Quim. Nova, Vol. 32, No.

9, 2444-2457, 2009

Reviso

QUIMIOTERAPIA DA DOENA DE CHAGAS: ESTADO DA ARTE E PERSPECTIVAS NO DESENVOLVIMENTO

DE NOVOS FRMACOS
Luiz C. Dias e Marco A. Dessoy
Departamento de Qumica Orgnica, Instituto de Qumica, Universidade Estadual de Campinas, Cidade Universitria Zeferino
Vaz, CP 6154, 13083-970 Campinas - SP, Brasil
Jean Jerley N. Silva, Otavio H. Thiemann, Glaucius Oliva e Adriano D. Andricopulo*
Instituto de Fsica de So Carlos, Universidade de So Paulo, CP 780, 13560-970 So Carlos - SP, Brasil
Recebido em 17/6/09; aceito em 2/9/09; publicado na web em 10/11/09

CHEMOTHERAPY OF CHAGAS DISEASE: STATE OF THE ART AND PERSPECTIVES FOR THE DEVELOPMENT OF NEW
DRUGS. Neglected diseases are a major global cause of illness, long-term disability and death. Chagas disease is a parasitic infection
widely distributed throughout Latin America, with devastating consequences in terms of human morbidity and mortality. The existing drug
therapy suffers from a combination of drawbacks including poor efficacy, resistance and serious side effects. In 2009, we celebrate the
100th anniversary of the discovery of Chagas disease, facing the challenges of developing new, safe and effective drugs for the treatment of
this disease. This brief review attempts to highlight the state of the art, limitations and perspectives of Chagas disease drug development.
Keywords: Chagas disease; enzymes; inhibitors.

INTRODUO
As doenas infecciosas parasitrias afetam milhes de pessoas
nas diferentes regies geogrficas mais pobres do planeta e representam uma crescente ameaa mundial. A malria, doena de Chagas,
tripanossomase africana (doena do sono), leishmaniose e esquistossomose so responsveis por incapacitar anualmente uma frao
significativa da populao de vrios pases em desenvolvimento,
especialmente do continente africano.1 A Organizao Mundial de
Sade (OMS) expressa esse panorama pelo indicador chamado de
anos de vida perdidos ajustados por incapacidade (DALY - disabilityadjusted life years), que uma medida dos anos de vida saudveis
perdidos por um indivduo que contraiu uma doena (morbidade e
mortalidade). Para um estado de doena fatal ou grave condio de
sade, o DALY estimado como os anos de vida perdidos devidos
morte prematura (YLL - years of life lost) somados aos anos vividos
com incapacidade (YLD - years lived with disability), permitindo
uma viso mais abrangente do impacto da doena.
As doenas parasitrias continuam sendo um obstculo para o
desenvolvimento social e econmico dos pases mais pobres, e so
frequentemente chamadas de doenas negligenciadas, doenas
rfs ou doenas tropicais.2 A maioria absoluta das mortes devido
s doenas parasitrias ocorre em regies situadas abaixo da linha do
Equador.1 A necessidade de novas alternativas teraputicas clara,
mas os investimentos globais em pesquisa e desenvolvimento (P&D)
de frmacos e vacinas so extremamente insuficientes.1,2
A doena de Chagas, descoberta em 1909 pelo mdico brasileiro
Carlos Chagas, um dos principais problemas socioeconmicos enfrentados na Amrica Latina. Esta doena, causada pelo protozorio
parasita Trypanosoma cruzi, afeta cerca de 18 milhes de pessoas do
sul dos Estados Unidos at a Patagnia, causando aproximadamente
50.000 mortes por ano, sendo que outros 100 milhes de indivduos
vivem em reas de risco de contaminao.3,4 So estimados 700 mil
DALYs e aproximadamente 300 mil novos casos por ano.1,2
Neste ano de 2009 so celebrados os 100 anos da descoberta da
doena de Chagas. Em seu brilhante trabalho, Carlos Chagas identi*e-mail: aandrico@ifsc.usp.br

ficou no somente o agente etiolgico, mas tambm o vetor e o modo

de transmisso da doena, o que considerado um feito extraordinrio
e nico na histria da medicina. Contudo, este momento especial e
justo de comemoraes do centenrio da descoberta da doena nos
proporciona a oportunidade de refletir sobre a urgncia de novos
medicamentos, j que no h qualquer tratamento eficaz para essa
grave enfermidade. Portanto, faz-se necessrio o fortalecimento de
programas de pesquisas que visem o desenvolvimento de novos frmacos, promovendo aes de integrao social, cientfica e tecnolgica.
Neste breve artigo de reviso, sero abordados o estado da arte, as
limitaes e perspectivas para o desenvolvimento de novos frmacos
para a doena de Chagas, com nfase em estratgias envolvendo
aspectos fundamentais em qumica e biologia.
DOENA DE CHAGAS
Aspectos biolgicos
O protozorio flagelado T. cruzi da ordem Kinetoplastida, famlia
Trypanosomatidae e gnero Trypanosoma o agente causador da
doena de Chagas.5-7 O parasita possui um complexo ciclo biolgico,
o qual envolve um hospedeiro invertebrado e outro vertebrado, e apresenta trs formas distintas: (i) epimastigota, forma presente no vetor
e em cultura axnica; (ii) tripomastigota, forma sangunea circulante
e infectante; e (iii) amastigota, forma de replicao intracelular.6,7
A infeco chagsica humana caracterizada por uma fase aguda
que dura em mdia 2 meses, sendo sucedida por uma fase crnica que
tipicamente se prolonga por toda a vida do hospedeiro. Na maioria
dos casos, a fase aguda da doena oligossintomtica, principalmente
em adultos, no sendo valorizada pelo paciente ou pelo agente de
sade. Pode ainda no haver instalao de uma fase aguda clssica,
uma vez que est relacionada diretamente com o nmero de parasitas
inoculados. Quando esta se manifesta, apresenta um quadro febril ou
outras manifestaes clnicas, tais como miocardite, alteraes eletrocardiogrficas, linfadenopatia e hepatoesplenomegalia.7,8 A fase aguda
sintomtica ocorre principalmente em crianas, na primeira dcada
de vida, podendo levar morte devido a complicaes decorrentes de
insuficincia cardaca e processos inflamatrios que envolvem o cre-

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Quimioterapia da doena de chagas

bro (e.g., meningoencefalite). medida que os nveis de parasitemia e

as leses inflamatrias da fase aguda diminuem em intensidade, uma
miocardite focal se instala durante a fase indeterminada da doena,
podendo em muitos casos evoluir em magnitude e abrangncia, com a
destruio de fibras cardacas e aumento da fibrose.9,10 Cerca de 60%
dos pacientes chagsicos crnicos permanecem assintomticos por
longo perodo, sendo que 30% destes desenvolvem complicaes
cardacas que podem levar cardiopatia chagsica crnica, leso mais
grave da doena, e/ou afetar o sistema gastrointestinal, resultando em
severos problemas digestivos.8,9
Nas ltimas dcadas, evidncias experimentais suportam duas
hipteses sobre a patognese da cardiopatia chagsica crnica. Na
primeira, a infeco pelo T. cruzi induz respostas imunolgicas contra
constituintes tissulares normais, que seriam parcialmente independentes da presena parasitria (teoria da autoimunidade na doena
de Chagas).11,12 Na outra hiptese, o parasitismo tissular persistente
seria diretamente responsvel pelas reaes inflamatrias, acarretando em dano miocrdico irreversvel.12,13 A cardiopatia chagsica
crnica a forma mais comum de doena miocrdica de etiologia
no-isqumica.14-18
A doena de Chagas considerada um problema relevante de
sade pblica em vrios pases da Amrica Latina e, mais recentemente, tambm no sul dos Estados Unidos, levando a complicaes
socioeconmicas de grande extenso e complexidade. Embora muitos esforos no controle da transmisso vetorial tenham sido bem
sucedidos, os resultados destas medidas no beneficiam diretamente
os milhes de indivduos infectados, nem tampouco os pacientes
chagsicos com manifestaes clnicas da doena.16,19
Quimioterapia da doena de Chagas: um sculo de desafios,
avanos e limitaes
A longa histria da quimioterapia da doena de Chagas pode ser
dividida em trs fases principais.17-20 A primeira compreende o estgio
inicial da descoberta da doena, de 1909 at 1935, e marcada pela
morte de Carlos Chagas (em novembro de 1934) e pelo lanamento
do Manual de Doenas Tropicais e Infectuosas (em 1935), escrito
por Carlos Chagas em coautoria com seu filho Evandro Chagas.17 A
segunda fase, no perodo de 1936 a 1960, corresponde avaliao
biolgica de inmeras substncias qumicas, extratos e misturas de
componentes, sendo marcada por resultados controversos e de significado clnico questionvel.17,18 A ltima fase (a partir de 1961)
caracterizada por estudos que demonstraram claramente, atravs de
modelos experimentais de infeco com T. cruzi em camundongos,
a eficcia de alguns compostos como, por exemplo, a nitrofurazona
(1) (Figura 1).20,21
At o fim da primeira fase apenas dois trabalhos haviam sido
publicados sobre a teraputica experimental da doena de Chagas. Em
ambos, os resultados foram insatisfatrios. Na segunda fase, foram
descritos resultados de mais de 20 quimioterpicos e 30 antibiticos,
dentre os quais se destacam algumas substncias que tiveram efeito
supressivo sobre a infeco causada pelo T. cruzi.18-20 Entre os agentes
empregados nesta fase, destaca-se o antissptico violeta de genciana
(2) (Figura 1), que ainda hoje utilizado como agente profiltico em
bancos de sangue.
A partir da dcada de 1960, com a demonstrao de que a nitrofurazona (1) na dose diria de 100 mg kg-1 em esquema teraputico
de prolongada durao (50 dias em mdia) curava mais de 95% dos
camundongos cronicamente infectados, teve incio uma nova era na
teraputica da doena de Chagas.22 Dez indivduos com casos agudos da doena foram tratados com 1 apresentando bons resultados,
contudo, metade voltou a manifestar a presena do parasita circulante
detectado por tcnicas xenodiagnstico.22

