sem precipitao
Reao:
Cintica de 2 Pontos
Sistema:
Mono ou Birreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
510 nm (500 a 540)
Amostra:
Soro ou Plasma, urina e lquido amnitico
Linearidade:
entre 0,2 e 12 mg/dL
Erro Total: 10,40%
Bias: 5,10%
CVa: 3,20%
Bibliografia:
CALIBRAO
Os dados abaixo foram obtidos em espectrofotometro com banda de passagem de 2 nm, comprimento de onda
de 510 nm e cubeta de 1 cm de espessura, servindo somente como orientao e podem variar em funo das
caractersticas e condies do analisador, diferenas no material volumtrico utilizado, temperatura do banhomaria, entre outros.
Lquido amnitico:
Feto Imaturo < 1,5 mg/dL

Inconclusivo
1,5 a 2,0 mg/dL
Feto maduro > 2,0 mg/dL
A concentrao de creatinina um dos parmetros laboratoriais para a avaliao da maturidade fetal.
PREPARO DO PICRATO ALCALINO

Misturar 4 volumes de NaOH com 1 volume de cido Pcrico. (Exemplo: 0,8 mL NaOH + 0,2 mL cido
Pcrico). Estvel 15 dias entre 2 a 8 C, armazenado em frasco plstico bem vedado (no utilizar PET).
O CO2 atmosfrico altera significativamente a estabilidade do NaOH (no 1) e do Picrato Alcalino, quando os
reagentes so mantidos em recipientes abertos. A modificao da estabilidade influenciada pelo tempo de
exposio e condies ambientais.
Manter na bandeja do analisador somente o volume suficiente para a realizao de uma corrida analtica e
usar as informaes do controle da qualidade como indicador da necessidade de realizar nova calibrao.
20/09/2010
CREATININA K Ref. 96
NDICE DE CORREO
A interferncia das protenas plasmticas, que ocorre na reao de Jaff, introduz um erro constante na
medio o qual minimizado pela utilizao de um ndice de Correo (0,25 mg/dL), que deve ser subtrado de
todos os resultados (quando a leitura feita aos 30 e 90 segundos de reao).
Como as amostras de urina no contm protenas em concentraes capazes de introduzir erros constantes
nas medies, no necessrio aplicar o ndice de correo.
ORIENTAES
Segundo recomendaes do NKDEP (National Kidney Disease Education Program) os resultados de
Creatinina devem ser reportados com duas casas decimais para evitar erros sistemticos provocados por
arredondamentos, que podem chegar a 6,0%.
Quando o teste realizado em equipamento semi-automtico observar:
- O procedimento deve ser rigoroso em relao ao intervalo de tempo entre a mistura da amostra com
o reagente, a homogeneizao apropriada e a aspirao da mistura para o analisador.
- Homogeneizao com fora excessiva promove a formao de bolhas de ar que podem prejudicar o
resultado da anlise.
No existe uma relao direta entre os valores de Uria e Creatinina. A uria um produto do metabolismo
das protenas e a creatinina um produto do metabolismo da creatina muscular. O que ocorre que na
insuficincia renal h um aumento tanto da uria quanto da creatinina, mas sem uma relao definida.
DEPURAO
A depurao de uma substncia definida como a quantidade de sangue ou plasma completamente
liberada desta substncia, por unidade de tempo, atravs da filtrao renal.
Para a realizao da depurao da creatinina recomenda-se, se possvel, a interrupo do uso de
medicamentos, particularmente as cefalosporinas.
Para obteno da superfcie corporal, utilizar o nomograma que pode ser conseguido no SAC Labtest.
Encontra-se disponvel para download, no site da Labtest, www.labtest.com.br, planilha de clculo completa
para determinao da Depurao da Creatinina.
A amputao de membros afeta a superfcie corporal, devendo ser levado em conta para efeitos de clculo.
A dosagem da depurao da creatinina deve ser realizada em amostra de urina de 24 horas, garantindo
uma mdia mais representativa da creatinina urinria do que se obteria com um tempo menor de coleta.
Vale salientar que a coleta de urina de 24 horas para determinao da depurao de creatinina, se no for
bem feita, pode ser uma causa de resultados errados.
RITMO DE FILTRAO GLOMERULAR
A avaliao adequada da funo renal muito importante para o diagnstico e acompanhamento das
doenas renais. A avaliao do ritmo de filtrao glomerular (RFG) vista como o melhor indicador de funo
renal.
O NKDEP (National Kidney Disease Education Program) recomenda fortemente que todos os laboratrios
reportem a estimativa de Ritmo de Filtrao Glomerular (eRFG) em todos os laudos contendo resultados de
creatinina .
Segundo recomendaes do NKDEP, quando o eRFG calculado for maior que 60, deve ser reportado
como: maior que 60 mL/min/1,73m2.
O NKDEP recomenda calcular o ritmo de filtrao glomerular (eRFG) em substituio Depurao da
Creatinina, utilizando o resultado da creatinina rastrevel aps aplicao do ndice de Correo.
Encontra-se disponvel para download, no site da Labtest, www.labtest.com.br, planilha de clculo do RFG.
Absorbncia
REAO CINTICA DE 2 PONTOS
Tempo (min)
20/09/2010
CREATININA Ref. 35
A creatinina no formada pelo metabolismo corporal, sendo apenas um resultado do metabolismo da
creatina e, portanto, relacionada com a massa muscular. A converso da creatina em creatinina
praticamente constante, sendo que cerca de 2% da creatina total convertida em creatinina a cada 24
horas.
PRINCPIO DA REAO
A Creatinina e outros componentes do soro reagem com a soluo de picrato em meio alcalino, formando
um complexo de cor vermelha que medido fotometricamente.
A adio de um acidificante abaixa o pH para 5,0, promovendo a decomposio do picrato de creatinina,
permanecendo inalterada a cor derivada dos cromognios, que tambm medida fotometricamente. A
diferena entre as duas leituras fornece o valor da creatinina verdadeira.
APRESENTAO
Ref.
35.1 - cido Pcrico
35.2 - Tampo
35.4 - Acidificante
35-100
1 x 50 mL
1 x 200 mL
1 x 10 mL
1 x 10 mL
35E500
1 x 250 mL
1 x 1000 mL
1 x 30 mL
1 x 50 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Labtest - Reao de Jaff; Picrato sem precipitao
Reao:
Ponto Final
Sistema:
Mono ou Birreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
510 nm (500 a 540)
Amostra:
Soro ou Plasma, urina e lquido amnitico
Linearidade:
12 mg/dL
Erro Total: 10,40%
Bias: 5,10%
CVa: 3,20%
Bibliografia:
CALIBRAO
Ponto Final: Fator de Calibrao mdio: 14
Cintica 2 pontos: Fator de Calibrao mdio: 40
Lquido amnitico:
Feto Imaturo < 1,5 mg/dL

Inconclusivo
1,5 a 2,0 mg/dL
Feto maduro > 2,0 mg/dL
A concentrao de creatinina um dos parmetros laboratoriais para a avaliao da maturidade fetal.
ORIENTAES
Segundo recomendaes do NKDEP (National Kidney Disease Education Program) os resultados de
Creatinina devem ser reportados com duas casas decimais para evitar erros sistemticos provocados por
arredondamentos, que podem chegar a 6,0%.
20/09/2010
CREATININA Ref. 35
A Creatinina Ref. 35 no indicada para uso em analisadores automticos que possuem refrigerao na
rack de reagentes, pois o Tampo precipita em temperaturas inferiores a 15 C.
Para determinao da creatinina usando equipamento automtico usar a Creatinina K - Ref. 96.
No existe relao direta entre os valores de Uria e Creatinina. A uria um produto do metabolismo
das protenas e a creatinina um produto do metabolismo da creatina muscular. O que ocorre que na
insuficincia renal h um aumento tanto da uria quanto da creatinina, mas sem uma relao definida.
NDICE DE CORREO (Reao Ponto Final)
A interferncia das protenas plasmticas, que ocorre na reao de Jaff, introduz um erro constante na
medio o qual minimizado pela utilizao de um ndice de Correo (0,25 mg/dL), que deve ser subtrado
de todos os resultados.
Como as amostras de urina no contm protenas em concentraes capazes de introduzir erros
constantes nas medies, no necessrio aplicar o ndice de correo.
CINTICA DE 2 PONTOS (uso em analisadores semi-automticos)
Quando este produto utilizado em analisadores semi-automticos, utiliza-se a metodologia cintica de
2 pontos, no sendo utilizado o Acidificante (Ref. 35.4).
O Indice de Correo no aplicado quando se usa a cintica de 2 pontos.
O procedimento deve ser rigoroso em relao ao intervalo de tempo entre a mistura da amostra, padro
ou calibrador com o reagente, a homogeneizao apropriada e a aspirao da mistura para o analisador.
Homogeneizao com fora excessiva promove a formao de bolhas de ar que podem prejudicar o
O CO2 atmosfrico altera significativamente a estabilidade do Tampo e do Picrato Alcalino, quando os
reagentes so mantidos em recipientes abertos. A modificao da estbilidade influenciada pelo tempo de
exposio e condies ambientais.
Em amostras ictricas e turvas o procedimento com desproteinizao pode ser realizado da seguinte
maneira:
- Misturar 0,2 mL de soro a 0,4 mL do cido Pcrico, agitar e centrifugar durante 10 minutos. Colocar
0,8 mL do Tampo em um tubo, adicionar 0,3 mL do sobrenadante lmpido. Misturar e aspirar
imediatamente para a cubeta.
DEPURAO DA CREATININA
A depurao de uma substncia definida como a quantidade de sangue ou plasma completamente
liberada desta substncia, por unidade de tempo, atravs da filtrao renal.
Para a realizao da depurao da creatinina recomenda-se, se possvel, a interrupo do uso de
medicamentos, particularmente as cefalosporinas.
Para obteno da superfcie corporal, utilizar o nomograma que pode ser conseguido no SAC Labtest.
Encontra-se disponvel para download, no site da Labtest, www.labtest.com.br, planilha de clculo
completa para determinao da Depurao da Creatinina.
A amputao de membros afeta a superfcie corporal, devendo ser levado em conta para efeitos de
clculo.
A dosagem da depurao da creatinina deve ser realizada em amostra de urina de 24 horas, garantindo
uma mdia mais representativa da creatinina urinria do que se obteria com um tempo menor de coleta.
Vale salientar que a coleta de urina de 24 horas para determinao da depurao de creatinina, se no
for bem feita, pode ser uma causa de resultados errados.
RITMO DE FILTRAO GLOMERULAR
A avaliao adequada da funo renal muito importante para o diagnstico e acompanhamento das
doenas renais. A avaliao do ritmo de filtrao glomerular (RFG) vista como o melhor indicador de
funo renal.
O NKDEP (National Kidney Disease Education Program) recomenda fortemente que todos os
laboratrios reportem a estimativa de Ritmo de Filtrao Glomerular (eRFG) em todos os laudos contendo
resultados de creatinina .
O NKDEP recomenda calcular o ritmo de filtrao glomerular (eRFG) em substituio Depurao da
Creatinina, utilizando o resultado da creatinina rastrevel aps aplicao do ndice de Correo.
20/09/2010
CREATININA Ref. 35
Segundo recomendaes do NKDEP quando o eRFG calculado for maior que 60, deve ser reportado
como: Maior que 60 mL/min/1,73m2.
Encontra-se disponvel para download, no site da Labtest, www.labtest.com.br, planilha de clculo do
RFG.
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
Absorbncia
Tempo (min)
20/09/2010
DESIDROGENASE LCTICA - Ref. 37

A desidrogenase lctica (LDH) catalisa a converso reversvel de cido lctico muscular em cido pirvico,
um passo essencial nos processos metablicos que, em ltima anlise, produzem a energia celular. Em
razo da LDH estar presente em quase todos os tecidos corpreos e uma leso celular fazer com que a
LDH srica total se eleve, a medio de LDH tem valor diagnstico limitado.
PRINCPIO DA REAO
A desidrogenase lctica catalisa a reao reversvel lactato - piruvato, na presena do NAD que reduzido
a NADH. O mtodo mede a quantidade de NADH formada, que reduz estequiometricamente o INT a um
formazan de cor vermelha.
APRESENTAO
Ref.
37.1 - Tampo
37.2 - Substrato
37.3 - Padro - 150 UI
37.5 - Estabilizador
37
1 x 30 mL
1 x 20 mL
1 x 1 mL
1 x 8 mL
1 x 100 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Labtest (Lactato-Piruvato)
Reao:
Cintica Tempo Fixo com leitura em Ponto Final
Aplicao:
Comprimento Onda:
500 nm (495 a 505)
Amostra:
Soro e Lquor
Linearidade:
800 U/L
Erro Total: 11,4%
Bias: 4,30%
CVa: 4,30%
Bibliografia:
CALIBRAO
Lquido Pleural (diferenciao entre transudato e exudato):
Transudatos: relao lquido pleural / soro < 0,6
Exudatos: relao lquido pleural / soro > 0,6
Lquor: 12,5 a 82,5 U/L
ORIENTAES
A desidrogenase lctica possui cinco formas de isoenzimas distribudas da seguinte forma:
- LD1 : miocrdio, eritrcitos, rins.
- LD2 : rins, miocrdio, eritrcitos.
- LD3 : bao, pulmes, rins.
- LD4 : bao, pulmes, rins.
- LD5 : fgado, msculos esquelticos, pulmes.
Paciente em uso de ringer lactato: no h interferncia nos resultados.
20/09/2010
DESIDROGENASE LCTICA - Ref. 37

A deficincia da vitamina B12 causa a destruio dos precursores do eritrcito na medula ssea
(eritropoiese ineficaz), resultando no aumento da LDH em at 50 vezes o limite de referncia superior. Esta
elevao retorna rapidamente a valores normais aps tratamento.
A refrigerao ou congelamento da amostra pode desnaturar determinadas isoenzimas.
No utilizar amostras hemolisadas, pois obtm se valores falsamente elevados.
Nveis elevados de plaquetas podem levar a resultados falsamente elevados de LDH.
Os valores da LDH encontram-se elevados em todas as situaes em que ocorre grande destruio
celular.
O lquor deve ser centrifugado antes de realizar o teste. Neste a atividade enzimtica estvel por 6
horas entre 15 a 25 C.
EXATAMENTE 5 minutos no banho-maria 37 C antes de adicionar o Estabilizador.
Para a medio da atividade enzimtica da Desidrogenase Lctica (LD) no sangue existem duas
metodologias distintas:
- Metodologia onde a LD catalisa a reao reversvel lactato a piruvato na presena de NAD
que reduzido a NADH. (Desidrogenase Lctica - Labtest Ref. 37)
- Metodologia onde a LD catalisa a converso do piruvato a lactato na presena de NADH que
oxidado a NAD. (LDH Liquiform Labtest Ref. 86)
A reao Piruvato-Lactato proporciona melhor estabilidade do reagente e maior velocidade da reao,
enquanto que a velocidade da reao Lactato-Piruvato aproximadamente a metade da velocidade da
reao Piruvato-Lactato.
Aps avaliao das formas utilizadas para designar os mtodos para Desidrogenase lctica, a Labtest
decidiu utilizar o formato que indica a direo da reao, porque descreve melhor a reao que ocorre
durante a medio da atividade enzimtica. Essa forma de expressar utilizada na maioria das descries
das reaes para LD.
Absorbncia
REAO CINTICA COM LEITURA DE PONTO FINAL

Interrupo da Reao
enzimtica
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
Fe Liquiform Ref. 91
O ferro absorvido principalmente na parte superior do duodeno e no jejuno. Uma vez absorvido, se liga
transferrina plasmtica. A maior parte do ferro circulante captada pelos precursores eritrides na medula
ssea para compor a hemoglobina. A hemoglobina utiliza cerca de 80% do ferro corporal. O restante
armazenado no interior das clulas reticulares da medula ssea, bao e fgado, 60% sob a forma de ferritina
e cerca de 40% como hemossiderina.
Portanto, a distribuio do ferro corporal feita entre compartimentos: o funcional - hemoglobina,
mioglobina, enzimas heme e no-heme, o de transporte - transferrina - e o de reserva - ferritina e
hemossiderina.
A maior parte do ferro corporal oriunda da dieta. ingerido no estado frrico e, para sua absoro, precisa
estar em sua forma reduzida (ferroso). Por isso, a absoro influenciada por fatores redutores
gastrointestinais, pH gstrico e composio da dieta, como a presena de cido ascrbico, que mantm o
ferro no estado ferroso. Outra fonte do ferro a proveniente do processo de degradao da hemoglobina,
quando
o
ferro
liberado
da
hemoglobina
e
retorna
transferrina
plasmtica.
PRINCPIO DA REAO
O ferro dissociado da transferrina por ao de um tampo de pH cido. O cido ascrbico presente no
Reagente 2 reduz os ons frrico a ons ferroso que, em seguida, formam um complexo magenta brilhante
com o Ferrozine, cuja absorbncia medida entre 540 e 580 nm proporcional quantidade de ferro na
amostra.
APRESENTAO
Ref.
91.1 - Reagente 1
91.2 - Reagente 2
91.3 - Calibrador
91-2/50c
1 x 40 mL
1 x 10 mL
1 x 3 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Labtest Ferrozine
Reao:
Ponto Final com Branco de Amostra
Sistema:
Birreagente
Aplicao:
Manual, semi-automtico* e automtico
Comprimento Onda:
560 nm (540 a 580)
Amostra:
Soro (sem hemlise)
Linearidade:
1000 g/dL
Erro Total: 15,3%
Bias: 4,40%
CVa: 6,60%
Bibliografia:
CALIBRAO
Realizar a calibrao utilizando o Calibrador Ref. 91.3.
ORIENTAES
*Para realizar o teste em analisadores semi-automticos, deve-se seguir o procedimento das Instrues
de Uso, fazendo as leituras no modo Absorbncia. O nmero de testes ser reduzido pela necessidade de
realizar 2 tubos distintos para a leitura A1 e A2 para cada amostra.
*Para realizar o teste em analisadores semi-automticos usar o produto Ferro Srico Ref. 38.
20/09/2010
Fe Liquiform Ref. 91
A dosagem de Ferro na urina realizada por espectroscopia de absoro atmica. Intervalo de
referncia de 100 a 300 g/24 horas.
Cada 1,0 mg/dL de Hemoglobina srica aumenta o Ferro srico em 3,4688 g/dL
O material pode ser tratado com soluo aquosa de cido ntrico 10% (material de vidro) durante uma
noite ou detergente no inico, lavado com gua corrente e enxaguado com gua destilada ou
deionizada.
elevados. Sugerimos que todo o material para este uso seja guardado em sacos plsticos at o
momento do uso.
Em equipamentos automticos sugere-se fazer o ferro separado da rotina para evitar contaminao
Absorbncia
Leitura A1
Adio R1
e Amostra
20/09/2010
Adio R2
Leitura A2
Tempo (min)
FERRO SRICO - Ref. 38

