Biologico Manual

MINISTRIO DA SADE
Secretaria de Cincia, Tecnologia e Insumos Estratgicos
Diretrizes Gerais
para o Trabalho em Conteno
com Material Biolgico
Srie A. Normas e Manuais Tcnicos
Braslia DF
2004
2004 Ministrio da Sade.

permitida a reproduo parcial ou total desta obra, desde que citada a fonte.
Srie A. Normas e Manuais Tcnicos
Tiragem: 1. edio 2004 500 exemplares
Elaborao, distribuio e informaes:
MINISTRIO DA SADE
Secretaria de Cincia, Tecnologia e Insumos Estratgicos
Departamento de Cincia e Tecnologia
Esplanada dos Ministrios, Edifcio Sede, Bloco G, 8. andar, sala 831
CEP: 70058-900, Braslia DF
Tel.: (61) 315 3465
E-mail: ciencia@saude.gov.br
Reviso Tcnica:
Csar P. Jacoby
Daniela Buosi
Priscila C. Bueno
Telma Abdalla de Oliveira Cardoso
Elaborao:
Comisso de Biosseguranca em Sade (CBS/MS)
Agradecemos pelo empenho do Dr. Hermann Gonalves Schatzmayr (Fundao Oswaldo Cruz
- Fiocruz) na elaborao do anexo: Classicao de Agentes com Base em seu Risco Biolgico.
Impresso no Brasil / Printed in Brazil
Ficha Catalogrca
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Brasil. Ministrio da Sade. Secretaria de Cincia, Tecnologia e Insumos Estratgicos.
Diretrizes gerais para o trabalho em conteno com material biolgico / Ministrio da Sade, Secretaria de
Cincia, Tecnologia e Insumos Estratgicos Braslia: Ministrio da Sade, 2004.
60 p.: il. (Srie A. Normas e Manuais Tcnicos)
ISBN 85-334-0793-9
1. Conteno de riscos biolgicos. 2. Medio de risco. 3. Laboratrios. I. Brasil. Ministrio da Sade.
Secretaria de Cincia, Tecnologia e Insumos Estratgicos II. Ttulo. III. Srie.
NLM WA 671
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Catalogao na fonte Editora MS
Ttulos para indexao:
Em ingls:
General Directives for the Containment
Work with Biological Material
Em espanhol: Directivas Generales para el Trabajo en
Contencin con Material Biolgico
EDITORA MS
Documentao e Informao
SIA, Trecho 4, Lotes 540/610
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Equipe editorial:
Normalizao: Luciana Cerqueira
Reviso: Cludia Profeta, Ricardo Bortoleto
Capa e editorao: Alisson Albuquerque
LISTA DE SIGLAS
Anvisa Agncia Nacional de Vigilncia Sanitria
BPL Boas Prticas de Laboratrio
CBS Comisso de Biossegurana em Sade
CSB Cabine de Segurana Biolgica
CTNBio Comisso Tcnica Nacional de Biossegurana
EPI Equipamento de Proteo Individual
HEPA High Efficiency Particulated Air (Filtro de Ar de Alta Eficincia)
HVAC Heating, Ventilation and Air Conditioning Systems (Sistemas de
aquecimento, ventilao e ar condicionado)
IN Instruo Normativa
NB Nvel de Biossegurana
OGM Organismo Geneticamente Modificado
SUMRIO
Apresentao.........................................................................................
Diretrizes gerais para o trabalho em conteno com material biolgico
mbito de aplicao ........................................................................
Responsabilidades ............................................................................
I Classes de risco dos agentes biolgicos ..............................................
Classe de risco 1 .............................................................................
Classe de risco 2 .............................................................................
Classe de risco 3 .............................................................................
Classe de risco 4 .............................................................................
Classe de risco 5 .............................................................................. 10

II Nvel de biossegurana (NB) ............................................................. 10
Nvel de biossegurana 1 NB-1 ......................................................... 10
Procedimentos-padro de laboratrio para o NB-1 ........................... 10
Prticas especiais para o NB-1 ......................................................... 12
Equipamentos de conteno para o NB-1 ........................................ 12
Instalaes laboratoriais NB-1 .......................................................... 12
Nvel de biossegurana 2 NB-2 ......................................................... 14
Procedimentos-padro de laboratrio para o NB-2 .......................... 15
Prticas especiais para o NB-2 ........................................................ 15
Equipamentos de conteno para o NB-2 ........................................ 16

Nvel de biossegurana 3 NB-3 .......................................................... 17
Prticas especiais para o NB-3 ......................................................... 18
Equipamentos de conteno para o NB-3 ......................................... 20
Instalaes laboratoriais NB-3 ......................................................... 20
Observao ...................................................................................... 22
Nvel de biossegurana 4 NB-4 .......................................................... 23
Prticas especiais para o NB-4 ........................................................ 24
Equipamentos de conteno para o NB-4 ....................................... 25
Referncias bibliogrficas ...................................................................... 29
Glossrio ............................................................................................... 35
Anexo I Cabines de Segurana Biolgica (CSB)................................... 38
Anexo II Classificao de agentes com base em seu risco biolgico ... 40
APRESENTAO
Em fevereiro de 2002 (Portaria n. 343/02), foi criada a Comisso de Biossegurana em Sade (CBS), no mbito do Ministrio da Sade, atualmente
coordenada pela Secretaria de Cincia, Tecnologia e Insumos Estratgicos
(SCTIE), e composta, alm de representantes desta, por representantes da Secretaria de Vigilncia em Sade (SVS), Secretaria de Ateno Sade (SAS),
Assessoria de Assuntos Internacionais de Sade (Aisa), Fundao Oswaldo
Cruz (Fiocruz), Fundao Nacional de Sade (Funasa) e Agncia Nacional de
Vigilncia Sanitria (Anvisa).
Essa Comisso vem trabalhando com o objetivo de definir estratgias de
atuao, avaliao e acompanhamento das aes ligadas Biossegurana no
mbito de sua competncia. Dessa forma, vem discutindo e propondo a uniformizao de conceitos e aes, possibilitando a integrao deste Ministrio
com as demais instituies que lidam com o tema.
Durante suas reunies, a Comisso de Biossegurana em Sade identificou, dentre outras prioridades, a necessidade de uma reviso de literatura
e elaborao de propostas sobre questes relacionadas Biossegurana em
Sade, alm de normas para classificao de risco dos agentes biolgicos patognicos, que resultaram no documento: Diretrizes Gerais para o Trabalho
em Conteno com Material Biolgico.
Essas diretrizes definem os requisitos mnimos necessrios ao trabalho
seguro com material biolgico em ambiente de conteno. Aplicam-se
execuo dos procedimentos de segurana, em conteno em laboratrio,
na manipulao de materiais biolgicos, que contenham ou possam conter
agentes biolgicos com potencial patognico.
Para a sua elaborao foram utilizados documentos normativos nacionais
e internacionais, listados nas referncias bibliogrficas, considerando todos
os diferentes aspectos concernentes ao seu escopo.
Reinaldo Felippe Nery Guimares

Diretor do Departamento de Cincia e Tecnologia
DIRETRIZES GERAIS PARA O TRABALHO EM

CONTENO COM MATERIAL BIOLGICO
Estas diretrizes, elaboradas pela Comisso de Biossegurana em Sade/
Ministrio da Sade/CBS, definem os requisitos mnimos necessrios ao trabalho seguro com material biolgico em ambiente de conteno. Aplicam-se
execuo dos procedimentos de segurana, em conteno em laboratrio,
na manipulao de materiais biolgicos, que contenham ou possam conter
agentes biolgicos com potencial patognico.
Para a elaborao dessas diretrizes, foram utilizados documentos normativos nacionais e internacionais, listados nas referncias bibliogrficas, considerando todos os diferentes aspectos concernentes ao seu escopo.
mbito de Aplicao
Estas diretrizes se aplicam ao trabalho em conteno que utilize materiais
biolgicos, independentemente do volume a ser manipulado.
Para o trabalho em grande escala, o nvel de Biossegurana deve ser automaticamente o superior ao recomendado para a manipulao do material
biolgico envolvido.
Caso seja identificada ou suspeitada a presena de microorganismos da
classe de risco 5 no Pas, estes devero ser manipulados como descrito para
os microorganismos da classe de risco 4.
Responsabilidades
O Profissional Responsvel garantir o cumprimento dessas normas, devendo promover a conscientizao e o treinamento de todos os envolvidos,
direta ou indiretamente, no trabalho para o cumprimento dessas normas.
I CLASSES DE RISCO DOS AGENTES BIOLGICOS