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Figura 1. Estruturas qumicas da nitrofurazona (1), violeta de genciana (2),

nifurtimox (3) e benzonidazol (4)

Por volta do incio da dcada de 1970, dois compostos surgiram apresentando novas perspectivas para o tratamento da doena
de Chagas, tanto pela eficcia na fase aguda quanto pela tolerncia. Estes so o nifurtimox (Lampit, da Bayer), 3-metil-4-(5nitrofurfurilidenoamino)tetra-hidro-4H-1,4-tiazina-1,1-dixido (3)
(Figura 1); e o benzonidazol (Rochagan, da Roche), N-benzyl-2nitroimidazol acetamida (4) (Figura 1).20 A ao destes frmacos
afetada diretamente por algumas condies, como a durao do
tratamento, a idade e a distribuio geogrfica dos pacientes, entre
outros. Os resultados mais promissores foram observados na fase
aguda da doena com o uso de 3 na dose de 8-10 mg kg-1 ( 35 mol
kg-1) e de 4 na dose de 5-7,5 mg kg-1 ( 30 mol kg-1), durante um
perodo de 60 a 90 dias.23-25 Por outro lado, em pacientes adultos na
fase crnica da infeco, os melhores resultados foram obtidos no
Cone Sul da Amrica do Sul (regio sul do Brasil, Argentina e Chile)
devido provavelmente ao tipo de cepa de T. cruzi predominante nesta
regio.23-26 Os frmacos 3 e 4 apresentaram entre 50 e 70% de cura
na fase aguda, em contraste com valores percentuais inferiores a 20
na fase crnica da doena.23
Evidncias indicam que o nifurtimox (3) e benzonidazol (4)
atuam atravs da formao de radicais livres e/ou metablitos eletroflicos (Figura 2). O grupo nitro (NO2) presente nestas molculas
reduzido ao grupo amino (NH2) pela ao de enzimas do tipo
nitroredutases, que atuam especificamente em sistemas moleculares
do tipo R-NO2. Este processo, iniciado pela reao catalisada pela
NADPH citocromo P450 redutase (EC 1.6.2.4), leva formao
de um intermedirio nitro radicalar (R-NO2-) com subsequente
formao de hidroxilamina (R-NHOH).27 No caso de 3, o radical
reduz o oxignio molecular (O2) formando o on superxido (O2-)
e regenerando o grupo NO2 num processo conhecido como ciclo
redox (redox ciclyng).27 O on superxido formado captado pela
enzima superxido dismutase (EC 1.15.1.1) gerando perxido
de hidrognio (H2O2) que, atravs da reao de Haber-Weiss na
presena de ons FeIII, forma o radical hidroxila (OH).28,29 A esta
espcie tem sido atribudo o efeito tripanocida por mecanismos
complexos que envolvem ligao a lipdeos, protenas e ao DNA
do T. cruzi.27 Por outro lado, o frmaco 4 no atua atravs do ciclo
redox e no depende diretamente de espcies reativas de oxignio
(ROS - reactive oxigen species).27 O radical nitro formado em 4
estaria envolvido com seu efeito tripanocida atravs da formao
de ligaes covalentes com macromolculas do T. cruzi (e.g., DNA
e citocromo P450).28 descrito ainda que 4 aumenta a fagocitose e
lisa o T. cruzi atravs de um mecanismo dependente de interferongama (IFN-g - interferon-gamma),29 e inibe o crescimento do T.
cruzi atravs da enzima NADH-fumarato redutase (EC 1.3.1.6).30

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Dias et al.

Figura 2. Mecanismo de ao proposto dos frmacos nifurtimox (3) e benzonidazol (4)

Os metablitos (eletroflicos) formados atravs do mecanismo de

ao de 3 e 4 podem atuar tambm em outros sistemas, especialmente
do hospedeiro (humano), devido a sua alta reatividade. Esta baixa
especificidade de ao em vias bioqumicas definidas do parasita
contribui para os efeitos citotxicos observados no tratamento dos
pacientes. Os efeitos mais comuns para o composto 3 so perda de
peso, sonolncia, alm de algumas manifestaes digestivas, tais
como nuseas, vmitos e clicas intestinais.31 J para o frmaco 4, os
efeitos colaterais mais frequentes podem ser agrupados de trs formas:
(i) manifestaes de hipersensibilidade, como dermatite com erupo cutnea (usualmente entre o 7 e 10 dia de tratamento), edema
periorbital ou generalizado, febre, linfadenopatia, dores musculares
e articulares; (ii) depresso da medula ssea, incluindo neutropenia,
agranulocitose e prpura trombocitopmica; e (iii) polineuropatia
perifrica, representada por parestesias e polineurite.31
ESTADO DA ARTE E PERSPECTIVAS NO
DESENVOLVIMENTO DE NOVOS FRMACOS
O processo de descoberta e desenvolvimento de novos frmacos
engloba vrias estratgias e uma combinao de mtodos tradicionais
e modernos, de natureza intrinsecamente multi- e interdisciplinar,
integrando especialidades como a qumica, biologia, medicina,
farmcia, bioqumica, farmacologia, bioinformtica, entre outras. A
ao dos frmacos pressupe a interao de uma molcula pequena
(ligante) com uma macromolcula (receptor biolgico), tipicamente
uma protena de alguma via bioqumica associada a uma condio
de doena ou disfuno em humanos.32-34 Por muitas dcadas, a
descoberta de substncias bioativas se baseou em qumica e biologia
bsica e em uma abordagem tentativa e erro guiada por modelos
experimentais em culturas de clulas (in vitro) ou em animais (in
vivo). A evoluo desse processo deu origem era do planejamento
de frmacos, que teve como elemento fundamental a mudana de paradigma caracterizada pelo entendimento de que os sistemas qumicos
tinham papel determinante na modulao de sistemas biolgicos.33-35
As doenas endmicas parasitrias representam um grave problema mdico, social e humano e sua preveno, controle e tratamento
representam um grande desafio mundial. Por outro lado, do ponto de
vista cientfico, as oportunidades de estudos na rea de planejamento
de frmacos so promissoras, especialmente nas ltimas dcadas com
os avanos da biologia molecular e estrutural, bem como da qumica medicinal e computacional, da sntese orgnica planejada e dos
ensaios biolgicos em larga escala. As doenas parasitrias recebem
grande ateno no Programa Especial para Pesquisa e Treinamento
em Doenas Tropicais (TDR - Special Programme for Research &
Training in Tropical Diseases) da OMS.32 Para as doenas infectoparasitrias consideradas prioritrias neste programa, como a malria,
doena de Chagas, esquistossomose, tripanossomase africana e
as leishmanioses, no existem vacinas disponveis e os frmacos
permanecem o centro do controle destas doenas. Contudo, o repertrio de frmacos disponveis limitado e inadequado, e o quadro

Quim. Nova

bastante agravado pela emergncia de cepas de parasitas resistentes.

Novos frmacos so necessrios imediatamente e continuaro a ser
no futuro, uma vez que os parasitas acabam desenvolvendo, atravs
de mecanismos diversos, resistncia aos quimioterpicos mais frequentemente usados.32-37
O aumento considervel nos investimentos requeridos no desenvolvimento de novos frmacos, aliado perspectiva de retornos
financeiros insuficientes, tem como resultado a quase inexistncia
de recursos em P&D na rea de doenas parasitrias por parte das
principais companhias farmacuticas e biotecnolgicas do mundo.
Neste panorama atual, a doena de Chagas pode ser considerada
extremamente negligenciada, o que ilustra uma realidade preocupante face s necessidades das populaes mais pobres e vulnerveis
do planeta.2,3,32 A produo de medicamentos tambm segue uma
tendncia de mercado, j que os maiores produtores so a Amrica
do Norte (50%), Europa (24%) e Japo (13%). A Amrica Latina
responsvel por apenas 5% dos medicamentos produzidos no mundo,
sendo que outras regies mais pobres do planeta apresentam nmeros
insignificantes ou participao nula.3,33
As pesquisas por novos frmacos para o tratamento da doena
de Chagas tm evoludo sensivelmente nas ltimas dcadas, com
destaque para o sequenciamento dos genomas do T. cruzi, T. brucei e
Leishmania.34-36 que permitiu a identificao de vrios genes, muitos
deles existentes apenas no parasita e no no homem. Alm disso,
vrias molculas pequenas vm sendo exploradas em programas de
qumica medicinal com a aplicao de mtodos de planejamento de
frmacos baseados na estrutura do receptor (SBDD - structure-based
drug design) e na estrutura do ligante (LBDD - ligand-based drug
design). As inovaes cientficas e tecnolgicas tm contribudo fortemente no direcionamento do processo moderno de P&D na rea de
doenas negligenciadas. No tpico a seguir dar-se- nfase doena
de Chagas, explorando as bases moleculares para a identificao e
seleo de protenas alvo e a descoberta e otimizao de molculas
bioativas candidatas a frmacos.
Aspectos biolgicos e qumicos: alvos macro- e
micromoleculares
Alm dos avanos significativos obtidos nos aspectos biolgicos,
genticos e evolucionrios do parasita, o sequenciamento do genoma
do T. cruzi tambm contribui com a identificao de diversos alvos
biolgicos promissores, sendo a maior parte de enzimas.34-37 Na
Tabela 1 so apresentados alguns dos alvos macromoleculares mais
explorados e suas respectivas funes biolgicas. Na sequncia sero
explorados alguns destes alvos, bem como a sua implicao no processo de desenvolvimento de novos frmacos atravs de modulao
seletiva por molculas pequenas.35
Proteases
So enzimas que quebram ligaes peptdicas entre aminocidos
de protenas e peptdeos. Estima-se que sem a participao cataltica
destas enzimas, a hidrlise de um nico peptdeo poderia levar centenas ou milhares de anos, sendo que a reao ocorre em uma escala de
milissegundos na presena da protease apropriada.38 Em protozorios
como o T. cruzi, as proteases possuem mltiplas funes que envolvem
desde a invaso celular at o escape do parasita do sistema imune
do hospedeiro.34,37,38 Considerando-se o papel essencial dessa classe
de enzimas no ciclo de vida do T. cruzi, algumas proteases tm sido
selecionadas como alvos para o desenvolvimento de novos agentes
antichagsicos. Cisteno proteases, serino proteases, metaloprotenas
e treonino proteases (Tabela 1) so exemplos de proteases amplamente
estudadas.34,37 Dentre estas, a cruzana (EC 3.4.22), tambm chamada
cruzipana ou GP57/51 (Figura 3), que constitui a mais abundante