O ferro absorvido principalmente na parte superior do duodeno e no jejuno. Uma vez absorvido, se liga
transferrina plasmtica. A maior parte do ferro circulante captada pelos precursores eritrides na medula
ssea para compor a hemoglobina. A hemoglobina utiliza cerca de 80% do ferro corporal. O restante
armazenado no interior das clulas reticulares da medula ssea, bao e fgado, 60% sob a forma de ferritina
e cerca de 40% como hemossiderina.
Portanto, a distribuio do ferro corporal feita entre compartimentos: o funcional - hemoglobina,
mioglobina, enzimas heme e no-heme, o de transporte - transferrina - e o de reserva - ferritina e
hemossiderina.
A maior parte do ferro corporal oriunda da dieta. ingerido no estado frrico e, para sua absoro, precisa
estar em sua forma reduzida (ferroso). Por isso, a absoro influenciada por fatores redutores
gastrointestinais, pH gstrico e composio da dieta, como a presena de cido ascrbico, que mantm o
ferro no estado ferroso. Outra fonte do ferro a proveniente do processo de degradao da hemoglobina,
quando o ferro liberado da hemoglobina e retorna transferrina plasmtica.
PRINCPIO DA REAO
Os ons frrico so dissociados da transferrina por ao de um tampo de pH cido e reduzidos a ons
ferroso por ao da hidroxilamina.
Aps a adio do Ferrozine forma-se um complexo magenta brilhante cuja absorbncia, medida entre 540
e 580 nm, proporcional quantidade de ferro na amostra.
APRESENTAO
Ref.
38.1 - Reagente 1
38.2 - Padro 500 g/dL
38.3 - Ferrozine
38-80
1 x 80 mL
1 x 5 mL
1 x 2,5 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Goodwin modificado
Reao:
Ponto Final com Branco de Amostra
Sistema:
Birreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
560 nm (540 a 580)
Amostra:
Soro (sem hemlise)
Linearidade:
1000 g/dL
Erro Total: 15,3%
Bias: 4,40%
CVa: 6,60%
Bibliografia:
CALIBRAO
ORIENTAES
No teste do Ferro Srico realizado em equipamentos semi-automticos os protocolos sugeridos levam
em considerao a necessidade do Branco de Reagente e Branco de Amostra.
A dosagem de Ferro na urina realizada por espectroscopia de absoro atmica. Tem intervalo de
referncia de 100 a 300 g/24 horas.
20/09/2010
FERRO SRICO - Ref. 38

Cada 1,0 mg/dL de Hemoglobina srica aumenta o Ferro srico em 3,4688 g/dL
deionizada.
momento do uso.
Absorbncia
Leitura A1
Adio R1
e Amostra
20/09/2010
Adio R2
Leitura A2
Tempo (min)
FOSFATASE CIDA - Ref. 39

A enzima fosfatase cida encontrada presente em diversos tecidos inclundo fgado, rins, eritrcitos,
medula ssea, bao e plaquetas. Os nveis mais elevados encontram-se na prstata onde a atividade desta
isoenzima cerca de 100 vezes superior dos restantes tecidos.
PRINCPIO DA REAO
A fosfatase cida do soro atua sobre o substrato de timolftalena monofosfato. A adio de lcali inibe a
ao enzimtica e converte a timolftalena liberada na sua forma azul, que medida colorimetricamente. O
produto final da reao se constitui de uma mistura de cor azul e a cor prpria do substrato.
APRESENTAO
Ref.
39.1 - Substrato (liofilizado)
39.3 - Padro - 3,0 U/L
39.4 - Tampo
39-20
1 x 30 mol/L
1 x 100 mL
1 x 3 mL
1 x 20 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Roy modificado; substrato timolftalena monofosfato
Reao:
Cintica de Tempo Fixo com leitura em Ponto Final
Aplicao:
Comprimento Onda:
590 nm (570 a 610)
Amostra:
Soro ou plasma (heparina)
Linearidade:
20 U/L
Erro Total: 10,3%
Bias: 3,0%
CVa: 4,50%
Bibliografia:
CALIBRAO
PREPARO DO REAGENTE
Reconstituio do Substrato: Transferir o contedo do Tampo (20 mL) para o frasco de Substrato e
misturar por inverso at dissoluo completa. Estvel 6 meses entre 2 - 8 C.
ORIENTAES
O produto Labtest Fosfatase cida Ref. 39 utiliza um substrato de timolftalena monofosfato e podemos
assumir que, apesar do sistema medir a fosfatase cida total, os resultados quando elevados, podem ser
considerados como sendo correspondentes frao prosttica, porque a sensibilidade do substratos s
outras fraes consideravelmente diminuda e os valores encontrados para a atividade das fosfatases no
prostticas so to reduzidos que no tm significado clnico.
Definio de Unidade: uma unidade igual quantidade de enzima que libera, por hidrlise, 1 micromol
de timolftalena por minuto, por litro de soro, nas condies do teste
O Reagente de Cor pode ser conservado entre 2 a 30 C.
O tubo Controle realizado no procedimento de teste possibilita a minimizao da ao da interferncia
fotomtrica provocada pela amostra. Observar que a amostra neste tubo colocada aps a reao cintica
ser interrompida com a adio do Reagente de Cor.
20/09/2010
FOSFATASE CIDA - Ref. 39

A atividade enzimtica da fosfatase cida sensvel ao efeito da temperatura e pH. Separar o soro ou
plasma at 30 minutos aps a coleta e acidificar com 0,01 mL de cido actico 20% (v/v) para cada 1,0 mL
da amostra. A atividade enzimtica da amostra acidificada estvel por 2 dias entre 2 a 8 C e por 1
semana a 10 C negativo.
EXATAMENTE 30 minutos no banho-maria 37 C antes de adicionar o Reagente de Cor.
Absorbncia
REAO CINTICA TEPO FIXO COM LEITURA DE PONTO FINAL

Interrupo da Reao
enzimtica
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
FOSFATASE ALCALINA Liquiform - Ref. 79

A fosfatase alcalina uma enzima presente em praticamente todos os tecidos do organismo, especialmente
nas membranas das clulas dos tbulos renais, ossos (osteoblastos), placenta, trato intestinal e fgado.
Portanto, a fosfatase alcalina encontrada no soro resultado da presena de diferentes isoenzimas
originadas em diferentes rgos, com predomnio das fraes sseas e hepticas.
PRINCPIO DA REAO
A fosfatase alcalina (FALC) do soro, em pH alcalino, hidrolisa o p-nitrofenilfosfato liberando
p-nitrofenol e fosfato inorgnico, segundo a reao seguinte:
FALC
p-Nitrofenilfosfato + H2O p-Nitrofenol + fosfato
A quantidade produzida de p-nitrofenol que tem elevada absorbncia em 405 nm diretamente proporcional
atividade enzimtica da fosfatase alcalina na amostra.
APRESENTAO
Ref.
79.1 - Substrato
79.2 - Tampo
79-4/30
4 x 24 mL
4 x 6 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Bowers e McComb modificado (substrato p-nitrofenilfosfato)
Reao:
Cintica Contnua
Sistema:
Mono ou Birreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
405 nm
Amostra:
Linearidade:
1500 U/L
ESPECIFICAO QUALIDADE ANALTICA
Erro Total: 11,7%
Bias: 6,40%
CVa: 3,20%
Bibliografia:
CALIBRAO
O uso de calibrao para a medida da atividade enzimtica importante para a correo da variabilidade
ou correo da resposta fotomtrica. Indicamos o uso de calibrador da srie Calibra.
Fator =
20/09/2010
x Fator utilizado
FOSFATASE ALCALINA Liquiform - Ref. 79

ORIENTAES
Dosagem da Frao ssea da fosfatase alcalina:
A fosfatase alcalina ssea inativada quando a amostra incubada exatamente 15 minutos a 56
C ( 0,01C). Ver tcnica em Clinical Chemistry (Theory, analysis and correlation Second edition)
pgina 903. Em caso de necessidade pedir cpia do trabalho atravs do SAC Labtest.
O procedimento deve ser rigoroso em relao ao intervalo de tempo entre a mistura da amostra com
o reagente, a homogeneizao apropriada e a aspirao da mistura para o analisador.
Homogeneizao com fora excessiva promove a formao de bolhas de ar que podem prejudicar o
de fundamental importncia que sejam observadas as absorbncias medidas pelo analisador. As
diferenas entre medidas consecutivas (A) devem ser equivalentes respeitadas as variaes inerentes a
cada metodologia.
Citrato, fluoreto, oxalato e EDTA so inibidores da atividade da fosfatase alcalina porque formam
complexos com o magnsio que um importante ativador da ao enzimtica.
Na gravidez a fosfatase alcalina pode estar aumentada.
Algumas drogas podem aumentar a fosfatase alcalina, especialmente algumas drogas usadas para
tratamentos psiquitricos, mas isto ocorre raramente.
Em amostras nativas e controles como o Qualitrol a atividade da fosfatase alcalina pode aumentar
durante o armazenamento.
Absorbncia
REAO CINTICA CONTNUA
2
1
Tempo (min)
20/09/2010
FOSFATASE ALCALINA - Ref. 40

A fosfatase alcalina uma enzima presente em praticamente todos os tecidos do organismo, especialmente
nas membranas das clulas dos tbulos renais, ossos (osteoblastos), placenta, trato intestinal e fgado.
Portanto, a fosfatase alcalina encontrada no soro resultado da presena de diferentes isoenzimas
originadas em diferentes rgos, com predomnio das fraes sseas e hepticas.
PRINCPIO DA REAO
A fosfatase alcalina do soro hidrolisa a timolftalena monofosfato liberando timolftalena, que tem cor azul
em meio alcalino. A cor formada, diretamente proporcional a atividade enzimtica, medida em 590 nm. O
produto final da reao se constitui de uma mistura de cor azul e a cor prpria do substrato.
APRESENTAO
Ref.
40.1 - Substrato
40.2 - Tampo
40.4 - Padro - 45 U/L
40
1 x 5 mL
1 x 50 mL
1 x 200 mL
1 x 3 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Roy modificado; substrato timolftalena monofosfato.
Reao:
Cintica com leitura Ponto Final
Aplicao:
Comprimento Onda:
590 nm (580 a 590)
Amostra:
Linearidade:
500 U/L
ESPECIFICAO QUALIDADE ANALTICA
Erro Total: 11,7%
Bias: 6,40%
CVa: 3,20%
Bibliografia:
CALIBRAO
Absorbncia do Branco: < 0,075
ORIENTAES
Definio de Unidade: uma unidade igual quantidade de enzima que libera, por hidrlise, 1 micromol
de timolftalena por minuto, por litro de soro, nas condies do teste.
Dosagem da Frao ssea da fosfatase alcalina:
A fosfatase alcalina ssea inativada quando a amostra incubada exatamente 15 minutos a 56
C ( 0,01C). Ver tcnica em Clinical Chemistry (Theory, analysis and correlation Second edition)
pgina 903. Em caso de necessidade pedir cpia do trabalho atravs do SAC Labtest.
Citrato, fluoreto, oxalato e EDTA so inibidores da atividade da fosfatase alcalina porque formam
complexos com o magnsio que um importante ativador da ao enzimtica.
Quando a amostra armazenada na temperatura ambiente obtm-se resultados falsamente elevados.
No Qualitrol a atividade da fosfatase alcalina pode aumentar durante o armazenamento.
EXATAMENTE 10 minutos no banho-maria 37 C antes de adicionar o Reagente de Cor.
20/09/2010
FOSFATASE ALCALINA - Ref. 40
Absorbncia
REAO CINTICA TEMPO FIXO COM LEITURA DE PONTO FINAL

Interrupo da Reao
enzimtica
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
FSFORO UV Liquiform Ref. 12

O fsforo um dos constituintes mais abundantes do organismo, presente em diferentes tecidos. O fsforo
est como o clcio, sob a influncia da vitamina D e do hormnio paratiroideano. Tem funo estrutural ao
nvel da clula, notadamente nos fosfolipdeos, constituintes das membranas celulares. Participa de
numerosas atividades enzimticas e, tem um papel fundamental para a clula como fonte de energia sob a
forma de ATP (adenosina trifosfato).
PRINCPIO DA REAO
O Fsforo inorgnico reage com o Molibdato de Amnio na presena de cido sulfrico resultando na
formao de um complexo Fosfomolibdato no reduzido. A absorbncia em 340 nm do complexo formado,
proporcional concentrao de Fsforo na amostra.
Fsforo inorgnico + H2SO4 + Molibdato de Amnio Complexo Fosfomolibdato no reduzido
APRESENTAO
Ref.
12.1 - Catalisador
12.2 - Padro - 5 mg/dL
12-200
2 x 100 mL
1 x 5 mL
12-400
4 x 100 mL
1 x 5 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Daly e Ertingshausen modificado (fosfomolibdato UV; molibdato UV)
Reao:
Ponto Final
Sistema:
Monorreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
340 nm
Amostra:
Soro ou plasma (heparina), urina e lquido amnitico
Linearidade:
14 mg/dL
Erro Total: 10,2%
Bias: 3,2%
CVa: 4,3%
Bibliografia:
CALIBRAO
Absorbncia do Reagente: > 0,680
ORIENTAES
Sinnimos: Fsforo, fsforo inorgnico, fosfato
Quando o contato do soro ou plasma com as hemcias prolongado, ocorre a liberao do fsforo do
interior das hemcias, aumentando sua concentrao no soro ou plasma. Separar o soro ou plasma at 1
hora aps a coleta. Esta interferncia no corrigida utilizando o branco da amostra, porque no somente
uma interferncia fotomtrica.
Plasmas citratados, oxalatados, fluoretados ou com EDTA fornecem resultados falsamente diminudos.
Absorbncia do reagente, lido contra um branco de gua em 340 nm, maior que 1,500 indica
deteriorao do reagente.
20/09/2010
FSFORO UV Liquiform Ref. 12
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
FSFORO Ref. 42
O fsforo um dos constituintes mais abundantes do organismo, presente em diferentes tecidos. O fsforo
est como o clcio, sob a influncia da vitamina D e do hormnio paratiroideano. Tm funo estrutural ao
nvel da clula, notadamente nos fosfolipdeos, constituintes das membranas celulares. Participa de
numerosas atividades enzimticas e, sobretudo tem um papel fundamental para a clula como fonte de
energia sob a forma de ATP (adenosina trifosfato).
PRINCPIO DA REAO
Os ons fosfato reagem com o molibdnio em meio cido formando um complexo amarelo, o qual, por ao
de um tampo alcalino, reduzido a azul-molibdnio que medido colorimetricamente.
APRESENTAO
Ref.
42.1 - Catalisador
42.2 - Reagente Molibdato
42.3 - Tampo
42-100
1 x 6 mL
1 x 6 mL
1 x 12 mL
1 x 5 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Labtest (fosfomolibdato, molibdato)
Reao:
Ponto Final
Sistema:
Birreagente
Aplicao:
Comprimento de onda: 650 nm (640 a 700)
Amostra:
Soro ou plasma (heparina), urina e lquido amnitico
Linearidade:
14 mg/dL
Erro Total: 10,2%
Bias: 3,2%
CVa: 4,3%
Bibliografia:
CALIBRAO
ORIENTAES
Sinnimos: Fsforo, fsforo inorgnico, fosfato
Quando o contato do soro ou plasma com as hemcias prolongado, ocorre a liberao do fsforo do
interior das hemcias, aumentando sua concentrao no soro ou plasma. Separar o soro ou plasma at 1
hora aps a coleta.
Amostras hemolisadas produzem resultados falsamente elevados, devido contaminao do plasma ou
soro com o fsforo das hemcias. Esta interferncia no corrigida utilizando o branco da amostra, porque
no somente uma interferncia fotomtrica.
Ao usar os reagentes 1, 2 e 3 pingar as gotas diretamente na gua e no pela parede do tubo de ensaio.
Usar o conta gotas exatamente na posio vertical.
20/09/2010
FSFORO Ref. 42
GUA DEIONIZADA (Pesquisa de presena de silicato)
O uso da reao do Branco do Fsforo indicado para monitorar a qualidade da gua deionizada.
Quando a coluna deionizadora est saturada, a primeira substncia a ser liberada o silicato, e o produto
Fsforo Ref. 42 capaz de medir o silicato presente na gua:
- Adicionar 2,5 mL de gua deionizada em 2 tubos de ensaio. No tubo 1 colocar 1 gota do
Catalisador (Ref. 42.1), 1 gota do Reagente Molibdato (Ref. 42.2), homogeneizar e aguardar 2 minutos.
Adicionar 2 gotas do Tampo, aguardar 5 minutos e ler em 650 nm, acertando o zero com gua (tubo 2).
- A absorbncia deve ser menor que 0,010. Absorbncia maior indica que a coluna deionizadora
est saturada.
A gua de m qualidade pode interferir em vrios reagentes e reaes.
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
FRUTOSAMINA Ref. 97
Alm da HbA, a glicose pode ligar-se a outras protenas e globulinas por meio de uma glicosilao noenzimtica. A protena total, que, aps a ligao com a glicose, se transforma em uma cetamina estvel,
denominada genericamente frutosamina. Por sua meia-vida ser pequena, de cerca de 30 dias, os resultados
obtidos indicam a mdia das glicemias nas 2 ltimas semanas. Os valores podem ser alterados em
situaes de perda ou diminuio da meia-vida das protenas. A frutosamina se mostra elevada em todos os
casos de diabetes fora de controle metablico, independentemente dos valores da glicemia de jejum. Seus
valores retornam aos nveis de referncia 20 dias aps a estabilizao da glicemia. til no
acompanhamento de casos de pacientes portadores de hemoglobinopatias que interferem na dosagem da
hemoglobina glicosilada.
PRINCPIO DA REAO
A glicose se liga aos grupamentos amino das protenas formando uma base de Schiff (aldimina), que aps
um rearranjo molecular, transforma-se em uma cetoamina estvel denominada genericamente
frutosamina1. Em pH alcalino a frutosamina convertida forma enlica, que reduz o azul de nitrotetrazlio
a um "formazan prpura. A medida da diferena de absorbncia, aps incubao aos 10 e 15 minutos,
proporcional concentrao de frutosamina na amostra2. A calibrao do sistema realizada com
calibrador de matriz bovina, calibrado com polilisina glicada. Os resultados so expressos em
micromoles/litro (mol/L).
APRESENTAO
Ref.
97.1 - Reagente 1
97.2 - Reagente 2
97.3 - Calibrador
97-6/15
6 x 9 mL
6 x 6 mL
1 x 2 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Reduo NBT; Polilisina glicada
Reao:
Cintica de 2 pontos
Sistema:
Monorreagente
Aplicao:
Comprimento de onda: 530 nm (510 a 540 nm)
Amostra:
Soro, Plasma (heparina ou EDTA) sem hemlise
Linearidade:
entre 20 e 800 mol/L
Erro Total: 6,80%
Bias: 2,60%
CVa: 2,60%
Bibliografia:
CALIBRAO
Realizar a calibrao utilizando o Calibrador Ref. 97.3. A concentrao do calibrador est impressa no rtulo
do frasco, podendo variar de lote a lote.
Absorbncia do Reagente: 0,020
do Reagente 1 com 1 volume do Reagente 2. Estvel 30 dias entre 2 a 8 C.
O Reagente de Trabalho uma soluo alcalina (pH=10,3) e, como tal, instvel quando exposto
temperatura ambiente. Portanto este reagente pode ter seu desempenho comprometido, de modo
imprevisvel, se mantido aberto, seja no analisador automtico, seja na bancada.
20/09/2010
FRUTOSAMINA Ref. 97
ORIENTAES
Outros nomes: Protenas glicosiladas. Albumina e globulinas glicosiladas.
NBT - sigla do Nitro Blue Tetrazolium.
- O procedimento deve ser rigoroso em relao ao intervalo de tempo entre a mistura da amostra com o
reagente, a homogeneizao apropriada e a aspirao da mistura para o analisador.
- Homogeneizao com fora excessiva promove a formao de bolhas de ar que podem prejudicar o
- A mistura de reao aspirada para a cubeta no pode conter bolhas de ar.
O resultado de Frutosamina obtido em micromol/L no pode ser convertido para mmol/L ou vice-versa
porque a metodologia e o padro primrio utilizados na calibrao do padro de trabalho so muito
diferentes em cada um dos casos. A sensibilidade de cada mtodo no permite que faamos esta
converso.
Para calibrar o padro de trabalho em mmol/L utilizada a tcnica proposta por Jonhson et al., na qual o
padro primrio utilizado a 1-deoxy-1-morpholino-fructose (padro de baixo peso molecular), baseada na
atividade redutora dos produtos de reao de Amadori. Devido s propriedades redutoras dos padres de
baixo peso molecular, ocorre uma glicao de aminas secundrias nesta tcnica, o que torna esta glicao
diferente da glicao fisiolgica. Dessa forma, os valores de frutosamina obtidos com este procedimento
no representam os valores reais das protenas glicadas presentes no soro humano.
J a tcnica em que o padro de trabalho calibrado em micromol/L, o padro primrio utilizado de alto
peso molecular, como por exemplo, albumina humana e polilisina glicadas. A glicao especfica da
frutosamina sinttica, neste caso, determinada por radioatividade e anlise elementar de carbono e
nitrognio, o que minimiza as interferncias.
Literaturas:
- Schleicher and Vogt. Stardardization of Serum fructosamine assay. Clinical Chemistry 36/1, 136-139
(1990)
- Jonhson et al. Fructosamine: a new approach to the estimation of serum glycosyl protein. Clin. Chim.
Acta 1983; 127:87-95.
Absorbncia
Tempo (min)
20/09/2010
Gama GT Liquiform - Ref. 105

