ESTUDO IN VITRO DO PERFIL DE LIBERAO DE

MICROEMULSES TPICAS DE DICLOFENACO DE

DIETILAMNIO
Valria Ferreira da Costa Borba1; Davi Pereira de Santana2
1

Estudante do Curso de Farmcia CCS UFPE; E-mail: valeria.borba@hotmail.com, 2Docente/pesquisador

do Depto de Cincias Farmacuticas CCS UFPE. E-mail: d-santana@bol.com.br.

Sumrio: A administrao percutnea dos AINES tem sido estudada como uma forma de
melhorar a eficcia teraputica destes frmacos. Este trabalho teve como objetivo realizar
um estudo in vitro do perfil de liberao para avaliao da permeao e reteno do
diclofenaco de dietilamnio em microemulses tpicas. Para avaliao do perfil cintico
utilizou-se clulas de difuso tipo Franz com rea difusional de 1,15 cm2, volume de 6
mL e usando membranas artificiais hidroflicas de acetato de celulose 0,45 m. O
compartimento receptor foi preenchido com tampo fosfato pH 7,4 num sistema composto
de seis clulas individuais conectados a um banho termostatizado 37 0,5 oC sob
agitao magntica constante por 12 horas. A quantidade de frmaco liberada no
compartimento receptor foi quantificada por CLAE-UV atravs do mtodo analtico
desenvolvido. A permeao desta formulao foi comparado permeao de 300 mg do
medicamento de referncia. Observou-se que houve uma diferena significativa entre as
formulaes testadas, cuja ordem foi emulgel genrico > ME-DDA F10 gel. A literatura
relata que as ME tm grande capacidade de liberao de drogas. No entanto, neste ensaio,
foi encontrado resultado contraditrio, pois a ME apresentou um menor fluxo e quantidade
liberada que o emulgel de referncia.
Palavraschave: diclofenaco de dietilamnio; microemulso; perfil de liberao in vitro
INTRODUO
O diclofenaco pertence classe dos Antiinflamatrios No-esteroidais (AINES) e quando
administrado oralmente exaustivamente metabolizado no fgado, devido ao seu curto
tempo de meia-vida. A administrao percutnea dos AINES tem sido estudada como uma
forma de melhorar a eficcia teraputica. Recentemente, sistemas particulados como
lipossomas, nanoparticulas e microemulses esto sendo investigados como alternativa de
veculos para a absoro de drogas (KNEPP, 1990). Observa-se uma maior aceitao de
sistemas transdrmicos nos ltimos anos devido a uma srie de fatores como a grande
adeso dos pacientes ao tratamento, nveis plasmticos constantes, resultado da liberao
contnua de frmaco por determinado perodo; menor incidncia de efeitos colaterais,
devido ausncia de picos de concentrao, eliminao do efeito de primeira passagem e
disponibilidade de tecnologia para formulao de adesivos confiveis e confortveis ao uso
(SHAH, 1993). A pele formada por trs camadas: epiderme, derme e hipoderme, da mais
externa para a mais profunda, respectivamente. Na superfcie da pele existe uma pelcula
de material emulsificado, composta por complexa mistura de sebo, suor e lmina crnea
descamativa, a ltima das camadas de clulas epidrmicas mortas chamada de estrato
crneo(ANSEL, 2007). A barreira oferecida pelo estrato crneo, leva a limitaes muito
especficas. Apenas compostos dotados de certa lipofilia, no ionizados e de baixo peso

molecular podem penetrar passivamente a pele, a ponto de sofrerem absoro percutnea.