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Quimioterapia da doena de chagas

Tabela 1. Rotas metablicas e alvos macromoleculares para o desenvolvimento de novos frmacos para o tratamento da doena de Chagas
Alvo, via ou classe metablica
(funo)

Enzima, organela
ou rota metablica

Proteases
(Mltiplas funes que envolvem
desde invaso celular a escape
do parasita do sistema imune)

Cisteno proteases
Serino proteases
Metaloprotenas
Treonino proteases

Biossntese de esteris
(Essencial para a composio estrutural
de membranas, mitocndria e plasma)

Esterol 14-demetilase
Lanoesterol sintase
Esqualeno epoxidase
Esqualeno sintase
D-24(25) esterol metiltransferase
3-Hidroxi-3-metilglutaril coenzima
A redutase
Farnesilpirofosfato sintase
Farnesiltransferase

Via glicoltica
(Produo de energia)

Gliceraldedo-3-fosfato desidrogenase
Hexoquinase
Fosfofrutoquinase

Biossntese de lipdeos
(Essencial em diversos
constituintes celulares)

Alquil-lisofosfolipdeos
Glicosfingolipdeos

Metabolismo dependente
de grupos tiis
(Mecanismo de defesa
contra estresse oxidativo)
Metabolismo de pentose fosfato
(Mecanismo de defesa
contra estresse oxidativo)
Super famlia de protenas quinases
(Produo de energia)

Tripanotiona redutase
Tripanotiona sintetase
Triparedoxina peroxidase

6-Fosfogluconato desidrogenase
Arginina quinase
Fosfatidilinositol-3 quinase

Transporte e metabolismo de poliaminas

Arginina descarboxilase
(Defesa contra estresse oxidativo)
Glutationil espermidina sintetase
Sntese de nucleotdeos
(Precursores da sntese
de materiais genticos)

Organelas celulares
(Funes diversas)

Transferncia de cido silico

(Transferncia do cido a partir de
glicoconjugados do hospedeiro e
incorporao em molculas de mucina
ligadas membrana parasitria)
DNA topoisomerases
(Replicao do DNA do T. cruzi)

Purina fosforibosil transferases

Di-hidrofolato redutase
Pteridina redutase
Di-hidro-orotato desidrogenase
Ncleo e cinetoplasto
Mecanismo de transporte de Na+/
H+
Componentes da membrana e
osmorregulao
Glicossomo e sntese de vitamina C

Trans-sialidase

DNA topoisomerase I
DNA topoisomerase II

protena da famlia das cisteno proteases do T. cruzi, tem sido muito

explorada levando descoberta de vrios inibidores potentes e seletivos.
Das patentes depositadas atravs da Organizao Mundial da Propriedade Intelectual (WIPO - World Intellectual Property Organization)
sobre moduladores de rotas metablicas do T. cruzi, os inibidores de
cruzana merecem especial destaque. As principais classes de inibidores

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desta enzima incluem (Figura 3): (i) derivados peptdicos (5 e 6);34 (ii)
derivados no-peptdicos (triazis 7, pirimidinas 8, tiossemicarbazonas
9 e chalconas 10);34-40 (iii) complexos de rnio e ouro (oxornios 11 e
ciclometalados de ouro 12);41 e (iv) doadores de xido ntrico (nitrosotiis 13 e nitrosilo complexos de ferro e rutnio 14).42,43 Os derivados
peptdicos constituem a classe mais importante de inibidores da cruzana, especialmente o dipeptidil vinil sulfnico N-metil-Pip-F-hF-VSf
(5).39 Este inibidor, alm de alta seletividade, tambm exibiu potente
atividade in vitro e in vivo, inclusive em modelos imunossuprimidos
de infeco experimental aguda de doena de Chagas.

Figura 3. Estrutura cristalogrfica da cruzana de T. cruzi (PDB ID 1ME4).

Inibidores da enzima alvo de diferentes classes qumicas (5-14)

A diversidade qumica dos inibidores da Figura 3 representa o

espao qumico biolgico que pode ser explorado, valorizando o
papel dos produtos naturais e da sntese orgnica como fontes valiosas de molculas privilegiadas capazes de interagir com sistemas
biolgicos complexos.
Biossntese de esteris
Os esteris so componentes essenciais s membranas das
clulas e podem ser produzidos por animais e plantas. Alm disso,
so precursores da biossntese de diversos hormnios e da vitamina
D. No caso dos organismos unicelulares, os esteris so essenciais
ao crescimento celular. O principal esterol para o crescimento do
T. cruzi o ergosterol, o que torna, portanto, a via de biossntese
desse lipdeo um alvo atrativo para o desenvolvimento de frmacos.34 A importncia dessa via bioqumica pode ser melhor avaliada considerando-se que depois dos frmacos 3 e 4 (Figura 1), os
inibidores da biossntese de esteris so os nicos que alcanaram
triagens clnicas avanadas como candidatos a frmacos anti-T.
cruzi. Atualmente, as enzimas mais bem estudadas desta cascata
metablica so a esterol 14-demetilase (EC 1.14.13.70), lanoesterol sintase (EC 5.4.99.7), esqualeno epoxidase (EC 1.14.99.7),
esqualeno sintase (EC 2.5.1.21), D-24(25) esterol metiltransferase
(EC 2.1.1.43), farnesilpirofosfato sintase (EC 2.5.1.10) e a farnesiltransferase (EC 2.5.1.58) (Tabela 1). Dentre os inibidores mais
representativos da sntese de ergosterol tm-se os derivados azlicos
inibidores da esterol 14-demetilase, cetoconazol (15), fluconazol
(16) e itraconazol (17), alm do inibidor da farnesiltransferase,
tipifarnib (18) (Figura 4).
O potencial da classe de derivados azlicos pode ser observado
no caso dos inibidores 17 e 18, que alm de exibirem alta seletividade
enzimtica, induziram cura parasitolgica em modelos animais de infeco aguda e crnica.45,46 interessante observar que os compostos
da Figura 4 apresentam propriedades antifngicas conhecidas e foram

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Dias et al.

includos em processos de triagens antiparasitria, como estratgia

til para a identificao de candidatos a novos frmacos com menor
tempo e custo.32,34 Contudo, o uso destes compostos limitado pela
baixa absoro e resistncia.34 Novas geraes de compostos desta
classe devero incorporar melhores caractersticas fsico-qumicas
com o objetivo de otimizar propriedades farmacocinticas, como
absoro e biodisponibilidade.47

Figura 4. Inibidores azlicos cetoconazol (15), fluconazol (16), itraconazol

(17) e tipifarnib (18)

Via glicoltica
Formas tripomastigotas do T. cruzi so desprovidas do ciclo do
cido tricarboxlico.48 Levando-se em considerao que estas formas
infectivas so altamente dependentes da via glicoltica como fonte
de energia atravs da produo de ATP, esta se torna, portanto, um
alvo atrativo para o desenvolvimento de novos agentes quimioterpicos para a doena de Chagas.48,49 Podem-se destacar ao menos trs
enzimas que tm sido bastante exploradas como alvos biolgicos:
a gliceraldedo-3-fosfato desidrogenase (GAPDH, EC 1.2.1.12)
(Figura 5), a hexoquinase (EC 2.7.1.1), e a fosfofrutoquinase (EC
2.7.1.11).49,50 A GAPDH uma enzima tetramrica que catalisa a converso do substrato gliceraldedo-3-fosfato em 1,3-bisfosfoglicerato,
na presena do cofator NAD+ e fosfato inorgnico. A hexoquinase
cliva adenosina trifosfato (ATP) em adenosina difosfato (ADP), enquanto que a fosfofrutoquinase catalisa a transferncia irreversvel
de um fosfato de ATP a frutose-6-fosfato.50

Quim. Nova

tm sido descobertos. Dentre estes, destacam-se as cumarinas (19,

20), flavonoides (21) e cidos anacrdicos (22) de origem natural; os
derivados de produtos naturais como os anlogos sintticos do cido
anacardaco (23); os compostos sintticos derivados de planejamento
racional como os nucleosdeos (24); os reativos intermedirios de
nitrognio (xido ntrico, nitroxil e peroxinirito) (25); e mais recentemente alguns complexos doadores de NO (26).51-56
Metabolismo dependente de grupos tiis
O principal mecanismo de defesa do T. cruzi contra o estresse
oxidativo envolve os tiis tripanotiona (27), homotripanotiona (28),
glutationa (29) e ovotiol (30) (Figura 6).57 Tal hiptese suportada
pelo fato de que nenhuma catalase ou glutationa peroxidase encontrada no parasita e a atividade da superxido dismutase muito
reduzida.58 Alm disso, no h evidncias da existncia de a-tocoferol
ou b-caroteno no T. cruzi, ao contrrio do que ocorre em clulas
mamferas, que se protegem eficazmente dos radicais livres atravs
de mecanismos enzimticos e no enzimticos.59 Seria possvel depreciar cerca de 90% da sntese de glutationa em clulas mamferas
sem causar efeitos deletrios sobre estas clulas, o que no ocorreria
no caso do T. cruzi, que deficiente de mecanismos de defesa contra radicais livres.27 Desta forma, uma reduo nos nveis dos tiis
antioxidantes do T. cruzi tornaria o parasita altamente susceptvel
aos efeitos de radicais livres (e.g., NO, O2- ou ONOO-). Merecem
destaque especial na via de biossntese de tiis as enzimas tripanotiona redutase (EC 1.8.1.12) e tripanotiona sintetase (EC 3.6.1.9), que
tm sido bastante exploradas como alvos para o desenvolvimento de
frmacos. A primeira responsvel pela manuteno dos nveis de
tripanotiona reduzida e a segunda pela adio do composto 29 ao
substrato glutationil espermidina, formando tripanotiona (27).27,34-36
A enzima triparedoxina peroxidase tambm apresenta importncia
considervel na exposio do T. cruzi as ROS.60