A gama glutamil transpeptidase ou transferase (GGT) una enzima presente nas membranas celulares e
nas fraes microssmicas que participam no transporte de aminocidos atravs da membrana celular. Est
presente em ordem decrescente de abundancia no tbulo proximal renal, fgado, pncreas e intestino. Os
nveis sricos da GGT so principalmente de origem heptica. Sua meia-vida de 7 a 10 dias, aumentando
para 28 dias nas leses hepticas ligadas ao lcool.
PRINCIPIO DA REAO
A Gama GT cataliza a transferncia do grupamento glutamil de L--glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida para a
glicilglicina, formando L--glutamilglicilglicina e p-nitroanilina, de acordo com a seguinte reao:
Gama GT
L--glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida + Glicilglicina L--glutamilglicilglicina + p-nitroanilina.
A quantidade formada de p-nitroanilina, que apresenta elevada absorbncia em 405 nm, diretamente
proporcional a atividade da Gama GT na amostra.
APRESENTAO
Ref.
105-2/30
105.1 - Reagente 1
2 x 24 mL
105.2 - Reagente 2
2 x 6 mL
105.3 - Padro
1 x 3 mL
105-2/50
2 x 40 mL
2 x 10 mL
1 x 3 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Reao:
Szasz modificado; Cintica UV - IFCC; p-nitroanilina; Glicilglicina.

Cintica Continua (sistema semi-automtico e automtco)
Cintica Tempo Fixo (sistema manual e semi-automtico)
Sistema:
Mono ou Birreagente
Aplicao:
Comprimento de onda: 405 nm
Amostra:
Linearidade:
400 U/L
Erro Total: 11,1%
Bias: 5,40%
CVa: 3,50%
Bibliografia:
CALIBRAO
Fator =
20/09/2010
x Fator utilizado
1
Gama GT Liquiform - Ref. 105

Transferir o contedo de um frasco de Reagente 2 (n 2) para um frasco de Reagente 1 (n 1) ou
misturar 4 volumes do Reagente 1 com 1 volume do Reagente 2. Estvel 14 dias entre 2 a 8 C.
ORIENTAES
Nos testes enzimticos, quando se trabalha com Reagentes e controles de fabricantes diferentes, os
desde que o laboratorio determine sua prpria mdia.
de fundamental importncia que sejam observadas as absorbncias medidas pelo analisador.
Um teste somente com o Reagente de Trabalho fornece a informao sobre suas condies. A
absorbncia inicial geralmente em torno de 0,600 para Reagentes recm preparados. A atividade do
Reagente no deve ser maior que 10 U/L, uma atividade maior pode indicar sujeira no sistema de fluxo e na
cubeta.
Absorbncia
REAO CINTICA CONTINUA CRESCENTE
2
1
Tempo (min)
20/09/2010
GLICOSE HK Liquiform Ref. 85

A glicose ou dextrose um carboidrato do tipo monossacardeo. Cristal slido de sabor adocicado, de
formula molecular C6H12O6 , encontrado na natureza na forma livre ou combinada. Juntamente com a
frutose e a galactose, o carboidrato fundamental de carboidratos maiores, como sacarose e maltose.
Amido e celulose so polmeros de glicose.
No metabolismo, a glicose uma das principais fontes de energia e fornece 4 calorias de energia por
grama.
PRINCPIO DA REAO
A adenosina trifosfato promove a fosforilao da glicose em uma reao catalisada pela hexoquinase (HK),
de acordo com a seguinte reao:
HK
Glicose + ATP Glicose-6-fosfato + ADP
A glicose-6-fosfato, produzida na reao anterior oxidada a 6-fosfogluconato na presena da nicotinamida
adenina dinucletide (NAD), em reao catalisada especificamente pela glicose-6-fosfato desidrogenase (G6-PDH). Ocorre a produo de um mol de NADH para cada mol de glicose-6-fosfato que oxidado. A
absorbncia resultante, medida em 340 nm, diretamente proporcional concentrao da glicose na
amostra.
G-6-PDH
Glicose-6-fosfato + NAD 6-Fosfogluconato + NADH
APRESENTAO
Ref.
85-4/50
85.1 - Reagente 1
4 x 40 mL
85.2 - Reagente 2
4 x 10 mL
85.3 - Padro - 100 mg/dL
1 x 5 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Bondar e Mead modificado; glicose hexokinase
Reao:
Sistema:
Mono ou Birreagente
Comprimento Onda:
340 nm
Aplicao:
Amostra:
Plasma ou soro (ver Instrues de Uso)
Linearidade:
700 mg/dL
Erro Total: 6,90%
Bias: 2,85%
CVa: 2,20%
Bibliografia:
CALIBRAO
Liquido amnitico: Feto imaturo
Inconclusivo
Feto maduro
20/09/2010
> 15 mg/dL
10 a 15 mg/dL
< 10 mg/dL
1
GLICOSE HK Liquiform Ref. 85

Em indivduos sadios, a pequena quantidade de lquido presente nas cavidades articular, pleural e
peritoneal originada de ultrafiltrado do plasma. Portanto, pode-se considerar que, praticamente, a glicose
ali presente est na mesma concentrao do plasma.
Transferir o contedo de um frasco de Reagente 2 para um frasco de Reagente 1 ou misturar 4 volumes
do Reagente 1 com 1 volume do Reagente 2. Estvel 60 dias entre 2 a 8 C.
No utilizar o Reagente de Trabalho quando sua absorbncia medida contra a gua em 340 nm for igual
ou maior que 0,350 ou quando mostrar-se turvo ou com sinais de contaminao.
ORIENTAES
Os critrios para diagnstico de pr diabetes e diabetes podem ser obtidos em: American Diabetes
Association. Diabetes Care 2006; (suppl 29): S43-S48
Amostras de sangue no contendo antiglicoltico devem ser centrifugadas imediatamente aps a coleta e
o plasma ou soro separados das clulas ou cogulo.
Nas amostras de sangue tratadas com antiglicoltico a concentrao da glicose permanece estvel at 8
horas.
Em outros lquidos biolgicos (lquor e lquidos asctico, pleural e sinovial) adicionar anticoagulante
contendo antiglicoltico na mesma proporo usada para a amostra de sangue e centrifugar antes de
realizar a dosagem.
No plasma, soro e outros lquidos separados das clulas, a glicose permanece estvel durante 3 dias
entre 2 a 8 C.
cido Ascrbico em concentraes acima de 100 mg/dL interfere na reao produzindo resultados
falsamente reduzidos. Se houver suspeita de cido ascrbico em concentrao menor que 100 mg/dL,
deixar o plasma ou soro em repouso durante 90 minutos antes de iniciar a dosagem.
Nas 24 horas que sucedem a ingesto aguda de lcool ocorre significativa reduo da glicemia.
Redues significativas so observadas em indivduos submetidos a jejum prolongado ou em obesos
tratados com dietas com baixo valor calrico.
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
GLICOSE PAP Liquiform Ref. 84

A glicose ou dextrose um carboidrato do tipo monossacardeo. Cristal slido de sabor adocicado, de
formula molecular C6H12O6 , encontrado na natureza na forma livre ou combinada. Juntamente com a
frutose e a galactose, o carboidrato fundamental de carboidratos maiores, como sacarose e maltose.
Amido e celulose so polmeros de glicose.
No metabolismo, a glicose uma das principais fontes de energia e fornece 4 calorias de energia por
grama.
PRINCPIO DA REAO
A glicose oxidase catalisa a oxidao da glicose de acordo com a seguinte reao:
GOD
Glicose + O2 + H2O
cido Glucnico + H2O2
O perxido de hidrognio formado reage com 4-aminoantipirina e fenol, sob ao catalisadora da

peroxidase, atravs de uma reao oxidativa de acoplamento formando uma antipirilquinonimina vermelha
cuja intensidade de cor proporcional concentrao da glicose na amostra.
POD
2H2O2 + 4-Aminoantipirina + fenol
Antipirilquinonimina + 4H2O
APRESENTAO
Ref.
84.1 - Reagente 1
84.2 - Padro - 100 mg/dL
84- 1/500
1 x 500 mL
1 x 5 mL
84-2/500
2 x 500 mL
1 x 5 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Enzimtico Trinder; glicose oxidase
Reao:
Sistema:
Monorreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
505 nm (490 a 540)
Amostra:
Plasma ou soro (ver Instrues de Uso)
Linearidade:
500 mg/dL
Erro Total: 6,90%
Bias: 2,85%
CVa: 2,20%
Bibliografia:
CALIBRAO
Liquido amnitico: Feto imaturo > 15 mg/dL
Inconclusivo
10 a 15 mg/dL
Feto maduro < 10 mg/dL
Em indivduos sadios, a pequena quantidade de lquido presente nas cavidades articular, pleural e
peritoneal originada de ultrafiltrado do plasma. Portanto, pode-se considerar que, praticamente, a glicose
ali presente est na mesma concentrao do plasma.
20/09/2010
GLICOSE PAP Liquiform Ref. 84

ORIENTAES
Os critrios para diagnstico de pr diabetes e diabetes podem ser obtidos em: American Diabetes
Association. Diabetes Care 2006; (suppl 29): S43-S48
Nas 24 horas que sucedem a ingesto aguda de lcool ocorre significativa reduo da glicemia.
Redues significativas so observadas em indivduos submetidos a jejum prolongado ou em obesos
tratados com dietas com baixo valor calrico.
Como a velocidade de reao do padro, calibradores e amostras equivalente, pode-se fazer uma
cintica de 2 pontos na reao da Glicose PAP.
A reao cintica deve ser utilizada para minimizar a interferncia de amostras lipmicas.
CUIDADOS COM A AMOSTRA
Amostras de sangue no contendo antiglicoltico devem ser centrifugadas imediatamente aps a coleta e
o plasma ou soro separados das clulas ou cogulo.
Nas amostras de sangue tratadas com antiglicoltico a concentrao da glicose permanece estvel at 8
horas.
Em outros lquidos biolgicos (lquor e lquidos asctico, pleural e sinovial) adicionar anticoagulante
contendo antiglicoltico na mesma proporo usada para a amostra de sangue e centrifugar antes de
realizar a dosagem.
No plasma, soro e outros lquidos separados das clulas, a glicose permanece estvel durante 3 dias
entre 2 a 8 C.
cido Ascrbico em concentraes acima de 100 mg/dL interfere na reao produzindo resultados
falsamente reduzidos. Se houver suspeita de cido ascrbico em concentrao menor que 100 mg/dL,
deixar o plasma ou soro em repouso durante 90 minutos antes de iniciar a dosagem.
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
GLISTAB - Ref. 29
Soluo anticoagulante inibidora da gliclise.
APRESENTAO
Ref.
Glistab
29
1 x 20 mL
29E
1 x 200 mL
TEMPERATURA DE ARMAZENAMENTO
15 - 25 C
ORIENTAES
Contm EDTA dissdico 6,0 g/dL e Fluoreto de Potssio 12 g/dL
EDTA previne a coagulao ligando se ao clcio que essencial para o mecanismo de coagulao.
Fluoreto de Sdio preservativo da glicose, inibindo o sistema enzimtico envolvido na gliclise.
Orientao de Uso:
Volume de Amostra 3,0 mL
Volume de Glistab 1 gota
Os volumes de amostra e Glistab podem ser mudados proporcionalmente (considerar 1 gota como
sendo 50 microlitros):
1,5 mL amostra e 0,025 mL Glistab
1,2 mL amostra e 0,020 mL Glistab
A colocao prvia do Glistab em tubos de coleta pode causar perda parcial do anticoagulante.
- Quando realizar este procedimento adotar mecanismos com o objetivo de garantir que toda a soluo
ser utilizada.
15/01/2009
HDL LE Ref. 98
em nosso sangue atravs de partculas chamadas de lipoprotenas. Trs das lipoprotenas comuns so:
lipoprotenas de baixa densidade (LDL), lipoprotenas de alta densidade (HDL), e lipoprotenas de muita
baixa densidade (VLDL). A frao do colesterol LDL transporta o colesterol para o organismo, depositandoo nas artrias. A poro do colesterol HDL remove o colesterol da corrente sangnea, evitando o seu
depsito nas artrias.
PRINCPIO DA REAO
Na primeira fase da reao, o colesterol livre das partculas no HDL submetido a uma reao enzimtica
catalisada pela Colesterol oxidase (CO) na presena de Acelerador. O perxido de hidrognio produzido
consumido por uma reao da peroxidase com disulfobutilmetatoluidina sdica (DSBmT) formando um
produto incolor.
A segunda reao utiliza um detergente capaz de solubilizar especificamente o colesterol HDL. Com a ao
das enzimas colesterol esterase (CE) e colesterol oxidase e acoplamento com 4-aminoantipirina e o
cromognio DSBmT, em reao catalisada pela peroxidase, ocorre o desenvolvimento de colorao
proporcional concentrao de colesterol HDL na amostra.
Acelerador +CO
HDL, LDL, VLDL e Quilomicrons
LDL, Quilomicrons + HDL e VLDL no reagentes

DSBmT+Peroxidase
HDL
Detergente seletivo
Colesterol HDL solubilizado
Colesterol esterase
Colestenona + H2O2
Colesterol HDL solubilizado

Colesterol oxidase
Peroxidase
H2O2 + DSBmT + 4-aminoantipirina
APRESENTAO
Ref.
98.1 - Polinion
98.2 - Enzimas
98.3 - Calibrador
98-80
1 x 60 mL
1 x 20 mL
1 x 1,0 mL
98-320
1 x 240 mL
1 x 80 mL
1 x 1,0 mL
Temperatura Armazenamento 2 - 8 C
ESPECIFICAES
Metodologia:
Inibio Seletiva
Reao:
Ponto Final
Sistema:
Birreagente
Aplicao:
Semi-automtico* e automtico
Comprimento Onda:
600 nm
Amostra:
Soro ou Plasma (heparina e EDTA)
Linearidade:
entre 2 e 200 mg/dL
Erro Total: 12,8%
Bias: 5,0%
CVa: 4,0%
CALIBRAO
Realizar a calibrao utilizando o Calibrador Ref. 98.3. Ver concentrao no rtulo do frasco.
20/09/2010
HDL LE Ref. 98
ORIENTAES
O produto necessita de equipamento que pipete 2 reagentes.
*Para uso em equipamento semiautomtico o numero de testes ser reduzido.
torniquete.
Para clculo do Colesterol LDL e VLDL, pode ser utilizada a equao de Friedewald que exata para
amostras cujas concentraes de Triglicrides no ultrapassem 400 mg/dL e no pertenam a pacientes
portadores de lipoproteinemia do Tipo III.
Sugerimos o uso do produto LDL Liquiform Ref. 111.
EQUAO DE FRIEDEWALD
Colesterol VLDL =
Triglicrides ( mg / dL )
5
Colesterol LDL = Colesterol Total (Colesterol HDL + Colesterol VLDL)