Conforme anexo 2, os agentes biolgicos humanos e animais so divididos em cinco classes, de acordo com os seguintes critrios de patogenicidade: alterao gentica ou recombinao gnica; estabilidade; virulncia;
modo de transmisso; endemicidade; conseqncias epidemiolgicas; e disponibilidade de medidas profilticas e de tratamento eficaz. O documento
do anexo 2, Classificao de Agentes com Base em seu Risco Biolgico, foi
elaborado pela CBS para ser utilizado como referncia, haja vista a defasagem da IN n. 7, da CTNBio, de 6 de junho de 1997.
Classe de Risco 1
O risco individual e para a comunidade baixo. Aplica-se a agentes biolgicos bem caracterizados, que tm probabilidade nula ou baixa de provocar
infeces no homem ou em animais sadios e de risco potencial mnimo para
o profissional do laboratrio e para o ambiente. Exemplo: Lactobacillus.
Classe de Risco 2
O risco individual moderado e para a comunidade limitado. Aplicase a agentes biolgicos que provocam infeces no homem ou nos animais,
cujo risco de propagao na comunidade e de disseminao no meio ambiente limitado, no constituindo em srio risco a quem os manipula em
condies de conteno, pois existem medidas teraputicas e profilticas eficientes. Exemplo: Schistosoma mansoni.
Classe de Risco 3
O risco individual alto e para a comunidade limitado. Aplica-se a
agentes biolgicos que provocam infeces, graves ou potencialmente letais,
no homem e nos animais e representa um srio risco a quem os manipulam.
Representam risco se disseminados na comunidade e no meio ambiente, podendo se propagar de indivduo para indivduo, mas usualmente existem medidas de tratamento e/ou de preveno. Exemplo: Bacillus anthracis.
Classe de Risco 4
O risco individual e para a comunidade elevado. Aplica-se a agentes
biolgicos de fcil propagao, altamente patognicos para o homem, animais e meio ambiente, representando grande risco a quem os manipula, com
grande poder de transmissibilidade via aerossol ou com risco de transmisso
desconhecido, no existindo medidas profilticas ou teraputicas. Exemplo:
Vrus Ebola.
Classe de Risco 5
O risco de causar doena animal grave e de disseminao no meio ambiente alto. Aplica-se a agentes, de doena animal, no existentes no Pas e
que, embora no sejam patognicos de importncia para o homem, podem
gerar graves perdas econmicas e na produo de alimentos.
Os agentes dessa classe devem ter sua importao proibida e, caso sejam
identificados ou suspeitada sua presena no pas, devem ser manipulados em
laboratrios de conteno mxima, ou seja, NB-4.
II NVEL DE BIOSSEGURANA (NB)
Existem quatro nveis de Biossegurana: NB-1, NB-2, NB-3 e NB-4, relacionados aos requisitos crescentes de segurana para o manuseio dos agentes
biolgicos, terminando no maior grau de conteno e complexidade do nvel
de proteo.
O nvel de Biossegurana exigido para um ensaio ser determinado pelo
agente biolgico de maior classe de risco envolvido no ensaio.
Quando no se conhece o potencial patognico do agente biolgico, dever ser realizada uma anlise de risco prvia para estimar o nvel de conteno.
NVEL DE BIOSSEGURANA 1 NB-1
o nvel de Biossegurana necessrio ao trabalho que envolva material
biolgico que contenha agentes biolgicos da classe de risco 1.
Representa um nvel bsico de conteno que se fundamenta na aplicao das BPLs, na utilizao de equipamentos de proteo e adequao das
instalaes com nfase em indicadores de Biossegurana. O laboratrio no
precisa estar separado das demais dependncias do edifcio. O trabalho
conduzido, em geral, em bancada. Os equipamentos de conteno especficos no so exigidos. O profissional de laboratrio dever ter treinamento e
ser supervisionado por um profissional capacitado na rea.
PROCEDIMENTOS-PADRO DE LABORATRIO PARA O NB-1
O acesso ao laboratrio deve ser limitado mediante autorizao e no
ser permitido a crianas e animais. O acesso ao laboratrio deve apresentar
as reas de circulao desobstrudas e livres de equipamentos e estoques de
materiais. A sinalizao contendo o smbolo internacional de risco biolgico,
advertncia de rea restrita, identificao e telefone de contato do Profissional Responsvel, deve ser afixada na porta de acesso ao laboratrio onde h
o manuseio de material biolgico.
10
No laboratrio, todos os procedimentos, sejam tcnicos ou administrativos, devem estar descritos, serem de fcil acesso e do conhecimento dos
tcnicos envolvidos em sua execuo.
As pessoas devem lavar as mos antes e aps a manipulao de agentes
de risco e antes de sarem do laboratrio.
proibido comer, beber, fumar e aplicar cosmticos (maquiagem, cremes,
dentre outros) nas reas de trabalho do laboratrio.
Recomenda-se a no utilizao de cosmticos e adereos (brincos, pulseiras, relgio, dentre outros) no laboratrio.
proibido levar qualquer objeto boca no laboratrio, a pipetagem dever ser realizada com dispositivos apropriados, nunca com a boca.
No laboratrio, os materiais perfurocortantes devem ser manuseados cuidadosamente e a superfcie de trabalho devem ser descontaminadas ao final
de cada turno de trabalho e sempre que ocorrer derramamento de material
biolgico.
Devem ser mantidas a limpeza e a organizao do laboratrio.
proibido manter alimentos e plantas que no sejam objetos de anlise
do laboratrio.
Materiais e reagentes devem ser estocados em instalaes apropriadas no
laboratrio, onde deve haver sempre disponvel kit de primeiros socorros.
Todos os resduos devem ser descartados segundo normas legais e tcnicas vigentes e em cumprimento ao Plano de Gerenciamento de Resduos da
instituio.
No descarte as agulhas usadas no devem ser dobradas, quebradas, reutilizadas, recapeadas, removidas das seringas ou manipuladas antes de serem
desprezadas.
O descarte do material perfurocortante deve ser realizado em recipiente
de paredes rgidas, resistentes punctura, ruptura e vazamento, com tampa,
devidamente identificados, segundo normas legais e tcnicas vigentes, localizado prximo rea de trabalho, sendo expressamente proibido o esvaziamento desses recipientes para o seu reaproveitamento.
No descarte, as vidrarias quebradas no devem ser manipuladas diretamente com a mo, devem ser removidas por meio de meios mecnicos,
como uma vassoura e uma p de lixo ou pinas descartadas em recipientes
adequados.
necessria a organizao de um plano de contingncia e emergncia,
alm de um programa de vigilncia em sade (epidemiolgica, sanitria, ambiental e sade do trabalhador).
Deve ser mantida uma rotina de controle de artrpodes e roedores.
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PRTICAS ESPECIAIS PARA O NB-1

No se aplica.
EQUIPAMENTOS DE CONTENO PARA O NB-1
Equipamentos especiais de conteno, tais como as CSBs, no so exigidos
para manipulaes de agentes da classe de risco 1.
Equipamentos de proteo individual, tais como luvas e vesturio de proteo, ou seja, avental, uniforme ou jaleco, so requeridos durante o trabalho.
O vesturio de proteo dever ter mangas compridas ajustadas nos punhos e
no devem ser usadas fora da rea laboratorial.
obrigatrio o uso de calados fechados que possam proteger contra acidentes.
culos de segurana e protetores faciais devem ser usados sempre que os
procedimentos assim o exigirem.
O laboratrio deve possuir dispositivos de emergncia para lavagem dos
olhos e deve ser prevista a presena de chuveiros de emergncia prximos ao
laboratrio.
INSTALAES LABORATORIAIS NB-1
As instalaes laboratoriais devem ser compatveis com as regulamentaes
municipais, estaduais e federais.
O laboratrio deve ser projetado de modo a permitir fcil limpeza e descontaminao.
proibido o uso de carpetes, cortinas, persianas ou similares, recomendando-se, quando necessrio, a utilizao de pelculas protetoras ou outras formas
para controle da incidncia de raios solares.
A iluminao artificial deve ser adequada para todas as atividades, ao nvel
da superfcie de trabalho, evitando os reflexos indesejveis e a luz ofuscante, de
acordo com os nveis mnimos estabelecidos por normas e tcnicas vigentes.
As instalaes fsicas referentes segurana laboratorial e proteo contra
incndio devem estar de acordo com as regulamentaes de segurana do
Corpo de Bombeiros local e as normas legais e tcnicas vigentes.
As rotas de fuga e sadas de emergncia devem estar identificadas e, preferencialmente, localizadas nas circulaes pblicas e nos laboratrios, na direo oposta s portas de acesso, com sada direta para a rea externa da edificao. As portas de sada de emergncia devem estar identificadas, dotadas
de barra antipnico, que permita a abertura com um pequeno toque, conforme
normas legais e tcnicas vigentes. As instalaes eltricas para os laboratrios e instalaes eltricas de equipamentos eletroeletrnicos ou equipamentos
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associados operao e/ou controle de sistemas de climatizao devem ser

projetadas, executadas, testadas e mantidas em conformidade com as normas
legais e tcnicas vigentes.
A edificao deve possuir sistema de proteo contra descargas atmosfricas, os equipamentos eletroeletrnicos devem estar conectados a uma rede
eltrica estabilizada e aterrada e todas as tomadas e disjuntores devem ser identificados, conforme estabelecido nas normas legais e tcnicas vigentes.
Todas as tubulaes das instalaes prediais devem ser adequadas, identificadas e mantidas em condies de perfeito funcionamento, conforme normas
legais e tcnicas vigentes.
O sistema de abastecimento de gua deve possuir reservatrio suficiente
para as atividades laboratoriais e para a reserva de combate a incndio. A gua
de abastecimento deve atender as especificidades do laboratrio e seguir os
critrios tcnicos vigentes.
As circulaes horizontais e verticais tais como corredores, elevadores,
monta-cargas, escadas e rampas devem estar de acordo com as normas legais
e tcnicas vigentes.
As paredes, o teto e os pisos devem ser lisos, no porosos, sem reentrncias,
com cantos arredondados, acabamentos impermeveis e resistentes a produtos
qumicos para facilitar a limpeza e a descontaminao da rea.
Os pisos e os tetos devem ser nivelados.
Os laboratrios devem possuir portas para o controle do acesso ao pblico.
As portas devem ser mantidas fechadas e possuir visores, exceto quando haja
recomendao contrria.
As portas para passagem de equipamentos devem possuir dimenses com
largura mnima de 1,10 m.
As janelas e as portas devem ser de materiais e acabamentos que retardem
o fogo e facilitem a limpeza e a manuteno.
No necessrio requisito especial de ventilao, alm daqueles estabelecidos pelas normas legais e tcnicas vigentes.
As janelas com abertura para rea externa ao laboratrio, devem conter
telas de proteo contra insetos.
Deve haver espao suficiente entre as bancadas, cabines e equipamentos
de modo a permitir acesso fcil para a realizao da limpeza.
A superfcie das bancadas deve ser revestida por material impermevel, liso,
sem emenda ou ranhura e resistente ao calor moderado e a ao dos solventes
orgnicos, cidos, lcalis e solventes qumicos utilizados na descontaminao
das superfcies.
O mobilirio do laboratrio deve evitar detalhes desnecessrios, como reentrncias, salincias, quebras, cantos, frisos e tipos de puxadores que dificultem
a limpeza e a manuteno, e atender os critrios de ergonomia, conforme normas tcnicas e legais vigentes.
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As cadeiras e outros mveis utilizados no trabalho laboratorial devem ser

revestidos com um material que no seja absorvente e que possa ser facilmente descontaminado.
Cada laboratrio deve possuir pelo menos um lavatrio exclusivo para
lavagem das mos, localizado prximo sada do laboratrio.
Deve estar previsto um local, dentro do laboratrio, prximo ao acesso,
para guarda de jalecos e outros equipamentos de proteo individual, utilizados no laboratrio.
Deve possuir local fora das reas laboratoriais para guarda de pertences
e troca de roupas.
Prever local, dentro do laboratrio, para a guarda de substncias e materiais de uso freqente em armrios, prateleiras ou castelos. Para estocagem de
grandes volumes e das demais substncias e materiais, deve haver um local
em condies adequadas, fora das reas laboratoriais, e em concordncia
com as normas legais e tcnicas vigentes.
Deve possuir um local especfico, externo, coberto, ventilado e em condies de segurana para armazenamento de cilindros de gases, conforme
normas legais e tcnicas vigentes. Os cilindros de gases devem ser mantidos
na posio vertical e possurem dispositivos de segurana de forma a evitar
quedas ou tombamentos. No permitida a presena de cilindros pressurizados, de quaisquer dimenses, de alimentao das redes, na rea interna do
laboratrio.
A edificao laboratorial deve possuir um abrigo isolado, identificado,
para armazenamento temporrio dos resduos, separados por tipo, com local
para higienizao de containers, provido de ponto de gua, no pavimento
trreo ou em rea externa edificao, com sada para o exterior, de fcil
acesso aos carros coletores. Estas reas devem ser cobertas, ventiladas, com
piso, paredes e tetos revestidos de materiais lisos, impermeveis e resistentes
a substncias qumicas, conforme normas legais e tcnicas vigentes. O acesso a essas reas deve ser restrito ao pessoal autorizado.
Caso o sistema pblico no disponha de tratamento de efluente sanitrio,
prever tratamentos primrio e secundrio, tal como, tanque sptico e filtro
biolgico, a fim de evitar a contaminao da rede pblica com agentes qumicos e biolgicos.
o nvel de Biossegurana exigido para o trabalho com agentes biolgicos da classe de risco 2, considerando todos os critrios estabelecidos na
anlise de risco.
14

