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Eletroforese Capilar
Sonia Claudia do Nascimento de Queiroz *
sonia@cnpma.embrapa.br

Isabel Cristina Sales Fontes Jardim*

Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Qumica

Informaes do Artigo

Histrico do Artigo
Criado em Agosto de 2001

Palavras-Chaves
Eletroforese capilar
Capilares
Detectores
Fluxo eletroosmtico
Difuso molecular

Resumo
O fenmeno denominado eletroforese definido como sendo a migrao
de espcies carregadas eletricamente, que ocorre quando as mesmas so
dissolvidas ou suspensas em um eletrlito, atravs do qual uma corrente
eltrica aplicada [1]. Esta tcnica de separao foi desenvolvida pelo
qumico Arne Tiselius para o estudo de protenas em soro [2] e por este
trabalho ele ganhou o prmio Nobel em 1948.
Este mtodo, denominado soluo livre, era bastante limitado devido
instabilidade do aparelho, e mais significativamente, pelos efeitos de
difuso e aquecimento gerados pelo campo eltrico, os quais comprometiam
a resoluo (a separao) dos compostos. Estes efeitos foram minimizados
com a introduo de suporte (gel ou papel) que ajudou a conter o movimento
livre dos analitos, de forma que o efeito da difuso fosse diminudo.
Entretanto este sistema oferecia um baixo nvel de automao, tempos de
anlise longos e aps a separao a deteco era feita visualmente.
A eletroforese capilar (EC) uma tcnica que foi introduzida em 1981,
por Jorgenson e Lukacs [3] e tem sido aceita cada vez mais, como um
importante mtodo analtico. Em sua forma mais simples a EC uma
aproximao da tcnica original, descrita por Tiselius, porm emprega-se
um tubo capilar, preenchido com um eletrlito, conforme o prprio nome
sugere.

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Aplicaes
A eletroforese capilar (EC) uma tcnica aplicvel na
determinao de uma grande variedade de amostras,
incluindo hidrocarbonetos aromticos, vitaminas hidro
e lipossolveis, amino cidos, ons inorgnicos, cidos
orgnicos, frmacos, catecolaminas, substncias quirais,
protenas, peptdeos e muitos outros. Uma caracterstica
que difere a EC das outras tcnicas a sua capacidade nica
para separar macromolculas carregadas eletricamente
de interesse tanto em indstrias de biotecnologia quanto
* Autor para contato

em pesquisas biolgicas. Por exemplo, o projeto Genoma

Humano, que foi concludo recentemente, teve como meta
obter a seqncia completa do DNA humano e para isso
foi necessrio distinguir os diversos polinucleotdeos, com
massas molares, por volta de 200 a 500 Daltons (Dalton
= u.m.a.) que diferiam entre si por um nico nucleotdeo.
Somente a EC tem resoluo suficiente para este tipo de
separao. Alm disso, o DNA humano contm cerca
de 3 bilhes de nucleotdeos e as altas velocidades de
anlises, obtidas pela EC, permitiram que milhares de
nucleotdeos fossem seqenciados em um nico dia [4].

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Instrumentao

Geralmente o funcionamento de um equipamento de

eletroforese capilar - EC (Figura 1), envolve a aplicao
de alta voltagem, tipicamente 5 a 30 kV em um capilar
de dimetro reduzido gerando correntes na faixa de 10
a 100 mA. O uso do capilar apresenta vrias vantagens,
particularmente com respeito ao aquecimento Joule.