CLCULO DO NDICE DE CASTELLI I (Risco Aterognico)
Desejvel:
Homens: at 4,9
Mulheres: at 4,3

Desejvel:

Homens: at 3,3
Mulheres: at 2,9
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura A2
Leitura A1
Adio R1
e Amostra
20/09/2010
Adio R2
Tempo (min)
HEMOGLOBINA GLICADA Ref. 17

A hemoglobina a molcula especializada no transporte de oxignio dos pulmes at os tecidos do corpo.
Em todas as pessoas, a glicose absorvida dos alimentos circula no sangue junto com a hemoglobina, e o
contato entre as duas molculas faz com que algumas molculas de glicose se liguem definitivamente a
molculas de hemoglobina, originando assim a Hemoglobina Glicada. Quanto maiores o nvel de glicose
no sangue, maior tender a ser a proporo de Hemoglobina Glicada com relao Hemoglobina total nas
hemcias.
PRINCPIO DA REAO
A resina de troca inica, carregada negativamente, exibe uma afinidade por molculas com carga positiva.
Em fora inica e pH selecionados, a hemoglobina glicada (HbG) tem carga positiva menor que a
hemoglobina Ao e se liga mais fracamente resina. A aplicao do tampo Hb-Rpida (n 1) promove a
eluio da hemoglobina glicada (HbG), ficando as outras hemoglobinas retidas na resina.
A medida espectrofotomtrica do eluato (HbG) e da hemoglobina total (Hb Total) permite o clculo da
percentagem de HbG na amostra.
APRESENTAO
Ref.
17.1 - Tampo Hb-rpida
17.2 - Hemolisante
17.3 - Colunas
17
1 x 100 mL
1 x 12 mL
25 unidades
ESPECIFICAES
Metodologia:
Trivelli modificado; cromatografia troca inica
Reao:
Cromatografia de troca inica com leitura de Ponto Final
Aplicao:
Manual e semi-automtico.
Comprimento Onda:
415 nm (405 a 430)
Amostra:
Sangue total colhido com EDTA
Linearidade:
30%
Volume de Reagente e Amostra: Ver procedimento nas Instrues de Uso
NGSP (National Glycohemoglobin Standardization Program: 1 ponto percentual
ORIENTAES
O produto dosa a hemoglobina A1 total.
No h necessidade de jejum.
Amostras coletadas com heparina podem fornecer resultados falsamente elevados.
Todos os reagentes devem estar na mesma temperatura do ambiente em que ser realizado o teste.
No realizar o teste em temperatura inferior a 16 C ou superior a 30 C.
Para a correo do resultado, a temperatura deve ser medida, com um termmetro de imerso, no
lquido que drenou da coluna. Nunca medir a temperatura no ambiente.
Os tubos de ensaio utilizados no teste devem ser altos o suficiente para que a coluna no toque o lquido
drenado.
O hemolisado aplicado na coluna penetrar na mesma, ficando restrito na parte superior. Ao aplicar o
tampo Hb-Rpida haver a eluio da hemoglobina glicada.
Tomar cuidado para no ressuspender a resina ao colocar o Tampo Hb Rpida. A ressuspenso da
resina leva a resultados diminudos.
Resultados maiores que 20%, apresentam absorbncia A1 maior que a absorbncia A2 .
No podem ser utilizados regentes de lotes diferentes, principalmente Tampo (17.1) de um lote e
colunas de outro lote.
20/09/2010
HEMOGLOBINA GLICADA Ref. 17

PIPETAS AUTOMTICAS (PA)
Quando as pipetas automticas (PA) de 0,02 e de 0,05 mL no esto com aferio equivalente, pode
haver um erro no resultado final.
Para verificar a equivalncia das PA, realizar o teste do tubo A2 (Hb total) com o procedimento habitual e
em paralelo realizar o teste do tubo A2 (Hb total) com 17,5 mL de gua e 0,05 mL do hemolisado (ou com
7,0 mL de gua e 0,05 mL do hemolisado, neste caso dividindo a absorbncia obtida por 2,5). Comparar as
absorbncias obtidas. Havendo diferena significativa podemos inferir que h uma diferena entre as PA de
0,020 e 0,050 mL.
ANALISADORES SEMI-AUTOMTICOS:
O resultado do teste dado em percentagem da Hemoglobina Glicada em relao Hemoglobina total.
Como a concentrao da hemoglobina varia entre as amostras, cada amostra dever ser padronizada
individualmente utilizando o tubo 2 (Hb-total) como padro, que equivale a 20%.
O resultado liberado no analisador deve ser corrigido pela temperatura. necessrio multiplicar o
resultado liberado pelo fator de correo de temperatura.
20/09/2010
HEMOGLOBINA- Ref. 43
A hemoglobina a protena que d a cor vermelha ao sangue. Ela tambm responsvel pelo transporte
do oxignio para todos os tecidos do corpo humano.
PRINCPIO DA REAO
O Fe (II) do grupo heme da hemoglobina, oxihemoglobina e carboxihemoglobina oxidado ao estado frrico
pelo ferricianeto formando hemiglobina (Hi), que se combina com o cianeto ionizado para produzir cianeto
de hemiglobina (HiCN).
APRESENTAO
Ref.
43.1 - Reagente de Cor - Estoque
43
2 x 10 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Cianeto de Hemiglobina (HiCN)
Reao:
Ponto Final
Sistema:
Monorreagente
Comprimento Onda:
540 nm (520 a 550)
Aplicao:
Amostra:
Sangue total (citrato, EDTA ou oxalato)
Linearidade:
25 g/dL
Erro Total: 4,10%
Bias: 1,80%
CVa: 1,40%
Bibliografia:
CALIBRAO
Realizar a calibrao utilizando o Padro de Hemoglobina Ref. 47.
Fator de Calibrao: 36,8
PREPARO DO REAGENTE DE COR DE USO
- Adicionar o contedo de 1 frasco do Reagente de Cor - Estoque (10 mL) a 990 mL de gua destilada ou
deionizada (Tipo II) e misturar.
- A qualidade da gua utilizada essencial para o bom desempenho do reagente.
- Estvel por 6 meses em frasco de vidro mbar, entre 15 e 30 C.
NO REFRIGERAR.
- No armazenar em frasco plstico.
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
HEMSTAB Ref. 30
Soluo anticoagulante para hematologia.
APRESENTAO
Ref.
Hemstab
30
1 x 20 mL
30E
1 x 200 mL
TEMPERATURA DE ARMAZENAMENTO:
15 - 25 C
ORIENTAES
EDTA previne a coagulao se ligando ao clcio que essencial para o mecanismo de coagulao.
Contm EDTA dipotssico 15,0 g/dL
Orientao de Uso:
Volume Amostra 5,0 mL
Volume Reagente 1 gota
Os volumes de amostra e Hemstab podem ser mudados proporcionalmente (considerar 1 gota como
sendo 50 microlitros):
2,5 mL amostra e 0,025 mL Hemstab
A colocao prvia do Hemstab em tubos de coleta pode causar perda parcial do anticoagulante.
ser utilizada.
03/04/2009
HIV - Ref. 110

O Vrus da Imunodeficincia Humana, conhecido como HIV (sigla originada do ingls: Human
Immunodeficiency Virus), um vrus pertencente classe dos retrovrus e causador da AIDS. Ao entrar no
organismo humano, esse vrus pode ficar silencioso e incubado por muitos anos. Esta fase denomina-se
assintomtica e relaciona-se ao quadro em que uma pessoa infectada no apresenta nenhum sintoma ou
sinal da doena. O perodo entre a infeco pelo HIV e a manifestao dos primeiros sintomas da AIDS ir
depender, principalmente, do estado de sade da pessoa.
PRINCPIO DA REAO
O sistema consiste em uma membrana com antgenos recombinantes de HIV-1/O e HIV-2 (gp41 e gp36)
imobilizados na linha teste e um anticorpo anti-IgG imobilizado na linha controle. Na execuo do teste, a
amostra colocada para reagir com um conjugado composto de partculas de ouro coloidal marcadas com
antgenos recombinantes de HIV-1/2/O e partculas de ouro coloidal marcadas com IgG. Com a adio da
soluo diluente, a mistura amostra-conjugado se move cromatograficamente na membrana por ao
capilar. Na existncia de anticorpos anti-HIV/1/2/O na amostra, uma linha colorida se forma na regio teste,
onde os antgenos de HIV esto imobilizados, significando um resultado positivo. Como a mistura continua a
migrar na membrana, ocorre a formao de uma segunda linha colorida na regio controle, onde est
aplicado o anticorpo anti-IgG, confirmando que o teste se processou adequadamente.
APRESENTAO
Ref.
110-10
110-20
110-40
Placas Reao
10
20
40
Diluente
1 x 1,5 mL
1 x 3,0 mL
1 x 6,0 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Amostra:
Imunocromatografia
Soro, plasma ou sangue total.
ORIENTAES PARA O TESTE

O sistema HIV - Labtest detecta anticorpos anti-HIV-1/2/O, utilizando antgenos recombinantes do vrus.
Estudos realizados demonstram que o sistema no apresenta resultados falsamente positivos em
amostras positivas para anti-HTLV, anti-HCV, anti-T.cruzi, Sfilis, anti-HBc ou HBsAg.
No misturar reagentes de lotes diferentes.
A amostra de sangue total no deve ser congelada.
Assegurar que as amostras estejam descongeladas e homogeneizadas antes da sua utilizao.
As amostras no devem ser inativadas pelo calor, pois podem produzir resultados incorretos.
No considerar resultados positivos quando a linha na posio teste se mostrar visvel apenas
depois de decorridos 15 minutos do incio do teste.
Toda amostra deve ser avaliada com dois testes rpidos de marcas diferentes. Caso os dois testes
apresentem resultado positivo, a amostra deve ser considerada positiva para HIV. Se os dois testes
apresenttaem resultado negativo, a amostra deve ser considerada negativa para HIV. Entretanto, se os
testes forem discordantes, um terceiro teste deve ser utilizado para confirmao do resultado.
Brasil. Ministrio da Sade. Secretaria de Vigilncia em Sade. Portaria n 34, de 28 de julho de

2005. Dispe sobre o uso de testes rpidos para diagnstico da infeco pelo HIV em situaes especiais.
Dirio Oficial da Unio da Repblica Federativa do Brasil, Braslia, 29 jul. 2005. Disponvel em
<www.saude.gov.br/svs/>.
20/09/2010
IBC Liquiform- Ref. 92

A transferrina ou siderofilina srica a protena transportadora do ferro no soro. O seu grau de saturao
marcial varia conforme a patologia envolvendo o metabolismo do ferro.
PRINCPIO DA REAO
Os ons frricos contidos no Reagente 1 saturam os stios disponveis para a ligao de ferro da protena
transportadora transferrina. O excesso de ferro no ligado forma com o Ferrozine presente no Reagente 2
um complexo magenta brilhante cuja absorbncia, medida entre 540 e 580 nm. A diferena entre esta
quantidade de ferro e aquela contida no reagente 1 a Capacidade Latente de Ligao do Ferro (CLLF).
Medindo-se a concentrao de ferro srico e somando este valor com a CLLF obtm-se a Capacidade Total
de Ligao de Ferro (CTLF).
APRESENTAO
Ref.
92.1 - Reagente 1
92.2 - Reagente 2
92.3 - Calibrador
92-2/65C
2 x 50 mL
2 x 15 mL
1 x 3 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Labtest-Ferrozine
Reao:
Ponto Final com branco de amostra
Sistema:
Birreagente
Aplicao:
Automtico.
Comprimento dOonda: 560 nm (540 a 580)
Amostra:
Soro (sem hemlise)
Linearidade:
500 g/dL
Relao Amostra / Reagente: 1:10,5
Erro Total: 15,3%
Bias: 4,40%
CVa: 6,60%
Bibliografia:
CALIBRAO
Realizar a calibrao utilizando o Calibrador Ref. 92.3 (ver concentrao no rtulo do frasco).
Absorbncia do Reagente: 0,630 a 0,770
ORIENTAES
O produto IBC Liquiform indicado para uso em equipamentos automticos.
Em equipamentos semi-automticos o teste deve ser realizado de acordo com o procedimento constante
nas Instrues de Uso do produto. Pelo modelo utilizado no teste a aplicao para estes equipamentos
dificultada.
A amostra deve ser colhida pela manh visando evitar as variaes diurnas do ferro que podem produzir
redues de at 30% nos resultados.
Idade, sexo, perodo de gestao, uso de contraceptivos orais e estrognio alteram as concentraes do
ferro srico e podem modificar os valores da capacidade de ligao de ferro.
Cada 1,0 mg/dL de hemoglobina srica aumenta o Ferro srico em 3,4688 g/dL.
A limpeza e secagem do material utilizado so fatores fundamentais para a estabilidade dos reagentes e
obteno de resultados corretos.
20/09/2010
IBC Liquiform- Ref. 92

CUIDADOS COM CONTAMINAO
deionizada.
momento do uso.
Absorbncia
Leitura A1
Adio R1
e Amostra
20/09/2010
Adio R2
Leitura A2
Tempo (min)
LACTATO Liquiform - Ref. 116

O lactato produzido pelo organismo aps a queima da glicose (gliclise), para o fornecimento de energia
sem a presena de oxignio (metabolismo anaerbico lctico). Em atividades fsicas de longa durao, o
suprimento de oxignio nem sempre suficiente. O organismo busca esta energia em fontes alternativas,
produzindo o lactato.
PRINCPIO DA REAO
O lactato determinado de acordo com as seguintes reaes:
Lactato
Piruvato + H2O2
L - Lactato + O2
Oxidase
Peroxidase
2 H2O2 + TOOS + 4 Aminoantipirina
Quinoneimina + 4 H2O
Na presena de oxignio, a lactato oxidase catalisa a oxidao do cido ltico, promovendo a formao de
piruvato e perxido de hidrognio. Em seguida, ocorre uma reao de acoplamento entre o perxido de
hidrognio, 4-aminoantipirina e TOOS, catalisada pela peroxidase, produzindo uma quinoneimina que tem
mximo de absorbncia em 550 nm.
A intensidade da cor do produto da reao diretamente proporcional concentrao do lactato na
amostra.
APRESENTAO
Ref.
116.1 - Reagente 1
116-2 - Reagente 2
116- 1/40
1x 25 mL
1x 15 mL
1 x 5 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Enzimtico - Trinder
Reao:
Enzimtica de Ponto Final
Sistema:
Monorreagente
Aplicao:
Manual, Semi-automtico e automtico
Comprimento Onda:
550 nm (530 a 570)
Amostra:
Plasma (fluoreto) ou lquido cefalorraquidiano.
Linearidade:
At 120 mg/dL
Erro Total: 15,2%
Bias: 4,0%
CVa: 6,8%
Bibliografia:
CALIBRAO
Realizar a calibrao utilizando o Padro de 40 mg/dL Ref. 116.3 ou Calibra Ref. 80.
20/09/2010
LACTATO Liquiform - Ref. 116

ORIENTAES
O desenvolvimento de colorao levemente rsea no Reagente de Trabalho normal e no afeta a sua
qualidade.
O fluoreto inibe a gliclise, sendo assim, responsvel pela estabilizao do lactato sanguneo.
O lquido cefalorraquidiano deve ser centrifugado e usado sem modificaes adicionais.
Recomendaes para preparo do paciente, obteno e processamento da amostra
Antes da realizao do procedimento de coleta de sangue o paciente deve permanecer em repouso por
pelo menos 30 minutos.
A coleta de sangue deve ser realizada preferencialmente sem garroteamento ou imediatamente aps a
aplicao do torniquete. Se a coleta no for completada logo aps a aplicao do torniquete, este ltimo
deve ser removido e a coleta s deve ser novamente iniciada aps 2 minutos. O paciente deve evitar
exercitar as mos e os braos imediatamente antes e durante o procedimento de coleta.
Aps a separao, o plasma estvel 8 horas entre 20 - 25 C, 14 dias entre 2 - 8 C ou 1 ms a -20 C.
A separao por centrifugao deve ser realizada dentro de no mximo 15 minutos
Absorbncia
REAO PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
LDH Liquiform - Ref. 86

A desidrogenase lctica (LDH) catalisa a converso reversvel de cido lctico muscular em cido pirvico,
um passo essencial nos processos metablicos que, em ltima anlise, produzem a energia celular. Em
razo da LDH estar presente em quase todos os tecidos corpreos e uma leso celular fazer com que a
LDH srica total se eleve, a medio de LDH tem valor diagnstico limitado.
PRINCPIO DA REAO
A atividade da LDH determinada de acordo com a seguinte reao:
LDH
Piruvato + NADH + H
Lactato + NAD
A LDH catalisa a converso do piruvato a lactato na presena de NADH. O decrscimo da absorbncia em

340 nm devido a oxidao do NADH proporcional atividade da LDH na amostra.
APRESENTAO
Ref.
86.1 - Reagente 1
86.2 - Reagente 2
86-2/30
2 x 24 mL
2 x 6 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Piruvato-Lactato
Reao:
Cintica Contnua
Sistema:
Mono ou Birreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
340 nm
Amostra:
Soro
Linearidade:
2000 U/L
Erro Total: 11,4%
Bias: 4,30%
CVa: 4,30%
Bibliografia:
CALIBRAO
Fator =
20/09/2010
x Fator utilizado