Os procedimentos-padro exigidos so os mesmos j descritos para o NB-1.
As equipes do laboratrio e de apoio devem receber treinamentos anuais,
apropriados sobre os riscos potenciais associados aos trabalhos desenvolvidos. Treinamentos adicionais sero necessrios em caso de mudanas de normas ou de procedimentos.
O trabalho em laboratrio deve ser supervisionado por profissional de
nvel superior com conhecimento e experincia comprovada na rea de Biossegurana.
O Profissional Responsvel deve implementar polticas e procedimentos
com ampla informao a todos que trabalhem no laboratrio sobre o potencial de risco relacionado ao trabalho. O acesso ao laboratrio deve ser restrito
a profissionais da rea, mediante autorizao do Profissional Responsvel.
Pessoas susceptveis s infeces, tais como as imunocomprometidas ou
imunodeprimidas, no devem ser permitidas no laboratrio. Cabe ao Profissional Responsvel a deciso final quanto anlise de cada circunstncia e a
determinao de quem deve entrar ou trabalhar no laboratrio.
Todo o pessoal deve ser orientado sobre os possveis riscos e para a necessidade de seguir as especificaes de cada rotina de trabalho, procedimentos
de Biossegurana e prticas estabelecidas no manual de Biossegurana do
laboratrio, acessvel a todos os funcionrios.
As portas do laboratrio devem permanecer fechadas quando os ensaios
estiverem sendo realizados, e trancadas ao final das atividades.
O emblema internacional indicando risco biolgico deve ser afixado nas
portas dos recintos onde se manuseiam microorganismos pertencentes classe
de risco 2, identificando o(s) agente(s) manipulado(s), o nvel de Biossegurana, as imunizaes necessrias, o tipo de equipamento de proteo individual
que dever ser usado no laboratrio e o nome do Profissional Responsvel,
endereo completo e as diversas possibilidades para a sua localizao.
Os EPIs devem ser retirados, antes de sair do ambiente de trabalho, depositados em recipiente exclusivo para esse fim, em local apropriado, descontaminados antes de serem reutilizados ou descartados.
Mos enluvadas no devem tocar superfcies limpas tais como teclados,
telefones, maanetas, entre outros.
Um sistema de notificao de acidentes e incidentes, absentesmo de empregados e doenas associadas ao trabalho no laboratrio deve ser organizado, bem como um sistema de vigilncia em sade, contemplando programas
peridicos de imunizao e de controle da sade ocupacional.
15
Dependendo do(s) material(is) biolgico(s) manipulado(s), para referncia

futura, devem ser mantidas amostras sorolgicas da equipe do laboratrio e de
outras pessoas possivelmente expostas aos riscos, inclusive pessoal de limpeza
e manuteno.
Todos os procedimentos devem ser realizados cuidadosamente a fim de
minimizar a criao de aerossis ou de respingos.
Deve-se sempre tomar precaues especiais em relao a qualquer objeto
perfurocortante, incluindo seringas e agulhas, lminas, pipetas, tubos capilares
e bisturis. Agulhas e seringas hipodrmicas ou outros instrumentos perfurocortantes devem ficar restritos ao laboratrio e usados somente quando indicados. Devem ser usadas seringas com agulha fixa ou agulha e seringa em
uma unidade nica descartvel usada para injeo ou aspirao de materiais
infecciosos ou quando necessrio, seringas que possuam um envoltrio para
a agulha, ou sistemas sem agulha e outros dispositivos de segurana podero
ser utilizados.
Manter registro da utilizao do sistema de luz ultravioleta das CSBs com
contagem do tempo de uso (vida til de 7.500 horas).
Manter um sistema de manuteno, calibrao e de certificao dos equipamentos de conteno. A cada seis meses as CSBs e demais equipamentos
essenciais de segurana devem ser testados, calibrados e certificados.
Os filtros HEPA da rea de bioconteno devem ser testados e certificados
de acordo com a especificao do fabricante ou no mnimo uma vez por ano.
Acidentes ou incidentes que resultem em exposio a materiais biolgicos
patognicos devem ser imediatamente notificados ao Profissional Responsvel,
com providncias de avaliao mdica, vigilncia e tratamento, sendo mantido
registro por escrito dos acidentes e das providncias adotadas.
Todos os materiais e resduos devem ser descontaminados, preferencialmente esterilizados, antes de serem reutilizados ou descartados.
A equipe deve utilizar no interior do laboratrio os EPIs adequados, conforme descritos no NB-1.
Luvas devem ser usadas, segundo suas indicaes, e seu uso restrito ao
laboratrio. Luvas de ltex descartveis no podero ser lavadas, nem reutilizadas.
Devem ser utilizadas CSBs, classe I ou II (Anexo I), sempre que sejam realizadas culturas de tecidos infectados ou de ovos embrionados, bem como procedimentos com elevado potencial de criao de aerossis, como triturao,
homogeneizao, agitao vigorosa, ruptura por sonicao, abertura de recipientes contendo material onde a presso interna possa ser maior que a presso
ambiental e cultivo de tecidos, fluidos ou ovos de animais infectados.
16
Sempre que o procedimento for potencialmente gerador de aerossis e gotculas, provenientes de materiais biolgicos, dever ser utilizada a proteo
para o rosto (mscaras, protetor facial, culos de proteo, entre outras).
A centrifugao, fora da CSB, s poder ser efetuada se utilizada centrfuga de segurana e frascos lacrados. Esses s devero ser abertos no interior
da cabine.
Uma autoclave deve estar disponvel, no interior ou prximo ao laboratrio, dentro da edificao, de modo a permitir a descontaminao de todos
os materiais utilizados e resduos gerados, previamente a sua reutilizao ou
descarte.
As instalaes laboratoriais exigidas devem atender s especificaes estabelecidas para o NB-1, acrescidas as seguintes exigncias:
Devem estar afastadas das reas de circulao do pblico;
exigido um sistema de portas com trancas no acesso ao laboratrio;
Recomenda-se a instalao de lavatrios, com acionamento automtico
ou acionados com o cotovelo ou p, em cada laboratrio;
As CSBs devem ser instaladas longe das passagens de circulao e fora das
correntes de ar procedentes de portas ou janelas e de sistemas de ventilao;
Deve haver espao de aproximadamente 0,30 metros atrs e em cada lado
das CSB para permitir acesso fcil para a realizao da limpeza e manuteno;
O ar de exausto das CSBs, classe II, filtrado atravs de filtros HEPA, e das
capelas qumicas devem ser lanados acima da edificao laboratorial e das
edificaes vizinhas, longe de prdios habitados e de tomadas de ar do sistema de climatizao. O ar de exausto das CSBs, pode recircular no interior
do laboratrio se a cabine for testada e certificada anualmente;
No planejamento de novas instalaes devem ser considerados sistemas
de ventilao que proporcionem um fluxo direcional de ar sem que haja uma
recirculao para outras reas internas da edificao;
A rea de escritrio deve ser localizada fora da rea de bioconteno.
aplicvel aos locais onde forem desenvolvidos trabalhos com materiais
biolgicos da classe de risco 3.
O pessoal do laboratrio deve ter treinamento especfico no manejo dos
materiais biolgicos, devendo ser supervisionados pelo Profissional Responsvel.
17
Todos os procedimentos que envolverem a manipulao de material biolgico devem ser conduzidos dentro de CSBs ou outro dispositivo de conteno fsica. Os manipuladores devem usar EPIs especficos.
As barreiras secundrias para esse nvel incluem o acesso controlado ao
laboratrio e sistemas de ventilao que minimizam a liberao de aerossis
infecciosos do laboratrio.
Os laboratrios pertencentes a este grupo devem ser registrados junto a
autoridades sanitrias nacionais.
Esse nvel de conteno exige a intensificao dos programas de utilizao das prticas microbiolgicas e de segurana estabelecidas para o NB-2,
alm da existncia obrigatria de dispositivos de segurana e do uso, igualmente obrigatrio, de CSB classe II ou III.
Todos os procedimentos, sejam tcnicos ou administrativos, devem estar
descritos, de fcil acesso e ser do conhecimento pelos tcnicos envolvidos
em sua execuo. Estes devem demonstrar previamente ter o domnio dos
procedimentos tcnicos para a execuo das atividades laboratoriais.
O acesso ao laboratrio deve ser restrito.
Alm das prticas estabelecidas para o NB-2, devem ser obedecidas as
prticas a seguir discriminadas:
Somente as pessoas necessrias para que o ensaio seja executado ou o pessoal de apoio devem ser admitidos no local. As pessoas que apresentarem risco
aumentado de contrarem infeces no so permitidas dentro do laboratrio;
As equipes do laboratrio e de apoio devem receber treinamento adequado sobre os riscos potenciais associados ao trabalho desenvolvido, os cuidados necessrios para evitar uma exposio ao material biolgico e sobre os
procedimentos de avaliao da exposio. A equipe do laboratrio dever
freqentar cursos peridicos de atualizao ou treinamento adicional quando necessrio e tambm em caso de mudanas de normas e procedimentos.
Jamais uma pessoa deve trabalhar sozinha dentro do laboratrio NB-3.
O Profissional Responsvel deve estabelecer normas e procedimentos
pelos quais s sero admitidos para o trabalho no laboratrio pessoas que
j tiverem recebido informaes sobre o potencial de risco, que atendam
a todos os requisitos para a entrada no laboratrio, demonstrem estar aptos
para as prticas e tcnicas-padro de microbiologia, demonstrem habilidade
tambm nas prticas e operaes especficas do laboratrio e obedeam a
todas as regras para entrada e sada no laboratrio.
18
Os procedimentos de Biossegurana devem ser incorporados aos procedimentos operacionais padres.

Recomenda-se a mudana freqente das luvas acompanhada de lavagem
das mos.
proibido o uso de EPIs fora do laboratrio. Estes devem ser descontaminados antes de serem reutilizados ou descartados e trocados depois de
contaminados.
Os exames mdicos peridicos so obrigatrios. O pessoal do laboratrio
deve ser apropriadamente imunizado ou examinado quanto aos materiais
biolgicos manipulados ou presentes no laboratrio (por exemplo, vacina
para hepatite B ou teste cutneo para tuberculose).
Coletar amostras sorolgicas de toda a equipe e das pessoas expostas ao
risco e armazen-las para futura referncia. Amostras adicionais podem ser
periodicamente coletadas, dependendo dos materiais biolgicos manipulados ou do funcionamento do laboratrio.
Todas as manipulaes que envolvam materiais biolgicos devem ser
conduzidas no interior de CSBs ou de outros dispositivos de conteno fsica
dentro de um mdulo de conteno.
Todos os resduos devem ser obrigatoriamente esterilizados antes de serem removidos do laboratrio e descartados. Todos os materiais utilizados no
laboratrio devem ser descontaminados, antes de serem reutilizados.
Os filtros HEPA e pr-filtros das cabines de segurana biolgica e dos
sistemas de ar retirados devem ser acondicionados em recipientes hermeticamente fechados para serem descontaminados por esterilizao.
Acidentes ou incidentes que resultem em exposies a materiais infecciosos devero ser imediatamente relatados ao Profissional Responsvel. Anlise
mdica adequada, vigilncia e tratamento devero ser proporcionados em
registros por escrito devendo ser mantidos.
O Profissional Responsvel deve garantir que o projeto da instalao e
todos os procedimentos operacionais do NB-3 estejam documentados; que
os parmetros operacionais e as instalaes tenham sido verificados quanto ao funcionamento exigido, antes que o laboratrio inicie as suas atividades; que as instalaes sejam verificadas no mnimo uma vez por ano e os
equipamentos verificados, inclusive os sistemas de segurana, quanto ao seu
funcionamento, calibrao e eficincia, de acordo com as especificaes do
fabricante ou de acordo com as BPLs.
19