Figura 6. Principais tiis de tripanosomatdeos: tripanotiona (27), homotripanotiona (28), glutationa (29) e ovotiol (30)

Figura 5. Estrutura cristalogrfica da enzima GAPDH de T. cruzi (PDB

ID 3DMT). Inibidores de origem natural e sinttica da enzima alvo (19-26)

Dentre as enzimas da via glicoltica, a GAPDH tem sido alvo de

muitos estudos em qumica medicinal e como resultado vrios inibidores de origem natural e sinttica, com boa diversidade qumica,

Transferncia de cido silico

A trans-sialidase pertence famlia de glicoprotenas de superfcie do T. cruzi e constitui um dos poucos exemplos de glicosiltransferases superficiais encontradas em eucariontes.61 Essa enzima tem
duas atividades, uma hidrolase e outra transferase, e catalisa preferencialmente a transferncia de cido silico para molculas de mucina,
originando ligaes a-2,3 com molculas de b-galactose aceptoras
na superfcie do parasita. Apesar de ser classificada principalmente
como transferase, promovendo reaes reversveis, a trans-sialidase
possui tambm ao residual hidroltica (Figura 7). Como o T. cruzi

Vol. 32, No. 9

Quimioterapia da doena de chagas

incapaz de sintetizar cido silico e o nico mecanismo de transferncia deste cido atravs da trans-sialidase, esta enzima tem se
tornado um alvo macromolecular promissor.34

Figura 7. Reao de transferncia de cido silico mediada pela trans-sialidase

DNA topoisomerases
As enzimas DNA topoisomerases I (EC 5.99.1.2) e II (EC 5.99.1.3)
tm atrado grande ateno da comunidade cientfica, pois desempenham papel essencial na replicao do DNA do T. cruzi e, em particular,
no processo de replicao da cadeia de minicrculos e maxicrculos do
DNA do kinetoplasto (kDNA). O planejamento de inibidores destas
isomerases representou grande sucesso no desenvolvimento de novos
agentes quimioterpicos citotxicos.62 Existem alguns frmacos antioneoplsicos disponveis comercialmente que atuam nesses alvos
(Figura 8), tais como os inibidores da topoisomerase I, irinotecano
(Camptosar, da Pfizer) (31) e topotecana (Hycamtin, da GlaxoSmithKline) (32); e os inibidores da topoisomerase II, etoposida (33) e
teniposida (34) (Vepesid e Vumon, respectivamente, da Bristol-Myers
Squibb). As antraciclinas, camptotecinas, acridinas e fluoroquinolonas
formam classes de inibidores bem conhecidas, as quais apresentaram
bons resultados contra formas tripomastigotas sanguneas do T. cruzi.

Figura 8. Antineoplsicos inibidores das topoisomerases I e II

PLANEJAMENTO DE MOLCULAS BIOATIVAS:

INTEGRAO ENTRE QUMICA MEDICINAL E
QUMICA ORGNICA SINTTICA
Entre as estratgias mais utilizadas no planejamento de agentes
antiparasitrios est a investigao de vias bioqumicas e a seleo de
protenas alvo dos patgenos, que possam, por sua vez, ser moduladas
especifica ou seletivamente por pequenas molculas, considerandose a presena ou ausncia do alvo no hospedeiro. Neste contexto, as
vrias enzimas que vm sendo estudadas para o desenvolvimento de
novos frmacos fornecem exemplos muito interessantes de estratgias

2449

multidisciplinares, com diversos nveis de complexidade e de incorporao de mtodos e tecnologias de planejamento.63,64 Os avanos
significativos da biologia molecular e estrutural tm possibilitando
a seleo e validao de vrios alvos biolgicos importantes, especialmente na era ps-genmica. O aprimoramento das tcnicas de
determinao estrutural de macromolculas, como a cristalografia de
raios X e a ressonncia magntica nuclear (RMN), tem contribudo
fundamentalmente na compreenso das interaes intermoleculares
predominantes entre molculas bioativas e seus receptores biolgicos,
bem como nos estudos de caracterizao de mecanismos de ao.
Vale salientar que h vrios outros casos de molculas que possuem
interessante atividade anti-T. cruzi in vitro, contudo, a via bioqumica
e o alvo molecular no so conhecidos.65
A rpida identificao de molculas bioativas e a otimizao de
compostos lderes tm se tornado questes prioritrias na rea de
doenas negligenciadas. Os pr-frmacos tambm merecem destaque especial, pois a biotransformao da forma inativa do frmaco,
liberando a poro ativa no local de ao ou prximo a este, uma
estratgia muito til no planejamento de quimioterpicos com alta
especificidade de ao.66 A grande disponibilidade de compostos
sintticos e de ensaios biolgicos em mdia e larga escala tem contribudo para a seleo de vrias molculas com diferentes tipos de
atividades biolgicas e farmacolgicas. Uma questo fundamental
que se coloca frente nesse processo a otimizao de molculas
promissoras em relao a propriedades como potncia e afinidade.
A execuo dessa tarefa desafiadora requer a integrao entre as
estratgias de qumica medicinal moderna e o planejamento em
qumica orgnica sinttica, para que novas molculas, capazes de
representar novas entidades qumicas (NCEs - new chemical entities)
possam ser geradas.53,63
Diversas estratgias de otimizao de compostos com atividade anti-T. cruzi so descritas na literatura, variando desde os
modelos tradicionais baseados na abordagem tentativa e erro,
at os mtodos mais modernos de SBDD e LBDD, guiados pelo
uso racional de inovaes cientficas e tecnolgicas. Neste tpico
so apresentados dois exemplos do emprego da sntese orgnica
na gerao de molculas promissoras para a terapia da doena de
Chagas, abordando alguns aspectos sensveis do planejamento,
com nfase nas etapas de sntese dos compostos e otimizao de
propriedades. O entendimento desses processos de fundamental
importncia nos estudos das relaes entre a estrutura e atividade
(SAR - structure-activity relationships) e no planejamento de novas
molculas bioativas. No primeiro exemplo, o grupo N-xido foi explorado para o desenvolvimento de vrios derivados benzofuroxanos
(benzo[1,2-c]1,2,5-oxadiazol N-xido) para avaliao biolgica
(Figura 9). O processo de planejamento tinha como objetivo a gerao de compostos mais seletivos frente ao parasita, explorando as
qualidades biorredutveis superiores do grupo N-xido em relao
quelas dos frmacos 3 e 4 (Figura 1).67 interessante observar que
alguns derivados heterocclicos N-xidos, ismeros tautomricos
de N-hidroxi-benzimidazis, apresentaram modesta atividade in
vitro, resultado que foi atribudo ao fato destes derivados no serem
N-xidos verdadeiros (Figura 9).68,69

Figura 9. A. Estrutura geral dos derivados benzofuroxanos; B. formas tautomricas N-xido e N-hidrxi de derivados heterocclicos de benzimidazis

2450

Dias et al.

Com base nisso foi planejada uma nova srie de derivados

N-xido-benzimidazis no tautomerizveis e a atividade in vitro foi
determinada contra a forma epimastigota de T. cruzi.70 Com o intuito
de aumentar a diversidade qumica e melhorar algumas propriedades
fsico-qumicas desta classe de compostos, as estratgias de ciclizao
de o-nitro-anilinas e de reao de derivados de benzofuroxanos com
2-bromoacetato, iodeto de pentila e nitroalcanos foram empregadas
com sucesso.71 Na primeira estratgia, a ciclizao trmica de onitro-anilinas catalisada por cido conduziu a uma srie de derivados
N-xido1H-benzimidazis (35-39) contendo um substituinte no
nitrognio na posio 1, com rendimentos apenas moderados (Figura 10).70,71 Outras condies como a utilizao de cidos orgnicos
e irradiao por micro-ondas foram testadas, mas no levaram a
rendimentos superiores, devido provavelmente baixa reatividade
das nitro-anilinas usadas. Os derivados benzimidazis N-xidos
verdadeiros (35-39) no inibiram in vitro o crescimento da forma
epimastigota do T. cruzi na concentrao de 25 M, indicando que
apenas o grupo N-xido no era suficiente para conferir atividade
biolgica a esta srie de compostos.