Transferir o contedo de um frasco do Reagente 2 para um frasco do Reagente 1 ou misturar 4 volumes do
Lquor (Centrifugar antes de realizar o teste. A atividade enzimtica estvel 6 horas entre 15 - 25 C).
20 a 48 U/L
Lquido Pleural (Centrifugar antes de realizar o teste):
Transudatos relao valor lquido pleural / valor soro < 0,6
Exudatos relao valor lquido pleural / valor soro > 0,6
ORIENTAES
A LDH uma enzima intracelular responsvel pela oxidao reversa do lactato em piruvato.
amplamente distribuda em todas as clulas do organismo, concentrando-se mais especialmente no
miocrdio, rim, fgado, hemcias e msculos. Possui cinco formas de isoenzimas distribudas da seguinte
forma:
LD1: miocrdio; eritrcitos; rins
LD2: rins, miocrdio, eritrcitos
LD3: bao, pulmes, rins
LD4: bao, pulmes, rins
LD5: fgado, msculos esquelticos, pulmes
A LDH encontra-se elevada em todas as situaes em que ocorre grande destruio celular.
Refrigerao ou congelamento da amostra pode desnaturar determinadas isoenzimas.
A deficincia da vitamina B12 causa a destruio dos precursores do eritrcito na medula ssea
(eritropoiese ineficaz), resultando no aumento da LDH em at 50 vezes o limite de referncia superior. Esta
elevao retorna rapidamente a valores normais aps tratamento.
No utilizar amostras hemolisadas pois obtm se valores falsamente elevados.
Nveis elevados de plaquetas podem levar a resultados falsamente elevados de LDH.
Para a limpeza do sistema de fluxo de equipamentos semi-automticos, usar quinzenalmente uma
soluo de hipoclorito de sdio a 2,5%, deixando agir por 15 minutos e enxaguando bem em seguida.
Para a medio da atividade enzimtica da Desidrogenase Lctica (LD) no sangue existem duas
metodologias distintas:
Metodologia onde a LD catalisa a reao reversvel lactato a piruvato na presena de NAD

que reduzido a NADH. (Desidrogenase Lctica - Labtest Ref. 37)
Metodologia onde a LD catalisa a converso do piruvato a lactato na presena de NADH que

oxidado a NAD. (LDH Liquiform Labtest Ref. 86)
20/09/2010

A reao Piruvato-Lactato proporciona melhor estabilidade do reagente e maior velocidade da
reao, enquanto que a velocidade da reao Lactato-Piruvato aproximadamente a metade da velocidade
da reao Piruvato-Lactato. Por essas razes de velocidade da reao necessrio utilizar um formato de
expresso do mtodo utilizado em testes de proficincia para que os laboratrios respondentes sejam
classificados corretamente.
Aps avaliao das formas utilizadas para designar os mtodos para Desidrogenase lctica, a Labtest
decidiu utilizar o formato que indica a direo da reao, porque descreve melhor a reao que ocorre
durante a medio da atividade enzimtica. Essa forma de expressar aquela utilizada na maioria das
descries das reaes para LD.
Absorbncia
REAO CINTICA CONTNUA

1
2
Tempo (min)
20/09/2010
LDL Liquiform Ref. 111

em nosso sangue atravs de partculas chamadas de lipoprotenas: lipoprotenas de baixa densidade (LDL),
lipoprotenas de alta densidade (HDL), e lipoprotenas de muita baixa densidade (VLDL). A frao do
colesterol LDL transporta o colesterol para o organismo, depositando-o nas artrias. A poro do colesterol
HDL, remove o colesterol da corrente sangnea, evitando o seu depsito nas artrias.
PRINCPIO DA REAO
Na primeira fase da reao, um surfactante especfico presente no Reagente 1 solubiliza os quilomcrons,
as lipoprotenas de alta densidade e as lipoprotenas de muito baixa densidade (HDL e VLDL). O colesterol
solubilizado consumido pela ao da colesterol esterase (CE) e colesterol oxidase (CO) em uma reao
no formadora de cor.
Na segunda fase, um surfactante presente no Reagente 2 solubiliza o colesterol da LDL, que hidrolisado
pela colesterol esterase a colesterol livre e cidos graxos. O colesterol livre oxidado pela colesterol
oxidase a colest-4-en-ona e perxido de hidrognio. Em seguida, ocorre uma reao de acoplamento entre
perxido de hidrognio, 4-aminoantipirina e disulfobutilmetatoluidina sdica (DSBmT), catalisada pela
peroxidase, produzindo uma quinoneimina que tem mximo de absorbncia em 546 nm.
Primeira fase:
CE + CO
LDL + HDL + VLDL + Quilomcrons + Surfactante 1
LDL + Produto incolor
Segunda fase:
CE
LDL + Surfactante 2
Colesterol + cidos graxos

CO
Colesterol + O2
Colest-4-en-ona + H2O2
Peroxidase
2 H2O2 + DSBmT + 4-Aminoantipirina
Quinoneimina + 4 H2O
APRESENTAO
Ref.
111.1 - Reagente 1
111.2 - Reagente 2
111.3 - Calibrador
111-1/40
1 x 30 mL
1 x 10 mL
1 x 1,0 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Surfactante Seletivo
Reao:
Ponto Final
Sistema:
Birreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
546 nm (540 a 550)
Amostra:
Soro ou plasma (heparina-ltio e EDTA)
Linearidade:
entre 6,6 e 992 mg/dL
Erro Total: 12,8%
Bias: 5,0%
CVa: 4,0%
CALIBRAO
Realizar a calibrao utilizando o Calibrador Ref. 111.3. Ver concentrao no rtulo do frasco.
20/09/2010
LDL Liquiform Ref. 111

ORIENTAES
torniquete.
CLCULO DO NDICE DE CASTELLI I (Risco Aterognico)
Desejvel:
Homens: at 4,9
Mulheres: at 4,3

Desejvel:

Homens: at 3,3
Mulheres: at 2,9
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura A2
Leitura A1
Adio R1
e Amostra
20/09/2010
Adio R2
Tempo (min)
LIPASE Liquiform - Ref. 107

A lipase a enzima digestiva produzida principalmente pelas clulas acinares do pncreas excrino. Tem o
papel fisiolgico de hidrolisar as longas cadeias de triglicerdeos no intestino delgado (liplise).
PRINCPIO DA REAO
O substrato cromognico 1-2-o-dilauril-rac-glicero-3-cido glutrico(6-metilresorufina)-ester clivado em
meio alcalino por ao cataltica da lipase e forma o 1-2-o-dilauril-rac-glicerol e o intermedirio instvel cido
glutrico-(6-metilresorufina)ester que se decompe espontaneamente no meio alcalino para formar cido
glutrico e metilresorufina (cor vermelha). A intensidade da cor vermelha formada diretamente
proporcional atividade da lipase na amostra.
Lipase
Substrato cromognico
1-2-o-dilauril-rac-glicerol + cido glutrico-(6-metilresorufina)ester.

decomposio
cido glutrico-(6-metilresorufina)ester
cido glutrico + metilresorufina

espontnea
APRESENTAO
Ref.
107.1 - Reagente 1
107.2 - Reagente 2
107- 3/16
3 x 10 mL
3 x 6 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Enzimtica colorimtrica
Reao:
Cintica 2 Pontos
Sistema:
Birreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
570 nm (550 a 600)
Amostra:
Linearidade:
entre 3,0 e 300 U/L
Erro Total: 29,1%
Bias: 10,1%
CVa: 11,6%
Bibliografia:
CALIBRAO
Lquido Asctico ou Lquido peritoneal: Na pancreatite encontra-se elevado em nveis maiores que no
soro.
ORIENTAES
Amostras com EDTA, citrato ou fluoreto produzem resultados diminudos por inibio da atividade da
lipase.
Codena, indometacina e morfina elevam a lipase.
A metodologia deve ser necessariamente realizada em formato bi-reagente e a ordem de adio:
Reagente 1, amostra e Reagente 2 no deve ser alterada.
20/09/2010
LIPASE Liquiform - Ref. 107
Absorbncia
REAO CINTICA 2 PONTOS
Tempo (min)
20/09/2010
MAGNSIO - Ref. 50
O magnsio o ction intracelular mais importante, depois do potssio. um elemento qumico essencial
para o homem. A maior parte do magnsio no organismo encontrada nos ossos e, seus ons
desempenham papeis de importncia na atividade de muitas coenzimas e, em reaes que dependem da
ATP. Tambm exerce um papel estrutural, o on de Mg2+ tem uma funo estabilizadora para a estrutura de
cadeias de ADN e ARN.
Dependendo do peso e da altura, a quantidade diria necessria e recomendada de 300 a 350 mg,
quantidade que se pode obter facilmente, j que encontrado na maioria dos alimentos, principalmente, nas
folhas verdes das hortalias, ricas em magnsio.
PRINCPIO DA REAO
Os ons Magnsio reagem com o magon sulfonado (cor azul) em meio alcalino formando um complexo de
cor rsea que proporcional quantidade dos ons Magnsio na amostra. A colorao nos tubos teste e
padro ser uma mistura de cores azul e rosa.
APRESENTAO
Ref.
50.1 - Tampo
50.2 - Magon Sulfonado
50-200
1 x 100 mL
1 x 100 mL
1 x 3 mL
50-400
2 x 100 mL
2 x 100 mL
1 x 3 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Labtest; magon sulfonado, azul de xilidil
Reao:
Ponto Final
Sistema:
Mono ou Birreagente
Comprimento Onda:
505 nm (500 a 540)
Aplicao:
Amostra:
Soro ou plasma (heparina), urina e lquor centrifugados
Linearidade:
4,5 mg/dL
Erro Total: 4,80%
Bias: 1,80%
CVa: 1,80%
Bibliografia:
CALIBRAO
Absorbncia do Reagente: 0,490 a 0,550
ORIENTAES
A homogeneizao no preparo do Reagente de Cor de Uso deve ser eficiente, para obteno de boa
reprodutibilidade nos resultados.
- Sugerimos o uso de copos descartveis (100 ou 200 mL) para preparo deste e de outros reagentes.
Em alguns fotmetros ou espectrofotmetros no se consegue acertar o zero com o branco de reagente.
Neste caso, acertar o zero do equipamento com gua, ler o branco do reagente, o padro e os testes.
Retirar da absorbncia obtida no padro e em cada teste a absorbncia obtida no tubo branco de reagente.
Realizar os clculos.
20/09/2010
MAGNSIO - Ref. 50
Amostras hemolisadas produzem resultados falsamente elevados devido liberao do magnsio das
hemcias. Esta interferncia no corrigida utilizando o branco da amostra, porque no somente uma
interferncia fotomtrica.
A amostra de urina de 24 horas deve ser colhida em frasco contendo 10 mL de HCl 50% para evitar a
precipitao do magnsio e do clcio.
O uso de detergente inico para limpar o material uma fonte de contaminao com ons magnsio.
elevados.
Influncias pr analticas:
Varia com alimentos que contenham magnsio.
Diminuio fisiolgica: dieta vegetariana
Aumento fisiolgico: Ingesto excessiva de lcool.

Quando o teste realizado em equipamento automtico:
O CO2 atmosfrico altera significativamente a estabilidade do Reagente de Cor. A utilizao do

reagente mantido em recipiente aberto por perodos superiores a oito horas obriga a realizao de nova
calibrao. A calibrao pode ser realizada com menor frequencia, semanalmente, quando se utiliza novo
reagente a cada oito horas sendo descartado o resduo anterior.
Como muito freqente a presena de ons Mg++ em vrios reagentes, para evitar contaminaes
sugerimos realizar a calibrao e o teste do Magnsio separado da rotina.
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
MUCOPROTENAS - Ref. 20
Mucoprotenas so glicoprotenas, tendo duas fraes : alfa-1-glicoprotena e alfa-2-macroglobulina.
Alfa-1-glicoprotena - Inibidora de agregao plaquetria. til no "screening" de diversas enfermidades,
tanto de rea cardiovascular e renal, como nos quadros infecciosos ou inflamatrios de qualquer
localizao.
Alfa - 2- macroglobulina - Funo inibidora de enzimas proteolticas, alm da provvel funo carreadora de
hormnio.
A dosagem das mucoprotenas importante para o diagnstico e acompanhamento de doena reumtica,
pois uma das ltimas provas a se normalizar.
A dosagem de mucoprotenas est sendo substituda pela dosagem de alfa-1-glicoprotenas.
PRINCPIO DA REAO
As mucoprotenas (seromucides) so separadas das protenas coagulveis pelo calor por precipitao
seletiva com soluo de cido perclrico. Realiza-se em seguida a precipitao das mucoprotenas do
filtrado com cido fosfotngstico e dosagem com o reagente de Folin-Ciocalteau atravs do contedo em
tirosina.
APRESENTAO
Ref.
20.1 - cido Perclrico
20.2 - cido Fosfotngstico
20.3 - Carbonato de Sdio - Estoque
20.4 - Reagente de Folin
20.5 - Padro
20
1 x 100 mL
1 x 16 mL
1 x 50 mL
1 x 10 mL
1 x 2 mL
20E
1 x 400 mL
1 x 60 mL
1 x 200 mL
1 x 40 mL
1 x 4 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Winsler modificado
Reao:
Ponto Final
Aplicao:
Comprimento Onda:
680 nm (640 a 700)
Amostra:
Soro
Linearidade:
15 mg/dL
Volume de Reagente e Amostra: Ver orientaes nas Instrues de Uso
CALIBRAO
ORIENTAES
O teste no aplicvel em analisadores automticos.
Para calcular o valor em mucoprotenas, multiplicar o valor em tirosina (mg/dL) pela constante 23,8.
Cada 100 mg de mucoprotenas contm aproximadamente 4,2 mg de Tirosina.
No utilizar plasma, pois obtm-se resultados falsamente diminudos.
A filtrao NO deve ser substituda pela centrifugao. Utilizar papel de filtro similar ao indicado nas
Instrues de Uso do produto
A concentrao do padro de Mucoprotenas de 40 mg/dL, mas para corrigir a diluio a que
submetida a amostra no procedimento de precipitao, utilizada a concentrao de 5 mg/dL para clculo.
A razo GPA/Muco aproximadamente igual a 25, ou seja, multiplicar a GPA por 0,04 estima o valor da
Muco (Mitre, L. Relevncia clnica e laboratorial da alfa-1-glicoprotena cida. Laes & Haes, 103: 94-6, 1996).
20/09/2010
MUCOPROTENAS - Ref. 20
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
PADRO DE BILIRRUBINA - Ref. 32

Reagente para a padronizao da medio da Bilirrubina - Labtest Ref. 31
APRESENTAO
Ref.
32.1 - Padro de Bilirrubina
32.2 - Diluente
32
1 x 0,3 mg
1 x 3,5 mL
2 - 8 C
ORIENTAES
Deve ser utilizado em conjunto com o produto Bilirrubina Labtest Ref. 31.
Concentrao da bilirrubina no padro: No frasco do padro tem 0,3 mg de Bilirrubina aderida sua
parede. Reconstituindo o padro com 3 mL do Diluente, a concentrao de Bilirrubina ser igual a 10
mg/dL. (0,3 mg/3 mL = 10 mg/100 mL)
A bilirrubina est aderida na parede do frasco, sendo difcil de visualizar.
O diluente (DMSO dimetilsulfxido) pode congelar em temperaturas baixas. Esperar voltar
temperatura ambiente, homogeneizar e utilizar.
A ampola do Diluente contm 3,5 mL de DMSO, que deve ser transferido para um tubo limpo e seco,
tomar 3,0 mL e adicionar ao frasco do padro.
Proteger o padro da ao da luz.
A estabilidade do Padro de Bilirrubina depois de reconstitudo de 12 horas entre 15 - 25 C e de 1
ms a 20 C negativos. Congelar e descongelar somente uma vez.
15/01/2009
PADRO DE HEMOGLOBINA - Ref. 47

Reagente para a padronizao da medio da hemoglobina.
APRESENTAO
Ref.
47.1 - Padro de Hemoglobina
47
1 x 1,0 mL
2 - 8 C
ORIENTAES
Deve ser utilizado com o produto Labtest Hemoglobina Ref. 43.
Transferir o contedo da ampola para o frasco anexo. Guardar o frasco bem vedado e na posio
vertical.
15/01/2009
PROTENAS TOTAIS - Ref. 99

As protenas so as molculas orgnicas mais abundantes e importantes nas clulas e perfazem 50% ou
mais de seu peso seco. So encontradas em todas as partes de todas as clulas, uma vez que so
fundamentais sob todos os aspectos da estrutura e funo celulares. Existem muitas espcies diferentes de
protenas, cada uma especializada para uma funo biolgica diversa. Alm disso, a maior parte da
informao gentica expressa pelas protenas.
PRINCPIO DA REAO
Os ons cobre (Cu+2) em meio alcalino (Reagente de Biureto) reagem com as ligaes peptdicas das
protenas sricas formando cor prpura, que tem absorbncia mxima em 545 nm, proporcional
concentrao das protenas na amostra
APRESENTAO
Ref.
99-100
99-250
99.1 - Reagente Biureto1 x 100 mL
1 x 250 mL
99.2 - Padro 4 g/dL
1 x 3 mL
1 x 3 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Biureto
Reao:
Ponto Final
Sistema:
Monorreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
545 nm (530 a 550)
Amostra:
Soro, Lquidos Asctico, Pleural e Sinovial
Linearidade:
entre 1,0 e 14,0 g/dL
Erro Total: 5,20%
Bias: 1,80%
CVa: 2,0%
Bibliografia:
CALIBRAO
Lquido Pleural Diferenciao de Exudato e Transudato
Transudato - Relao Lquido Pleural / Soro: < 0,5
Protenas no Lquido Pleural: < 3.0 g/dL
Exudato - Relao Lquido Pleural / Soro: > 0,5
Protenas no Lquido Pleural: > 3,0 g/dL
Lquido Asctico Diferenciao de Exudato e Transudato
Transudato: < 3,0 g/dL
Exudato: 3,0 g/dL
Lquido Sinovial: 1,0 a 3,0 g/dL
20/09/2010
PROTENAS TOTAIS - Ref. 99