obrigatrio o uso de roupas de proteo (macaces, uniformes que
possuam menor soluo de descontinuidade, no se admitindo roupas abotoadas na frente), uso de mscaras, gorros, luvas, pr-ps ou sapatilhas. As
pessoas que usarem lentes de contato em laboratrios devero tambm usar
culos de proteo ou protetores faciais.
Utilizar CSBs, classe II, B 2 ou III, em qualquer operao com materiais
biolgicos onde se incluem manipulao de culturas e de material clnico
ou ambiental. Quando um procedimento ou processo no puder ser conduzido dentro de uma cabine de segurana biolgica devem ser utilizadas
combinaes apropriadas de EPIs (por exemplo, respiradores, protetores
faciais) com dispositivos de conteno fsica (por exemplo, centrfugas de
segurana e frascos selados).
Autoclave, preferivelmente de dupla porta, localizada no laboratrio ou
localizada dentro da rea de apoio da instalao de bioconteno.
As instalaes laboratoriais exigidas devem atender as especificaes estabelecidas para o NB-2, acrescidas das exigncias a seguir apresentadas:
O laboratrio deve estar separado das reas de trnsito irrestrito do prdio e possuir acesso restrito;
A entrada e a sada dos tcnicos deve ser feita atravs de cmara pressurizada ou vestirio de barreira adjacente rea de conteno do laboratrio, com presso diferenciada, para colocao e/ou retirada de EPIs,
dotados de sistema de bloqueio de dupla porta, providos de dispositivos de
fechamento automtico e de intertravamento;
A entrada de materiais de consumo, amostras biolgicas (humanas e
animais) deve ser feita atravs de cmara pressurizada ou outro sistema de
barreira equivalente;
Instalao de uma autoclave na rea de bioconteno para a sada de
resduos;
Quando as tubulaes das instalaes prediais atravessarem pisos, paredes ou tetos da rea de conteno, os orifcios de entrada e sada devem
ser vedados com materiais que garantam o isolamento;
O piso deve ser revestido de materiais contnuos, tais como resinas monolticas ou similares;
Recomenda-se que o mobilirio seja modulado, com uso flexvel e com
mobilidade;
Deve haver pelo menos um lavatrio para lavagem das mos, com acionamento automtico, ou acionado com o cotovelo ou p, prximo porta
de sada de cada laboratrio;
20
Todas as esquadrias devem ser de material de fcil limpeza e manuteno. So recomendados visores nas paredes divisrias, entre salas e circulaes, e nas portas entre circulaes. As janelas e visores devem ter vidro de
segurana e serem devidamente vedadas;
Devem existir CSBs em todos os laboratrios;
Quando forem utilizadas as CSBs da classe III, elas devem estar conectadas diretamente ao sistema de exaustores, de maneira que se evite qualquer
interferncia no equilbrio do ar delas prprias ou do edifcio. Se elas estiverem conectadas ao sistema de insuflao do ar, isto dever ser feito de tal
maneira que previna uma pressurizao positiva das cabines;
Centrfugas ou outros equipamentos que possam produzir aerossis, devem ser refreados por meio de dispositivos que liberem o ar atravs de filtros
absolutos, tipo HEPA, antes de serem descarregados no ambiente do laboratrio. Esses sistemas de filtrao devem ser testados no mnimo uma vez por
ano ou de acordo com a especificao do fabricante;
Deve haver um sistema de comunicao, ligando as reas de conteno
s reas de suporte do laboratrio e de apoio tcnico da edificao;
Deve haver chuveiro e lava-olhos de emergncia e lavatrio com dispositivos de acionamento por controles automticos em rea em conteno,
adjacentes rea do laboratrio;
O laboratrio deve ter um sistema de ar independente, com ventilao
unidirecional, garantindo que o fluxo de ar seja sempre direcionado das reas
de menor risco potencial para as reas de maior risco de contaminao. O
ar de exausto no deve recircular para qualquer outra rea da edificao,
devendo ser filtrado por meio de filtro HEPA, antes de ser eliminado para o
exterior do laboratrio, longe de reas ocupadas e de entradas de ar;
Os filtros HEPA devem ser instalados no ponto de descarga do sistema de
exausto;
Deve haver verificao constante do fluxo de ar no laboratrio. Recomenda-se que um monitor visual seja instalado para indicar e confirmar a entrada
direcionada do ar para o laboratrio. Deve-se considerar a instalao de um
sistema de automao para monitoramento do sistema de ar;
Os pontos de suprimento de gua no laboratrio devem ser providos de
dispositivo anti-refluxo;
Os registros devem estar localizados fora da rea de conteno do laboratrio para interrupo do fluxo de gua pela equipe de manuteno quando
necessrio;
Os sifes em reteno devem ser mantidos cheios de um desinfetante
ativo;
As linhas de suprimento de gases comprimidos devem ser dotadas de filtros de alta eficincia, ou de sistema equivalente, para proteo de inverso
do fluxo (dispositivo anti-refluxo);
21
As tubulaes devem estar preferencialmente nos espaos tcnicos, aparentes, de fcil acesso equipe de manuteno;
Toda a penetrao de canalizaes, por meio de pisos, paredes e tetos da
rea de conteno deve ser vedada com produto malevel, no retrtil;
As linhas de vcuo devem ser protegidas por filtros de alta eficincia, ou
sistema equivalente, para proteo de inverso do fluxo. Uma alternativa o
uso de bombas de vcuo portteis, no conectadas ao exterior da instalao
e tambm dotadas de filtro de alta eficincia;
Todas as canalizaes das instalaes de servio devem possuir dispositivos de fechamento para fins de descontaminao;
Os disjuntores e quadros de comando devem estar localizados fora da
rea de conteno do laboratrio;
Todos os circuitos de alimentao de energia eltrica devem ser independentes das demais reas da edificao;
O permetro de conteno do laboratrio deve ser dotado de sistema que
permita sua vedao, possuindo dispositivos de fechamento em todas as canalizaes das instalaes de servio para procedimentos de descontaminao dos ambientes;
Deve estar prevista a existncias de sadas de emergncia ou painis removveis;
Deve possuir sistema de emergncia constitudo de um grupo motor-gerador e chave automtica de transferncia, para alimentar os circuitos da
iluminao de emergncia; alarmes de incndio e de segurana predial; dos
equipamentos essenciais, tais como CSBs, freezers, refrigeradores e incubadoras, dentre outros, e do ar condicionado de ambientes que necessitam de
temperatura e fluxo unidirecional constante.
OBSERVAO
Algumas instalaes existentes para o trabalho em conteno com agentes biolgicos com caractersticas de transmisso por aerossol, podem temporariamente no possuir todas as caractersticas recomendadas para um NB-3.
Nessas circunstncias, um nvel aceitvel de segurana para conduo dos
procedimentos de rotina poder ser conseguido por meio de instalaes recomendadas para o NB-2 garantindo-se que:
O ar de exausto, filtrado, com filtros de alta eficincia, seja lanado
acima da edificao laboratorial e das edificaes vizinhas, longe de
prdios habitados e de tomadas de ar do sistema de climatizao;
A ventilao do laboratrio seja equilibrada de modo a proporcionar
um fluxo de ar direcionado para dentro da sala, estabelecendo presses
diferenciadas entre as reas de menor e maior risco;
22
O acesso ao laboratrio seja rigorosamente restrito aos tcnicos autorizados, e proibido quando o trabalho estiver sendo realizado;
Todos os resduos e materiais sejam esterilizados;
Os procedimentos-padro, as prticas especiais e os equipamentos de
conteno para o NB-3, sejam rigorosamente seguidos.
A deciso de implementar as modificaes relacionadas anteriormente
deve ser tomada somente pelo Responsvel Legal e pelo Profissional Responsvel, que devero comunic-las aos demais profissionais que trabalham no
laboratrio.
Este nvel de conteno deve ser usado sempre que o trabalho envolver
materiais biolgicos da classe de risco 4 ou com potencial patognico desconhecido, que representam um alto risco, no s para o pessoal do laboratrio,
mas tambm para a comunidade e para o ambiente, podendo provocar doenas fatais, alm de apresentarem um elevado potencial de transmisso por
aerossis. Para estes agentes no h nenhuma vacina ou terapia disponvel.
Os agentes que possuem uma relao antignica prxima ou idntica aos dos
agentes da classe de risco 4, tambm devem ser manuseados neste nvel de
Biossegurana at que se consigam dados suficientes para confirmao do
trabalho neste nvel de conteno ou para o trabalho em um nvel inferior.
O Profissional Responsvel responsvel pela aplicao de todos os procedimentos necessrios para a operao segura do laboratrio por toda a
equipe, incluindo o pessoal de apoio e de manuteno.
A equipe do laboratrio, supervisionada pelo Profissional Responsvel,
deve possuir treinamento especfico, direcionado para a manipulao de
agentes infecciosos extremamente perigosos e deve ser capaz de compreender, executar e operar as funes da conteno primria e secundria, de
executar as prticas padres especficas e gerais de segurana, os equipamentos de conteno e das caractersticas das instalaes do laboratrio.
O isolamento dos trabalhadores de laboratrios em relao aos materiais
infecciosos aerossolizados realizado primariamente em CSB da classe III ou
em CSB da classe II, B 2, associadas utilizao de roupas de proteo com
presso positiva, ventiladas por sistema de suporte vida.
O laboratrio NB-4 deve ser uma edificao construda separadamente de
outras edificaes ou estar localizada em uma zona completamente isolada,
possuindo caractersticas especficas quanto ao projeto e aos sistemas de engenharia para preveno da disseminao de microorganismos no meio ambiente.
23
Os laboratrios de conteno mxima s devem funcionar com autorizao e fiscalizao das respectivas autoridades sanitrias.
Esse nvel de conteno exige a intensificao dos programas de utilizao das prticas microbiolgicas e de segurana estabelecidas para o NB-3,
alm da existncia obrigatria de dispositivos de segurana especficos e do
uso, igualmente obrigatrio, de CSB classe II B2 ou III.
Devem ser obedecidas as prticas especiais estabelecidas para o NB-3
acrescidas das exigncias a seguir:
Nenhum material dever ser removido do laboratrio de conteno mxima (NB-4), a menos que tenha sido esterilizado, exceto os materiais biolgicos que necessariamente tenham que ser retirados na forma vivel;
O material biolgico vivel, a ser removido da CSB classe III ou do laboratrio de conteno mxima, deve ser acondicionado em recipiente de
conteno primria inquebrvel e selado. Este, por sua vez, deve ser acondicionado dentro de um segundo recipiente tambm inquebrvel e selado, que
dever passar por um tanque de imerso contendo desinfetante, ou por uma
cmara de fumigao ou por um sistema de barreira de ar planejada com este
propsito;
Somente as pessoas envolvidas na programao e no suporte ao programa
a ser desenvolvido, e cujas presenas forem solicitadas nos ambientes do
laboratrio, devem possuir permisso para entrada no local;
O Profissional Responsvel tem a responsabilidade final no controle do
acesso ao laboratrio. Antes de entrar no laboratrio, as pessoas devero ser
avisadas sobre o risco potencial e devero ser instrudas sobre as medidas
apropriadas de segurana;
O Profissional Responsvel tem a responsabilidade de assegurar que, antes de iniciar o trabalho, toda a equipe apresente uma alta competncia em
relao s prticas e tcnicas microbiolgicas, em prticas e operaes especiais, especficas do laboratrio, das precaues necessrias para a avaliao
de exposies e dos procedimentos de preveno exposio;
As pessoas autorizadas devem cumprir com rigor as instrues e os procedimentos para a entrada e sada do laboratrio. Deve haver um registro, por
escrito, de entrada e sada de pessoal, com data, horrio e assinaturas;
Devem existir um plano de contingncia e de emergncia com descrio
clara dos procedimentos necessrios para a ao em tais situaes;
Alm das amostras sorolgicas colhidas rotineiramente, amostras adicionais devem ser periodicamente coletadas, dependendo dos agentes mani-
24
pulados ou das atividades do laboratrio. Ao estabelecer um programa de