Figura 2 - Exemplo de um eletroferograma

Capilares
Figura 1 - Esquema de um equipamento de eletroforese capilar

A alta resistncia eltrica do capilar permite a aplicao de

campos eltricos altos pois gera um aquecimento mnimo,
alm disso o formato de capilar propicia uma dissipao
eficiente do calor gerado.O uso de campos eltricos
altos resulta em tempo de anlise curto, alta eficincia e
resoluo.
Na eletroforese capilar, o capilar preenchido com uma
soluo tampo e suas extremidades so mergulhadas
em recipientes, que contm a soluo tampo, e onde
aplicado um campo eltrico, que gera uma corrente no
interior do capilar. Os eletrodos so feitos de um material
inerte, tal como, platina, e so tambm mergulhados na
soluo para fechar o circuito. O capilar passa atravs de
um detector, usualmente um detector espectrofotomtrico
de absoro no UV/Vis.
Uma pequena quantidade de amostra introduzida em
uma das extremidades do capilar. A aplicao do campo
eltrico provoca o movimento dos analitos em direo aos
eletrodos. As separaes em EC so baseadas na presena
de um fluxo eletricamente induzido, denominado fluxo
eletroosmtico (FEO), um fenmeno eletrofortico que
gera o fluxo da soluo dentro do capilar, que faz com que
os solutos se movimentem em direo ao detector. Este
fluxo pode reduzir significativamente o tempo de anlise
ou forar um on a reverter a sua tendncia de migrao
em direo a um eletrodo, pelo qual est sendo atrado,
devido ao sinal de sua carga. Outros detalhes sobre o
FEO sero discutidos mais adiante, em outro item.
O grfico, gerado pelo detector, tempo em funo de
resposta do detector denominado eletroferograma
(Figura 2).
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Os capilares podem ser de vidro (para l > 280 nm), teflon

(flexvel, transparente no UV, porm no pode ser usado
com alta voltagem), ou slica fundida, normalmente
recoberta externamente com uma camada de proteo
de poliamida, que produz uma melhora na resistncia
mecnica, uma vez que extremamente frgil e se quebra
com facilidade. Uma pequena poro deste recobrimento
removida a fim de se formar uma janela para a deteco.
A janela ento alinhada ao centro ptico do detector.
Os capilares so, tipicamente, de 25 a 100 cm de
comprimento com 15 a 100 m de dimetro interno. Nos
instrumentos disponveis comercialmente, os capilares
so mantidos dentro de um dispositivo, denominado
cassete, que facilita a insero no instrumento e protege
a janela delicada de deteco. A superfcie interna do
capilar pode ser quimicamente modificada por meio
de ligao covalente com diferentes substncias. Estes
recobrimentos so utilizados para uma grande variedade
de propsitos, tais como, reduzir a adsoro da amostra
ou mudar a carga inica da parede do capilar.
O controle de temperatura ao redor do capilar muito
importante para assegurar separaes reprodutveis. O
controle feito geralmente por ar ou lquido refrigerante,
os quais so forados a passar atravs do cassete, onde se
encontra o capilar.

Introduo da amostra
Na EC, diferentemente das tcnicas cromatogrficas
(Cromatografia Gasosa-CG e Cromatografia Lquida

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de Alta Eficincia-CLAE), a
amostra no injetada e sim
introduzida no capilar pelo lado
mais distante do detector [5].
Mesmo no sendo adequada a
expresso injeo, este termo
ser empregado neste texto
por ser o mais freqentemente
utilizado.
Volumes tpicos de injeo so
de 10 a 100 nL. O modo de
injeo mais empregado em EC
o denominado hidrodinmico,
onde o capilar mergulhado em
um frasco contendo a amostra o
Figura 3 - Esquemas para a introduo de amostras
qual em seguida pressurizado,
submetido ao vcuo ou erguido
(efeito sifo) provocando a entrada de um certo volume de
Fluorescncia
10-3
amostra no capilar.
-2
Uma outra alternativa obtida atravs da insero do
capilar e do eletrodo no frasco da amostra seguida da
aplicao de uma voltagem, sendo que solutos neutros
so arrastados pelo FEO, ao passo que solutos carregados
iro migrar para dentro do capilar, por causa do FEO e
tambm da migrao eletrofortica. Este tipo de injeo
denominado de injeo eletrocintica [6,7]. A Figura 3
mostra os esquemas para introduo de amostras.