ORIENTAES
O CO2 atmosfrico altera significativamente a estabilidade do Reagente de Biureto, quando o mesmo
mantido em recipiente aberto. A modificao da estabilidade influenciada pelo tempo de exposio e
condies ambientais.
Sugerimos manter na bandeja do analisador somente o volume suficiente para a realizao de uma corrida
analtica ou usar as informaes do controle da qualidade como indicador da necessidade de realizar nova
calibrao.
Globulinas = Protenas Totais Albumina
No usar plasma pois obtm-se valores mais elevados devido a presena de fibrinognio.
O torniquete quando mantido por mais de 3 minutos aumenta em 0,5 g/dL o valor da protena no sangue.
Soros hemolisados ou contendo expansores de plasma (Dextran, PVP e Hemacel) e uso de estrognios
e contraceptivos orais fornecem resultados falsamente elevados.
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
QUALITROL H
CONTROLE
No laboratrio clnico o controle (soro controle) desempenha o papel de aferidor da qualidade e
confiabilidade dos resultados obtidos. Os controles so utilizados para monitorar a preciso do ensaio.
DESCRIO
Qualitrol H uma preparao em matriz protica humana liofilizada, contendo vrios analitos cujos valores
foram ajustados atravs da adio de extratos de tecido de animal e outros constituintes no proticos
como materiais qumicos purificados. O Qualitrol H adequado para controle interno da qualidade em
ensaios de qumica clnica, imunologia, hormnios e drogas teraputicas.
O Qualitrol H adequado para controle interno da qualidade em ensaios de qumica clnica, imunologia,
hormnios e drogas teraputicas podendo ser aplicado na medida da impreciso analtica e na verificao
de desvios da calibrao dos processos quantitativos comumente utilizados no laboratrio clnico. Sua
utilizao representa um benefcio, pois permite a utilizao de um nico material de controle para um
nmero significativo de analitos no controle interno da qualidade.
A utilizao conjunta do Qualitrol 1 H e Qualitrol 2 H permite a verificao do estado da preciso dos vrios
analitos em nveis diferentes de concentrao, possibilitando a aplicao das regras mltiplas de Westgard
que so poderosas ferramentas para se obter ganhos de qualidade e produtividade, minimizando as
repeties desnecessrias ocasionadas por sinais de falsa rejeio que ocorrem freqentemente quando se
usa controle em um s nvel de concentrao.
O Qualitrol H pode ser usado com bastante sucesso na verificao da impreciso tanto em ensaios manuais
como automatizados.
APRESENTAO
Ref.
Qualitrol 1H
201-1
1 x 5 mL
201-6
6 x 5 mL
Ref.
Qualitrol 2H
202-1
1 x 5 mL
202-6
6 x 5 mL
2 - 8 C
RECONSTITUIO E ARMAZENAMENTO
Seguir estritamente as orientaes de preparao contidas nas Instrues de Uso.
O uso de gua de boa qualidade importante para obteno de resultados adequados.
Para evitar congelamentos e descongelamentos repetidos, sugerimos separar o Qualitrol em alquotas
de 0,5 a 1,0 mL antes de congelar. Para evitar evaporao do material durante o perodo de
armazenamento sugerimos utilizar frascos adequados para congelamento (criotubos).
Temperatura no congelador de geladeiras de uma porta: aproximadamente 4 C negativos.
Temperatura no congelador de geladeira duplex: aproximadamente 8 C negativos.
Temperatura em freezer (como os de cozinha): aproximadamente 18 C negativos
O Qualitrol quando armazenado refrigerado e principalmente congelado, deve ser devidamente
homogeneizado antes de usar. No agitar fortemente ou usar vrtex.
Manter o Qualitrol o mnimo de tempo possvel aberto, fora da temperatura de armazenamento ou
exposto a luz.
O Qualitrol H reconstitudo est pronto para uso e deve ser processado exatamente como proposto nas
instrues das aplicaes manuais e automticas.
O Qualitrol H reconstitudo deve ser processado como uma amostra de paciente.
Verificar a correspondncia entre o lote impresso na Instruo de Uso e o lote constante no frasco do
Qualitrol.
15/01/2009
QUALITROL H
ESTABILIDADE
Aps reconstituio, os constituintes do Qualitrol H, com exceo dos Triglicrides, so estveis 7 dias
entre 2 8 C em frasco bem vedado protegido da luz. Os Triglicrides so estveis 3 dias entre 2 8 C
em frasco bem vedado.
Todos os constituintes, com exceo dos Triglicrides, so estveis 30 dias entre 10 20 C negativos
em recipiente hermeticamente fechado, protegido da luz.
Alguns constituintes do Qualitrol H (Bilirrubina e Creatina Quinase) so fotossensveis, portanto sua
exposio luz deve ser evitada.
Fosfatase cida, folato, triiodotironina (T3) e apolipoprotena A-1 devem ser testadas imediatamente
aps a reconstituio. O prolongamento da estabilidade da Fosfatase cida e apolipoprotena A-1 pode ser
obtido atravs do armazenamento de alquotas entre 10 a 20 C negativos por 20 dias.
A atividade da Fosfatase Alcalina pode aumentar durante o armazenamento.
Os valores constantes nas Instrues de Uso do Qualitrol H so somente uma referncia e foram obtidos
nas condies de testes da Labtest.
Vrios fatores alteram os resultados obtidos com o Qualitrol H. Dentre estes fatores esto os erros de
reconstituio, homogeneizao, contaminao da gua ou vidraria, controle inadequado da temperatura ou
erros tcnicos associados ao instrumento ou sistema de reagentes. Sugerimos o seguimento das boas
prticas de laboratrio e a verificao das instrues do fabricante do instrumento e dos reagentes
utilizados, relacionadas com as limitaes do procedimento.
O laboratrio deve determinar as mdias e os intervalos de concentraes dos constituintes, utilizando
seus procedimentos de ensaio, uma vez que podem ser encontradas diferenas decorrentes da diversidade
dos reagentes, dos sistemas de calibrao, dos instrumentos e das imprecises dos procedimentos de
medio.
Os valores mdios e os intervalos de concentraes encontrados pelo laboratrio podem ser utilizados
para controle interno da qualidade dos ensaios. Como limite mximo de controle, recomendamos utilizar o
valor da mdia 2 vezes o desvio padro obtido no laboratrio.
Alternativamente, pode-se utilizar as especificaes desejveis para impreciso derivadas da variao
biolgica, que se encontram disponveis no site: http://www.westgard.com/biodatabase1.htm/
15/01/2009
REUMALATEX FR - Ref. 114

O teste de fator reumatide (FR) o mais til dos testes imunolgicos para confirmao de artrite
reumatide. Nessa doena, os anticorpos IgG produzidos pelos linfcitos nas articulaes sinoviais reagem
com outros anticorpos IgG ou IgM, produzindo complexos imunes, ativao do complemento e destruio
tecidual. Ainda no se sabe como as molculas de IgG tornam-se antignicas, porm elas podem ser
alteradas pela agregao com vrus ou outros antgenos.
PRINCPIO DA REAO
Partculas de ltex estabilizadas e sensibilizadas com gamaglobulina humana purificada so aglutinadas
macroscopicamente quando o fator reumatide est presente na amostra em concentraes iguais ou
maiores que 8 UI/mL.
APRESENTAO
Ref.
114.1 - Ltex AEO
114.P - Controle Positivo
114.N - Controle Negativo
Lmina de Teste
Bastes misturadores
114-60
1 x 2,5 mL
1 x 0,5 mL
1 x 0,5 mL
1
60
114K-60
1 x 2,5 mL
---------
ESPECIFICAES
Metodologia:
Amostra:
Sensibilidade:
Volume de Reagente:
Volume de amostra:
Aglutinao do Ltex
Soro sem hemlise
8 UI/mL
1 gota (0,05 mL)
0,05 mL
ORIENTAES
O produto Ref. 114-60 composto de 01 frasco Ltex FR; 01 frasco Controle Positivo; 01 frasco Controle
Negativo; 1 lmina de teste e 60 bastes misturadores.
O produto Ref. 114K-60 composto somente de 01 frasco Ltex FR.
Em uma amostra onde o resultado foi positivo e na diluio 1:2 foi negativo, reportar o resultado como
menor que 16 UI/mL
O sistema est padronizado para se obter a sensibilidade proposta e o desempenho adequado em
funo dos volumes indicados na metodologia. Modificaes nos volumes recomendados e a
introduo de ponteiras contaminadas podem comprometer o desempenho do teste e a estabilidade
do Ltex FR.
Reagentes e amostras devem estar temperatura ambiente no momento da realizao do teste.
Ao utilizar o reagente Ltex FR, esvaziar o conta-gotas e homogeneizar a suspenso de ltex por vrias
aspiraes com o conta-gotas.
Realizar a leitura dos resultados dois minutos aps a mistura dos reagentes. Leituras aps o tempo
recomendado podem mostrar resultado falso positivo.
O uso de material contaminado com traos de detergente modifica a estrutura coloidal do reagente
levando deteriorao irreversvel e resultados inconsistentes.
Ao comparar mtodos para a determinao de FR, levar em considerao a sensibilidade dos mesmos.
Amostras de soro fortemente lipmicas podem produzir resultados falsamente positivos por aglutinao
inespecfica. Soros turvos podem ser clarificados por centrifugao a 19000g durante 30 minutos e descarte
da camada superior de lpides.
As amostras de soro podem ser armazenadas por 7 dias entre 2 e 8 C. Pode-se congelar as amostras
em temperatura inferior a 20C negativos durante um ms, desde que o congelamento seja realizado at 24
horas aps a colheita. As amostras devem ser congeladas e descongeladas uma s vez.
20/10/2010
REUMALATEX FR - Ref. 114

g = 1,118 x 10-5 x r x n2
20/10/2010
SANGUE OCULTO iFOBT - Ref. 112

A pesquisa de sangue oculto nas fezes til para a identificao de leses do tubo gastrointestinal que
cursam sem sangramento clnicamente visvel. As causas mais comuns so sangramentos oriundos de
lceras gstricas e duodenais, gastrite, ulceraes medicamentosas da mucosa gastrointestinal (aspirina,
antiinflamatrios), neoplasias gstricas ou de clon, diverticulite, colites, algumas parasitoses, hemorragias
de boca ou trato respiratrio superior deglutidas.
PRINCPIO DA REAO
O sistema Sangue Oculto um imunoensaio cromatogrfico que utiliza uma membrana com dois anticorpos
imobilizados: um anticorpo de captura anti-hemoglobina humana e um anticorpo de controle.
A amostra tamponada colocada em presena de um conjugado de ouro coloidal-anticorpo monoclonal
anti-hemoglobina humana e a mistura se move cromatograficamente na membrana por ao capilar. Na
existncia de hemoglobina na amostra, esta se liga ao conjugado e uma linha colorida se forma na regio
onde est imobilizado o anticorpo anti-hemoglobina, significando um resultado positivo. Como a mistura
continua a migrar na membrana, ocorre a formao de uma segunda linha colorida onde est aplicado o
anticorpo de controle, confirmando que o teste se processou adequadamente.
A formao de duas linhas horizontais coloridas indica um teste positivo, e a formao de uma s linha na
posio de controle indica um teste negativo.
A ausncia da linha colorida na posio de controle indica que o teste no se processou adequadamente e
que deve ser repetido.
APRESENTAO
Ref.
112.1 - Tampo
112.2 - Placas de Reao
112K7-20
20 x 2,0 mL
20
ESPECIFICAES
Metodologia:
Amostra:
Sensibilidade metodolgica:
Imunocromatografia
Fezes
0,04 g hemoglobina por mL da soluo tamponada de fezes
ORIENTAES
O teste no deve ser comparado com o mtodo do Guaiaco (perxido de hidrognio) que tem
interferncia de outras hemoglobinas.
Em amostras de fezes com aspecto melena (fezes escuras visivelmente com presena de sangue) pode
ocorrer efeito prozona por excesso de hemoglobina, fornecendo resultado falso-negativo.
20/09/2010
SANGUE OCULTO iFOBT - Ref. 112
20/09/2010
SANGUE OCULTO - Ref. 103

A pesquisa de sangue oculto nas fezes til para a identificao de leses do tubo gastrointestinal que
cursam sem sangramento clnicamente visvel. As causas mais comuns so sangramentos oriundos de
lceras gstricas e duodenais, gastrite, ulceraes medicamentosas da mucosa gastrointestinal (aspirina,
antiinflamatrios), neoplasias gstricas ou de clon, diverticulite, colites, algumas parasitoses, hemorragias
de boca ou trato respiratrio superior deglutidas.
PRINCPIO DA REAO
O sistema Sangue Oculto um imunoensaio cromatogrfico que utiliza uma membrana com dois anticorpos
imobilizados: um anticorpo de captura anti-hemoglobina humana e um anticorpo de controle.
A amostra tamponada colocada em presena de um conjugado de ouro coloidal-anticorpo monoclonal
anti-hemoglobina humana e a mistura se move cromatograficamente na membrana por ao capilar. Na
existncia de hemoglobina na amostra, esta se liga ao conjugado e uma linha colorida se forma na regio
onde est imobilizado o anticorpo anti-hemoglobina, significando um resultado positivo. Como a mistura
continua a migrar na membrana, ocorre a formao de uma segunda linha colorida onde est aplicado o
anticorpo de controle, confirmando que o teste se processou adequadamente.
A formao de duas linhas horizontais coloridas indica um teste positivo, e a formao de uma s linha na
posio de controle indica um teste negativo.
A ausncia da linha colorida na posio de controle indica que o teste no se processou adequadamente e
que deve ser repetido.
APRESENTAO
Ref.
103.1 - Tampo
103.2 - Placas de Reao
103K7-20
20 x 1,5 mL
20
ESPECIFICAES
Metodologia:
Amostra:
Sensibilidade metodolgica:
Imunocromatografia
Fezes
0,05 g hemoglobina por mL da soluo ou
6 g hemoglobina por grama de fezes.
ORIENTAES
O teste no deve ser comparado com o mtodo do Guaiaco (perxido de hidrognio) que tem
interferncia de outras hemoglobinas.
Em amostras de fezes com aspecto melena (fezes escuras visivelmente com presena de sangue) pode
ocorrer efeito prozona por excesso de hemoglobina, fornecendo resultado falso-negativo.
15/01/2009
SENSIPROT - Ref. 36
As protenas so as molculas orgnicas mais abundantes e importantes nas clulas e perfazem 50% ou
mais de seu peso seco. So encontradas em todas as partes de todas as clulas, uma vez que so
fundamentais sob todos os aspectos da estrutura e funo celulares. Existem muitas espcies diferentes de
protenas, cada uma especializada para uma funo biolgica diversa. Alm disso, a maior parte da
informao gentica expressa pelas protenas.
PRINCPIO DA REAO
O vermelho de pirogalol reage com o molibdato de sdio formando um complexo que quando combinado
com a protena em meio cido desenvolve um cromforo de cor azul, com o mximo de absoro em 600
nm.
A absorbncia resultante diretamente proporcional concentrao de protena na amostra.
APRESENTAO
Ref.
36-50
1 x 50 mL
1 x 5 mL
36-200
1 x 200 mL
1 x 5 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Vermelho de Pirogalol
Reao:
Ponto Final
Sistema:
Monorreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
600 nm (580 a 620)
Amostra:
Urina e Lquor (livre de hemlise)
Linearidade:
At 100 mg/dL
Erro Total: 43,5%
Bias: 10,9%
CVa: 19,8%
Bibliografia:
CALIBRAO
Absorbncia do Reagente (600 nm): 0,180 a 0,270
LQUIDOS CORPORAIS
Lquor (Pediatric Reference Range 2nd Edition (metodologia Nefelometria)
Recm nascido
40 - 120 mg/dL
< 1 ms
20 - 80 mg/dL
> 1 ms
15 - 45 mg/dL
Lquido Aminitico (Carl Kjeldsberg, Joseph Knight. Body Fluids 1993)
2o Trimestre
40 mg/dL
Trmino da gravidez
5 mg/dL
20/09/2010
SENSIPROT - Ref. 36
ORIENTAES
Como calcular o resultado em mg/24 horas?
Urina (mg/24 hs) = {mg/dL x volume (em mL)} / 100
mg/dL = valor obtido no teste
volume (em mL) = volume da urina de 24 horas
Um forte indcio de deteriorao do Reagente de Cor indicado por uma absorbncia menor que 0,170
quando medido contra gua em 600 nm
Todas as amostras devem ser centrifugadas para se obter melhores resultados.
Presena de fosfato inorgnico, clcio, magnsio, creatinina, uria e glicose produzem interferncias
positivas inferiores a 5%.
Presena de cido rico, citrato de sdio, oxalato de sdio e ascorbato produzem interferncias
negativas inferiores a 5%.
Hematria produz resultados falsamente elevados.
A presena de detergente no material utilizado pode introduzir alteraes significativas no resultado.
PREPARO DE CONTROLE PARA SENSIPROT
1. Obter uma amostra de soro ou um pool de soro;
2. Dosar Protena Total (Labtest Ref. 99) na amostra;
3. Preparar 10 mL de uma soluo de Merthiolate a 1% (0,1 mL de Merthiolate + 9,9 mL de NaCl 150
mmol/L).
4. Diluir a amostra 1:101 (0,1 mL de amostra + 10 mL da soluo de Merthiolate).
5. Este controle pode ser alicotado e armazenado a 20 C negativos por 3 meses. Deve ser descongelado
uma nica vez.
Exemplo:
Valor da Protena Total obtido na amostra sem diluir = 5,5 g/dL
Valor da protena obtido com o produto Sensiprot na amostra diluda 1:101 = 54,5 mg/dL
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
SEROLATEX AEO - Ref. 167