vigilncia sorolgica deve-se considerar a disponibilidade dos mtodos para
a avaliao do anticorpo do(s) agente(s) em questo;
Prever uma rea de observao, isolamento e para os primeiros cuidados
mdicos com o pessoal suspeito de contaminao em caso de acidentes no
laboratrio. Relatos por escrito devem ser preparados e mantidos em atas do
laboratrio e estas devem ser encaminhadas CBS;
Previamente realizao de trabalhos em conteno utilizando-se CBS da
classe III, os profissionais devem trocar suas roupas na entrada do laboratrio, nos vestirios internos, tambm em conteno, adjacentes ao laboratrio,
por roupa protetora completa e descartvel. Antes de sair do laboratrio para
a rea de banho, devem retirar a roupa usada no laboratrio e deposit-las
em recipiente exclusivo para esse fim e encaminh-las para a esterilizao
antes de serem descartadas. Na entrada ao laboratrio de conteno mxima,
que utiliza roupas protetoras com presso positiva, os profissionais devem
retirar suas roupas nos vestirios internos, tambm em conteno, adjacentes
ao laboratrio e vestir os macaces. Na sada, os profissionais, ainda vestindo
o macaco de presso positiva com sistema de suporte vida, devem passar
por um banho de descontaminao qumica;
A entrada e sada de pessoal por antecmara pressurizada somente devem
ocorrer em situaes de emergncia;
Materiais no relacionados ao ensaio, que estiver sendo realizado no momento, no so permitidos no laboratrio;
Os filtros HEPA e pr-filtros das cabines de segurana biolgica e dos
sistemas de ar devem ser removidos e acondicionados em recipiente hermeticamente fechado para subseqente descontaminao e destruio por meio
de incinerao;
Todos os materiais provenientes da rea de bioconteno devem sofrer
esterilizao;
Todos os resduos, aps a esterilizao, devem ser incinerados.
Existem dois modelos de laboratrio de conteno mxima para manipulaes de materiais biolgicos da classe de risco 4:
(1) manipulaes conduzidas em CSB de classe III;
(2) manipulaes conduzidas em CSB de classe II, B 2, neste caso usadas em
associao s roupas de proteo pessoal, pea nica ventilada, de presso
positiva, possuindo um sistema de suporte vida, protegido por filtros HEPA.
O sistema de suporte de vida deve incluir compressores de respirao de ar,
alarmes e tanques de ar de reforo de emergncia.
25

As instalaes laboratoriais exigidas devem atender s especificaes
estabelecidas para o NB-3, acrescidas as seguintes exigncias:
A construo do laboratrio de conteno mxima pode se basear em
um dos tipos de laboratrios ou em uma combinao dos dois tipos. Se for
utilizada a combinao, a construo deve atender a todos os requisitos de
cada tipo;
O acesso dos profissionais deve ser controlado por sistemas de identificao acionados por leitor de ris, ou leitor de digitais, ou carto magntico, ou outro tipo de sistema de segurana rigoroso;
A entrada e a sada de tcnicos feita por meio de sanitrios/vestirios de
barreira, com diferencial de presso entre os ambientes, dotadas de sistema
de bloqueio de dupla porta, providos de dispositivos de fechamento automtico e de intertravamento;
A entrada de materiais de consumo, amostras biolgicas, e sada de
resduos deve ocorrer por meio de cmara pressurizada ou sistemas de passagem (autoclaves, tanques de imerso, guichs e outros);
Diariamente, antes que o trabalho se inicie, devem ser feitas inspees
de todos os sistemas de conteno e de suporte vida, a fim de assegurar o
funcionamento de acordo com os parmetros de operao;
Devem existir visores localizados nas paredes divisrias e portas, entre
a rea de conteno e as reas de suporte do laboratrio;
As portas devem possuir caixilhos de construo slidos e dispositivos
de vedao total com sistema de acionamento de abertura automtico,
aps identificao;
Todos os efluentes lquidos, tais como a gua do chuveiro, da condensao da autoclave (conduzida por meio de um sistema fechado) e de outros
pontos da instalao devem estar conectadas diretamente a um sistema de
tratamento mecnico e biologicamente monitorado, para serem esterilizados antes de descartados no esgoto sanitrio;
Os sistemas de emergncia devem ser testados periodicamente, de acordo com a especificao do fabricante ou no mnimo uma vez por ano;
As linhas de suprimento de gases comprimidos devem ser dotadas de
filtros ou de sistema equivalente para proteo de inverso do fluxo (dispositivo anti-refluxo);
O laboratrio deve possuir um sistema de comunicao, de circuito interno de imagem e/ou outro dispositivo de comunicao entre as reas de
conteno e as reas de suporte do laboratrio e de apoio tcnico da edificao;
Deve possuir sistema de abastecimento de energia eltrica de emergncia, ligada aos sistemas de suporte vida, para alimentar os circuitos da
26
iluminao, os alarmes, os controles de entrada e sada, os sistemas de

comunicao, as CSBs e os outros equipamentos essenciais que parem de
funcionar;
Deve possuir sistema de tratamento trmico por incinerao, localizado dentro ou prximo edificao, para eliminao dos resduos gerados,
obedecendo s normas legais e tcnicas ambientais vigentes.
1. LABORATRIO NB-4 COM CSB DE CLASSE III
O sistema de vcuo deve possuir um sistema de filtrao em srie, por
meio de filtros HEPA, em cada ponto onde ser utilizado ou prximo da
vlvula de servio. Os filtros devem ser instalados de forma a permitir a descontaminao e a substituio local dos mesmos. Outras linhas utilitrias
devem ser providas de dispositivos anti-refluxo.
A exausto de ar das CSBs classe III deve ser realizada por sistema de
dupla filtragem por filtros HEPA em srie.
A autoclave de porta dupla deve ser acoplada CSB classe III para a
descontaminao de materiais e de resduos.
Deve haver um dispositivo visual para o monitoramento da presso, indicando e confirmando o diferencial de presso da sala da cabine e estar
localizado na entrada do vestirio. O fluxo de ar tambm deve ser monitorado.
2. LABORATRIO NB-4 COM O USO DE CSB DE CLASSE II
ASSOCIADO UTILIZAO DE ROUPAS DE PROTEO INDIVIDUAL COM
PRESSO POSITIVA, VENTILADAS POR SISTEMA DE SUPORTE DE VIDA
As circulaes s podem ser efetuadas no mesmo pavimento, entre as
reas de conteno e de suporte do laboratrio, com dimenses que permitam a passagem dos tcnicos com macaces ventilados, sem risco de
acidentes.
As bancadas devem possuir superfcies monolticas, fixas, seladas, sem
reentrncias e salincias, impermeveis e resistentes ao calor moderado e
aos solventes orgnicos, cidos, lcalis e solventes qumicos utilizados na
descontaminao das superfcies de trabalho e dos equipamentos.
O mobilirio deve ter uma construo simples, de modo a minimizar a
necessidade de manuteno, e ser resistente a gases, substncias qumicas
e ao calor moderado.
O sistema de insuflamento de ar pode estar equipado com filtro absoluto, de alta eficcia, tipo HEPA, independente das outras instalaes contguas, caso a atividade a ser desenvolvida exija.
Os dutos de exausto devem ser equipados com pelo menos dois filtros
HEPA, montados em srie antes de serem direcionados para fora do laboratrio.
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A exausto das CSB deve ser feita por meio de um sistema de dupla
filtragem por filtros HEPA.
Dever ser instalada autoclave de dupla porta, possuindo controle automtico, para descontaminao de quaisquer materiais utilizados na rea
de bioconteno.
Materiais e equipamentos que no possam ser descontaminados na autoclave devem passar por tanque de imerso com desinfetante ou cmara de
fumigao.
28
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Janeiro: [s. n.], 1996.
Instruo Normativa n. 7 da CTNBio
KILBY, J. A.; KINSLER, J .M. Effective glove selection: match the materials to
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KLEIN, R. C., PARTY, E., GERSHEY, E. L. Safety in the laboratory. Nature, v.
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32
NIH Guidelines for Research Involving Recombinant DNA Molecules. Disponvel em: <http://www.nih.gov:80/od/orda/toc.htm>.
ODA, L. M.; VILA, S. M. (Orgs.) Biossegurana em laboratrios de sade
pblica. Ministrio da Sade. Secretaria de Polticas de Sade e de Avaliao.
Departamento de Promoo da Formulao e Reorientao das Polticas de
Sade. Coordenao Geral de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico.
Rio de Janeiro: Fiocruz, 1998. 304 p.
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PRSS, A.; GIROULT, E.; RUHBROOK, P. Safe management of wastes from
health-care activities. Geneva: WHO, 1999. 230 p.
SCHATZMAYR, Hermann. Introduo reviso de vrus e bactrias. [S.l.: s.
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SHERIFF, M. P. Guia de programacin y diseo de centros de salud. Madrid:
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v. 2. (Atencin primaria de salud, 2).
TEIXEIRA, P.; VALLE, S. Biossegurana: uma abordagem multidisciplinar. Rio
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______. Guideline for the safe transport of infectious substances and diagnostic specimens. Disponvel em: <http://www.who.int/emc/pdfs/emc97_
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______. Laboratory biosafety manual. 2. ed. Genebra, [s.n.], 1995.
______. Laboratory biosafety manual. Geneva: WHO, 2003. 109 p.
______. Laboratory biosafety principles and practice: an intructor guide for
biosafety training. [S.l.]: WHO, 1983.
______. Monografia sobre seguridad en laboratorio. [S.l.]: WHO, 1981.
33
GLOSSRIO
Agentes Biolgicos bactrias; fungos; vrus; clamdias; riqutsias; micoplasmas; prons; parasitos; linhagens celulares e outros organismos.
Anlise de Risco o processo de levantamento, avaliao, gerenciamento e comunicao dos riscos, considerando o processo de trabalho, a
possibilidade de formao de aerossis, o volume, a concentrao e a classe
de risco do agente biolgico a ser manipulado, a fim de implementar aes
destinadas preveno, controle, reduo ou eliminao dos mesmos e determinao do nvel de Biossegurana a ser adotado para o desenvolvimento
de trabalhos em conteno com agentes biolgicos e a sua comunicao aos
profissionais envolvidos.
Barreiras de Conteno conjunto formado por procedimentos, equipamentos e instalaes, utilizados para a manipulao de materiais biolgicos
patognicos ou potencialmente patognicos, objetivando a reduo ou eliminao de riscos sade humana, animal e ambiental.
Biossegurana a condio de segurana alcanada por um conjunto
de aes destinadas a prevenir, controlar, reduzir ou eliminar riscos inerentes
s atividades que possam comprometer a sade humana, animal e vegetal e
o ambiente.
Classe de Risco grau de risco associado ao material biolgico manipulado.
Conteno Primria meios de proteo aos profissionais e ao ambiente
laboratorial na exposio aos agentes de risco, atingida por meio de boas
prticas e do uso de equipamentos de proteo individual ou coletivo apropriado.
Conteno Secundria a proteo aos profissionais e ao ambiente
exposio aos agentes de risco, mediante a combinao de aspectos relacionados infra-estrutura laboratorial e s prticas ou procedimentos operacionais.
Descontaminao consiste na utilizao de processos que eliminam
parcial ou totalmente os microorganismos. O objetivo da descontaminao
tornar qualquer material seguro para sua reutilizao ou descarte. Esse processo pode ser executado por meio de limpeza, desinfeco e/ou esterilizao.
35
Equipamentos Essenciais de Segurana so os equipamentos de proteo individuais e coletivos que permitem a conteno primria.
Filtro HEPA filtro de alta eficincia, High Efficiency Particulate Air,
feito de papel de fibra de vidro com 60 de espessura, sustentada por lminas de alumnio. As fibras do filtro so feitas de uma trama tridimensional a
qual remove as partculas de ar que passam por ele por inrcia, intercesso e
difuso. O filtro HEPA tem capacidade para filtrar partculas com eficincia
igual ou maior que 99,99%.
Grande Escala trabalho com materiais biolgicos usando volumes superiores a 10 litros.
Indicadores de Biossegurana so parmetros para a qualificao do
perfil de qualidade em Biossegurana. Dentre os mais importantes destacamos: boas prticas de laboratrio, equipamentos de proteo, infra-estrutura,
controle da qualidade ambiental, vigilncia mdica, capacitao de recursos
humanos, informao e manejo de animais.
Instalaes Laboratoriais conjunto da edificao e de todas as instalaes prediais e/ou especiais destinadas ao laboratrio. As principais instalaes prediais so: tratamento de ar, tratamento de efluentes, hidrulica,
eltrica, automao e gases.
Material Biolgico todo material que contenha informao gentica e
seja capaz de auto-reproduo ou de ser reproduzido em um sistema biolgico. Inclui os organismos cultivveis e microorganismos (entre eles bactrias,
fungos filamentosos, leveduras e protozorios); as clulas humanas, animais
e vegetais, as partes replicveis destes organismos e clulas (bibliotecas genmicas, plasmdeos, vrus e fragmentos de DNA clonado) e os organismos
ainda no cultivados. (Adaptado de: Working Party on Biotechnology, da
Organizao da Cooperao para o Desenvolvimento Econmico OCDE
fevereiro de 2001).
Nvel de Biossegurana grau de conteno necessrio para permitir o
trabalho com materiais biolgicos de forma segura para os seres humanos,
os animais e o ambiente. Consiste na combinao de prticas e tcnicas de
laboratrio, equipamentos de segurana e instalaes laboratoriais.
Profissional Responsvel profissional com conhecimento, experincia,
formao e treinamento especfico para a rea de atuao e que exerce a
funo de supervisor do trabalho com materiais biolgicos.
36
Representante Legal da Entidade indivduo formalmente designado para