Figura 10. Esquema geral de sntese de N-xido1H-benzimidazis, sendo X

= -CH2- (35), -(CH2)2- (36), -CH2O- (37), -CH2S-(38), -CH2N(Ph)-(39), com
rendimentos entre 19 e 46%

Na segunda estratgia, os derivados benzimidazlicos 40-42

(Figura 11) foram obtidos pela reao dos benzofuroxanos correspondentes, selecionados a partir de uma coleo de compostos bioativos,
com nitroetano em meio bsico a temperatura ambiente. Os derivados
benzofuroxanos substitudos na posio 5 do anel aromtico (41 e 42)
conduziram a misturas isomricas (ismeros de posio 5 e 6) devido
presena do equilbrio tautomrico mostrado na Figura 9. Estes derivados apresentaram baixa solubilidade em diferentes solventes orgnicos
(metanol, acetona, DMSO) devido alta polaridade conferida pelo
grupo N-hidroxilamino livre do anel aromtico. Diante disso, realizouse a reao de alquilao do grupo OH utilizando 2-bromo acetato de
etila ou iodeto de n-pentila, conduzindo aos derivados 43-46 (isolados
como misturas dos tautmeros). Em contraste com seus precursores,
estes compostos apresentaram alta solubilidade em solventes orgnicos
e modesta atividade inibitria (8-25% de inibio).70

Figura 11. Reao de derivados benzofuroxanos com nitroalcanos, sendo

R = H (40); R = 5(6)-CH3 (41); R = 5(6)-(E)-CH=CHPh (42); R = H e R1
= CH2CO2CH2CH3 (43); R = 5(6)-CH3 e R1 = CH2CO2CH2CH3 (44); R =
5(6)-(E)-CH=CHPh e R1 = CH2CO2CH2CH3 (45); R = H e R1 = n-pentila
(46). Rendimentos entre 34 e 61% para 40-42 e entre 34 e 52% para 43-46

Com base na premissa da suposta atividade inibitria promissora

dos derivados N-xidos (verdadeiros), foram sintetizados novos benzofuroxanos com o emprego de 2-nitropropano e piperidina (Figura
12). Esta estratgia sinttica impossibilitou a formao de ismeros
funcionais dos derivados 1,3-dixido de 2H-benzimidazis (47-52).
Os novos derivados foram obtidos em rendimentos acima de 60% e
apresentaram alta solubilidade em solventes orgnicos e gua.

Quim. Nova

Figura 12. Reao de derivados benzofuroxanos com 2-nitropropano, sendo R =

H (47); 5-CH3 (48), 5-OCH3 (49); 5-Br (50); 5-(E)CH=CHPh (51); 5-CH=NOH
(52); 5-CH=NNHCONH-n-hexil, com rendimentos entre 51e 100%

A avaliao biolgica apresentou resultados interessantes para estes

compostos (47-52), que na concentrao de 25 M foram capazes de
inibir entre 60 e 100% do crescimento das formas epimastigotas do
T. cruzi in vitro (linhagem Tulahuen 2), confirmando as propriedades
tripanocidas dos N-xidos verdadeiros e o seu potencial para contnuo
desenvolvimento. Diante disso, o parmetro quantitativo de potncia
inibitria (IC50, que se refere concentrao de composto necessria
para inibir em 50% o crescimento do T. cruzi) foi determinado para os
compostos 47-52 frente a diferentes linhagens do T. cruzi (Tulahuen
2, CL Brener e Y). Os valores de IC50 obtidos foram muito promissores, com destaque para o composto 51 (mais potente da srie) que
apresentou IC50 de 3, 6 e 5 M frente s cepas Tulahuen 2, CL Brener
e Y, respectivamente. A toxicidade dos compostos 47-52 tambm foi
investigada atravs de estudos de citotoxicidade inespecfica em macrfagos J774. Resultados interessantes foram obtidos para o composto
52, que no apresentou efeitos citotxicos at uma concentrao de
400 M (concentrao 30 vezes maior que o valor de IC50 obtido frente
s diferentes linhagens epimastigostas de T. cruzi). Em contraste, os
derivados 47-51 apresentaram citotoxicidade moderada na faixa de 40
M. Alm de ter a atividade in vitro e a toxicidade avaliadas em modelos
apropriados, o desenvolvimento de molculas bioativas candidatas a
NCEs requer a avaliao da atividade tripanocida in vivo. Baseado
nisso, o composto 52 foi avaliado in vivo usando um modelo animal
(camundongos BALB/c infectados com a forma tripomastigota do T.
cruzi). A taxa de sobrevida dos animais tratados com 52 foi de 100%,
ao passo que a do grupo controle (animais tratados com benzonidazol)
variou entre 60 e 88%.70 De modo geral, esses resultados ilustram como
a sntese orgnica planejada auxilia no desenvolvimento e otimizao
de propriedades biolgicas de novos compostos bioativos.
Como segundo exemplo tem-se o trabalho de planejamento, sntese
e avaliao biolgica (in vitro e in vivo) de uma srie interessante de
compostos heterocclicos com promissora atividade contra tripanosomatdeos.72 Estes parasitas so auxotrficos por vrios nutrientes,
incluindo as purinas, as quais sequestram de seus hospedeiros a partir
de transportadores especializados de nucleosdeos. Alm da absoro
das bases de purina como adenosina e adenina, um dos transportadores
chamado de P2 (caracterizado em T. brucei) pode transportar derivados
de melamina e benzamidina, que no so substratos para os correspondentes transportadores de mamferos.73 A estratgia empregada
neste trabalho envolveu o acoplamento do grupo melamina (frao
de reconhecimento estrutural P2) a nitro-heterocclicos, levando em
considerao alguns requerimentos importantes para a absoro atravs
do transportador P2, incluindo um grupo amidino, um anel aromtico
e um heterotomo eletronegativo. Entre as caractersticas estruturais
marcantes do composto lder da srie (53),74 pode-se destacar a presena
de um grupo nitro, um fragmento triazina contendo o sistema amidnico,
dois aneis aromticos, heterotomos e a presena da funo hidrazona
na fuso dos fragmentos de triazina e do anel contendo o grupo nitro,
como pode ser observado na Figura 13.
Os estudos de SAR realizados levaram em considerao vrios
aspectos importantes na modificao molecular de 53 para a gerao
de novos compostos.72 As principais estratgias incluram: (i) a introduo de grupos metila no fragmento triazina, com o objetivo de

Vol. 32, No. 9

Quimioterapia da doena de chagas

alterar as propriedades lipoflicas das molculas; (ii) o emprego do

bioisosterismo clssico como estratgia de modificao molecular,
atravs da substituio do tomo de oxignio por enxofre no anel
heterocclico contendo o grupo nitro; (iii) a variao de substituintes
do anel de 5 membros com o propsito de avaliar os efeitos eletrnicos
e as propriedades fsico-qumicas no sistema em estudo, bem como
a prpria importncia da presena do grupo nitro.

Figura 13. Estrutura qumica do composto lder da srie (53)

Este um exemplo bastante ilustrativo do papel chave da integrao da qumica medicinal e da qumica orgnica sinttica. Aps o
estabelecimento da estratgia de planejamento e das rotas sintticas
apropriadas, o trabalho de sntese iniciou com a reao da 2,4,6-tricloro-1,3,5-triazina (54) com amnia, metilamina e dimetilamina em
acetona/H2O como solvente, a temperatura ambiente, para fornecer
os derivados 55-57, respectivamente, em bons rendimentos (Figura
14). Nas condies reacionais brandas que foram empregadas, apenas
um dos tomos de cloro foi substitudo, sendo possvel introduzir
primeiramente grupos amino derivados de aminas menos reativas.
As cloro-triazinas (58-62) foram obtidas pela reao da amina correspondente com as 1,3,5-triazinas (55-57) na presena de base, em
bons rendimentos. Tratamento de 58-62 com hidrazina em gua, sob
refluxo, forneceu as hidrazinas 63-67 em bons rendimentos (81-90%).
As hidrazonas 68-76 foram preparadas pelo tratamento das hidrazidas
63-67 com os aldedos correspondentes, em rendimentos entre 13 e
80%. Os derivados nitrados 77-79 (rendimentos de 17 a 77%), preparados pelo tratamento de 63 com os correspondentes nitro-aldedos,
possuem um anel aromtico monossubstitudo (no-heterocclico)
em substituio ao anel heterocclico de 5 membros (Figura 14).

2451

O acoplamento de derivados de poliaminas ao grupo melamina

levou obteno de compostos com potente ao tripanocida e boa
seletividade celular.75 Contudo, estes compostos demonstraram toxicidade elevada em modelos animais. Portanto, o composto lder 53
foi selecionado por apresentar uma frao estrutural alternativa com
reconhecida atividade tripanocida, representada pelo grupo nitroaromtico, para o acoplamento aos grupos melamina e benzamidina.
Vale ressaltar que os frmacos 3 e 4 (Figura 1) empregados na terapia
da doena de Chagas so nitro-heterocclicos, que apresentam uma srie
de limitaes. Sabe-se que um dos problemas com compostos nitroaromticos que alguns apresentam considerveis efeitos mutagnicos,
carcinognicos e citotxicos, contudo, isso no acontece em muitos
casos e no pode ser tomado como regra geral, principalmente no caso
de doenas em que no h alternativas teraputicas disponveis e novos
frmacos so esperados com urgncia. A alternativa de empregar o
acoplamento de compostos nitro-aromticos ao grupo melamina teve
o objetivo de entregar de forma rpida e seletiva estes compostos aos
parasitas, possibilitando doses reduzidas e efeitos colaterais reduzidos.
Os compostos preparados foram avaliados em relao afinidade
de interao pelo transportador P2. Compostos sem a presena do
grupo melamina apresentaram baixa afinidade pelo transportador
P2 (resultados no apresentados), como esperado.76 O composto
70, que apresenta todos os tomos de nitrognio do anel melamina
metilados, tambm possui afinidade muito baixa (IC50 = 129 M).
Os demais compostos apresentaram valores de IC50 dentro de uma
unidade logartmica, em uma faixa de ordem similar do derivado
arsnico melarsoprol, que um substrato do transportador P2, usado
como medicamento no tratamento da tripanossomase africana. Alteraes no anel nitrofurano renderam apenas pequenas variaes na
afinidade aparente pelo transportador P2. A remoo do grupo nitro
(comparao dos compostos nos pares 68/73 e 75/76) no levou a
alteraes significativas, ao passo que a presena de enxofre melhorou
discretamente a afinidade. Esses estudos de SAR demonstraram que
o fator principal para a afinidade do transportador P2 a presena do
anel melamina, enquanto que o nitro-heterocclico tem efeito limitado.
Os compostos da srie 77-79 foram tambm avaliados biologicamente contra o T. cruzi, j que apresentaram atividade in vitro contra T. brucei,
independente da presena ou ausncia do transportador P2, indicando que
outras vias existem para estes compostos. Os compostos 68-72 e 74-79
apresentaram atividade tripanocida promissora (formas amastigotas),
com valores de IC50 variando desde a faixa de melhor potncia de 0,240,39 M, para os compostos 69 (IC50 = 0,24 M), 70 (IC50 = 0,38 M),
71 (IC50 = 0,39 M) e 72 (IC50 = 0,29 M), at a faixa de menor potncia
para os compostos 77-79 (IC50 = 328 M).72 A atividade dos melhores
compostos foi investigada em modelo experimental de infeco com T.
cruzi em camundongos. Os compostos 71 e 72 mostraram boa atividade
in vivo, sendo que o composto 72 reduziu os nveis de parasitemia em
45% na dose de 50 mg/kg. A estratgia empregada neste trabalho levou
gerao de uma nova srie de compostos com potente ao anti-T. cruzi,
apresentando elevado potencial para o desenvolvimento de compostos
lderes candidatos a novos frmacos antichagsicos.
Contribuies da qumica inorgnica medicinal