Os Streptococcus beta-hemolticos do grupo A causam infeces clnicas especialmente de orofaringe e
pele, endocardites e quadros no-supurativos, como febre reumtica e glomerulonefrite aguda. A
estreptolisina O uma das toxinas extracelulares liberadas pelo Streptococcus beta-hemoltico do grupo A.
Ela capaz de induzir a sntese de anticorpos especficos, os anticorpos antiestreptolisina O (AEO), em
cerca de 80% das infeces.
PRINCPIO DA REAO
Partculas de ltex estabilizadas e sensibilizadas com Estreptolisina-O purificada so aglutinadas
macroscopicamente quando a AEO est presente na amostra em concentraes maiores que 200 UI/mL.
APRESENTAO
Ref.
67.1 - Ltex AEO
67.P - Controle Positivo
67.N - Controle Negativo
67-60
1 x 2,5 mL
1 x 0,5 mL
1 x 0,5 mL
67K-60
1 x 2,5 mL
---
ESPECIFICAES
Metodologia:
Amostra:
Sensibilidade:
Volume de Reagente:
Volume de amostra:
Aglutinao do Ltex
Soro sem hemlise
200 UI/mL
1 gota (0,04 mL
0,04 mL
ORIENTAES
O produto Ref. 67-60 composto de 01 frasco Ltex AEO; 01 frasco Controle Positivo; 01 frasco
Controle Negativo; 1 lmina de teste e 60 bastes misturadores
O produto Ref. 67K-60 composto somente de 01 frasco Ltex AEO
Em uma amostra onde o resultado foi positivo e na diluio 1:2 foi negativo, reportar o resultado como
menor que 400 UI/mL
O sistema est padronizado para se obter a sensibilidade proposta e o desempenho adequado em
funo dos volumes indicados na metodologia. Modificaes nos volumes recomendados e a
introduo de ponteiras contaminadas podem comprometer o desempenho do teste e a estabilidade
do Ltex AEO.
Ao utilizar o reagente Ltex AEO, esvaziar o conta-gotas e homogeneizar a suspenso de ltex por
vrias aspiraes com o conta-gotas.
Realizar a leitura dos resultados dois minutos aps a mistura dos reagentes. Leituras aps o tempo
recomendado podem mostrar resultado falso positivo.
O uso de material contaminado com traos de detergente modifica a estrutura coloidal do reagente
levando deteriorao irreversvel e resultados inconsistentes.
Ao comparar mtodos para a determinao de AEO, levar em considerao a sensibilidade dos
mesmos.
Amostras de soro fortemente lipmicas podem produzir resultados falsamente positivos por aglutinao
inespecfica. Soros turvos podem ser clarificados por centrifugao a 19000g durante 30 minutos e descarte
da camada superior de lpides.
15/01/2009
SEROLATEX AEO - Ref. 167

g = 1,118 x 10-5 x r x n2
15/01/2009
TRANSAMINASE OXALACTICA- Ref. 52

A aspartato aminotransferase - AST, antigamente denominada transaminase oxaloactica, encontrada em
diversos rgos e tecidos, incluindo corao, fgado, msculo esqueltico e eritrcitos. Est presente no
citoplasma e tambm nas mitocndrias e, portanto sua elevao indica um comprometimento celular mais
profundo. No caso do hepatcito, isso se revela por uma elevao por tempo mais prolongado no curso das
hepatites virais agudas e uma elevao seletiva nos casos de hepatites alcolicas, metstases hepticas e
necroses medicamentosas e isqumicas.
PRINCPIO DA REAO
A transaminase oxalactica promove a transferncia de grupamentos amina de -aminocidos para cetocidos.
TGO
L-Aspartato + -cetoglutarato Glutamato + Oxalacetato
O oxalacetato formado medido atravs da formao de hidrazona, que tem intensa cor em meio alcalino.
APRESENTAO
Ref.
52.1 - TGO Substrato
52.3 - NaOH - Estoque
52.4 - Padro
52-200
1 x 50 mL
1 x 50 mL
1 x 160 mL
1 x 4 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Reitman e Frankel
Reao:
Cintica com medio em Ponto Final
Aplicao:
Comprimento Onda:
505 nm (490 a 540)
Amostra:
Linearidade:
190 Unidades/mL
Volume de Reagente e amostra: Ver orientaes nas Instrues de Uso
EQA Especificao Desejvel:
Erro Total: 15,2%
Bias: 5,40%
CVa: 6,0%
Bibliografia:
CALIBRAO
Realizar a curva de calibrao utilizando o Padro Ref. 52.4.
Absorbncia mdia da Curva de Calibrao
Tubo 1
0 Unidades/mL
Tubo 2
24 Unidades/mL
Tubo 3
61 Unidades mL
Tubo 4
114 Unidades mL
Tubo 5
190 Unidades mL
0,270
0,375
0,470
0,555
0,630
PREPARO DO NaOH DE USO

Transferir quantitativamente o contedo do frasco n 3 (160 mL) para um balo volumtrico de 500 mL,
completar at a marca de aferio com gua destilada ou deionizada livre de CO2 e homogeneizar. Estvel
12 meses em recipiente de plstico, entre 15 - 25 C.
20/09/2010
TRANSAMINASE OXALACTICA- Ref. 52

ORIENTAES
NaOH Estoque = 1,25 mol/L
NaOH de Uso = 0,4 mol/L
Normalidade = Molaridade x Valncia, no caso do NaOH a valncia 1, ento N = M.
Transformao: UI = Unidades/mL x 0,482
Unidades/mL = Unidades RF (Unidades Reitman Franke)l.
O NaOH da Transaminase Oxalactica - Ref. 52 pode ser utilizado na Transaminase Pirvica - Ref. 53
REAO CINTICA DE TEMPO FIXO COM LEITURA EM PONTO FINAL
Como traar manualmente uma curva da Transaminase
Realizar o teste da curva de calibrao utilizando o padro 52.4. Anotar as absorbncias (ou
%transmitncia) obtidas em cada ponto.
Usar papel milimetrado para traado da curva com leituras em absorbncia e papel monolog para
traado da curva com leitura em % transmitncia.
Plotar os pontos lanando as leituras obtidas no eixo dos Y (ordenada) e a concentrao de cada
ponto no eixo dos X (abcissa).
20/09/2010
TRANSAMINASE PIRVICA - Ref. 53

A alanina aminotransferase - ALT, antigamente denominada transaminase pirvica, encontrada
abundantemente no fgado, em quantidades moderadas no rim e em pequenas quantidades no corao e
na musculatura esqueltica. Sua origem predominantemente citoplasmtica, fazendo com que se eleve
rapidamente aps a leso heptica, tornando-a um marcador sensvel da funo do fgado. Como marcador
hepatocelular, apresenta valores alterados em patologias que cursam com necrose do hepatcito, como
hepatites virais, mononucleose, citomegalovirose e hepatites medicamentosas. Entretanto, um marcador
menos sensvel que a AST para hepatopatias alcolicas, cirrose ativa, obstrues extra-hepticas e leses
metastticas no fgado.
PRINCPIO DA REAO
A transaminase pirvica promove a transferncia de grupamentos amina de -aminocidos para cetocidos.
TGP
L- Alanina + -cetoglutarato Glutamato + Piruvato
O piruvato formado medido atravs da formao de hidrazona, a qual tem intensa cor em meio alcalino.
APRESENTAO
Ref.
53-200
53.1 - TGP Substrato
1 x 50 mL
53.2 - Reagente de Cor 1 x 50 mL
53.3 - NaOH - Estoque
1 x 160 mL
53.4 - Padro
1 x 4 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Reitman Frankel
Reao:
Cintica com leitura Ponto Final
Aplicao:
Comprimento Onda:
505 nm (490 a 540)
Amostra:
Soro ou Plasma (EDTA, heparina) e lquor
Linearidade:
150 Unidades/mL
Volume de Reagente e Amostra: Ver orientaes nas Instrues de Uso
EQA Especificao tima:
Erro Total: 16,0%
Bias: 6,0%
CVa: 6,1%
Bibliografia:
CALIBRAO
Realizar a curva de calibrao utilizando o Padro Ref. 53.4.
Absorbncia mdia da Curva de Calibrao
Tubo 1
0 Unidades/mL
Tubo 2
28 Unidades/mL
Tubo 3
57 Unidades mL
Tubo 4
97 Unidades mL
Tubo 5
150 Unidades mL
0,270
0,375
0,470
0,555
0,630
PREPARO DO NaOH DE USO

Transferir quantitativamente o contedo do frasco n 3 (160 mL) para um balo volumtrico de 500 mL,
completar at a marca de aferio com gua tipo II livre de CO2 e homogeneizar. Estvel 12 meses em
recipiente de plstico entre 15 25 C.
20/09/2010
TRANSAMINASE PIRVICA - Ref. 53

ORIENTAES
NaOH Estoque = 1,25 mol/L
NaOH de Uso = 0,4 mol/L
Normalidade = Molaridade x Valncia, no caso do NaOH a valncia 1, ento N = M.
Transformao: UI = Unidades/mL x 0,482
Unidades/mL igual a Unidades RF (Unidades Reitman Frankel.
O NaOH da Transaminase Pirvica - Ref. 53 pode ser utilizado na Transaminase Oxalactica - Ref. 52
REAO CINTICA DE TEMPO FIXO COM LEITURA EM PONTO FINAL
Como traar manualmente uma curva da Transaminase
Realizar o teste da curva de calibrao utilizando o padro 53.4. Anotar as absorbncias (ou
%transmitncia) obtidas em cada ponto.
Usar papel milimetrado para traado da curva com leituras em absorbncia e papel monolog para
traado da curva com leitura em % transmitncia.
Plotar os pontos lanando as leituras obtidas no eixo dos Y (ordenada) e a concentrao de cada
ponto no eixo dos X (abcissa) .
20/09/2010
TRIGLICRIDES Liquiform - Ref. 87

Os triglicrides, assim como o colesterol, so gorduras que podem ser fabricadas pelo prprio corpo ou
serem ingeridas junto com os alimentos. Os triglicrides so usados pelo corpo como combustveis sendo a
principal forma de reserva de energia do organismo.
PRINCPIO DA REAO
A lipase da lipoprotena promove a hidrlise dos triglicrides liberando glicerol, que convertido, pela ao
da glicerolquinase, em glicerol-3-fosfato. Este oxidado a dihidroxiacetona e perxido de hidrognio na
presena da glicerolfosfato oxidase. Em seguida, ocorre uma reao de acoplamento entre perxido de
hidrognio, 4-aminoantipirina e 4-clorofenol, catalisada pela peroxidase, produzindo uma quinoneimina que
tem mximo de absorbncia em 505 nm.
Lipase da Lipoprotena
Triglicrides
Glicerol + cidos Graxos

Glicerolquinase
Glicerol + ATP
Glicerol-3-Fosfato + ADP
Mg +2
Glicerol-3-Fosfato
Glicerol-3-Fosfato + O2
Dihidroxiacetona + H2O2
Oxidase
Peroxidase
2 H2O2 + 4 Aminoantipirina + 4-Clorofenol
Quinoneimina+ 4 H2O
APRESENTAO
Ref.
87.1 - Reagente 1
87-2/100
2 x 100 mL
1 x 5 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Enzimtico Trinder; oxidase
Reao:
Sistema:
Monorreagente
Aplicao:
Comprimento Onda:
505 nm (490 a 540)
Amostra:
Soro
Linearidade:
1100 mg/dL
Erro Total: 15,0%
Bias: 5,0%
CVa: 5,0%
CALIBRAO
Caracterstica de Lquido Pleural contendo Triglicrides:
Quiloso Mdia de 249 mg/dL (49 a 2290 mg/dL)
No Quiloso Mdia de 33 mg/dL (13 a 107 mg/dL)
20/09/2010
TRIGLICRIDES Liquiform - Ref. 87

ORIENTAES
A contaminao do material utilizado ou da amostra com glicerol fornece valores falsamente elevados.
Os resultados obtidos em pacientes recebendo alimentao parenteral devem ser interpretados com cautela
porque esta alimentao contm elevados teores de glicerol.
CUIDADOS COM A AMOSTRA
Devido ao rpido consumo do oxignio do meio, pode-se obter resultados de triglicrides
normais em amostras fortemente lipmicas. Deste modo, deve-se diluir essas amostras 1:10: (1
parte de amostra e 9 partes de NaCl 150 mmol/L - 0,85%), antes da realizao do teste.
O torniquete no deve ser mantido por tempo superior a 1 minuto. Obter a amostra de sangue aps
liberar o torniquete.
A amostra de soro pode ser armazenada bem vedada a 20 C negativos por at 7 semanas.
Amostras colhidas com heparina podem fornecer resultados falsamente diminudos. A heparina promove
a ativao in vivo ou in vitro da lipase da lipoprotena.
Como a concentrao de triglicrides influenciada por hbitos dietticos recentes, como consumo de
lcool e por variaes do peso corporal e exerccio fsico, os valores do triglicrides em um mesmo
indivduo so bastante variveis. (Ver Instruo de Uso).
AUMENTO: cido acetilsaliclico, amiodarona, asparaginase, atenolol, bisoprolol, ciclofenila, ciclosporina
A, clortalidona, colestiramina, contraceptivos orais, danazol, desogestrel, didanosina, estradiol 17-,
furosemida, glicocorticides, hidroclorotiazida, indapamida, isotretionina, itraconazol, levonorgestrel,
levotiroxina, medroxiprogesterona, mestranol, metildopa, metoprolol, miconazol, nadolol, nitrendipina,
pindolol, piretanida, propranolol, sotalol, espironolactona, tamoxifeno, tiazidas, warfarina.
DIMINUIO: cido ascrbico, acipimox, anabolizantes esterides, bezafibrato, captopril, carnitina,
carvedinol, cetoconazol, cilazapril, ciprofibrato, clofibrato, dextrotiroxina, diltiazem, doxazosina, enalapril,
genfibrozila, glucagon, hidrocloroquina, insulina, levocarnitina, lovastatina, metformina, neomicina, niacina,
nifedipina, nisoldipino, noretindrona, oximetolona, pentoxifilina, pravastatina, prazosina, prednisolona,
probucol, psillium, sinvastatina, terazosina, verapamil
Absorbncia
REAO DE PONTO FINAL
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
TROMBSTAB - Ref. 45
Soluo anticoagulante para teste de coagulao.
APRESENTAO
Ref.
Trombstab
45
1 x 20 mL
15 25 C
ORIENTAES
Citrato de Sdio Age inicialmente quelando ou se ligando ao clcio. A remoo do clcio do complexo
protrombnico previne a converso de protrombina a trombina. A enzima trombina (ou fator II ativado) por
protelise converte o fibrinognio solvel em fibrina insolvel. O efeito de quelao do clcio pelo citrato
reversvel pela adio de clcio amostra.
Contm Citrato de sdio 18,8 g/dL
Orientao de Uso:
Volume Amostra 3,0 mL
Volume Reagente 1 gota
Os volumes de amostra e Trombstab podem ser mudados proporcionalmente (considerar 1 gota como
50 microlitros):
1,5 mL amostra e 0,025 mL Trombstab
1,2 mL amostra e 0,020 mL Trombstab
A colocao prvia do Trombstab em tubos de coleta pode causar perda parcial do anticoagulante.
ser utilizada.
03/04/2009
URIA CE Ref. 27
A uria um produto do catabolismo de aminocidos e protenas. Gerada no fgado, a principal fonte de
excreo do nitrognio do organismo. difundida atravs da maioria das membranas celulares, e a sua
maior parte excretada pela urina, sendo que pequenas quantidades podem ser excretadas pelo suor e
degradadas por bactrias intestinais.
PRINCPIO DA REAO
A uria hidrolisada pela urease ons amnio e CO2. Os ons amnio reagem em pH alcalino com
salicilato e hipoclorito de sdio, sob a ao catalisadora do nitroprussiato de sdio para formar azul de
indofenol.
APRESENTAO
Ref.
27-500
27.1 - Urease
1 x 25 mL
27.2 - Tampo
1 x 100 mL
27.3 - Oxidante
1 x 25 mL
27.4 - Padro 70 mg/dL 1 x 3 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Enzimtico Colorimtrico
Reao:
Ponto Final
Sistema:
Birreagente
Aplicao:
Manual, Semi-automtico e automtico
Comprimento Onda:
600 nm (580 a 620)
Amostra:
Soro ou plasma (fluoreto, heparina, EDTA) e urina
Linearidade:
300 mg/dL
Erro Total: 15,7%
Bias: 5,50%
CVa: 6,20%
Bibliografia:
CALIBRAO
PREPARO DE REAGENTES
Tampo de Uso:
Adicionar o contedo do frasco n 2 (100 mL) a 400 mL de gua destilada ou deionizada e misturar. Estvel
12 meses em frasco mbar entre 2 - 8 C.
Oxidante de Uso:
Adicionar o contedo do frasco n 3 (25 mL) a 475 mL de gua destilada ou deionizada e misturar. Estvel
12 meses em frasco plstico entre 2 - 8 C.
Urease Tamponada:
Adicionar 1,0 mL de Urease (n 1) a 20 mL do Tampo de Uso. Estvel 21 dias em frasco de vidro mbar
entre 2 - 8 C.
20/09/2010
URIA CE Ref. 27
ORIENTAES
O Branco da reao tem uma cor amarelada. Presena de cor esverdeada no tubo branco indica
contaminao de reagentes.
Em alguns equipamentos automticos como o Cobas e Express o preparo do Oxidante (no 3) deve ser
feito de acordo com orientaes contidas no protocolo de aplicao dos mesmos.
No utilizar anticoagulantes contendo amnia.
A concentrao de fluoreto na amostra no deve ser maior que 3 mg/mL, pois o fluoreto em altas
concentraes inibidor da urease.
A urina de 24 horas deve ser colhida em frasco contendo 2,0 mL de HCl 50% e centrifugada antes de
usar. No utilizar formol como preservativo para a urina. Diluir a urina 1:50 (0,1 mL de urina + 4,9 mL de
gua deionizada). Multiplicar o resultado obtido por 50.
Transformao do resultado de Uria para BUN (Blood Urea Nitrogen)
BUN = Uria / 2,14 ou
BUN = Uria x 0,467
No armazenar os reagentes nas proximidades de solues de amnia.
Evitar fumar prximo ao local das dosagens.
Como a quantidade de uria na urina elevado, o valor em mg/24 horas dividido por 1000 para obter o
valor em g/24 horas.
Dietas ricas em protenas podem levar obteno de resultados elevados de uria
CLEARANCE DA URIA Clinical Chemistry; Principles and Technics ; Second Edition (pg. 1540 a 1543)
Cm = Clearance mximo (Utilizar quando o fluxo urinrio for > 2 mL/min)
Uu x V
1,73
Cm = x
Us
SC
Uu = Uria na urina (mg/dL)
V = Fluxo urinrio em mL/minuto
Us = Uria no soro
SC = Superfcie corporal
Cp = Clearance padro (Utilizar quando o fluxo urinrio for < 2 mL/min)

Uu x V
1,73
Cp = x
Us
SC
Us = Uria no soro
V = Raz quadrada do fluxo urinrio em mL/minuto
Intervalo de Referncia (segundo Mller et al):
Cm 59 a 95 mL/min/1,73 m2
Cp 41 a 65 mL/min/1,73m2
Absorbncia
REAO PONTO FINAL CRESCENTE
Leitura
Tempo (min)
20/09/2010
URIA UV Liquiform - Ref. 104

A uria um produto do catabolismo de aminocidos e protenas. Gerada no fgado, a principal fonte de
excreo do nitrognio do organismo. difundida atravs da maioria das membranas celulares, e a sua
maior parte excretada pela urina, sendo que pequenas quantidades podem ser excretadas pelo suor e
degradadas por bactrias intestinais.
PRINCPIO DA REAO
A uria hidrolisada pela urease produzindo amnia e dixido de carbono.
Urease
Uria + H2O
2 NH3 + CO2
A amnia reage com o 2-cetoglutarato e NADH em uma reao catalisada pela glutamato desidrogenase
(GLDH), promovendo a oxidao do NADH a NAD. A conseqente reduo da absorbncia medida em 340
nm proporcional concentrao de uria na amostra.
GLDH
2-cetoglutarato + NH3 + NADH
L-Glutamato + NAD
APRESENTAO
Ref.
104.1 - Reagente 1
104.2 - Reagente 2
104- 4/50
1 x 40 mL
1 x 10 mL
1 x 5 mL
ESPECIFICAES
Metodologia:
Enzimtico UV; Urase UV; Urease GluDH UV
Reao:
Cintica de 2 pontos decrescente
Sistema:
Mono ou Birreagente
Aplicao:
Comprimento de onda: 340 nm
Amostra:
Soro ou plasma (fluoreto, heparina, EDTA) e urina
Linearidade:
300 mg/dL
Erro Total: 15,7%
Bias: 5,50%
CVa: 6,20%
Bibliografia:
CALIBRAO
Absorbncia do Reagente: > 0,800
Transferir o contedo de um frasco de Reagente 2 para um frasco de Reagente 1 ou misturar 4 volumes do
20/09/2010
URIA UV Liquiform - Ref. 104