representar a entidade.
Risco a probabilidade de ocorrncia de efeitos adversos sade humana, animal e ao ambiente.
Trabalho em Conteno atividade com materiais biolgicos patognicos
em condies que no permitam seu escape ou liberao para o ambiente,
podendo ser realizado em pequena ou grande escala.
37
ANEXO I CABINES DE SEGURANA BIOLGICA (CSB)
Classe
Tipo
I com
a
frente
aberta
II
II
38
Velocidade
do ar
frontal
(ps/minuto /
cm/seg)
75
38,1
B1
75
38,1
100
50,8
Fluxo de ar
Agentes
qumicos
txicos/
radionucldeos
Nvel de Tipo de
Biossegu- Proterana
o
Insuflao
frontal;
exausto
traseira por
filtro HEPA
para o
exterior
No
2,3
A, P
2,3
A, P, Pp
Sim
2,3
(Nvel
baixo/volatilidade)
A, P, Pp
Insuflao
frontal; 70%
de ar recirculado por
No
meio do
HEPA; exausto por filtro
HEPA
Insuflao
frontal; 30%
de ar recirculado por
meio do
HEPA; exausto por filtro
HEPA e canos rgidos.
Classe
II
II
III
Tipo
B2
B3
Velocidade
do ar
frontal
(ps/minuto /
cm/seg)
Fluxo de ar
100
50,8
Insuflao
frontal;
nenhuma
recirculao
do ar; ar
totalmente
exaurido por
filtro HEPA,
dutos de
exausto.
100
50,8
Insuflao
frontal;
nenhuma
recirculao
do ar; ar
totalmente
exaurido por
filtro HEPA,
dutos de
exausto.
NA
Entrada e sada do ar por

meio de dois
filtros HEPA
Agentes
qumicos
txicos/
radionucldeos
Nvel de Tipo de
Biossegu- Proterana
o
Sim
2,3
A, P, Pp
Sim
2,3
A, P, Pp
Sim
2,3
A, P, Pp
Tipo de proteo:
A proteo ambiental
P proteo pessoal
Pp proteo ao produto
39
ANEXO II CLASSIFICAO DE AGENTES COM

BASE EM SEU RISCO BIOLGICO
Introduo
Os agentes biolgicos patognicos para o homem, animais e plantas so
distribudos em classes de risco biolgico em funo de diversos critrios tais
como: a gravidade da infeco, do nvel de sua capacidade de se disseminar
no meio ambiente, estabilidade, endemicidade, modo de transmisso, da
existncia ou no de medidas profilticas, como vacinas e da existncia ou
no de tratamentos eficazes. Alguns outros fatores so tambm considerados
como as perdas econmicas que possam gerar, vias de infeco, existncia
ou no do agente no Pas e sua capacidade de se implantar em uma nova rea
onde seja introduzido.
Por este motivo, as classificaes existentes em vrios pases embora concordem em relao a grande maioria dos agentes, apresentam algumas variaes, em funo de fatores regionais especficos.
As classes de risco biolgico so assim definidas:
- Classe de risco 1 (baixo risco individual e para a coletividade): Incluem
os agentes que no possuem capacidade comprovada de causar doena em
pessoas ou animais sadios.
- Classe de risco 2 (moderado risco individual e limitado risco para a
comunidade): Incluem os agentes que podem causar doena no homem ou
animais, porm no apresentam riscos srios para os profissionais do laboratrio, para a comunidade, para animais e para o meio ambiente. Os agentes
desta classe, quando no existentes no Pas, devem ter sua importao restrita, sujeita prvia autorizao das autoridades competentes.
- Classe de risco 3 (alto risco individual e risco moderado para a comunidade): Incluem os agentes que usualmente causam doenas humanas ou
animais graves as quais, no entanto, podem usualmente ser tratados por medicamentos ou medidas teraputicas gerais, representando risco moderado
para a comunidade e para o meio ambiente. Os agentes desta classe, quando
no existentes no Pas, devem ter sua importao restrita, sujeita a prvia
autorizao das autoridades competentes.
- Classe de risco 4 (alto risco individual e alto risco para a comunidade):
Incluem os agentes de alto risco biolgico que causam doenas humanas e
animais de alta gravidade, capazes de se disseminar na comunidade e no
meio ambiente.
Esta classe inclui principalmente agentes virais. Os agentes desta classe,
quando no existentes no Pas, devem ter sua importao proibida e, caso
sejam identificados ou se tenha suspeita de sua presena no Pas, os materiais
suspeitos de conter estes agentes devem ser manipulados com os nveis mximos de segurana disponveis e, devem ser destrudos por esterilizao por
40
processos fsicos (autoclavao) ou por processos qumicos de reconhecida

eficcia e posteriormente incinerados.
- Classe de risco 5 (alto risco de causar doena animal grave e de disseminao no meio ambiente): Incluem agentes de doena animal no existentes
no Pas e que, embora no sejam patgenos de importncia para o homem,
podem gerar graves perdas econmicas e na produo de alimentos.
Os agentes desta classe devem ter sua importao proibida e caso sejam
identificados ou sua presena suspeita no Pas, devem ser manipulados como
descrito para a classe de risco 4.
Observaes sobre a classificao de microorganismos
1 - Na relao de agentes nas diversas classes, no se tomam em considerao fatores particulares como uma possvel mais alta susceptibilidade do
profissional de laboratrio em funo de doenas pr-existentes, medicao
que esteja utilizando, baixa de sua imunidade, gravidez e lactao. Estes fatores devem ser avaliados antes dos profissionais entrarem em contacto com os
agentes infecciosos.
2 - No caso de mais de uma espcie de um determinado gnero ser patognica, ser assinalada a mais importante, seguida da denominao spp,
indicando que outras espcies do gnero podem ser tambm patognicas.
3 - Todos os vrus isolados do homem ainda no devidamente estudados e
classificados, devem ser considerados como de classe 2, no mnimo, at que
os estudos sejam concludos.
4 - A classificao de parasitas e as respectivas medidas de contingenciamento se aplicam somente para os estgios de seu ciclo durante os quais
sejam infecciosos para o homem ou animais.
5 - A inoculao experimental em animais de agentes biolgicos patognicos, em especial os que so eliminados em altos ttulos por excrees ou
secrees do animal e em especial os infectantes por via respiratria, podem
exigir um nvel de contingenciamento acima do indicado na classificao do
microorganismo. Cada caso dever ser avaliado por profissionais capacitados
a julgar o risco existente, antes de serem iniciadas as inoculaes experimentais destes agentes.
CLASSE DE RISCO 1
Agentes no includos nas classes de risco 2, 3 e 4 e que no demonstraram
capacidade comprovada de causar doena no homem ou em animais sadios.
A no classificao de agentes nas classes de risco 2, 3 e 4 no implica na
sua incluso automtica na classe de risco 1. Para isso dever ser conduzida
uma avaliao de risco, baseada nas propriedades conhecidas e/ou potenciais
desses agentes e de outros representantes do mesmo gnero ou famlia.
41
CLASSE DE RISCO 2
AGENTES BACTERIANOS, INCLUINDO CLAMDIAS E RICKETTSIAS
Acinetobacter baumannii (anteriormente Acinetobacter calcoaceticus)
Actinobacillus (todas as espcies)
Actinomadura madurae, A. pelletieri
Actinomyces spp, A. gerencseriae, A.israelli, Actinomyces pyogenes (anteriormente Corynebacterium pyogenes)
Aeromonas hydrophila
Amycolata autotrophica
Archanobacterium haemolyticum (anteriormente Corynebacterium haemolyticum)
Bacteroides fragilis
Bartonella (Rochalimea) spp, .B. bacilliformis, B. henselae, B. vinsonii, B.
quintana
Borrelia spp, B. anserina, B.burgdorferi, B. duttoni, B. persicus, B. recurrentis, B. theileri, B.vincenti
Bordetella bronchiseptica, B. parapertussis, B. pertussis
Burkholderia spp (anteriormente espcies de Pseudomonas exceto aquelas inseridas na classe 3)
Campylobacter spp, C.septicum, C. coli, C. fetus, C. jejuni
Cardiobacterium hominis
Chlamydia pneumoniae, C. trachomatis
Clostridium spp, (C. chauvoei , C. haemolyticum, C. histolyticum, C. novyi,
C. perfringens, C. tetani, C. septicum)
Corynebacterium spp, C. diphtheriae, C. equi, C. haemolyticum, C. minutissimum, C.pyogenes, C. pseudotuberculosis, C. renale
42
Dermatophilus congolensis
Edwardsiella tarda
Ehrlichia spp, Ehrlichia sennetsu (Rickettsia sennetsu)
Eikenella corrodens
Enterobacter aerogenes/cloacae
Enterococcus spp
Erysipelothrix rhusiopathiae
Escherichia coli (todas as cepas enteropatognicas, enterotoxignicas, enteroinvasivas e cepa detentoras do antgeno K 1).
Haemophilus ducreyi, H. influenzae
Helicobacter pylori
Klebsiella (todas as espcies)
Legionella, incluindo a L. pneumophila
Leptospira interrogans (todos os sorotipos)
Listeria (todas as espcies)
Moraxella (todas as espcies)
Mycobacterium (todas as espcies, exceto as listadas na Classe 3), Mycobacterium avium/intracellulare, M. cheloni, M. fortuitum, M. kansasii, M.
malmoense, M. marinum, M. paratuberculosis, M. scrofulaceum, M. simiae,
M. szulgai, M. xenopi, M. asiaticum, M.bovis BCG vacinal, M. leprae
Mycoplasma (todas as espcies, exceto Mycoplasma mycoides e Mycoplasma agalactiae classificados como risco 5), Mycoplasma caviae,
M. hominis, M. pneumoniae
43
Neisseria gonorrhoea, N. meningitidis