Detectores
O detector mais freqentemente utilizado em EC o
espectrofotomtrico de absoro no UV/Vis devido sua
natureza quase universal, ou seja, pode ser aplicado na
deteco de vrias classes de substncias.
A maioria dos instrumentos tem tambm detectores com
arranjo de diodos disponveis, o qual fornece um espectro
de UV/Vis para cada substncia detectada. Os detectores
alternativos esto mostrados na Tabela 1. O acoplamento
de EC com espectrmetro de massas usualmente
empregado para dar informaes estruturais dos analitos
[5].
Tabela 1.Detectores usados em eletroforese capilar e os seus limites de
deteo aproximados

Detector

Absoro no UV-Visvel

Absoro Indireta no UV-Visvel

Limite de Deteo
aproximado (mg L-1)
10-1
1

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Fluorescncia Indireta

10

Espectrmetro de Massa

10-4

Condutividade

10-3

Fluorescncia Induzida por Laser 10-6

Amperomtrico

10-5

Fluxo Eletroosmtico
A parede do capilar de slica contm grupos silanis (SiOH)
os quais se ionizam (SiO- + H+) quando em contato com
solues tampo com pH altos. Esta dissociao produz
uma superfcie carregada negativamente. Uma camada de
contra-on (ctions) ento formada prxima parede do
capilar a fim de manter a eletroneutralidade. Isto forma
a dupla camada e cria uma diferena de potencial muito
prxima parede e este fenmeno conhecido como
potencial zeta.
O potencial zeta essencialmente determinado pela carga
da superfcie na parede do capilar (a carga dependente do
pH). Quando uma diferena de potencial (ddp) aplicada,
estes ons metlicos e suas molculas associadas solvatadas
com gua migram em direo ao ctodo, Figura 4.
Este movimento de ons resulta no movimento das
espcies em direo ao detector e pode ser considerado
como um fluxo eletricamente dirigido. O Nvel do FEO
altamente dependente do pH do eletrlito, uma vez que
o potencial zeta governado pela ionizao dos grupos
silanis (cidos) da parede do capilar. Abaixo de pH 4,

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O potencial zeta gerado em todo o

comprimento do capilar e portanto
produz uma velocidade de fluxo
uniforme sem gerar presso. Se
fizermos um corte no tubo capilar, como
mostrado na Figura 6, verificamos que
o perfil do FEO do tipo plano (plug)
e isto tem um efeito benfico, uma
vez que ele no contribui diretamente
para o alargamento dos picos, pois as
Figura 4 - Migrao dos ons metlicos em direo ao ctodo
molculas do soluto se movero em
velocidades muito prximas. Esta
uma grande vantagem da EC quando comparada ao perfil
a ionizao dos grupos silanis pequena e o FEO no
parablico (fluxo laminar) da CLAE, caracterstico do
significante, enquanto que acima de pH 9 os silanis
fluxo induzido por presso. A soluo em fluxo laminar
ficam completamente ionizados e portanto o FEO alto
move mais lentamente prximo a parede da coluna e
(Figura 5).
mais rapidamente no centro, resultando em diferentes
velocidades do soluto ao longo da coluna. Assim, quanto
maior o tempo que o soluto despender para percorrer o
leito da coluna mais largo se tornar o perfil do pico.

Figura 6 - Perfil do fluxo eletroosmtico, comparado com o do fluxo

pressurisado

Figura 5 - A dependncia do fluxo eletroosmtico em funo do pH

A magnitude do fluxo eletroosmtico pode ser expressa

em termos de velocidade ou mobilidade segundo as
equaes:
V FEO = ( / )E
FEO = /
Em que:
V FEO = velocidade do FEO;
= constante dieltrica;
= potencial zeta;
= viscosidade;
E = potencial aplicado;
FEO = mobilidade do FEO.
O potencial zeta tambm dependente da fora inica
da soluo tampo. Um aumento da fora inica resulta
na compresso da dupla camada e conseqentemente uma
reduo do FEO.
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Um outro benefcio do FEO que ele gera o movimento

de quase todas as espcies, apesar das cargas, na mesma
direo. Sob condies normais (superfcie carregada
negativamente), o fluxo do nodo para o ctodo. nions
sero conduzidos em direo ao ctodo uma vez que o
fluxo gerado pode ser mais que uma ordem de magnitude
maior que as mobilidades eletroforticas. Assim, ctions,
neutros e nions sero eletroferografados em uma mesma
corrida, uma vez que eles migram na mesma direo.
A Figura 2 mostra este processo. Ctions migram
mais rpido, pois sofrem atrao pelo ctodo, neutros
so arrastados na mesma velocidade do FEO e no so
separados e nions migram mais lentamente uma vez que
so atrados para o nodo, mas so arrastados pelo FEO
em direo ao ctodo.