Figura 14. Sntese planejada e estudos de SAR

Alm dos trabalhos tradicionais de planejamento, sntese orgnica e

estudos de SAR discutidos nesse tpico, uma contribuio que merece
especial destaque nas pesquisas de doenas negligenciadas a da rea
de qumica inorgnica medicinal. Os primeiros relatos na literatura do
uso de metais de transio na quimioterapia da doena de Chagas so
referentes ao uso de sais de ouro, cobre e zinco durante os ensaios empricos empregados no perodo correspondente Fase II mencionada na
parte de introduo desta reviso.22,23 A partir da dcada de 80, muitos
esforos foram direcionados na avaliao da ao anti-Trypanosoma

2452

Dias et al.

de uma variedade de complexos com atividade antitumoral, devido

principalmente s semelhanas bioqumicas em termos de metabolismo
e recursos de sistemas de proteo entre os tripanosomatdeos e algumas
clulas tumorais.55 Logo surgiram os primeiros trabalhos mostrando
uma boa correlao entre as propriedades antitumorais e tripanostticas
de compostos de platina, como a cisplatina (80) e carboplatina (81)
(Figura 15).56 Dentre os compostos de platina (II) mais promissores,
podemos destacar os derivados terpiridnicos (2,2:62-terpiridina)
e pentamidnicos, os quais foram eficazes in vitro contra as formas
amastigotas e tripomastigotas do T. cruzi. A atividade tripanocida de
uma srie de complexos de amino ou dimetilssulfxido de rutnio,
entre estes [Ru(NH3)5Cl]Cl2 (82), [Ru(NH3)6]Cl3 (83), [Ru(DMSO)4Cl2]
(84), [Ru(DMSO)2en] (85) tambm foi demonstrada (Figura 15).55,56

Quim. Nova

deste frmaco num complexo de rutnio poderia facilitar o processo

de nitrorreduo e, assim, melhorar a sua potncia e eficcia. De fato,
o derivado de rutnio do benzonidazol, trans-[Ru(Bz)(NH3)4(SO2)]2+
(88) (Figura 16) demonstrou potencial como candidato a frmaco
anti-T. cruzi, com atividade in vivo similar, porm numa dose 1.000
vezes menor que a usada clinicamente para o benzonidazol (4).58

Figura 16. Complexos com atividade anti-T. cruzi, clotimazol (86), [Ru(H2O)
(Ctz)2Cl3] (87) e trans-[Ru(Bz)(NH3)4(SO2)]2+ (88)

PADRONIZAO DE DADOS BIOLGICOS NAS

PESQUISAS POR NOVOS FRMACOS
Figura 15. Compostos de platina e rutnio com atividade anti-T. cruzi, cisplatina (80) e carboplatina (81), [Ru(NH3)5Cl]Cl2 (82), [Ru(NH3)6]Cl3 (83),
[Ru(DMSO)4Cl2] (84), [Ru(DMSO)2en] (85)

A partir destas descobertas, as pesquisas evoluram para a descoberta de novos compostos de platina e de rutnio que demonstraram
propriedades interessantes de toxicidade e atividade contra o T. cruzi.56
Compostos de metais de transio, tais como platina (II e IV), rutnio
(II e III), rdio (I e II) e irdio (I e II) foram usados empiricamente contra o T. cruzi.77-79 H cerca de uma dcada foi demonstrada a atividade
anti-T. cruzi de alguns compostos de smio (III), que atuavam em sinergia com ligantes nitro-imidazlicos, inclusive com o benzonidazol
(4) (Figura 1). Estes complexos mostraram significativa inibio do
crescimento de formas epimastigotas, mas foram citotxicos contra
macrfagos e clulas Vero.57 Foi postulado que estes compostos atuavam atravs da inibio das enzimas succinato desidrogenase (EC
1.3.99.1), malato desidrogenase (EC 1.1.1.37) e piruvato quinase (EC
2.7.1.40), ou pela interao com o DNA e RNA.57
Outra estratgia de desenvolvimento de complexos anti-T. cruzi
foi empregada a partir da dcada de 90 considerando a sinergia
entre metais de transio (e.g., rutnio, cobre, ferro) e inibidores da
biossntese de esteris do T. cruzi.55 Foi descrito que inibidores da
enzima citocromo P450 14a-demetilase, tais como o cetoconazol
(15) (Figura 4) e o clotrimazol (86) (Figura 16) eram mais ativos
quando ligados a metais de transio. A partir disso, uma srie de
trabalhos tem demonstrado que a atividade pode ser aumentada em
at 10 vezes quando estes inibidores esto coordenados ao rutnio (II/
III).55 Os complexos de rutnio de frmula geral [RuClnL], [Ru(H2O)
ClnL] e Ru(DMSO)nL] (87) (Figura 16) tambm foram mais ativos
e menos citotxicos que os respectivos complexos de rnio, ouro,
platina e cobre.55 Estas propriedades foram atribudas similaridade
no metabolismo entre os compostos de rutnio e ferro, a qual tem
sido reivindicada como responsvel pela baixa toxicidade destes
compostos na quimioterapia do cncer.
Baseando-se ainda na estratgia de sinergia, mais recentemente
foi sintetizado um derivado inorgnico do benzonidazol com o
objetivo de melhorar a eficcia, reduzir a toxicidade e aumentar a
hidrossolubilidade.58 Considerando-se que o mecanismo de ao do
benzonidazol (4) envolve a reduo do grupo nitro, o ancoramento

Dentre os requerimentos estabelecidos pela OMS para bons candidatos a frmacos antichagsicos esto alta potncia e seletividade contra
as formas mamferas do T. cruzi; eficcia em modelos experimentais
agudos e crnicos da doena de Chagas; elevada biodisponibilidade em
humanos; administrao por via oral; uma nica dose diria; tratamento
em poucas doses; baixa toxicidade; segurana para administrao em
crianas e gestantes; princpio ativo com manufaturamento simples; e
baixo custo.19,34 Para alcanar essas caractersticas necessrio passar
por diversas etapas de pesquisa bsica, que vo desde a identificao de
molculas bioativas at a otimizao e desenvolvimento de NCEs. Uma
das grandes dificuldades encontradas pelos pesquisadores na rea de doena de Chagas est justamente na falta de padronizao de protocolos
experimentais e de cepas do T. cruzi para avaliao de substncias com
atividade antichagsica. Estima-se que existam catalogadas mais de 35
cepas do T. cruzi, as quais apresentam diferentes perfis de resistncia
e susceptibilidade aos frmacos padres 3 e 4 (Figura 1). Um nmero
tambm considervel de protocolos pode ser encontrado na literatura,
apresentando variaes importantes. Esses fatores fazem com que as
anlises de diferentes resultados e experimentos sejam muito difceis,
levando geralmente a informaes de pouca importncia prtica para
o desenvolvimento de um novo candidato a frmaco.
A gerao de informaes padronizadas de fcil acesso e anlise
uma questo fundamental para que os diferentes grupos internacionais envolvidos na identificao e planejamento de molculas
bioativas possam contribuir e interagir de forma mais efetiva. Para
alcanar esta meta, a OMS tem adotado em sua rede de pesquisas
do programa TDR, um protocolo experimental padro baseado em
uma nica cepa do T. cruzi, o que tem permitido a produo de resultados de alta qualidade que podem ser comparados pelos diferentes
laboratrios acadmicos e industriais da rede.32 Este um aspecto de
grande relevncia, especialmente na rea de doena negligenciadas,
onde existe uma necessidade premente de aes globais capazes de
promover maiores avanos das pesquisas. Neste tpico so discutidos os protocolos experimentais in vitro e in vivo usados pela OMS
em seu programa de pesquisas por novos frmacos para a doena
de Chagas. Estes protocolos foram adotados tambm no Brasil no
Centro de Referncia de Qumica Medicinal para Doena de Chagas,
criado pela OMS no programa TDR e que composto por um grupo
de pesquisadores da USP e da UNICAMP (autores deste artigo de

Vol. 32, No. 9

Quimioterapia da doena de chagas

reviso). A estratgia de pesquisa por novos frmacos no programa

TDR/OMS envolve a integrao do planejamento de qumica medicinal com a sntese orgnica e a avaliao biolgica (in vitro e in
vivo). Um esquema geral para as pesquisas visando a descoberta e
otimizao de compostos lderes apresentado na Figura 17. O desenvolvimento de candidatos a novos frmacos para o tratamento da
doena de Chagas passa essencialmente pelo cumprimento das etapas
apresentadas nesse esquema. Os protocolos de ensaios in vitro e in
vivo executados nas diferentes etapas seguem padres rigorosos de
qualidade de experimentao, coleta, tratamento e anlise de dados.