Nocardia asterides, N. brasiliensis, N. otitidiscaviarum, N. transvalensis,
N. farcinica, N. nova
Pasteurella spp, P. multocida
Peptostreptococcus anaerobius
Plesiomonas shigelloides
Porphyromonas spp
Prevotella spp
Proteus mirabilis, P. penneri, P. vulgaris
Providencia spp, P. alcalifaciens, P. rettgeri
Rhodococcus equi
Salmonella ssp (todos os sorovares)
Serpulina spp
Shigella spp.(S. boydii, S. dysenteriae , S. flexneri, S. sonnei)
Sphaerophorus necrophorus
Staphylococcus aureus
Streptobacillus moniliformis
Streptococcus spp, S. pneumoniae, S. pyogenes, S. suis
Treponema spp, T. carateum, T. pallidum, T. pertenue
Vibrio spp, V. cholerae 01 e 0139, V. vulnificus, V. parahaemolyticus
Yersinia spp, Y. enterocolitica, Y. pseudotuberculosis
44
PARASITAS:
Acanthamoeba castellani
Ancylostoma humano e animal, incluindo A. duodenale, A. ceylanicum
Angiostrongylus spp, A. cantonensis, A. costaricensis
Ascaris, A. lumbricoides, A. suum
Babesia, incluindo B. microti, B. divergens
Balantidium coli
Brugia, incluindo B. malayi, B. timori, B. pahangi
Capillaria spp, C. philippinensis
Clonorchis sinensis, C. viverrini
Coccidia
Cryptosporidium spp, C. parvum
Cyclospora cayetanensis
Cysticercus cellulosae (cisto hidtico, larva de T. solium)
Dactylaria galopava (Ochroconis gallopavum)
Dipetalonema streptocerca
Diphyllobothrium latum
Dracunculus medinensis
Echinococcus, incluindo E. granulosus, E. multilocularis, E. vogeli
Emmonsia parva var. crescens, Emmonsia parva var. parva
Entamoeba histolytica
45
Enterobius
Exophiala (Wangiella) dermatitidis
Fasciola , incluindo F. gigantica,F. hepatica
Fasciolopsis buski
Fonsecaea compacta, F. pedrosoi
Giardia spp, Giardia lamblia (Giardia intestinalis)
Heterophyes
Hymenolepis, incluindo H. diminuta, H. nana
Isospora
Leishmania spp, L. major, L. mexicana, L. peruvania, L. tropica, L. ethiopia,
L. brasiliensis, L. donovani
Loa loa
Madurella grisea, M. mycetomatis
Mansonella ozzardi, M. perstans
Microsporidium
Naegleria fowleri, N. gruberi
Necator, incluindo N. americanus
Onchocerca, incluindo O. volvulus
Opisthorchis (todas as espcies)
Paragonimus westermani
Plasmodium, incluindo as espcies smias, P. cynomolgi, P. falciparum, P.
malariae, P. ovale, P. vivax
46
Sarcocystis, incluindo S. suihominis

Scedosporium apiospermum (Pseudallescheria boidii), Scedosporium
prolificans(inflatum)
Schistosoma haematobium, S. intercalatum, S. japonicum, S. mansoni, S.
mekongi
Strongyloides, incluindo S. stercoralis
Taenia solium, T. saginata
Toxocara, incluindo T. canis
Toxoplasma, incluindo T. gondii
Trichinella spiralis
Trichuris trichiura
Trypanosoma, incluindo T. brucei brucei, T.brucei gambiense, T. brucei
rhodesiense, T.cruzi
Wuchereria bancrofti
FUNGOS:
Aspergillus flavus, A. fumigatus

Blastomyces dermatitidis
Candida albicans, C. tropicalis
Cladophialophora carrioni (Cladosporium carrioni), Cladophialophora
bantiana (Xylophora bantiana, Cladosporium bantianum ou C. trichoides)
Cryptococcus neoformans, Cryptococcus neoformans var. gattii (Filobasidiella bacillispora), Cryptococcus neoformans var. neoformans (Filobasidiella neoformans var. neoformans)
47
Emmonsia parva var. crescens, Emmonsia parva var. parva

Epidermophyton spp, E. floccosum
Exophialla dermatitidis
Fonsecaea compacta, F. pedrosi
Madurella spp, M. grisea, M. mycetomatis
Microsporum spp.,M. canis, M. aldouinii
Neotestudina rosatii
Paracoccidioides brasiliensis (na fase de esporulao apresenta maior risco de infeco)
Penicillium marneffei
Pneumocystis carinii
Scedosporium apiospermum (Pseudallescheria boidii), Scedosporium
prolificans (inflatum)
Sporothrix schenckii
Trichophyton spp, Trichophyton rubrum
FUNGOS EMERGENTES E OPORTUNISTAS:
Acremonium falciforme, A. kiliense,A. potronii, A. recifei, A. roseogriseum

Alternaria anamorfo de Pleospora infectoria
Aphanoascus fulvescens
Aspergillus amstelodami, A. caesiellus, A. candidus, A. carneus, A. glaucus,
A. oryzae, A. penicillioides, A. restrictus, A. sydowi, A. terreus, A. unguis,
A. versicolor.
48
Beauveria bassiana
Candida pulcherrima, C. lipolytica, C. ravautii, C. viswanathii
Chaetomium spp
Chaetoconidium spp
Chaetosphaeronema larense
Cladosporium cladosporioides
Conidiobolus incongruus
Coprinus cinereus
Cunninghamella geniculata
Curvularia pallescens, C. senegalensis
Cylindrocarpon tonkinense
Drechslera spp
Exophiala moniliae
Fusarium dimerum, F. nivale
Geotrichum candidum
Hansenula polymorpha
Lasiodiplodia theobromae
Microascus desmosporus
Mucor rouxianus
Mycelia sterilia
Mycocentrospora acerina
49
Oidiodendron cerealis
Paecilomyces lilacinus, P. viridis, P. variotii
Penicillium chrysogenum, P. citrinum, P. commune, P. expansum, P. spinulosum
Phialophora hoffmannii, P. parasitica, P. repens
Phoma hibernica
Phyllosticta spp, P. ovalis
Pyrenochaeta unguis-hominis
Rhizoctonia spp
Rhodotorula pilimanae, R. rubra
Schizophyllum commune
Scopulariops acremonium, S. brumptii
Stenella araguata
Taeniolella stilbospora
Tetraploa spp
Trichosporon capitatum
Tritirachium oryzae
Volutella cinerescens
VRUS:
Adenovirus humanos (todos os tipos)

Arenavirus do Velho Mundo: vrus Ippy, Mobala, coriomeningite linfocitria
(amostras no neurotrpicas).
50
Arenavirus do Novo Mundo (complexo Tacaribe): vrus Amapari, Latino,

Paran, Pichinde, Flechal
Astrovirus
Birnavirus, incluindo Picobirnavirus, Picotrinavirus.
Bunyavirus incluindo Grupo Anopheles A (Arumateua, Caraip, Lukuni,
Tacaiuma, Trombetas, Tucurui); Grupo Bunyamwera (Iaco, Kairi, Macau,
Maguari, Sororoca, Tucunduba, Taiassu, Xingu) ; Grupo da encefalite da
Califrnia (La Crosse, Snow hare, San Angelo, Tahyna, Lumbo, Inkoo);
Grupo Melo (Jamestown Canyon, South River, Keystone, Serra do Navio,
Trivittatus, Guaroa; Grupo C (Apeu, Caraparu, Itaqui, Marituba, Murutucu, Nepuyo, Oriboca; Grupo Capim (Capim, Acara, Benevides, Benfica,
Guajar, Moriche); Grupo Guam (Ananindeua, Bimiti, Cat, Guam, Mirim, Moju, Timboteua). Grupo Simbu (Jatobal, Oropouche, Utinga); vrus
Turlock, Belm, Moju dos Campos, Par e Santarm.
Hantavirus incluindo Prospect Hill, Puumala e demais hantavrus, exceto
as classificadas no nvel 3
Nairovirus incluindo Hazara
Phlebovirus incluindo vrus Alenquer, Amb, Anhang, Ariquemes, Belterra, Bujar, Candir, Icoarac, Itaituba, Itaporanga, Jacund, Joa, Morumbi, Munguba, Oriximina, Pacu, Serra Norte, Tapar, Turuna, Uriurana,
Urucuri , Napoles, Toscana, Uukuvrus, Calicivirus incluindo hepatite E,
agente de Norwalk e demais vrus do grupo.
Coronavirus incluindo vrus humanos, gastroenterite de sunos, hepatite
murina, Coronavirus bovinos, peritonite infecciosa felina, bronquite infecciosa aviria, Coronavirus de caninos, ratos e coelhos.
Flavivirus incluindo vrus Dengue tipos 1,2,3 e 4, vrus da Febre Amarela vacinal, West Nile, Kunjin, Bussuquara, Cacipacor, Ilhus, encefalite de So Lus
Hepadnavirus incluindo vrus da Hepatite B/ vrus Delta
Herpes-vrus incluindo Citomegalovirus, Herpes simplex 1 e 2, vrus Epstein-Barr, Varicela-Zoster, Herpes-vrus tipo 6- HHV6, Herpes-vrus tipo
7- HHV7, Herpes-vrus tipo 8 HHV8
51
Orthomyxovirus incluindo vrus da Influenza A, B e C.