Tempo de Migrao e Mobilidade

O tempo requerido para um composto migrar do incio
do capilar para o ponto de deteco chamado tempo
de migrao, e dado pelo quociente entre a distncia de

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migrao e a velocidade. O tempo de migrao e outros

parmetros experimentais podem ser usados para calcular
a mobilidade aparente (a) do soluto usando:
a =l / tE = lL/tV
a = e + FEO
em que:
V = voltagem aplicada;
L = comprimento total do capilar;
t = tempo de migrao;
E = campo eltrico;
l = comprimento efetivo.
Na presena do FEO, a medida da mobilidade chamada
de mobilidade aparente, a. A mobilidade efetiva, e, pode
ser extrada da mobilidade aparente pela medida do FEO
usando um marcador neutro que move com a velocidade
igual ao FEO. Exemplos de marcadores neutros incluem
dimetilsulfxido e acetona.
H duas medidas de comprimento no capilar, uma
denominada efetiva e a outra total. O comprimento efetivo
a medida do ponto de injeo at ponto de deteco. Para
deteco espectroscpica on-capillary, este comprimento
tipicamente de 5 a 10 cm mais curto que o comprimento
total. Para deteco off-capillary, por exemplo por
espectrometria de massas, os dois comprimentos so
equivalentes.
O conhecimento de ambos os comprimentos importante,
uma vez que a mobilidade e o tempo de migrao so
definidos pelo comprimento efetivo, ao passo que o campo
eltrico definido pelo comprimento total.

Fontes de Alargamento dos Picos

A separao na eletroforese baseada nas diferenas nas
mobilidades dos solutos. A diferena necessria para
resolver dois solutos dependente da distncia entre os
dois solutos. A disperso, alargamento do pico do soluto,
resulta das diferenas na velocidade do soluto, e pode ser
definida como a largura do pico na linha de base, wb. Para
um pico gaussiano:
wb = 4
em que:
o desvio padro do pico (no tempo, comprimento ou
volume).
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A eficincia, expressa pelo nmero de pratos, N, pode ser

obtida por:
N = (l/)2
em que:
l = comprimento efetivo do capilar.
2tot = w2/5,545
Pode, tambm, ser relacionado altura de prato, H, por:
H = l/N

Difuso molecular
O efeito que mais contribui para o alargamento do pico
causado pela difuso molecular do soluto ao passar ao
longo do capilar (difuso longitudinal). Assim, a eficincia
pode ser relacionada difuso molecular em termos de
cromatografia, que :
2 = 2Dt = 2DlL/eV
sendo:
D = coeficiente de difuso do soluto.
A partir das equaes anteriores, obtm-se uma expresso
eletrofortica fundamental para o nmero de pratos:
N = eVl/2Dl = El/2D
Da equao acima, a razo para a aplicao de campo
eltrico alto evidente. Isto devido ao fato que o soluto
gasta menos tempo no capilar, quando campo eltrico
alto aplicado, as molculas tm menos tempo para
difundir. Alm disso esta equao mostra que molculas
grandes, tais como protenas e DNA, as quais tm baixo
coeficiente de difuso, iro exibir menos disperso que
molculas pequenas. Os valores de coeficiente de difuso
de algumas substncias esto listados na Tabela 2.
Tabela 2. Coeficientes de difuso de algumas substncias, em gua
(25 C)

Substncia

D x 10 -5 (cm s-1)