ORIENTAES
No utilizar anticoagulantes contendo amnia.
A concentrao de fluoreto na amostra no deve ser maior que 3 mg/mL, pois o fluoreto em altas
concentraes inibidor da urease.
A urina de 24 horas deve ser colhida em frasco contendo 2,0 mL de HCl 50% e centrifugada antes de
usar. No utilizar formol como preservativo para a urina. Diluir a urina 1:50 (0,1 mL de urina + 4,9 mL de
gua deionizada). Multiplicar o resultado obtido por 50.
Como a quantidade de uria na urina elevado, o valor em mg/24 horas dividido por 1000 para obter o
valor em g/24 horas.
Transformao do resultado de Uria para BUN (Blood Urea Nitrogen)
BUN = Uria / 2,14 ou
BUN = Uria x 0,467
No armazenar os reagentes nas proximidades de solues de amnia.
Evitar fumar prximo ao local das dosagens.
Dietas ricas em protenas podem levar obteno de resultados elevados de uria
CLEARANCE DA URIA Clinical Chemistry; Principles and Technics ; Second Edition (pg. 1540 a 1543)
Cm = Clearance mximo (Utilizar quando o fluxo urinrio for > 2 mL/min)
Uu x V
1,73
Cm = x
Us
SC
V = Fluxo urinrio em mL/minuto
Us = Uria no soro
Cp = Clearance padro (Utilizar quando o fluxo urinrio for < 2 mL/min)

Uu x V
1,73
Cp = x
Us
SC
Us = Uria no soro
V = Raz quadrada do fluxo urinrio em mL/minuto
Intervalo de Referncia (segundo Mller et al):
Cm 59 a 95 mL/min/1,73 m2
Cp 41 a 65 mL/min/1,73m2
Absorbncia
REAO CINTICA DE 2 PONTOS DECRESCENTE
Tempo (min)
20/09/2010
URIQUEST - Ref. 100

APRESENTAO
Ref.
Tiras Reagentes
100/50
50
100/100
100
TEMPERATURA DE ARMAZENAMENTO 2 - 30 C
100/150
150
No Refrigerar.
SISTEMA DE TIRA REAGENTE PARA DETERMINAO SEMI QUANTITATIVA DE:

Bilirrubina; Cetonas; Densidade ou Gravidade Especfica; Glicose; Leuccitos; Nitrito; pH; Protena;
Sangue; Urobilinogneo
ORIENTAES
Amostras de urina com concentrao de sais e protenas em excesso fornecem resultados falso
negativos para sangue, pois dificultam a lise das hemcias.
Como a exatido da anlise da urina dependente da qualidade da amostra, todos os cuidados devem
ser tomados para que a amostra de urina seja colhida, armazenada e transportada adequadamente.
AMOSTRAS DE URINA
A amostra de escolha para realizao do exame de urina a primeira urina da manh, de jato mdio, aps
perodo no inferior a 4 horas de permanncia da urina na bexiga. recomendado que a coleta seja
realizada aps 8 horas de repouso, isto , antes da realizao das atividades fsicas habituais do indivduo
e, preferencialmente, em jejum.
Na impossibilidade de se colher a primeira urina da manh, pode-se obter, alternativamente, amostra de
urina aleatria. Neste caso a coleta pode ser realizada em qualquer momento do dia. A amostra obtida de
colheita aleatria pode ser usada para a anlise, porm est mais freqentemente associada com
resultados falso negativos e falso positivos, sendo recomendado que a urina permanece armazenada na
bexiga por pelo menos 4 horas, antes da coleta.
RECIPIENTE DE COLETA
A amostra de urina deve ser colhida em recipiente descartvel, limpo e prova de vazamento. Deve ser de
material inerte, livre de partculas e substncias interferentes, como detergentes. Muitos laboratrios
preferem utilizar frasco estril para todas as coletas de urina.
ORIENTAO AO PACIENTE
A maioria das amostras de urina pode ser obtida pelos pacientes, de forma adequada, aps o fornecimento
de instrues simples pelo profissional do laboratrio responsvel pelo atendimento. Estas instrues
devem ser dadas verbalmente sendo, tambm, recomendado o fornecimento das mesmas na forma escrita
contendo ilustraes do procedimento de coleta. Caso o paciente no seja capaz de realizar o procedimento
recomendado, oferecer assistncia de profissional do laboratrio capacitado.
INFORMAES PR-ANALTICAS
O uso de medicamentos e vitaminas deve ser investigado, uma vez que isto pode representar importante
influncia pr-analtica ou interferncia no exame de urina (ver itens Influncias Pr-Analticas e Fatores
Interferentes).
ARMAZENAMENTO
O tempo compreendido entre a coleta e a anlise da amostra de urina o maior obstculo para a exatido
dos resultados do exame de urina rotina na maioria dos laboratrios. Idealmente, o exame de urina deve ser
realizado at duas horas aps a coleta. Caso isto no seja possvel, o material deve ser armazenado sob
refrigerao (2 8 ) imediatamente aps a coleta.
A refrigerao preserva a maioria dos analtos pesquisados com a tira reagente por 6 8 horas, com
exceo da bilirrubina e do urobilinognio, que so susceptveis a exposio luz. Caso a amostra
contenha bactrias, a refrigerao reduzir o crescimento bacteriano, impedindo a obteno de resultados
incorretos com vrios parmetros na pesquisa com a tira reagente. Entretanto, pode haver a precipitao de
uratos e fosfatos que podem interferir no exame microscpico. Alm disso, leuccitos e hemcias podem
sofrer lise e os cilindros podem se dissolver, com reduo significativa de seu nmero, aps 2 4 horas,
mesmo sob refrigerao. Quanto maior o tempo, maior a decomposio dos elementos, especialmente
quando a urina est alcalina e a densidade baixa. Urinas refrigeradas devem estar temperatura
ambiente antes de serem testadas, uma vez que algumas das reaes qumicas da tira reagente so
dependentes da temperatura.
15/01/2009
URIQUEST - Ref. 100

ALTERAES EM AMOSTRA DE URINA MANTIDAS A TEMPERATURA AMBIENTE POR 2 HORAS
Constituinte
Alterao
Mecanismo
pH
Glicose
Nitrito
aumento
diminuio
presente
ausente
diminuio
diminuio
diminuio
diminuio
diminuio
Produo de amnia, a partir de uria, por bactrias contaminantes

Gliclise por ao de bactrias
Produo por bactrias contaminantes
Degradao a nitrognio, seguida de evaporao
Converso do cido acetoactico a acetona, evaporao da acetona
Oxidao a biliverdina por exposio luz
Oxidao a urobilina por exposio luz
Lise
Dissoluo
Cetonas
Bilirrubina
Urobilinognio
Hemcias/Leuccitos
Cilindros
INFLUNCIAS PR-ANALTICAS
Alm dos fatores relacionados com a coleta e armazenamento da amostra, diversas condies como: jejum,
ingesto hdrica, dieta, esforo fsico, gravidez que so capazes de alterar a concentrao dos
componentes urinrios, interferindo no resultado, apesar do processo analtico estar correto.
INTERPRETAO E SIGNIFICADO CLNICO DOS RESULTADOS
Bilirrubina: Traos que produzem cor rosada so suficientes para indicar a presena de bilirrubina na urina
e sugerir investigao adicional. A maior parte da bilirrubina derivada da poro heme da hemoglobina
oriunda de hemcias velhas destrudas pelas clulas do sistema reticuloendotelial do bao, fgado e medula
ssea. A bilirrubina produzida transportada na corrente sangunea ligada albumina. A bilirrubina no
conjugada (ou indireta) no capaz de atravessar a barreira glomerular renal. No fgado, a bilirrubina
captada e conjugada com o cido glicurnico, tornando-se hidrosolvel sendo, ento, capaz de atravessar
os glomrulos renais e aparecer na urina. Normalmente, a bilirrubina conjugada (ou direta) excretada
atravs da bile para o intestino delgado e no est presente na urina. Sua presena na urina observada
quando h aumento da concentrao de bilirrubina conjugada no sangue (> 12 mg/dL) e indica obstruo
das vias biliares ou leso de hepatcitos. Desta forma, a deteco de bilirrubina na urina importante na
suspeita de doenas hepticas e na investigao das causas de ictercia.
Cetonas: As cetonas (cido -hidroxibutrico, cido acetoactico e acetona) so produtos do metabolismo
incompleto de lpides e sua presena na urina est relacionada com condies metablicas, nas quais
lpides, ao invs de carboidratos, so usados como fonte de energia, como ocorre no diabetes mellitus no
controlado, alcoolismo, jejum prolongado (desidratao, vmitos, diarria e febre) e raras doenas
metablicas hereditrias. A tira reagente mais sensvel ao cido acetoactico (>5 mg/dL) que acetona
(>50 mg/dL).
Densidade: A densidade ou gravidade especfica da urina medida atravs da concentrao de ons e se
baseia no fato de que com o aumento da concentrao inica ocorre aumento da densidade. O teste, que
sofre influncia do pH urinrio, est otimizado para resultados exatos em pH 6,0. A medida da densidade
urinria oferece informao limitada sobre a capacidade de concentrao renal, uma vez que sofre grande
influncia do estado de hidratao do paciente. A densidade pode variar de 1.001 a 1.035, sendo
geralmente encontrada entre 1.015 e 1.022 em indivduos com ingesto hdrica normal. Na disfuno renal,
como observada no diabetes mellitus, diabetes insipidus e hiperaldosteronismo, h perda da capacidade de
concentrar a urina sendo, ento, detectados valores fixos iguais ou menores que 1.010.
Glicose: A glicose livremente filtrada pelos glomrulos e reabsorvida pelos tbulos renais. Quando a
concentrao de glicose no sangue alcana valores entre 180 e 200 mg/dL, a capacidade mxima de
reabsoro dos tbulos ultrapassada e a glicose aparecer na urina. Este o mecanismo de glicosria
observada no diabetes mellitus. Glicosria na ausncia de hiperglicemia (glicosria renal) decorrente de
distrbio na reabsoro tubular renal da glicose e pode ocorrer em diversas condies: desordens tubulares
renais, sndrome de Cushing, uso de corticoesterides, infeco grave, hipertireoidismo, feocromocitoma,
doenas hepticas e do sistema nervoso central. Na gravidez, devido ao aumento da taxa de filtrao
glomerular e diminuio da capacidade de reabsoro da glicose pelas clulas tubulares renais.
Glicosria pode ocorrer, ainda, devido ingesto de dieta com elevada porcentagem de carboidratos. O
limite de deteco da Uriquest 50 mg/dL. Assim, resultados positivos at 50 mg/dL podem ser
considerados como esperados em pessoas sadias.
15/01/2009
URIQUEST - Ref. 100

Leuccitos: A pesquisa da esterase leucocitrio um mtodo indireto de deteco da presena de
leuccitos na urina. Esta enzima est presente nos grnulos primrios ou azurfilos dos neutrfilos,
moncitos, eosinfilos e basfilos. Linfcitos e clulas epiteliais no contm esterase leucocitria. Como os
leuccitos podem sofrer lise na urina, a pesquisa da esterase leucocitria til na deteco de enzima
derivada de clulas que no so mais visveis microscopia. A presena de leuccitos na urina em nmero
significativo est relacionada, mais comumente, com infeco urinria (pielonefrite e cistite). Outros
processos inflamatrios do trato genito-urinrio podem levar ao aumento de leuccitos sem a presena de
bacteriria. O limite de deteco da Uriquest se encontra entre 10 e 20 leuccitos/microlitro, portanto,
qualquer resultado entre negativo e 25 leuccitos/microlitro pode ter significado clnico.
Nitrito: Qualquer grau de colorao laranja a rosado indicativo de um resultado positivo sugerindo uma
quantidade 105 organismos por mililitro de urina. A pesquisa de nitrito representa teste bastante til na
deteco de bacteriria assintomtica. O teste do nitrito indica presena de bactrias na urina que so
capazes de converter nitrato em nitrito, podendo auxiliar no diagnstico da infeco urinria. Bactrias que
convertem nitrato em nitrito incluem, principalmente, bactrias gram-negativo como Escherichia coli,
Proteus, Klebsiella, Citrobacter, Aerobacter, Samonella, alm de algumas cepas de Pseudomonase e raras
de Staphylococcus e Enterococcus.
pH: Normalmente a urina discretamente cida (pH 5,0 ou 6,0). A determinao do pH no constitui,
isoladamente, ndice da capacidade renal de excreo de cidos, apresentando valor limitado na
investigao de disfunes renais. Urina alcalina freqentemente indica que a amostra foi mantida
temperatura ambiente por mais de 2 horas, entretanto, quando colhida e armazenada adequadamente,
pode sugerir infeco urinria.
Protena: O teste particularmente sensvel albumina e menos sensvel s outras protenas. Apesar de
ocorrer uma excreo de protenas na urina de indivduos sadios (at 15 mg/dL), a Uriquest detecta valores
iguais ou maiores que 30 mg/dL. A deteco de protenas provavelmente o achado isolado mais sugestivo
de doena renal. Proteinria por aumento da permeabilidade glomerular ocorre em glomerulonefrites, nefrite
lpica, amiloidose, obstruo da veia renal, nefroesclerose, pr-eclmpsia e nefropatia diabtica. Proteinria
devida a desordens tubulares ocorre na pielonefrite, necrose tubular aguda, rim policstico, intoxicao por
metais pesados e vitamina D, hipopotassemia, Doena de Wilson, Sndrome de Fanconi e galactosemia.
Outras condies podem levar a proteinria: proteinria postural (3 a 5% de adultos jovens sadios), estado
febril, exerccio fsico vigoroso, exposio prolongada ao frio ou calor, estresse emocional e insuficincia
cardaca congestiva.
Sangue: A presena de sangue na urina pode ser confirmada atravs da deteco na urina de hemcias
ntegras hematria (5 hemcias/L de urina) ou de hemoglobina livre hemoglobinria (0,015 mg/dL de
urina). A hematria resulta de sangramento em qualquer ponto do trato urinrio desde o glomrulo at a
uretra, podendo ser devido doenas renais, infeco, tumor, trauma, clculo, distrbios hemorrgicos ou
uso de anticoagulantes. A hemoglobinria pode resultar de hemlise intravascular, no trato urinrio ou na
amostra de urina aps a colheita. A diferenciao entre hematria e hemoglobinria clinicamente
importante, porm, como as hemcias na urina so rapidamente lisadas, a ausncia de hemcias
microscopia no afasta hematria ou confirma a hemoglobinria.
Urobilinognio: A bilirrubina conjugada liberada no intestino delgado com a bile desconjugada por ao
de bactrias da microbiota indgena intestinal. A bilirrubina livre , ento, reduzida a urobilinognio,
estercobilinognio e mesobilirrubinognio que so transformados em pigmentos que do a cor habitual das
fezes. Parte do urobilinognio produzido retorna ao sangue, atravs da circulao enteroheptica. A maior
parte do urobilinognio reabsorvido removido pelo fgado e uma pequena poro excretada na urina (1
mg/dL). Quando h produo elevada de bilirrubina (anemias hemoltica e megaloblstica) observa-se
aumento do urobilinognio reabsorvido, com conseqente aumento da eliminao deste na urina. Nas
disfunes ou leses hepticas (hepatites, cirrose e insuficincia cardaca congestiva), o fgado torna-se
incapaz de remover o urobilinognio reabsorvido tornando sua pesquisa na urina positiva. Outras condies
onde h aumento do urobilinognio urinrio incluem: estados de desidratao e febril. O teste da Uriquest
no afetado por interferentes que produzem resultados falso positivos na reao de Ehrlich. Resultados
iguais ou maiores que 2,0 mg/dL devem ser considerados como positivos ou patolgicos.
15/01/2009

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Tempo de Reao (min)

T0 - T1 - Intervalo de tempo onde ocorre a reao

A1 - Absorbncia do Reagente (Branco da Reao)

A1 Absorbncia do branco da amostra (mistura do 1 reagente com a amostra)

Preciso sem Exatido

CIDO RICO LIQUIFORM Ref. 73

Alantona + CO2 + H2O2

2H2O2 + DHBS + 4-aminoantipirina

Feto maduro 7,6 mg/dL

CIDO RICO LIQUIFORM Ref. 73

Determinar a concentrao do cido rico em amostra de soro e amostra de urina e efetuar o

AU urina (mg/dL) x VU mL/min

VU mL/min = Volume Urina em mL / Tempo coleta em minutos

REAO DE PONTO FINAL

REAO DE PONTO FINAL COM BRANCO DE AMOSTRA

ESPECIFICAES QUALIDADE ANALTICA

REAO DE PONTO FINAL

ALT/GPT Liquiform - Ref. 108

ALT/GPT Liquiform - Ref. 108

DETERMINAO DA ATIVIDADE ENZIMTICA SEM O USO DO PIRIDOXAL FOSFATO

REAO CINTICA CONTNUA DECRESCENTE

AMILASE CNPG - Ref. 25

AMILASE CNPG - Ref. 25

REAO CINTICA CONTNUA CRESCENTE

REAO CINTICA DE TEMPO FIXO COM LEITURA PONTO FINAL

AST/GOT Liquiform - Ref. 109

AST/GOT Liquiform - Ref. 109

DETERMINAO DA ATIVIDADE ENZIMTICA SEM O USO DO PIRIDOXAL FOSFATO

REAO CINTICA CONTNUA DECRESCENTE

BETATEST PLUS - Ref. 14K7

Anti IgG de rato

Conjunto para 25 testes

BETATEST PLUS - Ref. 14K7

BETATEST PLUS TIRAS - Ref. 14T

Anti IgG de rato

Conjunto para 25 testes

BETATEST PLUS TIRAS - Ref. 14T

BILI-D Liquiform - Ref. 93

BILI-D Liquiform - Ref. 93

Para uso em equipamentos semi-automticos e manual, utilizar o produto Bilirrubina Ref. 31 e

Homogeneizar e incubar em banho-maria a 37C durante 5 minutos.