Orthomyxovirus transmitidos por carrapatos: vrus Dhori e Thogoto.
Papovavirus, todos os tipos, incluindo vrus BK e JC, vrus do Papiloma
humano, vrus Smio 40 (SV40)
Paramyxovirus incluindo vrus do Sarampo, Cachumba, Nipah, Parainfluenza 1, 2, 3 e 4, vrus Respiratorio Sincicial , Pneumovrus e doena de
New-Castle, exceto amostras asiticas, classificadas no nvel 5.
Parvovirus incluindo Parvovirus humano B-19.
Picornavirus incluindo vrus da Poliomielite, vrus da conjuntivite hemorrgica aguda ( AHC ), vrus Coxsackie, vrus ECHO, Rhinovrus, vrus da
hepatite A.
Poxvirus incluindo Cowpox e vrus relacionados isolados de felinos domsticos e de animais selvagens, ndulo do ordenhador, Cotia, Molusco
contagioso, Buffalopox, vrus Orf, Vaccnia, Yatapox ( Tana e Yaba ), Parapoxvrus, Poxvrus de caprinos, sunos e aves, Myxoma.
Rhabdovirus incluindo vrus da Raiva (amostras de vrus fixo), Grupo da
Estomatite Vesicular (Indiana VSV-1, Cocal VSV 2, Alagoas VSV 3, Maraba
VSV 4 , Carajs, Juruna, Marab, Piry), Grupo Hart Park (Hart Park, Mosqueiro), Grupo Timb (Timb, Chaco, Sena Madureira), Grupo Mussuril
(Cuiab, Marco) vrus Duvenhage, Aruac, Inhangapi, Xiburema.
Reovirus incluindo Orthoreovirus tipos 1, 2 e 3, Coltivirus, Rotavirus, Orbivirus, Reovirus isolados na Amaznia dos grupos Changuinola e Corriparta, vrus Ieri, Itupiranga e Temb.
Togavirus/Alfavirus incluindo vrus Bebaru, Onyong-nyong, Chikungunya, Ross River, Semliki, encefalite equina Venezuela (amostra TC 83 ),
encefalomielite equina ocidental, encefalomielite equina oriental, Aur,
Mucambo, Mayaro, Pixuna, Una.
Togavirus/Rubivirus incluindo o vrus da Rubola.
Togavirus/Pestivirus incluindo o vrus da diarria bovina
Vrus da hepatite C
52
VRUS ONCOGNICOS DE BAIXO RISCO:
Adeno 7-Simian virus 40 (Ad7-SV40)

Adenovirus 1 avirio (CELO vrus )
Herpes-vrus de cobaias
Lucke vrus de rs
Mason-Pfizer smio vrus
Polyoma vrus
Rous sarcoma vrus
Shope fibroma vrus
Shope papilloma vrus
Vrus da Doena de Marek
Vrus da Leucose Bovina enzotica
Vrus da Leucemia de Hamsters
Vrus da Leucemia de Murinos
Vrus da Leucemia de Ratos
Vrus da Leucose Aviria
Vrus do Papiloma Bovino
Vrus do Sarcoma Canino
Vrus do Sarcoma de Murinos
Vrus do Tumor Mamrio de Camundongo
53
VRUS ONCOGNICOS DE RISCO MODERADO:

Adenovirus 2 - Simian vrus 40 (Ad2-SV40)
Vrus de Epstein-Barr (EBV)
Vrus da Leucemia de Gibes (GaLV)
Vrus da Leucemia Felina (FeLV)
Vrus do Sarcoma Felino (FeSV)
Vrus do Sarcoma de Smios (SSV) - 1
Vrus Yaba
CLASSE DE RISCO 3
AGENTES BACTERIANOS INCLUINDO RIQUTSIAS:
Bacillus anthracis
Bartonella (todas as espcies)
Brucella (todas as espcies)
Burkholderia mallei (Pseudomonas mallei), Burkholderia pseudomallei
(Pseudomonas pseudomallei)
Chlamydia psittaci
Clostridium botulinum
Coxiella burnetii
Escherichia coli, cepas verotoxignicas como 0157:H7
Francisella tularensis (tipo A)
Hemophilus equigenitalis
54
M. bovis (todas as cepas, exceto a BCG), M. tuberculosis

Pasteurella multocida tipo B (amostra buffalo e outras cepas virulentas)
Rickettsia akari, R. australis, R. canad, R. conorii, R. montana, R. prowazeckii, R. rickettsii, R.siberica, R. tsutsugamushi, R. typhi (R. mooseri)
Yersinia pestis
PARASITAS:
Nenhum
FUNGOS:
Coccidioides immitis (culturas esporuladas; solo contaminado)
Histoplasma capsulatum (todos os tipos, inclusive a variedade duboisii)
VRUS E PRIONS:
Arenavirus do Velho Mundo incluindo Linfocoriomeningite (amostras
neurotropicas)
Hantavirus incluindo vrus Andes, Juquitiba, Dobrava (Belgrado), Hantaan, Seoul, Sin Nombre, outras amostras do grupo recentemente isoladas.
Flavivirus incluindo vrus da Febre Amarela no vacinal, Murray Valley,
Encefalite Japonesa B, Powassan, Rocio, Sal Vieja, San Perlita, Spondweni
Herpes-vrus incluindo Rhadinovirus (Herpes-vrus de Ateles, Herpes-vrus de Saimiri)
Rhabdovirus; vrus da Raiva (amostras de rua)
Retrovrus incluindo vrus da imunodeficincia humana HIV-1 e HIV-2,
vrus linfotrpico da clula T do adulto HTLV-1 e HTLV-2, vrus de primatas no-humanos
Togavirus: Encefalite equina Venezuela (exceto a amostra vacinal TC-83)
55
Prions incluindo Agentes de encefalopatias espongiformes transmissveis:

encefalopatia espongiforme bovina, scrapie e outras doenas animais relacionadas, doena de Creutzfeldt-Jakob, insonia familiar fatal, sndrome
de Gerstmann-Straussler-Scheinker, Kuru.
Oncornavirus C e D
CLASSE DE RISCO 4
BACTRIAS:
Nenhuma.
FUNGOS:
Nenhum.
PARASITAS:
Nenhum.
VRUS E MICOPLASMAS:
Agentes de febres hemorrgicas (Crimia-Congo, Lassa, Junin, Machupo,
Sabi, Guanarito e outros vrus relacionados).
Encefalites transmitidas por carrapatos (vrus da encefalite primavera-vero russa, vrus da doena da floresta de Kyasanur , febre hemorrgica de
Omsk, vrus da encefalite da Europa Central com suas vrias amostras).
Filovirus: vrus Marburg, Ebola e outros vrus relacionados.
Herpes-vrus do macaco (vrus B)
Vrus da aftosa com seus diversos tipos e variantes.
Varola major e alastrim
Varola do macaco (monkey-pox)
Varola do camelo
56
Vrus da doena hemorrgica de coelhos

Vrus da enterite viral dos patos, gansos e cisnes
Vrus da febre catarral maligna de bovinos e cervos
Vrus da hepatite viral do pato tipos 1, 2 e 3
Vrus da lumpy skin
CLASSE DE RISCO 5
AGENTES:
Mycoplasma agalactiae (caprinos e ovinos)
Mycoplasma mycoides mycoides (pleuropneumonia bovina)
Cowdria ruminatium (heart water)
Thaileria annulata, T. bovis, T. hirci, T. parva e agentes relacionados
Trypanosoma evansi, T. vivax
Vrus da clera suna
Vrus da doena de Borna
Vrus da doena de New-Castle (amostras asiticas)
Vrus da doena de Teschen
Vrus da doena Nairobi do carneiro e vrus relacionados como Ganjam
e Dugbe
Vrus da doena vesicular do suno
Vrus da doena de Wesselbron
Vrus da febre do vale do Rift
Vrus da febre efmera de bovinos
57
Vrus da febre petequial infecciosa bovina

Vrus da peste eqina africana
Vrus da peste dos pequenos ruminantes
Vrus da peste bovina
Vrus da peste suna africana
Vrus da peste suna clssica (amostra selvagem)
Vrus da influenza aviria (amostras de epizootias)
Vrus da peste aviria
Vrus do louping ill de ovinos
58
A coleo institucional do Ministrio da Sade pode ser acessada

gratuitamente na Biblioteca Virtual do Ministrio da Sade:
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O contedo desta e de outras obras da Editora do Ministrio da Sade

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Secretaria de Cincia, Tecnologia e Insumos Estratgicos

Srie A. Normas e Manuais Tcnicos

2004 Ministrio da Sade.

Diretrizes gerais para o trabalho em conteno com material biolgico

mbito de aplicao ........................................................................

I Classes de risco dos agentes biolgicos ..............................................

Classe de risco 1 .............................................................................

Classe de risco 2 .............................................................................

Classe de risco 3 .............................................................................

Classe de risco 4 .............................................................................

Classe de risco 5 .............................................................................. 10

Instalaes laboratoriais NB-2 .......................................................... 17

Reinaldo Felippe Nery Guimares

DIRETRIZES GERAIS PARA O TRABALHO EM

I CLASSES DE RISCO DOS AGENTES BIOLGICOS

PRTICAS ESPECIAIS PARA O NB-1

associados operao e/ou controle de sistemas de climatizao devem ser

As cadeiras e outros mveis utilizados no trabalho laboratorial devem ser

PROCEDIMENTOS-PADRO DE LABORATRIO PARA O NB-2

Dependendo do(s) material(is) biolgico(s) manipulado(s), para referncia

Os procedimentos de Biossegurana devem ser incorporados aos procedimentos operacionais padres.

EQUIPAMENTOS DE CONTENO PARA O NB-3

pulados ou das atividades do laboratrio. Ao estabelecer um programa de

INSTALAES LABORATORIAIS NB-4

iluminao, os alarmes, os controles de entrada e sada, os sistemas de

______. Resoluo RDC n. 33, de 25 de fevereiro de 2003. Regulamento

CLASSIFICATION of Human Etiologic Agents on the Basis of Hazard. UCLA.

Representante Legal da Entidade indivduo formalmente designado para

ANEXO I CABINES DE SEGURANA BIOLGICA (CSB)

Entrada e sada do ar por

ANEXO II CLASSIFICAO DE AGENTES COM

processos fsicos (autoclavao) ou por processos qumicos de reconhecida

Neisseria gonorrhoea, N. meningitidis

Sarcocystis, incluindo S. suihominis

Aspergillus flavus, A. fumigatus

Emmonsia parva var. crescens, Emmonsia parva var. parva

FUNGOS EMERGENTES E OPORTUNISTAS:

Acremonium falciforme, A. kiliense,A. potronii, A. recifei, A. roseogriseum

Adenovirus humanos (todos os tipos)

Arenavirus do Novo Mundo (complexo Tacaribe): vrus Amapari, Latino,

Orthomyxovirus incluindo vrus da Influenza A, B e C.

VRUS ONCOGNICOS DE BAIXO RISCO:

Adeno 7-Simian virus 40 (Ad7-SV40)

VRUS ONCOGNICOS DE RISCO MODERADO:

M. bovis (todas as cepas, exceto a BCG), M. tuberculosis

Prions incluindo Agentes de encefalopatias espongiformes transmissveis:

Vrus da doena hemorrgica de coelhos

Vrus da febre petequial infecciosa bovina

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