NaCl

1,48

HCl

Glicina
Citrato

3,05

1,06

0,66

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Citocromo C

Hemoglobina (Humana)

0,11

0,069

O nmero de pratos pode ser determinado diretamente

no eletroferograma, usando por exemplo:
N = 5,54(t/w1/2)2
sendo:
t = tempo de migrao;
w1/2 = largura temporal do pico meia altura

Aquecimento Joule
Durante a aplicao da voltagem, e portanto a passagem
de corrente pelo capilar, pode ocorrer o aquecimento
Joule (formao de gradiente de temperatura). Este
aquecimento Joule causa a formao de correntes de
conveco dentro do capilar, causando uma mistura das
bandas j separadas, resultando na disperso do pico. Este
efeito pode ser minimizado pela aplicao de voltagens
adequadas e uso de tampo com concentrao mais baixa,
aliado a um bom controle de temperatura.

Injeo da amostra
Em adio difuso molecular, uma outra fonte de
alargamento do pico o comprimento do volume de
injeo. Um comprimento de poucos milmetros bastante
significativo dado que o comprimento de um capilar pode
ser de 25 cm e a janela de deteco de 0,1 mm. Uma
maneira de minimizar este problema dissolver a amostra
em um solvente de fora inica menor que a do tampo.
Sob estas condies, o campo eltrico maior na zona da
amostra que no resto do capilar. Assim os ons se movem
mais rapidamente at atingirem o tampo, onde o campo
eltrico menor, diminuindo portanto a velocidade. Este
processo facilitado quando a amostra dissolvida em
gua pura ou em uma soluo tampo diluda cerca de 10
vezes.

Modos de Separao
Hoje em dia a eletroforese um nome genrico dado
para uma srie de tcnicas de separao que envolvem a
aplicao de um campo eltrico em um capilar preenchido
com uma soluo tampo. As bases destas separaes
esto descritas a seguir [8].

Eletroforese Capilar em Soluo Livre (ECSL)

Fluxo eletroosmtico
O FEO, j foi descrito anteriormente, e, em princpio,
o perfil plano resulta em um benefcio, uma vez que
no contribui diretamente para a disperso das zonas.
Entretanto se a amostra interage com a parede do capilar,
a eficincia pode ser diminuda devido deformao
do perfil do pico. Para contornar este problema podem
ser adicionados modificadores no tampo ou modificar
quimicamente a parede do capilar.

Deteco on-column
Uma das causas do alargamento do pico em CLAE o
volume morto nas conexes, desse modo picos j separados
na coluna tornam-se mais dispersos, chegando ao detector
mais alargados, se houver volume morto nas conexes,
ocorre uma re-mistura dos picos. Isto, no ocorre em EC
pois a cela de deteco localizada no prprio capilar
(regio sem revestimento).
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A separao de ons a forma mais simples de EC e

denominada eletroforese capilar em soluo livre. Muitos
compostos podem ser separados rapidamente e facilmente
por esta tcnica. A separao em ECSL baseada nas
diferenas nas mobilidades eletroforticas resultantes das
diferentes velocidades de migraes de espcies inicas no
tampo, contido dentro do capilar.
O mecanismo de separao baseado nas diferenas
na razo massa/carga dos solutos em um dado pH. Na
ECSL espcies neutras no so separadas, porm permite
a separao de ctions e nions na mesma corrida.

Eletroforese Capilar em Gel (ECG)

A separao de biomolculas grandes, tais como DNA,
por ECSL, s vezes muito difcil de se obter devido
similaridade nas razes massa/carga. Assim ECSL
muitas vezes no suficiente para separar estes tipos de
substncias. Uma alternativa preencher o capilar com
um gel, onde o principal mecanismo de separao est

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baseado nas diferenas nos tamanhos dos solutos que

migram atravs dos poros do polmero. Esta tcnica
denominada eletroforese capilar em gel.
ons menores migram mais rapidamente enquanto que
solutos maiores ficam mais tempo retidos. Alm disso,
o gel serve como um meio anticonvectivo, minimizando
a difuso dos solutos. Ele tambm previne a adsoro
do soluto nas paredes do capilar e ajuda a eliminar a
eletroosmose. Entretanto, o gel deve possuir certas
caractersticas, tais como, ser estvel termicamente e ter
uma faixa de tamanho de poros apropriada (dependendo
das massas molares dos solutos da amostra), para poder
ser um meio eletrofortico adequado. Esta tcnica est
sujeita limitao de que espcies neutras no migram
atravs do gel, uma vez que o FEO suprimido.