2453

consistente e fornece resultados muito confiveis e reprodutveis.

Os compostos podem tambm ser submetidos inicialmente a
testes de toxicidade usando fibroblastos humanos, de acordo com
a Figura 17. Aps a determinao de valores de IC50, estes so
agrupados de acordo com a Tabela 2. A utilizao de agrupamentos
de compostos por pontuao (1, 2 e 3 da Tabela 2) faz parte dos
procedimentos padres de coleta e anlise de resultados. Somente
os compostos que apresentarem pontuao 3 (IC50fib > 30 M) so
submetidos aos ensaios de atividade anti-T. cruzi (IC50ama), usando-se
como parmetro as formas amastigotas.
Tabela 2. Anlise de dados padres de ensaios in vitro de toxicidade
e atividade anti-T. cruzi
Toxicidade in vitro
IC50fib (M)

Atividade in vitro
IC50ama (M)

< 10

> 30

30 < IC50 < 10

30 < IC50 < 10

> 30

< 10

Pontuao

Figura 17. Estratgia integrada para a descoberta de candidatos a novos

frmacos para o tratamento da doena de Chagas

O ensaio in vitro de avaliao de substncias emprega uma cepa

do T. cruzi chamada Tulahuen LacZ, que expressa constitutivamente
a enzima b-galactosidase (b-Gal, EC 3.2.1.23) oriunda da bactria
Escherichia coli.80 Esta enzima responsvel pela clivagem do
substrato vermelho de clorofenol b-D-galactopirano (89) (regio do
amarelo do espectro visvel) dando origem aos produtos D-galactose
(90, incolor) e vermelho de clorofenol (91, regio do vermelho do
espectro visvel) (Figura 18).80

No ensaio de atividade anti-T. cruzi in vitro, fibroblastos humanos

(HF) so semeados em placas de 96 poos e aps 12 h so infectados
com tripomastigotas metacclicas previamente cultivadas em fibroblastos ou em clulas Vero (Figura 19B). Passadas 24 h da infeco,
os compostos que receberam pontuao 3 na triagem de toxicidade
(Tabela 2) so adicionados de acordo com o modelo ilustrado na Figura 20A, sendo que o frmaco benzonidazol (4, Figura 1) usado como
referncia. Aps a adio dos compostos, as placas so incubadas a
37 oC e 5% de CO2 por 5 dias. Ao final deste perodo, o substrato
82 adicionado conferindo uma colorao amarela ao meio experimental como mostrado na Figura 19B (iv). Aps 3 h de reincubao
nas mesmas condies, a placa analisada em espectrofotmetro a
570 nm (Figura 19B - v). A porcentagem de parasitas viveis ento
aferida tomando-se como controle os poos da linha A (sem a adio
de compostos). Nos protocolos padres, primeiramente, as molculas
selecionadas so submetidas aos ensaios usando trs concentraes
(primeira triagem) e somente aquelas que apresentarem 50% de atividade a 30 M so selecionadas para o ensaio de determinao de
IC50, sendo posteriormente classificadas de acordo com a Tabela 2.

Figura 18. Esquema reacional da clivagem do substrato vermelho de clorofenol b-D-galactopirano (89) levando formao de galactose (90) e vermelho
de clorofenol (91), pela ao da enzima b-Gal

No mecanismo do ensaio, os parasitas viveis presentes no meio

reacional expressam a b-Gal, que por sua vez converte o substrato 89
nos produtos 90 e 91. Desta forma, a atividade anti-T. cruzi in vitro pode
ser determinada atravs de reao colorimtrica pela medida direta da
absorbncia do produto 91 em 570 nm, que linear com a concentrao
de parasitas no meio no intervalo de 500 a 1,5x105 parasitas/mL. Esta
cepa geneticamente modificada, adotada pela OMS como padro para
os experimentos in vitro com molculas provenientes de fontes naturais
ou sintticas, apresenta um srie de vantagens. Com a Tulahuen LacZ
possvel fazer experimentos em uma escala de tempo 10 vezes menor
em comparao com outros mtodos convencionais que se baseiam na
contagem de parasitas ao microscpio.80 O mtodo de anlise bastante

Figura 19. A. Esquema de semeamento dos candidatos a frmacos; B.

fibroblastos humanos (i), formas epimastigotas (ii) e tripomastigotas metacclicas (iii) usadas para a triagem de novos compostos. Representao do
experimento logo aps a adio do substrato (iv). Viabilidade do parasita
3 h aps a adio do substrato (v)

Na fase seguinte, de acordo com o esquema geral da Figura 17,

ensaios de atividade in vivo so realizados com as molculas com pontuao 2 ou 3. Contudo, a toxicidade aguda em camundongos avaliada
para cada molcula selecionada. Para isso, um camundongo fmea
BALB/c selecionado para a administrao de doses acumulativas

2454

Dias et al.

por via intraperitoneal de acordo com o esquema indicado na Tabela

3. Aps cada dose administrada, so monitorados sinais de toxicidade
aguda tais como sede, hiperventilao e tremores.81 Se nenhum sinal
for detectado, uma nova dose administrada at que estes sinais se
tornem evidentes, ou que a dose mxima de 150 mg/kg seja alcanada.
Somente as molculas com dose acumulada maior ou igual a 100 mg/
kg so selecionadas para os experimentos com animais infectados.
Tabela 3. Esquema teraputico para determinao de toxicidade aguda
Tempo
(h)

Dose aplicada
(mg/kg)

Dose acumulada
(mg/kg)

20

20

30

50

50

100

50

150

Nos ensaios de infeco aguda, grupos de 5 ou 6 camundongos

fmeas BALB/c so infectados com a cepa Tulahuen silvestre por via
intraperitoneal a uma carga parasitria mdia objetivando gerar um
modelo de infeco aguda. No terceiro dia, os animais so verificados
e somente aqueles que mostram infeco positiva so considerados
para o ensaio de atividade tripanocida. Os animais so mantidos
durante os experimentos sob temperatura controlada (22-25 oC), com
gua e rao ad libitum. Os compostos testados so administrados
inicialmente por via intraperitoneal em diferentes esquemas teraputicos conforme a Tabela 4. O benzonidazol (4, Figura 1) usado
como referncia (controle positivo), sendo administrado por via oral
(gavagem) dissolvido em PBS contendo goma arbica. O curso da
infeco ento acompanhado nos dias 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 18, 21,
25 e 30 aps a infeco, sempre pela contagem do nmero de formas
tripomastigotas mveis em 5 mL de sangue retirados da veia caudal.82

Quim. Nova

vida de milhes de pessoas no mundo. Em contraste com as vrias

reas teraputicas importantes que tm sido beneficiadas de forma
notvel pelos avanos da indstria farmacutica, as doenas negligenciadas carecem de mais programas de P&D de frmacos. Aes
globais especiais, capazes de integrar elementos essenciais de pesquisa, desenvolvimento, inovao e organizao, so extremamente
importantes neste contexto. So vrios os programas internacionais
que poderiam ser citados como exemplo, mas apenas dois casos sero
destacados nesta reviso.
Programa especial para pesquisa e treinamento em doenas
tropicais (TDR)
O TDR uma ao global de colaborao cientfica que tem o
papel de criar, apoiar, integrar e coordenar esforos globais com
o objetivo de diminuir o impacto econmico e social das doenas
negligenciadas. Fundado em 1975, o TDR patrocinado por um
grupo formado pelo Fundo Infantil das Naes Unidas (UNICEF
- The United Nations Childrens Fund), Naes Unidas para o Desenvolvimento (UNDP - United Nations Development Programme),
Banco Mundial (The World Bank) e OMS. As aes coordenadas
pelo TDR em seu programa de descoberta de candidatos a frmacos
para doenas tropicais infecciosas (lead discovery for drugs for
infectious tropical diseases) tm se mostrado muito promissoras
e capazes de promover cooperaes efetivas entre pesquisadores
de universidades e indstrias farmacuticas de diversos pases.
Este programa especial, do qual o Brasil faz parte, envolve as
redes de triagem de compostos (compound screening network), de
identificao de alvos (drug target network), de farmacocintica e
metabolismo de frmacos (drug metabolism and pharmacokinetics
network), e de qumica medicinal (medicinal chemistry network).
Um modelo geral de estratgia de pesquisa bsica do programa de
descoberta de candidatos a frmacos para doenas negligenciadas
do TDR ilustrado na Figura 20.2,32

Tabela 4. Esquemas teraputicos para os experimentos in vivo

Ensaio
(dose mg/kg)
1 (50)

2 (50)

3 (dose resposta:
10, 30, 90 e 150)

Tratamento
(rota)

Critrio
de atividade

10 dias consecutivos a partir Sobrevivncia maior

do dia 3 aps a infeco (i.p.)
que 30 dias
Somente nos trs dias que
Sobrevivncia maior
precede o pico parasitmico
que 40 dias
(i.p.)
Durante 15 dias consecutiDeterminao de
vos a partir do dia 3 aps a
*ED50
infeco (p.o.)