(AULTON, 2005). Os medicamentos podem penetrar na pele por trs rotas: a via
transcelular, a intercelular e atravs das paredes dos folculos pilosos, das glndulas
sudorparas ou sebceas (MOSER, 2001). O frmaco deve vencer a barreira do estrato
crneo para atingir as camadas mais profundas, sem que haja permeao e absoro
sangunea. Na difuso passiva, a matria se move de uma regio do sistema para outro sem
que haja influncia de outras molculas e/ou gasto de energia. A hiptese bsica de que a
taxa de transferncia da substncia difundida por unidade de rea de uma seo
proporcional ao gradiente de concentrao medido perpendicularmente a essa seo
(AULTON, 2005). Isso expresso pela primeira lei de Fick. A determinao da quantidade
de frmaco que chega ao local de ao uma medida importante para poder avaliar a
eficcia do produto dermatolgico. Uma grande quantidade de artigos, assim como
guidelines do FDA, recomenda o uso de clulas de difuso como a clula de Franz,
equipada com membrana sinttica para determinar a liberao in vitro de formulaes
tpicas, como cremes, geles e loes, e tambm de sistemas transdrmicos (BEMVINDO,
2006). A clula de difuso de Franz tornou-se um mtodo popular de estudo da difuso e
permeao de substncias atravs da pele. Depois de algum tempo foi tambm utilizada
para determinao da liberao in vitro de semi-slidos (SHAH, 1989; CLEMENT, 2000).
O objetivo do teste no necessariamente mimetizar o comportamento in vivo, e sim
avaliar indicadores de performance da formulao (SIEWERT, 2003). A taxa de liberao
de um frmaco a partir de determinada formulao depende diretamente das caractersticas
fsico-qumicas do veculo e do frmaco (BEMVINDO, 2006 apud SANTOYO, 1996).
MATERIAIS E MTODOS
Foi preparada uma microemulso a partir da mistura dos ingredientes polietilenoglicol-8
cprico caprlico glicerdeo como tensoativo (35,3 %) com poligliceril 6-dioleato como cotensoativo (17,6 %) e, a esta mistura, foi adicionado o miristato de isopropila como fase
oleosa (5,9 %) e em seguida gua purificada tipo Milli-Q (41,2 %). O diclofenaco de
dietilamnio foi incorporado ao sistema por simples solubilizao na concentrao de
1,16%. A microemulso foi preparada 48 horas antes dos testes para estabilizao
termodinmica das micelas na temperatura ambiente. As cinticas de difuso in vitro foram
conduzidas utilizando-se clulas de difuso tipo Franz com rea difusional de 1,15 cm2,
volume de 6 mL e usando membranas artificiais hidroflicas de acetato de celulose 0,45
m. O compartimento receptor foi preenchido com tampo fosfato pH 7,4 num sistema
composto de seis clulas individuais conectados a um banho termostatizado 37 0,5 oC
sob agitao constante de 100 rpm em agitador magntico por um perodo de 12 horas. As
membranas foram colocadas na parte superior da clula receptora. No compartimento
doador, foram aplicados 300 L da formulao diretamente sobre a membrana e,
posteriormente, o sistema foi fechado. As amostras da soluo receptora foram coletadas
nos seguintes tempos: 0,5; 1,0; 1,5; 2,0; 2,5; 3,0; 4,0; 6,0; 8,0; 10 e 12 horas. O volume
total da fase receptora foi substitudo a cada amostragem com tampo fosfato pH 7,4 para
manuteno das condies sink do sistema. A quantidade de frmaco liberado no
compartimento receptor foi quantificada por CLAE-UV atravs do mtodo analtico
desenvolvido. A permeao desta formulao foi comparado permeao de 300 mg do
medicamento Referncia.

RESULTADOS
A Figura 1 mostra a liberao in vitro da ME-DDA gel e da formulao comercial emulgel
genrico, usando membranas hidroflicas de acetato de celulose aps 12 horas de cintica.