Eletrocromatografia Capilar Micelar (ECCM)

A ECCM foi inicialmente desenvolvida para a resoluo
de compostos neutros, os quais no podem ser separados
usando simplesmente a ECSL.
As condies de separao envolvem o uso de eletrlitos
contendo nveis relativamente altos de surfactantes, tal
como dodecilssulfato de sdio (SDS). Acima de uma
determinada concentrao, denominada de concentrao
micelar crtica (CMC), as molculas de surfactante
comeam a agregar-se, formando micelas. A separao
baseada na partio das molculas entre a fase micelar
(pseudo-fase estacionria) e o tampo aquoso. As micelas
de SDS tm carga negativa e migram contra o FEO.
Entretanto, o FEO suficientemente forte para forar
as micelas passarem pelo detector. Espcies carregadas
positivamente so retardadas pela associao com micelas
carregadas negativamente, molculas neutras tm uma
partio entre as fases micelar e aquosa do tampo e tm
uma mobilidade intermediria, enquanto que molculas
carregadas negativamente so repelidas pelas micelas.
As separaes so conduzidas em pH onde h um FEO
aprecivel.
Solventes orgnicos e reagentes par-inicos tambm
podem ser adicionados no tampo para ajustar o fator de
reteno e seletividade, exatamente como em fase reversa
por CLAE. ECCM especialmente til para a resoluo
de solutos neutros insolveis em gua, como por exemplo
os esterides.

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Eletroforese Capilar com Focalizao Isoeltrica

(ECFI)
Na focalizao isoeltrica capilar substncias anfteras
so separadas com base em seus pontos isoeltricos (pH
onde o nmero de molculas que migra para o nodo
igual ao nmero de molculas que migra para o ctodo).
Esta tcnica baseada na formao de um gradiente de
pH, obtido pelo uso de substncias conhecidas como
anflitos, que so geralmente cidos polimricos sintticos
(e.g., poliaminocidos, cidos policarboxlicos ou cidos
polissulfnicos).
A aplicao de um campo eltrico na mistura de anflitos
gera a formao de um gradiente de pH. Os anflitos so
mantidos em um meio onde se usa um ctodo com pH
alto, tipicamente hidrxido de sdio e um nodo com pH
baixo, tipicamente cido fosfrico. As protenas, que so
anfteras, iro se comportar de maneira idntica e sero
focalizadas em uma dada posio ditada pelo seu ponto
isoeltrico (PI).
Neste tipo de separao necessrio um passo adicional,
pois os solutos no podem ser detectados in situ,
pois quando eles atingem o seu PI eles param de se
movimentar dentro do capilar e, portanto no atingem
a cela do detector. Este passo pode ser feito de diferentes
maneiras. Aps a focalizao, as zonas podem ser movidas
no capilar, em direo ao detector, por meio de presso,
que pode ser obtida por exemplo, elevando-se uma das
extremidades do capilar.
Alternativamente, aps a focalizao, a corrente do sistema
baixa pois somente ons OH- e H+ contribuem para a
condutividade. Quando um sal, por exemplo cloreto de
sdio, adicionado ao anlito (reservatrio cido) ou ao
catlito, os ons cloreto iro predominar e iro aumentar a
condutividade. Pelo princpio da eletroneutralidade, ons
sdio podem ser trocados por prtons no tubo, gerando
um gradiente desbalanceado. Isso causa a migrao dos
ons em direo ao detector.