*Dose referente a 50% de sobrevida dos animais infectados por mais de 120 dias

As molculas que apresentam valores de ED50 50 mg/kg tm

seus valores de dose letal determinados (LD50) usando-se protocolos alternativos que esto em acordo com os princpios dos 3R,
de reduo, reutilizao e reciclagem (replacement, reduction,
and refinement). Por fim, as molculas que apresentarem a relao
LD50/100 10 so testadas usando-se um modelo crnico de infeco
experimental, com administrao por via oral.
PROGRAMAS GLOBAIS ESPECIAIS DE PESQUISA EM
DOENAS NEGLIGENCIADAS
Os avanos das cincias biolgicas e qumicas nos ltimos 100
anos impulsionaram a descoberta de novos frmacos com aes teraputicas extraordinrias, proporcionando melhorias na qualidade de

Figura 20. Estratgias do TDR para a descoberta de compostos bioativos

candidatos a novos frmacos contra as doenas negligenciadas

Neste modelo, a identificao de novas molculas bioativas ou

ligantes (hit) se d atravs das redes especiais de triagem in vitro de
compostos contra alvos especficos validados, como enzimas, ou
diretamente em cultura de parasitas. As molculas bioativas mais
promissoras so selecionadas para uma fase posterior de otimizao,
que engloba o planejamento em qumica medicinal, a sntese e a
avaliao biolgica in vitro e in vivo de novos compostos, alm de
estudos de toxicidade bsica e de propriedades farmacocinticas (e.g.,

Vol. 32, No. 9

Quimioterapia da doena de chagas

absoro, biodisponibilidade). O emprego de controles negativos e

positivos, e o monitoramento constante em relao aos frmacos e
outras molculas bioativas de referncia so componentes importantes
no processo de padronizao e validao de resultados. O objetivo
final a descoberta e otimizao de compostos lderes com propriedades farmacodinmicas e farmacocinticas qualificadas, capazes de
representarem NCEs. Dessa forma, torna-se possvel uma avaliao
rigorosa do potencial de desenvolvimento clnico (triagens clnicas
em humanos) dos novos candidatos a frmacos, pois os mesmos tiveram suas propriedades de atividade, toxicidade e biodisponibilidade
determinadas em modelos padres in vitro e in vivo.
Na rede de descoberta de candidatos a frmacos antiparasitrios
coordenada pelo TDR, as contribuies da universidade e da indstria farmacutica tm sido essenciais para o progresso das pesquisas
na identificao de vrios candidatos a novos frmacos, sendo esta
integrao indispensvel para o sucesso do programa.31,83,84 Para se ter
uma melhor ideia da equipe internacional que atua neste programa,
podemos citar os parceiros acadmicos e industriais que fazem parte
da rede de qumica medicinal: Pfizer (Reino Unido), Merck Serono
(Sua), Chemtura (Canad), Pharmacopeia (EUA), Universidade de
Cape Town (frica do Sul), St. Jude Childrens Research Hospital
(EUA), Universidade de Nebraska (EUA), Universidade de Dundee
(Reino Unido), Universidade Estadual de Ohio (EUA), Universidade
de So Paulo/UNICAMP (Brasil). O papel da universidade ganha
destaque na gerao de conhecimento e na aplicao de ferramentas
e mtodos para o desenvolvimento de diversas etapas bsicas fundamentais, incorporando a validao de alvos biolgicos, as triagens
experimentais in vitro e in vivo, o planejamento e sntese de novos
compostos, bem como os estudos de farmacocintica e metabolismo.
Em contrapartida, a contribuio da indstria farmacutica pode ser
notada no desenvolvimento de triagens biolgicas automatizadas
em larga escala (HTS - high-throughput screening), nos estudos
pr-clnicos e clnicos, no suporte gerencial e no acompanhamento
dos projetos, alm de importante participao no financiamento de
projetos. Vale ressaltar que algumas organizaes filantrpicas, como
as Fundaes americanas Bill & Melinda Gattes e Rockefeller e a
Fundao britnica Wellcome Trust, tm sua contribuio atravs do
financiamento de projetos com objetivos e metas bem estabelecidos.
Iniciativa de medicamentos para doenas negligenciadas (DNDi)
Desde 1971, a organizao internacional de ajuda humanitria
Mdicos Sem Fronteiras vem testemunhando, por meio de seus
projetos espalhados em mais de 70 pases do mundo, como a falta
de tratamentos eficazes e acessveis para as doenas negligenciadas afeta a humanidade de forma impiedosa, desproporcional e
injusta. Profissionais de sade desta organizao perceberam que
o processo de desenvolvimento de medicamentos para as doenas
tropicais estava praticamente estagnado. Para se ter uma dimenso
do problema, nos ltimos 25 anos, apenas 1% de todos os medicamentos desenvolvidos foi para tratar alguma doena negligenciada.85
Na ausncia de novas alternativas teraputicas para doenas cada
vez mais graves, os mdicos se veem ainda obrigados a recorrer a
medicamentos e tratamentos antigos, que se tornam cada vez mais
ineficazes. Em funo disso, a organizao Mdicos Sem Fronteiras
decidiu destinar a quantia recebida pelo seu prmio Nobel da Paz ao
estudo das necessidades mdicas dos pacientes que sofrem dessas
doenas, resultando em julho de 2003 na criao da Iniciativa de
Medicamentos para Doenas Negligenciadas (DNDi - Drugs for
Neglected Diseases initiative), fruto da unio de 7 organizaes
espalhadas pelos cinco continentes.86,87 Os parceiros fundadores da
DNDi so formados por quatro instituies pblicas de pesquisa
mdica de pases em desenvolvimento, uma instituio privada

2455

de pesquisa, uma organizao internacional de pesquisa e uma

organizao internacional de ajuda humanitria da rea de sade.
So, respectivamente: Fundao Oswaldo Cruz (FIOCRUZ, Brasil), Conselho Indiano de Pesquisa Mdica, Ministrio da Sade
da Malsia, Instituto de Pesquisa Mdica do Qunia, Instituto
Pasteur (Frana), PNUD/Banco Mundial/TDR/OMS) e Mdicos
Sem Fronteiras (MSF).
A misso principal da DNDi pesquisar e desenvolver medicamentos eficazes, adaptados e financeiramente acessveis para o tratamento
das doenas negligenciadas, preenchendo as lacunas que existem em
P&D de medicamentos para essas doenas. A DNDi cria e coordena
projetos em P&D de frmacos para doenas negligenciadas em parceria
com a comunidade internacional de pesquisa, o setor pblico, a indstria
farmacutica, alm de outros parceiros. Dentre suas atividades relevantes na rea de doena de Chagas, destacam-se (i) o consrcio para
a otimizao de compostos lderes, que se destina ao desenvolvimento
de molculas da fase inicial de triagens. Os principais parceiros so o
Centro para Otimizao de Candidatos a Frmacos (CDCO - The Centre
for Drug Candidate Optimisation, da Austrlia), Epichem (Austrlia),
Universidade de Murdoch (Austrlia) e a Universidade Federal de
Ouro Preto (Brasil); (ii) identificao de compostos azlicos, que se
preocupa com a avaliao da nova gerao de antifngicos azlicos,
com a finalidade de selecionar novos candidatos para desenvolvimento
pr-clnico e clnico visando o tratamento da doena de Chagas; (iii)
benzonidazol peditrico, que visa o desenvolvimento de uma formulao de benzonidazol para crianas em parceria com o Laboratrio
Farmacutico do Estado de Pernambuco (LAFEPE). A DNDi atua
tambm em outros programas envolvendo doenas como a malria,
triapanossomase africana e leishmaniose.
CONCLUSES E PERSPECTIVAS
Chegamos ao primeiro centenrio da descoberta da doena de
Chagas sem qualquer frmaco seguro e eficaz que pudesse coroar
de xito o feito extraordinrio realizado por Carlos Chagas. A
fase crnica da doena permanece sem alternativas de tratamento,
representando grave problema que tem elevado o sofrimento de
milhes de infectados na Amrica Latina. Iniciativas de arquitetura
complexa como a do TDR e da DNDi, entre outras, representam
grande esperana para o desenvolvimento de um novo medicamento.
Contudo, novos programas de pesquisas, capazes de integrar redes
internacionais de trabalho envolvendo pesquisadores de instituies
do setor pblico e do setor privado, so necessrios e devem ser
incentivados, principalmente nos pases em desenvolvimento. A
trade Universidade Governo Empresa um caminho que deve
ser seguido no estabelecimento de parcerias efetivas. O Brasil, bem
como outros pases que sofrem com as doenas negligenciadas,
possui recursos humanos qualificados, centros de pesquisa e agncias de fomento capazes de associar as estratgias de organizao e
pesquisa para enfrentar com criatividade estes desafios de todas as
perspectivas. Os resultados destas iniciativas seriam percebidos no
fortalecimento da poltica cientfica e tecnolgica do pas, no desenvolvimento da cincia e educao, na formao contnua de recursos
humanos qualificados e, sobretudo, na sua benfeitoria mais nobre, no
melhoramento das condies de sade pblica e bem-estar social de
milhes de pessoas que vivem em condies desumanas nas reas
mais atingidas pelas doenas parasitrias. Os autores desta reviso
celebram os 100 anos da descoberta de doena de Chagas, colocando
como perspectiva para o prximo centenrio o desenvolvimento de
novos frmacos e vacinas para a doena de Chagas, bem como para
outras doenas negligenciadas. Espera-se que as novas geraes de
cientistas brasileiros possam contribuir efetivamente nesse processo,
da forma louvvel como tem sido feito pela gerao atual e por aque-

2456

Dias et al.

las passadas. Para o ano de 2109, coloca-se como desafio s novas

geraes de pesquisadores que nos sucedero o preparo de um artigo
de reviso dos 200 anos da descoberta da doena de Chagas, onde
podero, felizmente, ao lembrar desse artigo, descrever as histrias
de sucesso do desenvolvimento de frmacos ou vacinas que foram
fundamentais para o controle e tratamento da doena de Chagas.
AGRADECIMENTOS
OMS (Organizao Mundial de Sade), FAPESP (Fundao
de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo) e CNPq (Conselho
Nacional de Desenvolvimento Cientfico e Tecnolgico) pelo apoio
cientfico e financeiro s pesquisas do grupo na rea de doenas
negligenciadas, e ao Dr. R. V. C. Guido (Universidade de So Paulo)
pelas valiosas discusses e sugestes.
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