Figura 1. Liberao in vitro do DDA da ME-DDA gel e da formulao comercial emulgel

genrico.
A partir desta dos dados da Figura 1, foi possvel calcular o fluxo (J) no steady-state a
partir da poro linear. J o coeficiente de permeabilidade (Kp) foi calculado a partir do
fluxo (J) no estado de equilbrio vs a concentrao de DDA no compartimento doador
(Cdoador) conforme equao abaixo sugerida por OZGUNEY (2006): Kp = J/Cdoador . O Kp da
ME-DDA gel (5,76 x 10-3 7,1x10-4 cm h-1) foi menor em relao ao medicamento
genrico (1,28 x 10-2 2,3x10-3 cm h-1). Nesta triagem, os valores de J da ME-DDA gel,
emulgel comercial genrico foram, respectivamente, 20,06 2,48 e 44,84 8,01.
DISCUSSO
Na avaliao de produtos de ao dermatolgica como, por exemplo, uma ME de DDA,
testes clnicos devem ser precedidos, e em algumas vezes substitudos, por testes in vitro.
Estes testes, devido s suas peculiaridades, permitem entender alguns fenmenos que
ocorrem entre a aplicao do produto e o efeito medido farmacologicamente, de maneira
prtica, rpida e sem a interferncia de fatores biolgicos. A eleio de uma soluo
receptora para os experimentos in vitro depende da solubilidade do frmaco, pois
necessria a manuteno das condies sink para garantir a obteno de resultados
efetivos. No caso do DDA, o mesmo mostrou-se muito solvel em tampo fosfato pH 7,4,
com solubilidade superior 6 mg mL-1 e por isso o mesmo foi escolhido. A literatura relata
que as ME tm grande capacidade de liberao de drogas (OZGUNEY, 2006). No entanto,
neste ensaio, foi encontrado resultado contraditrio, pois a ME apresentou um menor J e
menor quantidade liberada que o emulgel genrico comercial.

CONCLUSES
O mtodo de quantificao do DDA por CLAE-UV apresentou confiabilidade e segurana
necessrias em procedimentos analticos do tipo cintica de liberao in vitro. Com o
estudo de liberao in vitro do DDA, utilizando o modelo de clulas de Franz em
membranas sintticas de acetato de celulose, foi possvel calcular e entender os fenmenos
cinticos envolvidos neste tipo de estudo como quantidade liberada, fluxo e coeficiente de
permeabilidade.
AGRADECIMENTOS
Agradeo a PROPESQ/CNPq o auxlio financeiro durante o desenvolvimento desta
pesquisa, ao Departamento de Cincias Farmacuticas da UFPE por ceder o laboratrio de
Farmacotcnica, ao Prof. Dr. Davi Pereira de Santana, orientador, e ao Prof. Jos
Alexsandro da Silva, autor deste projeto de doutorado, a oportunidade me concedida.
REFERNCIAS
ANSEL - JUNIOR, L. V. et al. 2007. Formas Farmacuticas e Sistemas de liberao de
frmacos. Editora Artmed.
AULTON, M. E. 2005. Delineamento de formas farmacuticas. 2. ed. Porto Alegre:
Artmed.
BEMVINDO, C. S.2006. Estudo comparativo da liberao e penetrao cutnea de
nitrato de miconazol de emulses tpicas comerciais.Dissertao de Mestrado em Cincias
Famacuticas Faculdade de Farmcia, Universidade Federal do Rio de Janeiro
CLEMENT, P.; LAUGEL, C. & MARTY, J.P. 2000. Influence of three synthetic
membranes on the release of caffeine from concentrated w/o emulsions, Journal of
Controlled Release, v. 66, p. 243-254.
KNEPP, V. M., SZOKA, F. C., JR & GUY, R. H.1990. Controlled drug release from novel
liposomal delivery system: II. Transdermal delivery characteristics. J. Control. Rel.,
v.12,p. 25-30.
MOSER, K. et al. Passive skin penetration enhancement and its quantification in vitro.
European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics, v. 52, p. 103-112, 2001.
OZGUNEY, I. S. et al. 2006. Transdermal delivery of diclofenac sodium through rat skin
from various formulations. : AAPS PharmSciTech. v.7, n.4, p.88, 2006
SHAH, V. P. et al. 1989. Determination of in vitro drug release form hydrocortisone
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SHAH, V.P. et al. 1993. Bioavailability and bioequivalence of transdermal drug delivery
systems. In Shah e Maibach: Topical drug bioavailability, bioequivalence and penetration.
Nova Iorque: Plenum Press, p. 415-424.
SIEWERT, M. et al. 2003. FIP/AAPS Guidelines to Dissolution/in vitro release testing of
Novel/Special dosage forms. AAPS PharmSciTech, v. 4, n. 1, p. 1-10.