Isotacoforese Capilar (IC)

A principal diferena entre a isotacoforese e as outras
tcnicas em CE que ela realizada em um sistema de
tampo descontnuo. A amostra condensada entre dois
tampes diferentes, um deles possui ons com a mais alta
mobilidade no sistema e denominado dianteiro, e um
outro com ons com a mais baixa mobilidade no sistema,
que denominado terminador.

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Vantagens e Limitaes

Na prtica, o reservatrio de tampo do lado mais prximo

ao detector e o capilar so preenchidos com o eletrlito
dianteiro, o outro reservatrio preenchido com o outro
eletrlito terminador e a amostra injetada entre eles.

A tcnica de eletroforese capilar possui uma srie de

vantagens, tais como,

Quando um campo eltrico aplicado, os componentes

da amostra comeam a se separar em zonas de acordo
com suas mobilidades. Quando um estado de equilbrio
atingido, os componentes da amostra so separados em
zonas que esto em contato umas com as outras, pois
no h eletrlito carreador, e todas se movem na mesma
velocidade.

Nesta tcnica o eletroferograma obtido contm uma srie

de patamares (degraus), onde cada degrau representa
uma zona de um analito. Ao contrrio dos outros modos
de EC, onde a quantidade de amostra presente pode
ser determinada pela rea do pico, como tambm em
cromatografia, a quantificao em isotacoforese est
baseada principalmente na medida do comprimento da
zona, que proporcional quantidade de substncia
presente.

rapidez,
versatilidade,
baixo custo por anlise, alto poder se separao
(resoluo) e
consumo mnimo de amostras, reagentes e solventes.

Alm disso, oferece a possibilidade de automao e

deteco on-line.
Entretanto esta tcnica oferece algumas limitaes,
pois no adequada para a determinao de compostos
volteis, no-polares e de massa molar baixa, os quais so
melhores determinados por cromatografia gasosa.
Tambm no muito adequada para a anlise de polmeros
no inicos de massa molar alta e no to sensvel quanto
a cromatografia lquida de alta eficincia.

Referncias Bibliogrficas
Anlises Quantitativas e Qualitativas
A anlise qualitativa feita atravs da comparao dos
tempos de migrao dos padres com os tempos de
migrao das substncias presentes na amostra e/ou
atravs de espectros de UV/Vis (detector por arranjo de
diodos) ou do espectro de massas (detector espectrmetro
de massas).

1. Heiger, D. N., High Performance Capillary

Electrophoresis, Hewlett Packard Company,
Publication Number 12-5091-6199E, 1997.
2. Tiselius, A., The Moving-Boundary Method of
Studying the Electrophoresis of Proteins, Tese de
Doutorado, University of Uppsala, Sucia, 1930.

A quantificao das substncias, com concentraes

desconhecidas, presentes na amostra, feita atravs do
procedimento usual de calibrao:

3. Jorgenson, J. W.; Lukacs K. D., Zone

Electrophoresis in Open-tubular Glass Cappilaries,
Anal. Chem., 1981, 53:1298.

1. injeo de solues dos padres de concentraes

conhecidas;
2. obteno das respostas do detector para cada
composto, em funo da altura, rea ou rea dividida
pelo tempo de migrao;
3. construo da curva analtica (resposta do detector
versus concentrao);
4. injeo das amostras;
5. obteno das respostas do detector para as amostras;
6. quantificao das substncias atravs das curvas
analticas.

4. Skoog, D. A.; Holler, F. J.; Nieman T.A., Principes

of Instrumental Analysis, Saunders College
Publishing, Philadelphia, 1998.

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5. Settle, F., Handbook of Instrumental Techniques for

Analytical Chemistry, Prentice-Hall International
Inc., New Jersey, 1997.
6. Li, S. F. Y., Capillary Electrophoresis. Principles,
Practice and Applications. J Chrom Libr, 1992,
52:1.

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7. Grossman, P. D.; Colburn. J. C., Capillary

Electrophoresis. Theory and Practice, Academic
Press Inc., San Diego - California, 1992.
8. Tavares, M. F. M, Mecanismos de Separao em
Eletroforese Capilar, Qum. Nova, 1997, 20: 493511.

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